JPS62126991A - マルト−スの製造法 - Google Patents
マルト−スの製造法Info
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- JPS62126991A JPS62126991A JP60265856A JP26585685A JPS62126991A JP S62126991 A JPS62126991 A JP S62126991A JP 60265856 A JP60265856 A JP 60265856A JP 26585685 A JP26585685 A JP 26585685A JP S62126991 A JPS62126991 A JP S62126991A
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- enzyme
- amylase
- starch
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔技術分野〕
本発明は、バシルス屈細菌の生産する新規なアミラーゼ
Ｇ２によるマルトースの製造方法に関するものである。
Ｇ２によるマルトースの製造方法に関するものである。
澱粉からマルトースを生成する酵素として、植物や微生
物の生産するβ−アミラーゼ、あるいはアスペルギルス
オリーゼなど糸状菌の生産するα−アミラーゼなど種々
の酵素が知られている。
物の生産するβ−アミラーゼ、あるいはアスペルギルス
オリーゼなど糸状菌の生産するα−アミラーゼなど種々
の酵素が知られている。
β−アミラーゼは、アミロースやアミロペクチンの非還
元性末端からβ−マルトースを規則的に遊離する酵素で
あり、プルラナーゼ、イソアミラーゼなどのアミロペク
チンの分岐結合（α−１，６−グルコシド結合）を加水
分解する酵素と組合わせて使用するとき、高い収景でマ
ルトースを製造することができる。一方、アスペルギル
ス属など糸状菌の生産するアミラーゼは、アミロースや
アミロペクチンをエンド型で分解するため、マルトース
の他に、グルコース、マルトトリオース、その他のオリ
ゴ糖も多量副生する。
元性末端からβ−マルトースを規則的に遊離する酵素で
あり、プルラナーゼ、イソアミラーゼなどのアミロペク
チンの分岐結合（α−１，６−グルコシド結合）を加水
分解する酵素と組合わせて使用するとき、高い収景でマ
ルトースを製造することができる。一方、アスペルギル
ス属など糸状菌の生産するアミラーゼは、アミロースや
アミロペクチンをエンド型で分解するため、マルトース
の他に、グルコース、マルトトリオース、その他のオリ
ゴ糖も多量副生する。
最近、Ｉｔ、 ０ｕｔｔｒｕｐとＢ、 Ｅ、 Ｎｏｒｍ
ａｎは、バシルスステアロサーモフイラス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ５ｔｃａｒｏｔｈｅｒｒｎｏ −ｐｈｉｌｕｓ
）の生産する新規なマルトース生成酵素が澱粉の非還元
性末端からエキソ型で分解し、α−マルトースを生成す
ることを報告した。この酵素は、β−アミラーゼのよう
に厳密にマルトース単位で加水分解するものではなく、
反応初期には、マルトテトラオース（Ｇ４）、マルトト
リオース（Ｇ３）。
ａｎは、バシルスステアロサーモフイラス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ５ｔｃａｒｏｔｈｅｒｒｎｏ −ｐｈｉｌｕｓ
）の生産する新規なマルトース生成酵素が澱粉の非還元
性末端からエキソ型で分解し、α−マルトースを生成す
ることを報告した。この酵素は、β−アミラーゼのよう
に厳密にマルトース単位で加水分解するものではなく、
反応初期には、マルトテトラオース（Ｇ４）、マルトト
リオース（Ｇ３）。
マルトース（Ｇ２）の他に、少量のマルトペンタオース
（Ｇ５）やマルトヘキサオース（Ｇ６）も生成する。ま
