JPS6131085A - 固定化微生物菌体の製造法 - Google Patents
固定化微生物菌体の製造法Info
- Publication number
- JPS6131085A JPS6131085A JP15309284A JP15309284A JPS6131085A JP S6131085 A JPS6131085 A JP S6131085A JP 15309284 A JP15309284 A JP 15309284A JP 15309284 A JP15309284 A JP 15309284A JP S6131085 A JPS6131085 A JP S6131085A
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- JP
- Japan
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- activated carbon
- active carbon
- alginate
- immobilized
- microbial cells
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- Pending
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は基質との反応効率の著しく高められた固定化微
生物菌体の製造法に関する。
生物菌体の製造法に関する。
従来の技術
従来、固定化酵素を得るに際し、固定化担体として活性
炭を使用し、これ忙酵素を物理的に吸着させて固定化す
る方法が知られている〔例えば。
炭を使用し、これ忙酵素を物理的に吸着させて固定化す
る方法が知られている〔例えば。
昭和ｓｇ年グ月財団法人機械振興協会経済研究所発行「
バイオテクノロジー関連機械システム［関する調査研究
報告書」第！／−４３頁参照〕０発明が解決しようとす
る問題点 従来の固定化担体として用いられる活性炭は、活性炭表
面の大部分の細孔半径がＱ、Ｑ／μ程度以下であって、
かつ活性炭ノＩＩＩｔ当りの細孔容積が０１．２１Ｒｔ
程度以下のものであるため、酵素等の微小な粒子を固定
化する場合には、たとえ活性炭表面の細孔半径が小さく
ても有効であるが、微生物の菌体の如（酵素等よりも著
しく大きいものを包括固定化するための固定化担体とし
ては著しく不利なものである。
バイオテクノロジー関連機械システム［関する調査研究
報告書」第！／−４３頁参照〕０発明が解決しようとす
る問題点 従来の固定化担体として用いられる活性炭は、活性炭表
面の大部分の細孔半径がＱ、Ｑ／μ程度以下であって、
かつ活性炭ノＩＩＩｔ当りの細孔容積が０１．２１Ｒｔ
程度以下のものであるため、酵素等の微小な粒子を固定
化する場合には、たとえ活性炭表面の細孔半径が小さく
ても有効であるが、微生物の菌体の如（酵素等よりも著
しく大きいものを包括固定化するための固定化担体とし
ては著しく不利なものである。
か（して、活性炭を固定化担体として有効に微生物菌体
な固定化し、これを基質と接触させて効率よ（発酵させ
ることのできる固定化微生物菌体の開発が、業界では強
（要望されている。
な固定化し、これを基質と接触させて効率よ（発酵させ
ることのできる固定化微生物菌体の開発が、業界では強
（要望されている。
問題点を解決するための手段
本発明者等は、活性炭を固定化担体として用い、基質と
の反応効率が著しく高められた固定化微生物菌体を得る
ため鋭意検討を重ねた結果、活性炭表面の大部分の細孔
半径が２μ以上であって、かつ活性炭／ ｍｅ当りの細
孔の容積がｏ、ｙｍ１以上の活性炭を固定化担体として
用いることにより、微生物菌体の如き酵素等よりも著し
く大きいものでも効率良（固定化し得ること、又このよ
うにして得られた固定化微生物菌体を種々の基質と接触
させれば、反応効率が著しく高められること等の知見を
得て、本発明を完成した。
