JPH0586194B2 - - Google Patents
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- JPH0586194B2 JPH0586194B2 JP9803186A JP9803186A JPH0586194B2 JP H0586194 B2 JPH0586194 B2 JP H0586194B2 JP 9803186 A JP9803186 A JP 9803186A JP 9803186 A JP9803186 A JP 9803186A JP H0586194 B2 JPH0586194 B2 JP H0586194B2
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Description
【発明の詳細な説明】
．発明の背景
技術分野
本発明は微生物のインドール産生能検査用培地
組成物に関する。さらに詳しくは、本発明はグル
コース非発酵性グラム陰性桿菌のインドール産生
能検査用培地組成物に関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌についてイン
ドール産生能の検査が行われる。これは、上記菌
が有するインドール産生能を利用し、菌の同定を
行うものである。本発明の培地組成物はこのよう
な試験に好適に使用される。 先行技術およびその問題点 インドール産生反応はトリプトフアナーゼによ
りペプトン中のトリプトフアンからインドールが
産生される反応であり、従来、下記の組成を有す
るインドール産生検査用ペプトン水が用いられて
いる。 カゼインペプトン 10〜20g NaC 5g 蒸 留 水 1000ml PH7.4 検査に際しては上記ペプトン水に検査菌を接種
し、30℃で20〜48時間培養する。検査菌のインド
ール産生能の有無は培地にコバツク試薬を加え、
赤紫色反応物を生成するか否かによつて判定され
る。 上記従来法によれば判定までに長時間を要し、
またペプトン中のトリプトフアン量はペプトンの
種類、ロツト等により変動し、安定した結果が得
られない場合がある。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査差業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 ．発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌のインドール産
生能の検査用培地組成物を提供することを目的と
する。 かかる目的を達成するため、本発明はＬ−トリ
プトフアン1.0部（重量部、以下同じ）に対し、
ペプトン1.67〜15部、酵母エキス0.33〜３部およ
びリン酸一水素二アルカリ金属塩0.16〜２部の組
成よりなるグルコース非発酵性グラム陰性桿菌の
インドール産生能検査用培地組成物からなる。 さらに本発明はリン酸一水素二アルカリ金属塩
がリン酸一水素二ナトリウム塩であるインドール
産生能検査用培地組成物からなる。 ．発明の具体的説明 本発明の培地組成物において、Ｌ−トリプトフ
アンは基質であり、これが検査菌によつて分解さ
れるとインドールを生成し、これがコバツク試薬
中のパラジメチルベンズアルデヒドと反応して赤
紫色反応物を生成する。この変化によつて検査菌
のインドール産生能を判定する。ペプトンおよび
酵母エキスは養分として用いられる。リン酸一水
素二アルカリ金属塩はPH調整剤であり、菌の発育
に最適なPH6.9〜7.1になるような範囲に設定され
ている。本発明の培地組成物にはさらに浸透圧調
整剤としてアルカリ金属塩0.67〜６部が使用され
るのが望ましく、塩化ナトリウム、塩化カリウム
のようなアルカリ金属塩化物が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、Ｌ−トリプトフアン1.0部に対し、ペ
プトン1.67〜15部（好ましくは2.5〜7.5部）、酵母
エキス0.33〜３部（好ましくは0.5〜1.5部）およ
びリン酸一水素二アルカリ金属塩0.16〜２部（好
ましくは0.25〜0.75部）である。特にペプトン濃
度は重要であり、ペプトン濃度が低すぎると偽陽
性の判定となりやすく、逆に高すぎると偽陰性の
判定となりやすい。本発明の培地では、上述した
偽陽性や偽陰性の誤まつた判定を下す危険が少な
く、かつ、接種菌数を適宜選択することにより短
時間培養（４〜５時間）または一昼夜培養（18〜
22時間）のいずれによつても正しい判定が可能な
ようにペプトン濃度が設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つてＬ−トリプ
トフアン１部当り333〜1000部の滅菌蒸留水に溶
解して使用される。近年生化学的性状検査は多数
の試験を多穴プレート上で同時に行うのが普通で
あり、このような場合には本発明培地組成物の水
溶液を試験用プレートのウエルに注入し、乾燥さ
せて乾燥培地とする。試験に際しては該ウエルに
試験菌の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間
培養する。４〜５時間の培養で判定することが望
まれる場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個
の菌を接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれ
る場合は約1.5×107個の菌を接種するのが好まし
い。このように接種菌数を調整することにより、
短時間でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌のイン
ドール産生能を検査した実施例を示す。 実施例 表１の記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて蒸留水１に溶解し、菌同定用培地
１〜３を得た。
組成物に関する。さらに詳しくは、本発明はグル
コース非発酵性グラム陰性桿菌のインドール産生
能検査用培地組成物に関するものである。 細菌感染症に対して適切な治療を施すためには
病原菌を同定し、感受性試験を行い、その病原菌
に有効な薬剤を決定することが重要である。この
ような病原菌の同定に際しては多項目にわたる生
化学的性状検査が行われ、その項目の１つとして
グルコース非発酵性グラム陰性桿菌についてイン
ドール産生能の検査が行われる。これは、上記菌
が有するインドール産生能を利用し、菌の同定を
行うものである。本発明の培地組成物はこのよう
な試験に好適に使用される。 先行技術およびその問題点 インドール産生反応はトリプトフアナーゼによ
りペプトン中のトリプトフアンからインドールが
産生される反応であり、従来、下記の組成を有す
るインドール産生検査用ペプトン水が用いられて
いる。 カゼインペプトン 10〜20g NaC 5g 蒸 留 水 1000ml PH7.4 検査に際しては上記ペプトン水に検査菌を接種
し、30℃で20〜48時間培養する。検査菌のインド
ール産生能の有無は培地にコバツク試薬を加え、
赤紫色反応物を生成するか否かによつて判定され
る。 上記従来法によれば判定までに長時間を要し、
またペプトン中のトリプトフアン量はペプトンの
種類、ロツト等により変動し、安定した結果が得
られない場合がある。 細菌感染症の早期治療のためには、菌の同定は
できるだけ速やかに行うことが必要であり、より
短かい時間で菌の同定が可能な培地の出現が望ま
れていた。しかし、一方においては、検査差業の
都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない場合も
生じ、このような場合には培養期間が厳格に規制
されておらず、都合により培養時間を延長しても
反応過剰になつたりせず、正確な判定が可能な培
地が望ましい。 ．発明の目的 本発明は短時間の培養で同定が可能であるとと
もに長時間培養しても正確な同定が可能であるグ
ルコース非発酵性グラム陰性桿菌のインドール産
生能の検査用培地組成物を提供することを目的と
する。 かかる目的を達成するため、本発明はＬ−トリ
プトフアン1.0部（重量部、以下同じ）に対し、
ペプトン1.67〜15部、酵母エキス0.33〜３部およ
びリン酸一水素二アルカリ金属塩0.16〜２部の組
成よりなるグルコース非発酵性グラム陰性桿菌の
インドール産生能検査用培地組成物からなる。 さらに本発明はリン酸一水素二アルカリ金属塩
がリン酸一水素二ナトリウム塩であるインドール
産生能検査用培地組成物からなる。 ．発明の具体的説明 本発明の培地組成物において、Ｌ−トリプトフ
アンは基質であり、これが検査菌によつて分解さ
れるとインドールを生成し、これがコバツク試薬
中のパラジメチルベンズアルデヒドと反応して赤
紫色反応物を生成する。この変化によつて検査菌
のインドール産生能を判定する。ペプトンおよび
酵母エキスは養分として用いられる。リン酸一水
素二アルカリ金属塩はPH調整剤であり、菌の発育
に最適なPH6.9〜7.1になるような範囲に設定され
ている。本発明の培地組成物にはさらに浸透圧調
整剤としてアルカリ金属塩0.67〜６部が使用され
るのが望ましく、塩化ナトリウム、塩化カリウム
のようなアルカリ金属塩化物が好適である。 本発明の培地組成物の前述した成分割合は臨界
的であり、Ｌ−トリプトフアン1.0部に対し、ペ
プトン1.67〜15部（好ましくは2.5〜7.5部）、酵母
エキス0.33〜３部（好ましくは0.5〜1.5部）およ
びリン酸一水素二アルカリ金属塩0.16〜２部（好
ましくは0.25〜0.75部）である。特にペプトン濃
度は重要であり、ペプトン濃度が低すぎると偽陽
性の判定となりやすく、逆に高すぎると偽陰性の
判定となりやすい。本発明の培地では、上述した
偽陽性や偽陰性の誤まつた判定を下す危険が少な
く、かつ、接種菌数を適宜選択することにより短
時間培養（４〜５時間）または一昼夜培養（18〜
22時間）のいずれによつても正しい判定が可能な
ようにペプトン濃度が設定されている。 本発明の培地組成物は常法に従つてＬ−トリプ
トフアン１部当り333〜1000部の滅菌蒸留水に溶
解して使用される。近年生化学的性状検査は多数
の試験を多穴プレート上で同時に行うのが普通で
あり、このような場合には本発明培地組成物の水
溶液を試験用プレートのウエルに注入し、乾燥さ
せて乾燥培地とする。試験に際しては該ウエルに
試験菌の懸濁水を所定量分注し、30℃で所定時間
培養する。４〜５時間の培養で判定することが望
まれる場合は、液体培地50μ当り約7.5×107個
の菌を接種し、18〜22時間培養後の判定が望まれ
る場合は約1.5×107個の菌を接種するのが好まし
い。このように接種菌数を調整することにより、
短時間でもまた翌日でも検査が行える。 次に本発明の培地組成物を使用して細菌のイン
ドール産生能を検査した実施例を示す。 実施例 表１の記載の組成を有する本発明培地組成物を
常法に従つて蒸留水１に溶解し、菌同定用培地
１〜３を得た。
【表】
上記培地１〜３を多穴プレートの各ウエルに
50μずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培
地上で各種検査細菌を30℃で18〜24時間培養し、
1.0mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合
は1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／
mlとなるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
下記のペプトン水を用いる従来法により培養を行
なつた。 ペプトン水 カゼインペプトン 20g NaC 5g 蒸 留 水 1000ml PH7.4 所定時間培養したのち、培養液にコバツク試薬
（イソアミルアルコール75ml、パラジメチルベン
ズアルデヒド5g、濃塩酸25ml）を加えて赤紫色
を呈するかどうかにより、インドール産生能の有
無を判定した。結果を表２に示す。
50μずつ分注し、40℃で乾燥した。次に寒天培
地上で各種検査細菌を30℃で18〜24時間培養し、
1.0mlの滅菌蒸留水中に培養時間が４時間の場合
は1.5×109個／mlまた20時間の場合３×108個／
mlとなるように懸濁し各ウエルに50μずつ接種
し、30℃で所定時間培養した。比較試験として、
下記のペプトン水を用いる従来法により培養を行
なつた。 ペプトン水 カゼインペプトン 20g NaC 5g 蒸 留 水 1000ml PH7.4 所定時間培養したのち、培養液にコバツク試薬
（イソアミルアルコール75ml、パラジメチルベン
ズアルデヒド5g、濃塩酸25ml）を加えて赤紫色
を呈するかどうかにより、インドール産生能の有
無を判定した。結果を表２に示す。
【表】
．発明の具体的作用および効果
表２から明らかなように、グルコース非発酵性
グラム陰性桿菌のインドール産生能検査におい
て、本発明の培地を使用すると、培養時間の長短
を問わず正しい菌の同定が可能である。従つて検
査作業の都合により即日同定、翌日同定のいずれ
も選択することができる。これに対して対照培地
は少くとも20時間の培養が必要であり、即日判定
は不可能である。例えば、フラボバクテリウム・
メニンゴスペクテイカムATCC13253およびフラ
ボバクテリウム・インドロゲネスは、対照培地で
は５時間培養では判定は陰性であり22時間培養で
陽性になる。これに対して本発明の培地を使用す
ると５時間培養で正しい判定が可能である。
グラム陰性桿菌のインドール産生能検査におい
て、本発明の培地を使用すると、培養時間の長短
を問わず正しい菌の同定が可能である。従つて検
査作業の都合により即日同定、翌日同定のいずれ
も選択することができる。これに対して対照培地
は少くとも20時間の培養が必要であり、即日判定
は不可能である。例えば、フラボバクテリウム・
メニンゴスペクテイカムATCC13253およびフラ
ボバクテリウム・インドロゲネスは、対照培地で
は５時間培養では判定は陰性であり22時間培養で
陽性になる。これに対して本発明の培地を使用す
ると５時間培養で正しい判定が可能である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ Ｌ−トリプトフアン1.0部（重量部、以下同
じ）に対し、ペプトン1.67〜15部、酵母エキス
0.33〜３部およびリン酸一水素二アルカリ金属塩
0.16〜２部の組成よりなるグルコース非発酵性グ
ラム陰性桿菌のインドール産生能検査用培地組成
物。 ２ リン酸一水素二アルカリ金属塩がリン酸一水
素二ナトリウム塩である特許請求の範囲第１項記
載の培地組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9803186A JPS62257397A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | インド−ル産生能検査用培地組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9803186A JPS62257397A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | インド−ル産生能検査用培地組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62257397A JPS62257397A (ja) | 1987-11-09 |
| JPH0586194B2 true JPH0586194B2 (ja) | 1993-12-10 |
Family
ID=14208630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9803186A Granted JPS62257397A (ja) | 1986-04-30 | 1986-04-30 | インド−ル産生能検査用培地組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62257397A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101653497B1 (ko) * | 2015-06-05 | 2016-09-01 | 건양대학교산학협력단 | 음성인식 기반의 외골격계 근력보조 시스템 |
-
1986
- 1986-04-30 JP JP9803186A patent/JPS62257397A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101653497B1 (ko) * | 2015-06-05 | 2016-09-01 | 건양대학교산학협력단 | 음성인식 기반의 외골격계 근력보조 시스템 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62257397A (ja) | 1987-11-09 |
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