JPH0523759B2 - - Google Patents
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- JPH0523759B2 JPH0523759B2 JP9106484A JP9106484A JPH0523759B2 JP H0523759 B2 JPH0523759 B2 JP H0523759B2 JP 9106484 A JP9106484 A JP 9106484A JP 9106484 A JP9106484 A JP 9106484A JP H0523759 B2 JPH0523759 B2 JP H0523759B2
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Description
Ｉ 発明の背景
技術分野
本発明は、微生物の生化学的性状検査用培地に
関する。さらに詳しくは、本発明は腸内細菌等微
生物の生化学的性状同定法でマロン酸分解試験に
用いられる改良された培地に関するものである。 感染症に対して適切な治療を施すためには病原
菌を同定し、感受性試験を行ない、その病原菌に
有効な薬剤を決定することが重要である。このよ
うな病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化
学的性状検査が行なわれ、その項目としてマロン
酸分解試験が行なわれる。本発明の培地はこのよ
うなマロン酸分解試験に好適に使用される。 先行技術および問題点 マロン酸分解試験は、マロン酸を炭素源として
利用できるかどうかを判定する試験である。この
試験は菌をマロン酸を含有する培地で培養するこ
とによつて実施される。この試験で使用する培地
として、最近、プロテオーゼペプトン、グルコー
ス、マロン酸ナトリウム、Ｌ−トリプトフアン、
リン酸二水素一ナトリウム、塩化ナトリウム、ブ
ロムチモールブルーおよび精製水の組成からなる
ものが提案されている（特公昭58−20263）。この
培地はマロン酸分解試験及びトリプトフアンデア
ミナーゼ試験に用いられるもので、培養時間が従
来のものにくらべて大巾に短縮されている。即
ち、従来の培地においては培養期間が１〜２日間
であつたのに対してこの培地では培養期間が４〜
５時間に短縮されており、即日判定が可能であ
る。しかしながらこの培地においても菌の種類に
よつては４〜５時間の培養では反応が不十分であ
り判定が困難なものもあり、そのような場合には
培養時間を長くし、翌日に判定せざるをえない場
合があつた。従つて全ての菌について４〜５時間
の培養で反応の陽性、陰性を明瞭に判定できる培
地が要望されている。 また早期治療のためには菌の同定はできるだけ
速やかに行なわれるのが望ましいが、他方、検査
作業の都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない
場合も生ずる。このような場合には培養期間が厳
格に規定されておらず、作業上の都合で培養期間
を延長または短縮しても正確な判定が可能な培地
が望ましい。 さらに生化学的性状検査は作業の効率上多数の
試験を多穴培養プレートを用いて一度に行なうこ
とが多いので各試験の培養期間をそろえることが
必要となる。このような場合にも培養期間に厳格
な制限のない培地が望ましい。 発明の目的 本発明は培養期間が特に制限されず、即日同定
および翌日同定が可能なマロン酸分解試験用培地
を提供することを目的とする。 本発明はさらに呈色反応が明瞭であり判定が容
易なマロン酸分解試験用培地を提供することを目
的とする。 本発明によれば、酵母エキス0.5g；ペプトン
2.5g；グルコース0.75g；塩化ナトリウム1g；硫
酸アンモニウム1.5g；リン酸二水素一アルカリ金
属塩2g；マロン酸塩10g；およびブロムチモール
ブルーからなるPH指示薬0.12gの割合の組成より
なり、水１に溶解したときのPHが6.3であるマ
ロン酸分解試験用培地が提供される。 発明の具体的説明 本発明の培地は、酵母エキス、ペプトン、グル
コース、塩化ナトリウム、硫酸アンモニウム、リ
ン酸二水素一アルカリ金属塩、マロン酸塩および
PH指示薬からなる。 本発明の成分においてマロン酸塩としてはマロ
ン酸のアルカリ金属塩（特にカリウム、ナトリウ
ム塩）が好適に使用される。本発明においては培
地中にグルコースが添加されており反応性が向上
している。また、酵母エキスは酵素反応を促進さ
せるためである。 但し、グルコースを多量に加えると分解してPH
低下を引きおこし、マロン酸分解反応が陽性の菌
による培地のアルカリ化を抑制する。 リン酸二水素一アルカリ金属塩はPH調整剤であ
りアルカリ金属塩としてはカリウム、ナトリウム
が好ましい。 上述した本発明の培地における各組成割合は臨
界的であり、特にリン酸二水素一アルカリ金属塩