の反応効率が著しく高められた固定化微生物菌体を得る
ため鋭意検討を重ねた結果、活性炭表面の大部分の細孔
半径が２μ以上であって、かつ活性炭／ ｍｅ当りの細
孔の容積がｏ、ｙｍ１以上の活性炭を固定化担体として
用いることにより、微生物菌体の如き酵素等よりも著し
く大きいものでも効率良（固定化し得ること、又このよ
うにして得られた固定化微生物菌体を種々の基質と接触
させれば、反応効率が著しく高められること等の知見を
得て、本発明を完成した。
即ち、本発明は微生物菌体を、水もしくは緩衝液、及び
被覆材としてアルギン酸塩もしくはＮａ型カラギーナン
と混合した懸濁液を、活性炭表面０大部分の細孔半径が
２μ以上であって、かつ活性炭１ｍｌ当りの細孔の容積
が０．４１ｍ１以上の活性炭に収着させ、ついでゲル化
剤と接触させることを特徴とする固定化微生物菌体の製
造法である。
被覆材としてアルギン酸塩もしくはＮａ型カラギーナン
と混合した懸濁液を、活性炭表面０大部分の細孔半径が
２μ以上であって、かつ活性炭１ｍｌ当りの細孔の容積
が０．４１ｍ１以上の活性炭に収着させ、ついでゲル化
剤と接触させることを特徴とする固定化微生物菌体の製
造法である。
先ず５本発明に用いられる微生物菌体としては、細菌、
酵母、黴、放線菌等、如何なる種別の菌体でもよい。
酵母、黴、放線菌等、如何なる種別の菌体でもよい。
次に、上記した微生物菌体を、水もしくは緩衝液、及び
被覆材としてアルギン酸ナトリウム、アルギン酸カリウ
ム、アルギン酸アンモニウム等のアルギン酸塩もしくは
Ｎａ型カラギーナンと常温〜ｊＯＣ程度で混合して懸濁
液を得る。
被覆材としてアルギン酸ナトリウム、アルギン酸カリウ
ム、アルギン酸アンモニウム等のアルギン酸塩もしくは
Ｎａ型カラギーナンと常温〜ｊＯＣ程度で混合して懸濁
液を得る。
これに用いる緩衝液としては、例えば酢酸緩衝液、マツ
キルヴエイン緩衝液、リン酸緩衝液、トリス緩衝液、ベ
ロナール緩衝液等が挙げられる。
キルヴエイン緩衝液、リン酸緩衝液、トリス緩衝液、ベ
ロナール緩衝液等が挙げられる。
なお、上記した微生物菌体と、水もしくは緩衝液、及び
被覆材との混合は、これらを同時に混合してもよ（、又
菌体と水もしくは緩衝液とを混合したものを被覆材と混
合してもよい。
被覆材との混合は、これらを同時に混合してもよ（、又
菌体と水もしくは緩衝液とを混合したものを被覆材と混
合してもよい。
次に、上記した微生物菌体含有懸濁液を、活性炭表面の
大部分の細孔半径が２μ以上であって、かつ活性炭］Ｉ
ＩＩｔ当りの細孔の容部が０．’Ｉｍｔ以上の活性炭に
収着させる。これに用いる活性炭表面の大部分の細孔半
径が一μ以上であって、かつ活性炭／ ｍｌ当りの細孔
の容積がＯ，グｍ６以上の活性炭は、例えば杉等の針葉
樹のオガ屑を常法により炭化した木炭の粉末を、電気炉
に入れ、炉内の温度／ ０００．ｌコｏｏＣで、水蒸気
と空気の混合気体（空気中の酸素１．Ｑモルに対し水蒸
気０．２モル程度を混合した気体）を用いてガス付活を
行ない、付活歩留り１３％（Ｗ／Ｗ）程度以下となるま
で活性化を進めることにより得ることが出来る０ このような通常の活性炭に比し、著しく活性炭表面の細
孔半径並びに細孔容積の大きい活性炭を固定化担体とし
て用いることにより、従来の活性炭ではその表面の細孔
半径並びに細孔容積が小さいため活性炭の内部に保持さ
せることが困難であった微生物菌体な極めて効率良（該
活性炭の内部に保持させることが出来るのである。
大部分の細孔半径が２μ以上であって、かつ活性炭］Ｉ
ＩＩｔ当りの細孔の容部が０．’Ｉｍｔ以上の活性炭に
収着させる。これに用いる活性炭表面の大部分の細孔半
径が一μ以上であって、かつ活性炭／ ｍｌ当りの細孔
の容積がＯ，グｍ６以上の活性炭は、例えば杉等の針葉
樹のオガ屑を常法により炭化した木炭の粉末を、電気炉
に入れ、炉内の温度／ ０００．ｌコｏｏＣで、水蒸気
と空気の混合気体（空気中の酸素１．Ｑモルに対し水蒸
