JPS6322525A - 造血剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 童栗上■■里分国 本発明は、出血及び鉄欠乏のために貧血状態にある患者
の治療、回復並びに貧血の予防に利用される造血剤に関
する。

従来Ｉ術とその一題、つ 従来、出血及び鉄欠乏による貧血状態の治療、回復には
鉄則、例えばクエン酸鉄、ピロリン酸鉄、塩化鉄、硫酸
鉄などの第１鉄及び第２鉄を含む鉄則、ビタミンＢｌ！
製剤、葉酸及び蛋白同化ステロイド剤などが用いられて
いる。しかし、これらの鉄則は体内での吸収効率が低い
ため、比較的多量に投与する必要があり、経口投与の場
合多量に投与すると鉄剤は消化管壁の鉄症（Ｓｉｄｅｒ
ｏｓｉｓ）や様々な副作用、例えば吐気、むかつき、便
秘などを引起す問題がある。そのため、硫酸鉄を水溶性
高分子化合物にイオン結合させることにより、鉄を胃腸
内で徐々に放出させるように工夫した徐放鉄則も用いら
れているが、この場合には鉄の吸収効率が従来の鉄則よ
りもさらに低くなり、その結果、貧血状態の治療、回復
に２倍以上の期間を要するという問題がある。

一方、胃腸障害が強く現れるための経口剤の服用ができ
ない患者、鉄の腸管よりの吸収が著しく弱い患者又は出
血などにより急速に鉄飽和を必要とする患者には、静注
用鉄則が用いられている。

しかし、この静注用鉄則では多量の鉄を静注すると血清
の鉄結合能を越えた鉄が直接脳や大腸に重大な障害を与
える危険があり、また、過剰の鉄は体内に沈着して組織
障害を起す恐れもあり、加うるに、頭痛、めまい、発熱
、発疹などの副作用や急性中毒症を併発する可能性もあ
るという問題がある。

なお、前掲のビタミンＢ１□製剤や葉酸については筋注
が行われているが、貧血状態が回復に向かうと鉄不足を
きたすので、上記鉄則の併用が必要となる。

上述したごとき状況から、体内での鉄吸収率が良好であ
って、副作用などの危険性を伴わない造血剤の提供が強
く要望されている。

■が解決しようとする課 本発明は、上述したごとき従来の造血剤にみられる問題
点に鑑みなされたものであって、体内での鉄の吸収効率
が良好であって一般的な貧血状態の治療、回復のみなら
ず、出血多量などにより極度の貧血状態にある患者の早
期回復にも優れた効果を奏するとともに副作用を伴わな
い造血剤を提供することを課題とする。

本発明者らは、乳から分離して得られるラクトフェリン
に第２鉄イオンをキレート結合させた鉄結合型ラクトフ
ェリンが、そのラクトフェリンに結合している鉄が第２
鉄（Ｆｅ”）であり、かつ非ヘム形態の鉄であるにもか
かわらず、有意に体内に吸収されて造血作用、すなわち
、赤血球数を増加させる作用を有することを見出し、本
発明をなすに至った。

因に、（Ｍｏｒｃｋ　Ｔ、Ａ、　ａｎｄ　Ｃｏｏｋ　Ｊ
、Ｄｏ、［シリアルフードワールドＪ　（Ｃｅｒｅａｌ
　Ｆｏｏｄｓ　Ｗｏｒｌｄ　）、２６．６６７〜６７２
．１９８１）の研究報告によると、食物中に含まれる鉄
は、ヘム鉄と非ヘム鉄に分けられ、ヘム鉄はその吸収率
が良好である（吸収率１５〜３５％）反面、食物中の含
有量が少なく、それを食品に添加して補給すると味が血
生臭くなる欠点があり、一方、非ヘム鉄は食物中の鉄の
主成分ではあるが、その存在状態が吸収性に可成り影響
を及ぼすとされる０例えば、非ヘム鉄はアスコルビン酸
や葉酸などとの共存下では吸収性が良いものの、卵、大
豆、米、茶などと共に摂取した場合には吸収が著しく阻
害される。

