JPS62104593A - アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物 - Google Patents
アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物Info
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- JPS62104593A JPS62104593A JP24297185A JP24297185A JPS62104593A JP S62104593 A JPS62104593 A JP S62104593A JP 24297185 A JP24297185 A JP 24297185A JP 24297185 A JP24297185 A JP 24297185A JP S62104593 A JPS62104593 A JP S62104593A
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- amino acid
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- medium composition
- glucose
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/045—Culture media therefor
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- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
■８発明の前日
［技術分野］
本発明は微生物の生化学的性状検査用培地組成物に関す
る。さらに詳しくは、本発明はグルコース非発酵性グラ
ム陰性桿菌のアミノ酸脱炭酸能を検査するために使用さ
れる１８地の組成物に関するものである。
る。さらに詳しくは、本発明はグルコース非発酵性グラ
ム陰性桿菌のアミノ酸脱炭酸能を検査するために使用さ
れる１８地の組成物に関するものである。
細菌感染症にス・１して適切な治療を１Ｍ７１−ために
は病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌にイ
］効な薬剤を決定することが中背である。このＪ：うな
病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化学的性状検
査が行われ、その項［１の１つとしてグルコース非発酵
性グラム陰性桿菌について上記のアミノ酸脱炭酸能の検
査が行われる。本発明の培地組成物はこのような試験に
好適に使用される。
は病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌にイ
］効な薬剤を決定することが中背である。このＪ：うな
病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化学的性状検
査が行われ、その項［１の１つとしてグルコース非発酵
性グラム陰性桿菌について上記のアミノ酸脱炭酸能の検
査が行われる。本発明の培地組成物はこのような試験に
好適に使用される。
［先行技術およびその問題点］
上記検査の培地として従来、下記の組成を有するメーラ
ー（ＨＩＬＬ［Ｒ）培地が使用されていた。
ー（ＨＩＬＬ［Ｒ）培地が使用されていた。
アミノ酸 １０（９）ペプトン
５ 肉１キス ５ ピリドキサール ０゜００５ ブドウ糖 ０．５ブロムクレゾ
ールパープル ０．０１クレゾールレツド
０．００５蒸留水 １０００ （ｄ ）ｐ
ｌ−１ｅ、。
５ 肉１キス ５ ピリドキサール ０゜００５ ブドウ糖 ０．５ブロムクレゾ
ールパープル ０．０１クレゾールレツド
０．００５蒸留水 １０００ （ｄ ）ｐ
ｌ−１ｅ、。
上記従来培地を使用してアミノ酸の脱炭酸能を検査した
場合には、正しい結果を得るまでに１〜３日間の培養時
間を必要とするが、細菌感染症の〒明治療のためには、
菌の同定はできるだけ速やかに行うことが必要であり、
より短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望まれ
ていた。しかし、一方においては、検査作業の都合上、
判定を翌日に行なわざるを得ない場合も生じ、このよう
な場合には培養期間が厳格に規ａ、ＩＪされておらず、
都合により培養時間を延長しても反応過剰になったすせ
ず、正確な判定が可能な培地が望ましい。
場合には、正しい結果を得るまでに１〜３日間の培養時
間を必要とするが、細菌感染症の〒明治療のためには、
菌の同定はできるだけ速やかに行うことが必要であり、
より短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望まれ
ていた。しかし、一方においては、検査作業の都合上、
判定を翌日に行なわざるを得ない場合も生じ、このよう
