JPS6130216B2 - - Google Patents
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- JPS6130216B2 JPS6130216B2 JP3205082A JP3205082A JPS6130216B2 JP S6130216 B2 JPS6130216 B2 JP S6130216B2 JP 3205082 A JP3205082 A JP 3205082A JP 3205082 A JP3205082 A JP 3205082A JP S6130216 B2 JPS6130216 B2 JP S6130216B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/64—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving ketones
Description
本発明は体液、殊に尿中のアセト酢酸またはア
セトン(以下「ケトン体」という)を検出するた
めの試験片に関するものである。 糖尿病、腎不全、消化器症患、尿毒症等により
ケト−ジスが生起しアセト酢酸、アセトン、β−
ヒドロキン酪酸等のケトン体が血液中に増加し尿
中に大量に排泄される。 従つて、尿中のケトン体を測定することによつ
て上記の如き各種症患の有無の判定あるいは予後
の判定をすることができる。 従来、体液中のケトン体を検出するため種々の
試薬や方法が提案されたが、その多くはニトロプ
ルシド塩を反応試薬として含有する試験片あるい
は組成物をアルカリ性条件下でケトン体と反応さ
せるものであつた。 しかし、ニトロプルシド塩はPH7以上でのみ安
定でPH8以上では分解してしまうが、ニトロプル
シド塩をケトン体検出のために使用するにはPH8
以上のアルカリ性媒体中でないと作用しないので
試験紙上でアルカリ性物質から保護することが必
要となり、これを解決するためにポリビニルピロ
リドン酢酸ビニル共重合体、メチルエチルエーテ
ル−無水マレイン酸共重合体等の有機フイルム形
成物質によりニトロプルシド塩を保護する方法や
アルカリ性物質にアミン、アミノ酸、アルコール
アミン等を使用してニトロプルシド塩を安定化す
る方法が知られているが、これらは耐熱性が悪い
ものであつた。 本発明は上記事情を鑑みなされたもので、その
目的とするところはアルカリ性物質に対して安定
で、しかも検出感度のよい製造の容易なケトン体
検出試験片を提供することにある。 すなわち、本発明は吸収性担体にアルカリ性緩
衝物質および水溶性アミノ酸の乾燥物の層を設
け、さらに該層の外側にニトロプルシドナトリウ
ムおよび塩基度が3以上の有機溶媒に可溶な有機
酸の乾燥物の層を設けたことを特徴とするアセト
酢酸またはアセトン検出用試験片である。 本発明に係る試験片は以下のような方法によつ
て製造することができる。まず、紙、ガラス繊
維、紙等の吸収性担体をアルカリ性緩衝剤および
アミノ酸溶液に浸し、乾燥する。第2に、こうし
て処理した担体をニトロプルシドナトリウムおよ
び有機酸溶液に浸し、乾燥して作製する。 第1の処理に使用される緩衝剤はPH8〜10を与
えるもので、特に有用なものとしてはリン酸三ナ
トリウム、リン酸二ナトリウム、ホウ酸塩、エチ
レンジアミン四酢酸等で、アミノ酸としては水溶
性アミノ酸であれば何でもよいが好ましくはグリ
シン、あるいはアラニンである。その際、含浸液
100ml中緩衝剤は20〜40g、アミノ酸は10〜20g
を含有するのが適当である。 本発明では、有機溶媒に可溶な有機酸を使用す
ることにより、貯蔵中、ニトロプルシドナトリウ
ムをアルカリ性物質の有害作用から保護すること
が可能となつた。 本発明に用いることができる有機溶媒に可溶な
有機酸としては、塩基度3以上有機酸、例えばク
エン酸、エチレンジアミン四酢酸、ピロメリツト
酸などであり、塩基度2以下のものを用いた場合
より安定性の点でより有効である。 ニトロプルシドナトリウムと有機酸は有機溶
剤、例えば、メタノール、ジメチルスルホキシ
ド、エタノール、ジメチルホルムアミドおよび、
その混合物に溶かして用いるが、含浸液100ml中
ニトロプルシドナトリウムは1〜5g、有機酸は
0.5〜5gを含有するのが適当である。 本発明に係る試験片は、ケトン体、特に尿中ア
セト酢酸濃度5mg〜10mg%で紫色に呈色、陽性呈
色反応は15秒以内におこる。 一般的貯蔵の室温状態(温度10〜20℃、湿度20
〜50%)では、いずれも良好な安定性を保持でき
る。 以下、実施例および比較例をもつて本発明の効
果を詳細に説明する。 比較例 1 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ジメチルスルホキシド 10ml 紙に溶液1を含浸し、100℃で乾燥する。乾
燥後、溶液を含浸し、80℃で乾燥する。この試
験片で、尿100ml中のアセト酢酸5mg〜10mgを15
秒以内に紫色の呈色によつて検出することができ
る。 比較例 2 A リン酸三ナトリウム・12H2O 210g リン酸二ナトリウム・無水物 90g グリシン 187g 蒸留水 1000mlとなるまで B ニトロプルシドナトリウム 8g 無水物 ポリビニルピロリドン/ 酢酸ビニル共重合体 (50%エタノール溶液) 65ml ジメチルスルホキシド 380ml 無水エタノール 185ml クロロホルム 350ml 陰イオン洗浄剤の有機 リン酸エステル 17ml 蒸留水 1000mlとなるまで 比較例1と同様な方法で乾燥した。 実施例 1 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g クエン酸・1H2O 0.08g ジメチルスルホキサイド 10ml 実施例 2 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ピロメリツト酸 0.05g エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 比較例 3 溶液1(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g 安息香酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 比較例 4 溶液(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.61g マレイン酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 実施例 3 溶液(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ピロメリツト酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 実施例1〜3、比較例3・4において比較例1
