JPS63225601A - 放射性医薬品調製用高分子化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は放射性医薬品調製用高分子化合物、特にホルミ
ル基含有ポリサッカライド誘導体に対しアミノ基含有生
理活性物質とアミノ基含有２官能配位子化合物が結合し
て成る放射性医薬品調製用キャリヤーとして有用な高分
子化合物および該高分子化合物に放射性金属元素を結合
せしめて成る放射性医薬品として有用な標識高分子化合
物に関する。

本発明の高分子化合物は文献未載の新規物質であり、特
定臓器の描出、特定疾患の検出、生理活性物質の動態検
査、疾病の治療などの核医学的用途に適した、安定な放
射性金属標識つき放射性医薬品を提供することが出来る
ものである。

特定臓器の描出、特定疾患の検出、生理活性物質の動態
検査などを目的とした放射性医薬品として、従来、ヨー
ド−１３１で標識された生理活性物質が汎用されてきた
。たとえば、血液循環系の描出や動態検査に用いられる
ヨード−１３１標識ヒト血清アルブミン、血栓の検出に
用いられるヨード−１３１標識フイブリノーゲンなどが
挙げられる。しかしながら、ヨード−ｔａｔは半減期が
約８日と長い点で放射線治療には有利であるが、核医学
診断に有用なガンマ−線の他にベータ線を放出するため
、被検者に多量の放射線被曝を与える欠点が指摘されて
いる。

そこで核医学診断により適した物理的特性を有する放射
性金属を、他の方法により生理活性物質に導入し、有用
な放射性診断剤を得ようとする試みが続けられている。

たとえば、生理活性物質に直接、放射性金属塩を作用さ
せる標識法で得られるものとして、テクネチウム−９９
ｍ標識ヒト血清アルブミン、インジウム−２１標識プレ
オマイシンなどが知られている。さらにジエチレントリ
アミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、３−オキソブチラールビス
（Ｎ−メチルチオセミカルバゾン）カルボン酸、デフエ
ロキサミンなどの２官能配位子化合物の各種金属に対す
る強いキレート形成能と、それらの化合物末端のアミノ
基およびカルボキシル基の種々の生理活性物質に対する
反応性に基づいて、これら２官能配位子化合物を介して
放射性金属および生理活性物質を結合させる方法も提案
されている。

これらの方法で得られた標識化合物は比較的安定であり
、しかも生理活性物質の活性を保持しているので、核医
学診断目的に非常に興味ある薬剤である。しかしながら
、これらの方法によって得られた放射性診断剤は、分子
量の大きい生理活性物質、たとえば血栓診断やガン診断
に使用されるそれぞれ分子量約３４万のフィブリノーゲ
ンや分子量約１６万のＩｇＧを用いた場合、診断に必要
な高比放射能のものが得られない欠点がある。

本発明者らは、この欠点を解決すべく種々研究を重ねた
結果、先にジアルデヒドデンプンにアミノ基含有２官能
配位子化合物とアミノ基含有生理活性物質が結合した高
分子化合物を開発することに成功した（特開昭５９−１
０５００２号明細書および特開昭５９−１０６４２５号
明細書参照）。この高分子化合物は、１分子当たり多数
の配位子を持つものであり、このことはとりも直さず１
分子当たりに結合する放射性金属イオンの数が従来の２
官能配位子化合物に比して格段に多いことを意味する。

そしてこの高分子化合物を使用することにより、生理活
性物質の変性および活性低下を来すことなく高比放射能
の放射性診断剤が得られる事実が見出だされた。

上記の知見に基づいて更に研究を進めた結果、ジアルデ
ヒドデンプンに代えて他のホルミル基含有ポリサッカラ
イド誘導体を使用しても同様に生理活性物質の変性や活
性低下を起こすことなく高比放射能の放射性医薬品が得
られる事実が見出だされた。一般に分子量の大きい生理
活性物質をヒトに投与する場合、その抗原性を考慮する
ならば、その投与量を可及的少量にすることが望ましい
。

従って、ここに得られた放射性医薬品が高比放射能であ
ることは、この点で極めて有利である。なお、ジアルデ
ヒドデンプンは分子量分布が広く、網状構造を有するの
で、その繰り返し構造の数はどには２官能配位子化合物
が効果的に結合しにくい傾向が認められるが、ジアルデ
ヒドアミロースのように分子量分布が狭くかつ直鎖構造
を有するものを使用すれば多数の２官能配位子化合物を
効果的に結合することが出来、従って高比放射能の製品
が得られやすい。

本発明は以上の知見に基づいて完成されたものであって
、その要、旨は 分子中に少なくとも３個のホルミル基を有するポリサッ
カライド誘導体（ただし、ジアルデヒドデンプンを除く
。）（■）に対しアミノ基含有２官能配位子化合物（Ｉ
ＩＩ）とアミノ基含有生理活性物質（■）が前記ポリサ
ッカライド誘導体（ＩＩ）１分子当たり前記２官能配位
子化合物（Ｉ［Ｉ）少なくとも２分子と前記生理活性物
質（ＩＶ）少なくとも１分子の割合でメチレンイミン結
合（−ＣＨ＝Ｎ−）またはメチしンアミン結合（−ＣＨ
ｔＮＨ−）を介して結合して成る高分子化合物（１） に存する。

本発明の目的とする上記高分子化合物（１）はポリサブ
カライド誘導体（ＩＩ）に対し２官能配位子化合物（Ｉ
ＩＩ）と生理活性物質（■）が結合して構成された、生
理活性物質（ＩＶ）−ポリサッカライド誘導体（ｎ）−
２官能配位子化合物（Ｉ［［）結合体である。

ポリサブカライド誘導体（Ｉｆ）は分子中に少なくとも
３個のホルミル基を持つことが必要であり、ホル造ル基
の数が多いほど好ましい。それらのホルミル基のうち少
なくとも２個は２官能配位子化合物（Ｉ［［）との結合
に役立つものであり、他の少なくとも１個は生理活性物
質（ＩＶ）との結合に役立つものである。