また、鉄の吸収性に関する多くの研究報告によると、一
般に、経口摂取される鉄は、消化管内で可溶性である第
１鉄（Ｆｅ”″）の方が、ｐＨ３以上で不溶化になる第
２鉄（Ｆｅ”）より、吸収率が高いと言われている。す
なわち、鉄が主として吸収される小腸上部の内容物のｐ
Ｈ５〜６の範囲では第１鉄はヘム鉄と同様に溶解性が良
いため吸収率も高い。

以下本発明の詳細な説明する。

３訓し１」戊 本発明の構成上の特徴は、乳から分離したラクトフェリ
ンに第２鉄イオンをキレート結合させた鉄結合型（鉄飽
和）ラクトフェリンを有効成分とする造血剤にある。

課題を解決するための　段 本発明に係る造血剤に用いられるラクトフェリンは、乳
から公知の分離方法により得られる。例えば、イオン交
換樹脂を用いて乳からラクトフェリン濃度を高めた両分
を分離する方法（特開昭５８−２８２３３号）などを適
用し得るが、ラクトフェリンのタンパク質当りの鉄結合
量を高めるには、−そう純度の高い、かつ変性のないラ
クトフェリンを用いることが望ましく、そのためには抗
ラクトフェリンモノクローナル抗体を固定化したアフイ
ニテイカラムを利用して分離する方法（川上ら、「日本
農芸化学会講演要旨集」）を適用するとよい。　また、
本発明において用いる第２鉄イオンとしては塩化第２鉄
、硫酸第２鉄などの食品衛生上無害な第２鉄化合物が適
している。

上記ラクトフェリンに第２鉄イオンをキレート結合させ
るには、ラクトフェリンと第２鉄化合物を、クエン酸ナ
トリウムもしくは重炭酸ナトリウムの存在下で混合させ
ることにより行い得る。

すなわち、ラクトフェリンをクエン酸ナトリウム又は重
炭酸ナトリウムの溶液に溶解し、これに塩化第２鉄や硫
酸第２鉄を添加して溶解し、常温下に１時間程度攪拌を
行ってラクトフェリンに第２銖イオンをキレート結合さ
せる。上記キレート結合におけるラクトフェリンに対す
る第２鉄の混合割合は、ラクトフェリン（変性していな
いもの）１分子に対して第２鉄は２分子まで結合するこ
とが知られていることから、２：１のモル比で混合する
ことが好ましい。

次に、上述のごとくして得られた鉄結合型ラクトフェリ
ンは脱塩処理及び限外濾過処理を行った後、溶液形態の
ままで造血剤として用いてもよいが、通常、該溶液を濃
縮後凍結乾燥などにより乾燥して粉末形態で用いる。ま
た、本発明に係る造血剤は、糖衣錠やタブレットもしく
はカプセル等の製剤として用いることもでき、さらには
、胃潰瘍などにより、胃壁から多量の出血がある場合や
、その他の疾病で胃が極度に閏っている場合には、経腸
投与する輸液形態の栄養剤に配合して用いることもでき
る。

さらに又、造血剤の応用例として、各種飲食品、例えば
清涼飲料、果汁飲料、発酵飲料等やゼリー、アイスクリ
ーム、水菜等に添加して貧血改善用食品素材として用い
てもよく、その場合には０．２重量％以上、好ましくは
０．５重量％以上添加する。

なお、本造血剤の構成成分であるラクトフェリンは元来
乳中に存在する乳タンパク質の一種である糖タンパク質
であるから、人体に対する悪影響は何らみられず、その
摂取量についても特に制限的でない。しかし、実際上造
血剤として利用する場合は、２０〜２００ｍｇ／日／ｋ
ｇ程度が適当である。

