JPS63196298A

JPS63196298A - 新規微生物

Info

Publication number: JPS63196298A
Application number: JP62024716A
Authority: JP
Inventors: Takashi Sasaki; 佐々木　尭; Takafumi Harumi; 隆文春見; Keiji Kainuma; 圭二貝沼; Hiroaki Ishizuka; 博明石塚; Katsuo Wakao; 若生　勝雄; Takeshi Kawaguchi; 川口　嶽; Tsunero Oda; 小田　恒郎
Original assignee: NIKKEN KAGAKU KK; National Food Research Institute; Nikken Chemicals Co Ltd
Current assignee: NIKKEN KAGAKU KK; National Food Research Institute; Nikken Chemicals Co Ltd
Priority date: 1987-02-06
Filing date: 1987-02-06
Publication date: 1988-08-15
Also published as: JPH0411189B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利本発明は新規微生物及びそれを用いる発酵による−１−
！ＩＸ！Ｊ　）−ルの製造方法に関し、更に詳細には、
オーレオバシディウム属に属する新規な人工変異株であ
るオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−０４２菌株及び当
該変異株を用いて発酵性糖類をエリスリトールに変換す
ることを特徴とする、新規微生物及びそれを用いる発酵
によるエリスリトールの製造方法に関する。

良釆二皮夏従来から、キャンシダ属、デバリオミセス属。

トリゴノプシス属、トルロプシス属、ハンゼヌラ属、モ
ニリエラ属、オーレオバシディウム属などに属する微生
物を利用して、発酵法によりグルコース、グリセリンな
どの糖類からエリスリトールを製造する方法は既に公知
となっている。

例えば、特公昭４７−４１５４９号公報には、キャンシ
ダ属、トリゴノプシス属に属する微生物を用いてグリセ
リンなどの発酵性糖類をエリスリトールに変換する方法
が記載されている。しかし、この方法では微生物の耐糖
性が低いために、主炭素源として使用される糖質濃度（
基質濃度）に限界があり、比較的低濃度で発酵を行う必
要があった。

また、特開昭６０−１１０２９５号公報などには、モニ
リエラ属に属する微生物を用いるエリスリトールの改良
製法が開示されている。この方法はエリスリトールへの
変換率が高く、微生物の耐糖性も高いという点で優れて
いるが、この微生物は泡の発生が著しく、通常使用され
る消泡剤では役に立たないため、高価なキサンタンガム
などを多量に添加する必要があり、そのために製造コス
トが高くなるという欠点がある。

更に、特開昭６１−３１０９１号公報には、本発明者ら
によりオーレオバンプイウム属に属スるオーレオバシデ
ィウムｓｐ、　　５Ｎ−４２菌株（微工研菌寄第７５９
４号）を用いてグルツースなどの発酵性糖類からエリス
リトールを製造する方法が開示されている。この方法は
、比較的高濃度の糖質を用いてエリスリトールを製造す
ることを可能にするものであるが、培養液中の菌体生成
量に比べてエリスリトール収率が充分ではなく、また製
造条件であるｐＨや温度などの至適範囲が狭いなど、必
ずしも満足のいく方法とは言い難い。

□　点を　決するための手段本発明者らは、上記したような従来方法の欠点を改良す
るために、オーレオバンプイウム属に属する微生物の耐
糖性を高めるべく、微生物の改良について種々検討した
結果、沖縄県の澱粉工場内の土壌から分離された不完全
菌類のオーレオバンプイウム属に属するオーレオバシデ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株（微工研菌寄第８７
４５号）を親株とし、これより得られた変異株であるオ
ーレオバシデイウムｓｐ、　ＳＮ　−Ｇ４２菌株が高い
エリスリトール生産能を有すると共に、高い耐糖性を獲
得していること並びに培養の際に泡を生成しないことを
見出し、本発明に到達したものである。

即ち、本発明はエリスリトール生産能を有し、菌体（細
胞）が親水性、非凝集性であり、且つ液体培地中で好気
的に培養するとき実質的に泡を生成しないことを特徴と
するオーレオバシディウムｓｐ、　ＳＮ　−０４２菌株
及び当該微生物を用いて発酵性糖類を主炭素源として含
む培地に接種し、好気的に培養して培養液中にエリスリ
トールを生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴と
する発酵によるエリスリトールの製造方法に関する。