た、シャーディンガー（Ｓｈａｒｄｉｎｇｅｒ）デキス
トリンをフル１−−スとグルコースに分解し、マルトト
リオースをマルトースとグルコースに分解する。このた
め、この酵素による澱粉分解物中には６〜８％のグルコ
ースが含まれる。
（Ｇ５）やマルトヘキサオース（Ｇ６）も生成する。ま
た、シャーディンガー（Ｓｈａｒｄｉｎｇｅｒ）デキス
トリンをフル１−−スとグルコースに分解し、マルトト
リオースをマルトースとグルコースに分解する。このた
め、この酵素による澱粉分解物中には６〜８％のグルコ
ースが含まれる。
本発明者は、澱粉からマルトースを特異的に生成するア
ミラーゼ生産菌を求めて、広く微生物の検索を行ってき
た結果、土壌中より分離し、バシルス・メガテリウム（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）と同定した
細菌が新規で、且つ耐熱性のマルトース生成酵素を生産
することを認めた。本発明者はこの酵素をアミラーゼＧ
２と命名した。
ミラーゼ生産菌を求めて、広く微生物の検索を行ってき
た結果、土壌中より分離し、バシルス・メガテリウム（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）と同定した
細菌が新規で、且つ耐熱性のマルトース生成酵素を生産
することを認めた。本発明者はこの酵素をアミラーゼＧ
２と命名した。
本酵素は、澱粉を、その非還元性末端からマルトース単
位で加水分解すると考えられるが、生成糖はα−型であ
ることを、生成物の変旋光及びガスクロマトグラフによ
る分析により確認した。本酵素はアミロペクチンのα−
１，６−グルコシド結合を分解することはできないため
、リミットデキストリンを残すが、アミロペクチンのマ
ルトースへの分解率は、β−アミラーゼの場合に比べて
、２〜３％程度高く、より分岐結合近くまで分解できろ
ものと考えられる。本発明は、この知見に基づいてなさ
れたものである。
位で加水分解すると考えられるが、生成糖はα−型であ
ることを、生成物の変旋光及びガスクロマトグラフによ
る分析により確認した。本酵素はアミロペクチンのα−
１，６−グルコシド結合を分解することはできないため
、リミットデキストリンを残すが、アミロペクチンのマ
ルトースへの分解率は、β−アミラーゼの場合に比べて
、２〜３％程度高く、より分岐結合近くまで分解できろ
ものと考えられる。本発明は、この知見に基づいてなさ
れたものである。
すなわち、本発明は、バシルス属ＨＵ菌の生産する新規
なアミラーゼＧ２を、アミロース、アミロペクチン、澱
粉、又はこれらの部分分解物に作用させることを特徴と
するアミラーゼＧ２によるマルトースの製造方法に関す
るものである。
なアミラーゼＧ２を、アミロース、アミロペクチン、澱
粉、又はこれらの部分分解物に作用させることを特徴と
するアミラーゼＧ２によるマルトースの製造方法に関す
るものである。
以下に、本発明をより詳しく説明する。
本発明の酵素の性質の詳細は下記に示す通りである。
（１）作用； アミロース、アミロペクチン、グリコー
ゲンのα−１，４−グルコシド結合を、その非還元性末
端からマルトース単位で加水分解する。生成糖はα−マ
ルトースであることからα−アミラーゼの一種と考えら
れるが、エンド型の分解作用を示さず、アミロペクチン
、グリコーゲンからはリミッ１へデキストリンを残す。
ゲンのα−１，４−グルコシド結合を、その非還元性末
端からマルトース単位で加水分解する。生成糖はα−マ
ルトースであることからα−アミラーゼの一種と考えら
れるが、エンド型の分解作用を示さず、アミロペクチン
、グリコーゲンからはリミッ１へデキストリンを残す。
サイクロデキストリンを分解せず、またマルトトリオー
スの分解力も弱い。生成糖がα−型であることを除けば
。
スの分解力も弱い。生成糖がα−型であることを除けば
。
植物や細菌のβ−アミラーゼに似ているが。
アミロペクチンやこれを含む澱粉に対する分解限度は２
〜３％高い。
