JPS61282368A - 抗がん性キナゾリン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、効力のある抗腫瘍剤（抗がん剤）であるキナ
ゾリン誘導体に関する。

腫瘍の処置に使用されてきている薬物の一大部分は、分
割する細胞中の核酸の複製を直接にあるいは間接に妨害
する。抗代謝物質と呼ばれる多くの因子は、ＤＮＡ合成
に含まれる特異的酵素の基質と拮抗しあるいはそれを置
換する、腫瘍の必須生長要素を欠乏させるととＫよって
、腫瘍を殺すように設計される。抗代謝物質類はそれら
の特異的阻害作用に従って分類することができ、そして
例はプリン類およびピリミジン類の類体類および葉酸の
拮抗剤類、例えば、アミノグチリンおよびアメトプテリ
ン（メトトレキセート）を包含する。

葉酸の拮抗剤類のうちで、メトトレキセートは人間の悪
性の病気の処置において、特に絨毛膜がんおよび骨肉腫
の処置においておよび急性リンパ性白血病の維持治療に
おいて広く使用されている。

その酵素ジヒＹロフオレートリダクターゼ（ＤＨＰＲ，
ＩＣ１，５，１，４）の阻害は、炭素担持ナト２ヒドロ
フオレートのプールを欠乏させ、ＤＮＡ合成に必要なチ
ミンヌクレオチドおよびプリンヌクレオデドの両者の新
たな（ｄ＠ｎｏｔｅ）合成を阻害する。メトトレキセー
トによシ誘導される「プリン不足（ｐｕｒｉｎ＊１ｅａ
ｓ）Ｊ状態はマウスの胃腸管に対する毒性を生じさせる
ことが示されたが、それはある種の培養された腫瘍細胞
系統に対するメトトレキセートの細胞毒性に帰因せず、
そして他においてそれと拮抗することがある。

メトトレキセートは代謝の活性化を必要とせず、そして
大部分の細胞のタイプにおいて代Ｗを有意に低下させる
。メトトレキセートの抵抗性既知の原因は、膜の輸送の
減少および細胞のＤＨＰＲの増加を包含する。後者の場
合において、メトトレキセートの有効な標的はチミジレ
ートシンターゼ（ＴＳ、ＥＣ２，１，１，４５）となる
ことができ、チミジレートの新らたな合成における最終
工程を触媒する酵素はもっばらＤＮＡ合成に要求される
ことがある。ＴＳの直接の阻害は５−フルオロウラシル
、５−フルオロデオキシウリジンモノホスフェートの活
性な代謝物により達成されうる。

しかしながら、５−フルオロウラシル抵抗性は適当な活
性化酵素の減少によシしばしば達成され、そしてこの薬
物はＲＮＡおよびＤＮＡの中へのその組み込みに帰因さ
せうる毒性作用をまた有することができる。

したがって、ピリジン基質よシはむしろＴＳのナト２ヒ
ドロフオレート共基質（ｃｏｓｕｂｓｔｒａｔｅ）と拮
抗する因子（ａｇ＠ｎｔ）が要求される。なぜなら、こ
のような化合物はメトトレキセート感受性腫瘍において
ばかシでなく、かつまたレイズされた（ｒａｉｓ＠ｄ）
細胞のＤＨＦＲＫ、より抵抗性のものにおいてメトトレ
キセートと同等であるかあるいはそれよフもすぐれた活
ａをもつことを期待できるからでるる、プリン類の合成
は影響を受けないであろうから、それはまた宿主に対す
る毒性が低いであろう、さらに、７オレー）　（ｆｏｌ
ａｔｅ）類似体は、代謝の活性化を必要としないので、
ピリミジン類よυも活性であろう。

いくつかの古典的なキナゾリン抗７オレート、例えば、
２−アミノ−４−ヒドロキシおよび２．４−ジアミノ誘
導体はＴＳの阻害剤であることが示され、これらの後者
はＴＳのかなシ効来的な阻害剤であることが示され九が
、それらはまたＤＨＦＲＫかなシ竪固に結合する、 英国特許（ＧＢ）２．０６へ６５５−８号は、次の武人
のキナゾリン類または製薬学的に許容すれうるそれらの
塩類またはエステル類を記載している： 式中８は １）直鎖状もしくは分枝鎖状の飽和もしくは不飽和の炭
化水素基、または ２）少なくとも１つの異Ｓ原子（Ｒが０１炭化水素基で
あるとき、前記異種原子または各異種原子はハロｒ）で
ある）、または飽和の炭素環式基または少なくとも１つ
の異種原子を含有する基（Ｒが環式基を含有するとき、
前記異種原子はＯ，ＮまたはＳである）Ｋより置換され
た、直鎖状もしくは分枝鎖状の飽和もしくは不飽和の炭
化水素基を表わし、 ｎは０または１〜４の整数でおり、 Ｘは、あるいは、ｎが少なくとも２であるとき、各Ｘは
、独立に、ハロｒノ’Ｉ　Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アリー
ルまたはアラルキル基または少なくとも１つの異種原子
を含む基を表わし、そしてＸは次の式の基を表わす： ａ）−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＯＨ ＣＨｔ　−Ｃｏ　０Ｈ （Ｌ−７スパルテー）　（ａｓｐａｒｔａｔｅ）　）ｂ
）−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＯＨ ＣＨ，−ＣＨ！−ＣＯＯＨ （Ｌ−グルタメー）　（ｇｌｕｔａｍａｔａ）　）また
は ここでｍ≧１（ポリーＬ−グルタメート）。

臨床学的用途においてかなりの将来性を示す武人のより
効力のある化合物の１種は、Ｎ−（４−（Ｎ−（（２−
アミノ−４−ヒドロキシ−６−キナゾリル）メチル）グ
ロブ−２−イニルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタミ
ン酸でアシ、これはＮ”−グロノ量ルイルー５．８−ジ
デアザ葉酸としてまた知られかつコードＣＢ５７１７で
知られている。

弐Ａの種々のＮ　１　Ｇ置換基を有する５、８−ジブア
ザ葉酸の類似体は、新たなテミジレート合成の道筋であ
る末端酵素である、チミジレートシンターゼ（ＴＳ）の
すぐれた阻害剤であることが以前に足置れｆｃ。

これらのうち最も効力のあるもののＮ１°−グロブぐル
ギルー５．８−ジデアザ葉酸（ＣＢ３７１７）は、生体
外または生体内の両者におけるし１２１０細胞に対して
活性であることがわかった。ＣＢ５７１７の細胞毒性の
作用は両者の場合において、チミジレート合成における
サルベージ前駆体であるチミジンによシ阻止された。と
れはナト２ヒドロフオレー）　（Ｐ　Ｈ４）の酸化−還
元サイクルに７オレートリダクターゼ（ＤＨＦＲ）の阻
害は細胞不含系罠おいてかなシ効力があるが、数学的モ
デル化および実験の証拠はＤＨＦＲの阻害はこの化合物
の主な作用場忙ｘではないことを確証する。

！ウスおよびヒトの両者において、毒性は肝臓および腎
臓に対して観測される。前者の毒性はアラニントランス
アミナーゼの一時的上昇として現われ、これに「倦怠」
の感じを伴い、そして後者は血漿尿素（−９ウス）の上
昇または糸球体濾過速度（ＧＰＦ　）（ヒト）の低下と
して現われる。いくつかの小さくかつ部分的な応答は、
期Ｉ／ＩＩの臨床的研究の間に認められた（とくに乳房
および卵巣）、こうしてＣＢ３７１７はヒトにおいて抗
腫瘍性質を有するが、その使用は明らかに投与量に無関
係な（しかし生命を脅かない）肝臓への毒性によって妨
害される。

したがって、このような毒性の副作用をもたず、かつす
ぐれた腫瘍阻止のために必須の特性を保持する第２世代
の抗フオレート（ａｎｔｉｆｏｌａｔｓ）のための役割
が存在する。しかしながら、酸性のｐＨにおけるＣＢ５
７１７の劣った溶解度は腎臓の毒性の原因となるが、肝
臓への毒性の原因に関する手がかりは現われようとして
いる。こうして化学的合成は、他の効力の６るＴＳ阻害
剤を探す上で合理的であるが、肝臓に対して毒性でない
化合物の探求において実際的でおったにちがいないつ今
回、価値あるＴ８阻害性質を保持するが、肝臓に対する
毒性をＣＢ５７１７および弐Ａの関連化合物に比べて減
少させる５、８−ジブアザ葉酸の類似体の新規な部類を
、われわれは発見した。

したがって、本発明は次の一般式Ｉの化合物または製薬
学的に許容されうるその塩またはエステルを提供する： 式中Ｒは １）水素または ２）直鎖状もしくは分枝鎖状の飽和もしくは不飽和の炭
化水素基、または ３）少なくとも１つの異種原子（ＲがＣ１炭化水素基で
あるとき、前記異種原子または各異種原子はハロゲノで
める）により、飽和炭素環式基によシ、あるいは少なく
とも１つの異種原子を含有する基（Ｒが環式基を含有す
るとき、前記異種原子または各異種原子はＯ，Ｎまたは
Ｓである）によシ置換された、直鎖状もしくは分枝鎖状
の飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、 ｎは０．１または２で１、ｚは−ＣＨ＝ＣＨ−または−
〇−または−Ｓ−を表わし、 Ｘは、あるいはｎが少なくとも２の整数であるとき、各
Ｘは、独立に、ハロゲノ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アリー
ルまたはアラルキル基または少なくとも１つの異種原子
を含む基を表わし、そして Ｙは次式の基を表わす： ａ）−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＯＨ ＣＬ　−ＣＯＯＨ （Ｌ−アスパラギン酸残基） ｂ）　−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＯＫ ＣＨｔ−ＣＨｔ−ＣＯＯＨ （Ｌ−グルタミン酸残基） または ここでｍ≧１（ポリ−Ｌ−グルタミン酸残基）または ｄ　）　−ＮＨ−ＣＨ−ＣＨｓ ｏｏｎ （Ｌ−アラニン残基） または ｅ）　−ＮＨ−Ｃ）Ｅ−ＣＨ１ＣＨ３ ｏｏｎ （Ｌ−２−アミノ−酪酸残基）、。

本発明の化合物は、抗がん剤として有用であ夛、それ自
体活性であるか、あるいは生体内で転化して活性化合物
を供給する薬物前駆体（ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ）として適
する。

式Ｉにおいて２）で定義される好ましい置換基Ｒは２〜
６個、例えば４個、とくに２個または３個の炭素原子を
含有する直鎖状もしくは分校鎖状の鎖、ことに少なくと
も２−位置またはω−位置に不飽和を有するものである
。このような基の例は、フルケニル、アルカジェニル、
アルキニルおよびアルカシイニル、とくにビニル、アリ
ル、プロペニル、プロパルギル、プ）−２−イニル、ブ
ドー５−イニルおよび１−メチルグログ−２−イニルで
ある。飽和基Ｒの例はメチルまたはエチルである。

式■において５）で定義される好ましい基Ｒは炭素鎖中
に６個までの炭素原子を含有する直鎖状もしくは分枝鎖
状の鎖、とくに全体として基Ｒ中に合計６個まで、例え
ば、合計５個までの炭素原子を含有する基である。飽和
炭化水素鎖は好ましくは３個の炭素原子を含有するが、
不飽和炭化水素鎖は好ましくは２個または３個の炭素原
子を含有する。好ましくは１または２または５つの置換
基が鏡上に存在する。適当な異種原子の置換基の例は、
ハロｒノ、例えば、Ｃ１ｉたはＦ、ＯおよびＳであり、
これらはα−炭素原子以外の炭素原子へ結合することが
できる。このようなＲ基の例は、ホルミル、１−オキシ
エチル、１−オキソプロピル、２−オキソプロピル、ホ
ルミルメチル、アクリロイル、プロピオニル、２，２．
２−）リフルオロエチル、２−クロロエチル、２−フル
オロエチル、メトキシメチルおよびメチルチオメチルで
ある。

好ましい炭素環式置換基は３〜６個、とくに５〜５個の
環炭素原子を含有する。炭素環式環は少なくとも１つの
０１〜Ｃ番アルキル置換基、好ましくはメチルでアル、
それらのうちで好ましくは１〜３、好ましく１が存在す
る。

Ｒの定義３）に記載する少なくとも１個の異種原子を含
有する置換基は、好ましくは１〜６個、と＜Ｋ１〜４個
の異種原子、例えば、ハロｒノ、０、ＮまたはＳを含有
する。このような特定の例はＯＨ，ＮＨ，、Ｃ０ＮＨ，
、Ｃ０ＯＨ訃よびそれらの塩類およびエステル類、ＣＮ
、Ｎｏ、、ＳＨ，メチルスルホニルオキシ、アルコキシ
およびアミノ酸の基である。こうして、５）に定義する
基Ｒは、例えば、次のものであることができる：ヒドロ
キシアルキル、例えば、２−ヒドロキシエチルまたは３
−ヒドロキシプロピル、カルバモイルアルキル、例えば
、カルバモイルメチル、アミノアルキル、例えば、２−
アミノエチル、メルカプトアルキル、例えば、２−メル
カプトエチル、シアノアルキル、例えば、シアンメチル
、カル〆キシアルキル、例えば、カル〆キシメチル、ア
ルコキシカル〆ニルアルキル、例えば、エトキシカル〆
ニルメチル、アルキルスルホニルオキシアルキル、例え
ば、メチルスルホニルオキシエチル、アルキルアミノア
ルキルまたはジアルキルアミノアルキル、例えば、ジメ
チルアミノエチル、アルコキシアルキル、例えば、メト
キシメチルアルキルチオアルキル、例えば、メチルチオ
メチル、ハロアルキルまたはアルカノイル。

異種原子を含有する置換基は、また、炭素環式環または
複素環式環である環を含有できる。炭素環（例えばフェ
ニルまたはす７チル）および異種原子を含む基の特定の
例は、７エナシル！ある。