な場合には培養期間が厳格に規ａ、ＩＪされておらず、
都合により培養時間を延長しても反応過剰になったすせ
ず、正確な判定が可能な培地が望ましい。
■０発明の目的
本発明は短時間の培養で同定が可能であるとともに長時
間１８養しても正確な同定が可能であるグルコース非発
酵性グラム陰性桿菌のアミノ１１？酸能の検査用培地組
成物を提供することを目的とする。
間１８養しても正確な同定が可能であるグルコース非発
酵性グラム陰性桿菌のアミノ１１？酸能の検査用培地組
成物を提供することを目的とする。
本発明はさらに、呈色反応が明瞭であり、判定が容易な
上記検査用培地組成物を提供することを目的とする。
上記検査用培地組成物を提供することを目的とする。
本発明によれば、アミノ酸２０部（重量部、以下同じ）
に対しペプトン０．２〜１，０部、酵母エキス０．０１
〜０．６部、リン酸二水素一アルカリ金属塩０．１〜０
．８部、リン酸一水素二アルカリ金属塩０゜１〜０．５
部、グルコース１．０〜３．０部およびｐＨ指示ｇＰ、
０．０２〜０．１部の組成よりなり、水１０００部に溶
解したときのｐｌ＋が５５〜６，５であることを特徴と
するグルコース非発酵性グラム陰性桿菌のアミノ酸脱炭
酸能検査用培地組成物からなる。
に対しペプトン０．２〜１，０部、酵母エキス０．０１
〜０．６部、リン酸二水素一アルカリ金属塩０．１〜０
．８部、リン酸一水素二アルカリ金属塩０゜１〜０．５
部、グルコース１．０〜３．０部およびｐＨ指示ｇＰ、
０．０２〜０．１部の組成よりなり、水１０００部に溶
解したときのｐｌ＋が５５〜６，５であることを特徴と
するグルコース非発酵性グラム陰性桿菌のアミノ酸脱炭
酸能検査用培地組成物からなる。
■９発明の詳細な説明
本発明の培地組成物は、上述したように、アミノ酸、ペ
プトン、！Ｓｙ母エ生エキスン酸二水素一アルカリ金属
塩、リン酸一水素二アルカリ金属塩、グルコースおよび
ｐｔ＋指示薬からなる。アミノ酸は基質であり、その種
類は特に限定されず、例えば、し−リジン、Ｌ−アルギ
ニン、Ｌ−オルニチン等が適宜使用される。アミノ酸が
塩基性アミノ酸である場合には酸付加塩、例えばｊｌ！
ｔ、硫酸、硝酸またはリン酸塩、酸性アミノ酸である場
合にはアルカリ金属塩の形態で使用づるのが好ましい。
プトン、！Ｓｙ母エ生エキスン酸二水素一アルカリ金属
塩、リン酸一水素二アルカリ金属塩、グルコースおよび
ｐｔ＋指示薬からなる。アミノ酸は基質であり、その種
類は特に限定されず、例えば、し−リジン、Ｌ−アルギ
ニン、Ｌ−オルニチン等が適宜使用される。アミノ酸が
塩基性アミノ酸である場合には酸付加塩、例えばｊｌ！
ｔ、硫酸、硝酸またはリン酸塩、酸性アミノ酸である場
合にはアルカリ金属塩の形態で使用づるのが好ましい。
ペブ１−ンは蛋白栄養源であり、従来公知の培地の１７
５闇以下を使用づるのでアンモニア等塩基性分解物によ
る検査誤差〈偽陽性）がさけられる。グルコースも栄養
源として使用される。流動パラフィンは完全な嫌気的条
件をつくり得ないので、グルコースは酸性分解物を生成
する。従ってグルコースの使用量もその分解物が検査誤
差を生じない範囲が選択されている。酵母エキスは酵素
反応を促進するためのものであり、偽陽性とならない範
囲の争が使用される。
５闇以下を使用づるのでアンモニア等塩基性分解物によ
る検査誤差〈偽陽性）がさけられる。グルコースも栄養
源として使用される。流動パラフィンは完全な嫌気的条
件をつくり得ないので、グルコースは酸性分解物を生成
する。従ってグルコースの使用量もその分解物が検査誤
差を生じない範囲が選択されている。酵母エキスは酵素
反応を促進するためのものであり、偽陽性とならない範
囲の争が使用される。
リン酸二水素一アルカリ金属塩およびリン酸一水素二ア
ルカリ金属塩はｐＨ調整剤であり、アルカリ金属として
はカリウムまたはナトリウムが使用され、それらの相合
ぜが特に好ましい。ｐｌ＋指示薬には特に制限はないが
、フェノールレッド、プロムチ七−ルブルー、ブロムク
レゾールパープル、クレゾールレッド、ブロムフェノー
ルレッド等が適当゛である。特にフェノールレッドを使
用すると呈色が明瞭であり、試験試料が少Ｒでも陽性、
陰性の判定がしやすい。
ルカリ金属塩はｐＨ調整剤であり、アルカリ金属として
はカリウムまたはナトリウムが使用され、それらの相合
ぜが特に好ましい。ｐｌ＋指示薬には特に制限はないが
、フェノールレッド、プロムチ七−ルブルー、ブロムク
レゾールパープル、クレゾールレッド、ブロムフェノー
ルレッド等が適当゛である。特にフェノールレッドを使
用すると呈色が明瞭であり、試験試料が少Ｒでも陽性、
陰性の判定がしやすい。
上記組成物にさらにアミノ酸の脱炭酸反応を促進するた
めに５′ −ピリドキサールリン酸エステルを、また浸
透圧調整剤として、アルカリ全屈塩化物、例えば塩化ナ
トリウム、塩化カリウム等を使用した方が好ましい。
めに５′ −ピリドキサールリン酸エステルを、また浸
透圧調整剤として、アルカリ全屈塩化物、例えば塩化ナ
トリウム、塩化カリウム等を使用した方が好ましい。
本発明の培地組成物における前述した成分割合は臨界的
