JPS60192703A - 少なくとも１個の遊離ホルミル基を有する高分子化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は少なくとも１個の遊離ポルミル基を有４−る高
分子化合物、特にホルミル基含有ボリザッカライト誘導
体とアミノ基含有２官能配位子化合物が結合して成る、
少なくとも１個の遊離ポルミル基を有する高分子化合物
に関する。

本発明の高分子化合物は文献未載の新規物質であり、特
定臓器の描出、特定疾患の検出、生理活性物質の動態検
査、疾病の治療などの核医学的用途に適した、安定な放
射性金属元素標識つき放射性医薬品を提供することが出
来るものである。

特定臓器の描出、特定疾患の検出、動態検査などを目的
とした非侵襲的核医学診断のために、従来ヨード−１３
１で標識された生理活性物質が汎用されてきた。たとえ
ば、血液循環系の描出や動態検査に用いられるヨード−
１３１標識ヒト血清アルブミン、血栓の検出に用いられ
るヨード−１３１標識フイブリノーゲンなどが挙げられ
る。しかしながら、ヨード−１３１は半減期が約８日と
長く、かつ、核医学診断に有用なガンマ−線の他に、ベ
ータ線を放出するため、被検者に多量の放射線被曝を与
える欠点がある。

そこで核医学診断により適した物理的特性を有する放射
性金属を、他の方法により生理活性物質に導入し、有用
な放射性診断剤を得ようとする試みが続けられている。

たとえば、生理活性物質に直接、放射性金属塩を作用さ
せる標識法で得られるものとして、テクネチウム−９９
’ｍ標識ヒト血清アルブミン、インジウム−Ｉｌｌ標識
プレオマイシンなどが知られている。さらにジエチレン
トリアミン五酢酸（Ｄ’ｒＰＡ）、３−オキソブチラー
ルビス（Ｎ−メチルチオセミカルバゾン）カルボン酸、
デフエロキザミンなどの２官能配位子化合物の各種金属
に対する強いキレート形成能と、それらの化合物末端の
アミノ基およびカルボキシル基の種々の生理活性物質に
対する反応性に基づいて、これら２官能配位子化合物を
介して放射性金属および生理活性物質を結合させる方法
も提案されている。

これらの方法で得られた標識化合物は比較的安定であり
、しかも生理活性物質の活性を保持しているので、核医
学診断目的に非常に興味ある薬剤である。しかしながら
、これらの方法によって得られた放射性診断剤は、分子
量の大きい生理活性物質、たとえば血栓診断やガン診断
に使用されるそれぞれ分子量約３４万のフィブリノーゲ
ンや分子量約１６万のＩｇＧを用いた場合、診断に必要
な高比放射能のものが得られない欠点がある。

本発明者らは、この欠点を解決すべく種々研究を重ねた
結果、先にジアルデヒドデンプンにアミノ基含有２官能
配位子化合物とアミノ基含有生理活性物質が結合した高
分子化合物を開発することに成功した（特開昭５９−１
０５００２号明細書および特開昭５９−１０６４２５号
明細書参照）。この高分子化合物は、１分子当たり多数
の配位子をもつものであり、このことはとりも直さず１
分子当たりに結合する放射性金属イオンの数が従来の２
官能配位子化合物に比して格段に多いことを意味する。

そしてこの高分子化合物を使用することにより、生理活
性物質の変性および活性低下を来すことなく高比放射能
の放射性診断剤が得られる事実が見出だされた。

上記の知見に乱づいて更に研究を進めた結果、ジアルデ
ヒドデンプンに代えて他のホルミル基含有ポリサッカラ
イド誘導体を使用しても同様に生理活性物質の変性や活
性低下を起こすことなく高比放射能の放射性医薬品が得
られる事実が見出だされた。一般にジアルデヒドデンプ
ンは分子量分布が広く、網状構造を有するので、その繰
り返し構造の数はどには２官能配位子化合物が効果的に
結合しにくい傾向が認められるが、ノアルデヒドアミロ
ースのように分子量分布が狭くかつ直鎖構造を存するも
のを使用すれば多数の２官能配位子化合物を効果的に結
合することが出来る。