あるいは、炭素環式環はそれ自体異種原子含有基、好ま
しくはＯＳＮまたはＳである１〜５個の異種原子を含有
する基で置換されることができる。特定の例はＣ１〜Ｃ
４アルコキシ（例、メトキシ）、ＯＲ，ＮＨ，、Ｃ０Ｏ
Ｈ，ＳＨ，ケト、ホルミルおよびメチルスルホニルオキ
シである。複素環式置換基は好ましくは３〜６個、とく
に３．５または６個の環原子および異種原子を含有し、
異種原子はＮ、ＳまたはＯであることができ、好ましく
は１〜３個で存在する。このようなＲ基の例はオキシラ
ニルメチルである。とれらの環は少なくとも１つのＣ３
〜Ｃ４アルキル基、好ましくはメチル、または異種原子
含有基によシ置換されることができ、好ましくはとれら
の基の１つまたは２つによシ置換されている。これらの
異種原子含有基は好ましくは１〜３個のＯ，ＮまたはＳ
である異種原子を含有し、そして例えば、Ｃ１〜Ｃ４ア
ルコキシ（例、メトキシ）、＝Ｑ、ＯＨ，ＮＨ，、Ｃ０
ＯＨ。

ＳＨおよびホルミルである。とのカテプリーにおけるＲ
基の特定の例は、５−ラフシルメチル、すなわち、チミ
ニルである。

基Ｘは少なくとも１個の異種原子、好ましくは１〜３個
の異種原子を含有することができるが、必ずしも含有す
る必要はなく、異種原子は例えばＮまたは０であるとと
ができる。このような基の特定の例はＣ，−Ｃ，アルコ
キシおよびＮＯ３である。他の好ましい基Ｘはハロゲノ
、例えば、フルオロまたはクロロ、およびメチルである
。アラルキルＸ置換基中のアルキル基は通常１〜４個の
炭素原子を含有するであろう、環上に１つのみのＸ置換
基が存在し、そしてそれは２１位置に位置し、−ｃｏ−
ｙ基は１′位置に存在することが通常好ましい、このよ
うな好ましい２Ｉ−置換基はハロゲノ（Ｆ、ＣＩまたは
Ｂｒ）、アジドまたはトリフルオロメチルである。しか
しながら、１よ勺多いＸ置換基が存在することができ、
セしてＸがＦであるとき、置換基は２Ｉ、６Ｉ−ジフル
オロであることができる。

基２は好ましくは−Ｃ■＝ＣＨ−または−８−である。

本発明によるとくに効力のある抗がん剤は、Ｒがプロパ
ルギルを表わし、ｎが０であり、そしてＹがグルタミン
酸の基またはその塩またはエステルを表わすものである
。さら［、ｎが１であシかりＸが２１−位置のフルオロ
である対応する化合物は高い活性を示す。

上に示したように、本発明は遊離酸の形およびまたこれ
らの酸の製薬学的に許容されうる塩またはエステルの形
のキナゾリン誘導体を包含し１後者は部分的な塩または
エステルであることができる。こうして、グルタミン酸
およびアスパライン酸の基を含有する化合物の場合に訃
いて、モノエステルモノ酸およびジエステルの誘導体お
よびまＣ０ＯＨ基を含有するＲ基は塩またはエステル、
例エバ、エチルエステルの形であることができる。

本発明の塩は生理学的に許容されうる無機ま九は有機の
酸または塩基、または第四アンモニウム塩と形成した付
加塩であることができるが、好ましくはナトリウム塩、
例えば、ニナトリウム塩である。エステルは好ましくは
親油性エステルであ）、この形で化合物は薬物前駆体（
ｐｒｏ−ｄｒｕｇ）として対応する酸の形に分解する前
に、非特異的エステ２−ゼの部位へ輸送されうる。好ま
しいエステルの例は、Ｃ１〜Ｃ３ｏ脂肪族基をもつもの
、例えば、好ましくは１〜４個の炭素原子をもつアルキ
ルエステル、ことにジエチルエステルである。

本発明の化合物は、式■亀 を出Ｙ　りもｐｒｃ−ｓμｆ中鍵奮杏二函ｈ〒水ｈＲ１
はＲと同一であるかあるいは保護された形の基Ｒでめシ
、ｔ　は水素またはアミン保護基であシ（好ましいＲ′
はｔａｒｔ−ブチルである）、そしてＹ′はＹについて
上に定義した式＆）、ｂ）またはＣ）の基または前記基
の塩または部分的にもしくは完全に保護された形の前記
基であり、Ｙ′における保護基はカルボキシル保護基、
例えばエステル基または他の保護基であり、式１ｍの化
合物は少なくとも１つの保護基を含有する、 の化合物を部分的にあるいは完全に脱係蔽することによ
って製造できる。脱係ｉを実施して１よシ多い保護基を
除去する場合、脱係鉦は同時にあるいは順次に実施でき
る。好ましくはＲＯは基Ｒ’ＣＯ・０やＣＩ（、−であ
り、ここでＲ１は直鎖状もしくは分枝鎖状のアルキル基
、アリール基またはアラルキル基である。

こうして、例えば、本発明の酸および塩は式１１の化合
物を完全に脱保護することによって調製することができ
、部分的エステルはラクタム基および８１基を必要に応
じて脱保護することによって調製することができ、ここ
でＹ／はすでに部分的エステルの形であるかあるいは完
全にエステル化された形でラシ、後者は次いて部分的に
脱保護され、そして完全なエステルはラクタム基および
Ｒ２基を必要に応じて脱保護することによって調製する
ことができ、ここでＹＩは完全にエステル化された形で
ある。

酸を形成するエステルの形のＹＩの脱保護は、例えば、
ＮａＯＨのような塩基を用いるおだやかなけん化によシ
実施できる。得られる酸は、必要に応じて、引き続いて
酸または塩基と反応させて製薬学的に許容されりる塩を
形成できる。最も好ましくは、酸をＮａＯＨと反応させ
て対応する二ナトリウム塩を形成することができる。あ
るいは酸生成物をエステル化することができ、塩生成物
を１！！またはエステルに転化することができ、おるい
はエステル生成物をエステル交換することができる。脱
保護によジエステルから塩を直接形成することが望まし
いことがらる：式（ｍの化合物がジエステルの形である
とき、ジエステルをその１モルにつき３モルのＮａ０Ｈ
（水性）でけん化し、そしてこの反応が完結したとき、
ジエステルの１モルにつき１モルのＭＣＩ（水性）を加
え、そして好ましくは生成物の基音凍結乾燥することに
よって、式１１の化合物のニナトリウム塩を形成するこ
とができる。

Ｒｌｔ−含有する特定の保護基は、通常、ＲおよびＹ’
基の性質および所望生成物を考慮して選択されるでろろ
う、すなわち、Ｒ１基を除去するために要求される条件
は、保護されないＲ基に影響を及ぼさず、かつＹＩ中の
保眩エステル基がＱ＃！生成物中に要求される場合、こ
のようなエステル基を除去しないように選択される。Ｒ
”ＣＯ基の一例はピパロイル基である；ピパロイルオキ
シメチル基は、けん化工程において、例えば、ＮａＯＨ
を使用して除去して、Ｙ＃からエステル基を除去する。

Ｒ１は、示したように、Ｒに等しいかあるいはは後者の
場合において、例えば、エステルの形の基Ｃ０ＯＨを含
有することができ、あるいはＲ２中の基ＯＨは酸基によ
）保護することができる。

このような基Ｒ８の例は、エトキシカルダニルメチル、
２−アセトキシエチルおよび５−アセトキシプロピルで
あり、これらは脱保護されてそれぞれカルｌキシメチル
、２−ヒドロキシエチルおよび５−ヒドロキシプロピル
となる。しかしながら、これらのＲ１基はそれら自体Ｒ
の例である。ＩＲの保護された形の他の例は、置換基Ｒ
８が単に余分の基を含有しないが、それがＲ基と異る形
でありかつ保護基として転化を行う場合である。この例
は後に与え、ここで１１基の２−ヒドロキシ−５−ブロ
モプロピルがＹＩからエステル基を除去するけん化条件
下に環化反応を行いかつオキシラニルメチル基Ｒを形成
する。

式１ｍの保護された化合物は、それ自体、次のようなカ
ップリング反応によって調製できる：■■ 式中Ｒ’、Ｒ１、Ｘ、　Ｚ、　ｎオ！びＹＩは式Ｉｍの
化合物について定義した通〕であ夛、そして Ｘ′は離脱基、好ましくはハロｒノ（例えば、クロロま
たはブロモ）、ｐ−）ルエンスルホネート、メチルスル
ホネートまたはトリフルオロメチルスルホネートである
。この接合は一般に酸受容体、例えば、炭酸カルシウム
、炭酸カリウム、２．６−シメチルピリジンまたはトリ
エチルアミンの存在下Ｋかつ溶媒、例えば、Ｎ、Ｎ−ジ
メチルアセトアミドまたはセロソルツ中で実施される。

上の式■のアミンは、弐Ｒ”Ｘ’（式中Ｒ１は上に定義
した通）であ夛、そしてＸＩは離脱基、好ましくはへ四
ｒノ（例えば、クロロまたはブロモ）、ｐ−）ルエンス
ルホネート、メチルスルホネートまたはトリフルオロス
ルホネートである）の化合物を保護された形のＮ−（４
−アミノベンソイル）−Ｌ−グルタメ−）、−Ｌ−７ス
／ダルテートまたは一ポリーＬ−グルタメートと直接反
応させることによって調製できる。

式■のアミンを形成する別の方法はサンティ（Ｓａｎｔ
ｉ）（ジャーナルーオプ・ヘテロサイクリック番ケミス
トリー（Ｊ＊　Ｈ＠ｔａｒｏｅｙｅｌｉｃＣｈａｍ・）
４．４７５参照〕の方法でアリ、出発物質として４−（
（（４−メチルフエニＡ／）スルホニル）アミノ）ベン
ゾエートエステル、例エバ、エチルエステルを使用し、
これを化合物Ｒ”Ｘ’（式中８２およびＸＩは上に定義
した通）である）と反応させてアミノ窒素上にＲ１基を
導入する。

このエステルを次いでけん化して遊離酸とし、酸塩化物
に転化し、次いで保護された形、例えば、ジエステルの
形のＹＩ基とカップリングする。この生成物はアミノ基
上に保護基ＣＨ＠　”　Ｃ４Ｈ６−Ｓ　Ｏｔを有し、こ
の保護基は次いで除去できる。

置換基Ｘを含有する本発明の化合物を調製しようとする
とき、まず適当なＸ置換基を含有する保護された形の対
応するＮ−（４−ニトロベンゾイル）−Ｌ−グルタメー
ト、−Ｌ−アスパルテートまたは一す−Ｌ−グルタメー
トをｌｌ展し、それを水素化または還元により対応する
４−アミン誘導体に転化し、次いでこの誘導体をＲ”Ｘ
’と反応させて式■のアミンを形成することが好ましい
。

Ｒｏ　がＨであシかつＸ′がブロモまたはクロロである
上の式■の反応成分は、対応する６−プロモメテルー２
−トリメチルアセトアミド（ピパロイル）化合物から、
ナト２ヒドロフラン中において、それぞれ、水性ＨＢｒ
および過剰の水性メタノール性ＨＣＩとの反応によシ調
製できる。Ｎ−ブロモスクシンイミドを使用して、６−
メチル−２−トリメチルアセトアミドキナゾリンの臭素
化を実施できる。

式１１の保護された化合物を形成する別の方法は、次の
反応式に従い、２−アミノ保護された形およびＹＩが保
護された形のＮ　１０−非置換接合化合物をＲ”Ｘ’（
式中Ｒ１およびｘＩは上に定義した通りである）で転化
することを包含する：（Ｉｂ） （Ｉａ） 弐１ｂの化合物はそれ自体法の反応に従って調製できる
： ■１■ 式中Ｘ′は上に定義し九通勺である。この反応において
、弐■の６−ＣＭ、−Ｘ’化合物の代わシに、対応する
６−ホルミルまたは６−シアノ化合物を使用することが
可能である。なぜなら、式Ｉ［ａの化合物は合成のこの
段階においてアミノ基上にＲ基をもたないからである。

本発明は、また、治療学的に有効量の本発明について上
に定義した抗がん剤と製薬学的に許容されうる担体また
は希釈剤とからなるｉ薬学的組成物を提供する１人工的
に腫瘍を移植されたマウスを用いる実験によると、本発
明の抗がん剤の腹腔内注射はマウスの平均の生存時間を
増加させることができ、この増加は投与量に関係するこ
とが示された。さらに、これらの動物は体重の有意な量
を損失せず、あるいは薬物で処置する間、毒性の他の徴
候を示さなかった。

本発明の組成物は、例えば、非経口的（例えば、静脈内
、筋肉内または腔洞内）、経口的、局所的または経直腸
的投与に適する形態である１組成物の特定の形態は、例
えば、溶媒、懸濁液、乳剤、クリーム、錠剤、カプセル
剤、リポソームまたは微小容器、ことに無菌の注射可能
な形態の組成物であることができる１本発明の化合物は
、それを宿主に投与することによシヒトまたは動物の体
におけるがんを処置する方法において使用できる。

ヒトにおいて１回であるいは反復して投与される治療学
的に有効な食は、各投与について５０〜１００００η／
　ｍ　Ｍ体表面の範囲、好ましくは少なくとも５００　
Ｍｉ　／　ｍ　”　、例えば５０００ｑ／ｍ”以上であ
ると考えられ、必要に応じて反復される。

本発明の化合物は、白血病、リンパ性悪性腫瘍および充
実朧瘍のスペクトル、とくにがんおよび肉腫に対して広
い範囲の抗腫瘍活性を示す、こうして、単一の薬物とし
ての使用に加えて、本発明の化合物は、例えば、有糸分
裂阻害剤（ｍｌ　ｔｏ　ｔ　ｉ　ｃｉｎｈｉｂｉｔｏｒ
）（例えば、ピンクリスチーン、ビンプ２スチーン八ア
ルキル化剤（例えば、シクロホス７アミド、メルフアラ
ン、ミレラン、クロ２ンプシル、ムステン）、抗代謝物
質（例えば、５−スルオロウ２シル、６−メルカプトプ
リン、チオグアニン、シトシンアラビノシド、ヒドロキ
シ尿素）、内位添加（１ｎｔ＠ｒｃａｌａｔｉｎｇ）抗
生物質（例えば、アドリアマイシン、プレオーイシン）
、または酵素（例えば、アスノ１ラギナーゼ）と同時に
投与することができ、あるいはそれらと混合し九配合物
の形態でそれらを含有することができる。