ポリサブカライド誘導体（Ｉ［）としては、たとえば適
宜に置換されていることもあるポリサッカライドを酸化
剤（たとえば過ヨード酸ナトリウム）で処理して得られ
る、原則としてサツカライド単位毎に１個または２個の
ホルミル基を有するものが使用されうる。ポリサッカラ
イドとしては、オリゴサツカライドでもよいが、本発明
の目的から理解されるようにベント−サン、ヘキソ−サ
ン、ポリグルコサミン、ポリウロン酸、グリコサミノグ
リカン、グリコサミノグリカン、ヘテロヘキソ−サンな
ど高次のポリサッカライドが好ましい。具体例としては
、アミロース、アミロペクチン、デキストラン、セルロ
ース、イヌリ、ン、ペクチン酸、プルランなどが挙げら
れ、それらの混合物や脱水縮合物であってもよい。一般
にサツカライド単位が３０００以下、特にｌ０００以下
のものが望ましい。

２官能配位子化合物（ＩＩＩ）としては、放射性金属元
素（Ｖ）に対し強固なキレート結合を形成し、かつ比較
的緩和な条件下でポリサッカライド誘導体（ＩＩ）のホ
ルミル基と反応し得るアミノ基を有するものが使用され
る。この上うな２官能配位子化合物（ＩＩＩ）の具体例
としてはデフェロキサミン（メルク・インデックス、第
９版、３７４頁（１９７６年））、式：％式％ （式中、Ｒ１およびＲ８それぞれ水素、０１〜Ｃ，アル
キルまたはフェニルを表す。）で表される３−アミノメ
チレン−２，４−ペンタンジオン−ビス（チオセミカル
バゾン）誘導体（ヨーロッパ特許出願第５４９２０号明
細書）、式： （式中、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ水素またはＣ１〜Ｃ
３アルキル、ｎは０〜３の整数を表す。）で表される１
−（ｐ−アミノアルキル）フェニルプロパン−１，２−
ジオン−ビス（チオセミカルバゾン）誘導体（オースト
ラリア特許第５３３７２２号明細書）などが挙げられる
。

そのもの自体はアミノ基を有していなくても容易にアミ
ノ基またはアミノ基含有構造を形成し得る基または構造
を有している場合は、放射性金属元素を捕捉する性質を
有する限り、このものもまたアミノ基またはアミノ基含
有構造を形成せしめたうえで、アミノ基含有２官能配位
子化合物として使用し得る。たとえば、カルボキシル基
を有するものは、これにアルキレンジアミンを反応させ
ることによって容易にアミノ基を導入することが出来、
本発明において２官能配位子化合物（ＩＩＩ）の１種と
して使用することが出来る。その具体例としては、ジエ
チレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミ
ン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジメルカプトアセチルエチレン
ジアミン（Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇら：Ｊ。

Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、、　２３．９１７（１９８２））お
よびビスアミノエタンチオール（Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇ
ら：　　Ｊ、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、。

剣、　９１６（１９８４））に代表さ゛れるＮ　ｔ　Ｓ
　ｔリガンド、サイクラン（１（ｅｉｒｉｎｇら：　Ｊ
、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、、　２３．９１７（１９８２））
に代表されるＮ、リガンド、Ｎ、Ｎ’〜ビス（２−ヒド
ロキシエチル）エチレンジアミン（Ｗａｇ−ｎｅｒＪｒ
、ら：　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｉ　
ｎｔｅｒｎａｔｉｏ−ｎａｌ　Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ　ｏ
ｎ　Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ　ｉｎ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、　Ｐａｄ
ｏｖａ　Ｉ　ｔａｌｙ、　１６１頁（１９ｇ２））に代
表されるＮ　ｔ　Ｏｔリガンド、式：％式％ （式中、Ｒ５、Ｒ＠、Ｒ？、Ｒ８およびＲｓは水素また
はＣ，−ＣＳアルキル）で表される２−プロピオンアル
デヒド−ビス（チオセミカルバゾン）誘導体（アメリカ
特許第４２８７３６２号明細書）などｈ５挙げられる。

生理活性物質（ＩＶ）としては、適当な器官または組織
あるいは特定の病巣に蓄積するか、特定の生理状態に対
応して特異な挙動を示す物質であって、生体内における
このような物質の挙動を追跡することによって診断ある
いは治療上有用な情報や効果を得ることが出来るものが
使用される。生理活性物質は一般にそれ自体でアミノ基
を有しているものが多いが、そのような生理活性物質は
もとより、それ自体ではアミノ基を有していないもので
あっても、これに適宜の方法でアミノ基またはアミノ基
含有構造を導入したものを、使用することが出来る。

生理活性物質ＣＩＶ＞の具体例としては、血液蛋白質（
たとえばヒト血清アルブミン、フィブリノーゲン）、酵
素（たとえばウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ）、ホ
ルモン（たとえば甲状腺刺激ホルモン、副甲状腺ホルモ
ン）、免疫抗体（たとえば！ｇＧおよびその断片のＦ　
（ａｂ）ｔ’、Ｆ　ａｂ’、Ｆ　ａｂ）、モノクローナ
ル抗体、抗生物質（たとえばプレオマイシン、カナマイ
シン）、糖類、脂肪酸、アミノ酸などが挙げられる。

高分子化合物（１）を製造するには、たとえばポリサッ
カライド誘導体（ＩＩ）と２官能配位子化合物＜ｍ＞を
縮合させて前者のホルミル基と後者のアミノ基の間でメ
チレンイミン結合を形成せしめ、必要に応じこのメチレ
ンイミン結合を還元してメチレンアミン結合に変換した
後、得られたポリサブカライド誘導体（ｎ）−２官能配
位子化合物（Ｉ［）結合体と生理活性物質（■）を縮合
させて前者のポリサッカライド誘導体（ｎ）部分に存在
するホルミル基と後者のアミノ基の間でメチレンイミン
結合を形成せしめ、必要に応じこのメチレンアミン結合
を還元してメチレンアミン結合に変換すればよい。