気０．２モル程度を混合した気体）を用いてガス付活を
行ない、付活歩留り１３％（Ｗ／Ｗ）程度以下となるま
で活性化を進めることにより得ることが出来る０ このような通常の活性炭に比し、著しく活性炭表面の細
孔半径並びに細孔容積の大きい活性炭を固定化担体とし
て用いることにより、従来の活性炭ではその表面の細孔
半径並びに細孔容積が小さいため活性炭の内部に保持さ
せることが困難であった微生物菌体な極めて効率良（該
活性炭の内部に保持させることが出来るのである。
上記の活性炭に微生物菌体含有懸濁液を収着させる手段
としては、例えば両者をゆｉ暖に混合してもよく、又該
活性炭を収納した容器内を減圧下におき、これに上記微
生物菌体含有懸濁液を加えて混合する等の手段が挙げら
れる。
としては、例えば両者をゆｉ暖に混合してもよく、又該
活性炭を収納した容器内を減圧下におき、これに上記微
生物菌体含有懸濁液を加えて混合する等の手段が挙げら
れる。
なお、微生物菌体含有懸濁液の添加量は、活性炭圧動し
通常グ０％ｒｖ／ｖ）以上が望ましい。
通常グ０％ｒｖ／ｖ）以上が望ましい。
次に、上記のように微生物菌体含有懸濁液を収着させた
活性炭をゲル化剤と接触させることにより被覆材をゲル
化させる。
活性炭をゲル化剤と接触させることにより被覆材をゲル
化させる。
これに用いるゲル化剤としては、例えば塩化カルシウム
、酢酸カルシウム、硫酸アルミニウム。
、酢酸カルシウム、硫酸アルミニウム。
塩化アルミニウム、塩化カリウム等が用いられ、これは
通常／ −／ ｏ ４ （ｗ ／ Ｖ ）程度の濃度の
溶液として用いるのが望ましい。
通常／ −／ ｏ ４ （ｗ ／ Ｖ ）程度の濃度の
溶液として用いるのが望ましい。
被覆材をゲル化した活性炭を例えば濾過などによりゲル
化剤と分離して固定化微生物菌体を得る。
化剤と分離して固定化微生物菌体を得る。
この固定化微生物菌体は通常の固定化微生物菌体と同様
に基質と接触させて使用することができる。
に基質と接触させて使用することができる。
発明の効果
本発明は、従来の活性炭に比し著しく活性炭表面の細孔
半径並びに細孔容積の大きい活性炭を固定化担体として
用いることにより、大きな細孔半径並に細孔容積に加え
て活性炭表面が微生物菌体と接触する面積がきわめて大
き（なるため、微生物菌体を極めて効率良く該活性炭の
内部に特に保持きせることが出来る。従って、本発明に
よれば、通常の活性炭を用いて微生物菌体を固定化する
場合よりも著しぐ小量の活性炭の使用で微生物菌体の効
果的な固定化ができ、このような活性炭を固定化担体と
した固定化微生物菌体な基質と接触享せれば、基質との
反応効率を著しく向上させることができる等１本発明は
産業上極めて有利である。
半径並びに細孔容積の大きい活性炭を固定化担体として
用いることにより、大きな細孔半径並に細孔容積に加え
て活性炭表面が微生物菌体と接触する面積がきわめて大
き（なるため、微生物菌体を極めて効率良く該活性炭の
内部に特に保持きせることが出来る。従って、本発明に
よれば、通常の活性炭を用いて微生物菌体を固定化する
場合よりも著しぐ小量の活性炭の使用で微生物菌体の効
果的な固定化ができ、このような活性炭を固定化担体と
した固定化微生物菌体な基質と接触享せれば、基質との
反応効率を著しく向上させることができる等１本発明は
産業上極めて有利である。
実施例
以下に本発明の実施例を示す。
実施例 １
食塩７２係（Ｗ／Ｖ ）、グルコース３％（Ｗ／■）、
肉エキス７％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス７％（Ｗ／Ｖ）、
チオグリコール酸ナトリウム０．１％（Ｗ／Ｖ ）、酢
酸ｏ、３ｇ係（Ｖ ／ Ｖ ）を含む液体培地（ｐＨ７
，，２）ｆ ００ｍ１ｔ、６ｉｐ−７ラスコに入れ、常
法圧より殺菌後、これ圧ペディオコッカス・ハロフィル
スＦＥＲＭ Ｐ −６４１２０を接種し、３０Ｃでｔ
ｉｔｇ時間培養して得た培養液を常法により遠心分離し