本発明は以上の知見に基づいて完成されたものであって
、その要旨は分子中に少なくとも３個のポルミル基を有
するポリサッカライド誘導体（ただし、ジアルデヒドデ
ンプンを除く。）（■）とアミノ基含有２官能配位子化
合物（Ｉ）が前者１分子当たり後者少なくとも２分子の
割合においてメチレンアミン結合（−ＣＨ＝Ｎ−）また
はメチレンアミン結合（−ＣＨ，ＮＨ−）を介して結合
して成る少なくとも１個の遊離ホルミル基を有する高分
子化合物（１）に存する。

本発明の目的とする上記高分子化合物（Ｉ）はポリサッ
カライド誘導体（ＩＩ）と２官能配位子化合物（ＩＩＩ
）が結合して構成されたものである。

ポリサッカライド誘導体（ＩＩ）は分子中に少なくとも
３個のホルミル基を持つことが必要であり、ホルミル基
の数が多いほど好ましい。それらのホルミル基のうち少
なくとも２個は２官能配位子化合物（Ｉ）との結合に役
立つものであり、他の少なくとも１個は高分子化合物（
１）において遊離のまま残留し、後に高分子化合物（１
）に生理活性物質（■）を結合させるのに役立つ。

ポリサッカライド誘導体（ＩＩ）としては、たとえば適
宜に置換されていることもあるポリサッカライドを酸化
剤（たとえば過ヨード酸ナトリウム）で処理して得られ
る、原則としてサツカライド単位毎に１個または２個の
ポルミル基を有するものが使用されうる。ポリサッカラ
イドとしては、オリゴザツカライドでもよいが、本発明
の目的から理解されるようにペント−サン、ヘキソ−サ
ン、ポリグルコザミン、ポリウロン酸、グリコザミノグ
リカン、グリコウロノグリカン、ヘテロヘキソ−サンな
ど高次のポリサッカライドが好ましい。具体例としては
、アミロース、アミロペクチン、デキストラン、セルロ
ース、イヌリン、ペクチン酸、プルランなどが挙げられ
、それらの混合物や脱水綜合物であってもよい。一般に
サツカライド単位が３０００以下、特に１０００以下の
ものが望ましい。

２官能間位子化合物（１）としては、放射性金属元素（
Ｖ）に対し強固なキレート結合を形成し、かつ比較的緩
和な条件下でポリサッカライド誘導体（ＩＩ）のポルミ
ル基と反応し得るアミノ基を有するものが使用される。

このような２官能間位子化合物（ｉｌｌ）の具体例とし
てはデフエロキサミン（メルク・インデックス、第９版
、３７４頁（１９７６年））、式：％式％ （式中、ＬＬ’およびＲ２それぞれ水素、Ｃｌ−Ｃ５ア
ルキルまたはフェニルを表す。）で表される３−アミノ
メチレン−２，４−ペンタンジオン−ビス（チオセミカ
ルバゾン）誘導体（ヨーロッパ特許出願第５４９２０号
明細書）、式： （式中、Ｒ３およびＲ４はそれぞれ水素またはＣＩ〜Ｃ
３アルキル、ｎは０〜３の整数を表す。）で表される１
−（ｐ−アミノアルキル）フェニルプロパン−１，２−
ジオン−ビス（チオセミカルバゾン）誘導体（オースト
ラリア特許第５３３７２２号明細書）などが挙げられる
。

