JPH0574356B2 - - Google Patents
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- JPH0574356B2 JPH0574356B2 JP24297285A JP24297285A JPH0574356B2 JP H0574356 B2 JPH0574356 B2 JP H0574356B2 JP 24297285 A JP24297285 A JP 24297285A JP 24297285 A JP24297285 A JP 24297285A JP H0574356 B2 JPH0574356 B2 JP H0574356B2
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Classifications
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
技術分野
本発明は微生物のクエン酸塩利用能検査用培地
組成物に関する。さらに詳しくは、本発明はグル
コース非発酵性グラム陰性桿菌のクエン酸塩利用
能検査用培地組成物に関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌についてクエ
ン酸塩利用能の検査が行われる。これは、上記菌
が有するクエン酸分解能を利用し、菌の同定を行
うものである。本発明の培地組成物はこのような
試験に好適に使用される。 先行技術およびその問題点 上記検査の培地として従来、下記の組成を有す
るシモンズ（Simons）のクエン酸塩寒天培地が
知られている。 NH4H2PO4 1.0（ｇ） K2HPO4 1.0 NaCl 5.0 クエン酸三ナトリウム 2.0 MgSO4・7H2O 0.2 寒 天 15.0 ブロムチモールブルー 0.08 蒸留水 1000（ml） 上記培地は寒天培地であるため反応速度が遅
く、判定に１〜３日を要する。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査作業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌のクエン酸塩利
用能の検査用培地組成物を提供することを目的と
する。 本発明はさらに、呈色反応が明瞭であり、判定
が容易な上記検査用培地組成物を提供することを
目的とする。 本発明によれば、クエン酸三アルカリ金属塩
1.0部（重量部、以下同じ）に対し、リン酸一水
素二アルカリ金属塩0.125〜0.45部、リン酸二水
素一アンモニウム塩0.125〜0.45部、マグネシウ
ム鉱酸塩0.05〜0.2部、およびPH指示薬0.02〜0.08
部の組成よりなるグルコース非発酵性グラム陰性
桿菌のクエン酸塩利用能検査用培地組成物からな
る。 発明の具体的説明 本発明の培地組成物において、クエン酸三アル
カリ金属塩は基質であり、このものが検査菌によ
つて分解されると塩基性物質が生成して培地のPH
値が上昇する。この変化をPH指示薬で検出するこ
とにより、検査菌のクエン酸利用能を判定する。
クエン酸三アルカリ金属塩は、通常水和物の形態
で使用される。リン酸一水素二アルカリ金属塩と
リン酸二水素一アンモニウム塩はPH調整剤であ
り、本発明では、これらの混合比が新しく、従来
のものより使用量が少なくなつている。従つて、
PH変化がおこり易く、指示薬によつ呈色反応が明
瞭、迅速に表われる。また、菌の発育に最適なPH
になるような範囲に設定されている。マグネシウ
ム鉱酸塩としては、マグネシウムの塩酸、硫酸、
硝酸塩等が好ましい。PH指示薬としてはPH6.5〜
7.0からPH7.2以上に変化したときに変色するもの
が使用され、フエノールレツド、ブロムチモール
ブルー、ブロムクレゾールパープル、クレゾール
レツド、ブロムフエノールレツド等が適当であ
る。特にブロムチモールブルーを使用すると呈色
が明瞭であり、試験試料が少量でも陽性、陰性の
判定がしやすい。さらに、浸透圧調整剤としてア
ルカリ金属塩が使用されるのが望ましく、塩化ナ
トリウム、塩化カリウム等が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、特にPH調整剤はPH値が6.5〜7.0好まし
くは6.7〜6.8となり、基質であるクエン酸塩が分
解されたときに、培地のPHが7.2以上となるよう
に設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つて所定量の各
成分を水に溶解して使用される。近年生化学的性
状検査は多数の試験を多穴プレート上で同時に行
うのが普通であり、このような場合には本発明培
地を試験用プレートのウエルに注入し、乾燥させ
て乾燥培地とする。試験に際しては該ウエルに試
験菌の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間培
養する。４〜５時間の培養で判定することが望ま
れる場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個の
菌を接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれる
場合は約1.5×107個の菌を接種するのが好まし
い。このように接種菌数を調整することにより、
短時間でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌のクエ
ン酸塩利用能を検査した実施例を示す。 実施例 表１に記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて水１に溶解し、菌同定用培地１〜
３を得た。
組成物に関する。さらに詳しくは、本発明はグル
コース非発酵性グラム陰性桿菌のクエン酸塩利用
能検査用培地組成物に関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌についてクエ
ン酸塩利用能の検査が行われる。これは、上記菌
が有するクエン酸分解能を利用し、菌の同定を行
うものである。本発明の培地組成物はこのような
試験に好適に使用される。 先行技術およびその問題点 上記検査の培地として従来、下記の組成を有す
るシモンズ（Simons）のクエン酸塩寒天培地が
知られている。 NH4H2PO4 1.0（ｇ） K2HPO4 1.0 NaCl 5.0 クエン酸三ナトリウム 2.0 MgSO4・7H2O 0.2 寒 天 15.0 ブロムチモールブルー 0.08 蒸留水 1000（ml） 上記培地は寒天培地であるため反応速度が遅
く、判定に１〜３日を要する。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査作業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌のクエン酸塩利
用能の検査用培地組成物を提供することを目的と
する。 本発明はさらに、呈色反応が明瞭であり、判定
が容易な上記検査用培地組成物を提供することを
目的とする。 本発明によれば、クエン酸三アルカリ金属塩
1.0部（重量部、以下同じ）に対し、リン酸一水
素二アルカリ金属塩0.125〜0.45部、リン酸二水
素一アンモニウム塩0.125〜0.45部、マグネシウ
ム鉱酸塩0.05〜0.2部、およびPH指示薬0.02〜0.08
部の組成よりなるグルコース非発酵性グラム陰性
桿菌のクエン酸塩利用能検査用培地組成物からな
る。 発明の具体的説明 本発明の培地組成物において、クエン酸三アル
カリ金属塩は基質であり、このものが検査菌によ
つて分解されると塩基性物質が生成して培地のPH
値が上昇する。この変化をPH指示薬で検出するこ
とにより、検査菌のクエン酸利用能を判定する。
クエン酸三アルカリ金属塩は、通常水和物の形態
で使用される。リン酸一水素二アルカリ金属塩と
リン酸二水素一アンモニウム塩はPH調整剤であ
り、本発明では、これらの混合比が新しく、従来
のものより使用量が少なくなつている。従つて、
PH変化がおこり易く、指示薬によつ呈色反応が明
瞭、迅速に表われる。また、菌の発育に最適なPH
になるような範囲に設定されている。マグネシウ
ム鉱酸塩としては、マグネシウムの塩酸、硫酸、
硝酸塩等が好ましい。PH指示薬としてはPH6.5〜
7.0からPH7.2以上に変化したときに変色するもの
が使用され、フエノールレツド、ブロムチモール
ブルー、ブロムクレゾールパープル、クレゾール
レツド、ブロムフエノールレツド等が適当であ
る。特にブロムチモールブルーを使用すると呈色
が明瞭であり、試験試料が少量でも陽性、陰性の
判定がしやすい。さらに、浸透圧調整剤としてア
ルカリ金属塩が使用されるのが望ましく、塩化ナ
トリウム、塩化カリウム等が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、特にPH調整剤はPH値が6.5〜7.0好まし
くは6.7〜6.8となり、基質であるクエン酸塩が分
解されたときに、培地のPHが7.2以上となるよう
に設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つて所定量の各
成分を水に溶解して使用される。近年生化学的性
状検査は多数の試験を多穴プレート上で同時に行
うのが普通であり、このような場合には本発明培
地を試験用プレートのウエルに注入し、乾燥させ
て乾燥培地とする。試験に際しては該ウエルに試
験菌の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間培
養する。４〜５時間の培養で判定することが望ま
れる場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個の
菌を接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれる
場合は約1.5×107個の菌を接種するのが好まし
い。このように接種菌数を調整することにより、
短時間でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌のクエ
ン酸塩利用能を検査した実施例を示す。 実施例 表１に記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて水１に溶解し、菌同定用培地１〜
３を得た。
【表】
【表】
上記培地１〜３を多穴プレートの各ウエルに
50μずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培
地上で各種細菌を30℃で18〜24時間培養し、1.0
mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合は
1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／ml
となるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
シモンズ培地を用いた従来法により培養を行なつ
た。培養液の色の変化によりクエン酸塩利用能の
有無を判定した。結果を表２に示す。
50μずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培
地上で各種細菌を30℃で18〜24時間培養し、1.0
mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合は
1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／ml
となるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
シモンズ培地を用いた従来法により培養を行なつ
た。培養液の色の変化によりクエン酸塩利用能の
有無を判定した。結果を表２に示す。
【表】
発明の具体的作用および効果