本発明に係わるオーレオバシデイウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ
４２Ｗ株は、親株であるオーレオバシディウムｓｐ、　
　ＳＮ　−１２４Ａ菌株に、紫外線を照射した後、引キ
続＃Ｎ−メチルーＮ’−ニトロ−Ｎ／Ｌニトロソグアニ
ジンなどの突然変異誘起剤を使用して処理することによ
り誘発された新規変異株である。

以下に、本変異株の菌学的性質を示す。

１、培地上の生育状況１）顕微鏡的所見栄養細胞の大きさく＊ｌ）　　４〜７Ｘ４〜１５μ栄養
細胞の形状（＊１）　　　菌糸および酵母様の単胞、卵
形等の形状を示す。

栄養細胞の増殖法（＊ｌ）　　菌糸及び酵母様細胞の多
極出芽菌糸体（＊２）　　　　　　　真性菌糸を形成し、先端
及び側面に全分芽型分朱子を多数少ずる。

（註）＊ＩＹＭ寒天培寒天培地２７°ロ、５養＊２ポテ
トグルフース寒天によるスライド培養２）寒天斜面（＊３）生　　　育　　　　　　　　　良　　　好形　　態　　
　　　表面は平滑状光　　　沢　　　　　　　　無　　　し色　　調　　　
　　　口数の経過に伴い白色からうすい黄黒色のフｐニーに変化する。

（註）＊３ＹＭ寒天培地３）液体培養（栗４）表面生育　　　　　厚い皮膜形成濁　　　度　　　　　　　　透　　　明沈　　　査　　
　　　　　　大（註）＊４ＹＭ液体培地２、子のう胞子の形成ポテトグルコース寒天培地　形成　せずコーンミール寒
天培地　　　形　成せずＹＭ寒天培地　　　　　　　形
成　せずニンジンエキス寒天培地　　形　成せずＶ８寒
天培地　　　　　　　形　成　せず３、生理学的性質酸素要求性　　　　　　　　　好　気　的生育温度　　
　　　　　　　　約４０°Ｃまで最適生育温度　　　　
　　　　３５〜３７°Ｃ生育ｐＨ２，５〜１０．０最適生育ｐＨ４，０〜７．０ＫＮＯ３資化性（＊５）　　　　　　　有　　リ（ＮＨ
４）　２ＳＯ４資化性（＊５）　　　　有　　り尿素の
分解　　　　　　　　　　無　　しゼラチンの液化　　
　　　　　　無　　しカロチノイドの生成　　　　　　
無　　しファーストブルーＢ発色試験　　無　　し有機
酸の生成　　　　　　　　　無　　しデンプン様物質の
生成　　　　　無　　しビタミンの要求性（＊５）　　
　　　有　　リグルコース濃度（＊６）　　　　５０％
生育　■６０％生育　料食塩濃度（秦７）２％生育　＋１０％生育　− （註）　１１５　Ｗｉｃｋｅｒｈａｍ　ｆ）合成培地を
用イタＪ、Ｌｏｄｄｅｒらの方法により判定＊６寒天培地栗７液体培地４、糖の発酵性（＊５）グルコース　　　　　　　　　　　＋ラクトース　　　　　　　　　　− ガラクトース　　　　　　　　　− ノリビオース　　　　　　　　　　− シュクロース　　　　　　　　　＋ラフィノース　　　　　　　　　− マルトース　　　　　　　　　　　十〇−７ラピノース　　　　　　　　− キシロース　　　　　　　　　　− トレハロース　　　　　　　　　　− イヌリン　　　　　　　　　　　− ５、糖、有機酸等の資化性グルコース　　　　　　　　　　　＋Ｄ−キシｐ−ス　　　　　　　　　− ガラクトース　　　　　　　　　− エリスリトーｌし＋Ｄ−７ラビノース　　　　　　　　− し一７ラビノース　　　　　　　　− Ｄ−リボース　　　　　　　　　　＋シュクロース　　　　　　　　　＋Ｌ−ラムノース　　　　　　　　　　−マルトース　　
　　　　　　　　士エタノール　　　　　　　　　　　− メタノール　　　　　　　　　　士セロビオース　　　　　　　　　　＋サリシン　　　　　　　　　　　− Ｌ−ソルボース　　　　　　　　　＋リビトールシーガラクチトール　　　　　　　　　− グリセロール　　　　　　　　　＋トレハロース　　　　　　　　　　− ラクトース　　　　　　　　　　　− ノリビオース　　　　　　　　　　− Ｄ−マンニトール　　　　　　　　− ラフイノース　　　　　　　　　　＋メレヂトース　　　　　　　　　　＋ α−メチルーＤ−グルコシド　　　− イヌリン　　　　　　　　　　　＋イノシトール　　　　　　　　　− 可溶性デンプン　　　　　　　　− ＤＬ−乳酸　　　　　　　　　　　　　−コハク酸　　
　　　　　　　　　　− クエン酸　　　　　　　　　　　　　−〇−グルシトー
ル　　　　　　　　＋グルクロン酸　　　　　　　　　　− アルブチン　　　　　　　　　　＋Ｄ−グルコサミン　（ＭＣＩ）　　　　　　−２−ケト
グルコン酸　　　　　　　＋５−ケトグルコン酸　　　　　　　十上記の如き菌学的性質を有する本菌株は、オ−レオバン
プイウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株を親株として変異
したものであり、且つ親株に近似した性質を有している
ことから、オーレオバシディウム属に属する新規な変異
株であると判断し、オーレオバンプィウムｓｐ、　５Ｎ
−０４２菌株とし命名した。