因に、ヒト成人の１日当りの鉄の必要量は、男性で１２
ｎ＋ｇ、女性で１４ｍｇとされており、通常の食生活で
は十分量の鉄分が摂取されるが、食品中の鉄の吸収率は
１０％以下であると言われている。また、偏食や女性の
妊娠や月経による鉄の排出等により体内の鉄必要量を維
持することが困難な場合があり、実際に鉄欠乏性貧血は
全貧血の９０％以上を占め、全人口の５０％以上が成る
程度の貧血状態にあると言われている。

本発明に係る造血剤の有効成分である鉄結合型ラクトフ
ェリンにおける第２鉄イオンはラクトフェリンにキレー
ト結合されているので酸性下でも遊離せず、したがって
、人体に投与した場合結合状態のままで腸管に達し吸収
され得る。

又凱■四果 次に、本発明による造血剤の作用効果を要約すると下記
のとおりである。

■酸性下で安定であるので腸管内で鉄が不溶性になるこ
となく、従来の鉄則に比べて約５倍量の造血機能を示す
。

■水に易溶性であり、ｐＨの変化により不溶化したり、
鉄が容易に遊離することがなく、かつヘム鉄にみられる
血生臭がないので、飲食品にも利用でき、その際フレー
バーやマスキングＩＦＩＩヲ特に用いる必要がない。

■乳タンパク質であるラクトフェリンに鉄を結合させた
ものであるから、他の造血用鉄則と異なり、病中及び病
後の患者、老人及び新生児等に対し、造血剤として広範
囲に利用できる。

以下に実施例を示して本発明及びその効果を具体的に説
明する。

実施例１ 本造血剤の有効成分である鉄結合型（鉄飽和）ラクトフ
ェリンの調製： 抗ウシラクトフェリンモノクローナル抗体を固定化した
アフイニティ力ラムに生脱脂乳１００ｋｇを通ン＆して
、ラクトフェリン１２ｇを得た。

ついで、上記ラクトフェリンを０．０１５モルのクエン
酸ナトリウム溶液１２００ｍ　ｌに溶解した後これに塩
化第２鉄１２０ｍｇを添加、溶解した。得られた混合溶
液を室温下に１時間攪拌を行った後、脱塩し、限外濾過
濃縮後、凍結乾燥して目的の鉄結合型ラクトフェリン１
）．８ｇを得た。ラクトフェリンＩｇ当り１．４ｍｇの
鉄が含まれていた。

実施例２ 本例は、本発明による造血剤の下記投与試験による貧血
状態の改善効果を示したものである。

■試験方法 ウィスター系ラット（雄、３週令）を試験動物として用
い、含鉄食投与の標準群（鉄含量４０ｍｇ％）と除鉄食
投与群（鉄含量０．２ｍｇ％）の２群の試験区に分け、
両群とも脱イオン水を与えた。１８日後に、対照群のラ
ット血液中のヘモグロビン値（ｏｂ値）が７ｇ／ｄ　ｐ
以下また赤血球数が４００万個／μｌ以下になった時を
貧血状態になったと判断した。

ついで、上述のごとくして作成した貧血状態のラット群
に除鉄食を自由ＩＨ取させながら、該ラット群をさらに
Ｆｅ５Ｏａ　・７ＨｚＯ（硫酸第１鉄）を５０ｇｇ／匹
（鉄量として１０ｇｇ／匹）及び２５０ｇｇ／匹（鉄量
として５０ｇｇ／匹）を毎日強制投与する２群と、本発
明による鉄結合型（鉄飽和）ラクトフェリンを７ｍｇ　
７匹（鉄量として１０ｇｇ／匹）及び３５ｍｇ　７匹（
鉄量として５０ｇｇ／匹）を毎日強制投与する２群、及
び鉄を投与することなく貧血状態を！！続させる対照群
の合計５群に分けて飼育し、これら各群と上記標準群と
について経日的に赤血球数、ヘマトクリット値及びヘモ
グロビン値を測定した。