であり、特にｐＨ調整剤は、ｐＨが５．５〜６．５好ま
しくは５．８〜６２となり、基質であるアミノ酸が脱炭
酸されたどぎに培地のＩ）Ｈが７以上となるように設定
されている。またアミノ酸および５′ 〜ビリドキナー
ルリン酸エステルの吊も培養期間を短縮可能なように設
定されている。
であり、特にｐＨ調整剤は、ｐＨが５．５〜６．５好ま
しくは５．８〜６２となり、基質であるアミノ酸が脱炭
酸されたどぎに培地のＩ）Ｈが７以上となるように設定
されている。またアミノ酸および５′ 〜ビリドキナー
ルリン酸エステルの吊も培養期間を短縮可能なように設
定されている。
ｐｉ指示薬の使用量は、その種類によって多少異なり、
例えばフェノールレッドは０．０４〜０．１部の帛使用
づるのが好ましい。
例えばフェノールレッドは０．０４〜０．１部の帛使用
づるのが好ましい。
本発明の１８地組成物は常法に従って所定ｍの各成分を
水に溶解することによって使用される。近年生化学的性
状検査は多数の試験を多穴プレート上で同時に行うのが
ｆｌｉ通であり、このような場合には本発明培地を試験
用プレートのつ１ルに注入し、乾燥させて乾燥培地とす
る。試験に際しては該ウェルに試験菌の懸濁水を所定山
分注し、３０℃で所定時間培養する。培養時には流動パ
ラフィンを重層する。
水に溶解することによって使用される。近年生化学的性
状検査は多数の試験を多穴プレート上で同時に行うのが
ｆｌｉ通であり、このような場合には本発明培地を試験
用プレートのつ１ルに注入し、乾燥させて乾燥培地とす
る。試験に際しては該ウェルに試験菌の懸濁水を所定山
分注し、３０℃で所定時間培養する。培養時には流動パ
ラフィンを重層する。
菌のＩＩＲ炭酸反応によりアミノ酸は塩基性物質に変換
される。例えば、リジンはカタベリンに、アルギニンは
アグマチンに、オルニチンはプトレシンに変換される。
される。例えば、リジンはカタベリンに、アルギニンは
アグマチンに、オルニチンはプトレシンに変換される。
この塩基性物質の産生によるｐＨの変化で反応の陽性、
陰性を判定する。４〜５時間の培養で判定することが望
まれる場合は液体培地に換算してその５０μｍに７．５
Ｘ １０７〜１０５×ｉｏ８ｇの菌を接種し、１８〜２
２時間の培養で判定する場合は１．５ｘ １０７〜３ｘ
１０７個の菌を接種するのが好ましい。
陰性を判定する。４〜５時間の培養で判定することが望
まれる場合は液体培地に換算してその５０μｍに７．５
Ｘ １０７〜１０５×ｉｏ８ｇの菌を接種し、１８〜２
２時間の培養で判定する場合は１．５ｘ １０７〜３ｘ
１０７個の菌を接種するのが好ましい。
次に本発明の培地組成物を使用してアミノ酸の脱炭酸反
応試験を行った実施例を示す。
応試験を行った実施例を示す。
実施例
表１〜３に記載の組成を有する本発明培地組成物を常法
に従って水１文に溶解し、菌同定用培地１〜６を得た。
に従って水１文に溶解し、菌同定用培地１〜６を得た。
表 １
［−−リジン培地
表 ２
Ｌ−アルギニン培地
１１位り
表 ３
Ｌ−オルニチン培地
上記培地１〜９を多穴プレートの各ウェルに５０μｐず
つ分注し、４０℃で乾燥した。次に寒天平板培地上で各
種微生物を３０℃で１８〜２４時間培首し、１．０−の
滅菌蒸留水中に培養時間が／Ｉ Ｉ＋、’ｉ間では１．
５Ｘ１０９個／ｍｆ！また２０時間では３ Ｘ １０８
個／ｄとなるように懸濁して各ウェルに５０μｐずつ穿
刺接種し、流動パラフィンを８？′Ｔ層し、３０℃で所
定時間培養した。比較試験どじで、メーラー培地を用い
た従来法により培養を行なった。ｊ８養液の色の変化に
よりアミノｌｌｉ！２脱炭酸反応のイｉ照を判定した。
つ分注し、４０℃で乾燥した。次に寒天平板培地上で各
種微生物を３０℃で１８〜２４時間培首し、１．０−の
滅菌蒸留水中に培養時間が／Ｉ Ｉ＋、’ｉ間では１．
５Ｘ１０９個／ｍｆ！また２０時間では３ Ｘ １０８
個／ｄとなるように懸濁して各ウェルに５０μｐずつ穿
刺接種し、流動パラフィンを８？′Ｔ層し、３０℃で所
定時間培養した。比較試験どじで、メーラー培地を用い
た従来法により培養を行なった。ｊ８養液の色の変化に
よりアミノｌｌｉ！２脱炭酸反応のイｉ照を判定した。
結果を表４〜６に示ケ。
表 ４
表 ５
表 ６
Ｌ−オルニｆ〜ン培地
■、発明の具体的作用および効果
表／１〜６から明らかなように、グルコース非発酵性グ
ラム陰性桿菌のアミノ酸脱炭酸能検査にＪ３いて、本発
明の培地を使用すると、培養時間の伎知を問わず正確な
菌の同定が可能である。従って検査作業の都合により即
ｌ同定、翌日同定のいずれも選択することができる。こ
れに対して対照培地は少くとも２４時間の培養が必要で
あり、即日判定は不可能である。例えば対照培地を使用
した場合は、シュードモナス・セパシアＡＴＣＣ２７５
１５、シフ−トモナス・ビ１ブダＡＴＣＣ１２６３り
、シュードｔノス・フルオレッセンスＡＴＣＣ１３５２
８は２４時間培養では反応は陰性であり４８〜９６時間
培養で陽ゼｌどなる。これに対して本発明の培地を使用
すると、いずれの菌においても４時間培養で正しい判定
