JPS6078593A - 発酵法によるアデノシンの製造法 - Google Patents
発酵法によるアデノシンの製造法Info
- Publication number
- JPS6078593A JPS6078593A JP18531383A JP18531383A JPS6078593A JP S6078593 A JPS6078593 A JP S6078593A JP 18531383 A JP18531383 A JP 18531383A JP 18531383 A JP18531383 A JP 18531383A JP S6078593 A JPS6078593 A JP S6078593A
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- adenosine
- guanine
- fermentation
- culture
- azaadenine
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるアデノシンの製造法に関する。
従来、発酵法によるアデノシン生産に関しては、グアニ
ン要求株を用いる方法が知られている。
ン要求株を用いる方法が知られている。
本発明者らは更にアデノシンの生産性の高い菌株を得る
べく種々検討した結果、バチルス属に属し、グアニン要
求性を有し、８−アザアデニン、及び又は６−メチルア
ミノプリンに耐性を有スる変異株が極めて着信のアデノ
シンを生成することを見出した。この知見に基いて本発
明を完成した。
べく種々検討した結果、バチルス属に属し、グアニン要
求性を有し、８−アザアデニン、及び又は６−メチルア
ミノプリンに耐性を有スる変異株が極めて着信のアデノ
シンを生成することを見出した。この知見に基いて本発
明を完成した。
本発明において用いる微生物の採取は具体的には次のよ
うに行なった。まず、Ｂａｃｌｌｌｕｓ Ｓｕｂｔｌｌ
ｌｇの野生株を親株として通常の方法で変異処理を行々
い、菌株の生育にグニアンを要求する菌株を得た。この
菌株を親株として変異処理を行ない、各種薬剤耐性株を
採取した。その結果、８−アザアデニン及び父は６−メ
チルアミノブリン耐性ヲｌＷする菌株のなかに著量のア
デノシンを培養液中に蓄積する菌株が存在することを見
出した。上記手法によシ得られた微生物を具体的に例示
すれば以下の菌株がある。
うに行なった。まず、Ｂａｃｌｌｌｕｓ Ｓｕｂｔｌｌ
ｌｇの野生株を親株として通常の方法で変異処理を行々
い、菌株の生育にグニアンを要求する菌株を得た。この
菌株を親株として変異処理を行ない、各種薬剤耐性株を
採取した。その結果、８−アザアデニン及び父は６−メ
チルアミノブリン耐性ヲｌＷする菌株のなかに著量のア
デノシンを培養液中に蓄積する菌株が存在することを見
出した。上記手法によシ得られた微生物を具体的に例示
すれば以下の菌株がある。
バチルスズブチリスＡＪ １２０４８１ＲＭ Ｐ−７１
４７（グアニン要求、８−アザアデニン耐性〕 バチルスズブチリスＡＪ １２０４９ ＦＥＲＭＰ−７
１４８（グアニン要求、６−メチルアミラフ０リン耐性
）バチルスズブチリスＡＪ １２０５０ ＦＥＲＭ ｐ
−７ｉ４９（グアニン要求、８−アザアデニン耐性、６
−メチルアミノゾリン耐性） 本発明の変異株の各薬剤に対する耐性度を示す実験結果
を以下に示す。
４７（グアニン要求、８−アザアデニン耐性〕 バチルスズブチリスＡＪ １２０４９ ＦＥＲＭＰ−７
１４８（グアニン要求、６−メチルアミラフ０リン耐性
）バチルスズブチリスＡＪ １２０５０ ＦＥＲＭ ｐ
−７ｉ４９（グアニン要求、８−アザアデニン耐性、６
−メチルアミノゾリン耐性） 本発明の変異株の各薬剤に対する耐性度を示す実験結果
を以下に示す。
実験例
下記の基本培地に薬剤をそれぞれ第１表に示す濃度にな
るように添加した培地を調製し試験管に３ ｍｅづつ分
注し殺菌後、各菌株を接種し、３４℃２０時間振とり培
養を行った。
るように添加した培地を調製し試験管に３ ｍｅづつ分
注し殺菌後、各菌株を接種し、３４℃２０時間振とり培
養を行った。
基本培地
グルコース ２ １．Ｑｔ
塩塩化アンノン ０．５ Ｉ
リン酸第−カリ ｏ、１〃
硫酸マグネシユーム ０．０４＃
クエン酸ソーダ ０．０５＃
Ｌ−グルタミン酸 ０．１ １
グアニン ０．０１＃
ｐｅ 、Ｍｎ （各） ２ ｐｐｍ
ｐｉ（（ＫＯＨ） ７．０
第１表に試験結果を示す。数値は相対生育値である。な