と同様に紙に溶液1を含浸し、100℃で乾燥
し、次いで溶液を含浸し80℃で乾燥した。 それらの試験片は尿100ml中のアセト酢酸5mg
〜10mgを15秒以内に紫色の呈色によつて検出する
ことができた。また、正常尿では何ら変色せず試
験片そのものの色である徴かつ色のままであつ
た。 実施例1・2および比較例1・2の試験片を乾
燥剤を入れた褐色の密封ピンを用い室温で貯蔵
し、その経時変化を調べた。その結果を表1に示
す。
セトン(以下「ケトン体」という)を検出するた
めの試験片に関するものである。 糖尿病、腎不全、消化器症患、尿毒症等により
ケト−ジスが生起しアセト酢酸、アセトン、β−
ヒドロキン酪酸等のケトン体が血液中に増加し尿
中に大量に排泄される。 従つて、尿中のケトン体を測定することによつ
て上記の如き各種症患の有無の判定あるいは予後
の判定をすることができる。 従来、体液中のケトン体を検出するため種々の
試薬や方法が提案されたが、その多くはニトロプ
ルシド塩を反応試薬として含有する試験片あるい
は組成物をアルカリ性条件下でケトン体と反応さ
せるものであつた。 しかし、ニトロプルシド塩はPH7以上でのみ安
定でPH8以上では分解してしまうが、ニトロプル
シド塩をケトン体検出のために使用するにはPH8
以上のアルカリ性媒体中でないと作用しないので
試験紙上でアルカリ性物質から保護することが必
要となり、これを解決するためにポリビニルピロ
リドン酢酸ビニル共重合体、メチルエチルエーテ
ル−無水マレイン酸共重合体等の有機フイルム形
成物質によりニトロプルシド塩を保護する方法や
アルカリ性物質にアミン、アミノ酸、アルコール
アミン等を使用してニトロプルシド塩を安定化す
る方法が知られているが、これらは耐熱性が悪い
ものであつた。 本発明は上記事情を鑑みなされたもので、その
目的とするところはアルカリ性物質に対して安定
で、しかも検出感度のよい製造の容易なケトン体
検出試験片を提供することにある。 すなわち、本発明は吸収性担体にアルカリ性緩
衝物質および水溶性アミノ酸の乾燥物の層を設
け、さらに該層の外側にニトロプルシドナトリウ
ムおよび塩基度が3以上の有機溶媒に可溶な有機
酸の乾燥物の層を設けたことを特徴とするアセト
酢酸またはアセトン検出用試験片である。 本発明に係る試験片は以下のような方法によつ
て製造することができる。まず、紙、ガラス繊
維、紙等の吸収性担体をアルカリ性緩衝剤および
アミノ酸溶液に浸し、乾燥する。第2に、こうし
て処理した担体をニトロプルシドナトリウムおよ
び有機酸溶液に浸し、乾燥して作製する。 第1の処理に使用される緩衝剤はPH8〜10を与
えるもので、特に有用なものとしてはリン酸三ナ
トリウム、リン酸二ナトリウム、ホウ酸塩、エチ
レンジアミン四酢酸等で、アミノ酸としては水溶
性アミノ酸であれば何でもよいが好ましくはグリ
シン、あるいはアラニンである。その際、含浸液
100ml中緩衝剤は20〜40g、アミノ酸は10〜20g
を含有するのが適当である。 本発明では、有機溶媒に可溶な有機酸を使用す
ることにより、貯蔵中、ニトロプルシドナトリウ
ムをアルカリ性物質の有害作用から保護すること
が可能となつた。 本発明に用いることができる有機溶媒に可溶な
有機酸としては、塩基度3以上有機酸、例えばク
エン酸、エチレンジアミン四酢酸、ピロメリツト
酸などであり、塩基度2以下のものを用いた場合
より安定性の点でより有効である。 ニトロプルシドナトリウムと有機酸は有機溶
剤、例えば、メタノール、ジメチルスルホキシ
ド、エタノール、ジメチルホルムアミドおよび、
その混合物に溶かして用いるが、含浸液100ml中
ニトロプルシドナトリウムは1〜5g、有機酸は
0.5〜5gを含有するのが適当である。 本発明に係る試験片は、ケトン体、特に尿中ア
セト酢酸濃度5mg〜10mg%で紫色に呈色、陽性呈
色反応は15秒以内におこる。 一般的貯蔵の室温状態(温度10〜20℃、湿度20
〜50%)では、いずれも良好な安定性を保持でき
る。 以下、実施例および比較例をもつて本発明の効
果を詳細に説明する。 比較例 1 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ジメチルスルホキシド 10ml 紙に溶液1を含浸し、100℃で乾燥する。乾
燥後、溶液を含浸し、80℃で乾燥する。この試
験片で、尿100ml中のアセト酢酸5mg〜10mgを15
秒以内に紫色の呈色によつて検出することができ