そのもの自体はアミノ基を有していなくても容易にアミ
ノ基またはアミノ基含有構造を形成し得る基または構造
を有している場合は、放射性金属元素を捕捉する性質を
有する限り、このものもまたアミノ基またはアミノ基含
有構造を形成せしめたうえで、２官能間位子化合物（Ｉ
ＩＩ）として使用し得る。たとえば、カルボキシル基を
有するものは、これにアルキレンジアミンを反応させる
ことによって容易にアミノ基を導入することが出来、本
発明において２官能間位子化合物（１）の１種として使
用することが出来る。このような２官能間位子化合物（
ＩＩＩ　）の具体例としては、ジエチレントリアミン五
酢酸（＋）′ｒ　Ｐ　Ａ）、エチレンジアミン四酢酸（
Ｅ［）ＴＡ）、ジメルカプトアセチルエチレンジアミン
（Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇら　Ｊ　、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、
、２３，９１７（１，９８２））およびビスアミノエタ
ンチオール（Ｆ　ｒｉｔｚｂｃｒｇら；Ｊ　、Ｎｕｃｌ
、Ｍｅｄ、、２５，９１６（１９８４））に代表される
Ｎ２５２リガンド、ザイクラン（１（ｅｉｒｉｎｇら　
Ｊ、ＮｕｃｌＭｅｄ、、　２３，９１７（１９ｇ２））
に代表されるＮ４リガンド、Ｎ、Ｎ’−ビス（２−ヒド
ロキシエチル）エチレンジアミン（Ｗａｇｎｅｒ　Ｊ　
ｒ、ら：　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅｌ　
ｎｔｅｒｎａＬｉｏｎａｌ　Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ　ｏｎ
　Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ　ｉｎＣｈｅｍｉｓＬｒｙ　ａ
ｎｄ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、　Ｐａｄｏ
ｖａ。

Ｉ　ｔａｌｙ、　１６１頁（１９８２））に代表される
Ｎ２Ｏ２リガンド、式 ％式％ （式中、Ｒ５、Ｒ８、Ｒ７、Ｒ８およびＲ８は水素また
はＣ３〜Ｃ，アルキル）で表される２−プロピオンアル
デヒド−ビス（チオセミカルバゾン）誘導体（アメリカ
特許第４２８７３６２号明細書）などが挙げられる。

高分子化合物（１）を製造するには、たとえばポリサッ
カライド誘導体（［１）と２官能間位子化合物（ＩＩＩ
）を縮合させてＩｉη者のポルミル基き後者のアミノ基
の間でメチレンイミン結合を形成せしめ、必要に応じこ
のメチレンイミン結合を還元してメチレンアミン結合に
変換すればよい。上記縮合反応はホルミル基とアミノ基
を縮合させるために採用される自体常套の手段で行えば
よく、上記還元反応もメチレンイミン結合をメチレンア
ミン結合に変換するてめに採用されている自体常套の手
段、たとえば、は水素化ホウ素ナトリウムのような金属
水素化物を使用することにより行なわれる。上記還元反
応に際し、サツカライド単位中のホルミル基が一部還元
された化合物が副生ずることがあるが、これによって本
発明の目的が妨げられることはない。反応試剤、反応条
件などの相違によりポリザラカライド誘導体（■月分子
に結合する２官能配位子化合物ＣＩＩＩ）の分子数は異
なるが、一般には５またはそれ以上、特に１０またはそ
れ以上が好ましい。ただし、この反応で得られた高分子
化合物（１）のポリサッカライ誘導体（ＩＩ）部分にお
ける少なくとも１個のホルミル基は生理活性物質（１■
）との結合のため遊離のまま残留すべきである。

ポリザラカライド誘導体（ＩＩ）としてアミロース由来
のものを使用する場合を例に挙げて高分子化合物（Ｉ）
の製造を式で示せば次の通りである：（Ｉｌａ） ”　ＣＨｔＯＨＣＨｔＯＨ ＩＩ Ｎ ＩＩ 　Ｘ ↓ １ Ｎｌ−Ｉ　ＮＨ １ Ｘ （式中、Ｘは２官能配位子化合物（ＩＩＩ）からアミノ
基を除去した残基、Ｙは−ＣＨＯまたは−ＣＨ２０ｆ（
、ｐは２−１０００の整数、ｑ、　ｒＳｓおよびｔはそ
れぞれ０〜１０００の整数を表す。ただし、ｑ　＋　ｒ
　−１−ｓ　＋　Ｌは２〜１０００の整数である。）。

なお、」二式においてジアルデヒドアミロース（■ａ）
はアミロースを原料とし、これを過ヨード酸のような酸
化剤で部分的あるいは全体的に酸化することにより得ら
れる鎖状高分子物質であって、それ自体市販されている
。そのサツカライド単位は通常２〜１０００であり、特
に２〜５００か好ましい。　、：１ ここに生成した高分子化香物（１）は、必要に応じ、高
分子物質に適用されるカラムクロマトグラフィー、ゲル
ろ適法、透析法などの常套の精製法により精製されても
よい。