本発明の化合物は、また、組み合わせた物理療法の処置
、例えば、放射線治療および／または外科の一成分とし
て使用できる随 本発明の化合物（ＣＢ３８０４）の合成の概略１を下に
示す。

次の実施例により、また添付図面を参照しながら、本発
明を説明する。

実施例１ 上の反応の概略１に示した合成により、Ｎｌ０−プロパ
ルギル−５，８−ジブアザ葉酸（ＣＢ３７１．７）の２
−デスアミノ類似体（ＣＢ　　３８０４）を調製した。

この合成を下に詳述する。

これらの実施例において、ベトロールは石油エーテル沸
点６０−８０℃を示す、ＴＬＣはシリカゲル６０Ｆ２５
４予備被覆シート［マーク拳アート（Ｍｅ　ｒｃｋ　　
Ａｒｔ）５７３５］を使用して実施した；融点はコフラ
ー・ブロック（Ｋ。

ｆｌｅｒ　　ｂｌｏｃｋ）で決定した；　ＮＭＲスペク
トルはパーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ　　Ｅｌｍｅ
　ｒ）Ｒ３２（９０ＭＨｚ）およびブルーカー（Ｂ　ｒ
　ｕ　ｋ　ｅ　ｒ）　ＷＭ　（２５０ＭＨｚ）　スペク
トロメーターを使用して決定した；場の強さはδ（ｐｐ
ｍ）の単位で表わし、そしてピークの多重度は次のよう
に表示する：Ｓ、−重線；ｄ、二重線：ｄｄ、二重線の
二重線；Ｅ、三重線；ｂＳ、幅広い一重線；ｂ、幅広い
信号；ｍ、多重線。

吸収赤外スペクトルは、パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋ
ｉｎ　　Ｅｌｍｅｒ）１３１０ペクトロメーターで取っ
た。

元素分析は、バターワース・ラボラトリーズ（Ｂｕｔｔ
ｅｒｗｏｒｔｈ　　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｔｅｄ
ｄｉｎｇｔｏｎ、ＭｉｄｄｌｅｓｅＸ）により決定した
。記載する元素分析の結果は±０．４％以内であった。

に土ニジ±」よと】と−Ｌ１仁二糺二り天乞土丈区１Ｚ
」又Σ　−２−アミノ−５−メチル安息香酸（１）［ア
ルドリッヒ（Ａ　ｌ　ｄ　ｒ　ｉ　ｃ　ｈ）、３０．２
３ｇ、０．２モル］およびホルムアミド（３６，０３ｇ
、０．８モル、４当量）を４００ｍ１容のビーカーに入
れ、−緒に攪拌して均質なｌ厚ペーストを得た。このビ
ーカーを内部温度が１３０℃までになるように油浴中に
沈めた；暗色の液体が得られた。この混合物を１３０℃
に１時間保持し、その間アモニアガスが発生し、次いで
広範な固化が起こった０次いで、浴温度を１８０℃に上
昇し、混合物をこうしてさらに１時間保持し、固体の大
きい塊を破壊して温度の均衡性および均質性を維持した
。この混合物を冷却し、エタノール（２０ｍｌ）を水（
１００ｍｌ）との混合物で処理し、そして固体の塊を破
壊して均質なスラリーを得た。この生成物（２８，８ｇ
）を濾過し、水で２回そして完全に洗浄した。エタノー
ルから再結晶化すると、白色の微細な針状結晶（２４，
７６ｇ、７７．３％）融点２６０−１６１℃、［文献：
エールリッヒ（Ｅｈｒｌｉｃｈ）、ベルブウェルト（Ｂ
ｅｒ、）３４．３３６６　（１９０１）は２５１”０を
記載している；フィンデクリー（Ｆｉｎｄｅｋｌｅｅ）
、ベルブウェルト（Ｂｅｒ、）３８１．３５５３　（１
９０５）は２５５℃を記載している］。

３．４−ジヒドロ−６−メチル−４−オキヱニ１−（（
ピバロイル）オキシ）メチルキナゾリンエ１Σ　−水素
化ナトリウム（油中の６０％の分散液、２．５０ｇ、０
．０６２５モル、１．２５当量）を５００　ｍ　ｌ容の
２首フラスコに入れ、ベトロールで洗浄した。Ｎ、Ｎ−
ジメチルホルムアミド［アルトリー７ヒ（Ａｌｄｒｉｃ
ｈ）、３オンクストロームの活性化モレキュラーシーブ
で乾燥した「ゴールド・ラベル（ＧｏｌｄＬｂｅｌ）Ｊ
、６５ｍ１ｌを添加し、次いで、磁気的に攪拌しながら
、３，４−ジヒドロ−４−オキソ−６−メチルキナゾリ
ン（８，ＯＯｇ、０．０５モル）を１５分かけて時々氷
冷しながら添加した。

フラスコの首をジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）で洗
浄して清浄にし、次いでソーダライムの保護管で密封し
た。さらに室温で３０分間攪拌すると、わずかの未反応
の水素化ナトリウム小粒子を含有するナトリウム塩の黄
灰色溶液が生成し光。それに、クロロメチルピバレート
［アルドリッヒ（Ａｌｄｒｉｃｈ）、９７％、７．８０
ｇ、０．０５モル］を２分かけて添加し、そして得られ
る混合物を室温で２時間攪拌した。この混合物は、ここ
で沈殿した塩化ナトリウムを含有し、エーテル（１１）
と水（１１）との間に分配した。エーテル抽出液を飽和
ブライン（１１）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯａ）Ｌ、真
空濃縮すると、黄色油が得られ、これは自発的に結晶化
した（ｔ３．ｇｏｇ）、この粗製生成物をベトロール・
（約５００ｍ１）から再結晶化し、この方法の多少のキ
ナゾリン出発物質を濾過して除去した。２℃において一
夜結晶化を完結させ、次いで生成物を集め、ベトロール
で１回洗浄した（１１．１２ｇ、８１．１％）、融点１
０８．５−１０９℃、ＩＲｙｃ＝０（ｚステル）１７３
３ｃｍ−’およびｐｃ’−０（ラクタム）１６９０ｃｍ
−’　、ＮＭＲ（９０ＭＨ２，ＣＤＣＬ３　／ＴＭＳ）
δ１．２２（ｓ、９Ｈ，ｔＢｕ）、２．５０　（ｓ、３
Ｈ、メチル）、５．９５　（ｓ、２Ｈ、メチレン）、７
．６０（乱れた一重線、２Ｈ，Ｈ’およびＨ＠）、８．
１４　（乱れた一重線、ＩＨ，Ｈ５）８．２２（ｓ、Ｉ
Ｈ，Ｈ２）、分析（Ｃ１５Ｈ，、Ｎ２０３　）Ｃ，Ｈ，
Ｎ。

見Ｚ」土と　−メチル化合物（３）（６，８６ｇ、０．
０２５モル）を１１容のボロシリケートのフラスコに入
れ、モして四塩化炭素（２５０ｍｌ）中に開時間加温し
て溶解させた。Ｎ−ブロモスクシンイミド（Ｈ２Ｏから
再結晶化したもの。

４．８９ｇ、０．０２７５モル、１．１当量）を添加し
、そしてこの混合物を還流させた０次いで、フラスコ（
加熱マントル中に１ｃｍだけ入れた）を、２７５ワツト
のサンランプ（ｓｕｎ−１ａ　ｍ　ｐ　）で５ｃｍの距
離から正確に２０分間照射した。冷却後、前記スクシン
イミドを濾過し、モして四塩化炭素（２Ｘ５０ｍｌ）で
洗浄した０合わせた濾液および洗液を濃縮乾固して、粘
性のクリーム色の固体（１００６９ｇ）を得た。これを
ベトロール（９５０ｍ　ｌ）から再結晶化し、その間不
溶性固体（約５％）を濾過した。２℃に冷却すると、き
れいでない白色結晶（７−６７ｇ、融点１０４−１１４
℃）が得られ、これをベトロール（１１００ｍｌ）から
再結晶化すると、より形状の整った結晶（６，７４ｇ、
７６．３％、融点１１８−１１５℃）が得られ、これは
さらに使用するために適した工業銘柄の生成物であった
。工業銘柄の生成物の小さい部分をベトロールからさら
に２回再結晶化して、分析用試料を得た。

融点１２１−１２２℃、ＩＲνＣ＝Ｏ（エステル）１７
３０ｃｍ−’およびｙｃ＝ｏ（ラクタム）１６８５ｃｍ
−’　、ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ　、　ＣＤ　ＣＬ３　／
　ＴＭＳ）δ１．２０（ｓ、９Ｈ，ｔＢｕ）、４．６０
　（ｓ、２Ｈ，ＣＨ２Ｂｒ）、５．９５　（Ｓ、２Ｈ，
ＣＨ２）、７．７０（ｄ、ＩＨ，Ｊ　　　　＝８．４Ｈ
ｚ、Ｈ”　）、８．７ ７．８２（ｄｄ、　ＩＨ，Ｊ　　　　　＝８．４Ｈｚ、
７．８ Ｊ　　　　　＝２．２Ｈｚ、Ｈ’）、８．２９　　（ｓ
。

７．５ １Ｈ・１（２）・８・３２（ｄ・Ｉ　Ｈ−Ｊｓ　、　７
２．２Ｈｚ、Ｈ５）、分析（Ｃ＋　ｓ　Ｈ＋　７　Ｂｒ
Ｎ２０３　）Ｃ，Ｈ，Ｎ、Ｂｒ。

（５Σ　−ブロモメチル化合物４（工業銘柄、２．３０
ｇ、少なくとも０．００５モル）、ジエチルＮ−（４−
（プロプ−２−イニルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グル
タメート、　［Ｔ、Ｒ。

ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）、Ａ、Ｈ，カルバート（Ｃａ
ｔ　ｂｅｒｔ）、Ａ、Ｌ、ジャクマｙ（Ｊａｃｋｍａｎ
）、Ｓ、Ｊ　、プラウ７（Ｂｒａｗｎ）、Ｍ、ジョーン
ズ（Ｊｏ　ｎ　ｅ　ｓ）およびＫ。

Ｒ、ハラツブ（Ｈａ　ｒ　ｒ　ａ　ｐ）　　：　ニーｏ
ビアン・ジャーナル・オプ・キャンサー（Ｅｕｒｏｐ。

Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ）、よヱ、１１　（１９８１）］（１
１，８０ｇ０．００５モル）、炭酸カルシウム（１００
℃で乾燥したもの、１．００ｇ、０゜０１モル）および
Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド［アルドリッヒ（Ａｌｄ
ｒｉｃｈ）、３オングストロームの活性化モレキュラー
シーブで乾燥した「ゴールド・ラベル（Ｇｏｌｄ　　Ｌ
ｂｅｌ）Ｊ。

２０ｍ１］の混合物を栓付きフラスコ内で８０°Ｃにお
いて１８時間乾燥した。冷却後、この混合物をセライト
（Ｃｅｌｉｔｅ）の床を通して濾過し、そして固体をジ
メチルホルムアミドでよく洗浄した。透明な濾液を５５
℃／　４　ｍ　ｍで回転蒸発器により濃縮し、次いで７
５℃／ｉｎｍで油ポンプに直接連結することにより濃縮
して、硬い褐色ゴム（６，７８ｇ）を得た。これをジク
ロロホルム（１３ｍｌ）とエーテル（２０ｍｌ）との混
合物中に溶解し、ジョビンーイボン会クロマトスパック
・プレグ（Ｊｏｂｉｎ−Ｙｖｏｎ　　Ｃｈｒｏｍａｔｏ
ｓｐａｃ　　Ｐｒｅｐ）１０機械内でエーテル−中で構
成したシリカ［マーク・アート（Ｍｅｒｃｋ　　Ａｒｔ
）１５１１１．２４０ｇ］に適用した。この溶液をＣＨ
２Ｇ−１２（４ｍｌ）とエーテル（６ｍｌ）との混合物
で洗浄し、次いでこの方ラムをエーテルで溶離し、流出
液をセシル（Ｃｅｃｉ　１）２１２Ａ紫外モニターに２
５４ｎｍにおいて通過させた。生成物は最後に溶離され
、そして適当な分画を蒸発させると、ゴム（２，５４ｇ
、８０．３％）が得られ、これは純粋であるが、固化に
誘導することができなかった。特性づけのため、このゴ
ムに一部を１００ＸＺ化合物／Ｐ２Ｏ５／１ｍｍ７１８
Ｈで乾燥すると、もろいガラス状物質が得られた。

ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ、ＣＤＣＬ３／ＴＭＳ）δ１．２
０　（５，９Ｈ，ｔＢＵ）、 １．２２　（ｔ、３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、ｘチルＣＨ３
）、 １．２９（ｔ、３Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、エチルＣＨｓ）
、 ２．２１（ｍ、２Ｈ，ｇ　ｌ　ｕｃＨＦ）　。

２．４５（ｍ、２Ｈ，ｇ　ｌ　ｕｃＨｚ　）、３．０２
　（ｂｓ、ＩＨ１＝ＣＨ）、 ４．１０（（１，２Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、エチルＣＨ２
）　　、 ４．１６（ｄ、　２Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ　、　プロノク
ルギル　ＣＨ２）。

４．２２　（ｑ、２Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、エチルＣ１（
２）、 ４．７４−４．８３　（ｍ、ＩＨ，ｇｌｕ　　ＣＨα）
。

４．７６（ｓ、２Ｈ，ＣＨ２）、 ５．９４（Ｓ、２Ｈ１Ｏ−ＣＨ２Ｎ）。

６．８５（ｄ、３Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、Ｈ”およびＨ５
′、アミジン　ＮＩ（が上に重なってしする）、 ７．７１−７．７５（ｍ、４　Ｈ、Ｈ７、）ｉ　＃、１
（２”、Ｈ６゛）、 ８．２５（ｄ、ＬＨ，Ｊ　　　　　＝１．５Ｈｚ。