また、ポリサッカライド誘導体（Ｉｆ）と生理活性物質
（ＩＶ）を縮合させて前者のホルミル基と後者のアミノ
基の間でメチレンイミン結合を形成せしめ、必要に応じ
このメチレンアミン結合を還元してメチレンアミン結合
に変換した後、得られたポリサッカライド誘導体（ｒｌ
）−生理活性物質（１％’）結合体と２官能配位子化合
物（Ｉ［［）を縮合させて前者のポリサッカライド誘導
体（ＩＩ）部分に・存在するホルミル基と後者のアミノ
基の間でメチレンイミン結合を、形成せしめ、必要に応
じこのメチレンイミン結合を還元してメチレンアミン結
合に変換してもよい。

上記各方法における縮合反応はホルミル基とアミノ基を
縮合させるために採用される自体常套の手段で行えばよ
い。還元反応もまた、メチレンイミン結合をメチレンア
ミン結合に変換する際に採用される自体常套の手段、た
とえば水素化ホウ素ナトリウムのような金属水素化物を
使用することにより行なわれる。上記縮合反応および還
元反応はいずれも比較的緩和な条件下で進行することが
出来るから、生理活性物質（■）が比較的不安定な場合
でもその生理活性に本質的な影響を与えることなく目的
とする高分子化合物（ｆ）、すなわち生理活性物質（■
）−ポリサブカライド誘導体（ＩＩ）−２官能配位子化
合物（ｎＩ）結合体を製造することが出来る。

反応試剤、反応条件などの相違によりポリサブカライド
誘導体（■）１分子に結合する２官能配位子化合物（Ｉ
ＩＩ）や生理活性物質（ＩＶ）の分子数は異なるが、２
官能配位子化合物（ＩＩＩ）の分子数は一般には５また
はそれ以上、特に１０またはそれ以上が好ましく、生理
活性分子数（ＥＶ）の分子数は一般にはＩＯまたはそれ
以下、特に３またはそれ以下が好まごい。ポリサッカラ
イド誘導体（ｎ）に対し２官能配位子化合物（■）と生
理活性物質（１’％ｒ）のいずれを先に結合させてもよ
いが、後で結合させるべき生理活性物質（ＩＶ）または
２官能配位子化合物（ＩＩＩ）が結合するための適当な
数の遊離のホルミル基が残存するように反応を実施すべ
きである。

上記製造法の途中で得られる各種結合体および最終的に
得られた高分子化合物（Ｉ）は、いずれも必要に応じて
高分子物質に適用されるカラムクロマトグラフィー、高
速液体クロマトグラフィー、ゲルろ適法、透析法などの
常套の精製法を適用することにより精製されてもよい。

ポリサッカライド誘導体（ｎ）としてアミロース由来の
ものを使用する場合を例に挙げ、これをまず２官能配位
子化合物（ＩＩＩ）と縮合させた後還元を行い、次いで
ここに得られたポリサッカライド誘導体（ＩＩ）−２官
能配位子化合物（Ｉ［［）結合体を生理活性物質（ＩＶ
）と縮合させた後還元を行って目的とする高分子化合物
（Ｉ）、すなわち生理活性物質（■）−ポリサブカライ
ド誘導体（ｎ）−２官能配位子化合物（Ｉ［［）結合体
を製造する場合を式で示せば次の通りである： （ＩＩａ） ■ ↓　還元 ＋　　　Ｙ　−Ｎ　Ｆｌ　。

（式中、Ｘは２官能配位子化合物（Ｉ［［）からアミノ
基を除去した残基、Ｙは生理活性物質（ＴＶ）からアミ
ノ基を除去した残基、Ｚは−ＣＨ０または−Ｃ）Ｉｔｏ
Ｉ（、Ｐは２〜１０００の整数、ｑおよびＳはそれぞれ
１−１０００の整数、ｒおよびｔはそれぞれ０〜１００
０の整数を表す。ただし、ｑ＋ｒおよびｑ＋ｓ＋ｔはそ
れぞれ２〜１０００の整数である。）。

なお、上式においてジアルデヒドアミロース（ＩＩａ）
はアミロースを原料とし、これを過ヨード酸のような酸
化剤で部分的あるいは全体的に酸化することにより得ら
れる鎖状高分子物質であって、それ自体市販されている
。そのサツカライド単位は通常２〜１０００であり、特
に２〜５００が好ましい。

本発明の高分子化合物（１）、すなわち生理活性物質（
ＩＶ）−ポリサッカライド誘導体（ＩＩ）−２官能配位
子化合物（ＩＩＩ）結合体は、放射性医薬品調製用キャ
リヤーとして有用なものである。すなわち、該高分子化
合物（１）には２官能配位子化合物（Ｉ［［）部分が複
数個存在しており、これによって複数個の放射性金属元
素（Ｖ）を捕捉することが可能である。このように複数
個の放射性金属元素（Ｖ）を捕捉せしめた標識高分子化
合物はそれ自体放射性医薬品として使用される。

ここに放射性金属元素（Ｖ）としては、放射能を有する
金属元素であって、核医学的診断や治療に適した物理的
または化学的特性を有し、しかも２官能配位子化合物（
ＩＩＩ）の配位子構造により容易に捕捉されて安定なキ
レート錯体を形成し得るものが使用されてよい。その具
体例としては、診断の目的に供されるものとしてガリウ
ム−６７、ガリウム−６８、タリウム−２０１，インジ
ウム−１１１、テクネチウム−９９ｍなどが挙げられ、
治療の目的に供されるものとして銅−６７、イツトリウ
ム−９０，パラジウム−１（Ｌ９、レニウム−１８６な
どのベータ線放出核種、金−１９８、ビスマス−２１２
などのアルファ線核種などが挙げられる。これらは通常
、塩、特に水溶性塩の形で使用され、水性媒体中におい
て高分子化合物（１）と接触せしめてその標識化を行う
。ただし、放射性金属元素（Ｖ）が安定なキレート錯体
を形成しうる原子価状態にある場合には（たとえばガリ
ウム−６７、インジウム−Ｉｌｌ）、反応系に他の試剤
を存在せしめる必要はないが、安定なキレート錯体を形
成するために原子価状態を変化せしめる必要がある場合
には（たとえばテクネチウム−９９ｍ）、反応系に還元
剤または酸化剤を存在せしめる必要があろう。還元剤の
例としては、２価のスズ塩（たとえばハロゲン化スズ、
硫酸スズ、硝酸スズ、酢酸スズ、クエン酸スズ）が挙げ
られる。