表２から明らかなように、グルコース非発酵性
グラム陰性桿菌のクエン酸塩利用能検査におい
て、本発明の培地を使用すると、培養時間の長短
を問わず正確な菌の同定が可能である。従つて検
査作業の都合により即日同定、翌日同定のいずれ
も選択することができる。これに対して対照培地
は少くとも24時間の培養が必要であり、即日判定
は不可能である。例えば、対照培地を使用した場
合は、シユードモナス・ピユチダATCC12633、
シユードモナス・アエルギノーザATCC10145お
よびシユードモナス・セパシアATCC27515は４
時間培養では反応は陰性であり24時間培養で陽性
となる。これに対して本発明の培地を使用する
と、いずれの菌においても４時間培養で正しい判
定が可能である。
グラム陰性桿菌のクエン酸塩利用能検査におい
て、本発明の培地を使用すると、培養時間の長短
を問わず正確な菌の同定が可能である。従つて検
査作業の都合により即日同定、翌日同定のいずれ
も選択することができる。これに対して対照培地
は少くとも24時間の培養が必要であり、即日判定
は不可能である。例えば、対照培地を使用した場
合は、シユードモナス・ピユチダATCC12633、
シユードモナス・アエルギノーザATCC10145お
よびシユードモナス・セパシアATCC27515は４
時間培養では反応は陰性であり24時間培養で陽性
となる。これに対して本発明の培地を使用する
と、いずれの菌においても４時間培養で正しい判
定が可能である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ クエン酸三アルカリ金属塩1.0部（重量部、
以下同じ）に対し、リン酸一水素二アルカリ金属
塩0.125〜0.45部、リン酸二水素一アンモニウム
塩0.125〜0.45部、マグネシウム鉱酸塩0.05〜0.2
部、およびPH6.5〜7.0からPH7.2以上に変化したと
きに変色するPH指示薬0.02〜0.08部の組成よりな
るグルコース非発酵性グラム陰性桿菌のクエン酸
塩利用能検査用培地組成物。 ２ クエン酸三アルカリ金属塩がクエン酸三ナト
リウムである特許請求の範囲第１項記載の培地組
成物。 ３ リン酸一水素二アルカリ金属塩がリン酸一水
素二カリウム塩である特許請求の範囲第１項また
は第２項記載の培地組成物。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24297285A JPS62104594A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | クエン酸塩利用能検査用培地組成物 |
| EP19860402431 EP0222661B1 (en) | 1985-10-31 | 1986-10-30 | Medium composition for testing the citrate-utilizing capability of microorganisms |
| DE19863685939 DE3685939T2 (de) | 1985-10-31 | 1986-10-30 | Mediumzusammensetzung zur bestimmung der zitratverwendungsfaehigkeit von mikroorganismen. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24297285A JPS62104594A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | クエン酸塩利用能検査用培地組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62104594A JPS62104594A (ja) | 1987-05-15 |
| JPH0574356B2 true JPH0574356B2 (ja) | 1993-10-18 |
Family
ID=17096970
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24297285A Granted JPS62104594A (ja) | 1985-10-31 | 1985-10-31 | クエン酸塩利用能検査用培地組成物 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
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| JP (1) | JPS62104594A (ja) |
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| IL95970A0 (en) * | 1989-10-12 | 1992-05-25 | Imutran Ltd | Use of homologous complement restriction factors in preventing xenograft rejection |
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-
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- 1986-10-30 DE DE19863685939 patent/DE3685939T2/de not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
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| JPS62104594A (ja) | 1987-05-15 |
| EP0222661B1 (en) | 1992-07-08 |
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