JPS62195284A - 微生物の固定化物及びその製法 - Google Patents
微生物の固定化物及びその製法Info
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- JPS62195284A JPS62195284A JP3502186A JP3502186A JPS62195284A JP S62195284 A JPS62195284 A JP S62195284A JP 3502186 A JP3502186 A JP 3502186A JP 3502186 A JP3502186 A JP 3502186A JP S62195284 A JPS62195284 A JP S62195284A
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Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の目的〕
本発明は微生物の固定化物及びその製法に関するもので
ある。
ある。
更に詳細には、本発明は、微生物を懸濁状態で固定化し
た物及びその製法に関するものである。
た物及びその製法に関するものである。
本発明の微生物の懸濁液をアルギン酸カルシウムの皮膜
で囲包してなる微生物の固定化物は、一般な微生物の代
謝生産物であるアルコール、アミノ酸等の物質生産、遺
伝子操作微生物の特殊代謝生産物の生産、各種物質の転
換反応等にきわめて有用である。
で囲包してなる微生物の固定化物は、一般な微生物の代
謝生産物であるアルコール、アミノ酸等の物質生産、遺
伝子操作微生物の特殊代謝生産物の生産、各種物質の転
換反応等にきわめて有用である。
従来、微生物の固定化はアクリルアミド、ゼラチン、ア
ルギン酸カルシウム、カラギーナン、エポキシ樹脂など
を用いてビーズ状にゲル化させ固定化していた。
ルギン酸カルシウム、カラギーナン、エポキシ樹脂など
を用いてビーズ状にゲル化させ固定化していた。
しかし、このようにして固定化された微生物は培養液中
でゲル中に培地成分を取り込んで、さらに生成物を排出
しなければならず、粒子が大きくなったりすると物質交
換が低効率となる欠点があった。
でゲル中に培地成分を取り込んで、さらに生成物を排出
しなければならず、粒子が大きくなったりすると物質交
換が低効率となる欠点があった。
本発明は、微生物を液中に懸濁状でアルギン酸カルシウ
ムの皮膜で囲包し固定化してなるものであって、微生物
が液中に懸濁されているために、培養栄養源、物質の流
入及び代謝産物の流出はきわめて容易であるなどのすぐ
れた効果を示すものである。
ムの皮膜で囲包し固定化してなるものであって、微生物
が液中に懸濁されているために、培養栄養源、物質の流
入及び代謝産物の流出はきわめて容易であるなどのすぐ
れた効果を示すものである。
本発明の微生物の固定化物の製法は、カルシウムイオン
を存在させた微生物懸濁液をアルギン酸ナトリウム溶液
に滴下し、液滴の表面にアルギン酸カルシウムの皮膜を
形成せしめることにある。
を存在させた微生物懸濁液をアルギン酸ナトリウム溶液
に滴下し、液滴の表面にアルギン酸カルシウムの皮膜を
形成せしめることにある。
本発明に使用する微生物は、酵母、細菌、かびなどいず
れの微生物でもよい。
れの微生物でもよい。
微生物は、水、培養液１代謝物質含有液、特殊物質含有
液などに懸濁させる。
液などに懸濁させる。
また、微生物の懸濁液は、微生物を培養して得た微生物
含有培養液をそのまま使用することもできる。
含有培養液をそのまま使用することもできる。
懸濁液中の微生物は、固定化後の増殖を考慮すれば各刈
高濃度とする必要はなく、約１０１ケ〜１０６ケ／ ｍ
Ｑ程度の懸濁濃度でよい。
高濃度とする必要はなく、約１０１ケ〜１０６ケ／ ｍ
Ｑ程度の懸濁濃度でよい。
次いで、この微生物懸濁液にカルシウムイオンを形成す
るカルシウム塩１例えば塩化カルシウムが添加される。
るカルシウム塩１例えば塩化カルシウムが添加される。
カルシウム塩は、懸濁液滴を囲包するアルギン酸カルシ
ウムの皮膜を形成する量であれば任意でよいが、懸濁液
に対して０．５〜１．０％程度の添加が好適である。
ウムの皮膜を形成する量であれば任意でよいが、懸濁液
に対して０．５〜１．０％程度の添加が好適である。
別に、アルギン酸ナトリウム溶液を調製しておくが、ア
ルギン酸ナトリウム０．５％〜５％程度の水溶液が好ま
しい。
ルギン酸ナトリウム０．５％〜５％程度の水溶液が好ま
しい。
次いで、カルシウムイオンを存在させた微生物の懸濁液
を液滴としてアルギン酸ナトリウム溶液に滴下し、微生
物の懸濁液の周囲にアルギン酸カルシウムの皮膜を形成
させるものである。
を液滴としてアルギン酸ナトリウム溶液に滴下し、微生
物の懸濁液の周囲にアルギン酸カルシウムの皮膜を形成
させるものである。
微生物の懸濁液の滴下はいかなる方法でもよいが、容器