たとえば、放射性金属元素（Ｖ）としてテクネチウム−
９９ｍを使用する場合、高分子化合物（１）を水性媒体
中還元剤としての第１スズ塩の存在下パーテクネテート
の形のテクネチウム−９９ｍと処理することによってテ
クネチウム−９９ｍ標識高分子化合物（１）を調製する
ことができる。上記調製に際し、各試剤の混合順序につ
いて格別の制限はないが、通常、水性媒質中で最初に第
１スズ塩とパーテクネテートを混合することは避けた方
が望ましい。第１スズ塩はバーテクネテートを充分に還
元出来る量で使用するのが好ましい。

このようにして得られた標識高分子化合物（１）が放射
性医薬品、たとえば放射性診断剤や放射性治療剤として
有用であるためには、診断や治療を可能とするに充分な
放射能と放射能濃度を有することが必要である。たとえ
ば放射性金属元素（Ｖ）としてテクネチウム−９９１を
使用する放射性診断剤の場合、投与時に約０．５〜５．
０ｍｌ！当たり０゜１〜５０ａＣｉの放射能濃度を有す
ることが望ましい。また、このような標識高分子化合物
（１）は調製後直ちに投与されてもよいが、好ましくは
調製後適当時間保存に耐えうる程度の安定性を有するこ
とが望ましい。

本発明高分子化合物（１）から成る放射性医薬品調製用
キャリヤーは溶液の形で保存されてもよいが、通常は凍
結乾燥法、低温減圧蒸発法などにより粉末状態に変換し
て保存され、用に臨み無菌水、生理食塩水、緩衝液など
に溶解される。必要に応じ、溶解補助剤（たとえば有機
溶媒）、Ｐ）［調節剤（たとえば酸、塩基、緩衝剤）、
安定剤（たとえばアスコルビン酸）、保存剤（たとえば
安息香酸ナトリウム）、等張剤（なとえば塩化ナトリウ
ム）などが配合されてもよい。また、前記のように放射
性金属元素（Ｖ）の原子価状態を調整するため、還元剤
や酸化剤が配合されてもよい。放射性医薬品調製用キャ
リヤーとしての用途に鑑み、これらの添加物はいずれも
医薬上許容され得るものであることを要する。

放射性医薬品調製用キャリヤーの量は最終的に製造され
る放射性医薬品の標識率が実用上支障のない程度に高く
なるような量であり、かつ薬剤掌上許容され得る範囲で
あることが必要である。

前記放射性医薬品調製用キャリヤーを使用して放射性医
薬品を調製するには、該放射性医薬品調製用キャリヤー
と必要に応じてこれに前記した添加物を配合して成る組
成物と前記した適宜の形態の放射性金属元素（Ｖ）を水
性媒体中で接触せしめればよい。通常は両者の内の少な
くとも一方を予め水溶液としたうえ、他方をそれに添加
する。接触させる放射性金属元素（Ｖ）の放射能は任意
であるが、核医学診断を実施する場合には、充分な情報
が得られるような放射能であり、かつ被検者の放射線被
曝を可能な限り低くするような放射能の範囲であること
が望ましい。他方、治療を目的とする場合には、治療効
果が充分得られるような放射能が必要であると共に、他
の正常臓器や組織への放射線被曝を可能な限り低くする
ような放射能の範囲であることが望ましい。

本発明の放射性医薬品をヒトに投与するには、通常、経
静脈的に行うが、該放射性医薬品中の生理活性物質（Ｉ
Ｖ）部分が投与後その活性を発現するのに適していたり
、有利である限り、特にこれに限定されるものではなく
、その他の適宜の方法が採用されてよい。

上記したところから明らかなように、本発明にかかる放
射性医薬品調製用キャリヤーは、放射性金属イオンを含
有する水溶液と接触させるという極めて簡単な方法によ
り、高比放射能の放射性医薬品を提供することが出来る
、しかも得られた放射性医薬品はそれを構成する生理活
性物質（■）部分に由来する生理活性をそのまま実質的
に保有する特徴を有する。

現在、放射性医薬品としては核医学診断を目的とするも
のだけでなく、治療を目的とするものも知られている。

治療用放射性医薬品の基礎原理は、放射線による疾患部
の細胞や組織の破壊作用に基づくものであって、その実
用例としては甲状腺腫に用いるヨード−１３１標識ヨー
化ナトリウム、腹部、胸部などの体腔の内表面の悪性腫
瘍に用いる金ｊ！９８コロイドなどがあり、半減期の比
較的短いベータ線放出核種が使われている。最近、モノ
クローナル抗体を始めとして、種々の癌病巣に特異的集
積が期待出来る生理活性物質が開発されるに従い、これ
らをベータ線やアルファ線放出核種、あるいは電子捕獲
、核異性体転移を行う核種で標識した放射性医薬品によ
る癌治療の可能性が示唆されている。本発明の高分子化
合物（１）は、このような治療目的に合致したものであ
り、特に１分子当たりに多数の放射性金属元素（Ｖ）を
結合することができるので、高放射能および高圧放射能
による効果的な治療を施し得る利点がある。