〜３％高い。
（２）作用温度範囲及び最適温度； １％可溶性澱粉、
０、０５８リン酸緩衝液の下で作用させたとき、約７５
°Ｃまで作用し、最適温度は約６０℃である（第１図（
ａ））。
０、０５８リン酸緩衝液の下で作用させたとき、約７５
°Ｃまで作用し、最適温度は約６０℃である（第１図（
ａ））。
（３）作用ＰＨ範囲及び最適ＰＨ； 約３〜約１１の
広いｐＩＩ範囲に作用する。最適ｐＨは約７〜７．５で
ある（０．０５Ｍリン酸緩衝液、１％可溶性澱粉の下で
作用、（第１図（ｂ））。
広いｐＩＩ範囲に作用する。最適ｐＨは約７〜７．５で
ある（０．０５Ｍリン酸緩衝液、１％可溶性澱粉の下で
作用、（第１図（ｂ））。
（４）熱安定性； ０．０５Ｍ）−リス緩衝液（ρ１
１７．０）の下で加熱した場合、５０℃、１０分間の加
熱までは失活が認められない。６０℃ＩＯ分間の加熱で
約１０％失活し、６５℃ｌＯ分間の加熱で約７０％失活
し、そして、６０℃ｌＯ分間の加熱で９０％以上失活し
た（第１図（Ｃ））。
１７．０）の下で加熱した場合、５０℃、１０分間の加
熱までは失活が認められない。６０℃ＩＯ分間の加熱で
約１０％失活し、６５℃ｌＯ分間の加熱で約７０％失活
し、そして、６０℃ｌＯ分間の加熱で９０％以上失活し
た（第１図（Ｃ））。
（５）ｐＨ安定性； Ｏ，１Ｍｆｌ衝液の下、室温（
３０’Ｃ）ｔ’３時間放置後、残存活性を測定した。そ
の結果、 ｐＨ４，５〜８の範囲で安定であった（第１
図（ｄ））。
３０’Ｃ）ｔ’３時間放置後、残存活性を測定した。そ
の結果、 ｐＨ４，５〜８の範囲で安定であった（第１
図（ｄ））。
（６）安定化； カルシウムイオンによる熱安定性の増
加は認められなかった。
加は認められなかった。
（７）阻害剤； 本酵素は、ｌＸｌ０−３ＨのｌＩｇｃ
１□。
１□。
ＡｇＮ０３ 、 Ｃｕ５Ｏ４、Ｎ１５Ｏ４により、それ
ぞれ約８５％、約７５％、約７０％、約６０％阻害され
た。また、ｌＸｌ０””Ｈのｐ−クロロマーキュリベン
ゾエートにより約７０％阻害された。
ぞれ約８５％、約７５％、約７０％、約６０％阻害され
た。また、ｌＸｌ０””Ｈのｐ−クロロマーキュリベン
ゾエートにより約７０％阻害された。
（８）精製方法； 本酵素は、液体培養液の上澄から、
硫安分画、ＤＥＡＥ−セファロースカラムクロマトグラ
フィー、同カラムによる再クロマトグラフィーとバイオ
ゲルＡ０．５ｍによるカラムタロマトグラフィーにより
、ディスク電気泳動的に均一まで精製することができる
。
硫安分画、ＤＥＡＥ−セファロースカラムクロマトグラ
フィー、同カラムによる再クロマトグラフィーとバイオ
ゲルＡ０．５ｍによるカラムタロマトグラフィーにより
、ディスク電気泳動的に均一まで精製することができる
。
（９）分子量； セファデックスＧ−２００により測定
した分子量は約６０ 、０００であった。
した分子量は約６０ 、０００であった。
（１０）力価測定法；０．１にリン酸緩衝液に溶解させ
た２％可溶性澱粉０．５ｎＱに、適量の酵素を加え、水
で全量１ｍＱとし、４０℃で反応させる。
た２％可溶性澱粉０．５ｎＱに、適量の酵素を加え、水
で全量１ｍＱとし、４０℃で反応させる。
この条件で、１分間に１μモルのグルコースに相当する
還元力を生成する酵素量を１単位とした。
還元力を生成する酵素量を１単位とした。
以上の酵素的性質について、本発明以前に知られている
。植物起源のβ−アミラーゼ、バシルス屈細菌のβ−ア
ミラーゼ及びバシルスステアロサーモフイラスのマルト
ース生成アミラーゼと比較した結果は、第１表に示す通
りである。
。植物起源のβ−アミラーゼ、バシルス屈細菌のβ−ア
ミラーゼ及びバシルスステアロサーモフイラスのマルト
ース生成アミラーゼと比較した結果は、第１表に示す通
りである。
すなわち、植物系β−アミラーゼ及びバシルス屈のβ−
アミラーゼはβ−マルトースのみを生成するのに対し、
本発明の酵素はα−マルトースのみを生成する。バシル
スステアロサーモフイラスのアミラーゼは１本発明の酵
