JP2776479B2 - エリスリトールの製造方法 - Google Patents
エリスリトールの製造方法Info
- Publication number
- JP2776479B2 JP2776479B2 JP29123896A JP29123896A JP2776479B2 JP 2776479 B2 JP2776479 B2 JP 2776479B2 JP 29123896 A JP29123896 A JP 29123896A JP 29123896 A JP29123896 A JP 29123896A JP 2776479 B2 JP2776479 B2 JP 2776479B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- strain
- erythritol
- glucose
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、オーレオバシディ
ウム属に属する新規な人工変異株であるオーレオバシデ
ィウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株を用いて糖類をエリスリト
ールに変換することを特徴とするエリスリトールの製造
方法に関する。 【０００２】 【従来の技術】微生物を用いてエリスリトールを製造す
る方法はすでに公知であり、例えば特開昭６０−１１０
２９５号公報にはモニリエラ属に属する微生物を用いる
方法が記載されており、特開昭６１−３１０９１号公報
にはオーレオバシディウム属に属する微生物を用いる方
法が記載されている。しかし、これらの方法は原料糖か
らのエリスリトールへの変換率が高く、微生物自体の耐
糖性も比較的高いという点では優れているものの、これ
らの微生物は培養時に泡の発生が著しく、消泡剤を多量
に使用してもこれを有効に抑えられないという欠点があ
った。なお、上記特開昭６０−１１０２９５号等におい
ては、キサンタンガムなどを用いて泡の抑制を試みてい
るが、効果は必ずしも十分でない。 【０００３】 【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、エリス
リトール生産能の高い工業的利用可能な菌株について広
範な探索を行い、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１
２４Ａ株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４２９）を見出し、先に
特許を出願した。このＳＮ−１２４Ａ株は、エリスリト
ールへの変換能が非常に高く、増殖力も非常に旺盛であ
るという特徴があるが、耐糖性が十分でなく、その上培
養の際の泡の発生もかなり激しいという欠点があった。 【０００４】 【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは上
記オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株から耐
糖性，起泡性の改善された変異株を誘導、分離するべく
種々検討した結果、紫外線照射処理および突然変移誘起
剤による処理を反復して適用した菌株の中から耐糖性が
高く、起泡性のない菌株を分離することに成功し、本発
明に到達した。 【０００５】即ち、本発明は糖濃度４０％（Ｗ／Ｖ）以
上の環境（培地）中で良好な生育と高いエリスリトール
生産能を維持することができ、且つ菌体（細胞）が親水
性，非凝集性であり、液体培地中で好気的に培養すると
き、泡が実質的に生成しない新規変異株オーレオバシデ
ィウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４３
１）を糖類を炭素源として含む培地に接種し、好気的に
培養して培養液中にエリスリトールを生成蓄積させ、こ
れを採取することを特徴とするエリスリトールの製造方
法に関する。 【０００６】 【発明の実施の形態】本発明に用いるオーレオバシディ
ウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（変異株）と、その親株であ
るオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株（野生
株）の菌学的性質を示す。 〔Ａ〕オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株
（野生株）の菌学的性質 １）培地上の生育状況 ａ）顕微鏡的所見 栄養細胞の大きさ（＊１） ４〜７×４〜１５μ 栄養細胞の形状（＊１） 菌糸および酵母様の単胞、卵形等の形状を示 す。 栄養細胞の増殖方法（＊１）菌糸および酵母様細胞の多極出芽。 菌糸体（＊２） 真性菌糸を形成し、先端および側面に全分芽 形分生子を多数生ずる。 （註）＊１ ＹＭ寒天培地に２７℃、５日間培養。 ＊２ ポテトグルコース寒天によるスライド培養。 ｂ）寒天斜面（＊３） 生育 良好 光沢 無し 色調 日数の経過に伴い、白色からうすい黒色のコ ロニーに変化する。 （註）＊３ ＹＭ寒天培地 ｃ）液体培養（＊４） 表面生育 厚い皮膜形成 濁度 透明 沈査 大 （註）＊４ ＹＭ液体培地 【０００７】 ２）子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地 形成せず コーンミール寒天培地 形成せず ＹＭ寒天培地 形成せず ニンジンエキス寒天培地 形成せず Ｖ8 寒天培地 形成せず ３）生理学的性質 酸素要求性 好気的 生育温度 約４０℃まで 最適生育温度 ３５〜３７℃ 生育ｐＨ ２．５〜９．５ 最適生育ｐＨ ４〜７ ＫＮＯ3 資化性（＊５） 有り （ＮＨ4)2 ＳＯ4 資化性（＊５） 有り 尿素の分解 有り ゼラチンの液化 無し カロチノイドの生成 無し 有機酸の生成 有り アルブチン 無し デンプン様物質の生成 無し ビタミンの要求性（＊５） 有り グルコースの濃度（＊６）５０％ 生育 ＋＋ ６０％ 生育 ＋＋ 食塩濃度（＊７） ２％ 生育 ＋ ６％ 生育 − （註）＊５ Ｗｉｃｋｅｒｈａｍの合成培地を用いるＪ．Ｌｏｄｄｅｒら の方法により判定した。 ＊６ 寒天培地 ＊７ 液体培地 【０００８】４）糖の発酵性（＊５） グルコース ＋＋ ラクトース − ガラクトース − メリビオース − シュクロース ＋＋ ラフィノース − マルトース ＋ セロビオース − トレハロース − イヌリン − ５）糖、有機酸等の資化性 グルコース ＋＋ Ｄ−キシロース ± ガラクトース − エリスリトール − Ｄ−アラビノース − Ｌ−アラビノース − Ｄ−リボース ＋ シュクロース ＋ Ｌ−ラムノース − マルトース ＋ エタノール − セロビオース ＋ サリシン − Ｌ−ソルボース − リビトール − ガラクチトール − グリセリン ＋ トレハロース − ラクトース − メリビオース − Ｄ−マンニトール ＋ ラフィノース − メレチトース − α−メチル−Ｄ−グルコシド − イヌリン ± イノシトール − 可溶性デンプン − ＤＬ−乳酸 − コハク酸 ± クエン酸 ± 【０００９】〔Ｂ〕オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−