以下に実施例を示し、本発明をさらに具体的に説明する
。

実施例１ ヒト血清アルブミンージアルデヒドアミロースーデフェ
ロキサミン結合体の製造（１）：−デフェロキサミン（
以下、ＤＦＯと略す。）（１５ｍｇ）をｐＨ７，０の０
．０３Ｍリン酸緩衝液（１村）に溶解させ、これにトリ
エチルアミン（９９％溶液）（３，２μＱ）を加え、約
５分間室温で撹拌した。この溶液に、水に溶解したジア
ルデヒドアミロース（以下、ＤＡＡと略す。）２５ｘ９
／ｗＱ溶液（Ｉｚ（１）を加え、３０分間室温にて撹拌
した。この溶液をＡ液とする。別にヒト血清アルブミン
（１００ｉｙ）を０．０３Ｍリン酸緩衝液（ｌｘ＋２）
に溶解し、この溶液をＢ液とする。室温でＡ液（２ｘＱ
）をＢ液に加え、同じ温度で約６時間撹拌して反応させ
た。反応終了後、１Ｍ塩化ナトリウム溶液に対して室温
で２４時間透析したのち、０．０３Ｍリン酸緩衝液を溶
出剤としてセファクリル５２００（カラム：直径２　、
２　ａｍ、高さ５０ｃｍ）によるカラムクロマトグラフ
ィーを行った。この溶出液を凍結乾燥することにより、
放射性医薬品調製用キャリヤーとしてのヒト血清アルブ
ミン−ＤＡＡ−ＤＦ’Ｏ結合体を得た。

実施例２ ヒト血清アルプミンージアルデヒドアミロースーデフェ
ロキサミン結合体の製造（２）ニーＤＦＯ（１５１９）
を０．０３Ｍリン酸緩衝液（Ｉ　ｘＱ）に溶解させ、こ
れにトリエチルアミン（９９％溶液Ｘ３．２μｍ２）を
加え、約５分間室温で撹拌した。

この溶液に、水に溶解したＤ　Ａ　Ａ　２５　ｚ９／ｘ
Ｑ溶液（１１１２）を加え、３０分間室温にて撹拌した
。この溶液をＡ液とする。別にヒト血清アルブミン（！
００ｕ）を０．０３Ｍリン酸緩衝液（１ｘ＆）に溶解し
、これをＢ液とする。室温でＡ液（２３１１２）をＢ液
に加え、同じ温度で約６時間撹拌して反応させた。この
反応液に、水素化ホウ素ナトリウム（１，５ｍ９）を加
え、約１時間室温で撹拌しながら還元した。

反応終了後、１Ｍ塩化ナトリウム溶液に対して室温で２
４時間透析したのち、０．０３Ｍリン酸緩衝液を溶出剤
としてセファクリルＳ　２００（カラム：直径２　、２
　ｃｍ、高さ５０ｃｉ）によるカラムクロマトグラフィ
ーを行った。この溶出液を凍結乾燥することにより、放
射性医薬品調製用キャリヤーとしてのヒト血清アルブミ
ン−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体を得た。

上記結合体中のＤＦＯおよびヒト血清アルブミンをろ紙
電気泳動法により定量した。すなわち、前記還元反応終
了後の反応液（精製工程前の溶液）にクエン酸ガリウム
としてガリウム−６７１ｍＣ１を含む溶液を加えて標識
した。このガリウム−６７標識溶液を、展開液としてベ
ロナール緩衝液（ｐＨ８、６）、泳動膜としてセルロー
スアセテートを用いて電気泳動（３ＩＩＡ／Ｇｊ１．３
０分）を行なった後、ラジオクロマトスキャナーで走査
した。放射能のピークは、原線から正側１ｃｘ、負側１
．５ＣＲおよび負側３　、５　ａｍに認められ、それぞ
れガリウム−６７標識ヒト血清アルブミン−ＤＡＡ−Ｄ
ＦＯ結合体、ガリウム−６７標識ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体
およびガリウム−６７標識ＤＦＯと同定された。それぞ
れのピークの放射能値の比較から、本例で得られた前記
結合体中においてヒト血清アルブミン１分子当りのＤＦ
Ｏ分子数は１１．５個、ＤＡＡの分子数は０．９と算出
された。

Ｘ監鯉１ ヒト血清アルブミン−ジアルデヒドアミロース−３−オ
キソブチラールビス（Ｎ−メチルチオセミカルバゾン）
カルボン酸：ヘキサンジアミン縮合体結合体の製造ニー ３−オキソブチラールビス（Ｎ−メチルチオセミカルバ
ゾン）カルボン酸（以下、ＫＴＳと略す。）（ｔ３２ｏ
）を無水ジオキサン（５１１２）に溶解し、１０℃付近
に冷却したのち、トリーｎ−ブチルアミン（０，１２ｘ
（７）、更にイソブチルクロロホルメイト（６４μＱ）
を加え、同温度で約５０分間撹拌して、混合酸無水物溶
液を得た。別にＮ　−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル−１，６−ヘキサンジアミン（１０ｉ９）を無水ジオ
キサン（２ｘ１２）に溶解した溶液を調製し、この溶液
を上記混合酸無水物溶液に加え、１０℃付近で約１５時
間撹拌し、ＫＴＳ：　Ｎ　−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−！゛、６−ヘキサンジアミン縮合体を得た。

この縮合体溶液に濃塩酸（１〜２滴）を加えてＰＨ２と
することによりＮ　−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニ
ル基を離脱せしめ、ＫＴＳ：ヘキサンジアミン縮合体を
得た。

ＤＡＡ（８３ｏ）をジメチルスルホキシド（５酎）に溶
解し、この溶液に上記ＫＴＳ：ヘキサンジアミン縮合体
の溶液を加え、室温で約３時間反応させ、ＤＡＡ−ＫＴ
Ｓ：ヘキサンジアミン縮合体結合体溶液を得た。この溶
液（５ｙＩ（１＞をヒト血清アルブミン（５０３１９）
の０．０３Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７。

