JPS63109789A - オリゴ糖の製造法 - Google Patents

オリゴ糖の製造法

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JPS63109789A
JPS63109789A JP61253857A JP25385786A JPS63109789A JP S63109789 A JPS63109789 A JP S63109789A JP 61253857 A JP61253857 A JP 61253857A JP 25385786 A JP25385786 A JP 25385786A JP S63109789 A JPS63109789 A JP S63109789A
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辰彦 菅
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    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/38Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、ビフィドバクテリウム菌増殖促進因子である
オリゴ糖を製造する方法に関するものである。
従来の技術 一般式Ga1−(Gal)n−Glc (但し式中Ga
lはガラクトース残基、Glcはグルコース残基、nは
1〜4の整数を、それぞれ表わす)で示されるオリゴ糖
(以下、単にオリゴ糖という)は、母乳オリゴ糖の主要
構成成分であり、且つヒト腸内に生息する有用細菌・ビ
フイドバクテリツム菌の増殖促進因子として有用なもの
である。
上記オリゴ糖の従来の製造法としては、乳糖に7スベル
ギルス・オリゼのβ−ガラクトシダーゼを作用させる方
法(特公昭58−20266号公報)が代表的なもので
ある。この製法は、温度20〜50℃、乳糖濃度的10
〜50%、pH3〜8、酵素濃度1〜100単位/瞳1
を推奨反応条件とする。
上記乳糖濃度の上限は、アスペルギルス・オリゼのβ−
ガラクトシダーゼの作用適温と関係がある。すなわち、
乳糖は溶解度があまり高くなく、用いるβ−ガラクトシ
ダーゼの作用適温の範囲内では50%程度しか水に溶解
させることができない。
一明が解 しようとするr照点 アスペルギルス・オリゼが生産したβ−がラクトシダー
ゼを用いる上記従来のオリゴ糖製造法は、他の起源のβ
−ガラクトシダーゼを用いる場合よりも短時間で高いオ
リゴ糖収率を与える点ですぐれているが、それでも、乳
糖がらオリゴ糖への転換率が最高27%程度と低く、反
応効率が悪いことが問題であった。また、未反応の乳糖
や副生するガラクトース、グルコース等の単糖類な多量
に含む反応生成物からオリゴ糖だけを分離するのは難し
いため、オリゴ糖を利用する場合は上記反応生成物をほ
ぼそのまま利用することになるが、それは多くの場合に
無用の乳糖や単糖類を併用することになり、オリゴ糖を
添加した飲食物を高カロリーにしたり乳糖不耐症者にと
って摂取し難いものとする恐れがある。そのため、製品
の利用範囲や使用量が限定されるという不都合があった
さらに、上記従来の製法は、反応液の糖濃度が低いため
、反応終了後に雑菌汚染防止と製品輸送コスト低減のた
めの濃縮が必要で、それに要する熱エネルギーコストや
設備費が大きいという問題もあった。
本発明は、β−ガラクトシダーゼを用いる従来のオリゴ
糖製造法における上述のような問題点を解決することを
目的とする。
刑蓮点を解決するための 段 上記課題を解決するために本発明において採択された手
段は、乳糖にアスペルギルス・オリゼのβ−ガラクトシ
ダーゼを作用させてオリゴ糖を製造するに当り、酵素反
応液の初期乳糖濃度を50〜90%(w/v)とし、反
応温度を55℃以上ただし反応液中におけるβ−ガラク
トシダーゼの失活温度以下の温度とすることを特徴とす
る。
この製法は、7スベルギルス・オリゼのβ−がラクトシ
ダーゼが高濃度乳糖溶液中では通常の作用適温の上限を
こえる高い温度においても失活することなく乳糖からオ
リゴ糖への転移反応を触媒するという、本発明者らによ
る新規な知見に基づくものである。すなわち、本発明の
製法においては、上述のようなβ−がラクトシグーゼの
特異な性質が反応液を高温にして乳糖濃度を高(するこ
とを可能にし、同時に、結晶析出のおそれなしに乳糖濃
度を高くできることがβ−ガラクトシダーゼの失活を防
いでいる。
第1図は乳糖水溶液中におけるアスペルギルス・オリゼ
のβ−ガラクトシダーゼの失活温度を示し、失活温度は
乳糖濃度1こほぼ比例して高くなることがわかる。した