γ９６株（変異株）の菌学的性質 オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の菌学的性
質は、上記のオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４
Ａ株（野生株）の菌学的性質のうち、「糖、有機酸等の
資化性」において下記第１表に示すような相違を有する
こと以外は親株の菌学的性質と同一である。 【００１０】 【表１】【００１１】上記説明からも明らかなように、本発明に
用いる変異株オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株は、野生株であるオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−
１２４Ａ株と極めて類似した菌学的性質を有する。しか
しながら、本変異株は、後記試験例に示すように、耐糖
性が高いことおよび菌体が親水性で培養の際に泡を生成
しない点で従来のオーレオバシディウムに属する菌株と
相違する。即ち、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１
２４Ａ株（野生株）は、培地のグルコース濃度が３３．
５％以下の条件では、３７．０〜４１．５％の比較的良
好なエリスリトールへの変換率を示すが、グルコース濃
度が３９．５％以上になると、変換率の急激な低下が認
められ、グルコース濃度４５％では約１６％に低下す
る。これに対して、本発明に用いるオーレオバシディウ
ムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（変異株）は、培地のグルコー
ス濃度が６０％を超えても、エリスリトールへの変換率
はほとんど低下が認められず、グルコース濃度７５％で
も尚３２％の変換率を維持している。更に、このオーレ
オバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株は菌体が親水性で
培養の際に実質的に泡の発生が認められない。 【００１２】本発明者らは、本発明に用いる変異株につ
いての上記の特徴から、本変異株はオーレオバシディウ
ム属に属する新規な変異株であると判断し、本変異株を
オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株と命名し
た。本菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所にＦ
ＥＲＭ ＢＰ−１４３１として寄託されている。 【００１３】次に、本菌株を用いるエリスリトールの製
造方法について説明する。尚、以下の説明中に用いる％
は、特にことわりのない限り、容量（Ｗ／Ｖ）％であ
る。本菌株の培養は炭素源，窒素源，無機塩類等を含む
液体培地を用いて好気的条件下に実施される。液体培地
の炭素源としては、グルコース，フルクトース，シュク
ロース等の糖質が使用される。糖質の使用量（添加量）
は培地量の１０〜９５％、好ましくは２０〜７０％であ
る。窒素源としては微生物により利用可能な窒素化合
物、例えば酵母エキス，ペプトン，麦芽エキス，カザミ
ノ酸，コーンスチープリカー等が使用される。無機塩類
としては、例えば硫酸第一鉄，塩化カリウム，塩化ナト
リウム，リン酸二水素カリウム，水酸化カルシウム等の
塩類が使用される。尚、これらの炭素源，窒素源，無機
塩類の他に、更に必要に応じて、酵母の生育に必要な各
種の有機物，無機物あるいは通常用いられている消泡剤
等を添加することができる。 【００１４】培養は、前記組成の液体培地に本変異株の
菌体を直接接種するか、または別に前培養によって得ら
れる種培養液を接種して行われる。この種菌培養液の調
製は、例えば常法により斜面培養した菌をグルコース４
５．０％、コーンスチープリカー６．２％を含むｐＨ４
〜６の液体培地に１白金耳接種して３４〜３６℃の温度
で２〜４日間培養することにより行われる。培養温度は
微生物が生育しうる範囲内、即ち３０〜３８℃で行われ
るが、好ましくは３５〜３７℃の範囲である。なお、培
地のｐＨは４〜９、好ましくは４〜７の範囲で調整され
る。培養期間は使用する培地の種類および炭素源である
糖質の濃度により異なるが、通常４〜８日間程度であ
る。培養は、培地の栄養源が最大限に利用され、かつ培
養液中のエリスリトールの生成量が最高に達した時点で
培養を終了させることができるように、培養液中のエリ
スリトール量をガスクロマトグラフィー，高速液体クロ
マトグラフィー等の周知の方法により測定しながら行う
ことが望ましい。 【００１５】培養液中に蓄積されたエリスリトールは、
培養終了後、常法によって培養液中から分離される。即
ち、かかる場合に当該分野において通常使用されている
周知の手段、例えば濾過，遠心分離，イオン交換または
吸着クロマトグラフィー，溶媒抽出，蒸留，結晶化等の
操作が必要に応じて適宜組み合わせて用いられる。一例
を挙げれば、培養液から濾過，遠心分離等によって菌体
を除去し、次いでこの液を活性炭で処理して着色物質な
どを除き、更にイオン交換樹脂により脱イオンしたの
ち、液を濃縮してシロップとする。次いで、このシロッ
プからエリスリトールを結晶化して分離する。 【００１６】 【実施例】次に、本発明を試験例および実施例等により
詳しく説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。 試験例１ （耐糖性試験） 酵母エキス２．０％および所定量（２２．０〜８３．３
％）のグルコースを含む液体培地１００ｍｌをそれぞれ
５００ｍｌ容の三角フラスコに入れ、常法により滅菌を
行ったのち、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株（ＦＥＲＭＢＰ−１４３１）または同ＳＮ−１２４Ａ
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４２９）の斜面培養菌体を接種
し、それぞれ種菌培養を３５℃で１〜５日間行う。次
に、所定量（２２．０〜８３．３％）のグルコースおよ
び酵母エキス２．０％を含む液体培地２Ｌを３Ｌ容の発
酵槽に入れ、ここに上記の対応する基質濃度の種菌培養
液８０ｍｌを加えて培養温度３５℃、通気量２．０ｖｖ
ｍ、回転（攪拌）数１０００ｒｐｍの条件でそれぞれの
培地のグルコースが完全に消費されるまで（２〜１４日
間）培養する。培養終了後、各培養液中のエリスリトー
ル含量を高速液体クロマトグラフィーで測定して、第２
表の結果を得た。 【００１７】 【表２】 【００１８】試験例２ （発泡性、凝集性および親水性
試験） 酵母エキス１．６％，グルコース４０．０％を含む液体
培地５ｍｌを試験管に入れ、常法により滅菌を行う。こ
れにオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−１４３１）または同ＳＮ−１２４Ａ株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−１４２９）の斜面培養菌体を接種し、３