０Ｘ５０＊Ｑ）溶液に加え、室温で約３時間撹拌して反
応させた。この反応液に、水素化ホウ素ナトリウムＣ１
２，９Ｍ９）を加え、約１時間撹拌を続けた。反応終了
後、反応−を通常の透析チューブに入れ、０．０３Ｍリ
ン酸緩衝液に対して一夜透析を行なった。透析後、０．
０３Ｍリン酸緩衝液を溶出剤としてセファクリル６２０
０（カラム：直径２．２ｃｍ、５０．０ｃｍ）によるカ
ラムクロマトグラフィーを行った。この溶液を凍結乾燥
することにより、放射性医薬品調製用キャリヤーとして
のヒト血清アルブミン−ＤＡＡ−ＫＴＳ：ヘキサンジア
ミン縮合体結合体を得た。

実施例４ アンチミオシン抗体断片Ｆａｂ−ジアルデヒドアミロー
スーデフエロキサミン結合体の製造ニーアンチミオシン
抗体断片Ｆａｂの０．９％塩化ナトリウム水溶液（８，
１１９／酎）（１ｘｉ２）に、ＤＡＡの０．０３Ｍリン
酸緩衝液溶液（９、５ｘｆ／ＩＩＱＸ０　。

２１１１２）を加え、３０分間室温にて撹拌した。この
溶液をＡ液とする。別にＤＦＯ（３０友ｇ）を水（ｌｘ
Ｑ）に溶解し、これにトリエチルアミン（約９９％溶液
）（１２μｅ）を加え、約５分間室温で撹拌した。

この溶液をＢ液とする。室温でＡ液にＢ液（０，３１１
ｇ）を加え、同じ温度で約４時間撹拌して反応させた。

この反応液に、水素化ホウ素ナトリウム（２，５１１Ｉ
ｇ）を加え、約１時間室温で撹拌しながら還元した。反
応終了後、１Ｍ塩化ナトリウム−０，５％グルコース溶
液に対して室温で２４時間透析した後、０．０３Ｍリン
酸緩衝液を溶出剤としてＴＳＫ３０００ＳＷ（カラム・
直径０．７５ｃ献高さ６０ｃｍ）による高速液体クロマ
トグラフィーを行い、放射性医薬品調製用キャリヤーと
してのアンチミオシン抗体断片Ｆａｂ−ＤＡＡ−ＤＦＯ
結合体を含む溶液を得た。

実施例５ ヒトフィブリノーゲンージアルデヒドアミロースーデフ
ェロキサミン結合体の製造ニーヒトフィブリノーゲン（
２０１１ｇ）を０．０３Ｍリン酸緩衝液（２３＋のに溶
解させ、これに濃度１０ｘｇ／ＲＱのＤＡＡ溶液（６０
μＱ）を加え、約３０分間室温で撹拌した。この溶液を
Ａ液とする。別にＤＦＯ（６８１９）を水（１，ｘＱ）
に溶解し、トリエチルアミン（９９％溶液）（＋７．５
μＱ）を加え、室温で５分間反応させた。この溶液をＢ
液とする。Ａ液にＢ液（８８μａ）を加え、室温で５時
間撹拌して反応させた。この反応液に水素化ホウ素ナト
リウム（１ｏ）を加え、約１時間室温で撹拌しながら還
元した。反応終了後、１Ｍ塩化ナトリウム−０，５％グ
ルコース溶液に対して２４時間透升したのち、０．０３
Ｍリン酸緩衝液を溶出剤としてＴＳＫ４０００Ｓ　Ｗ（
カラム：直径０．７５ｃｘ、高さ６０ＣｊＩ）による高
速液体クロマトグラフィーを行い、放射性医薬品調製用
キャリヤー（ヒトフィブリノーゲン−ＤＡＡ−ＤＦＯ結
合体）を得た。

笈籠鯉ｉ ヒトフィブリノーゲンージアルデヒドデキストランーデ
フェロキサミン結合体の製造ニージアルデヒドデキスト
ラン（以下、ＣＡＤと略す。Ｘ１２７ｚｇ）を０．０１
Ｍリン酸緩衝液−０，１５Ｍ塩化ナトリウム水溶液（５
ｙＩＱ＞に溶かし、これにＤＦＯ（３７０ｏ）を溶解さ
せた。トリエチルアミン（７８，９μｍ２）を加えた後
、１０〜１５℃で２０分間撹拌した。ヒトフィブリノー
ゲン（４００ｍ９）を０．０１Ｍリン酸緩衝液−０，１
５Ｍ塩化ナトリウム水溶、液（４０ｘｆ２）に溶解させ
、これに上記溶液を加え、１０〜１５℃で２時間撹拌し
た。この反応混合物に水素化ホウ素ナトリウム（１２，
３ｏ）を加え、１０〜１５℃に１時間撹拌した。その反
応混合物を０〜４℃で０．０１Ｍグルコース−０゜３５
Ｍクエン酸ナトリウム水溶液に対し３日間にわたり透析
を行い、次いで同溶液を溶出剤としてセファロースＣＬ
６Ｂ（カラム：直径４　、４　ａｍ、高さ１００　ＣＩ
）によるカラムクロマトグラフィーを行った。溶出液を
０．０１Ｍグルコース−０，３５Ｍクエン酸ナトリウム
水溶液で希釈してヒトフィブリノーゲン濃度Ｉ貢９７Ｒ
（ｌとし、アスコルビン酸ナトリウムを加えて３０ｍＭ
に調節した。得られた溶液３＊Ｑをバイアルに入れ、凍
結乾燥を行うことにより、放射性医薬品調製用キャリヤ
ーとしてのヒトフィブリノーゲン−ＤＡＤ−ＤＦＯ結合
体を得た。

