JPS6342606B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23
―ラクトンを活性成分として含有するカルシユウ
ム低下剤に関する。 更に詳細には本発明は、血清中のカルシユウム
含有量が高いことに起因する病態，例えば高カル
シユウム血症，高カルシユウム尿症等の病気の治
療に効果的な25―ヒドロキシビタミンD₃―23，
26―ラクトンを活性成分として含有するカルシユ
ウム低下剤に関する。 従来、骨粗鬆症，骨軟化症等の治療に有用であ
る化合物として、例えば1α，25―ジヒドロキシ
コレカルシフエロール，1α―ヒドロキシコレカ
ルシフエロール，1α，24―ジヒドロキシコレカ
ルシフエロールが知られている。しかしながらこ
れらの化合物はその投与量が多くなると高カルシ
ユウム血症，高カルシユウム尿症等の副作用を発
現する可能性がある。 高カルシユウム血症等の治療薬としてカルシト
ニンが知られているが、カルシトニンは経口投与
ができないという欠点を有している。 一方、最近において、ビタミンD₃の新規な代
謝産物として、ニワトリ，ラツトあるいはブタの
血清中より25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23
―ラクトンが単離同定された（バイオケミストリ
ー（Biochemistry），18，4775〜4780；バイオケ
ミカルアンドバイオフイズイカルリサーチコミユ
ニケーシヨン（Biochemical and Biophysical
Research Communication）89，286〜293
（1979）；バイオケミカルアンドバイオフイズイカ
ルリサーチコミユニケーシヨン93，149〜154
（1980）。 かかる25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―
ラクトンの生理活性として、特表昭56―500045号
公報には以下のことが記載されている。すなわち
ビタミンD₃欠乏飼料で飼育したラツトに25―ヒ
ドロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンを投与
し、投与12時間後その血清中のカルシウム濃度を
測定すると、25―ヒドロキシビタミンD₃―26，
23―ラクトンは血清中のカルシユウム濃度を上昇
させ、従つて「骨からのカルシユウムの流通化に
関し、ビタミンＤ様活性を持つ」ことが開示され
ている。 本発明者は、かかる25―ヒドロキシビタミン
D₃―26，23―ラクトンの生理活性について更に
詳細に検討したところ、25―ヒドロキシビタミン
D₃―26，23―ラクトンをビタミンD₃欠のラツト
に投与し、投与24時間〜96時間後にその血清中の
カルシユウム濃度を測定すると、意外にもカルシ
ユウムレベルが著しく低下していることを認め
た。 本発明はかかる知見に基いて達成されたもので
ある。すなわち25―ヒドロキシビタミンD₃―26，
23―ラクトンは投与後24時間以上経過するとカル
シユウムレベルを低下せしめ、従つて、かかる化
合物が上述した如く1α，25―ジヒドロキシコレ
カルシフエロール等の投与に起因する高カルシユ
ウム血症等の治療に有用であることを見出し本発
明に到達したものである。 すなわち本発明は25―ヒドロキシビタミンD₃
―26，23―ラクトンを活性成分として含有するカ
ルシユウム低下剤である。 本発明の薬剤に用いられる25―ヒドロキシビタ
ミンD₃―26，23―ラクトンは式 で表わされる化合物である。該25―ヒドロキシビ
タミンD₃―26，23―ラクトンは、ラツト，ニワ
トリ，ブタ等にビタミンD₃を多量に投与した時、
その代謝産物として血清中から単離抽出されるも
のである。（フエブス レターズ （FEBS
LETTERS），134，207〜211（1981）；バイオケ
ミストリー（Biochemistry，18，4775〜4780
（1979）；バイオケミカル アンド バイオフイズ
イカルリサーチ コミユニケーシヨン
（Biochemical and BiophysicalResearch
Communication），89，286〜293（1979））。 また化合的合成によつても得ることができる。
すなわち、例えば式 で表わされるアルデヒドをアセトンと反応せしめ
て対応するβ―ヒドロキシケトン体とし、次いで
シアンヒドリン合成によつて得る方法（テトラヘ
ドロン．レターズ（Tetrahedron Letters），21，
4667〜4670（1980）），エルゴステロールから得ら
れるアルデヒド体を原料とする方法（ジヤーナル