結果は添付の第１図乃至第３図にそれぞれ示すとおりで
ある。

各図に見られるとおり、本発明による鉄飽和ラクトフェ
リンを鉄量として５０ｇｇ／日／匹投与した群では他の
鉄則投与群に比べて経口的に血液成分値が向上して貧血
状態が回復しており、また、１０ｇｇ／日／匹投与した
群でも経口的に貧血状態が改善される。

実施例３ 本例は、本発明による造血剤を貧血改善用もしくは貧血
予防用食品に応用した例を示したものである。

■貧血予防乳飲料の製造 実施例１で調製した鉄結合型ラクトフェリンを下記によ
り配合して貧血予防乳飲料を調製した。

社　　　　　　　　　　　■金旦ユ私Ｘ）脱脂粉乳　　
　　　　　　　　　７．１ブドウ糖　　　　　　　　　
　　　５．０サフラワー油　　　　　　　　　２．０乳
化剤（シュガーエステル）０．１ 鉄量合型ラクトフェリン　　　　１．６ビタミン類　　
　　　　　　　　　０．０２ヨーグルトフレーバー　　
　　　０．１８水　　　　　　　　　　　　　　　　　
　８４．０１００％ 上記配合に基き、脱脂乳２１．３ｇとブドウｔ７！１５
ｇを６０°Ｃに加熱した温水１００ｍ１！に溶解し、一
方すフラワー油６ｇとシュガーエステル（商品名ＤＫＦ
　１６０）０．３ｇを６０’Ｃにて混合、溶解したもの
をＴＫホモミキサーで攪拌しながら、上記脱脂乳液に徐
々に滴下して乳化した。これを９０℃で５分間加熱殺菌
した後２０℃に冷却した０次いで得られた混合乳化液に
鉄結合型ラクトフェリン４．８ｇを１５２ｍ　ｊ！の水
に溶解し、ビタミン０．０６ｇ　、ヨーグルトフレーバ
ー０．５４ｇを添加して０．２２μ信のフィルターで除
菌したものを添加して混合して製品とした。

次に、この鉄結合型ラクトフェリンを含有した乳飲料を
、試験動物としてのラットに与えて貧血予防の効果を調
べた。

試験方法： ウィスター系ラット１０匹を５匹宛の２群に分け、各群
共に除鉄食を与え、一方の群には同時に上記乳飲料４０
０ｎ＋ｇを毎日投与し、他方の群には脱イオン水を毎日
投与して、各群の血液中のヘモグロビン含量を測定した
。

その結果、４週間後には脱イオン水の投与群ではヘモグ
ロビン値は平均６．３ｇ／ｄ　ｌであったのに対し、乳
飲料投与群では平均１５．５ｇ／＋Ｈ！であった。

■貧血改善用ゼリーの製造； 実施例１で調製した鉄量合型ラクトフェリンを下記によ
り配合して貧血改善用ゼリーを調製した。

炭分　　　　　　　　　　　■金１ユａ−砂［１５ プルーンエキス　　　　　　　　４ ゼラチン　　　　　　　　　　　０．５鉄量合型ラクト
フェリン　　　　５ ７５．５ 合計　　１０１００（ 上記配合により、砂糖とゼラチンを水５０ＩＩＩｌに加
え８０°Ｃに加熱して溶解し、これにプルーンエキスを
加えて攪拌しながら５０℃まで放冷した後、４０℃の温
水２５．５ｍｌに溶解した鉄量合型ラクトフェリンを添
加し、混合した後、容器に収容し放冷して製品とした。

次に、上記鉄量合型ラクトフェリンを含有したゼリーを
試験動物としてのラットに与えて貧血改善効果を調べた
。

試験方法： ウイスター系ラツ）１０匹を５匹宛の２群に分け、各群
とも２週間除鉄食のみを与えて貧血状態となした後、一
方の群には除鉄食と市販の鉄剤（硫酸第１鉄）１８０μ
ｇ（鉄量として３５μｇ）とを与え、他の群には除鉄食
と上記ゼリー０．５ｇ　（鉄量として３５μｇ）とを与
えて飼育し、３０日後に各群の血液中のヘモグロビン値
と赤血球数を測定した。その結果、市販の鉄剤を与えた
群ではヘモグロビン値平均１．２ｇ／ｄｌ及び赤血球数
平均５　Ｘ　１０’個／ｍｍ″であるのに対し、ゼリー
を与えた群では各々平均１２．６ｇ／ｄ　Ｎ及び８．Ｉ
　Ｘ　１０”個／ｌ１）１）３まで回復した。

実施例４ 本例は、本発明に係る造唾剤を鉄吸収効率の優れた経腸
栄養剤に応用した例を示したものである。

■鉄吸収性の良好な経腸栄養剤の調製 実施例１で調製した鉄量合型ラクトフェリンを下記表に
より配合して、鉄吸収性のよい経腸栄養剤を調製した。

表 上記配合に基き、ＭＣＴカゼイン粉末６５３ｇ、低乳糖
脱脂粉乳２７０ｇ　、全粉乳６２ｇ、鉄量合型ラクトフ
ェリン１４．３ｇ、ビタミン混合粉２４０ｍｇ及び炭酸
カルシウム５６０ｍｇを粉体温合機で混合し、製品１ｋ
ｇを得た。

また、比較例として、ＭＣＴカゼイン粉末６５９ｇ、低
乳糖脱脂粉乳２７５ｇ　、全粉乳６５ｇ、コハク酸クエ
ン酸鉄ナトリウム２００ｍｇ、炭酸カルシウム５６０ｍ
ｇ及びビタミン混合粉２４０＋ｎｇを粉体混合機で混合
し、製品１ｋｇを得た。

次に、この鉄量合型ラクトフェリンを鉄源として用いた
調製した経腸栄養剤と、鉄量合型ラクトフェリンを用い
ないで調製した上記経腸栄養剤を下記によりラットにそ
れぞれ与え、鉄吸収効率について調べた。

試験方法： ウィスター系ラット１０匹を５匹ずつ２群に分け、各群
ともに除鉄食を与え、一方の群には同時に上記鉄量合型
ラクトフェリン含有経腸栄養剤の５０％水溶液を０．５
ａ＋ｊ！ずつ毎日投与し、他方の群には、鉄量合型ラク
トフェリンを添加しない経腸栄養剤の５０％水溶液を０
．５ｓ＋ｊ！投与し、各群の血液中ヘモグロビン値を調
べた。

その結果、３週間後には鉄量合型ラクトフェリンを添加
しない比較例の経腸栄養剤の投与群のヘモグロビン値が
平均７．８ｇ／ｄｆであったのに対し、鉄量合型ラクト
フェリンを含む経腸栄養剤の投与群のヘモグロビン値は
１３．１ｇ／ｄｎであった。

【図面の簡単な説明】

第１図乃至第３図は、本発明による造血剤の貧血状態の
改善効果を示したものであって、第１図は赤血球数、第
２図はへマドクリット及び第３図はヘモグロビンの各値
の変化をそれぞれ示す。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）乳から分離したラクトフエリンに第２鉄イオンを
   キレート結合させて成る鉄結合型ラクトフエリンを有効
   成分とする造血剤。
2. （２）ラクトフエリン１分子当り、１〜２分子の鉄をキ
   レート結合させている特許請求の範囲第（１）項記載の
   造血剤。
3. （３）経口投与に適した糖衣錠、タブレットもしくはカ
   プセルの形態にした特許請求の範囲第（１）項記載の造
   血剤。
4. （４）輸液中に配合して経腸投与に適した形態にした特
   許請求の範囲第（１）項記載の造血剤。
5. （５）飲料もしくはゼリー形態にした特許請求の範囲第
   （１）項記載の造血剤。