参考例１ ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７
標識ヒト血清アルブミン一ジアルデヒドアミロースーデ
フエロキサミン結合体）の製造ニー実施例２の方法によ
って製造された放射性医薬品調製用キャリヤー（ヒト血
清アルブミン−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体）にクエン酸ガリ
ウムとして、ガリウム−６７１ｍＣ１を含む溶液（１＊
Ｉ２）を加えて、ガリウム−６７標識つき放射性医薬品
（ガリウム−６７標識ヒト血清アルブミン−ＤＡＡ−Ｄ
ＦＯ結合体）を得た。本例で得られたガリウム−６７標
識つき放射性医薬品は、ごく薄い淡黄色の澄明な溶液で
あり、ｐＨは約７．０である。

このガリウム−６７標識つき放射性医薬品について、実
施例２で説明した電気泳動を行なった。

放射能は原線から正側に１ｃｍの場所に単一ピークとし
て検出され、かつ、この放射能ピークの位置はボンソー
３Ｒによるヒト血清アルブミンの発色バンドと一致した
。この結果から、上記ガリウム−６７標識つき放射性医
薬品の標識率は、はぼ１００％であり、かつその電荷状
態についてもヒト血清アルブミンと差異を認めなかった
。

また、上記ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（０，
２１１２）をとり、複数のＳ、Ｄ、系雌ラットに静脈内
投与し、血中濃度の経時変化および体内分布挙動を調べ
た。投与直後からの各測定時間における取り込み率を第
１表に示す。

体内分布の様相は、従来のヨード−１３１標識ヒト血清
アルブミンのそれとほぼ同様であった。

ただし、血中濃度の減衰速度は、ヨード−１３１標識ヒ
ト血清アルブミンの方が本例のガリウム−６７標識つき
放射性医薬品よりかなり大きいことが示された。

参考例２ テクネチウム−９９ｍ＋標識つき放射性医薬品（テクネ
チウム−９９ｓｌｉｌ識ヒト血清アルブミン−ジアルデ
ヒドアミロース−３−オキソブチラールビス（Ｎ−メチ
ルチオセミカルバゾン）カルボン酸：ヘキサンジアミン
縮合体結合体）の製造ニー実施例３の方法によって製造
された放射性医薬品調製用キャリヤー（ヒト血清アルブ
ミン−ＤＡＡ−ＫＴＳ：ヘキサンジアミン縮合体結合体
）０００１９）を、窒素ガスを吹き込んで溶存酸素を除
去した水（１６０ｍ（２）に溶解し、１ｙＭ塩化第一ス
ズ溶液（１０１１１２）、さらにアスコルビン酸ナトリ
ウム（０，６ｙ）を加え、完全に溶解させた。この溶液
（１、５１１（２）に過テクネチウム酸ナトリウムとじ
てテクネチウム−９９ｍ　３．３ｍＣ１を含む生理食塩
水（ｊ　、　５　ｙｔ１２）を加えて、テクネチウム−
〇９ｎ＋標識つき放射性医薬品（テクネチウム−９９＋
標識ヒト血清アルブミン−ＤＡＡ−ＫＴＳ：ヘキサンジ
アミン縮合体結合体）を得た。本例で得られたテクネチ
ウム−９９ｍ標識つき放射性医薬品は、ごく薄い淡黄色
の澄明な液体である。

１イ鯉ｌ ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７
標識アンチミオシン抗体断片Ｐａｂ−ジアルデヒドアミ
ロースーデフェロキサミン結合体）の製造ニー 実施例４の方法によって製造された放射性医薬品調製用
キャリヤー（アンチミオシン抗体断片Ｐａｂ−ＤＡＡ−
ＤＦＯ結合体）の溶液（約１　ｉｙ／ｘ１２）（１１１
２）にクエン酸ガリウムとしてガリウム−６７１ｓ＋ｃ
ｉを含む溶液（１ｊｌ１２）を加えて、ガリウム−６７
標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７標識アンチミオ
シン抗体断片Ｆ、ａｂ−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体）を得た
。

このガリウム−６７標識つき放射性医薬品について、実
施例２で説明した電気泳動を行った。放射能は原線から
負側に１　、５　ａｍの場所に単一ピークとして検出さ
れ、かつ、この放射能ピークの位置はボンソー３Ｒによ
るアンチミオシン抗体断片Ｆａｂの発色バンドと一致し
た。

また、上記ガリウム−６７標識つき放射性医薬品に０．
０３Ｍリン酸緩衝液を加えて稀釈し、アンチミオシン抗
体断片Ｆａｂ濃度が０．０５μ９／Ｉｔ（１になるよう
に調製した。次にこの希釈溶液（１ｘｆｆ）に濃度５０
μｙ／ｍ（ｌのミオシン溶液（抗原Ｘ０　、１５　ｚ（
２）を加えて、室温で１．５時間反応させた。その後コ
ノ反応溶液（０，３ｘｅ）？＝濃度７　、５　ｍｙ／ｍ
Ｑ（Ｄヒトフィブリノーゲン溶液（０，１ｊｌ１２）を
加え、穏やかに振とうしたのち、放射能を測定した。更
にこの溶液に１８％ポリエチレングリコール溶液（０、
３ｙｚ（１）を加え、１０秒間撹拌したのち、４℃で毎
分４０００回転の遠心分離操作を２０分間行った。沈渣
を３回洗浄したのち、放射能を測定した。両者の放射能
の比から結合定数：Ｋａ＝２．５ＸｌＯ”Ｍ−１を得た
。インジウム−１１１をアンチミオシン抗体断片Ｆａｂ
にジエチレ゛ントリアミン五酢酸を介して直接標識した
ときの結合定数は２Ｘ１０”Ｍ−１であるから、本島は
十分な生理活性を保持していることが確認された。

参考例４ ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７
標識ヒトフイブリノ一ゲンージアルデヒドアミロースー
デフエロキサミン結合体）の製造ニー実施例５の方法に
よって製造された放射性医薬品調製用キャリヤー（ヒト
フィブリノーゲン−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体Ｘｌ＊（２）
にクエン酸ガリウムとしてガリウム−６７１ａＣｉを含
む溶液（１ｚＱ）を加えて、ガリウム−６７標識つき放
射性医薬品（ガリウム−６７標識ヒトフィブリノーゲン
−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体）を得た。