て！θ倍（Ｖ／Ｖ）に濃縮し、乳酸菌菌体の濃縮液を得
た。
肉エキス７％（Ｗ／Ｖ）、酵母エキス７％（Ｗ／Ｖ）、
チオグリコール酸ナトリウム０．１％（Ｗ／Ｖ ）、酢
酸ｏ、３ｇ係（Ｖ ／ Ｖ ）を含む液体培地（ｐＨ７
，，２）ｆ ００ｍ１ｔ、６ｉｐ−７ラスコに入れ、常
法圧より殺菌後、これ圧ペディオコッカス・ハロフィル
スＦＥＲＭ Ｐ −６４１２０を接種し、３０Ｃでｔ
ｉｔｇ時間培養して得た培養液を常法により遠心分離し
て！θ倍（Ｖ／Ｖ）に濃縮し、乳酸菌菌体の濃縮液を得
た。
一方、杉材のオガ屑を常法によりグθ０〜６００Ｃで炭
化した木炭を７０−２０メツシユに篩分けして得たもの
を、炉内温度１０ｊＯ’Ｑに設定した電気炉に入れ、こ
れに空気と水蒸気の混合ガス（空気中の酸素１モルに対
し水蒸気０．２モルを混合したガス）を通してガス付活
を行ない、付活歩留がｌグ、３係になるまで活性化を進
め活性炭表面の大部分の細孔半径が２８以上であって、
活性炭／ ｍｌ当りの細孔の容積がｏ、ｔ、ｔ６ｍｌの
活性炭を得た０ このようにして得られた活性炭／１０ｍｔに、３ｑｂ（
Ｗ／Ｖ）アルギン酸ナトリウム水溶液−〇ｍｌと上記の
乳酸菌菌体の濃ｍ液ｒｏｍｌとを均一に混合した愁濁＃
ｌを加えて充分混合し、該活性炭に収着享せた。ついで
、これを！係（Ｗ／Ｖ）塩化力ルンウム水浴液にノ夜浸
漬し、ついでこれをガーゼで１過して固定化乳酸菌菌体
（実施例１の固定化菌体）を得た。
化した木炭を７０−２０メツシユに篩分けして得たもの
を、炉内温度１０ｊＯ’Ｑに設定した電気炉に入れ、こ
れに空気と水蒸気の混合ガス（空気中の酸素１モルに対
し水蒸気０．２モルを混合したガス）を通してガス付活
を行ない、付活歩留がｌグ、３係になるまで活性化を進
め活性炭表面の大部分の細孔半径が２８以上であって、
活性炭／ ｍｌ当りの細孔の容積がｏ、ｔ、ｔ６ｍｌの
活性炭を得た０ このようにして得られた活性炭／１０ｍｔに、３ｑｂ（
Ｗ／Ｖ）アルギン酸ナトリウム水溶液−〇ｍｌと上記の
乳酸菌菌体の濃ｍ液ｒｏｍｌとを均一に混合した愁濁＃
ｌを加えて充分混合し、該活性炭に収着享せた。ついで
、これを！係（Ｗ／Ｖ）塩化力ルンウム水浴液にノ夜浸
漬し、ついでこれをガーゼで１過して固定化乳酸菌菌体
（実施例１の固定化菌体）を得た。
なお、対照として上記固定化乳酸菌菌体の製造操作中、
固定化担体として用いた上記の活性炭の代りに、市販の
活性炭としてヤシコールＭ（液相用）〔活性炭表面の大
部分の細孔半径がｏ、ｏｏｏｔ〜０．００／μであって
、活性炭／ｍｔ邑つの細孔の容積が０，１４１ｍ１の活
性炭、太平化学産業（株〕製〕を用いる以外は、上記操
作と全（同様な操作を行なって固定化乳酸菌菌体を得た
。
固定化担体として用いた上記の活性炭の代りに、市販の
活性炭としてヤシコールＭ（液相用）〔活性炭表面の大
部分の細孔半径がｏ、ｏｏｏｔ〜０．００／μであって
、活性炭／ｍｔ邑つの細孔の容積が０，１４１ｍ１の活
性炭、太平化学産業（株〕製〕を用いる以外は、上記操
作と全（同様な操作を行なって固定化乳酸菌菌体を得た
。
上記固定化乳酸菌菌体を夫々９０ｃＱのカラム（内径；
シσ、高さ：〕０ｃｒｎ）に充填し、該カラムに肉エキ
スノ％（Ｗ／Ｖ ）、ポリペプトン／％（Ｗ／Ｖ ）、
酵母エキスノ係（Ｗ／Ｖ）、グルコース／％（Ｗ／Ｖ）
、チオグリコール酸ナトリウＡＯ−／％（Ｗ／Ｖ ）、
食塩／、２％（Ｗ／Ｖ３を含む液体培地（ｐＨ６，０）
を上昇法（流速： ０．２３ｍ１７分）、３ｏＣで通液
して乳酸発酵を行ない乳酸生成量を測定した。その結果
を第１表に示す。
シσ、高さ：〕０ｃｒｎ）に充填し、該カラムに肉エキ
スノ％（Ｗ／Ｖ ）、ポリペプトン／％（Ｗ／Ｖ ）、
酵母エキスノ係（Ｗ／Ｖ）、グルコース／％（Ｗ／Ｖ）
、チオグリコール酸ナトリウＡＯ−／％（Ｗ／Ｖ ）、
食塩／、２％（Ｗ／Ｖ３を含む液体培地（ｐＨ６，０）
を上昇法（流速： ０．２３ｍ１７分）、３ｏＣで通液
して乳酸発酵を行ない乳酸生成量を測定した。その結果