は該組成物を水１に溶解したときのPHが6.3と
なり、呈色反応が明瞭に現われるように設定され
ている。またマロン酸塩の量も培養期間を短縮可
能なように設定されている。 硫酸アンモニウムの含量が少ないとマロン酸分
解反応が偽陽性となりやすい。 本発明の培地においては、PH指示薬としてはブ
ロムチモールブルーが最も適しており試験試料が
少量でも反応の陽性、陰性が明瞭に判定できるよ
うな量に設定されている。 本発明の培地は常法に従つて所定量の各成分を
水に溶解することによつて使用される。近年生化
学的性状検査は多数の試験を多穴プレート上で同
時に行うのが普通であり、このような場合には本
発明培地を試験用プレートのウエルに注入し、乾
燥させて乾燥培地とする。試験に際しては該ウエ
ルに試験菌の懸濁水を分注し、所定時間培養す
る。培養液の色の変化により、マロン酸分解反応
の陽性、陰性を判定する。 発明の具体的作用および効果 本発明の培地は、従来のマロン酸分解試験用培
地と全く同様にして使用される。培養時間は３〜
５時間に短縮可能であるが特に制限はされず、即
日同定、翌日同定のいずれにも適している。また
呈色が明瞭であり、反応の陽性、陰性の判定が容
易である。 本発明の培地組成にＬ−トリプトフアンを加え
たものは、マロン酸分解反応試験に加えてトリプ
トフアンデアミナーゼ反応にも用いることができ
る。トリプトフアンデアミナーゼ反応試験とはト
リプトフアンを脱アミノ化してインドールピルビ
ン酸を生成する菌を検出する試験である。 次に本発明の培地を使用してマロン酸分解試験
を行なつた実施例並びに本発明の培地組成にさら
にＬ−トリプトフアンを加えた培地を使用してマ
ロン酸分解試験およびトリプトフアンデアミナー
ゼ試験を行なつた参考例を示す。
関する。さらに詳しくは、本発明は腸内細菌等微
生物の生化学的性状同定法でマロン酸分解試験に
用いられる改良された培地に関するものである。 感染症に対して適切な治療を施すためには病原
菌を同定し、感受性試験を行ない、その病原菌に
有効な薬剤を決定することが重要である。このよ
うな病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化
学的性状検査が行なわれ、その項目としてマロン
酸分解試験が行なわれる。本発明の培地はこのよ
うなマロン酸分解試験に好適に使用される。 先行技術および問題点 マロン酸分解試験は、マロン酸を炭素源として
利用できるかどうかを判定する試験である。この
試験は菌をマロン酸を含有する培地で培養するこ
とによつて実施される。この試験で使用する培地
として、最近、プロテオーゼペプトン、グルコー
ス、マロン酸ナトリウム、Ｌ−トリプトフアン、
リン酸二水素一ナトリウム、塩化ナトリウム、ブ
ロムチモールブルーおよび精製水の組成からなる
ものが提案されている（特公昭58−20263）。この
培地はマロン酸分解試験及びトリプトフアンデア
ミナーゼ試験に用いられるもので、培養時間が従
来のものにくらべて大巾に短縮されている。即
ち、従来の培地においては培養期間が１〜２日間
であつたのに対してこの培地では培養期間が４〜
５時間に短縮されており、即日判定が可能であ
る。しかしながらこの培地においても菌の種類に
よつては４〜５時間の培養では反応が不十分であ
り判定が困難なものもあり、そのような場合には
培養時間を長くし、翌日に判定せざるをえない場
合があつた。従つて全ての菌について４〜５時間
の培養で反応の陽性、陰性を明瞭に判定できる培
地が要望されている。 また早期治療のためには菌の同定はできるだけ
速やかに行なわれるのが望ましいが、他方、検査
作業の都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない
場合も生ずる。このような場合には培養期間が厳
格に規定されておらず、作業上の都合で培養期間
を延長または短縮しても正確な判定が可能な培地
が望ましい。 さらに生化学的性状検査は作業の効率上多数の
試験を多穴培養プレートを用いて一度に行なうこ
とが多いので各試験の培養期間をそろえることが
必要となる。このような場合にも培養期間に厳格
な制限のない培地が望ましい。 発明の目的 本発明は培養期間が特に制限されず、即日同定
および翌日同定が可能なマロン酸分解試験用培地
を提供することを目的とする。 本発明はさらに呈色反応が明瞭であり判定が容
易なマロン酸分解試験用培地を提供することを目
的とする。 本発明によれば、酵母エキス0.5g；ペプトン
2.5g；グルコース0.75g；塩化ナトリウム1g；硫
酸アンモニウム1.5g；リン酸二水素一アルカリ金
属塩2g；マロン酸塩10g；およびブロムチモール
ブルーからなるPH指示薬0.12gの割合の組成より
なり、水１に溶解したときのPHが6.3であるマ
ロン酸分解試験用培地が提供される。 発明の具体的説明 本発明の培地は、酵母エキス、ペプトン、グル