５．７ Ｈ５）。

８．２６（Ｓ、ＬＨ，Ｈ２）。

分析（Ｃａ　ａ　Ｈ４ｏ　Ｎａ　０ｓ）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

ゴム状トリエステル５　（０，６３３ｇ、０．００１モ
ル）、Ｈ２０（１８ｍｌ）、ＥｔＯＨ（１８ｍｌ）およ
び１．０ＯＮのＮａ０Ｈ（水性）（１ｍｌ、０．００５
モル）の混合物を三角フラスコに入れ、そして４０分間
激しく攪拌（磁気攪拌機）して、淡黄色の溶液を得た。

この溶液を２２℃に１８．５時間保持した０次いで、そ
れをセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）の床を通して濾過しく炭
素の処理）、そして透明濾液を１．０ＯＮのＩＣｌ（水
性）でｐＨ２，５にした。生成物の得られる白色のゼラ
チン様沈殿を遠心分！　（１５００ｇ７３０分）し、再
懸濁（Ｈ２Ｏ：８０ｍ１．８０ｍ１、および４０ｍ１）
−遠心分離−デカンチージョンの３サイクルにより洗浄
した。沈殿物をＰ２Ｏ５で真空乾燥したーまずデシケー
タ−内で２２℃／２４時間、次いでピストル（ｐｉｓｔ
。

ｌ）内で８０℃／４時間、淡黄色の非晶質固体が得らｈ
た（０．３１２ｇ、６７．５％）、融点１７０−１７３
℃、ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ、ＣＤＣＬ３　／ＴＭＳ）δ ２．００（ｍ、２Ｈ，ｇｌｕｃＨＦ）、２．３４（ｍ、
２Ｈ，ｇ　１　ｕＣＨ２）、３．２２　（ｔ、ＬＨ，Ｊ
＝２．ＩＨ２，＝ｃＭ）３．４（ｂｓ、２Ｈ１水和水）
、 ４．３６（ｍ、３Ｈ、プロパルギル　ＣＨ２およびｇｌ
ｕ　　ＣＨα）、 ４．８１（ｓ、２Ｈ，ＣＨ２）、 ６．８５（ｄ、３Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、Ｈ３′およびＨ
ｓ　′）、 ７．６５　（ｄ、ＩＨ，Ｊ　　　　　＝８　．４Ｈｚ。

８．７ Ｈｓ）　　、 ７．７５（ｄ、２Ｈ，Ｈ２’およびＨ６’、ｄｄ上の重
なり、ＩＨ，Ｈ７）、 ８．０３（ｄ、ＩＨ，Ｊ　　　　　＝１．８Ｈｚ、５．
７ Ｈｓ）　、 ８．０６（ｄ、　ＩＨ，Ｈ２）　、 ８．２７（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．７Ｈｚ、アミジンＮＨ）
　、 １２゜２４（ｂｓ、カルボキシルおよびラクタムＮＨ）
。

ＵＶ　（０、ＩＮ（７）ＮａＯＨ（水性）中に取る）入
（ε）、最大：２２１ｍｍ（３４，５００）、３００ｍ
ｍ　（２９，０００）；最少：　２４８　ｎｍ（６，２
００）。分析用試料を乾燥したＰ２Ｏ２／１１０℃、　
（Ｃ２ａ　　Ｈ２２Ｎａ　　Ｏ６Ｉｌ　ＩＨ２０）Ｃ，
Ｈ，Ｎ。

実施例２ 上の反応の概略２の合成により、２′−フルオロ類似体
（ＣＢ　　３８５４）を調製した。この合成を下に詳述
する。

２−フルオロ−２−二トロー安息香酸（６）２１容のビ
ーカー内のＮ　ａ２　Ｃｒ２０７　　（８０，４６ｇ、
０．２６モル）の攪拌した氷酢酸溶液に、２−フルオロ
−４−二トロトルエン（３１，０３ｇ、０．２モル）を
添加し、１０分間で濃Ｈ２ｓｏａ　　（２００ｇ）を添
加した。最初に鮮明なオレンジ色の溶液は粘性かつ黒色
となり、次いで１００℃のちょうど上で沸騰した。生ず
る緑色のスラリーを９０℃にさらに１時間加熱した。

水（２３６ｍｌ）を添加し、そして生ずる溶液を０℃に
冷却すると、淡緑色の結晶が得られ、これを濾過により
回収し、そして冷水で控え目に洗浄した。この生成物（
２２，１４ｇ）は水（２００ｍ　ｌ　）から淡緑色の微
小針状結晶として再結晶化した（２１．１６ｇ、５７．
２％）、融点１７５−１７８℃、文献Ｆ、Ｃ，シュメル
ケス（Ｓｃｈｍｅｌｋｅｓ）およびＭ、ルーピン（Ｒｕ
ｂｉｎ）、ジャーナルΦオブ管アメリカン争ケミカルー
ソサイアテ４　（Ｊ　、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓ。

ｃ、）、６６．１６３１、（１９４４）、１７６−１７
７℃。

乾燥トルエン（１０ｍ　ｌ　）中の２−フルオロ−２−
ニトロ−安息香酸（６）（０，４２６ｇ、２．３ミリモ
ル）のスラリーを５ＯＣＩ２（０゜４１ｇ、３．４５ミ
リモル）で処理し、そしてこの混合物を湿気を排除して
１．５時間還流加熱した。冷却しかつセライトを通して
濾過した後、淡黄色の溶液を回転蒸発機で濃縮すると、
酸塩化物が粘性の褐色油として得られ（定量的収率）、
これは放置すると固化した。ＣＨ２Ｃ１２（５０ｍ１）
中の酸塩化物の溶液を、窒素の雰囲気の下でかつ２５℃
以下の温度を維持しながら、ＣＨ２Ｃ１２（１００ｍ　
ｌ　）中のジエチルＬ−グルタメート塩酸塩（０，５５
ｇ、２．３ミリモル）およびトリエチルアミン（０゜４
６ｇ、４．６ミリモル）の溶液に１５分間で添加した。

生ずる褐色溶液を２５℃でさらに２時間攪拌し、その後
それをＨ２０（２Ｘ２５０ｍｌ）　で洗浄し、脱色炭で
処理し、そして乾燥（ＭｇＳＯ４）した、抽出液を回転
蒸発器で濃縮すると、淡褐色固体（０，７６ｇ）が得ら
れた。これをトルエン−シクロヘキサン（ｌ；３．２０
　ｍ　ｌ　）から再結晶化すると、純粋な白色針状結晶
が得られた（０．７３ｇ、８５．９％）、融点８０．５
−８１．５℃、ＩＲ：３３７０および３３１５ｃｍ−’
　　（Ｎ−Ｈ）および１７４０ｃｍ”−’　（Ｃ＝Ｏ）
；ＭＳ：ｍ／ｚ１６８および１２２；ＮＭＲ（２５０Ｍ
Ｈｚ　　ＣＤＣＬ３／ＴＭＳ）。

６１．２５　（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ。

ＣＨ３）。

１　．３３　　（ｔ　、　Ｊ＝７．１Ｈｚ、　３Ｈ１Ｃ
Ｈ３）　、 ２．２７　（ｍ、２Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ２）。

２．４７（ｍ、２Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ２）、４．１３　
（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ，！ステルＣＨ２）、 ４．２７　（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ、エステルＣＨ
２）、 ４．８４（ｍ、ＩＨ，ｇｌｕ　　ＣＨ）、７．５０　（
ｂｒ　　ｔ、Ｊ＝７．６および７．６Ｈｚ、ＩＨ，アミ
ジン　ＮＨ）、 ８．０５　（ｄｄ、Ｊ＝２．１おＪ：び１０．９Ｈｚ、
ＩＨ，Ｈ３）、 ６．４７　（ｄｄ、Ｊ＝８．６および２　、２Ｈｚ、Ｉ
Ｈ，Ｈ５）。

７．１９　（ｄｄ、Ｊ＝１３．８および７．５Ｈｚ、Ｉ
Ｈ、アミジン　ＮＨ）。

７．８１　（ｔ、Ｊ＝８．６および８　、６Ｈｚ、１Ｈ
，Ｈ６）、 分析（Ｃ＋　６Ｈ２１ＦＮ２０５）Ｃ，Ｈ，Ｆ、Ｎ。

ソエチルＮ−（２−フルオロ−ａ−−ｒミノベンゾイル
）−Ｌ−グルタメート（８） ＡｃＯＨ（５０ｍｌ）中のニトロ化合物（７）の溶液を
、鉄粉末〔アルドリッヒ（Ａｌｄｒｉｃｈ　）３２５メ
ツシユ、６．１４Ｆ、０．１１Ｆ原子〕で処理した。こ
のスラリーをオーバーヘッドの攪拌によシ５０℃におい
て２時間流動状態に保持した。

この混合物を室温に冷却し、ＣＨ，Ｃｌ、　（２５０ｍ
）およびＨ，０（１０００ｍ／）で処理し、そしてＨ，
０（１０００ｄ）で洗浄し、脱色炭で処理し、乾燥しく
Ｍ１７５０４）そして濃縮して、よごれた白色結晶質固
体（１１，３Ｆ）を得た。トルエン−ヘキサン（５：１
．５．６５−）から再結晶化すると、毛羽状灰色結晶（
ａ１２Ｆ、９５．５％）が得られた。

融点１２９．５−１！１１．５℃。ＩＲ’、１７５０ｔ
ｘ−’（Ｃ＝０）　；ＭＳ　：ｍ／ｚ５４０　（Ｊｆ”
）　；ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ　、ＣＤＣｌ　ｓ　／　Ｔ
ＭＳ　）　、δ１．２５＜ｔ、Ｊ＝７．１Ｈ２，５Ｈ，
ＣＨ３）。

１．５０（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、５Ｈ９ＣＨ，）。

２−２２　（ｍｒ　２　Ｈ＋　ｙ　ｌ　１ＬＣＨｚ　）
　＋２−４４　（ｆ′ｎ＋′２　ＨＨｇ　ｔ　１Ｌ（１
’　Ｈｚ　）　。

４−１１　（Ｑ＋１＝７．１Ｈｚ、２Ｈ，ｘ、ステルノ
ＣＨ，） ４−２３　（ｑｌ　７＝７．１Ｈｚ　、　２Ｈ，工、ｘ
、チルのＣＨ，） ４、２５　（ｂｒ　　ｓ　ｒ　２　Ｈ＋　ＭＨ２）　＋
４．８３（惰、　１Ｈ、ｇｌｗ　　ＣＭ　）。

＆３３　（ｄｄ　、　Ｊ＝１４．５および２．２Ｈｚ　
、　ｌ　Ｈ。

Ｈａ＞　　。

６．４７　（ｄｄ　、　Ｊ＝ａ６および２．２Ｈｚ、１
Ｈ。

Ｈり。

７、１９　（ｄｄ　、　７＝１３．８オ！ヒフ、５Ｈｚ
　、　１Ｈ。

アミジノＮＨ）。

７．８１　（ｔ　、　Ｊ＝Ｆ１．６オヨびｅ、、６Ｈｚ
、１Ｈ。

Ｈ６）。

分析（０１８Ｈ□ＦＮ、０りＣ，Ｈ，Ｆ、Ｎ０ソエチル
Ｎ−（２−フルオロ−４−（Ｎ−グロブ−２−イニルア
ミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタメート（９） アミノ化合物（８）（７，４５Ｍ’、２２ミリモル）の
ＤＭＦ溶液に、Ｋ、ＣＯ，（３，ｃＩ　４　Ｆ、２２ミ
リモル）および臭化ゾロパル（トルエン中の８０％Ｗ／
Ｖ溶液、６．５４ｔ、４４ミリモル）を加えた。

この混合物を激しくかきまぜながら湿気の不存在下に、
１１０〜１２０℃に３時間加熱した。冷却後、溶媒を除
去して暗かつ色の粘性スラリーを得た。これをＥｔＯＡ
ａ（２５０ｍｇ）に加え、Ｈ，０（２５０ｍ）で洗浄し
た。レンが赤色の有機層を引き続いて乾燥（Ｍ（Ｊ　Ｓ
Ｏ４）　Ｌ、濃縮して暗赤色のシロラグ（１０，（１）
を得た。ベトロール−ＥｔＯＡｃ　−ＣＭ、Ｃ１ｔ（２
：　１　：　１．２５−）中の溶液をシリカグル〔マー
ク・アート（ＭｅｒｃｋＡｒｔ）９５８５．４ｓｏｒ）
のがラスカラム（内径５ｃｍ）に加えた。ベト０−ルー
ＥｔＯＡｃ　（２：１．２Ａりで溶離し、次いでベトロ
ール−ＥｔＯＡｃ（１，５：１Ｊで溶離した後、適当な
分画を濃縮すルト、淡黄電油（５，０３ｆ、６０．５％
）が得られた。ｆＲ：３３１０ｃｍ″″Ｉ（Ａ’ｆ）及
び１７４５ｃｍ−’　　（Ｃ＝０）Ｈｉｓ　’、ｍ／Ｚ
５７Ｂ　（Ｊｆ＋）ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ　、　ＣＤ
Ｃｌ、／ＴＭＳ　）。δ１．２３　（ｔ　、！＝７．１
Ｈｚ　、５Ｈ，ＣＨ５）。

１．３０（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、５Ｈ，ＣＨ，）。

２．２２　（ｍ、　２Ｈ、ｇｌｕ　　ＣＨ，）。

２．２７　（ｔｒ　１＝２．４Ｈｚ　、　１Ｈ，１セチ
ｖン）。

２．４４　（？ＦＬ　ｌ　２Ｈ、ｇｌｕ　　ＣＭ、　）
　。

３．９７　（８、２Ｈ，ゾロパルギルＣＨ２）。

４−１１　（ｑｒ　１＝７．１Ｈｚ　、　２Ｈ，エステ
ｋＣＨ２）４．２２（ｑ、Ｊ＝″１１Ｈｚ　、　２Ｈ，
ｘステルｃＨ，）４．５４（６ｒ　　ｓ、ＩＨ，７ミン
ＮＨ）。