本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所に「微生物
受託番号　微工研菌寄第８９４０号」として寄託されて
いる。

このように、本発明に係わるオーレオパシデイウＡ　ｓ
ｐ、　ＳＮ−０４２Ｍ株は、親株であるオーレオバンプ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株の菌学的性質（特願
昭６１−２１０６６９号参照）に近似しているが、硝酸
塩の資化性が弱く、尿素非分解性及び炭素源の資化性な
どで若干具なる性質を有しており、また親株に比較して
耐糖性が高い点（後、記試験例１参照）、液体培地で好
気的に□培養したとぎ実質的に泡を生成しない点並びに
菌体（細胞）が親水性であり、且つ非凝集性である点（
後記試験例２参照）及び平板寒天培地で静置培養したと
きのコロニーの形態（後記試験例３参照）においても相
違を有している。

以下に、本発明に係わるエリスリトールの製造方法につ
いて述べるが、本発明の中で用いる％は特にことわりの
ない限り容量％で示した。

本発明における培養は、通常液体培地を用いて好気的条
件下に撹拌培養により実施されることが望ましい。

当該液体培地の主炭素源としてはグルコース。

フルクトース、シェフロースなどの糖質カ使用されるが
、これらの糖質の培地中における量的割合としては１０
〜５５％、好ましくは２０〜５０％の範囲で添加使用さ
れる。窒素源としては微生物により利用可能な窒素化合
物、例えば酵母エキス、ペプトン、麦芽エキス、カザミ
ノ酸、コーンスチープリカーなどが使用される。また、
培地に加える無機塩類としては、例えば硫酸第一鉄、塩
化カリウム、塩化ナトリウム、リン酸二水素カリウム、
水酸化カルシウムなどの塩類が使用される。更に、必要
に応じて酵母の生育に必要な各種の有機物。

無機物あるいは通常用いられる消泡剤などを添加するこ
とができる。

培養は、前記組成からなる液体培地に微生物菌体を直接
接種するか、又は別に前培養によって得られる種培養液
を接種して行われる。この種培養液の調製は、例えば常
法により斜面培養した菌をグルコース３３．５％、コー
ンスチーブリ力−４，５％を含むｐＨ４〜６の液体培地
に１白金耳接種して３４〜３６°Ｃの温度で２〜４日間
培養することにより行われる。

培養温度は微生物が生育しうる範囲内、即ち３０〜３８
°Ｃで行われるが、好ましくは３５〜３７℃の範囲であ
る。

また、培地のｐＨは４〜９、好ましくは４〜７の範囲で
調節される。

培養期間は使用する培地の種類及び主炭素源である糖質
の濃度により異なるが、通常４〜８日間程度である。

本発明における培養は、培地の栄養源が最大限に利用さ
れ、且つ培養液中のエリスリトールの生成量が最高に達
した時点で培養を終了させることが望ましい。

なお、培養液中のエリスリトール生成量はガスクロマト
グラフィー、高速液体クロマトグラフィーなどの周知の
方法を用いて速やかに測定することができる。

かくして、培養液中に蓄積されたエリスリトールは、常
法に従って培養液中から分離される。即ち、斯かる場合
に当該分野において通常使用されている周知の手段、例
えばろ過、遠心分離、イオン交換又は吸着クロマトグラ
フィー、溶媒抽出。