素と同様、α−マルトースを生成するが、反応初期には
、マルトテトラオースやマルトトリオース及び微量のマ
ルトヘキサオースやマルトペンタオースを生成すると報
告されている。従って、これら酵素は本発明の酵素とは
本質的に異なっている。また、最適ＰＨ１最適温度、分
子量などの酵素的性質においても差が認めらめることか
ら、本発明の酵素は新規な酵素ということができる。
アミラーゼはβ−マルトースのみを生成するのに対し、
本発明の酵素はα−マルトースのみを生成する。バシル
スステアロサーモフイラスのアミラーゼは１本発明の酵
素と同様、α−マルトースを生成するが、反応初期には
、マルトテトラオースやマルトトリオース及び微量のマ
ルトヘキサオースやマルトペンタオースを生成すると報
告されている。従って、これら酵素は本発明の酵素とは
本質的に異なっている。また、最適ＰＨ１最適温度、分
子量などの酵素的性質においても差が認めらめることか
ら、本発明の酵素は新規な酵素ということができる。
本発明の酵素を生産する例示菌として、バシルスメガテ
１功ム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇε畿冨ｕｍ）を挙げ
る。
１功ム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇε畿冨ｕｍ）を挙げ
る。
本菌の菌学的性質は下記に示す通りであり、微工研菌寄
第７９７８号として、工業技術院微生物工業技術研究所
に寄託されている。
第７９７８号として、工業技術院微生物工業技術研究所
に寄託されている。
（１）形態； 巾０．７〜１．３Ｘ２．４〜５．０μ、
通常、２個以上連なり、短鎖状に生成する。ダラム陰性
。
通常、２個以上連なり、短鎖状に生成する。ダラム陰性
。
（２）胞子； 両末端近くに２個、胞子をもつ細胞のふ
くらみは殆んど認められない。
くらみは殆んど認められない。
（３）生育； 好気的に生育、嫌気下では殆んど生育は
認められない。
認められない。
（４）肉汁； 混濁、沈降する。
（５）肉汁寒天； 生育良好、表面なめらか、淡褐色を
示すが、色素の生成なし。
示すが、色素の生成なし。
（６）グルコース肉汁寒天； 肉汁培地よりよく生育す
る。
る。
（７）グルコース硝酸塩寒天； よく生育する。
（８）チロシン寒天； 褐色色素を生成する。
（９）グルコース・アスパラギン寒天； かなりよく生
育する。
育する。
（ｌＯ）ボテ１−； 生育良好、表面なめらかで、淡
褐色を示す。培地中に褐色色素を生成する。
褐色を示す。培地中に褐色色素を生成する。
（１１）クエン酸の利用； 陽性。
（１２）澱粉の加水分解； 陽性。
（１３）アセチルメチルカルビノール： 生成しない。
（１４）ゼラチン； 分解する。
（１５）ミルク； 凝固し、ペプトン化する。
（１Ｇ）硝酸塩の還元； 陽性。
（１７）カタラーゼ； 陽性。
（１８）炭水化物の利用； Ｄ−グルコース、Ｄ−フラ
クトース、０−ガラクトース、Ｄ−マンノース、Ｄ−リ
ボース、し−ラムノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシ
ロース、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、マルト
ース、蔗糖などを利用し、いずれもガスを生成すること
なく生産する。
クトース、０−ガラクトース、Ｄ−マンノース、Ｄ−リ
ボース、し−ラムノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシ
ロース、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、マルト
ース、蔗糖などを利用し、いずれもガスを生成すること
なく生産する。
（１９）最適生育温度；４０℃前後。
（２０）！高生育温度； 約５０℃。
（２１）死滅温度；１００°Ｃｌ２Ｏ分間の加熱でも死
滅しない。
滅しない。