このガリウム−６７標識つき放射性医薬品について、実
施例２で説明した電気泳動を行った。放射能は原線から
負側に０．５ｃｍの場所に単一ピークとして検出され、
かつ、この放射能ピークの位置はポンプ−３Ｒによるヒ
トフィブリノーゲンの発色バンドと一致した。

また、上記ガリウム−６７標識つき放射性医薬品に０．
０５％塩化カルシウムを含む０．１Ｍジエチルバルビッ
ール酸ナトリウム−塩酸緩衝液（ｐＨ７，３）を加え、
ヒトフィブリノーゲン濃度としてｌ肩９／耐になるよう
に調製した。さらにこの溶液にｌ　ＯＯｕｎｉｔ／ｘ１
２のトロンビン（０，１ｔｆ２）を加え、水浴中で３０
分間放置した。生成したフィブリン凝固を完全に除去後
、フィブリン凝塊とフィブリン凝固を除去した液中の放
射能を計数することにより本例のガリウム−６７標識つ
き放射性医薬品の凝固能を測定した結果、出発物質であ
るヒトフィブリノーゲンに対して８０％の凝固能を示し
た。・これはデフェロキサミンを結合し−たジアルデヒ
ドデンプンを高分子化合物として用いたときのヒトフィ
ブリノーゲン（特開昭第５９−１０６４２５号明細書）
と同等か、あるいはそれ以上の生理活性度を有すること
を意味する。

参考例５ ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７
標識ヒト血清アルブミン一ジアルデヒドアミロースーデ
フエロキサミン結合体）の製造ニー実施例２で製造され
た放射性医薬品調製用キャリヤー（ヒト血清アルブミン
−ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体）を注射用蒸留水に溶解させ、
クエン酸ガリウムとしてガリウム−６７１ｍＣ１を含む
溶液（ｌ村）を加え、室温にて１時間放置してガリウム
−６７標識つき放射性医薬品（試料りを得た。また、従
来法によりヒト血清アルブミンとＤＦＯを直接結合させ
、ここに得られた放射性医薬品調製用キャリヤーにガリ
ウム−６７を結合させてガリウム−６７標識つき放射性
医薬品（試料２）を得た。これら試料ｌおよび試料２に
ついて参考例１に記載した方法に従って標識率を測定し
た。結果を第２表示す。

第２表の結果から、本発明のキャリヤー（試料Ｉ）は、
ヒト血清アルブミン（０，５２Ｄ）を使用した場合、実
用的な標識時間である１時間において１ｍＣ１のガリウ
ム−６７を１００％標識し得るのに対し、従来法による
キャリヤーは同様の条件下では１５％しか標識し得ず、
１００％の標識率を得るにはヒト血清アルブミン（３，
５ｚｙ）を必要とすることが理解出来る。

なお、前記のごとく製造されたガリウム−６７標識つき
放射性医薬品を、放射能を適度に減衰させた後、Ｓ、Ｄ
、系雌雄うット各５匹の各群に対し体重１００ｇ当たり
０　、１　ｘＱ、ｃ予定人体投与量の６０倍に相当）静
脈内投与し、各動物の観察を行ったが、解剖後の各臓器
の検査結果を含め何等の異常も認めなかった。

１４鯉ｉ ガリウム−６７標識つき放射性医薬品（ガリウム−６７
標識ヒトフイブリノ一ゲンージアルデヒドデキストラン
ーデフエロキサミン結合体）の製造ニー 実施例６の方法によって製造された放射性医薬品調製用
キャリヤー（ヒトフィブリノーゲン−ＤＡＤ−ＤＦＯ結
合体）にクエン酸ガリウムとしてガリウム−６７２ｍＣ
１を含む溶液（２村）を加えて、ガリウム−６７標識つ
き放射性医薬品（ガリウム−６７標識ヒトフィブリノー
ゲン−ＤＡＤ−ＤＦＯ結合体）を得た。この溶液は淡黄
色透明であって、ｐＨ７，８を示した。

このガリウム−６７標識つき放射性医薬品について、実
施例２で説明した電気泳動を行った。放射能は原線から
負側に０　、５　Ｃｍの場所に単一ピークとして検出さ
れ、かつ、この放射能ピークの位置はボンソー３Ｒによ
るヒトフィブリノーゲンの発色バンドと一致した。この
結果から、上記ガリウム−６７標識つき放射性医薬品の
標識率は、はぼ１００％であり、かつその電荷状態につ
いてもヒトフィブリノーゲンと差異を認めなかった。

上記ガリウム−６７１！ｉｔ識っき放射性医薬品に塩化
カルシウム０．０５％を含む０．１Ｍジエチルバルビッ
ール酸ナトリウム塩酸塩緩衝液（ｐＨ７，３）を加えて
フィブリノーゲン濃度をｌｘｙ／ｘ（ｌとした。

トロンビン（ｌ　ＯＯｕｎｉｔ／ｚ（２Ｘ　０　、１　
ｘＱ）を加え、水浴中に３０分間放置した。生成したフ
ィブリン凝固を完全に除去後、フィブリン凝塊とフィブ
リン凝固を除去した液中の放射能を計数することにより
本例のガリウム−６７標識つき放射性医薬品の凝固能を
測定した結果、出発物質であるヒトフィブリノーゲンに
対して８４％の凝固能を示した。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、分子中に少なくとも３個のホルミル基を有するポリ
   サッカライド誘導体（ただし、ジアルデヒドデンプンを
   除く。）に対しアミノ基含有２官能配位子化合物とアミ
   ノ基含有生理活性物質が前記ポリサッカライド誘導体１
   分子当たり前記２官能配位子化合物少なくとも２分子と
   前記生理活性物質少なくとも１分子の割合でメチレンイ
   ミン結合（−ＣＨ＝Ｎ−）またはメチレンアミン結合（
   −ＣＨ＿２ＮＨ−）を介して結合して成る高分子化合物
   。