を第１表に示す。
第１表
第１表より明らかな如（、実施例１で遵だ固定化乳酸菌
菌体の乳酸発酵能は、対照のそれに比し著しく優れたも
のであることが認められた。
菌体の乳酸発酵能は、対照のそれに比し著しく優れたも
のであることが認められた。
実施例 ２
グルコースｚθ％（Ｗ／Ｖ）、ペプトン／ ％ （Ｗ／
Ｖ）、酵母エキスノ％（Ｗ／Ｖ）を含む液体培地（ｐＨ
ｊ、ｊ）／Ａを３！フラスコに入れ、常法ニヨり殺菌し
た後、該培地にサツカロミセス−セレビシェＩＦＯ０，
２２’ｌの種培養液ＪＯｍｌを接種し、３ｏ’６でコク
時間振盪培養して得た培養液を常法により遠心分離して
−ｆＯ倍（Ｖ／Ｖ）に濃縮し、酵母菌体の濃縮液を得た
。
Ｖ）、酵母エキスノ％（Ｗ／Ｖ）を含む液体培地（ｐＨ
ｊ、ｊ）／Ａを３！フラスコに入れ、常法ニヨり殺菌し
た後、該培地にサツカロミセス−セレビシェＩＦＯ０，
２２’ｌの種培養液ＪＯｍｌを接種し、３ｏ’６でコク
時間振盪培養して得た培養液を常法により遠心分離して
−ｆＯ倍（Ｖ／Ｖ）に濃縮し、酵母菌体の濃縮液を得た
。
一方、杉材のオガ屑を常法によりｔ、ｔｏｏ〜１００Ｃ
で炭化した木炭をＩＱ−一〇メツシュに篩分けして得た
本のを、炉内温度７ノ３０Ｃに設定した電気炉に入れ、
これに空気と水蒸気の混合ガス（空気中の酸素７モル忙
対し水蒸気ｏ６ｇモルを混合したガス）を通してガス付
活を行ない、付活歩留が／３，１％になるまで活性化を
進めて活性炭表面の大部分の細孔半径が２μ以上であっ
て、活性炭ｔ ａｒｔ当りの細孔の容積が０．６ＩＩ＆
の活性炭を得た。
で炭化した木炭をＩＱ−一〇メツシュに篩分けして得た
本のを、炉内温度７ノ３０Ｃに設定した電気炉に入れ、
これに空気と水蒸気の混合ガス（空気中の酸素７モル忙
対し水蒸気ｏ６ｇモルを混合したガス）を通してガス付
活を行ない、付活歩留が／３，１％になるまで活性化を
進めて活性炭表面の大部分の細孔半径が２μ以上であっ
て、活性炭ｔ ａｒｔ当りの細孔の容積が０．６ＩＩ＆
の活性炭を得た。
このようにして得られた活性炭１ｌＯＩＩＩ６に、９％
（Ｗ ／ Ｖ ） Ｎａ型カラギーナン（三菱レーヨン
株式会社製、商品名ソアギーナ）水浴液２ｏｍｌと上記
の酵母菌体の濃縮液、２ｏｍｔとを均一に混合した懸濁
液を加えて充分混合し、該活性炭に収着させた。ついで
、これを−％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液に１０時間
浸漬し、ＮＱ、−の東洋１紙でｆ１過して固定化酵母菌
体を得た。
（Ｗ ／ Ｖ ） Ｎａ型カラギーナン（三菱レーヨン
株式会社製、商品名ソアギーナ）水浴液２ｏｍｌと上記
の酵母菌体の濃縮液、２ｏｍｔとを均一に混合した懸濁
液を加えて充分混合し、該活性炭に収着させた。ついで
、これを−％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液に１０時間
浸漬し、ＮＱ、−の東洋１紙でｆ１過して固定化酵母菌
体を得た。
Claims (2)
- （１）微生物菌体を、水もしくは緩衝液、及び被覆材と
してアルギン酸塩もしくはＮａ型カラギーナンと混合し
た懸濁液を、活性炭表面の大部分の細孔半径が２μ以上
であつて、かつ活性炭１ｍｌ当りの細孔の容積が０．４
ｍｌ以上の活性炭に収着させ、ついでゲル化剤と接触さ
せることを特徴とする固定化微生物菌体の製造法。 - （２）ゲル化剤が塩化カルシウム、酢酸カルシウム、硫
酸アルミニウム、塩化アルミニウム、及び塩化カリウム
より選ばれた少なくとも１種である特許請求の範囲第（