本発明の高分子化合物（Ｉ）は、その分子中に少なくと
も１個の遊離ホルミル基が存在するから、そのホルミル
基を介してアミノ基を有する生理活性物質（ＩＶ）と結
合し、放射性医薬品調製用キャリヤーを提供することが
出来る。ここで言う生理活性物質とは、適当な器官また
は組織あるいは特定の病巣に蓄積するか、特定の生理状
態に対応して特異な挙動を示す物質を意味し、生体内に
おけるこのような物質の挙動を追跡することによって診
断上有用な情報を得ることが出来るものである。

生理活性物質は一般にそれ自体でアミノ基を有している
ものが多いが、そのような生理活性物質はもとより、そ
れ自体ではアミノ基を有していないものであっても、こ
れに適宜の方法でアミノ基またはアミノ基含有構造を導
入したものを使用することが出来る。ポルミル基とアミ
ノ基の間の反応は比較的緩和な条件下で進行するから、
本発明において何列に利用することが出来る。

生理活性物質（ＩＶ）の具体例としては、血液蛋白質（
たとえばヒト血清アルブミン、フィブリノーゲン）、酵
素（たとえばウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ）、ホ
ルモン（たとえば甲状腺刺激ホルモン、副甲状腺ホルモ
ン）、免疫抗体（たとえばＩｇＧおよびその断片のＦ　
（ａｈ）、’、Ｆａｂ’、Ｐ　ａｂ）、モノクローナル
抗体、抗生物質（たとえばプレオマイノン、カナマイツ
ン）、糖類、脂肪酸、アミノ酸などが挙げられる。

本発明の高分子化合物（Ｉ）に対して生理活性物ｆｆ（
ＩＶ）を結合ｌしめるには、たとえば高分子化合物（１
）と生理活性物質（ＩＶ）を縮合させて面者のポルミル
基と後者のアミノ基の間でメチレンイミン結合を形成せ
しめ、必要に応じこのメチレンイミン結合を還元してメ
チレンアミン結合に変換すればよい。上記縮合反応も還
元反応も共に自体常套の方法で行えばよい。高分子化合
物（１）の１分子当たり導入される生理活性物質の分子
数は、反応試剤、反応条件などによって異なるが、通常
は１０またはそれ以下、特に３またはそれ以下が好まし
い。

ここに生成した高分子化合物（１）と生理活性物質（Ｉ
Ｖ）の結合体は必要に応じ高分子物質に適用されるカラ
ムクロマトグラフィー、ゲルろ適法、透析法などの常套
の精製法により精製されてもよい。

この高分子化合物（１）−生理活性物質（ＩＶ）結合体
は、前記のように放射性医薬品調製用キャリヤーとして
有用なものである。ずなイつち、該結合体には高分子化
合物（１）の部分に２官能配位子化合物（ＩＩＩ）が複
数個存在しており、これによって複数個の放射性金属元
素（Ｖ）を捕捉するごとが可能であり、このように複数
個の放射性金属元素（Ｖ）を捕捉せしめた結合体はそれ
自体放射性医薬品として使用されうる。

ここに放射性金属元素（Ｖ）としては、放射能を有する
金属元素であって、核医学的診断や治療に適した物理的
または化学的特性を有し、しかも２官能配位子化合物（
ＩＩＩ）の配位子構造により容易に捕捉されうる乙のが
使用される。その具体例としては、ガリウム−６７、ガ
リウノ、−６８、タリウム−２０１、インジウムーＩｌ
１１テクネチウム＝９９ｍなどがあり、これらは通常、
塩、特に水溶性塩の形で使用され、水性媒体中において
高分子化合物（１）−生理活性物質（ＩＶ）結合体と接
触せしめてその標識化を行う。ただし、放射性金属元素
（Ｖ）が安定なキレート錯体を形成しうる原子価状態に
ある場合には（たとえばガリウム−６７、インジウム−
１１１）、反応系に他の試剤を存在せしめる必要はない
が、安定なキレート錯体を形成するために原子価状態を
変化せしめる必要がある場合には（）ことえばテクネチ
ウム−９９ｍ）、反応系に還元剤または酸化剤を存在せ
しめる必要／Ｊ’あろう。還元剤の例としては、２価の
スズ塩（たとえばハロゲン化スズ、硫酸スズ、硝酸スズ
、酢酸スズ、クエン酸スズ）が挙げられる。