以上の菌学的性質について、バージエイスマニュアルオ
ブデタミネーテイブバクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’
ｓ Ｍａｍｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔ、ｅｒｍｉｎ
ａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）の第７版及び第
８版（ザウィリアムスアンドゥイルキンスカンパニー（
Ｔｈｅ Ｗｉｌｌｉａｍｓａｎｄ Ｍｉｌｋｉｎｇ Ｃ
ｏｍｐａｎｙ）、 １９５７年及び１９７４年）を参照
し、本菌をパシルスメガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓｍ
ｅｇａｔｅｒｉｕｍ）Ｇ −２と命名した。
ブデタミネーテイブバクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’
ｓ Ｍａｍｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔ、ｅｒｍｉｎ
ａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）の第７版及び第
８版（ザウィリアムスアンドゥイルキンスカンパニー（
Ｔｈｅ Ｗｉｌｌｉａｍｓａｎｄ Ｍｉｌｋｉｎｇ Ｃ
ｏｍｐａｎｙ）、 １９５７年及び１９７４年）を参照
し、本菌をパシルスメガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓｍ
ｅｇａｔｅｒｉｕｍ）Ｇ −２と命名した。
バシルスメガテリウムＧ２を培養して、アミラーゼＧ２
を生産するための一般的培養は、次のようにして行われ
る。
を生産するための一般的培養は、次のようにして行われ
る。
培養は、通常、液体培地による通気、攪拌培養により行
われる。窒素源としては、肉エキス、ペプトン、酵母エ
キス、カゼイン、コーンステイープ、リカー、大豆粕な
ど、通常、微生物の培養に際し、よく用いられる有機窒
素源、あるいはこれに補足する窒素源として、塩化アン
モン、リン酸アンモン、硝酸塩などの無機窒素源が用い
られる。
われる。窒素源としては、肉エキス、ペプトン、酵母エ
キス、カゼイン、コーンステイープ、リカー、大豆粕な
ど、通常、微生物の培養に際し、よく用いられる有機窒
素源、あるいはこれに補足する窒素源として、塩化アン
モン、リン酸アンモン、硝酸塩などの無機窒素源が用い
られる。
炭素源としては、澱粉、デキストリン、マルトース、グ
ルコース、シュークロスなどが使用される。
ルコース、シュークロスなどが使用される。
培養はｐＨ５〜９、温度２０〜６０℃で好気的に行われ
る。
る。
アミラーゼＧ２は、菌体外に生産される酵素であるので
、培養終了後、濾過または遠心分離により除菌し、上澄
液を回収する。
、培養終了後、濾過または遠心分離により除菌し、上澄
液を回収する。
培養上澄液は、必要により濃縮し、硫酸アンモニウム、
硫酸ナトリウムなどによる塩析によるか。
硫酸ナトリウムなどによる塩析によるか。
または、アセトン、イソプロパツール、エタノール、メ
タノールなどの有機溶媒を加えて、酵素を沈澱物として
収得し、乾燥、保存する。
タノールなどの有機溶媒を加えて、酵素を沈澱物として
収得し、乾燥、保存する。
アミラーゼＧ２を用いて、澱粉を糖化する反応は、次の
ようにして行う。
ようにして行う。
澱粉は、先ず、酸または澱粉液化酵素α−アミラーゼに
より液化される。澱粉の液化度（ＤＨ）は、マルトース
の収量に著しく影響し、液化度の小さい液化澱粉を使用
する方が収量よくマルトースが得られる。（ＤＥは固形
分中の還元力をグルコースとして表わした百分率）。基
質濃度は１通常、５〜４０％１反応ｐＨは５〜８、温度
は５０〜６０℃で行われる。
より液化される。澱粉の液化度（ＤＨ）は、マルトース