０℃で５日間振盪培養して各培養液における泡の生成状
態および培養停止後の菌体の凝集状態を観察した。培養
中、ＳＮ−γ９６株の培養液には発酵による泡の発生が
全く見られず、振盪による泡の生成が僅かに見られるの
みであった。また、振盪停止後は泡が直ちに消失し、菌
体は培養液中に均一に懸濁した状態になっている。一
方、ＳＮ−１２４Ａ株の場合は、培養中に激しく生成し
た泡が培養停止後もほとんど消失することなく、その量
は培地量（高さ）の８０％にも達しており、この泡は数
時間放置しても消失せず、菌体は凝集して底部および泡
の周辺に分離する。更に、上記の培養液に培養液と同量
のベンゼンを加えて激しく攪拌後、約３０分静置して菌
体の状態を観察したところ、ＳＮ−γ９６株の菌体は全
て水層にとどまり、ベンゼン層への移行が認められなか
ったのに対して、ＳＮ−１２４Ａ株の菌体は全てベンゼ
ン層に移行して水層が透明となり、二つの菌体の親水性
の相違が明瞭に観察された。 【００１９】参考例１ （変異株の造成） オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−１４２９）をグルコース２２．０％，酵母エ
キス０．５％を含む５．０ｍｌの液体培地に接種し、温
度３０℃で２日間振盪培養し、培養物を得た。次に、上
記で得られた培養物を２２．０％グルコース溶液で１０
０倍に希釈し、シャーレ中でゆるやかに攪拌しながら３
０ｃｍの距離から１５Ｗの紫外線ランンプ（東芝殺菌灯
「ＧＬ１５」）を４０分間照射した。終了後、シャーレ
中の処理液をグルコース２２．０％，酵母エキス０．５
％、寒天１．５％を含む寒天培地に塗布し、３０℃で４
日間静置培養して生育した菌株を選抜した。次に、上記
処理で選抜した菌株をグルコース２２．０％，酵母エキ
ス０．５％の液体培地に接種し、３０℃で２日間振盪培
養して培養物を得た。 【００２０】このようにして得た培養物を上記と同様に
して希釈したのち、上記と同じ条件により再度２０分間
紫外線照射した。照射後、処理液をグルコース３３．５
％，酵母エキス１．０％，寒天１．５％を含む寒天培地
に塗布し、３０℃で４日間静置培養し、生育した菌株を
選抜した。更に、上記より選抜した菌株をグルコース３
３．５％，酵母エキス１．０％を含む液体培地に接種
し、３０℃で２日間振盪培養して培養物を得た。次に、
上記で得られた培養物から遠心分離により菌体を分離
し、更にこの菌体を２Ｍのグルコースを含む０．２Ｍ酢
酸緩衝液（ｐＨ５．０）で２回洗浄したのち、１×１０
7 ｃｅｌｌ／ｍｌとなるように菌体を緩衝液に懸濁し、
１ｍｇ／ｍｌ濃度のＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニ
トロソグアニジンにより３０℃で３０分間処理した。終
了後、常法により菌体を分離し、更に緩衝液で洗浄した
のち、グルコース４０．０％，酵母エキス１．０％，寒
天１．５％を含む寒天培地に塗布して３０℃で５日間静
置培養し、生育した菌株を選抜した。 【００２１】次に、上記より選抜した菌株を酵母エキス
１．６％，グルコース４０．０％からなる液体培地に接
種し、３０℃で２日間振盪培養して培養物を得た。次い
で、上記で得られた培養物を１×１０7 ｃｅｌｌ／ｍｌ
に希釈したもの３ｍｌをガラス製の試験管に入れ、１８
ｃｍの距離からγ線（60Ｃｏ）を２００ｋＲａｄ照射し
た。終了後、処理菌体をグルコース４５．０％，酵母エ
キス１．６％，寒天１．５％を含む寒天培地に塗布し、
３０℃で５日間静置培養して生育した菌体を選抜して変
異株オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−１４３１）を得た。 【００２２】実施例１ （ａ）種菌培養液の調製 グルコース４０．０％，酵母エキス１．６％，寒天１．
５％からなる斜面培地にオーレオバシディウムｓｐ．Ｓ
Ｎ−γ９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４３１）の菌体を塗
布し、３５℃で５日間静置培養した。次に、グルコース
４０．０％，酵母エキス１．６％を含む液体培地（ｐＨ
４．９）１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容量の三角フラ
スコに上記斜面培養菌体を１白金耳植菌し、３５℃で３
日間培養を行った。更に、この培養液９ｍｌを上記と同
様の液体培地１５０ｍｌを入れた５００ｍｌ容量の三角
フラスコに接種し、３５℃で３日間振盪培養して培養物
を得た。 【００２３】（ｂ）本培養 グルコース４０．０％およびコーンスチープリカー６．
８％を含む液体培地（グルコースおよびコーンスチープ
リカーは予め別々に滅菌したものを使用）１５Ｌを３０
Ｌ容量の発酵槽に入れ、消泡剤（旭電化ＫＫ製「アデカ
ノールＬＧ−１０９」）３００ｐｐｍを加え、水酸化ナ
トリウムを用いて培地のｐＨを４．２に調整した。これ
に上記（ａ）で調製したオーレオバシディウムｓｐ．Ｓ
Ｎ−γ９６株の種菌培養液９００ｍｌを加え、温度３５
℃，通気量１．０ｖｖｍ，回転数４００ｒｐｍで４日間
培養を行った。培養終了後、高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）により培養液の分析を行った結果、グル
コースは完全に消費されており、培養液中のエリスリト
ール含量は１８．９％（収率４７．３％）、グリセリン
含量は３．５％（収率８．８％）であった。 【００２４】次に、この培養液６００ｍｌを採り、遠心
分離により菌体を除去し、更に活性炭による脱色および
イオン交換樹脂（ＩＲＡ−１４０：ＩＲ−１２０＝２：
１）による脱塩を行った。次いで、溶出液を糖濃度５０
％以上に濃縮したのち、徐冷してから結晶を析出させて
分離し、更にこの結晶を水から再結晶させて多面体様の
白色結晶を得た。この結晶の融点は１２１．０℃で、爽
やかな甘味を有していた。更に、この結晶は液体クロマ
トグラフィー，ガスクロマトグラフィー，旋光度および
核磁気共鳴スペクトルの測定によりエリスリトール（ｍ
ｅｓｏ−エリスリトール）と同定された。 【００２５】実施例２ グルコース５０％およびコーンスチープリカー６．８％
を含む培地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使
用）１５Ｌを容量３０Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤３００
ｐｐｍを加え、水酸化ナトリウムを用いて培地のｐＨを
４．２に調整した。これに実施例１（ａ）の方法に従っ
て調製したオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株
の種菌培養液９０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量１．
５ｖｖｍ，回転数４００ｒｐｍの条件で６日間培養を行
った。培養終了後、培養液の分析をしたところ、グルコ
ースは完全に消費されており、培養液中のエリスリトー
ル含量は２３．３％（収率４６．５％）、グリセリン含
量は４．５％（収率９．０％）であった。 【００２６】実施例３ グルコース６０．２％、酵母エキス２．０％の液体培地