がって、本発明の製法における反応温度は、乳糖濃度が
高いほど高(することができる。
反応温度を高くして初期乳糖濃度を高くすることは、単
に反応装置利用効率の向上や製品濃縮費の低減を可能に
するにとどまらず、オリゴ糖収率の向上や反応時間の短
縮、さらには酵素使用量の節減に有効である。すなわち
、@2図に示したように、最適反応温度を採用した場合
におけるオリゴ糖の収率(乳糖からオリゴ糖への転換率
)は反応液の初期乳糖濃度が高いほどよくなる。また、
第3図に示したように、初期乳糖濃度が同じ場合でも、
反応温度が高いほど、最高オリゴ糖収率に達するのに要
する反応時間が短縮され、また酵素量が少なくてすむ。
また、酵素反応を終わらせるため反応液を加熱して酵素
失活温度まで反応液温度を上昇させる際、あまり長時間
を要するとその間にオリゴ糖の分解反応が急激に進行し
、オリゴ糖収率の低下や変動を招き易いが、反応温度が
高い場合は酵素の失活温度に達するまでに要する加熱時
間が短くてすむので、反応生成物の組成が安定する。
以上の事実を考慮し、本発明を実施する際は初期乳糖濃
度を50〜90%(III/v)の範囲でなるべく高(
し、その乳糖:g1度において酵素が作用し得る最高の
温度またはそれに近い温度を採用してオリゴ糖収率が最
高になったとき反応を打切ることが望ましい。
pHその池の反応条件は、従来の製法の場合と同様にし
て差支えない。また、反応原料としては、高純度4L糖
のほかにも、粗製乳糖や高率で乳糖を含有する物質、た
とえば付性ホエイ粉(乳糖含有率的71%)、脱塩水エ
イ粉(乳糖含有率約75%以上)などを用いることがで
きる。
反応生成物は、そのまま、あるいは適宜脱色精製、濃縮
、乾燥、その他飲食物とするのに必要な加工を施して、
ビフィドバクテリウム菌増殖促進作用がある甘味糖混合
物もしくは飲食物として利用することができる。もちろ
ん、これを精製オリゴ糖の製造に利用することら可能で
、乳糖や単糖類が少ないため容易に高純度のオリゴ糖を
得ることができる。
ス隻例 以下、実施例を示して本発明を説明する。
実施例 1 食品グレードの乳糖80gと水48m1とを混合し、沸
B浴中で還流下に加熱して80%w/vの乳糖溶液10
0m1を得た。
これを65°Cの温浴に入れて浴温と同温度まで冷却し
たのちアスペルギルス・オリゼのβ−ガラクトシダーゼ
(ラクターゼY−400,株式会社ヤクルト本社製品)
800単位(0,5mlの水に溶解し50°Cに調温)
を加え、そのまま4時開反応させた。その後、反応液を
90°Cに20分間加熱して酵素を失活させた。反応液
の糖組成を高速液体クロマトグラフィーによ1)調べた
ところ、オリゴ糖31%、三糖類43%、単糖類26%
であった。
発明の効果 以上詳述したところからすでに明らかなように、本発明
によれば、 ■ オリゴ糖含有率が高く且つ糖組成が安定した反応生
成物が得られる。
■ 反応に要するβ−〃ラクトシグーゼの量が少なくて
すむ。
■ オリゴ糖収率の向上により、製造設備の利用効率が
向上する。
■ 反応終了後に反応液を濃縮するために必要な熱エネ
ルギーが少なくてすむ。
など、顕著な効果が奏される。
【図面の簡単な説明】
f51図:乳糖濃度とβ−ガラクトシダーゼ失活温度と
の関係を示すグラフ 第2図:乳糖濃度とオリゴ糖収率との関係を示すグラフ
第3図:反応時間とオリゴ糖収率との関係を示すグラフ
(初期乳糖濃度80%w/v)

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 乳糖にアスペルギルス・オリゼのβ−ガラクトシダーゼ
    を作用させて一般式Gal−(Gal)n−Glc(但
    し式中Galはガラクトース残基、Glcはグルコース
    残基、nは1〜4の整数を、それぞれ表わす)で示され
    るオリゴ糖を製造するにあたり、酵素反応液の初期乳糖
    濃度を50〜90%(w/v)とし、反応温度を55℃
    以上ただし反応液中におけるβ−ガラクトシダーゼの失
    活温度以下の温度とすることを特徴とするオリゴ糖の製
    造法。
JP61253857A 1986-10-27 1986-10-27 オリゴ糖の製造法 Granted JPS63109789A (ja)

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CA000549981A CA1334394C (en) 1986-10-27 1987-10-22 Method for producing oligosaccharides
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