たとえば、放射性金属元素（Ｖ）とし゛ζテクネチウム
ー９９ｍを使用する場合、高分子化合物（１）−生理活
性物質（ＩＶ）結合体を水性媒体中還元剤としての第１
スズ塩の存在下パーテクネテートの形のテクネチウム−
９９ｍと処理することによってテクネチウムー９９ｍ標
識高分子化合物（１）−生理活性物質（ＩＶ）結合体を
調製することができる。

上記調製に際し、各試剤の混合順序について格別の制限
はないが、通常、水性媒質中で最初に第１スズ塩とパー
テクネテートを混合することは避けた方が望ましい。第
１スズ塩はパーテクネテートを充分に還元出来る量で使
用するのが好ましい。

このようにして得られた標識高分子化合物（１）−生理
活性物質（ＩＶ）結合体が放射性診断剤として有用であ
るためには、診断を可能とする充分な放射能と放射能濃
度を有することが必要である。たとえば放射性金属元素
としてテクネチウム−９９ｍを使用した場合、投与時に
約０．５〜５．０好当たり０．１〜５０ｍＣ１の放射能
濃度を有することが望ましい。また、このような標識高
分子化合物（１）−生理活性物質（ＩＶ）結合体は調製
後直ちに投与されてもよいが、好ましくは調製後適当時
間保存に耐えうる程度の安定性を有することが望ましい
。なおまた、標識高分子化合物（１）−生理活性物質（
ＩＶ）結合体には、必要に応じｉ）Ｈ調節剤（たとえば
酸、塩基、緩衝剤）、安定剤（たとえばアスコルビン酸
）、等張剤（たとえば塩化ナトリウム）などが配合され
てもよい。

本発明高分子化合物（Ｉ）を用いて得られた放射性医薬
品の一例をポリザラカライド誘導体（１１）としてジア
ルデヒドアミロニス、２官能配位子化合物（ＩＩＩ）と
してデフェロキサミン、生理活性物質（ＩＶ）としてヒ
）・血清アルブミン、放射性金属元素（Ｖ）としてガリ
ウム−６７を使用する場合につき説明すれば次の通りで
ある。

まず、ジアルデヒドアミロースをデフエロキザミンと縮
合させた後、必要に応じて還元することによりジアルデ
ヒドアミロースーデフェロキサミン結合体を調製し、こ
の結合体にヒト血清アルブミンを縮合させた後、必要に
応じて還元することによりヒト血清アルブミン−ジアル
デヒドアミロースーデフェロキサミン結合体を得る。こ
の結合体と３価のガリウムイオンの形でガリウム−６７
を含む水溶液を接触させることにより、安定で高比放射
能のガリウム−６７標識ヒト血清アルブミンージアルデ
ヒドアミロ−スーデフェロキサミン結合体を得る。

この標識結合体の電気泳動的挙動は、ヒト血清アルブミ
ンの挙動と全く同じである。また、この標識結合体のラ
ット体内分布は従来のヨード−１３１標識ヒト血清アル
ブミンとほぼ同じである。

血中濃度の半減期は約３０時間で、ヨードル１３１標識
ヒト血清アルブミンの血中濃度の半減期（５，７時間）
よりも充分長い。すなわち、本発明による標識結合体は
、心プール像の描出に有用であることが理解出来る。

本発明による上記ヒト血清アルブミンージアルデヒドア
ミロースーデフェロキサミン結合体（試料１）と従来法
によりヒト血清アルブミンとデフェロキサミンを直接結
合させたもの（試料２）とのガリウム−６７、ＩｍＣ＋
に対する標識能を比較したところ、次のような結果が得
られた。