（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを３
Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加えた。これ
に実施例１（ａ）の方法に従って調製したオーレオバシ
ディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８０ｍｌを
加え、温度３５℃，通気量２．５ｖｖｍ，回転数１００
０ｒｐｍの条件で７日間培養を行った。培養終了後、培
養液の分析をしたところ、グルコースは完全に消費され
ており、培養液中のエリスリトール含量は２８．８％
（収率４７．７％）、グリセリン含量は６．８％（収率
１１．３％）であった。 【００２７】実施例４ グルコース７５．５％、酵母エキス２．０％を含む液体
培地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌ
を容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で１１日間培養を行った。培養
終了後、培養液の分析を行ったところ、グルコースは完
全に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は
２４．５％（収率３２．４％）、グリセリン含量は１
１．０％（収率１４．３％）であった。 【００２８】実施例５ シュクロース５０．０％およびコーンスチープリカー
６．８％を含む培地（培地材料は予め別々に滅菌したも
のを使用）５Ｌを容量７Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤３０
０ｐｐｍを加え、水酸化ナトリウムを用いて培地のｐＨ
を４．２に調整した。これに実施例１（ａ）の方法に従
って調製したオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株の種菌培養液３００ｍｌを加え、温度３５℃，通気量
１．０ｖｖｍ，回転数８００ｒｐｍの条件で５日間培養
を行った。培養終了後、培養液の分析を行った結果、シ
ュクロースは完全に消費されており、培養液中のエリス
リトール含量は２３．６％（収率４７．２％）、グリセ
リン含量は５．０％（収率１０．０％）であった。 【００２９】実施例６ シュクロース６１．０％、酵母エキス２．０％の液体培
地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを
容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で６日間培養を行った。培養終
了後、培養液の分析をしたところ、シュクロースは完全
に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は２
４．６％（収率４０．３％）、グリセリン含量は７．８
％（収率１２．８％）であった。 【００３０】実施例７ シュクロース９３．３％、酵母エキス２．０％の液体培
地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを
容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で１５日間培養を行った。培養
終了後、培養液の分析をしたところ、シュクロースは完
全に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は
２１．６％（収率２３．０％）、グリセリン含量は４．
９％（収率５．３％）であった。 【００３１】 【発明の効果】本発明によれば、耐糖性が高く、耐熱性
やエリスリトール生産能に優れ、しかも培養の際に実質
的に泡を生じない新規変異株オーレオバシディウムｓ
ｐ．ＳＮ−γ９６株を用いてエリスリトールを製造する
ため、従来の方法よりも効率よくエリスリトールを製造
することができる。
ウム属に属する新規な人工変異株であるオーレオバシデ
ィウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株を用いて糖類をエリスリト
ールに変換することを特徴とするエリスリトールの製造
方法に関する。 【０００２】 【従来の技術】微生物を用いてエリスリトールを製造す
る方法はすでに公知であり、例えば特開昭６０−１１０
２９５号公報にはモニリエラ属に属する微生物を用いる
方法が記載されており、特開昭６１−３１０９１号公報
にはオーレオバシディウム属に属する微生物を用いる方
法が記載されている。しかし、これらの方法は原料糖か
らのエリスリトールへの変換率が高く、微生物自体の耐
糖性も比較的高いという点では優れているものの、これ
らの微生物は培養時に泡の発生が著しく、消泡剤を多量
に使用してもこれを有効に抑えられないという欠点があ
った。なお、上記特開昭６０−１１０２９５号等におい
ては、キサンタンガムなどを用いて泡の抑制を試みてい
るが、効果は必ずしも十分でない。 【０００３】 【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、エリス
リトール生産能の高い工業的利用可能な菌株について広
範な探索を行い、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１
２４Ａ株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４２９）を見出し、先に
特許を出願した。このＳＮ−１２４Ａ株は、エリスリト
ールへの変換能が非常に高く、増殖力も非常に旺盛であ
るという特徴があるが、耐糖性が十分でなく、その上培
養の際の泡の発生もかなり激しいという欠点があった。 【０００４】 【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは上
記オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株から耐
糖性，起泡性の改善された変異株を誘導、分離するべく
種々検討した結果、紫外線照射処理および突然変移誘起
剤による処理を反復して適用した菌株の中から耐糖性が
高く、起泡性のない菌株を分離することに成功し、本発
明に到達した。 【０００５】即ち、本発明は糖濃度４０％（Ｗ／Ｖ）以
上の環境（培地）中で良好な生育と高いエリスリトール
生産能を維持することができ、且つ菌体（細胞）が親水
性，非凝集性であり、液体培地中で好気的に培養すると
き、泡が実質的に生成しない新規変異株オーレオバシデ
ィウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４３
１）を糖類を炭素源として含む培地に接種し、好気的に
培養して培養液中にエリスリトールを生成蓄積させ、こ
れを採取することを特徴とするエリスリトールの製造方
法に関する。 【０００６】 【発明の実施の形態】本発明に用いるオーレオバシディ
ウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（変異株）と、その親株であ
るオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株（野生
株）の菌学的性質を示す。 〔Ａ〕オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株
（野生株）の菌学的性質 １）培地上の生育状況 ａ）顕微鏡的所見 栄養細胞の大きさ（＊１） ４〜７×４〜１５μ 栄養細胞の形状（＊１） 菌糸および酵母様の単胞、卵形等の形状を示 す。 栄養細胞の増殖方法（＊１）菌糸および酵母様細胞の多極出芽。 菌糸体（＊２） 真性菌糸を形成し、先端および側面に全分芽 形分生子を多数生ずる。 （註）＊１ ＹＭ寒天培地に２７℃、５日間培養。 ＊２ ポテトグルコース寒天によるスライド培養。 ｂ）寒天斜面（＊３） 生育 良好 光沢 無し 色調 日数の経過に伴い、白色からうすい黒色のコ ロニーに変化する。 （註）＊３ ＹＭ寒天培地 ｃ）液体培養（＊４） 表面生育 厚い皮膜形成 濁度 透明 沈査 大 （註）＊４ ＹＭ液体培地 【０００７】 ２）子のう胞子の形成 ポテトグルコース寒天培地 形成せず コーンミール寒天培地 形成せず ＹＭ寒天培地 形成せず ニンジンエキス寒天培地 形成せず Ｖ8 寒天培地 形成せず ３）生理学的性質 酸素要求性 好気的 生育温度 約４０℃まで 最適生育温度 ３５〜３７℃ 生育ｐＨ ２．５〜９．５ 最適生育ｐＨ ４〜７ ＫＮＯ3 資化性（＊５） 有り （ＮＨ4)2 ＳＯ4 資化性（＊５） 有り 尿素の分解 有り ゼラチンの液化 無し カロチノイドの生成 無し 有機酸の生成 有り アルブチン 無し デンプン様物質の生成 無し ビタミンの要求性（＊５） 有り グルコースの濃度（＊６）５０％ 生育 ＋＋ ６０％ 生育 ＋＋ 食塩濃度（＊７） ２％ 生育 ＋ ６％ 生育 − （註）＊５ Ｗｉｃｋｅｒｈａｍの合成培地を用いるＪ．Ｌｏｄｄｅｒら の方法により判定した。 ＊６ 寒天培地 ＊７ 液体培地 【０００８】４）糖の発酵性（＊５） グルコース ＋＋ ラクトース − ガラクトース − メリビオース − シュクロース ＋＋ ラフィノース − マルトース ＋ セロビオース − トレハロース − イヌリン − ５）糖、有機酸等の資化性 グルコース ＋＋ Ｄ−キシロース ± ガラクトース − エリスリトール − Ｄ−アラビノース − Ｌ−アラビノース − Ｄ−リボース ＋ シュクロース ＋ Ｌ−ラムノース − マルトース ＋ エタノール − セロビオース ＋ サリシン − Ｌ−ソルボース − リビトール − ガラクチトール − グリセリン ＋ トレハロース − ラクトース − メリビオース − Ｄ−マンニトール ＋ ラフィノース − メレチトース − α−メチル−Ｄ−グルコシド − イヌリン ± イノシトール − 可溶性デンプン − ＤＬ−乳酸 − コハク酸 ± クエン酸 ± 【０００９】〔Ｂ〕オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−
γ９６株（変異株）の菌学的性質 オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の菌学的性
質は、上記のオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４
Ａ株（野生株）の菌学的性質のうち、「糖、有機酸等の
資化性」において下記第１表に示すような相違を有する
こと以外は親株の菌学的性質と同一である。 【００１０】 【表１】【００１１】上記説明からも明らかなように、本発明に
用いる変異株オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株は、野生株であるオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−
１２４Ａ株と極めて類似した菌学的性質を有する。しか
しながら、本変異株は、後記試験例に示すように、耐糖
性が高いことおよび菌体が親水性で培養の際に泡を生成
しない点で従来のオーレオバシディウムに属する菌株と
相違する。即ち、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１
２４Ａ株（野生株）は、培地のグルコース濃度が３３．
５％以下の条件では、３７．０〜４１．５％の比較的良
好なエリスリトールへの変換率を示すが、グルコース濃
度が３９．５％以上になると、変換率の急激な低下が認
められ、グルコース濃度４５％では約１６％に低下す
る。これに対して、本発明に用いるオーレオバシディウ
ムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（変異株）は、培地のグルコー
ス濃度が６０％を超えても、エリスリトールへの変換率
はほとんど低下が認められず、グルコース濃度７５％で
も尚３２％の変換率を維持している。更に、このオーレ
オバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株は菌体が親水性で
培養の際に実質的に泡の発生が認められない。 【００１２】本発明者らは、本発明に用いる変異株につ
いての上記の特徴から、本変異株はオーレオバシディウ
ム属に属する新規な変異株であると判断し、本変異株を
オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株と命名し
た。本菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所にＦ
ＥＲＭ ＢＰ−１４３１として寄託されている。 【００１３】次に、本菌株を用いるエリスリトールの製
造方法について説明する。尚、以下の説明中に用いる％
は、特にことわりのない限り、容量（Ｗ／Ｖ）％であ
る。本菌株の培養は炭素源，窒素源，無機塩類等を含む
液体培地を用いて好気的条件下に実施される。液体培地
の炭素源としては、グルコース，フルクトース，シュク
ロース等の糖質が使用される。糖質の使用量（添加量）
は培地量の１０〜９５％、好ましくは２０〜７０％であ
る。窒素源としては微生物により利用可能な窒素化合
物、例えば酵母エキス，ペプトン，麦芽エキス，カザミ
ノ酸，コーンスチープリカー等が使用される。無機塩類
としては、例えば硫酸第一鉄，塩化カリウム，塩化ナト
リウム，リン酸二水素カリウム，水酸化カルシウム等の
塩類が使用される。尚、これらの炭素源，窒素源，無機
塩類の他に、更に必要に応じて、酵母の生育に必要な各
種の有機物，無機物あるいは通常用いられている消泡剤
等を添加することができる。 【００１４】培養は、前記組成の液体培地に本変異株の
菌体を直接接種するか、または別に前培養によって得ら
れる種培養液を接種して行われる。この種菌培養液の調
製は、例えば常法により斜面培養した菌をグルコース４
５．０％、コーンスチープリカー６．２％を含むｐＨ４
〜６の液体培地に１白金耳接種して３４〜３６℃の温度
で２〜４日間培養することにより行われる。培養温度は
微生物が生育しうる範囲内、即ち３０〜３８℃で行われ
るが、好ましくは３５〜３７℃の範囲である。なお、培
地のｐＨは４〜９、好ましくは４〜７の範囲で調整され
る。培養期間は使用する培地の種類および炭素源である
糖質の濃度により異なるが、通常４〜８日間程度であ
る。培養は、培地の栄養源が最大限に利用され、かつ培
養液中のエリスリトールの生成量が最高に達した時点で
培養を終了させることができるように、培養液中のエリ
スリトール量をガスクロマトグラフィー，高速液体クロ
マトグラフィー等の周知の方法により測定しながら行う
ことが望ましい。 【００１５】培養液中に蓄積されたエリスリトールは、
培養終了後、常法によって培養液中から分離される。即
ち、かかる場合に当該分野において通常使用されている
周知の手段、例えば濾過，遠心分離，イオン交換または
吸着クロマトグラフィー，溶媒抽出，蒸留，結晶化等の
操作が必要に応じて適宜組み合わせて用いられる。一例
を挙げれば、培養液から濾過，遠心分離等によって菌体
を除去し、次いでこの液を活性炭で処理して着色物質な
どを除き、更にイオン交換樹脂により脱イオンしたの
ち、液を濃縮してシロップとする。次いで、このシロッ
プからエリスリトールを結晶化して分離する。 【００１６】 【実施例】次に、本発明を試験例および実施例等により
詳しく説明するが、本発明はこれに限定されるものでは
ない。 試験例１ （耐糖性試験） 酵母エキス２．０％および所定量（２２．０〜８３．３
％）のグルコースを含む液体培地１００ｍｌをそれぞれ
５００ｍｌ容の三角フラスコに入れ、常法により滅菌を
行ったのち、オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株（ＦＥＲＭＢＰ−１４３１）または同ＳＮ−１２４Ａ
株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４２９）の斜面培養菌体を接種
し、それぞれ種菌培養を３５℃で１〜５日間行う。次
に、所定量（２２．０〜８３．３％）のグルコースおよ
び酵母エキス２．０％を含む液体培地２Ｌを３Ｌ容の発
酵槽に入れ、ここに上記の対応する基質濃度の種菌培養
液８０ｍｌを加えて培養温度３５℃、通気量２．０ｖｖ
ｍ、回転（攪拌）数１０００ｒｐｍの条件でそれぞれの
培地のグルコースが完全に消費されるまで（２〜１４日
間）培養する。培養終了後、各培養液中のエリスリトー
ル含量を高速液体クロマトグラフィーで測定して、第２
表の結果を得た。 【００１７】 【表２】 【００１８】試験例２ （発泡性、凝集性および親水性
試験） 酵母エキス１．６％，グルコース４０．０％を含む液体
培地５ｍｌを試験管に入れ、常法により滅菌を行う。こ
れにオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−１４３１）または同ＳＮ−１２４Ａ株（Ｆ
ＥＲＭ ＢＰ−１４２９）の斜面培養菌体を接種し、３
０℃で５日間振盪培養して各培養液における泡の生成状
態および培養停止後の菌体の凝集状態を観察した。培養
中、ＳＮ−γ９６株の培養液には発酵による泡の発生が
全く見られず、振盪による泡の生成が僅かに見られるの
みであった。また、振盪停止後は泡が直ちに消失し、菌
体は培養液中に均一に懸濁した状態になっている。一
方、ＳＮ−１２４Ａ株の場合は、培養中に激しく生成し
た泡が培養停止後もほとんど消失することなく、その量
は培地量（高さ）の８０％にも達しており、この泡は数
時間放置しても消失せず、菌体は凝集して底部および泡
の周辺に分離する。更に、上記の培養液に培養液と同量
のベンゼンを加えて激しく攪拌後、約３０分静置して菌
体の状態を観察したところ、ＳＮ−γ９６株の菌体は全
て水層にとどまり、ベンゼン層への移行が認められなか
ったのに対して、ＳＮ−１２４Ａ株の菌体は全てベンゼ
ン層に移行して水層が透明となり、二つの菌体の親水性
の相違が明瞭に観察された。 【００１９】参考例１ （変異株の造成） オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−１２４Ａ株（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−１４２９）をグルコース２２．０％，酵母エ
キス０．５％を含む５．０ｍｌの液体培地に接種し、温
度３０℃で２日間振盪培養し、培養物を得た。次に、上
記で得られた培養物を２２．０％グルコース溶液で１０
０倍に希釈し、シャーレ中でゆるやかに攪拌しながら３
０ｃｍの距離から１５Ｗの紫外線ランンプ（東芝殺菌灯
「ＧＬ１５」）を４０分間照射した。終了後、シャーレ
中の処理液をグルコース２２．０％，酵母エキス０．５
％、寒天１．５％を含む寒天培地に塗布し、３０℃で４
日間静置培養して生育した菌株を選抜した。次に、上記
処理で選抜した菌株をグルコース２２．０％，酵母エキ
ス０．５％の液体培地に接種し、３０℃で２日間振盪培
養して培養物を得た。 【００２０】このようにして得た培養物を上記と同様に
して希釈したのち、上記と同じ条件により再度２０分間
紫外線照射した。照射後、処理液をグルコース３３．５
％，酵母エキス１．０％，寒天１．５％を含む寒天培地
に塗布し、３０℃で４日間静置培養し、生育した菌株を
選抜した。更に、上記より選抜した菌株をグルコース３
３．５％，酵母エキス１．０％を含む液体培地に接種
し、３０℃で２日間振盪培養して培養物を得た。次に、
上記で得られた培養物から遠心分離により菌体を分離
し、更にこの菌体を２Ｍのグルコースを含む０．２Ｍ酢
酸緩衝液（ｐＨ５．０）で２回洗浄したのち、１×１０
7 ｃｅｌｌ／ｍｌとなるように菌体を緩衝液に懸濁し、
１ｍｇ／ｍｌ濃度のＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニ
トロソグアニジンにより３０℃で３０分間処理した。終
了後、常法により菌体を分離し、更に緩衝液で洗浄した
のち、グルコース４０．０％，酵母エキス１．０％，寒
天１．５％を含む寒天培地に塗布して３０℃で５日間静
置培養し、生育した菌株を選抜した。 【００２１】次に、上記より選抜した菌株を酵母エキス
１．６％，グルコース４０．０％からなる液体培地に接
種し、３０℃で２日間振盪培養して培養物を得た。次い
で、上記で得られた培養物を１×１０7 ｃｅｌｌ／ｍｌ
に希釈したもの３ｍｌをガラス製の試験管に入れ、１８
ｃｍの距離からγ線（60Ｃｏ）を２００ｋＲａｄ照射し
た。終了後、処理菌体をグルコース４５．０％，酵母エ
キス１．６％，寒天１．５％を含む寒天培地に塗布し、
３０℃で５日間静置培養して生育した菌体を選抜して変
異株オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株（ＦＥ
ＲＭ ＢＰ−１４３１）を得た。 【００２２】実施例１ （ａ）種菌培養液の調製 グルコース４０．０％，酵母エキス１．６％，寒天１．
５％からなる斜面培地にオーレオバシディウムｓｐ．Ｓ
Ｎ−γ９６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４３１）の菌体を塗
布し、３５℃で５日間静置培養した。次に、グルコース
４０．０％，酵母エキス１．６％を含む液体培地（ｐＨ
４．９）１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容量の三角フラ