１）項記載の固定化微生物菌体の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15309284A JPS6131085A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 固定化微生物菌体の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15309284A JPS6131085A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 固定化微生物菌体の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6131085A true JPS6131085A (ja) | 1986-02-13 |
Family
ID=15554793
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15309284A Pending JPS6131085A (ja) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | 固定化微生物菌体の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6131085A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61104792A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-23 | Kawasaki Heavy Ind Ltd | 固定化菌体を用いる発酵方法 |
| US5916789A (en) * | 1992-04-29 | 1999-06-29 | Genencor International, Inc. | Immobilized enzyme |
| CN103923905A (zh) * | 2013-01-16 | 2014-07-16 | 浙江海洋学院 | 一种固定化微生物溢油修复剂的制备方法 |
| CN103923904A (zh) * | 2013-01-16 | 2014-07-16 | 浙江海洋学院 | 一种固定化微生物溢油修复剂的制备方法 |
| CN108264401A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-07-10 | 贵州省产品质量监督检验院 | 一种生物有机肥及制备工艺与施用方法 |
-
1984
- 1984-07-25 JP JP15309284A patent/JPS6131085A/ja active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61104792A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-23 | Kawasaki Heavy Ind Ltd | 固定化菌体を用いる発酵方法 |
| US5916789A (en) * | 1992-04-29 | 1999-06-29 | Genencor International, Inc. | Immobilized enzyme |
| CN103923905A (zh) * | 2013-01-16 | 2014-07-16 | 浙江海洋学院 | 一种固定化微生物溢油修复剂的制备方法 |
| CN103923904A (zh) * | 2013-01-16 | 2014-07-16 | 浙江海洋学院 | 一种固定化微生物溢油修复剂的制备方法 |
| CN108264401A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-07-10 | 贵州省产品质量监督检验院 | 一种生物有机肥及制备工艺与施用方法 |
| CN108264401B (zh) * | 2018-02-06 | 2021-12-24 | 贵州省产品质量监督检验院 | 一种生物有机肥及制备工艺与施用方法 |
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