４．８４　（ｍ、　１Ｈ，ＣＨ）。

６．３６　（ｄｄ、Ｊ＝１４．７および２．２Ｈｚ、１
Ｈ。

Ｈ３）。

６．５０　（ｄｄ　、　Ｊ＝８．７および２．５Ｈｚ　
、　ｊ　Ｈ。

Ｈ５）。

７．２１　（ｄｄ　、　Ｊ、、＝Ｚ６および６．２Ｈｚ
　、　１Ｈ。

アミジノＮＨ）。

７．９１　（ｔ　、　Ｊ＝ａ９およびａｓＢ７ｚ、ＩＨ
。

Ｈ６）。

分析（Ｃ，、Ｈ２，ＦＮ２０．　）　Ｃ、Ｈ、Ｆ　、　
Ｎ０ジエチルＮ−（９−フルナローａ−（Ｗ−（（ぺ−
４−ジヒドロ−４−オキノー６−キナゾリニル）メチル
）プロデー２−イニルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グル
タメー）（１０） この化合物は、実施例１において化合物（４）から化合
物（５）の製造についてと同様な方法で、表Ａに記載す
る試薬の量および条件を用いて、化合物（９）から調製
した。

分析用試料を７０℃／　Ｐ２０ｓ　／　０．１　ｆｉ／
　７時間で乾燥した。ＭＳ’、Ｍ／Ｚ６５０　（＆　　
）：ＮＭＲ（２５０ＮＨｚ　、ＤＭＳＯ−Ｄ、／ＴＨＥ
　）、δ１．１１　（ＩＩ　、　９Ｈ，ｔ１３ｒｂ）　
。

１．１５　（ｔ　、　７＝７．１Ｈｚ　、　３Ｈ、ＣＨ
，）。

１．１８（ｔ、Ｊ＝７．’＋Ｈｚ、５Ｈ，ＯＨ，］。

２．０１　（？７Ｚ、２Ｈ，ｇｉｎ　　ＣＨ２）。

２．３９　（ｍ、２Ｈ＋　ｇｌｕ　　ＣＨ，）。

５．２７（ｔ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ，”Ｔ＊ｆＶン）
＋４．０５（ｑｌ１＝７．１１１ｚ、２Ｈ，ｘステルＣ
Ｈ２）４．１０（ｑ、７＝１１Ｈｚ、２Ｈ，ｘステルＣ
Ｈ２）４．３９　（ｍ、　２Ｈ、プＱ　／Ｚ　ルギ＃　
Ｃ１ｌ、　）　。

４．３９　（ｍ、　１　ｉ”ｌ　、　ｇｌｕ　　ＣＨ２
）　。

４．８４　（ｓ　、　２Ｈ，ＣＨ，）。

５．８９　（８、２Ｅ　、　０−ＣＨ，−Ｎ）　。

６．６３　（ｄｄ　、　Ｊ＝１２．６および２．ＩＨｚ
ｌＩＨＩＨ３／）。

６．６７（ｄｄ、Ｊ＝８．９および２ＡＨｚ、１Ｈ。

Ｂ６１　　）。

７．５０　（ｔ　、　Ｊ　＝Ｂ、ｑおよび８．９Ｈｚ、
ＩＨ。

ｇ６／　　）。

７．６８（ｄ、Ｊ＝ａ５Ｈｚ、　　１Ｈ，Ｈ”）。

７．７８　（ｄｄ　、　Ｊ＝ａ３および１．Ｆ３Ｈｚ、
１Ｈ。

Ｂ７）。

ａ０９　（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、　　１Ｈ，Ｂ５）。

ａ１３　（ｄｄ、Ｊ＝Ｚ２および３．９Ｈｚ＋ＩＨｒア
ミソンＮＨ）。

分析（Ｃ３，Ｈ，、ＦＮ４０．　）　Ｃ、Ｈ、Ｆ　、　
Ｎ０Ｎ−（２−フルオロ−４−（＃−（（３，４−ジヒ
ドロ−４−オキソ−６−キナゾリニル）−メチル）グロ
ブ−２−イルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸
（ＣＢ３８５４） この化合物は、実施例１において化合物５からＣＢ５８
０４の製造についてと同様な方法で、表Ｂに記載する試
薬の量および条件を用いて、化合物（１０）から製造し
た。融点１８５−１８ａ５’Ｃ；ＮＭＲ（２５０ＮＨｚ
　、ＤＭＳＯ−Ｄ、／ＴＨ５）、δ １、９８　（ｔｎ　、２　Ｈｔ　ｇ　ｌ　ｘ　　ＣＨｔ
　）　＋１３１　（ｙｙｃ、　２Ｈ、ｇｌｕ　　ＣＨ，
）　。

３ｂ２６　（ｔ　、２．０Ｈｚ　、　１Ｈ，アセチレン
）。

４．５７（ｍ、２Ｈ，プロパルギＡ／　ＣＨ，）　。

４−３７　（ｍ＋　Ｉ　Ｈ＋　ｇｌ　ｕ　　ＣＨ）　＋
４．８２　（ａ　＋　２Ｈ，ＣＨ”、ン６．６３　（ｄ
ｄ　、　／＝１４．５および２．２Ｈｚ　、　１Ｈ。

Ｈｌｒｌ＞。

６．６８　（ｄｄ、　Ｊ＝ａ９および２．２　Ｈｚ　、
　Ｉ　Ｈ＋Ｈ″′）。

７．５４（ｔ、Ｊ＝Ｆ３．９および１３．９Ｈｚ、１Ｈ
。

Ｈ６／＞。

７．６４　（ｄ　、Ｊ＝８．３Ｈｚ　、　１Ｈ，Ｈ＆）
。

７．７３　（ｄｄ、　Ｊ＝ａ３および２．ｏＨｚ、１Ｈ
。

Ｂ７）。

７．９７　（ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、　１Ｈ，アミノ７Ｎ
Ｈ）。

ｅ−０２（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ，Ｈｌｌ　）。

ａ０７　　（＆　、　　１Ｈ，ＩＩ”　　）。

１２．２５（ｂｙ　　ｓ、１Ｈ，ラクタムＮＨ）。

１２．４７（６ｒ　８，２Ｈ，Ｃ０ＯＨ’８）。

ＵＶ（Ｑ、１Ｎ　Ｎａ０Ｈａ、）λ（ε）、最大：２２
２．５ｆＬｍ（３１，７００）、２９８ｗｍ（３Ｑ、３
００）；最小：　２４７．５Ｎｃｍ（６，８００）。

分析（Ｃ２４Ｈ，、ＦＮ４０６．　Ｉ　Ｈ，Ｏ）　　Ｃ
、Ｈ、Ｆ　、　Ｎ０実施例６ Ｎ１０に一〇Ｍ、置換基をもつ２−デスアミノ−５゜８
−ジブアザ葉酸の誘導体（ＣＢ５８２４）を反応の概略
３に示す。それはＣＢ５８０４と同様な方法で製造した
。合成を下に説明する。

ソエチルＮ−（４−（メチルアミン）ベンゾイル）−Ｌ
−グルタメート（１１） ソエチルアミノＮ−（４−アミノベンゾイル）グルタメ
ート（９，６６ｆ１３０ミリモル）のＤＭＦ溶液に、Ｋ
、Ｃｏ、　（４，１４ｆ、　　３０ミリモル）およびヨ
ードメタン（６，８１ｆ、４８ミリモル）を加えた。こ
の混合物を湿気の不存在下に２６時間激しくかきまぜた
。溶媒を油ポンプの真空下に除去した後、淡かつ色のス
ラッジをＥｔＯＡｃ（２５０−）に加え、Ｂ２０　（２
Ｘ２５０７りで洗浄した。

有機相を引き続いてＭｇＳＯ３で乾燥し、真空蒸発する
と、淡かっ色消（１［１７Ｓ’）が得られた。これをＣ
Ｈ，Ｃｌ２（２０ｄＪ中の５％のＥｔＯＡＣ中に溶解し
、ガラスのカラム（内径５儂）中に構成したシリカ）ｆ
　Ａ／　（−ｑ−り・アート（Ｍｔｔｒｃｋ　Ａｒｔ　
）７７３４．４５Ｃ１：］のカラムに加えた。このカラ
ムをシクロヘキサン：　ＣＭ２Ｃ１，：　ＥｔＯＡｃ（
４：４：２．５）で溶離し、適当な分画を真空蒸発して
、淡黄色消（２，３２Ｐ、２５％）を得た。

これは放置すると、固化して灰色結晶の固体が得られた
。トルエン：ヘキサン（１０：１．５．１０ｔｎｔ）か
ら再結晶化すると、微細な純粋な白色結晶（２，２Ｆ）
が得られた。融点８９．５−９１．５　；（１１）の概
略的製造はサンナ（Ｓαｎｔｉ）、（１９６７）：ジャ
ーナル・オプ・ヘテロサイクリック・ケミストリー（Ｊ
、　ＨｇｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃＣｈｇｍ、）　４　、４
７５に記載されている。

ソエチルＮ−（４−（＃−（（５，４−ジヒドロ−４−
オキンー３−（（ピバロイル）オキ−７）メチル−６−
キナゾリニルンメチル）メチルアミン）ベンゾイル）−
Ｌ−グルタメート（１５）この化合物は、化合物（５）
の製造について記載したのと同様な方法で表Ａに記載す
る試薬の量および条件を用いて、化合物（１１ンから製
造した。

特性づけのため、一部分を７０°Ｃ／′Ｐ、　Ｏ，、、
”　１ｍ／８時間で乾燥して、もろいガラス状物質を得
た。

Ｍ、　Ｐ、　８６．５−９０℃。ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ
　。

ＤＭＳＯ−Ｄ６／ＴＨＥ　）。δ １．１１　（ｓ＋９Ｈ，ｔＢｕ）。

１．１６　（ｔ　、Ｊ　＝７．１Ｈｚ、　５Ｈ，ＣＨ，
）。

１．１８　（ｔ　、　Ｊ＝７．１Ｈｚ　、　５Ｈ、ＣＨ
，）。

２．０５　（？７Ｌ　、　２Ｈ、ｇｌｌＬＣＨ，）　。

２．４１（ｍ、２Ｈ，σｌ舊　ＣＨ２１。

３．１４　（ｓ　＋　３Ｈ＋　Ｎ”　ＣＨｓ　）　＋４
−０４（Ｑ＋１＝７．１Ｈｚ、２Ｈ，ｘ、：ｘチルＣＨ
２）。

４、ｏ’？　（ｑ＋　Ｊ＝７．１Ｈｚ　、　２Ｈ，ｘス
−ｒルｃＨ，）。

４．５８　（ｍ、　　１Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ）。

４．８３　　（８１２Ｈ，ＣＨ９，） ５．８９　（ｓ　、　２Ｈ、０−Ｃ’Ｈｔ−Ｎ　）　。

６．７７　（ｃｌ　＋　Ｊ＝＝９ｏＨｚ　ｒ　２Ｈ＋　
Ｈ”　、　Ｈ”）　　ｔ７．６８　（ｙｘ、２Ｈ、Ｂ７
　、Ｈ”　　）。

７．２２　（ｄ　ｌ　ｌ＝９．０Ｈ２，２Ｈ、Ｈ”、Ｈ
６’）。

７．９８　（＄　ｌ　１ＨＴＨ”　　）１１３．３３（
ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｂ、７ミソンＮＨ）。

ａ４３　（ｇ　、’ＩＨ、Ｂ２　）。

分析（’ｓｚＬ。Ｎ、０．）　Ｃ、Ｈ、Ｎ０Ａ’−（４
−（Ａ’−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−６−キ
ナゾリニル）メチル）メチルアミン）ベンゾイル）−Ｌ
−グルタミン酸（ＣＢ５８２４）この化合物は、実施例
１におけるＣＢ５８０４の製造についてと同様な方法で
表Ｂに示す試薬の量および条件を用いて、化合物（１５
）が製造した。

融点１８６．５　＝　１８９℃。ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ
　。

ＤＭＳＯ−Ｄ、／ＴＭＳ　）　　δ ｔ９９　（ｍ、２Ｈ、ｇｌｗ　　ＣＨ，）。

２．３３　（ｙａ、　２Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ２）。

五１３　（８１５Ｈ，Ｎ１０ＣＨ，）。

４．３５　（ｍ、　　１Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ）。

４．８１　　（８１２Ｈ，ＣＨ９ｔ　）。

６、７７　（ｄ　＋　Ｊ＝ａ　９　Ｈｚ　＋　２　Ｈ＋
　Ｈ”　’　、　Ｈ”　）　。

Ｚ６５　（＆　、　２Ｈ，Ｈ’　　、Ｈ”　　）。

７．７３　（ｄ　、Ｊ＝８．９Ｈｚ　、２Ｈ、Ｈ”、Ｈ
”）。

７．９１　　（８１１Ｈ，Ｂ５）　　。

ヒ（３６（ｓ　、　　１Ｈ，Ｈ”　　）。

ａ２１　（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、　１Ｈ，１ミＶンＮＨ
）。

１２．２５（ｂτ　ｇ、１Ｈ，ラクタムＮＨ）。

１２．５５　（ｂｒ　　ｓ　、　２Ｈ，Ｃ０ＯＨ’ｓ　
）ＵＶ（０，１ＮＮα０Ｈａ９）λ（ｉ）　ｓ最大；２
２２５、ｎｍ（３１，６００）、３１０１ｍ（３０゜２
００）；最小：２４８Ｔｚｍ（５，２００）。

分析（Ｃｔ□Ｈ２！Ｎ４０６　・　１Ｈ，０）　Ｃ、Ｈ
、Ｍ０実施例４，５および６ ＣＢ３８０４の製造に類似する方法で、適当なアミンを
アルキル化し、次いで反応の概略に従いけん化しかつ表
ＡおよびＢに示す試薬の量および条件を用いて、化合物
ＣＢ５８２２．５８２６および３８１６をまた製造した
。

ゾｘチルＮ　−（４−（エチルアミノ）ベンゾイル−Ｌ
−グルタメート（１２） ソエチル＃−（４−アミノベンゾイル）グルタメート（
６，４４ｒ、２０ミリモル）のＤＭＦ溶液にに、ＣＯ，
（２，７６Ｆ、２０ミリモル）およびヨードエタン（６
，２４Ｆ、４０ミリモル）を加えた。