コース、塩化ナトリウム、硫酸アンモニウム、リ
ン酸二水素一アルカリ金属塩、マロン酸塩および
PH指示薬からなる。 本発明の成分においてマロン酸塩としてはマロ
ン酸のアルカリ金属塩（特にカリウム、ナトリウ
ム塩）が好適に使用される。本発明においては培
地中にグルコースが添加されており反応性が向上
している。また、酵母エキスは酵素反応を促進さ
せるためである。 但し、グルコースを多量に加えると分解してPH
低下を引きおこし、マロン酸分解反応が陽性の菌
による培地のアルカリ化を抑制する。 リン酸二水素一アルカリ金属塩はPH調整剤であ
りアルカリ金属塩としてはカリウム、ナトリウム
が好ましい。 上述した本発明の培地における各組成割合は臨
界的であり、特にリン酸二水素一アルカリ金属塩
は該組成物を水１に溶解したときのPHが6.3と
なり、呈色反応が明瞭に現われるように設定され
ている。またマロン酸塩の量も培養期間を短縮可
能なように設定されている。 硫酸アンモニウムの含量が少ないとマロン酸分
解反応が偽陽性となりやすい。 本発明の培地においては、PH指示薬としてはブ
ロムチモールブルーが最も適しており試験試料が
少量でも反応の陽性、陰性が明瞭に判定できるよ
うな量に設定されている。 本発明の培地は常法に従つて所定量の各成分を
水に溶解することによつて使用される。近年生化
学的性状検査は多数の試験を多穴プレート上で同
時に行うのが普通であり、このような場合には本
発明培地を試験用プレートのウエルに注入し、乾
燥させて乾燥培地とする。試験に際しては該ウエ
ルに試験菌の懸濁水を分注し、所定時間培養す
る。培養液の色の変化により、マロン酸分解反応
の陽性、陰性を判定する。 発明の具体的作用および効果 本発明の培地は、従来のマロン酸分解試験用培
地と全く同様にして使用される。培養時間は３〜
５時間に短縮可能であるが特に制限はされず、即
日同定、翌日同定のいずれにも適している。また
呈色が明瞭であり、反応の陽性、陰性の判定が容
易である。 本発明の培地組成にＬ−トリプトフアンを加え
たものは、マロン酸分解反応試験に加えてトリプ
トフアンデアミナーゼ反応にも用いることができ
る。トリプトフアンデアミナーゼ反応試験とはト
リプトフアンを脱アミノ化してインドールピルビ
ン酸を生成する菌を検出する試験である。 次に本発明の培地を使用してマロン酸分解試験
を行なつた実施例並びに本発明の培地組成にさら
にＬ−トリプトフアンを加えた培地を使用してマ
ロン酸分解試験およびトリプトフアンデアミナー
ゼ試験を行なつた参考例を示す。
【表】
【表】
培養条件
上記の組成の本発明の培地および対照培地を多
穴プレートの各穴に、50μlずつ分注し、40℃で乾
燥した。次に寒天平板培地上で各種微生物を35〜
37℃で18〜24時間培養し、1.0mlの滅菌蒸留水中
に４〜５時間培養の場合は約６〜９×108／mlｌ，
16〜20時間培養の場合は約１〜２×108／mlにな
るように懸濁して各穴に50μlずつ接種後蓋をし、
35〜37℃で所定時間培養し、培養液の色の変化に
よりマロン酸分解反応の有無を判定した。結果を
第１表に示す。
穴プレートの各穴に、50μlずつ分注し、40℃で乾
燥した。次に寒天平板培地上で各種微生物を35〜
37℃で18〜24時間培養し、1.0mlの滅菌蒸留水中
に４〜５時間培養の場合は約６〜９×108／mlｌ，
16〜20時間培養の場合は約１〜２×108／mlにな
るように懸濁して各穴に50μlずつ接種後蓋をし、
35〜37℃で所定時間培養し、培養液の色の変化に
よりマロン酸分解反応の有無を判定した。結果を
第１表に示す。
【表】
【表】
参考例
前記実施例における本発明の培地および対照培
地にＬ−トリプトフアンを加えた培地を使用し
て、実施例と同様にしてマロン酸分解試験および
トリプトフアンデアミナーゼ反応試験を行なつ
た。その結果をそれぞれ第２表および第３表に示
す。
地にＬ−トリプトフアンを加えた培地を使用し
て、実施例と同様にしてマロン酸分解試験および
トリプトフアンデアミナーゼ反応試験を行なつ
た。その結果をそれぞれ第２表および第３表に示
す。
【表】
【表】
【表】
【表】
第１表及び第２表の結果から明らかなように、
マロン酸分解試験において本発明の培地を使用す
るときは培養時間の長短を問わず正確な菌の同定
が可能である。従つて検査作業の都合により即日
同定、翌日同定のいずれをも選択できる。 これに対して対照培地を使用するときは、菌に
よつては４〜５時間の培養では呈色が不十分であ
り、即日同定が困難な場合がある。 また、このように培養時間に厳格な制限を受け
ないことは多数の生化学的試験を同時に実施する
場合に極めて好都合である。
マロン酸分解試験において本発明の培地を使用す
るときは培養時間の長短を問わず正確な菌の同定
が可能である。従つて検査作業の都合により即日