が可能である。
ラム陰性桿菌のアミノ酸脱炭酸能検査にＪ３いて、本発
明の培地を使用すると、培養時間の伎知を問わず正確な
菌の同定が可能である。従って検査作業の都合により即
ｌ同定、翌日同定のいずれも選択することができる。こ
れに対して対照培地は少くとも２４時間の培養が必要で
あり、即日判定は不可能である。例えば対照培地を使用
した場合は、シュードモナス・セパシアＡＴＣＣ２７５
１５、シフ−トモナス・ビ１ブダＡＴＣＣ１２６３り
、シュードｔノス・フルオレッセンスＡＴＣＣ１３５２
８は２４時間培養では反応は陰性であり４８〜９６時間
培養で陽ゼｌどなる。これに対して本発明の培地を使用
すると、いずれの菌においても４時間培養で正しい判定
が可能である。
１′ｊ訂出願人 ア ル Ｔ： 株
式 会 社（はか２名）
式 会 社（はか２名）
Claims (4)
- （１）アミノ酸２０部（重量部、以下同じ）に対しペプ
トン０．２〜１．０部、酵母エキス０．０１〜０．６部
、リン酸二水素一アルカリ金属塩０．１〜０．８部、リ
ン酸一水素二アルカリ金属塩０．１〜０．５部、グルコ
ース１．０〜３．０部およびｐＨ指示薬０．０２〜０．
１部の組成よりなり、水１０００部に溶解したときのｐ
Ｈが５．５〜６．５であることを特徴とするグルコース
非発酵性グラム陰性桿菌のアミノ酸脱炭酸能検査用培地
組成物。 - （２）リン酸二水素一アルカリ金属塩がリン酸二水素一
カリウムであり、リン酸一水素二アルカリ金属塩がリン
酸一水素二ナトリウムである特許請求の範囲第１項記載
の培地組成物。 - （３）アミノ酸がＬ−リジン、Ｌ−アルギニンまたはＬ
−オルニチンである特許請求の範囲第１項または第２項
記載の培地組成物。 - （４）ｐＨ指示薬がフェノールレッド、ブロムクレゾー
ルパープルまたはクレゾールレッドである特許請求の範
囲第１項ないし第３項のいずれかの１項に記載の培地組
成物。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24297185A JPS62104593A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物 |
| EP86402432A EP0223685A3 (en) | 1985-10-31 | 1986-10-30 | Medium composition for testing the microorganism capability of decarboxylating amino acids |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24297185A JPS62104593A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62104593A true JPS62104593A (ja) | 1987-05-15 |
| JPH0574355B2 JPH0574355B2 (ja) | 1993-10-18 |
Family
ID=17096954
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24297185A Granted JPS62104593A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | アミノ酸脱炭酸能検査用培地組成物 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0223685A3 (ja) |
| JP (1) | JPS62104593A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010035458A1 (ja) * | 2008-09-29 | 2010-04-01 | 三愛石油株式会社 | 一般生菌数測定用培地 |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR8807223A (pt) * | 1987-09-29 | 1989-10-17 | Dbv | Processo de contagem e deteccao de microplasmas e meio biologico unico |
| FR2621049B1 (fr) * | 1987-09-29 | 1990-01-19 | Var Diffusion Bacteriologie | Procede de numeration et de depistage des mycoplasmes urogenitaux |
| FR2638170A1 (fr) * | 1988-10-24 | 1990-04-27 | Var Diffusion Bacteriologie | Systeme et procede de detection de bacteries dans un milieu |