蒸留、結晶化などの操作が必要に応じて適宜組み合わせ
て用いられる。−例を挙げれば、培養液からろ過、遠心
分離などによって菌体を除去し、次いでこの液を活性炭
で処理して着色物質などを除き、更にイオン交換樹脂に
より脱イオンした後、液を濃縮してシロップとする。次
に、このシロップからエリスリトール結晶化して分離す
る。エリスリトールを分離した後の母液中にグリセリン
が含まれている場合には、これを更に減圧蒸留により精
製してグリセリンを得ることができる。

叉−」Ｌ−飢次に、本発明を試験例及び実施例により詳しく説明する
。

以下に、本発明に係わるオーレオバシディウムｓｐ．Ｓ
Ｎ−０４２菌株の特性を、親株であるオーレオハシティ
ラムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株と比較した。

試験例１（耐糖性試験）・方　法酵母エキス（Ｄｉｆｃｏ社製）１．０％、グルコース２
２．０〜４５．０％を含む培地を５００　Ｎ１を容の三
角フラスコにそれぞれ入れ、１２０°Ｃで１５分間蒸気
滅菌を行った。冷浸、培地ｐＨを５．５に調整し、これ
に種培養液６％を接種した後、３０’Ｃ。

１８０ｒｐｍで７日間回転培養を行った。

・結　果次頁に対消費グルコース当たりのエリスリトール収率な
示した。

表から明らかなように、親株であるオーレオハシティラ
ムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａ菌株は、培地のグルコース濃
度が３３．５％以下ではエリスリトールへの変換率が３
６．５〜３８．３％で良°好な変換率を示すが、グルコ
ース濃度が３９．５％以上になると、グルコース濃度の
上昇に伴って急激な変換率の低下が認められた。

これに対し、本発明の変異株であるオーレオバシディウ
ムｓｐ．ＳＮ−０４２菌株は、培地のグルコース濃度が
３９．５％を越えてもエリスリトールへの変換率の低下
が認められず、グルコース濃度が４５．０％になっても
親株に比べ約２．３倍のエリスリトール収率が認められ
た。

試験例２（発泡性、凝集性及び親水性試験）・方　法酵母エキス１．０％、グルコース３３．５％を含む培地
を試験管に入れ、１２０°Ｃで１５分間蒸気滅菌を行っ
た０冷後、培地ｐＨを５．５に調整し、これに種培養液
６％を接種した後、３０°Ｃ１５日間振盪培養を行った
。培養終了後、１０〜１５分間静置して泡の生成状態及
び菌体（細胞）の凝集状態を観察した（発泡性、凝集性
）。

引き続き、培養液と同量のベンゼンを加えて強く撹拌し
た後、約３０分間静置して菌体（細胞）のベンゼン層へ
の移行状態を観察した（親水性）。

・結　果親株であるオーレオハシティラムｓｐ、　ＳＮ　−１２
４Ａ菌株は、液体培地で好気的に培養したとき著しい発
泡を示し、撹拌（振盪）を停止した後も泡は長時間消失
しなかった。また、培養液中の菌体（細胞）は、撹拌を
停止すると速やかに凝集して沈殿を生じた。

これに対し、本発明の変異株であるオーレオハシティラ
ムｓｐ、　ＳＮ　−０４２菌株は上記と同一の条件で培
養しても発泡が全く認められず、撹拌（振盪）を停止し
ても菌体の凝集は生じなかった。

また、上記と同一条件で培養した親株と本発明の変異株
の各培養液に、適量のベンゼンを加えてベンゼン−水２
層系としたとき、親株の菌体はベンゼン層に移行し、水
層には何も残らないが、本発明の変異株の菌体は全て水
層にとどまり、ベンゼン層には全く移行しなかった。

試験例３（形態観察）・方　法酵母エキス１．０％、グルコース、３３．５％、寒天１
．５％から成る平板寒天培地に、白金線を用いて菌株を
接種した後、３０″Ｃ１５日間静置培養し、コロニーの
形態を観察した。

・結　果親株であ盃オーレオバシディウムｓｐ、　ＳＮ　−１２
４Ａ菌株は、平板寒天培地上で表面がシワ状のコロニー
を生ずるが、本発明の変異株であるオーレオバシディウ
ムｓｐ、　ＳＮ　−０４２菌株は表面が平滑状のコシニ
ーを生じ、外観上著しく相違している。

実施例１（変異株の造成）オーレオバシディウムｓｐ、　５Ｎ−１２４Ａｍ　株を
酵母エキス０．５％、グルコース２２％の培地で２日間
前培養したものを１００倍稀釈し、３０ｃｍの距離から
１５Ｗの紫外線ランプ（東芝殺菌灯［ＧＬ１５Ｊ　）を
４０分間照射する。これを稀釈後、寒天培地（酵母エキ
ス１．０％、グルコース３３．５％寒天１．５％）に塗
布し、生育してくるものを選抜した。