この混合物を１００−１１０℃で５時間はげしくかきま
ぜた。油ポンプの真空下に溶媒を除去した後、暗かっ色
スラッジをＥｔＯＡｃ　（２５０ｍ／）に加え、ＨＩ３
（２Ｘ５００ゴ）で洗浄した。有機層を引き続いて乾燥
（Ａｆ　ｙ　Ｓ　Ｏ＋　）　シ、そして真空蒸発してか
っ色消（８，４ｒ）を得た。これをＣＨ，Ｃｌ２（１０
ｒｎりの５％のＥｔＯＡｃ中に溶解し、ガラスのカラム
（内径５ｃｒｒＬ）中に構成したシリカＩｆ　ルＣマー
ク・７−　）　（Ｍｅｒｃｋ　Ａｒｔ　）　　７７３４
．４００　？　］に適用した。このカラムをＣＨ，Ｃ１
，中の５％のＥｔＯＡｃで溶離し、そして適当な分画を
濃縮して淡黄色固体を得た。融点７７−７８℃、文献７
３°ＣＸＪ、Ａ、モンドゴメリ＝（Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒ
ｙ）、Ｊ、Ｒ，ノぐイパー（ｐｉ−ｐｅｒ）、Ｒ，Ｄ、
エリオツド（ＥＬｌｉｏｔｔ　）、Ｃ。

テンプル（Ｔｅｍｐｌｔ　）　Ｊｒ、、Ｅ、Ｃ，ａパー
ツ（Ｒｏｂｅｒｔｓ　）およびＹ、Ｆ、　シーリイ（Ｓ
ｈｇｃＺ−ｌｙ）（１９７９）；ジャーナル・オプ・メ
デイシナル・ケミストリー（Ｊ、　Ｍａｄ、　Ｃｈｅ情
、）２２．８６２゜ クメチルＮ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−
オキソ−３−（（ピパロイル）オキシ）メチル−６−キ
ナゾリニル）メチル）エチルアミノ）特性づけのため、
一部分を７０℃／　ｐｔ　Ｏｓ　／　１襲／８時間で乾
燥して、もろいガラス状物質を得・た。ＭＳ：ｍ／ｚ６
２２Ｍ　　；ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ　、　ＣＤＣｌ、／
ＴＭＳ　）δ１．１１　（ｓ　、　９Ｈ，ｔＢ藝）。

１．１５　（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ　、５Ｈ，エチｈｃＨ
５）。

１．１７（ｔ、！＝７．０Ｈｚ、６Ｅ、ＣＨ，’ｓ）２
．０４（常、　２Ｈ、ｇｌｗ　　ＣＨ，）。

２．４　Ｑ　（ｍ、　’ｌＨ、ｇａｒｂ　　ＣＨ，）　
。

五５９　（ｑ、　７＝６．９　、２Ｈ、エチルＣＨ，）
。

４．０５　＜ｑ、Ｊ＝７．０．２Ｈ，エステルＣＨ２）
。

４．０８　Ｃｑ、Ｊ＝７．０．２Ｈ，エステルｃｍ２）
。

４．３８　（？７Ｌ、　１Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ）。

４．７８　（ａ　、　２Ｈ，ＣＭ’□）。

５．８９　（ｓ　、　２Ｈ、０−ＣＭ、−Ｎ　）　。

６．７１　（ｄ　、Ｊ＝ａ９Ｈｚ　、　２Ｈ、Ｈ”、Ｈ
”）。

７．６９　（ｄ　、Ｊ＝８．．９Ｈｚ　、２Ｈ，Ｈ”、
Ｈ”）。

７．６９　（ｆｉ、２Ｈ，Ｈ？　、Ｈ”　　）。

８、ＱＱ　（ｓ　、　１Ｈ，Ｈ”　　）。

Ｃ２９（ｄ、７＝７．５Ｈｚ、１！？、７ミソンＮＨ）
。

Ｃ４３（８，１Ｈ，Ｈ’　　）。

分析（Ｃ９，Ｈ４２Ｎ、０８）Ｃ１Ｈ２ＮＯＮ−（４−
（＃−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−６・−キナ
ゾリニル）メチル）エチルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−
グルタミン酸（ＣＢ５８２２ンＭ、　Ｐ、　１４五５−
１４５．５　、　ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ。

ＤＭＳＯ−Ｄ、／ＴＭＳ　） ’１．１７（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、３Ｈ，ＣＨ，）。

１．９８（倶、２Ｈ２σ１ｕｃｋｔ）ν２．３２（倶、
２Ｈ，ｇｌｓ　　ＣＨ，）。

３．５８　（Ｑ　、　Ｊ＝６．９Ｈｚ　、　２Ｈ、エチ
ルＣＨ，）　。

４−３４　（ｍＴ　Ｉ　Ｈｔ　ｇｌ　ｕ　　ＣＭ　）　
。

４．７５　（ＩＩ　＃　２Ｈ，０Ｍ９．　）１６．７１
　（ｄ、Ｊ＝ａ９Ｈｚ　、２Ｈ，Ｈ”、Ｈ”）。

Ｚ　６６　（テガ、、　　２Ｈ，Ｈ丁　、Ｈ８）　　。

７．７０　（ｄ　、Ｊ＝８．９Ｈｚ　、２Ｈ，Ｈ”、Ｈ
”）。

７．９３　（ｇ　、　１Ｈ，Ｈ”　　）。

Ｃ０６（＄　＋　１Ｈ，Ｈ”　　）。

ａｌ　７　（ｄ　、Ｊ＝７．７Ｈｚ　、　１Ｈ，７ミノ
ンＮＨ）。

１２．２４　（ａ　、　１Ｈ，ラクタムＮＨ）。

１２．２９　（ｌ０ｒｒ　　ｓ　、　２Ｈ、Ｃ０ＯＨ’
５）ＵＶ　（０，ＩＮ　Ｎａ０Ｈａ、）λ（ｅ）、最大
：２２４ＴＬｍ（３０，８００）、３１２ｙｃｍ（２９
，９００；最小２５０９ｍ（５，５００）。

分析（ＣｔｓＨｔ＋Ｎ＋　Ｏｎ・１Ｈ，０）Ｃ，Ｈ，Ｎ
０ソエチルＮ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４
−オキソ−３−Ｎピバロイル）オキシ）メチル−６−キ
ナゾリニル）メチル）ゾロデー２−エニルアミノ）ベン
ゾイル）−Ｌ−グルタメートこれは４およびソエチル＃
−（４−（プロプ−２−エニルアミノ）ベンシル）−Ｌ
−グルタメー）（１３）のアルキル化により合成した。

文献Ｔ、Ｒ，ソヨーンズ（ｌｏｎｇｓ　）、Ａ、Ｈ，ツ
ヤツク−ｒ　ン（Ｊａｃｋｍａｎ　）、Ｓ、Ｊ、ブラウ
ン（Ｂｒｏ−ｗｎ）、Ｍ３ソヨーンズ（Ｚｏｎｅｓ　）
およびに、Ｒ。

ハラツブ（Ｈａｒｒαｐ）：ユーロピアン・ジャーナル
Ｏオプーキサ／サ−（Ｅｗｒｏｐ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅ
ｒ　）１７　１１（１９８１）。特性づけのため、一部
分を７０℃／　Ｐ２０６　／　１　ｍ／　１０時間で乾
燥して、もろいガラス状物質を得た。融点４７−５０℃
。

ＭＳ　：ｍ／ｚ６５４　（Ｊｆ　　）、ＮＭＲ（２５０
ＭＨｚ　、ＤＭＳＯ−Ｄ６／ＴＭＳ　）、δ１．１１　
（ＩＩ　＋　９Ｈ，ｔＢｌＬ）　。

１．１５（ｔ、Ｊ＝７．’＋Ｈｚ、５Ｈ，ｘステルｃＨ
，）。

１．１７（ｔ＋７＝７．１Ｈｚ、３Ｈ，エステルｃＨ，
）。

２、０３　（ｍｔ　２　Ｈ、（７’　”　　ＣＬ　）　
＋２．４０　（ｍ、　２Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ，）。

４．０３　（ｑｒ　１　＝７．１　Ｈｚ　、　２　Ｈ、
ｘ　ステルＣＨ，）　＋４．０７　（＋７　ｒ　１＝７
．１Ｈｚ　、　２Ｈ，ｘｙ、、チルＣＭ２）。

４．１９　（ｍ、　２Ｈ，７リルｃＨ，）＋４．３７　
（ｍ、ＩＨ＋　ｇｌｕ　　ＣＨ）。

４．７９　（＆　、　２Ｈ，ＣＨ９□）。

５．１８＜ｍ、２Ｈ，末端アリルｃＨ，）　。

５．８５−５゜９６　（ｆｉ、ＩＨ，アリルｃＨ）。

５．８９　（８、２Ｈ、０−ＣＨ，−Ｎ　）　。

Ａ、７２　（ｄ　、Ｊ＝Ｆ！−９Ｈｚ　、２Ｈ，Ｈ”、
Ｈ”）７、６８　（ｄ　ｒ　Ｊ＝ａ　９　Ｈｚ　＋　２
　Ｈｒ　Ｈ”　’　＋　Ｈ”　）　。

７．７３　（ｍ、２Ｅ、Ｈ’　　、Ｈ８）。

ａｏ　１　　（ｄ　、Ｉ＝１．５Ｈｚ　、　１Ｈ，Ｂ５
　）。

Ｃ５１（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、ＩＨ，７ミソンＮＨ）。

８．４４　（ｇ　　ｌ　　ＩＨｐＨ”　　＞　　＋分析
（Ｃｓ４Ｈ４ｔ’ｌＯａ・１Ｈ，０）　Ｃ、Ｈ、Ｎ０Ｎ
−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキノー６
−キナゾリニル）メチル）ｆログ−２−エニルアミノ）
ベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸Ｍ、Ｐ、１５Ｂ−１４
３°ＣｏＮＭＲ（２５Ｃ１１＝ｆＨｚ　。

ＤＭＳＯ−Ｄ６）、　δ １．９８　Ｃｍ、２Ｈ、ｇｌｕ　　ＣＭ、）。

２−０９　（ｍｔ　２　Ｈｔ　ｇｌ　ｕ　　ＣＨｔ　）
　＋４．１８　（ｍ、２Ｈ，７リルＣＨ２）。

４．３４　（ｍ、　　１Ｈ，ｇｌｕ　　ＣＨ）。

４．７７　（８、２Ｈ，ＣＨＱ、　）。

５．１８　（７ａ、　２Ｈ、末端アリルｃＨ，）。

５．８３−５．９６　（ｆｆ＋、、　ＩＨ，７リルｃＨ
）。

６．７２　（ｄｌ　Ｊ＝８．９Ｈ１，２Ｒ，Ｂ３１．Ｈ
”ｌ）。

７．６７　（ｍ、２Ｈ、Ｈ’　　、Ｈ”　　）。

７．６８　　（ｄ　、　　Ｊ＝８．９Ｈｚ　　、　　２
　Ｈ，Ｈ”、Ｈ”）　　。

Ｂ９４　（ｇ　、ｊＨ，Ｂ５　）。

８、Ｑ６　（Ｊ　、　　１Ｈ，Ｈ”　　）。

ａｌ　９　Ｃｄ　、Ｊ＝７．７Ｈｚ　、　１Ｈ，アミジ
ンＮＨ）。

１２．２５　（ｓ　、　１Ｈ，ラクタムＮＨ）。

１２４１　　（ｂｒ　　　ｓ、２Ｈ，Ｃ０ＯＨ’ｓ）。

Ｕ　Ｖ（０，１Ａ’　Ｎａ０Ｈａ　ｑ　）λ（ε）、最
大：２２０．５Ｎｍ（５３，７００）、３１０Ｎｍ（３
０，７００１；最小２５０ｎ常（５，７００）。

分析（Ｃ，、Ｂ、、Ｎ、０，５／４Ｈ，０）　Ｃ、Ｈ、
Ｎ０ノエチルＮ−４−（＃−（（３，４−ジヒドロ−４
−オキソ−３−（（ピパロイル）オキシ）メチル−６−
キナゾリニル）メチル）アミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グ
ルタメート（１８） これは（４）およびソエチル＃−（４−（アミン）ベン
ゾイル）−Ｌ−グルタメート（１４）のアルキル化によ
り合成した。

Ｍ、Ｐ、６５−６６℃。Ａ’　ＭＲ（２５０ＭＥ　Ｚ　
。

ＣＤＣ１，／ＴＭＳ）、δ １．２０　（ｓ　＋　９　ＩＩ　、ｔ　ＢｌＬ）　＋１
．２１　（ｔ　、５Ｈ，ＣＨ３）。

１．２９　（ｔ　、　３Ｈ，ＣＭ、　）。

２．２１　（ｍ、２’Ｌ　ｇｌｕ　　ＣＨ２）。

２．４６　（？ＦＬ、　２８　、　ｇｌｕ　　ＣＭ、　
）　。

４−０９（Ｑ、２Ｈ，エステルＣＨ，）　。

４．２１（ｑ、２Ｈ，エステルＣＭ２）。

４．５４　（８，２Ｈ，ＣＨ”、）。

４．６４（ｂｒ　　ｓ、１Ｈ，Ｎ’ＯＨ）。

４．７７　（？ＦＬ、ＩＨ，ｇ１１Ｌ　ＣＭ）。

５、９４　（ａ　、　２　Ｈ、０−ＣＨ，−Ｎ）　。

６．６１　（ｄ　＋　Ｊ＝ａ７Ｈｚ　ｔ　２Ｈ，Ｈ３’
、Ｈ５’）。

６−７９（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ，７ミジ７ＮＨ）
。

７．６６　（ｄ　、Ｊ＝８．７Ｈｚ　、２Ｈ、Ｈ”、Ｈ
”）。

７．７１　　（ｄ＃＝８．４Ｈｚ、　１Ｈ，Ｈ”　　）
。

７．７８　（ｄｄ、　Ｊ＝ａ４およびｔ９Ｈｚ　、　Ｉ
　Ｈ。

Ｂ７　）。

ａ２ｙ　（ｓ　＋　　１Ｈ＋　Ｈ”　　）＋ａ３０　（
ｄ　、Ｊ＝１．９Ｈｚ　、　１Ｈ，Ｂ５　）。

分析（Ｃ３１Ｈ３８Ｎ４０８）　Ｃ２Ｈ２Ｎ。

Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
６−キナゾリニル）メチル）アミン）ベンシイ／Ｉ／）
−Ｌ−グルタミン酸（ＣＢ５８１６）ＮＡｆＲ（２５０
ＭＨｚ　、ＣＤ、ＯＤ／ＴＭＳ）、δ２．１　７　　（
ｍ、　　２Ｈ、ｇｌ　１Ｌ　　ＣＨ，ン　。