| US5462860A (en) * | 1994-06-06 | 1995-10-31 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Conditioned culture medium for rapid growth and detection of microbes |
| DE19602345C2 (de) | 1996-01-24 | 2002-12-12 | Biotest Ag | Verfahren zur Verbesserung des Wachstums und des kolorimetrischen Nachweises von Bakterien, Hefen, Pilzen oder Kokken |
| DE29710050U1 (de) * | 1997-06-11 | 1997-10-16 | Macherey Nagel Gmbh & Co Hg | Mikrobiologisches Nährmedium |
| EP2632584B1 (en) | 2010-10-26 | 2017-08-09 | Capsugel Belgium NV | A process for the manufacture of bulk enteric capsule shells |
| CA2870134C (en) | 2012-05-02 | 2020-04-28 | Capsugel France SAS | Aqueous dispersions of hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate (hpmcas) |
| EP3065720A1 (en) | 2013-11-04 | 2016-09-14 | Capsugel Belgium NV | Methods and systems for improved bioavailability of active pharmaceutical ingredients including esomeprazole |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3832288A (en) * | 1970-03-02 | 1974-08-27 | O Beckford | Enteric bacilli differential media |
| US3893889A (en) * | 1974-02-25 | 1975-07-08 | Schering Corp | Culture medium for differentiation of enterobacteriaceae |
| CH636376A5 (en) * | 1977-02-14 | 1983-05-31 | Sarrebourg Hopital Civil Saint | Process for the identification of bacteria and culture medium for its implementation |
| US4335205A (en) * | 1979-04-06 | 1982-06-15 | Greenwood James R | Low protein degradation product basal medium for identification of non-fermentative gram-negative bacilli and other microorganisms |
| JPS60234596A (ja) * | 1984-05-09 | 1985-11-21 | Terumo Corp | リジン脱炭酸試験用培地 |
-
1985
- 1985-10-31 JP JP24297185A patent/JPS62104593A/ja active Granted
-
1986
- 1986-10-30 EP EP86402432A patent/EP0223685A3/en not_active Withdrawn
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010035458A1 (ja) * | 2008-09-29 | 2010-04-01 | 三愛石油株式会社 | 一般生菌数測定用培地 |
| JP2010075145A (ja) * | 2008-09-29 | 2010-04-08 | San Ai Oil Co Ltd | 一般生菌数測定用培地 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0223685A3 (en) | 1989-01-18 |
| JPH0574355B2 (ja) | 1993-10-18 |
| EP0223685A2 (en) | 1987-05-27 |
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