次に、上記処理で選抜した菌株を再び２０分間紫外線照
射し、同様にして生育してくるものを選抜した。

更に、上記処理で選抜した菌株を１　ｍｇ／　ｍｅ濃度
のＮ−メチル−Ｎ′−二）　ａ　−Ｎｎ−ニトロソグア
ニジンで３０分間処理し、同様にして生育してくるもの
を選抜して、変異株であるオーレオバシディウムｓｐ、
　　ＳＮ　−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭＰ−８９４０）を得
た。

実施例２腫１１区μ」１にグルコース３３．５％、酵母エキス１．０％、寒天１．
５％から成る斜面培地にオーレオバシディウムｓｐ、　
　ＳＮ　−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）の菌
体を塗布し、３５°Ｃで２〜３日間静置培養する。

次に、グルコース２０％、コーンスチーフリカ−（玉子
コーンスターチ■製）１．６％を含む液体培地　（ｐＨ
４，０）　１５０ｍ／を入れた５００ＩＩＩｔ容の三角
フラスコに上記培養菌体を１白金耳植菌し、３５°Ｃで
３日間培養を行い、更に、この培養液９ｙｔｌを同様の
液体培地１５０ｍ／を入れた５００ａ＋／容の三角フラ
スコに接種し３５°Ｃで３日間振盪培養することにより
調製した。

本−」し−１グルコース２０．０％およびコーンスチープリ力−１，
６％を含む培地１５Ｊを３０１容の発酵槽に入れ、消泡
剤（「シリコーンＫＳ−６６Ｊ信越化学■製）３００ｐ
ｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸気滅菌する
。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨな４．０に
調整したのち、これにオーレオバシディウムＳｐ、　Ｓ
Ｎ−Ｇ４２菌株（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）の種培養液
６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０．２５　ＶＶｍｓ
回転数２３Ｏｒｐｍの条件で７日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４９．３％、グリセリン収率は２．２％であった。

次に、この培養液の一部をとり、遠心分離により菌体を
除去し、更に活性炭による脱色およびイオン交換樹脂（
ＩＲＡ−４１０：　ＩＲ−１２０Ｂ　＝　２：１）によ
る脱塩を行った。溶出液を糖濃度５０％以上に濃縮し、
徐冷することによって結晶を得、更に、この結晶を水に
溶解した後、同様の方法によって再結晶を行った。

得られた多面体様の白色結晶はされやかな甘味を有し、
その融点は１２１°Ｃであった。更に、液体クロマトグ
ラフィー、ガスクーマドグラフィー、旋光度及び核磁気
共鳴スペクトル等の測定を行った結果、上記結晶はエリ
スリトールと同定された。

実施例３グルコース２０．０％およびコーンスチープリカ−１，
６％を含む培地１５Ｊを３０１容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオパシデイ
ウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−８
９４０）の種培養液６％を加え、温度３５℃、通気量０
．５０ｖｖｍｓ回転数２３Ｏｒｐｍの条件で７日間培養
を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４９．２％、グリセリン収率は１．２％であった。

実施例４グルコース２０．０％およびコーンスチープリ力−１，
６％を含む培地１５１を３０７！容の発酵槽に入れ、消
泡剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間
蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐ
Ｈな４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地
を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシデ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−Ｇ４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−
８９４０）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気
量０．７５ｗｍｑ回転数２３Ｏｒｐｍの条件で７日間培
養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４６．５％、グリセリン収率は２．７％であった。

実施例５グルコース２０．０％およびコーンスチープリカ−１，
６％を含む培地１５Ｊを３０１容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−８
９４０）の種培養液６％を加え、温度３５”Ｃ，通気ｆ
！ｋｌ　、００　ＶＶｍｓ回転数２３Ｏｒｐｍの条件で
７日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は４１．８％、グリセリン収率は１．４％であった。

実施例６グルコース３３．５％、およびコーンスチープリカ−４
，４７％を含む培地６７ｉを７４容の発酵槽に入れ、消
泡剤３ｏｏｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間
蒸気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐ
Ｈな４．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地
を用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシデ
ィウムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−
８９４０）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気
量０．２５ｗｍ１回転数５０Ｏｒｐｍの条件で５日間培
養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３９．７％、グリセリン収率は７．９％であった。