の収量に著しく影響し、液化度の小さい液化澱粉を使用
する方が収量よくマルトースが得られる。（ＤＥは固形
分中の還元力をグルコースとして表わした百分率）。基
質濃度は１通常、５〜４０％１反応ｐＨは５〜８、温度
は５０〜６０℃で行われる。
本酵素はアミロペクチンのα−１，６−グルコシド結合
を分解することができないので、アミロペクチン、ある
いはこれを含む澱粉又はその派生物を基質として用いる
ときには、α−１，６−グルコシド結合を分解するイソ
アミラーゼやプルラーゼなどのα−１，６−グルコシダ
ーゼの存在下で反応を行うと、糖化反応を促進し、収量
よくマルトースを製造することができる。
を分解することができないので、アミロペクチン、ある
いはこれを含む澱粉又はその派生物を基質として用いる
ときには、α−１，６−グルコシド結合を分解するイソ
アミラーゼやプルラーゼなどのα−１，６−グルコシダ
ーゼの存在下で反応を行うと、糖化反応を促進し、収量
よくマルトースを製造することができる。
次に、実施例により１本発明の詳細な説明する。
実施例１
大豆タンパク２％、米ぬか２％、Ｋ２ＨＰＯ４０，３％
。
。
ＭｇＳＯ４・７１１２００．１％、可溶性澱粉２％、Ｃ
ａＣ１２１Ｘ１０”−３Ｍ、 ＭｎＣｌ２１ＸＩＯ−’
Ｍ、 ＣｕＳＯ４２，５ｘｌＯ−’ Ｍ。
ａＣ１２１Ｘ１０”−３Ｍ、 ＭｎＣｌ２１ＸＩＯ−’
Ｍ、 ＣｕＳＯ４２，５ｘｌＯ−’ Ｍ。
ＦｅＣ１２２，５Ｘ １０− ’ Ｍ、ラウリル硫酸ナ
トリウム２．５Ｘ１０″″２％からなる培地（ｐＨ７，
０）３抛Ωを２００ｍ Ｑ容三角フラスコに入れ、１２
０℃で１５分間殺菌後。
トリウム２．５Ｘ１０″″２％からなる培地（ｐＨ７，
０）３抛Ωを２００ｍ Ｑ容三角フラスコに入れ、１２
０℃で１５分間殺菌後。
バシルスメガテリウム（微工研菌寄第７９７８号）を接
種し、３０℃で３日間振盪培養（１６０ｒｐｍ） した
。培養後、遠心分離して得た上澄液について、生産され
たアミラーゼＧ２活性を測定した結果、培地１ｆｆｌＱ
当り、９，０単位であった。
種し、３０℃で３日間振盪培養（１６０ｒｐｍ） した
。培養後、遠心分離して得た上澄液について、生産され
たアミラーゼＧ２活性を測定した結果、培地１ｆｆｌＱ
当り、９，０単位であった。
実施例２
実施例１で得られた培養上澄液に、硫酸アンモニウムを
８０％飽和になるように加え、生成した沈澱物を遠心分
離機により回収し、水に溶解、１×１０− ’ ＭのＬ
−システィンを含む蒸留水に対し、−夜透析したものを
澱粉糖化用酵素液として使用した。酵素の回収率は約８
２％であった。
８０％飽和になるように加え、生成した沈澱物を遠心分
離機により回収し、水に溶解、１×１０− ’ ＭのＬ
−システィンを含む蒸留水に対し、−夜透析したものを
澱粉糖化用酵素液として使用した。酵素の回収率は約８
２％であった。
ＤＥＬ、８３．５．８１．８．０５と１２．６の液化デ
ンプン各１００ｍ ｇに、アミラーゼＧ２を１単位加え
、全ｉ１＋ｍＱとし、５５℃で３日間反応を行った。反
応後、＠！！化液の糖組成を液体クロマトグラフ法によ
り分析した結果は第２表に示す通りであった。
ンプン各１００ｍ ｇに、アミラーゼＧ２を１単位加え
、全ｉ１＋ｍＱとし、５５℃で３日間反応を行った。反
応後、＠！！化液の糖組成を液体クロマトグラフ法によ
り分析した結果は第２表に示す通りであった。
第２表
実施例３
実施例１で得られた培養上澄液に硫安を８％飽和になる
ように添加し、生成した沈澱物を遠心分離機により回収
し、水に溶解、ｔｘｉｏ−３Ｈのし一システィンを含む
蒸留水に対し、−夜透析したものを澱粉糖化用酵素液と
した（酵素の回収率は約８２％であった。） 可溶性澱粉、短鎖アミロース（ＤＰ１７）、アミロペク
チン（トウモロコシ製）、グリコーゲン（カキ環）各２
０１１１ｇに、アミラーゼを６Ｘ１０−３単位加え、全
量２ＩＩ１１２とし、ｐＨ７，４０℃で、３日間反応を
おこなった。反応後、糖化液の糖組成を液体クロマトグ