成上　ガリウム−６７標識能（標識時間１時間）表１に
示すごとく、本発明により調製されたキャリヤー（試料
■）は、ヒト血清アルブミン０．５２ｍｇを使用した場
合、実用的な標識時間である１時間において、ｌｍＣ１
のガリウム−６７を１００％標識しうるのに対し、従来
法による非放射性キャリヤーは同様の条件下で１５％し
か標識できず、１００％の標識率を得るには３　、５　
ｍｇを必要とず以上の結果から明らかなように、本発明
高分子化合物（Ｉ）を使用することにより、高比放射能
の放射性医薬品を調製することが可能である。

以下に実施例を示し、本発明を更に具体的に説明する。

実施例１ ジアルデヒドアミロースーデフェロキサミン結合体（縮
合体）の製造ニー 平均分子量２９００のジアルデヒドアミロース（以下、
ＤＡＡと略す。Ｘｌｏｚｇ）を水（０，４ｘのに溶解し
た。この溶液をＡ液とする。別にデフェロキサミン（以
下、ＤＦＯと略す。）（３４＊ｙ）を水（０゜６靜）に
溶解し、この溶液に等モル量（５、５ｍｇ）のトリエチ
ルアミンを加えた。この溶液をＢ液とする。Ｂ液を室温
にて１０分間攪拌後、Ａ液に加え、３０分間室温にて攪
拌した。生成したＤＡＡ−ＤＦＯ結合体を精製するため
下記のゲルクロマトグラフィーを実施した。

担体；セファデックスＧ−５０ 溶媒＋　０．０３Ｍ　’）ン酸緩衝液、ｐＨ７，０カラ
ムサイズ：直径２．２Ｇ友、高さ３０ｃ１１流速二４７
屑σ／ｈｒ ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体は、７０〜１０　（ｌｉｔ！ニ溶
出され、未反応ＤＦＯｉ；ｔ：ｌ　１０−１３０ｘ（！
ｉ：溶出された。ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体を含む７０〜Ｉ
。

Ｏ好の溶出液を凍結乾燥することにより目的の高分子化
合物を得ることが出来る。この高分子化合物を下記の条
件で高速液体クロマトグラフィーによる分析を行うと保
持体積は２４．７ｚρ、であった。

なお遊離のＤ　Ｉ”　０は検出されなかった（この系で
のＤＦＯの保持体積は２９．２ｚρである）。

カラム　ＴＳＫ−３０００９Ｗ 溶　媒　０．２Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，０圧　カニ３
８０ｐｓｉ 流　速：　０　、７５　ｍ＋２／ｍｊｎ吸光波長：２ｇ
０ｒ＋ｍ 実施例２ ジアルデヒドアミロースーデフェロキサミン結合体（縮
合還元体）の製造ニー 平均分子量２９００ノＤＡＡ（ｌ　Ｏｙｔｒｇ）を水（
０゜４ｍｇ）に溶解した。この溶液をＡ液とする。別に
ＤＦＯ（３８ｏ）を水（０，６ｍのに溶解し、この溶液
に等モル量（５、５Ｗｇ）のトリエチルアミンを加えた
。この溶液をＢ液とする。Ｂ液を室温にて１０分間攪拌
後、Ａ液に加え、３０分間室温にて攪拌した。これに水
素化ホウ素ナトリウム（２，４ｘｙ）を加え、約１時間
室温で攪拌しながら還元した。

生成したＤＡＡ−ＤＦＯ結合体を精製するため下記のゲ
ルクロマトグラフィーを実施した。

担体：セフアブ・ゾクスＧ−５０ 溶媒：　０．０３Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，０カラムサ
イズ：直径２　、２　ａｍ、高さ３０ｃｉ流速：　４７
ｉＩ２／ｈｒ ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体は、７５〜ｌ　Ｏ０ｘ（１：溶出
され、未反応ＤＦ’０は１１０−１３０ｍρに溶出され
た。ＤＡＡ−ＤＦＯ結合体を含む７５〜１００ＦＩＱの
溶出液を凍結乾燥することにより目的の高分子化合物を
得ることが出来る。この高分子化合物を下記の条件で高
速液体クロマトグラフィーによる分析を行うと保持体積
は２５．５ｚｅであった。