スコに上記斜面培養菌体を１白金耳植菌し、３５℃で３
日間培養を行った。更に、この培養液９ｍｌを上記と同
様の液体培地１５０ｍｌを入れた５００ｍｌ容量の三角
フラスコに接種し、３５℃で３日間振盪培養して培養物
を得た。 【００２３】（ｂ）本培養 グルコース４０．０％およびコーンスチープリカー６．
８％を含む液体培地（グルコースおよびコーンスチープ
リカーは予め別々に滅菌したものを使用）１５Ｌを３０
Ｌ容量の発酵槽に入れ、消泡剤（旭電化ＫＫ製「アデカ
ノールＬＧ−１０９」）３００ｐｐｍを加え、水酸化ナ
トリウムを用いて培地のｐＨを４．２に調整した。これ
に上記（ａ）で調製したオーレオバシディウムｓｐ．Ｓ
Ｎ−γ９６株の種菌培養液９００ｍｌを加え、温度３５
℃，通気量１．０ｖｖｍ，回転数４００ｒｐｍで４日間
培養を行った。培養終了後、高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）により培養液の分析を行った結果、グル
コースは完全に消費されており、培養液中のエリスリト
ール含量は１８．９％（収率４７．３％）、グリセリン
含量は３．５％（収率８．８％）であった。 【００２４】次に、この培養液６００ｍｌを採り、遠心
分離により菌体を除去し、更に活性炭による脱色および
イオン交換樹脂（ＩＲＡ−１４０：ＩＲ−１２０＝２：
１）による脱塩を行った。次いで、溶出液を糖濃度５０
％以上に濃縮したのち、徐冷してから結晶を析出させて
分離し、更にこの結晶を水から再結晶させて多面体様の
白色結晶を得た。この結晶の融点は１２１．０℃で、爽
やかな甘味を有していた。更に、この結晶は液体クロマ
トグラフィー，ガスクロマトグラフィー，旋光度および
核磁気共鳴スペクトルの測定によりエリスリトール（ｍ
ｅｓｏ−エリスリトール）と同定された。 【００２５】実施例２ グルコース５０％およびコーンスチープリカー６．８％
を含む培地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使
用）１５Ｌを容量３０Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤３００
ｐｐｍを加え、水酸化ナトリウムを用いて培地のｐＨを
４．２に調整した。これに実施例１（ａ）の方法に従っ
て調製したオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株
の種菌培養液９０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量１．
５ｖｖｍ，回転数４００ｒｐｍの条件で６日間培養を行
った。培養終了後、培養液の分析をしたところ、グルコ
ースは完全に消費されており、培養液中のエリスリトー
ル含量は２３．３％（収率４６．５％）、グリセリン含
量は４．５％（収率９．０％）であった。 【００２６】実施例３ グルコース６０．２％、酵母エキス２．０％の液体培地
（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを３
Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加えた。これ
に実施例１（ａ）の方法に従って調製したオーレオバシ
ディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８０ｍｌを
加え、温度３５℃，通気量２．５ｖｖｍ，回転数１００
０ｒｐｍの条件で７日間培養を行った。培養終了後、培
養液の分析をしたところ、グルコースは完全に消費され
ており、培養液中のエリスリトール含量は２８．８％
（収率４７．７％）、グリセリン含量は６．８％（収率
１１．３％）であった。 【００２７】実施例４ グルコース７５．５％、酵母エキス２．０％を含む液体
培地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌ
を容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で１１日間培養を行った。培養
終了後、培養液の分析を行ったところ、グルコースは完
全に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は
２４．５％（収率３２．４％）、グリセリン含量は１
１．０％（収率１４．３％）であった。 【００２８】実施例５ シュクロース５０．０％およびコーンスチープリカー
６．８％を含む培地（培地材料は予め別々に滅菌したも
のを使用）５Ｌを容量７Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤３０
０ｐｐｍを加え、水酸化ナトリウムを用いて培地のｐＨ
を４．２に調整した。これに実施例１（ａ）の方法に従
って調製したオーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６
株の種菌培養液３００ｍｌを加え、温度３５℃，通気量
１．０ｖｖｍ，回転数８００ｒｐｍの条件で５日間培養
を行った。培養終了後、培養液の分析を行った結果、シ
ュクロースは完全に消費されており、培養液中のエリス
リトール含量は２３．６％（収率４７．２％）、グリセ
リン含量は５．０％（収率１０．０％）であった。 【００２９】実施例６ シュクロース６１．０％、酵母エキス２．０％の液体培
地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを
容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で６日間培養を行った。培養終
了後、培養液の分析をしたところ、シュクロースは完全
に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は２
４．６％（収率４０．３％）、グリセリン含量は７．８
％（収率１２．８％）であった。 【００３０】実施例７ シュクロース９３．３％、酵母エキス２．０％の液体培
地（培地材料は予め別々に滅菌したものを使用）２Ｌを
容量３Ｌの発酵槽に入れ、消泡剤２００ｐｐｍを加え
た。これに実施例１（ａ）の方法に従って調製したオー
レオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９６株の種菌培養液８
０ｍｌを加え、温度３５℃，通気量２．０ｖｖｍ，回転
数１０００ｒｐｍの条件で１５日間培養を行った。培養
終了後、培養液の分析をしたところ、シュクロースは完
全に消費されており、培養液中のエリスリトール含量は
２１．６％（収率２３．０％）、グリセリン含量は４．
９％（収率５．３％）であった。 【００３１】 【発明の効果】本発明によれば、耐糖性が高く、耐熱性
やエリスリトール生産能に優れ、しかも培養の際に実質
的に泡を生じない新規変異株オーレオバシディウムｓ
ｐ．ＳＮ−γ９６株を用いてエリスリトールを製造する
ため、従来の方法よりも効率よくエリスリトールを製造
することができる。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ
Ｃ１２Ｒ 1:645）