ラフ法により測定した結果は、第３表に示す通りであっ
た。
ように添加し、生成した沈澱物を遠心分離機により回収
し、水に溶解、ｔｘｉｏ−３Ｈのし一システィンを含む
蒸留水に対し、−夜透析したものを澱粉糖化用酵素液と
した（酵素の回収率は約８２％であった。） 可溶性澱粉、短鎖アミロース（ＤＰ１７）、アミロペク
チン（トウモロコシ製）、グリコーゲン（カキ環）各２
０１１１ｇに、アミラーゼを６Ｘ１０−３単位加え、全
量２ＩＩ１１２とし、ｐＨ７，４０℃で、３日間反応を
おこなった。反応後、糖化液の糖組成を液体クロマトグ
ラフ法により測定した結果は、第３表に示す通りであっ
た。
第３表
実施例４
ＤＥｌ、４３の液化澱粉１ｇに、アミラーゼ２Ｇを５単
位と、クレブシラニューモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｐｎｅｕ＋５ｏｎｉａｅ）の生産するプルラナーセ（
チガセ生化学社製）を、１．２または３単位加え、ｐ）
１７．５５°Ｃで３日間反応を行った。反応後、糖化液
の糖組成を分析した結果は第４表に示す通りであった。
位と、クレブシラニューモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｐｎｅｕ＋５ｏｎｉａｅ）の生産するプルラナーセ（
チガセ生化学社製）を、１．２または３単位加え、ｐ）
１７．５５°Ｃで３日間反応を行った。反応後、糖化液
の糖組成を分析した結果は第４表に示す通りであった。
第４表
第１図（ａ）、（ｂ）、（Ｃ）と（ｄ）は、それぞれア
ミラーゼＧ２の最適温度、最適ｐｔ＋、熱安定性とＰＲ
安定性を示している。 中 ”’： や （１１“ 才ｊ図 糧４ＣＯｐＨ
ミラーゼＧ２の最適温度、最適ｐｔ＋、熱安定性とＰＲ
安定性を示している。 中 ”’： や （１１“ 才ｊ図 糧４ＣＯｐＨ
Claims (1)
- バシルス属細菌の生産するアミラーゼＧ２を、アミロー
ス、アミロペクチン、澱粉、または、これらの部分分解
物に作用させることを特徴とするアミラーゼＧ２による
マルトースの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60265856A JPS62126991A (ja) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | マルト−スの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60265856A JPS62126991A (ja) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | マルト−スの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62126991A true JPS62126991A (ja) | 1987-06-09 |
| JPH0253035B2 JPH0253035B2 (ja) | 1990-11-15 |
Family
ID=17423030
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60265856A Granted JPS62126991A (ja) | 1985-11-26 | 1985-11-26 | マルト−スの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62126991A (ja) |
-
1985
- 1985-11-26 JP JP60265856A patent/JPS62126991A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0253035B2 (ja) | 1990-11-15 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |