JPS63310864A

JPS63310864A - 生理活性を有する新規なアクチノニン誘導体

Info

Publication number: JPS63310864A
Application number: JP62144176A
Authority: JP
Inventors: Masayoshi Shibahara; 聖至柴原; Sachiko Takahashi; 幸子高橋; Yuji Matsuhashi; 松橋　祐二; Mitsugi Hachisu; 蜂須　貢; Shinichi Kondo; 信一近藤; Tomio Takeuchi; 富雄竹内; Takaaki Aoyanagi; 青柳　高明
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation; Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation; Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1987-06-11
Filing date: 1987-06-11
Publication date: 1988-12-19
Anticipated expiration: 2010-08-09
Also published as: DE3880561D1; EP0296040A1; DE3880561T2; US4929633A; EP0296040B1; JPH0774194B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は放線菌の代謝産物であるアクチノニンを化学修
飾することにより得られる生理活性、特にボスト−プロ
リン・クリ−ベイソング８素（ＰＰＣＥ）阻害作用と実
験的健忘症治療効果を有する新規なアクチノニン誘導体
に関する。

（従来の技術）微生物の代謝産物は様々な化学構造と様々な生理活性を
有する種々な有機化合物を提供し、従来より、それらを
抗生物質として利用する技術は幅広く研究され利用され
て来た。本発明者らはこれら特異な化学構造を有する微
生物代謝産物の抗菌作用以外の生理活性を追求し、抗生
物質以外の医薬として利用する研究を行って来た。それ
ら−環の研究過程で、従来より抗生物質として文献（例
えば米国特許第３，２４０，７８７号明細書）記載の化
合物であるアクチノニンがペプチド分解酵素を幅広く阻
害する事を見出した（「ジャーナル・オブ・アンチィビ
オティックス」並、　１６２９〜１６３０頁（Ｉ９８５
）並びに特開昭６ｌ−１５１１Ｌ４０号及び特開昭６２
−４２２８号公報参照）。

また、アクチノニン類縁化合物の合成研究はその抗菌力
を改善する目的で行なわれ、「ジャーナル・オブ・ケミ
カル・ソサイエティー・バーキントランス・Ｉ　Ｊ　１
９７５．８４６頁に報告されている。

（発明が解決しようとする問題点）アクチノニンを、人を含む哺乳類の酵素の阻害剤として
用いる場合、その抗菌作用はこの化合物を利用する目的
外の作用であり、好ましくない。

又、従来研究されて来たアクチノニン類縁化合物の合成
研究は全て全合成的手段で行なわれ、工業的な製造法で
はない。一方、本発明者らの研究では、アクチノニンの
酵素阻害作用は酵素特異性が無く、幅広い酵素を阻害す
るから、医薬として用いるには適していない。

本発明者らは、微生物の培養で得られるアクチノニンを
合成用の出発原料として用い、その化学修飾を行う事で
ひ素特異性の高いペプチド分解酵素阻害剤として有用な
新規化合物を創製して提供し、問題の解決を計るべく研
究を行っている。アクチノニンは、抗菌作用を示す他に
、幅広い基質と幅広いペプチド分解酵素を阻害する。例
えば、アクチノニンは２種の酵素、すなわちアンジオテ
ンシン変換酵素ＡＣＥ及び前記の酵素ＰＰＣＥに対して
中程度の阻害活性を示す。本発明者らは、アクチノニン
の抗菌力発現に必須のヒドロキシアミノ基を除去すると
、成るペプチド分解？素のみを阻害する下記の一般式（
Ｉ）で表わされる一群の新規な化合物が得られることを
知見した。

（問題点を解決するための手段）従って、本発明の要旨とするところは、次の一般式（Ｉ
）〔式中、Ｒは水素原子又は低級アルキル基である〕で示
されるアクチノニン誘導体にある。

一般式（Ｉ）の化合物において、Ｒとしての低級アルキ
ル基は、炭素数１〜６のアルキル基であり得て、好まし
くは炭素数１〜５のアルキル基である。低級アルキル基
の好適な例は、メチル基、エチル基、プロピル基、イソ
プロピル基である。本発明の一般式（Ｉ）の化合物は強
いＰＰＣＥ阻害活性を示すが、酵素ＡＣＥに対する阻害
活性は無い。

従って本発明の一般式（Ｉ）の化合物は、アクチノニン
の幅広いペプチド分解酵素阻害活性の内、ＰＰＣＥに対
する阻害活性を増強し、他の阻害活性を弱めた酵素特異
性が発現されている。

更に、本発明の一般式（Ｉ）の化合物の生理活性の一つ
としては、マウスに於ける実験的健忘症の治療効果があ
る。ＰＰＣＥに対する阻害活性を有する化合物は、各種
の脳傷害の治療薬として研究されており、それらの内で
健忘症に対する治療効果を、マウスのサイクロヘキシイ
ミドで誘発した実験的健忘症治療効果について試験され
るが、この効果を本発明化合物が有することが実験で確
認された。

次に、本発明の化合物の例として、以下の化合物がある
ことを示す。

（Ｉ）次式（Ｉａ）で示される（２Ｓ）−２−ペンチル
サクシニル−し−バリル−プロリナール（実施例１化合
物）（２）次式（Ｉｂ）で示される（２Ｓ）−３−エト
キシカルボニル−２−ペンチルプロピオニル−し−バリ
ル−Ｌ−プロリナール（実施例２化合物）（３）次式（Ｉｃ）で示される（２Ｓ）−３−メトキシ
カルボニル−２−ペンチルプロピオニル−し−バリル−
Ｌ−プロリナール（実施例３化合物）一般式（Ｉ）で示される化合物の化合物は、下記の式（
ＩＩ）で示されるアクチノニンから出発して下記の工程
図で示される反応工程よりなる方法で製造される。

尚、出発原料である式（ＩＩ）のアクチノニンそれ自体
は公知であり、放線菌ストレプトミセス・ロゼオプルラ
タスの培養により得られる。

二艮皿化合物（ｍ）（但しＲは水素でない）（但しＲは水素でない）上記の工程図の諸反応について説明するに、先づ式（Ｉ
Ｉ）のアクチノニンを水に懸濁し過ヨウ素酸ソーダで処
理して脱ヒドロキシアミノ化反応を行うことにより、ヒ
ドロキシアミノ基を除去すると、コハク酸誘導体（Ｉｌ
ｌ）を得る０次いで、この化合物（ｍ）のヒドロキシメ
チル基を酸化する事により本発明の一般式（Ｉ）でＲ＝
水素で表わされる化合物（Ｉａ）を得る。　この酸化反
応は通常のアルコールをアルデヒドに酸化する反応であ
れば何れも適用される。好ましくはフィッナー・モハッ
ト法で知られるジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）とそ
の活性化試薬の組み合せを用いる酸化反応が良く、中で
も、ＤＭＳＯとピリジン−無水硫酸錯体（ＣＮ−３ｏ３
＞との組み合せにより式（Ｉａ）の目的化合物が高収率で
得られる。

一方、コハク酸誘導体（ＩＩＩ）の遊離カルボン酸を、
所望のアルコールでエステル化する事により対応のエス
テル体（ＩＶ）を得る。このエステル化は従来より知ら
れている一般的な方法でよく、アルコールと酸触媒、又
はアルコールと脱水縮合剤を反応させるか、あるいは化
合物（ｍ）を酸塩化物又は混合酸無水物等の活性体に導
き、次いで弐Ｒ−ＯＨ（但しＲは前記と同じ）で示され
る所望のアルコールで処理しても良い。化合物（ＩＩＩ
）と所望のアルコールを、４−ジメチルアミノピリジン
及び脱水縮合剤ＤＣＣの存在下に反応させると、簡便で
収率よくエステル体（ＩＶ）が得られる。

次いで、エステル化合物（ＩＶ）を、化合物（ｍ）を酸
化する場合と同様に、酸化する事により本発明の一般式
（Ｉ）で、Ｒがエチル基、メチル基、イソプロピル基等
のアルキル基である化合物（Ｉ′）が得られる。

（発明の効果）（イ）本発明による一般式（Ｉ）の化合物が酵素特異性
を有する事を示すため、二つのペプチド分解酵素、すな
わち第一は血圧調整に関与するアンジオテンシン変換酵
素（ＡＣＥ）、第二は記憶に関与するボストープロリン
クリーベイジング酵素（ＰＰＣＥ）に対する阻害作用を
、アクチノニンを対照に測定した。

ＰＰＣＥに対する阻害活性は、酵素液に基質としてＺ−
ＧＬｙ−Ｐｒｏ−ＰＮＡを加え、これに、検定する酵素
阻害剤化合物を加え、３７℃、１５分間反応させ、その
後、基質の消失を紫外部吸収を測定する事で測定した。