お親株として用いたＢａｅｌｌｌｕｓ ５ｕｂｔｌｌｉ
ｓは薬剤存在下で生育が認められなかった。
お親株として用いたＢａｅｌｌｌｕｓ ５ｕｂｔｌｌｉ
ｓは薬剤存在下で生育が認められなかった。
第 １ 表
ＡＪ１２０４８１００ ５０ ５
ＡＪ１２０４９１００ ２０ ４０
ＡＪ１２０５０１００ ８０ ９０
（註）生育値は培養液の２０時間培養後の吸光度の増加
値について薬剤無添加の場合を１００とした相対生育度
で示した。
値について薬剤無添加の場合を１００とした相対生育度
で示した。
このような微生物を培養する培地は、炭素源。
窒素源、無機塩類、グアニンおよび必要ならば更にその
他の微量栄養素を含有する通常の液体培地である。炭素
源としては、グルコース、糖蜜、デンゾン加水分解液な
どの炭水化物、酢酸、１０ピオン酸、ピルビン酸、クエ
ン酸等の有機酸、エタノール、プロパツールナトのアル
コール類、サラに菌によっては炭化水素などを使用でき
る。窒素源としては硫安、硝安、塩安、リン安等のアン
モニューム塩、硝酸塩、尿素、アンモニアガス等の無機
能窒素もしくはカゼイン加水分解物、アミノ酸等の有機
態窒素等が使用できる。また、栄養要求物質としてのグ
アニンはグアニン、グアニン鉱酸塩、グアノシン、グア
ニル酸、リビ核酸等のいずれも使用可能である。また、
必要に応じてビタミン類、アミノ酸、核酸塩基などの微
量栄養素を添加すればアデノシンの蓄積量を増すことが
できる場合が多い。また本発明の微生物にアミノ酸等の
要求性を付与すれば更にアデノシンの収量が向上する場
合が多いが、その場合にはその要求物質を添加しなけれ
ばならない。
他の微量栄養素を含有する通常の液体培地である。炭素
源としては、グルコース、糖蜜、デンゾン加水分解液な
どの炭水化物、酢酸、１０ピオン酸、ピルビン酸、クエ
ン酸等の有機酸、エタノール、プロパツールナトのアル
コール類、サラに菌によっては炭化水素などを使用でき
る。窒素源としては硫安、硝安、塩安、リン安等のアン
モニューム塩、硝酸塩、尿素、アンモニアガス等の無機
能窒素もしくはカゼイン加水分解物、アミノ酸等の有機
態窒素等が使用できる。また、栄養要求物質としてのグ
アニンはグアニン、グアニン鉱酸塩、グアノシン、グア
ニル酸、リビ核酸等のいずれも使用可能である。また、
必要に応じてビタミン類、アミノ酸、核酸塩基などの微
量栄養素を添加すればアデノシンの蓄積量を増すことが
できる場合が多い。また本発明の微生物にアミノ酸等の
要求性を付与すれば更にアデノシンの収量が向上する場
合が多いが、その場合にはその要求物質を添加しなけれ
ばならない。
培養方法は好気的条件が良く、また、培養温度は２０な
いし４０℃の範囲がよい、８合によっては発酵途中にて
発酵温度を若干変更させてもよい。
いし４０℃の範囲がよい、８合によっては発酵途中にて
発酵温度を若干変更させてもよい。
培養開始時および培養中のｐｉ（を５．０ないし９．０
の範囲の最適値に調節して培養するのが望ましい。
の範囲の最適値に調節して培養するのが望ましい。
−の調整は無機酸、有機酸あるいはアルカリさらに尿素
、炭酸カルシューム、アンモニア水、アンモニアガスな
どを使用することができる。かくして２〜５日間培養す
れば著量のアデノシンが培地中に蓄積される。
、炭酸カルシューム、アンモニア水、アンモニアガスな
どを使用することができる。かくして２〜５日間培養す
れば著量のアデノシンが培地中に蓄積される。
発酵液よシアデノシンを採取するには、例えば菌体を分
離除去し、アニオン交換樹脂、カチオン交換樹脂等の樹
脂処理あるいは濃縮冷却晶析法の併用等によシアデノシ
ンを単離する。不純物を除くためには常法の活性炭吸着
法および再結法を用いて精製してもよい。
離除去し、アニオン交換樹脂、カチオン交換樹脂等の樹
脂処理あるいは濃縮冷却晶析法の併用等によシアデノシ
ンを単離する。不純物を除くためには常法の活性炭吸着
法および再結法を用いて精製してもよい。
実施例
第２表のシード培地５ＱｍＪを張υ込んだ５００Ｍ容フ
ラスコに第３表に示す菌株を１白金耳液種し、３４℃に
て１６時間培養した。
ラスコに第３表に示す菌株を１白金耳液種し、３４℃に
て１６時間培養した。
この培養液を、上記主発酵培地２０ｍ１張り込んだ５０
０ ｍ１４容フラスコにｌ ｍＡ添加し３４℃にて７２
時間培養した。この培養液中のアデノシンを液体クロマ
トグラフにて定量したところ第３表に示す量のアデノシ
ンが生成蓄積した。
０ ｍ１４容フラスコにｌ ｍＡ添加し３４℃にて７２