同定、翌日同定のいずれをも選択できる。 これに対して対照培地を使用するときは、菌に
よつては４〜５時間の培養では呈色が不十分であ
り、即日同定が困難な場合がある。 また、このように培養時間に厳格な制限を受け
ないことは多数の生化学的試験を同時に実施する
場合に極めて好都合である。
Claims (1)
- １ 酵母エキス0.5g；ペプトン2.5g；グルコース
0.75g；塩化ナトリウム1g；硫酸アンモニウム
1.5g；リン酸二水素一アルカリ金属塩2g；マロン
酸塩10g；およびブロムチモールブルーからなる
PH指示薬0.12gの割合の組成よりなり、水１に
溶解したときのPHが6.3であるマロン酸分解試験
用培地。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9106484A JPS60234595A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | マロン酸分解試験用培地 |
| EP19850104454 EP0167724B1 (en) | 1984-05-09 | 1985-04-12 | Medium for malonate utilization test |
| DE8585104454T DE3563455D1 (en) | 1984-05-09 | 1985-04-12 | Medium for malonate utilization test |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9106484A JPS60234595A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | マロン酸分解試験用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60234595A JPS60234595A (ja) | 1985-11-21 |
| JPH0523759B2 true JPH0523759B2 (ja) | 1993-04-05 |
Family
ID=14016070
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9106484A Granted JPS60234595A (ja) | 1984-05-09 | 1984-05-09 | マロン酸分解試験用培地 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0167724B1 (ja) |
| JP (1) | JPS60234595A (ja) |
| DE (1) | DE3563455D1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19602345C2 (de) | 1996-01-24 | 2002-12-12 | Biotest Ag | Verfahren zur Verbesserung des Wachstums und des kolorimetrischen Nachweises von Bakterien, Hefen, Pilzen oder Kokken |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2047739A (en) * | 1979-04-27 | 1980-12-03 | Roche Products Ltd | Nutrient medium |
| US4385123A (en) * | 1979-06-08 | 1983-05-24 | Merck & Co., Inc. | Deacetylated polysaccharide S-60 |
-
1984
- 1984-05-09 JP JP9106484A patent/JPS60234595A/ja active Granted
-
1985
- 1985-04-12 EP EP19850104454 patent/EP0167724B1/en not_active Expired
- 1985-04-12 DE DE8585104454T patent/DE3563455D1/de not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60234595A (ja) | 1985-11-21 |
| EP0167724A1 (en) | 1986-01-15 |
| EP0167724B1 (en) | 1988-06-22 |
| DE3563455D1 (en) | 1988-07-28 |
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