実施例７グルコース３９．５％およびコーンスチープリ力−４，
０％を含む培地５１を７Ｅ容の発酵槽に入れ、消泡剤３
００ｐｐｍを加えたのち、１２０’Ｃで２０分間蒸気滅
菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを４
．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用い
て実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディウム
ｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０
）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０．２
５ｖｖｍｓ回転数５０Ｏｒｐｍの条件で６日間培養を行
った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３８．６％、グリセリン収率は９．５％であった。

実施例８グルコース３９．５％およびコーンスチーブリ力−５，
３％を含む培地５／！を７７！容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０″Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−８
９４０）　（１）種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１
通気量Ｑ、２５ｖｖｍｓ回転数５０Ｏｒｐｍの条件で５
日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３７．５％、グリセリン収率は７．２％であった。

実施例９グルコース３９．５％およびコーンスチープリ力−６，
６％を含む培地５１を７１容の発酵槽に入れ、消泡剤３
００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸気滅
菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを４
．２に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用い
て実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディウム
ｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−８９４
０）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０．
２５ｖｖｍｓ回転数５０Ｏｒｐｍの条件で４日間培養を
行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３７．１％、グリセリン収率は４．８％であった。

実施例１０グルコース４５．０％およびコーンスチープリ力−６，
０％を含む培地１５Ｊを３０１容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．０に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株　（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９
４０）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０
．２５ｖｖｍｓ回転数２３Ｏｒｐｍの条件で８日間培養
を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、グルコースは
完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収率
は３７．３％、グリセリン収率は４．５％であった。

実施例１１シェフロース３３．５％およびコーンスチープリ力−４
，５％を含む培地５１を７７１容の発酵槽に入れ、消泡
剤３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
な４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ、　５Ｎ−０４２菌株の種培養液６％を加え、
温度３５’Ｃ。

通気量０．２５ｖｖｍｓ回転数５０Ｏｒｐｍの条件で６
日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、シェフロース
は完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収
率は４１．９％、グリセリン収率は７．４％であった。

実施例１２シェフロース３９．５％およびコーンスチープリカ−５
，３％を含む培地５１を７４容の発酵槽に入れ、消泡剤
３００ｐｐｍを加えたのち、１２０°Ｃで２０分間蒸気
滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨを
４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を用
いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディウ
ムｓｐ、　５Ｎ−Ｇｄ２菌株　（ＦＥＲＭ　　Ｐ−８９
４０）の種培養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０
．２５ｖｖｍｓ回転数５０Ｏｒｐｍの条件で６日間培養
を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、’ｉｘｌロー
スは完全に消費されており、培養液中のエリスリトール
収率は４２．４％、グリセリン収率は５．８％であった
。

実施例１３シェフロース４５．０％およびコーンスチーブリ力−６
，０％を含む培地５１を７１容の発酵槽に入れ、消泡剤
３００ｐｐｍを加えたのち、１２′Ｏ°Ｃで２０分間蒸
気滅菌する。冷却後、カセイソーダを用いて培地のｐＨ
を４．１に調整したのち、上記培地と同一組成の培地を
用いて実施例２の方法に従い調製したオーレオバシディ
ウムｓｐ。

５Ｎ−Ｇｄ２菌株　（ＦＥＲＭ　Ｐ−８９４０）の種培
養液６％を加え、温度３５°Ｃ１通気量０．２５ｗｍ５
回転数５０Ｏｒｐｍの条件で６日間培養を行った。

培養終了後、培養液の分析を行った結果、シェフロース
は完全に消費されており、培養液中のエリスリトール収
率は４１．７％、グリセリン収率は３．８％であった。

ｌ乳旦夏釆本発明の新規微生物であるオーレオバシディウムｓｐ、
　ＳＮ　−Ｇｄ２菌株は、耐糖性、耐熱性に優れ、エリ
スリトール生産能が高く、しかも発酵培養時に泡の発生
が極めて少ないので、工業的に利用する上で大変都合の
良いものである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）エリスリトール生産能を有し、菌体（細胞）が親
水性、非凝集性であり、且つ液体培地中で好気的に培養
するとき実質的に泡を生成しないことを特徴とするオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−Ｇ４２菌株。
（２）オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−Ｇ４２菌株を
、発酵性糖類を主炭素源として含む培地に接種し、好気
的に培養して培養液中にエリスリトールを生成蓄積せし
め、これを採取することを特徴とする発酵によるエリス
リトールの製造方法。