時間培養した。この培養液中のアデノシンを液体クロマ
トグラフにて定量したところ第３表に示す量のアデノシ
ンが生成蓄積した。
上記と同様の方法によって得たＡＪ １２０５０の培養
液１０１より菌体を遠心分離法で除いた後上清をエバポ
レーターにて２１まで濃縮した。この濃縮液を５℃に放
置してアデノシンの結晶を生成させた。得られたアデノ
シンの結晶を水に溶解し、更に活性炭に吸着せしめ常法
によシ溶出しアデノシン画分を採取し、濃縮冷却晶析す
ることにょシアデノシンの結晶７８ｇを得た。
液１０１より菌体を遠心分離法で除いた後上清をエバポ
レーターにて２１まで濃縮した。この濃縮液を５℃に放
置してアデノシンの結晶を生成させた。得られたアデノ
シンの結晶を水に溶解し、更に活性炭に吸着せしめ常法
によシ溶出しアデノシン画分を採取し、濃縮冷却晶析す
ることにょシアデノシンの結晶７８ｇを得た。
Claims (1)
- バチルス属に昂じ、生育のためにグアニンを要求し、８
−アザアデニン、及び又は６−メチルアミノプリンに耐
性を有し、アデノシンを生成蓄積する能力を有する変異
株を、液体培地中に培養し、生成蓄積したアデノシンを
採取することを特徴とする発酵法によるアデノシンの製
造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18531383A JPS6078593A (ja) | 1983-10-04 | 1983-10-04 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18531383A JPS6078593A (ja) | 1983-10-04 | 1983-10-04 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6078593A true JPS6078593A (ja) | 1985-05-04 |
| JPH0452118B2 JPH0452118B2 (ja) | 1992-08-20 |
Family
ID=16168659
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18531383A Granted JPS6078593A (ja) | 1983-10-04 | 1983-10-04 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6078593A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103146786A (zh) * | 2013-03-25 | 2013-06-12 | 天津科技大学 | 一种采用梯度pH顺序控制发酵生产腺苷的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4832348A (ja) * | 1971-08-28 | 1973-04-28 | ||
| JPS5714160A (en) * | 1980-06-27 | 1982-01-25 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Airconditioner |
-
1983
- 1983-10-04 JP JP18531383A patent/JPS6078593A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4832348A (ja) * | 1971-08-28 | 1973-04-28 | ||
| JPS5714160A (en) * | 1980-06-27 | 1982-01-25 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | Airconditioner |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103146786A (zh) * | 2013-03-25 | 2013-06-12 | 天津科技大学 | 一种采用梯度pH顺序控制发酵生产腺苷的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0452118B2 (ja) | 1992-08-20 |
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