オブ オルガニツク ケミストリー（Journal
of Crganic Chemistry），46，3422〜3428
（1981））などが知られている。 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラクト
ンは、その25位，23位に不斉炭原子を有するが、
本発明においては、25位，23位はそれぞれＲ―配
位，Ｓ―配位いずれでもよく、またＲ―配位，Ｓ
―配位の任意の割合の混合物であつてもよい。な
かでも特に天然体である23（Ｓ）25（Ｒ）―25―ヒ
ドロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンが好ま
しい生理活性を有する点で好適である。 本発明の25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23
―ラクトンは上記した如く、血清中のカルシユウ
ム濃度を下げる作用を有し、それ故血清中のカル
シユウムレベルが高くなることに起因する病気、
例えばビタミンＤ類縁体投与による高カルシユウ
ム血症，悪性腫瘍による高カルシユウム血症，高
カルシユウム尿症，副甲状腺機能亢進症，ベーチ
エツト病等の治療に有用である。 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラクト
ンの投与は経口，非経口のいずれでもよく、非経
口投与は筋肉内，皮下，静脈内，直腸投与を含
む。なかでも経口投与が好ましい。本化合物を活
性成分とするカルシユウム調整剤は錠剤，散剤，
顆粒剤，坐剤，カプセル剤，アルコール溶液剤，
油性溶液剤，水性懸濁剤などの投与形態で用いら
れる。油性溶液の溶媒としては植物油，たとえば
トウモロコシ油，棉実油，ココナツツ油，アーモ
ンド油，落花生油，魚肝油，油状エステルなどを
使用することができる。その他の成分として乳
糖，でんぷん，タルク，ステアリン酸マグネシウ
ム，糖，生理食塩水，界面活性剤，酸化防止剤等
が挙げられる。また本化合物の保存寿命を延長す
るために、製剤中に、抗酸化剤，例えばアスコル
ビン酸，ブチル化ヒドロキシアニソール，ヒドロ
キノンなどを混入することもできる。 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラクト
ンの投与量は0.0001〜10μｇ／Kg／日，好ましく
は0.01〜2μｇ／Kg／日の割合で投与される。 以下本発明を実施例により更に詳細に説明す
る。 実施例 １ (i) FEBS Lett.134，207〜211（1981）に記載さ
れた方法によつて、23（Ｓ）25（Ｒ）―25―ヒド
ロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンを得た。 すなわち、離乳したウイスター（Wistar）
系雄性ラツトを、ビタミンD₃を通常の量含む
飼料（Ca，1.0％，Ｐ，1.0％，D₃，2000 IU／
Kg）で８週間飼育した。次いで150匹のラツト
に、ビタミンD₃4×10⁵IUを100μのエタノー
ル溶液として、３日間の間隔をおいて２回筋肉
内投与した。２回目の投与後３日経過した後、
ラツトをエーテルで麻酔をかけた後、腹部大動
脈より血液を採血した。該血液より得られる血
清600mlを同量の水で希釈した後、２倍量のク
ロロホルム／メタノール（１／１）で抽出し
た。 得られる抽出物を、セフアデツクスLH―20
のカラム（1.5×25cm）で、展開溶媒としてク
ロロホルム／ｎ―ヘキサン（65／35）を用いて
クロマトグラフイーに付した。次いで24，25―
ジヒドロキシビタミンD₃が溶出するフラクシ
ヨンを、更に展開溶媒として９％のイソプロパ
ノールを含むヘキサンを用い、流速１ml／min
でゾルバツクスSilカラムを用いた高速液体ク
ロマトグラフイーに付した。25―ヒドロキシビ
タミンD₃―26，23―ラクトンが溶出するフラ
クシヨンを、更に同一の条件で高速液体クロマ
トグラフイーに付した。次いで得られる25―ヒ
ドロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンを、
ゾルバツクスSilカラムを用い、展開溶媒とし
て1.5％のメタノールを含むジクロルメタンを
用い流速１ml／minで高速液体クロマトグラフ
イーにかけ精製した。 (ii) かくして得られる23（Ｓ）25（Ｒ）―25―ヒド
ロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンを用い
て、腸管からのカルシユウム吸収能および血清
中のカルシユウム濃度を測定した。 離乳したウイスター（Wistar）系雄性ラツ