なおＰＰＣＥはブタ腎臓より′Ａ製し、硫安分画、ＤＥ
ＡＥ−セファデックスで精製して用いた。

、また、ＡＣＥに対する阻害活性は文献記載「アナリテ
ィカル・バイオケミストリー」８４巻、３６１頁（Ｉ９
７８年）の方法に従って測定した。その結果を次表に示
す。

表に　本発明化合物の酵素阻害活性表１の結果で明らかの様に、対照のアクチノニンは２種
の３素ＡＣＥ及びＰＰＣＥに対して中程度の阻害活性を
示した。一方、本発明の一般式（Ｉ）の化合物である実
施例１および実施例２の化合物は強いＰＰＣＥ阻害活性
を示すが、ＡＣＥに対する阻害活性は無い、従って本発
明の一般式（Ｉ）の化合物は、アクチノニンの幅広いペ
プチド分解酵素阻害活性の内、ＰＰＣＥに対する阻害活
性を増強し、他の阻害活性を弱めて酵素特異性を発現し
ている。

（ロ）更に、本発明の一般式（Ｉ）の化合物の生理活性
の一つとしては、マウスに於ける実験的健忘症の治療効
果がある。マウスのサイクロヘキシイミドで誘発した実
験的健忘症治療効果をステップダウン受動回避反応で測
定した。

この実験は平均体重２５ｇのｄｄｙ系マウス（雄）を用
い、ケージ内に一辺４ｃｍの立方体プラットホームを設
置し、プラットホーム上にマウスを乗せ、プラットホー
ム外のケージ床には通電装置を設け、マウスがプラット
ホームから床に降りると６０Ｖ電圧の電流を０．５秒間
通電して、学習させた。学習後、直ちにサイクロヘキシ
イミドの３０ｍｇ／ｋｇを皮下投与して実験的健忘症を
誘発させた。供試化合物は学習前１５分に腹腔内に投与
し、マウスは学習終了後、２４時間目に再び同条件の実
験ケージ、プラットホーム上に乗せ、上限を３００秒と
するプラットホーム上の滞留時間を測定した。

表２の結果で明らかの様に、本発明の実施例２の化合物
はマウスの実験的健忘症に対し顕著な治療効果を示した
。

次に、一般式（Ｉ）の化合物の製造例を、参考例、およ
び実施例について更に説明する。

参考例１（２Ｓ）−２−ペンチルサクシニル−し−バリル−Ｌ−
プロリノール（ＩＩＩ）の合成。

アクチノニン（Ｉ，０ｇ）を水（Ｉ００ｍｌｌりに懸濁
し、１．５Ｎ−過ヨウ素酸ソーダ水溶液（２５ｔＲ）を
加え、室温で終夜攪拌して脱ヒドロキシアミノ化反応を
行った。反応液を食塩で飽和し、エチルエーテル（Ｉ０
０ｍｕ）で抽出した０次いでエーテル層を飽和重曹水溶
液（５０ｍＲ）で２回抽出した。水層を合せｌＮ−ＨＣ
ｌでｐ）ｌ　２に調整後、食塩で飽和しエチルエーテル
（Ｉ５０ｉ＋Ω）で抽出した。エーテル層を芒硝で乾燥
後濾過し、濾液を濃縮乾固し、表題化合物（ＩＩＩ）を
無色飴状残渣（７９０ｍｇ）として得たゆマススペクト
ル：　　ｍＨｚ　３７０（Ｍ”）ＩＲスペクトル（クロ
ロホルム溶液）：　　３３００．１６００゜１６５０、
１５８０ｃ＋ｍ−’ ＮＭＲスペクトＪＬ／　（９０ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ、）
　：６０．８５（９Ｈ，ｔａ、　ＣＨ，Ｘ３）、６１．
２〜１．６（８Ｈ，ｒａ、　−Ｃ１ｌ□Ｘ４）、５１．
７〜２．１（５Ｈ，ｍ、　−ＣＨ，Ｘ２．−ＣＨＸＩ）
、６２．２〜２．９（３Ｈ，ｍ、　−ＣＨ２ＸＩ、　−
ＣＩＩＸＩ）、６３．３〜３．９（４Ｈ，ｒａ、　−Ｃ
Ｈ２Ｘ２）、６４．３〜４．７（２Ｈ，ｍ、　−ＣＨＸ
２）ス】１１Ｌ（２Ｓ）−２−ペンチルサクシニル−Ｌ−バリル−し−
プロリナール（Ｉａ）の合成。

参考例１で得られた化合物（Ｉｎ　）　（９８ｍｇ）と
トリエチルアミン（Ｉ０μＱ）を無水ジメチルスルホキ
シド（ＩｍＲ）に溶解し、攪拌下に三酸化イオウ・ピリ
ジン錯体（Ｉ２４ｍｇ）のジメチルスルホキシド（ｌｄ
）溶液を加えた。室温で１５分間攪拌して酸化反応を行
った。その後、氷水（Ｉ０ｄ）に注ぎ、酢酸エチル（Ｉ
５ｍＱ）で抽出した。有機層を水、飽和重曹水、水で順
次洗滌し、次いで芒硝で乾燥、濾過し、濾液を濃縮した
。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール＝１０＝１）で精製し表題化合
物（Ｉａ）を飴状残渣（８１ｍｇ）として得た。