なお、遊離のＤＦＯは検出されなかった（この系でのＩ
）ＦＯの保持体積は３０．４ｚρである）。

カラム：　’１’５Ｋ−３０００ＳＷ 溶　媒：　０．２Ｍリン酸緩衝液、ｐｉ（７，０圧　カ
ニ３８０ｐｓｉ 流　速：　０　、７５　ｍ１２／ｍｉｎ吸光波長：２８
０ｕｍ Ｆｅ（Ｉ［［）とＤＦＯはｌ：１錯体を形成し、４２０
ｕｍに極大吸収を有する。ＦＢ（Ｉｎ）−ＤＦＯ錯体の
４２０ｒｕｎにおけるＥ　ｍａｘは２．６３ＸＩＯ３で
あった。上記高分子化合物の既知量を水に溶解し、ＤＦ
ＯとＦｅ（［）が１：Ｉ錯体を形成するのに充分な塩化
第２鉄溶液を加え、１時間静置した後、４２０ｕｍにお
ける吸光度を測定した。その結果、上記高分子化合物中
においてＤＡＡ１分子当たりＤＦｏｌｌ、５個が結合し
ていることが確認された。

従って、上記高分子化合物の平均分子量は約１０，００
０と計算される。

実施例３ ジアルデヒドアミロース−３−オキソブチラールビス（
Ｎ−メチルチオセミカルバゾン）カルボン酸のアミン誘
導体の結合体（綜合還元体）の製造＝３−オキソブヂラ
ールビス（Ｎ−メチルチオセミカルバゾン）カルボン酸
（以下、Ｋ　’ｒ　Ｓと略す。）（１３２ｕ）を無水ジ
オキサン（５ｕ（りに溶解し、１０℃付近に冷却したの
ち、トリーｎ−ブチルアミン（０、１２ＩＱ）、更にイ
ソブヂルクロロホルメイト（６４μｍ２）を加え、同温
度で約５０分間攪拌して、混合酸無水物を得た。

別にＮ　−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−鳳６−
ヘキサンジアミン（１０４＋９）を無水ジオキサン（２
ｚρ）に溶解した溶液を調製し、この溶液を混合酸無水
物溶液に加え、１０℃付近で約１５時間攪拌し、ＫＴＳ
−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−１，６−ヘ
キサンジアミン縮合体を得た。

この縮合体溶液に濃塩酸（１〜２滴）を加えてｐ）（２
に下げることによりＮ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボ
ニル基を離脱せしめ、ＫＴＳ−へ、キサンジアミン縮合
体の溶液を得た。これをＤＡＡＣ８３罪）のジメチルス
ルホキシド（５雇）溶液に加えた後、水素化ホウ素ナト
リウム（１７，２ｘｙ）を加え、室温で約３時間反応さ
せ、ＤＡＡ−ヘキサンジアミン〜ＫＴＳ結合体の溶液を
得た。

上記溶液を通常の透析デユープに入れ、常法により３０
時間透析することにより、未反応試薬を除去し、さらに
凍結乾燥することにより、目的とする高分子化合物を得
た。

ヘキサンジアミンーＫＴＳ結合体の最大吸収は、波長３
３４　ｎｍに存在し、そのＥｍａＸは４Ｊ７Ｘ　Ｉ　Ｏ
’であることを確認した。上記高分子化合物を水に溶解
して３ｍｇ７１σの濃度とし、水を対照として３３４’
ｎｍて吸光度を測定した。その結果、ＤＡＡ　１分子あ
たりＩ（’Ｉ’ＳＩ０．５個か結合していることが確認
された。従って、上記高分子化合物の平均分子量は約７
，０００と算出される。

実施例４ ジアルデヒドデキストランーデフェロキサミン結合体（
縮合還元体）の製造ニー ＤＦＯ（２，８ｇ）を水（３０好）に溶解し、この溶液
に等モル量（４３２ｍｇ）のトリエチルアミンを加え、
室温にて１０分間攪拌した。これをジアルデヒドデキス
トラン（以下、ＤＡＤと略す。Ｘ　ｌ　ｇ；ホルミル基
含量５　、１　ａ　ｍｏｆ２／　ｍｇ）の水（４０１１
Ｑ）溶液に加え、１５分間室温にて攪拌した。これに水
素化ホウ素ナトリウム（１６７Ｍ？）を加え、約１時間
室温で攪拌しながら還元した。生成したＤＡＤ−ＤＦＯ
結合体を精製するため、透析チューブに導入し、水に対
して３日間透析した後、下記のゲルクロマトグラフィー
を実施した。