から多数の内径１〜１０ａｕｓ程度のガラス管を下方に
固定した滴下容器を作り、これに微生物の懸濁液を入れ
蓋をして密閉し、容器内上方空間部と外界をゴム管でつ
なぎ、該ゴム管を通して空気を少量づつ間けつ的に容器
内に送れば、微生物の懸濁液は液滴となって落下する方
法などがよい。
から多数の内径１〜１０ａｕｓ程度のガラス管を下方に
固定した滴下容器を作り、これに微生物の懸濁液を入れ
蓋をして密閉し、容器内上方空間部と外界をゴム管でつ
なぎ、該ゴム管を通して空気を少量づつ間けつ的に容器
内に送れば、微生物の懸濁液は液滴となって落下する方
法などがよい。
アルギン酸ナトリウム液に落下した微生物の懸濁液は、
そこに含まれるカルシウムイオンがアルギン酸ナトリウ
ムと反応して、アルギン酸カルシウムとなり、アルギン
酸カルシウムは硬化するので、液滴を囲包し皮膜となる
のである。
そこに含まれるカルシウムイオンがアルギン酸ナトリウ
ムと反応して、アルギン酸カルシウムとなり、アルギン
酸カルシウムは硬化するので、液滴を囲包し皮膜となる
のである。
所望の厚さの皮膜が形成されたら、固定化物をアルギン
酸ナトリウム液から分離し、１〜４回程度水洗し、カル
シウムイオンを除去するのがよい。
酸ナトリウム液から分離し、１〜４回程度水洗し、カル
シウムイオンを除去するのがよい。
得られた微生物の固定化物は、培養タンクに投入し、例
えばアルコール発酵に何度でも使用でき、また、カラム
につめて、培養液を通液することによって例えばアルコ
ールを生産させることができるものである。
えばアルコール発酵に何度でも使用でき、また、カラム
につめて、培養液を通液することによって例えばアルコ
ールを生産させることができるものである。
次に本発明の実施例を示す。
実施例１゜
グルコース１−０ｇ７．１００ｍ１ Ｋｏ、ｐｏ４０
．３ｇ／１００ｍｊ１ＭｇＳＯ４０，０５ｇ／ １００
ｍＡ （ＮＨ，）、５０．０．５ｇ／ １００ｍＲＣ
ａＣ１，０，０５ｇ／ １００ｍ（ｌ 酵母エキス０
．５ｇ／ １００ｍｎからなる培地ＩＱを小型培養槽に
仕込み１２１℃１５分間滅菌し、ｐＨ５，５に調整した
。 この培地にサツカロマイセス・セレビシェを接種し
、３０℃で通気量３Ｑ／ｗｉｎ攪拌数３０Ｏｒｐｍで２
４時間培養した。得られた培養液には別に滅菌した１０
％塩化カルシウム液を最終濃度１．０％になる様に加え
、１．０５ Ｑを得た。このカルシウム添加酵母培養液
を別に滅菌した１、０％アルギン酸ナトリウムの溶液に
内径５ＩＩＩ１１のガラス管より滴下し、３〜５秒で、
アルギン酸カルシウムの皮膜を形成した５〜６ｗｍの球
体を得た。この球体を無菌の脱イオン水５Ｑに入れゆる
い攪拌を行い１時間放置しさらに２回水を交換し過剰の
カルシウムを除去し、うすいアルギン酸カルシウムの皮
膜でつつまれた酵母懸濁菌体１゜３ｋｇを得た。
．３ｇ／１００ｍｊ１ＭｇＳＯ４０，０５ｇ／ １００
ｍＡ （ＮＨ，）、５０．０．５ｇ／ １００ｍＲＣ
ａＣ１，０，０５ｇ／ １００ｍ（ｌ 酵母エキス０
．５ｇ／ １００ｍｎからなる培地ＩＱを小型培養槽に
仕込み１２１℃１５分間滅菌し、ｐＨ５，５に調整した
。 この培地にサツカロマイセス・セレビシェを接種し
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４時間培養した。得られた培養液には別に滅菌した１０
％塩化カルシウム液を最終濃度１．０％になる様に加え
、１．０５ Ｑを得た。このカルシウム添加酵母培養液
を別に滅菌した１、０％アルギン酸ナトリウムの溶液に
内径５ＩＩＩ１１のガラス管より滴下し、３〜５秒で、
アルギン酸カルシウムの皮膜を形成した５〜６ｗｍの球
体を得た。この球体を無菌の脱イオン水５Ｑに入れゆる
い攪拌を行い１時間放置しさらに２回水を交換し過剰の
カルシウムを除去し、うすいアルギン酸カルシウムの皮
膜でつつまれた酵母懸濁菌体１゜３ｋｇを得た。
実施例２゜
グルコース１．０ｇ／ １００ｍＱ Ｋｏ、ｐｏ４０
−３ｇ／ １００＋ｏｌ１ＭｇＳ０４０．０５ｇ／１０
０履ａ （ＮＨ，）、ＳＯ４０，５ｇ／ １００ｓ
＋ＭＣａＣ１，０，０５ｇ／ １００ｍＱ 酵母エキ
ス０．５ｇ／１００−からなる培地２Ｑを小型培養槽に
仕込み１２１℃１５分間滅菌を行い、 ＰＨ５，５に調
整した。この培地にサツカロマイセス・セレビシェを接
種し、３０℃で通気量５Ｍ／ａｋｉｎ攪拌数３０Ｏｒｐ
ｍ＋で２４時間培養した。培養液を遠心分離５０００ｒ
ｐｍ １０分して菌体を集め、この菌体に滅菌を行った
１％塩化カルシウム溶液ＩＱを加え菌体懸濁液を調整し
た。この懸濁液を滅菌された０、７％アルギン酸ナトリ
ウム溶液（記文フードケミファＨタイプ）に内径５ｍｍ
のガラス管より滴下し３〜５秒後にアルギン酸溶液より
取り出し５〜６ｍｍの球体１．２ｋｇを得た。この球体
を無菌の脱イオン水５Ｑに入れ攪拌しながら１時間放置
。
−３ｇ／ １００＋ｏｌ１ＭｇＳ０４０．０５ｇ／１０