(72)発明者 石塚 博明
茨城県筑波郡谷田部町稲荷前17−12 沼
尻アパート208
(72)発明者 若生 勝雄
埼玉県行田市持田５−10−２
(72)発明者 川口 嶽
埼玉県行田市壱里山町21−６
(72)発明者 小田 恒郎
東京都秋川市下代継128
(56)参考文献 特開 昭60−110295（ＪＰ，Ａ)
特開 昭61−31091（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名)
C12P 7/18
C12N 1/14
ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)
ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 １．糖濃度４０％（Ｗ／Ｖ）以上の環境（培地）中で良
好な生育と高いエリスリトール生産能を維持することが
でき、且つ菌体（細胞）が親水性，非凝集性であり、液
体培地中で好気的に培養するとき、泡が実質的に生成し
ない新規変異株オーレオバシディウムｓｐ．ＳＮ−γ９
６株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４３１）を糖類を炭素源とし
て含む培地に接種し、好気的に培養して培養液中にエリ
スリトールを生成蓄積させ、これを採取することを特徴
とするエリスリトールの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29123896A JP2776479B2 (ja) | 1996-10-15 | 1996-10-15 | エリスリトールの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29123896A JP2776479B2 (ja) | 1996-10-15 | 1996-10-15 | エリスリトールの製造方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21031587A Division JP2626692B2 (ja) | 1987-08-26 | 1987-08-26 | 新規変異株 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09168392A JPH09168392A (ja) | 1997-06-30 |
| JP2776479B2 true JP2776479B2 (ja) | 1998-07-16 |
Family
ID=17766274
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29123896A Expired - Lifetime JP2776479B2 (ja) | 1996-10-15 | 1996-10-15 | エリスリトールの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2776479B2 (ja) |
-
1996
- 1996-10-15 JP JP29123896A patent/JP2776479B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH09168392A (ja) | 1997-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5036011A (en) | Novel Aureobasidium sp. microorganisms and method for obtaining the same, and method for preparing erythritol with the same | |
| JP3192487B2 (ja) | 発酵方法 | |
| EP1616018A1 (en) | METHOD OF PRODUCING 1,2-PROPANEDIOL USING i KLEBSIELLA PNEUMONIAE /i | |
| KR100271137B1 (ko) | 신규 미생물 트리코스포로노이데스 마디다 디에스911 및 이 균주를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
| US5939311A (en) | Mutant trichosporonoides and a process for producing erythritol using the said microorganism | |
| JP2776479B2 (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
| JPH0411189B2 (ja) | ||
| JP2626692B2 (ja) | 新規変異株 | |
| JP2845385B2 (ja) | 新規変異株及びそれを用いるグリセリンの製造方法 | |
| WO1997026323A1 (fr) | Variant possedant une capacite elevee de production d'erythritol et procede de production d'erythritol | |
| JPS6131091A (ja) | 発酵によるポリオ−ル類の製造方法 | |
| JP4194152B2 (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
| KR0177478B1 (ko) | 에리스리톨 생성능을 갖는 칸디다속 균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
| JP2696092B2 (ja) | 新規微生物を用いるエリスリトールの製造方法 | |
| KR0178085B1 (ko) | 트리코스포로노이데스 속 변이균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법 | |
| CN1081714A (zh) | 利用微生物生产d-酒石酸的方法 | |
| JPS639834B2 (ja) | ||
| US2938835A (en) | Production of mutants of the genus penicillium | |
| JPH04635B2 (ja) | ||
| JPS6221509B2 (ja) | ||
| JPS6214789A (ja) | ピルビン酸の製造法 | |
| JPH0722504B2 (ja) | 新規微生物及びそれを用いるエリスリト−ルの製造方法 | |
| KR0162168B1 (ko) | 에리스리톨의 제조방법 | |
| JPH05284989A (ja) | 微生物セルロースの生産方法 | |
| JPS6131080A (ja) | 新規微生物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 10 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080501 |