担体：セファデックスＧ−５０ 溶媒：水 カラムサイズ；直径４　、５　ａｍ、高さ５０ｃπ流速
：　２　、５　ａｃ／ｍ１ｎ ＤＡＣ−ＤＦＯ結合体は、３００〜４５０叶に溶出され
、未反応ＤＦＯは５−５０〜６００Ｒ（！に溶出された
。Ｄ　Ａ’Ｄ−Ｄ　Ｆ　Ｏ結合体を含む溶出液を凍結乾
燥することにより目的の高分子化合物を得ることが出来
る。この高分子化合物を下記の条件で高速液体クロマト
グラフィーによる分析を行うと保持体積は２７．３ｉσ
であった。なお、遊離のＤＦＯは検出されなかった（こ
の系でのＤＦＯの保持体積は３２．８罰である）。

カラム：　ｉ’５Ｋ−３０００ＳＷ 溶　媒：　０．０５Ｍトリス−０，１５Ｍ塩化ナトリウ
ム−塩酸緩衝液、ｐＨ７，４ 圧　力＋　１００ｋｇ／ａｍ２ 流　速：　１　、Ｏｉ（！／ｍｉｎ 吸光波長：２８０ｎｍ 以上の実施例は本発明を例示するために意図されたもの
であり、その範囲をなんら制限するものでない。

特許出願人　Ｈ本メジフィジックス株式会社代理　人　
弁理士　青　山　葆　ほかＩ名手続補正書動式） ％式％ ２、発明の名称 少なくとも１個の遊離ホルミル基を有する高分子化合物
３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　兵庫県宝塚市高司４丁目２番１号５、補正命令の
日付：　昭和６０年３月２６日（発送日）６、補正の対
象：　明細書の「発明の詳細な説明」の欄７、補正の内
容 （１）明細書第９頁上から８行および同書同頁上から９
〜ＩＯ行、ｒ　Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇら：　Ｊ　、Ｎｕ
ｃｌ、Ｍｅｄ、　、　Ｊとあるを、「フリッツバーグ（
Ｆ　ｒｉｔｚｂｅｒｇ）ら：ジャーナル・オン・ヌクレ
アー・メディスン（Ｊ、Ｎｕｃｌ。

Ｍｅｄ、）、Ｊと補正する。

（２）同書同頁下から８〜７行、ｒＫｅｉｒｉｎｇら：
Ｊ。

Ｎｕｃｌ、Ｍｅｄ、、Ｊとあるを、「カイリング（Ｋｅ
ｉｒｉｎｇ）ら：ジャーナル・オン・ヌクレアー・メデ
ィスン（Ｊ　、Ｎｕｃｌ、Ｍｅｃ！、）、Ｊと補正する
。

（３）同書同頁下から５行、ｒＷａｇｎｅｒ　Ｊｒ、ら
」とあるを、「バクナー・ジュニア（ＷａｇｎｅｒＪ　
ｒ、）ら」と補正する。

（４）同書同頁下から５行、「；」と「Ｐｒｏｃｅｅｄ
−ｉｎｇｓＪの間に、［プロシーディングズ・オン・ザ
・インターナショナル・シンポジウム・オン・テクネチ
ウム・イン・ケミストリイ・アンド・ヌクレアー・メデ
ィスン、パドバ、イタリイ（」を挿入する。

（５）同書同頁下から２行、ｒ　ｌ　ｔａｌｙＪと「、
」の間に「）」を挿入する。

以」―

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ■９分子中に少なくとも３個のホルミル基を有するポリ
   サツカライド誘導体（ただし、ジアルデヒドデンプンを
   除く。）とアミノ基含有２官能配位子化合物が前者１分
   子当たり後音少なくとも２分子の割合においてメチレン
   イミン結合（−ＣＨ＝Ｎ−）またはメチレンイミン結合
   （−ＣＨ，Ｎｌ−１−）を介して結合して成る少なくと
   も１個の遊離ホルミル基を何する高分子化合物。