る。 比較例 2 A リン酸三ナトリウム・12H2O 210g リン酸二ナトリウム・無水物 90g グリシン 187g 蒸留水 1000mlとなるまで B ニトロプルシドナトリウム 8g 無水物 ポリビニルピロリドン/ 酢酸ビニル共重合体 (50%エタノール溶液) 65ml ジメチルスルホキシド 380ml 無水エタノール 185ml クロロホルム 350ml 陰イオン洗浄剤の有機 リン酸エステル 17ml 蒸留水 1000mlとなるまで 比較例1と同様な方法で乾燥した。 実施例 1 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g クエン酸・1H2O 0.08g ジメチルスルホキサイド 10ml 実施例 2 溶液 1 リン酸三ナトリウム・12H2O 10g リン酸二ナトリウム・12H2O 10g グリシン 10g 蒸留水 50ml 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ピロメリツト酸 0.05g エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 比較例 3 溶液1(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g 安息香酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 比較例 4 溶液(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.61g マレイン酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 実施例 3 溶液(実施例1と同じ) 溶液 ニトロプルシドナトリウム 0.1g ピロメリツト酸 0.2mmo エタノール 5ml ジメチルスルホキサイド 5ml 実施例1〜3、比較例3・4において比較例1
と同様に紙に溶液1を含浸し、100℃で乾燥
し、次いで溶液を含浸し80℃で乾燥した。 それらの試験片は尿100ml中のアセト酢酸5mg
〜10mgを15秒以内に紫色の呈色によつて検出する
ことができた。また、正常尿では何ら変色せず試
験片そのものの色である徴かつ色のままであつ
た。 実施例1・2および比較例1・2の試験片を乾
燥剤を入れた褐色の密封ピンを用い室温で貯蔵
し、その経時変化を調べた。その結果を表1に示
す。
【表】
以上の様に、有機酸を用いた試験片は経時変化
が少なく、安定性に優れていることがわかつた。 また、実施例3および比較例3,4を室温で、
かつ湿度が70%の場所に放置し、試験片への湿気
による影響を調べた。 この結果を第2表に示す。
が少なく、安定性に優れていることがわかつた。 また、実施例3および比較例3,4を室温で、
かつ湿度が70%の場所に放置し、試験片への湿気
による影響を調べた。 この結果を第2表に示す。
【表】
以上の様に、塩基度が2以下の有機酸よりも塩
基度が3以上の有機酸を用いた方が有効であるこ
とがわかつた。
基度が3以上の有機酸を用いた方が有効であるこ
とがわかつた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 吸収性担体にアルカリ性緩衝物質および水溶
性アミノ酸の乾燥物の層を設け、さらに該層の外
側にニトロプルシドナトリウムおよび塩基度が3
以上の有機溶媒に可溶な有機酸の乾燥物の層を設
けたことを特徴とするアセト酢酸またはアセトン
検出用試験片。 2 前記アルカリ性緩衝物質がリン酸三ナトリウ
ムまたはリン酸二ナトリウムである特許請求の範
囲第1項記載のアセト酢酸またはアセトン検出用
試験片。 3 前記有機酸がクエン酸、エチレンジアミン四
酢酸、ピロメリツト酸のいずれかである特許請求
の範囲第1項または第2項記載のアセト酢酸また
はアセトン検出用試験片。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3205082A JPS57211067A (en) | 1982-03-01 | 1982-03-01 | Test specimen for detection of ketone body |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3205082A JPS57211067A (en) | 1982-03-01 | 1982-03-01 | Test specimen for detection of ketone body |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP7305577A Division JPS547993A (en) | 1977-06-20 | 1977-06-20 | Test piece for detecting keton member |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS57211067A JPS57211067A (en) | 1982-12-24 |
JPS6130216B2 true JPS6130216B2 (ja) | 1986-07-11 |
Family
ID=12348031
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP3205082A Granted JPS57211067A (en) | 1982-03-01 | 1982-03-01 | Test specimen for detection of ketone body |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS57211067A (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS60147651A (ja) * | 1984-01-12 | 1985-08-03 | Sekisui Chem Co Ltd | 体液中総蛋白およびアミノ酸の検出用試験紙およびその製造方法 |
CN101833006B (zh) * | 2009-03-13 | 2013-01-30 | 云南农业大学 | 一种快速测定奶牛亚临床酮病的试纸制备方法 |
-
1982
- 1982-03-01 JP JP3205082A patent/JPS57211067A/ja active Granted
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS57211067A (en) | 1982-12-24 |
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