０履ａ （ＮＨ，）、ＳＯ４０，５ｇ／ １００ｓ
＋ＭＣａＣ１，０，０５ｇ／ １００ｍＱ 酵母エキ
ス０．５ｇ／１００−からなる培地２Ｑを小型培養槽に
仕込み１２１℃１５分間滅菌を行い、 ＰＨ５，５に調
整した。この培地にサツカロマイセス・セレビシェを接
種し、３０℃で通気量５Ｍ／ａｋｉｎ攪拌数３０Ｏｒｐ
ｍ＋で２４時間培養した。培養液を遠心分離５０００ｒ
ｐｍ １０分して菌体を集め、この菌体に滅菌を行った
１％塩化カルシウム溶液ＩＱを加え菌体懸濁液を調整し
た。この懸濁液を滅菌された０、７％アルギン酸ナトリ
ウム溶液（記文フードケミファＨタイプ）に内径５ｍｍ
のガラス管より滴下し３〜５秒後にアルギン酸溶液より
取り出し５〜６ｍｍの球体１．２ｋｇを得た。この球体
を無菌の脱イオン水５Ｑに入れ攪拌しながら１時間放置
。
水を取り換えて同様に放置し過剰のカルシウムを除去し
、うすいアルギン酸カルシウムの皮膜でつつまれだ懸濁
液状の酵母の固定化菌体を得た。
、うすいアルギン酸カルシウムの皮膜でつつまれだ懸濁
液状の酵母の固定化菌体を得た。
Claims (2)
- （１）微生物の懸濁液をアルギン酸カルシウムの皮膜で
囲包してなる微生物の固定化物。 - （２）カルシウムイオンを存在させた微生物懸濁液をア
ルギン酸ナトリウム溶液に滴下し、液滴の表面にアルギ
ン酸カルシウムの皮膜を形成せしめることを特徴とする
微生物の固定化法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3502186A JPS62195284A (ja) | 1986-02-21 | 1986-02-21 | 微生物の固定化物及びその製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3502186A JPS62195284A (ja) | 1986-02-21 | 1986-02-21 | 微生物の固定化物及びその製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62195284A true JPS62195284A (ja) | 1987-08-28 |
Family
ID=12430406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3502186A Pending JPS62195284A (ja) | 1986-02-21 | 1986-02-21 | 微生物の固定化物及びその製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62195284A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0922451A3 (en) * | 1997-11-28 | 2000-05-24 | Universita' Degli Studi Di Pavia | Microcapsules containing seminal material for artificial insemination in pigs |
| JP2006122685A (ja) * | 2004-10-28 | 2006-05-18 | Cordis Neurovascular Inc | 安定化された部分を有する拡張可能なステント |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5813393A (ja) * | 1981-07-13 | 1983-01-25 | Res Assoc Petroleum Alternat Dev<Rapad> | 固定化微生物を用いるアルコ−ルの製造法 |
| JPS60120986A (ja) * | 1983-11-03 | 1985-06-28 | ビー・ブラウン―エスエスシー・アクチエンゲゼルシャフト | 生体触媒ビーズの製造装置 |
| JPS61152284A (ja) * | 1984-12-27 | 1986-07-10 | Q P Corp | 固定化菌 |
-
1986
- 1986-02-21 JP JP3502186A patent/JPS62195284A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5813393A (ja) * | 1981-07-13 | 1983-01-25 | Res Assoc Petroleum Alternat Dev<Rapad> | 固定化微生物を用いるアルコ−ルの製造法 |
| JPS60120986A (ja) * | 1983-11-03 | 1985-06-28 | ビー・ブラウン―エスエスシー・アクチエンゲゼルシャフト | 生体触媒ビーズの製造装置 |
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