２．４４　（ｔ　、　２Ｈ２（７１”　　ＣＨｔ　）　
。

４、ｓ　４（ｓ　ｌ　２ＨＩ　ＣＨ’２　）　１４．８
０（ｓ、２Ｈ，σ１ｕｃＨ）。

４．９Ｑ　（ｂｒ　　ｓ　、　ｉＨ，Ａ”’Ｈ１。

６．６５　（ｄ　ｊ　Ｊ＝ａ８Ｈ２Ｉ　２Ｈ，Ｈａｔ、
Ｈ５’）。

Ｚ６４　（ｄ　、１＝ａ８Ｈｚ　、　２Ｈ，Ｈ”、Ｈ”
）。

７．６７　（ｄ　、　Ｊ＝８．４Ｈｚ　、　１Ｈ、Ｈ・
　）　。

７．８５　（ｄｄ、Ｊ−４４および２．ＯＪ７ｇ、ＩＨ
。

１丁　）　。

ａ０６　（Ｊｉ　Ｉ　１Ｈ，Ｈ”　　）　　１ａ２２　
（ｄ　、Ｊ＝２．０Ｈｚ　、　１Ｈ，Ｈ”　　）。

ラクタムＭＥおよびＣ０ＯＨは記録されない。

ＵＶ（０，１ＮＮａＯＨ（水性）中に取る）λ（ε）。

最大：２８８ａｍ（２４，１００）、２２０ｍｍ［３０
，１００）：最小：２４７ｓｍ（７，２５０）。

分析（’ｚｔＨｔ。Ｎ４０．）Ｃ，Ｈ，Ｎ。

実施例６ 上 Ｎ−（５−アミノ−チェソー２−オイル）−Ｌ−グルタ
メート（５ｇ）を乾燥ジメチルホルムアミド（１００ｍ
ｌ）中に溶解し、臭化プロパルギル（８０％のトルエン
溶液の２　、５　ｇ）および２．６−ルチジン（２、０
ｎ　１）を添加し、そしてこの混合物を４０℃で４８時
間攪拌した。室温に冷却後、この混合物を水（５００ｍ
ｌ）中に注ぎ、酢酸エチル（３×１ＯＯＸＪ１１１）で
抽出し、そして合わせた有機抽出液を水（２Ｘ５０ｍｌ
）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空蒸発させ
た。生ずる油をシリカゲル（２５０ｇ＞のクロマトグラ
フィーにかけ、１５％の酢酸エチル／塩化メチレンで溶
離すると、ジエチルＮ−（５−（プロプ−２−イルアミ
ノ）チェソー２−オイル）−Ｌ−グルタメートが得られ
た。

Ｎ−（５−アミフチエン−２−オイル）−Ｌ−グルタメ
ートそれ自体は、次のようにして調製した： 塩化５−ニトロチン−２−オール（３ｇ）をトルエン（
５０ｍ　ｌ）中に溶解し、（Ｌ）−グルタミン酸ジエチ
ルエステル（塩酸塩）（４，１５ｇ）を添加し、次いで
ピリジン（１，５ｇ）をｉ加した。この混合物を室温で
７２時間攪拌し、水（２００ｍ　ｌ　）中に注ぎ、酢酸
エチル（３Ｘ１００ｍｌ）で抽出し、そして合わせた抽
出液をブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、真空蒸発させた。得られる油をシリカゲル
のクロマトグラフィーにかけ、１０％の酢酸エチル／塩
化メチレンで溶離し、そしてこのようにして得られた生
成物をエタノール（２０ｍｌ）中に溶解し、０℃に維持
した水中の亜流酸水素ナトリウム（６，２ｇの水和物塩
）溶液にゆっくり添加した。１時間攪拌した後、この混
合物を水（１００ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（３Ｘ５
０ｍｌ）っで抽出し、合わせた抽出液をブライン（２Ｘ
５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空
蒸発させる。生ずる油をシリカゲル（１００ｇ）のクロ
マトグラフィーにかけ、２７％の酢酸エチル／塩化メチ
レンで溶離すると、Ｎ−（５−７ミノチエンー２−オイ
ル）−Ｌ−グルタメートが得られ、これをそれ以上精製
せずに引き続く反応において使用した。

ｂ）工程（ａ）の生成物を実施例１に記載するようにブ
ロモメチル化合物（４）と反応させ、得られるジエチル
Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
３−（（ピバロイル）オキシ）メチル−６−キナゾリニ
ル）メチル）プロブ−２−イルアミノ）チェソー２−オ
イル）−Ｌ−グルタメートを、実施例１において対応す
るベンゾイル類似体について記載するように、水素化し
てＣＢ　　３８６６を得た。

研究はマウスおよびラットにおいて実施した。

ヱ皇ｌ ＣＢ　　３７１７およびＣＢ　　３８０４をｏ、ｉ５モ
ルにＮ　ａ　ＨＣＯ３、ｐＨ９−９，５中に１０．３０
または５０ｍｇ／ｍｌで溶解した。化合物は雄のＢＤＦ
Ｉマウスに１０ｍｇ／ｋｇで腹腔内投与して、１００，
３００または５００ｍｇ／ｋｇの投与量を得た。投与後
３時間および６時間に、各投与水準の３つのマウスの群
を心臓穿刺の放血により殺した。血漿を調製し、そして
肝臓および腎臓を切除し、秤量した。ＣＢ　　３７１７
およびＣＢ　　３８０４の濃度を血漿、肝臓および腎臓
において、高性能クロマトグラフィーにより決定した。

表１に示すように、ＣＢ　　３７１７は殺したマウスの
すべての血漿、肝臓および腎臓において容易に検出され
た。これと対象的に、研究した自邸において、ＣＢ　　
３８０４の水準は検出に限界より低く、ただし５００ｍ
ｇ／ｋｇｆｆｉｃＢ　　３８０４の投与後３時間におけ
る血漿水準は例外であった。

血漿の試料を、また、肝臓毒性の指示因子である酵素ア
ラニントラスアミナーゼについて分析した０表２に示す
ように、アラニントラスアミナーゼめ水準はＣＢ　　３
７１７の翅置後著しく上昇したが、ＣＢ　　３８０４の
投与後、その水準は正常の範囲（５−２５Ｕ／ｌ）内で
あった。

ＣＢ　　３８０４が腹腔内投与後吸収されることを立証
するために、分泌実験を実施し、ここで１００ｍｇ／ｋ
ｇｃ７）ＣＢ　　３８０４をマウスに腹腔内投与した０
表３に示すように、糞便および尿の両者においてＣＢ　
　３８０４の排除が存在した。

さらに、２成分は糞便中に観測された。これはＣＢ　　
３８０４の代謝物質を表わすことができる。

ＣＢ　　３７１７についての比較データが、また。

表３に記載されている。これらの分泌の研究が示すよう
に、ＣＢ　　３８０４は、腹腔内投与後、満足に生物利
用可能であり、それゆえ肝臓毒性の欠如および腎臓にお
けるＣＢ　　３８０４の検出不能性はこの化合物に固有
の性質である。

ラット ＣＢ　　３７１７およびＣＢ　　３８０４ヲ０１１５モ
ルｃｙ）ＮａＨＣＯ３、ｐＨ９中に溶解し、ベンドパル
ビタールで麻酔した雌のウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）ラ
ットに１００ｍｇ／ｋｇで１時間の静脈内注入として投
与した。注入の間および後において、血液および胆汁の
試料を集めた。実験後４時間において、ラットを殺し、
膀胱から尿を集め、そして肝臓および腎臓を切除した。

試料をＨＰＬＣによりＣＢ　　３７１７およびＣＢ　　
３８０４について分析した０表４に示すように、ＣＢ　
　５７１７はＣＢ　　３８０４はど急速に清浄化されな
かった。これはＣＢ　　３８０４のより大きい胆汁およ
び尿からの分泌と一致する。ＣＢ　　３７１７と対照的
に、ＣＢ　　３８０４は実験の終りにおいて肝臓または
腎臓のいずれからも検出することが不可能であった。血
漿の試料を、また、アラニントラスアミナーゼについて
分析した０表４に示すように、ＣＢ　　３７１７はこの
酵素の血漿水準の顕著な増加を示し、これに対してＣＢ
　　３８０４は示さなかった。

綾部 これらの実験に基づいて、研究した投与量において、Ｃ
Ｂ　　３８０４はマウスまたはラットにおいて肝臓毒性
ではないと、われわれは結論することができる。これは
ＣＢ　　３７１７と顕著な対照である。

同様に、ＣＢ　　３８０４は腎臓内の明らかに蓄積しな
い、ＣＢ　　３７１７の腎臓毒性は腎臓内の前記薬物の
沈殿のためであると考えられるので、ＣＢ　　３８０４
は非肝臓毒性キナゾリンを表わすであろう。

醗崖ヱ 各化合物を０．１５モルのＮａＨＣＯ３中に溶解した。

チミジレートシンターゼを３Ｈ解放法でアッセイした。

５０，０００ｇの上澄み液を、この研究所で開発したＴ
Ｓを再度に生産する（４５倍）Ｌ１２１０細胞系統から
調製した。調製緩衝液は０．０５モルのリン酸カルシウ
ム７０　、０１モルの２−メルカプトエタノール、ｐＨ
７，４であった。０．５ｍｌのインキュベーション混合
物は０．０５ｍ１の阻害剤、０．２０ｍ１の上澄み液（
約１０．Ｌモルの上澄み蛋白質）、５０ｆｉＬモルの３
　ＨｄＵＭＰ　（０，２２μＣｉ）および２００ＪＬモ
ルの（±）　−Ｌ−５、１０−ＣＨ２ＦＨｔ（ＩＯＢ−
ルの±Ｌ−ＦＨ４を５　ｍ　ｌの２０ミリモルの最終濃
度にホルムアルデヒドを添加したおよび約０．１ｍｌの
ＩＮのＮａＯＨ中に溶解することによって構成した）を
含有した。この反応混合物は合計２５ＩＬモルのホスフ
ェートを含有した。インキュベーション時間は３７℃で
１時間であった。これらの条件下に、上澄み液を５，１
Ｏ−ＣＨ２ＦＨ４の不存在下にインキュベーションした
時、バックグラウンドの放射能の存在により示されるよ
うに、ホスファターゼの活性は存在しなかった（すなわ
ち、３　ＨｄＵＭＰの３ＨｄＵｒｄへの共有は存在しな
かった）。

ＤＨＦＲをラットの肝臓から部分的に精製し、そして分
光光度測定的に７フセイした。

結果を下表に示す（表５）、Ｉ５゜はＴＳの活性を５０
％だけ減少するために必要な阻害剤の濃度であると定義
された。ＣＢ　　５７１７は参照化合物として含めたの
で、結果は逆相対効力（ｉｎｖｅｒｓｅ　　ｒｅｌａｔ
ｉｖｅ　　ｐｏｔｅｎｃｙ）（ＩＲＰ）として表わすこ
とができるであろう（Ｉｓｏ試験化合物／ＣＢ　　３７
１７）。

表　　　　５ ＣＢ５７１７　　　＊２０．５　　　　　　　　　４．
３０”ＣＢ５７１７１７０．Ｏａ３８００ ＣＢ５Ｂ１６　１１！＋６ ＣＢ５８２４　５３ ＣＢ５８２２　２６ ＣＢ５Ｂ２６　５６ ＣＢ５８６６１７００８５ ＊　Ｋｉ＝５ルＭ （−）−５、１０−ＣＨ，ＦＨ，＝２００μＭ本＊、よ
り純粋な物質を用いる反復試験ＣＢ　　３７１７構造か
ら２−アミノ基を除去すると、ＴＳの効力の小さい減少
が生じた（８倍）、非常にいっそう著しい阻害活性の損
失はＤＨＦＲに対して認められた。

綴胞ｍ璽蛮 Ｌ１２１０およびＬ１２１０／Ｃ１５（ＴＳを４５倍過
度に生産する）を、１０％のウマ血清を補充したＲＰＭ
Ｉ　　１６４０培地（２０ミリモルのＨＥＰＥＳ）中で
、連続的な懸濁培養で生長させた。対数期の生長の細胞
を約５Ｘ１０’／ｍｌに希釈し、そして反復実験の５ｍ
ｌのアリコートを適当な添加物を含有する５０ｍ１の組
織培養フラスコに添加した［ＲＰＭＩ中に希釈し、そし
てミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）濾過により滅菌した
］、インキュベーション後４８時間に細胞の計数を、コ
ールタ−（（ｇ　ｕｌ　ｔ　ｅ　ｒ）カウンティングに
より得た。ＩＤＳ、は、４８時間において計数を対照の
５０％に減少させるために必要な薬物の濃度として定義
した。

Ｌ１２１０およびＬ　１２１０／Ｃ１５中のＩＤ５゜を
表６に示す、ＣＢ　　３７１７の並行実験で使用した。

表　　　　６ （ｊ９３Ｂ１６　０．７ ＣＢ５Ｂ２４　１．１ ＣＢ５Ｂ２２　２．６ ＣＢ５Ｂ２６　１．７ ＊これらの細胞はメトトキセートまたは５−ＣＨ，−５
，８−ジアザアミノプテリン（ＣＢ５７０５）に対して
抵抗性では力かった。

士　別の実験　　手　別の実験 ＣＢ　　３８０４はＬ１２１０細胞に対してＣＢ５７１
７よりも約７倍効力があった。Ｌ１２１０／Ｃｌ　５細
胞系統（ＣＢ　　３７１７に対する抵抗性を獲得した）
は、ＣＢ　　３８０４に対して交差抵抗性（ｃｒｏｓｓ
−ｒｅｓ　ｉ　ｓｔ　ａｎｔ）−１？あった。この事実
は、ＴＳがＣＢ　　３８０４の細胞毒性に含まれる唯一
の作用場所であることを強く示唆する。