トをビタミンD₃欠乏，低カルシユウム食で６
週間飼育した。６週間後、体重約100ｇの５匹
のラツトに、0.2％のTritonX―100の溶液0.2ml
に溶解した500nｇの25―ヒドロキシビタミン
D₃―26，23―ラクトン，250nｇの1α，25―ジ
ヒドロキシビタミンD₃，500nｇの25―ヒドロ
キシビタミンD₃をそれぞれ静脈内投与した。
投与後ラツトを殺し、腸管からのカルシユウム
吸収能および血清中のカルシユウム濃度を測定
した。腸管からのカルシユウム吸収能は、デ・
ルーカらの方法（Am.J.Physiol.216，1351〜
1359（1969））により、血清中のカルシユウム濃
度はOCPC法（Am.J.Clin.Pathol.45，290〜296
（1966））により測定した。 腸管からのカルシユウム吸収能の結果は第１図
に、血清中のカルシユウム濃度の結果は第２図に
示した通りである。 第１図から、25―ヒドロキシビタミンD₃―26，
23―ラクトンは腸管からのカルシユウム吸収能を
わずかにしか亢進しないことが判る。 第２図より25―ヒドロキシビタミンD₃―26，
23―ラクトンは投与後12時間においてはカルシユ
ウム濃度を上昇せしめるが、投与後24時間後にお
いてはカルシユウムレベルを下げることが判る。 実施例 ２ １群５匹のウイスター系雄性ラツトをビタミン
D₃欠乏，低カルシユウム食で、６週間飼育した。
次いで第１回目に0.2％TritonX―100 0.2mlに溶
解した25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラ
クトン500nｇ，あるいは0.2％TritonX―100 0.2
mlのみ（Vehicle）を静脈内投与した。次いで80
時間後（第２回目）にラツトに、0.2％TritonX
―100 0.2mlに溶解した、1α，25―ジヒドロキシ
ビタミンD₃250nｇ，あるいは0.2％TritonX―100
0.2ml（Vehicle）を静脈内投与した。第２回目の
投与15時間後に、ラツトを殺し、実施例１の(ii)と
同様にして、その腸管のカルシユウム吸収能及び
血清中のカルシユウム濃度を測定した。結果は第
１表に示した通りである。

【表】 第１表より、1α，25―ジヒドロキシビタミン
D₃は血清中のカルシユウムレベルを著しく上昇
せしめるのに対し、25―ヒドロキシビタミンD₃
―26，23―ラクトンは著しく減少せしめることが
判る。 また、あらかじめ（第１回目投与）、25―ヒド
ロキシビタミンD₃―26，23―ラクトンを投与し、
次いで（第２回目投与）、1α，25―ジヒドロキシ
ビタミンD₃を投与した場合には、1α，25―ジヒ
ドロキシビタミンD₃による血清中のカルシユウ
ムレベルの上昇が抑制されることが判る。 被検動物としてウイスター系ラツト（雄性，８
周令）を用い、25―ヒドロキシビタミンD₃―26，
23―ラクトン50μｇ／Kg，5μｇ／Kg及び0.5μｇ／
ｇ（１日１回，静脈内投与）を２週間連続投与し
た。その結果、いずれの投与量でも副作用は認め
られなかつた。 実施例 ３ 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラクト
ンを脂肪油に溶解し7μｇ／mlの濃度の油性溶液
を得た。ゼラチン100重量部，グリセリン20重量
部，パラオキシ安息香酸エチル0.2重量部，パラ
オキシ安息香酸プロピル0.2重量部，１―パラ―
スルホフエニルアゾ―２―ナフトール―６―スル
ホン酸ジナトリウム塩0.5重量部および精製水80
重量部から成る剤皮組成分を加温溶解して被覆剤
とし、１カプセルにつき25―ヒドロキシビタミン
D₃―26，23―ラクトンが1μｇ含有するように連
続式軟カプセル製造機を用いて剤皮を施して軟カ
プセルを製造した。

【図面の簡単な説明】

第１図は25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23
―ラクトンの腸管からのカルシユウム吸収能の結
果を、第２図は血清中のカルシユウム濃度の結果
を表わしたものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラク
   トンを活性成分として含有する血清カルシユウム
   低下剤。 ２ 25―ヒドロキシビタミンD₃―26，23―ラク
   トンが23（Ｓ）25（Ｒ）―25―ヒドロキシビタミン
   D₃―26，23―ラクトンである特許請求の範囲第
   １項記載の血清カルシユウム低下剤。 ３ 経口剤形態にある特許請求の範囲第１項又は
   第２項記載の血清カルシユウム低下剤。