ＴＬＣ（シリカゲル）：　　ＲｆＯ，５（展開溶媒：ク
ロロホルム−メタノール＝ｌＯ：１）ＩＲスペクトル（クロロホルム溶液’）：　　３３００
．１７２０゜１６９０、１６５０．１５８０　ｃｒｎ−
”ＮＭＲスペクトル（９０ＭＩ（ｚ、　ＣＤＣｌ５）：
δ０．８５（９Ｈ，ｒｓ、　−ＣＨ，Ｘ３）、δ１−２
〜１−６　（８Ｈ−１１１−−ＣＨ２Ｘ　４）、６１．
７〜２．１（５Ｈ，ｍ、　−ＣＨ２Ｘ２．−ＣＨＸＩ）
、δ　４．３〜４．７（２＋１．　ｍ、　−ＣＨＸ２）
、６９．５（Ｉ）１．　ｄ、　−ＣＨｏ）去】１１影（２Ｓ）−３−エトキシカルボニル−２−ペンチルプロ
ピオニル−し−バリル−Ｌ−プロリナール（Ｉｂ）の合
成。

（Ａ）参考例１で得た化合物（ｍ　）　（Ｉ００Ｉｌ＋
ｇ）をエタノール（２＋＊Ｉｌ）に溶解し、攪拌下にＤ
ＣＣｌすなわちジシクロへキシルカルボジイミド（５５
ｍｇ）のエタノール（Ｉｍｇ）溶液と４−ジメチルアミ
ノピリジン（５＋ｓｇ）を加え、室温で終夜攪拌してエ
ステル化反応を行った。析出した不溶物を濾別後、濾液
を減圧濃縮した。その油状残渣を酢酸エチル（Ｉ５ｄ）
に溶解し２Ｎ−ＨＣＩ、水で順次洗滌し有機層を芒硝で
乾燥した。芒硝を濾過後、濾液を減圧濃縮した。得られ
た粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（展開溶媒
：クロロホルムー酢酸エチル３：１）で精製し、前記の
工程図で式（ｒＶ）で示した化合物、但しＲ＝エチル基
の化合物、すなわち（２Ｓ）−３−エトキシカルボニル
−２−ペンチルプロピオニル−し−バリル−Ｌ−プロリ
ノール（７３ｍｇ）を得た。

ＴＬＣ（シリカゲル）：　Ｒｆ　Ｏ，４（展開溶媒：ク
ロロホルムー酢酸エチル＝３：１）（Ｂ）得られた化合物（■）（但しＲ＝エチル）を実施
例１と同様にジメチルスルホキシドと三酸化イオウ・ピ
リジン錯体で酸化し、表題化合物（Ｉｂ）を得た。

ＩＲスペクトル（クロロホルム溶液）：　　１７２０．
１７１０゜１６５５、１６０５　ｃａｂ−１ＨＭＲスペクトル（９０ＭＨｚ、　ＣＤＣｌ、）：δ０
．７５〜０．９（Ｉ２Ｈ，ｍ、　−ＣＨ，Ｘ３）、δ　
１，２〜１．６（８Ｈ，ｍ、　−ＣＨ２Ｘ４）、６１．
７〜２．１（５Ｈ，ｒｔｒ、　−ＣＨ２Ｘ２．−Ｃ）Ｉ
ＸＩ）、δ４．０５（２Ｈ，ｑ、　−ＣＨ，）、６９．
４（ＬＨ，ｄ、　−ＣＩＩＯＸＩ）天Ｊｕｔ剤（２Ｓ）−３−メトキシカルボニル−２−ペンチルプロ
ピオニル−し−バリル−Ｌ−プロリナール（Ｉｃ）の合
成。

実施例２と同様に化合物（ｍ）をメタノール、ジシクロ
へキシルカルボジイミドでエステル化、対応のメチルエ
ステル（化合物（ＩＶ）、Ｒ＝メチル）を得た。次いで
、ジメチルスルホキシドと三酸化イオウ・ピリジン錯体
で酸化し、表題化合物（Ｉｃ）を得た。

Claims

【特許請求の範囲】１、一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼ ＣＨ（ＣＨ＿３）＿２　ＣＨ＿２ＣＯＯＲ（ I ）（式
中、Ｒは水素原子又は低級アルキル基である）で示され
るアクチノニン誘導体。２、一般式（ I ）におけるＲが水素、メチル基又はエ
チル基である化合物である特許請求の範囲第１項記載の
化合物。