ＣＢ　　３８０４（７）Ｌ１２１０毒性の逆転（ｒｅｖ
ｅｒｓａｌ）は、１０終モルのチミジンと同時にインキ
ュベーション（ｃｏ−ｉ　ｎｃｕｂａｔ　１ｏｎ）する
ことによって達成することができた。

５ルモルのＣＢ　　３８０４の存在下に逆転は完全であ
ったが、５０μモルにおいて不完全な逆転（対照の生長
の７５％）が認められた。再び、ＣＢ　　３７１７（Ｊ
Ｌモル）を対照として含めた。

表　　　　７ ＣＢ５７１７５０　１０５ ＣＢ５８０４５　９８ （：Ｂ５８０４５０　７５ 酸沈澱性物質中への３ＨｄＵｒｄの組み込みＬ１２１０
細胞を１０５７ｍ１の濃度で使用した。３７℃における
インキュベージ、ンは、薬物を含むかあるいは含まない
完全ＲＰＭＩ組織培養培地中で、グラフに示す長さの時
間実施した。この時間において、３ＨｄＵｒｄを２７ｔ
Ｃｉ／ｍｌ（約０．２蒔モル）の濃度で添加した。３つ
の１ｍｌのアリコートを２０分後に取り出し、氷上に置
き、そして１ｍｌの水冷リン酸塩緩衝生理的食塩水（Ｐ
ＢＳ）と混合した。ガラス繊維のディスク上への沈殿を
、トリクロロ酢酸の洗浄および引き統＜ＰＢＳの洗浄に
より実施した。第１図、第２図および第３図は、酸沈澱
性物質中への３ＨｄＵ　ｒ　ｄｃ７）組み込み（ｉｎｃ
ｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を抑制する能力についての１種
々の濃度のＣＢ　　３７１７、ＣＢ　　３８０５（５，
８−ジブアザ葉酸）およびＣＢ　　３８０４の作用を比
較する。これは全細胞中の新たなチミジレート合成の間
接の測定である。「親（ｐａｒｅｎｔ）Ｊ化合物（ＣＢ
　　３８０５）は、ＩＤ５ｏ濃度（５１Ｌモル）におい
て２時間にわたり３ＨｄＵｒｄの組み込みに有意に作用
しなかった。この値の１０倍でさえ、急速な抑制を生成
しなかった（これらの結果はＭＴＸを使用したものに類
似し、ここで新たなチミジレート合成の停止はＤＨＦＲ
阻止から生ずる２次の事象でる）、５０４モルのＣＢ　
　３７１７または１０ｐモルのＣＢ　　３８０４は、約
１０分までに組み込みを＜２０％に減少させた。

これらの濃度はＩＤ５゜値の１０倍である。結果が示唆
するように、ＣＢ　　３８０４はＣＢ　　３７１７に非
常に類似し、それはより低い濃度（そのＩＤ５ｏに比例
する）であるが、チミジレート合成を急速に阻止する。

Ｌ１２１０　　瘍　、マウスの装置 Ｌ１２１０腫瘍は、癌研究所（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　　
ｏｆ　　Ｃａｎｃｅｒ　　Ｒｅ５ｅａｃｈ）において日
常的にＤＢＡ２マウス中で生産される（ｃａｒｒｙ）（
Ｌ１２１０／ＣＢＲＩ）、実験のため、実験の３日前に
５Ｘ１０４細胞をＣ５７ＢＩＸＤＢＡ２　Ｆ＋雑種のマ
ウスの腹腔内に移植した。ＣＢ　　３８０４およびＣＢ
５７１７を００１５モルのＮａＨＣＯ３中に溶解し、そ
してｐＨ９，５にｍＮｊした後、腹腔内注射した（毎日
×５）、対照群は９匹のマウスから成り、そして処置群
は６匹または７匹のマウスから成っていた。

結果を第４図に示し、ここで・は対照であり；■は２５
ｍｇ／ｋｇのＣＢ　　３８０４’ｔ’あり；口は５０ｍ
ｇ／ｋｇ（７）ＣＢ　　３８０４であり：ｌ。

Ｏｍｇ／ｋｇのＣＢ　　３８０４であり；マは２００ｍ
ｇ／ｋｇのＣＢ　　３８０４であり；ムは５゜ｍｇ／ｋ
ｇのＣＢ　３７１７である。ＣＢ５７１７は１回の投与
でのみ（５０ｍｇ／ｋｇ）で含めた。なぜなら、ｔｏＯ
ｍｇ／ｋｇ（最適な投与量）は多くの前に実験において
８０〜１００％の「・治癒」を絶えず与えたからである
。この試験において、５０ｍｇ／ｋＨのＣＢ　　３７１
７は約７０％の「治癒」を与えた（＞１００日間生存し
た）からである、ＣＢ　　３８０４の投与は１００ｍ　
ｇ　／　ｋ　Ｈにおいて約８０％の「治癒」および５０
　ｍ　ｇ　／　ｋ　ｇにおいて約６５％の「治癒」を与
えた。非常に効果に劣った２　５　ｍ　ｇ　／　ｋ　ｇ
のＣＢ５８０４を除外して、処置のいずれの間にも有意
差は存在しなかった。最高の投与量（２００ｍｇ／ｋｇ
）は毒性の明らかな徴候を与えず、そして体重の損失は
起こらながた。このＣＢ　　３７１７の投与量は約ｌθ
％の体重の損失を与え、そして動物の約５０％を死亡さ
せた（データを含めず）。

紋論 ＣＢ　　３８０４はチミジレートシンターゼ阻害剤であ
り、そしてすべての入手可能の証拠はこの酵素がその作
用の細胞毒性場所であることを強く示唆している。ＤＨ
ＦＲに対する阻害活性の非常に有意な減少が達成された
。そして、これは優れたＴＳ阻害および細胞毒性の決定
におい重要でありうる。ＴＳに関する細胞中のＤＨＦＲ
の高い水準はキナゾリンの基づく阻害剤のキレ−化合物
形成（ｓｅｑｕｅｓｔ　ｒａｔ　ｉ　ｏｎ）によりＴＳ
作用に拮抗することができ、こうしてＴＳへの結合に有
効な「遊離」の細胞間阻害剤の水準を減少する。生体内
において、ＣＢ　　３７１７と匹敵しうる抗腫瘍活性が
見出された。毒性の徴候は用いた投与水準（２００ｍｇ
／ｋｇまで）において現われず、これは１００ｍｇ／ｋ
ｇ以上の投与量においてＣＢ　　３７１７を使用した通
常観測されるものと対照的である。

【図面の簡単な説明】

第１図〜第３図は、酸沈澱性物質中への３ＨｄＵｒｄの
組み込みへの種々のキナゾリン抗フオレートの作用を示
す。 第４図は、ＣＢ　　３８０４の抗腫瘍活性を示す。 特許出願人　ナショナル・リサーチ・ディベロップメン
ト・コーボレーショ 映Ｒ Ｆ工ＧＵＲＥ　　３ ３ＨｄＵｒｄ　ノａ　、Ｉｆ＞ ご

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ I 式中Ｒは １）水素または ２）直鎖状もしくは分枝鎖状の飽和もしくは不飽和の炭
   化水素基、または ３）少なくとも１つの異種原子（ＲがＣ＿１炭化水素基
   であるとき、前記異種原子または各異種原子はハロゲノ
   である）により飽和炭素環式基により、あるいは少なく
   とも１つの異種原子を含有する基（Ｒが環式基を含有す
   るとき、前記異種原子または各異種原子はＯ、Ｎまたは
   Ｓである）により置換された、直鎖状もしくは分枝鎖状
   の飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、ｎは０、１
   または２であり、Ｚは−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｏ−また
   は−Ｓ−を表わし、 Ｘは、あるいはｎが少なくとも２の整数であるとき、各
   Ｘは、独立に、ハロゲノ、Ｃ＿１〜Ｃ＿４アルキル、ア
   リールまたはアラルキル基または少なくとも１つの異種
   原子を含む基を表わし、そして Ｙは次式の基を表わす： ａ）▲数式、化学式、表等があります▼ （Ｌ−アスパラギン酸残基） ｂ）▲数式、化学式、表等があります▼ （Ｌ−グルタミン酸残基） または ｃ）▲数式、化学式、表等があります▼ ここで￥ｍ￥≧１（ポリ−Ｌ−グルタミン酸残基）であ
   り、 または ｄ）▲数式、化学式、表等があります▼ （Ｌ−アラニン残基） または ｅ）▲数式、化学式、表等があります▼ （Ｌ−２−アミノ−酪酸残基） の化合物または製薬学的に許容されうる塩またはエステ
   ル。 ２、ｎは０または１である特許請求の範囲第１項記載の
   化合物。 ３、ＸはハロゲノまたはＣ＿１〜Ｃ＿４アルキルである
   特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ４、Ｘはフルオロである特許請求の範囲第１項または第
   ２項記載の化合物。 ５、Ｚは−ＣＨ＝ＣＨ−を表わす特許請求の範囲第１項
   〜第４項のいずれかに記載の化合物。 ６、ＹはＬ−グルタミン酸またはその塩またはエステル
   の残基である特許請求の範囲第１項〜第５項のいずれか
   に記載の化合物。 ７、Ｒは１〜４炭素原子の非置換基である特許請求の範
   囲第１項〜第６項のいずれかに記載の化合物。 ８、Ｒはプロパルギルである特許請求の範囲第１項〜第
   ７項のいずれかに記載の化合物。 ９、Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキ
   ソ−６−キナゾリニル）メチル）プロプ−２−イニルア
   ミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸、 Ｎ−（２−フルオロ−４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ
   −４−オキソ−６−キナゾリニル）メチル）プロプ−２
   −イニルアミノ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸、 Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
   ６−キナゾリニル）メチル）メチルアミノ）ベンゾイル
   ）−Ｌ−グルタミン酸、 Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
   ６−キナゾリニル）メチル）エチルアミノ）ベンゾイル
   ）−Ｌ−グルタミン酸、 Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
   ６−キナゾリニル）メチル）プロプ−２−エニルアミノ
   ）ベンゾイル）−Ｌ−グルタミン酸および Ｎ−（４−（Ｎ−（（３，４−ジヒドロ−４−オキソ−
   ６−キナゾリニル）メチル）アミノ）ベンゾイル）−Ｌ
   −グルタミン酸およびそれらの塩類およびエステル類か
   ら選択される特許請求の範囲第１項記載の化合物。 １０、二ナトリウム塩またはジエチルエステルの形の特
   許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の化合物
   。 １１、人間および動物の体の外科または治療による処置
   の方法において使用するための、あるいは人間および動
   物の体について実施する診断の方法において使用するた
   めの特許請求の範囲第１項〜第１０項のいずれかに記載
   の化合物。 １２、外科または治療の方法ががんを処置する方法であ
   り、あるいは診断の方法ががんを検出する方法である特
   許請求の範囲第１１項記載の化合物。 １３、式（ I ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼ I ａ 式中Ｘ、Ｚおよびｎは特許請求の範囲第１項において定
   義した通りであり、Ｒ＾２はＲと同一であるかあるいは
   保護された形の基Ｒであり、Ｒ＾０は水素またはアミン
   保護基であり、そしてＹ′はＹについて特許請求の範囲
   第１項において定義した式ａ）、ｂ）またはｃ）の基ま
   たは前記基の塩または部分的にもしくは完全に保護され
   た形の前記基であり、式 I ａの化合物は少なくとも１
   つの保護基を含有する、 の化合物またはその塩またはエステルを部分的にあるい
   は完全に脱保護し、そして必要に応じて、そのようにし
   て生成した式 I の化合物をその塩またはエステルに転
   化し、あるいは式 I の化合物の塩またはエステルを式
   I の対応する遊離塩基または遊離酸に転化することを
   特徴とする特許請求の範囲第１項において定義した式（
   I ）の化合物またはその塩またはエステルを製造する
   方法。 １４、Ｒ＾０は基Ｒ＾１−ＣＯ・Ｏ−ＣＨ＿２−であり
   、そしてＲ＾１は直鎖状もしくは分枝鎖状のアルキル基
   、アリール基またはアラルキル基である特許請求の範囲
   第１３項記載の方法。 １５、脱保護を実施して１より多い保護基を除去し、脱
   保護を同時にあるいは順次に実施する特許請求の範囲第
   １３項または第１４項記載の方法。 １６、保護基Ｙ′はカルボキシル保護基である特許請求
   の範囲第１５項記載の方法。 １７、前記カルボキシル保護基または各カルボキシル保
   護基はエステル基であり、そして脱保護はおだやかなけ
   ん化により実施する特許請求の範囲第１６項記載の方法
   。 １８、式（II）の化合物および式（III）の化合物▲数
   式、化学式、表等があります▼III ▲数式、化学式、表等があります▼II 式中Ｒ＾０、Ｒ＾２、Ｘ、Ｚ、ｎおよびＹ′は式 I ａ
   の化合物について特許請求の範囲第１３項において定義
   したとおりであり、そしてＸ″は離脱基である をカップリングし、そして必要に応じてその後式 I ａ
   の得られる化合物をその塩またはエステルに転化するか
   、あるいは式 I ａの化合物の塩またはエステルを式 I
   ａの対応する遊離塩基または遊離酸に転化することを
   含む特許請求の範囲第１３項〜第１７項のいずれかに記
   載する方法。 １９、特許請求の範囲第２項〜第１０項のいずれかにお
   いて定義した化合物、または塩またはエステルを製造す
   る特許請求の範囲第１３項〜第１８項のいずれかに記載
   の方法。 ２０、治療学的に有効量の特許請求の範囲第１項〜第１
   ０項のいずれかにおいて定義した式（ I ）の化合物ま
   たは塩またはエステルと製薬学的に許容されうる担体ま
   たは希釈剤とからなることを特徴とする製薬学的組成物
   。 ２１、非経口的、経口的、局所的または直腸的投与に適
   した形態の特許請求の範囲第２０項記載の組成物。 ２２、無菌の注射可能な形態の特許請求の範囲第２１項
   記載の組成物。