JPS6067427A - 抗真菌剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 して含有することを特徴とする抗真菌剤、特にカー・ジ
〆（　Ｃａｎｄ　＋ｄａ　）症に対する薬剤に関するも
のである。

カンジダ症は、真菌の一種のカンジダ属、特にカンシタ
・アルビヵｙス（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）
によって起こされる疾病の総称であシ、粘膜、ひふ、消
化管等に炎症を起こす。これらの治療としては、マイコ
スタテンの内服や、アンホテリシンＢの注射などが行な
われる他、局所療法としてグンチアナ紫液、トリコマイ
シン軟膏などが用いられてきた。

本発明者らは、更に新たな抗真菌剤、特にカンディダ症
に対する有効な薬剤について鋭意開発研究を行った結果
、ストレプトミセス属に属する一菌株の培養物よシ分離
・採取された新規な抗生物質３７ｇＯ物質（以下単に「
３７ｇθ物質」と称する。）が、低毒性で優れた抗カン
ジダ活性を有することを見出し、該物質が、カンジダ症
治療に対して有効であることの知見を得て本発明を完成
したものである。

本発明の有効成分でおる３７ｇｏ物質について以下に説
明する。

本発明の有効成分を産生ずる微生物は、３７ｇＯ物質の
住産能を有するストレプトミセス属に属する菌種である
。その一例としてストレプトミセス・エスピ−・１６　
３　７　ｇ　Ｏ　（　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ
．　４３７ｇＯ）と称される微生物が前記の特性を有す
る新菌株であって、３７ｇθ物質を有利に生産するもの
である。

また、前記ストレプトミセス・エスピー・扁３７ｇｏの
自然的及び人工的変異株は勿論、ストレプトミセス属に
属する菌種で、後述の新抗生物質３７に０物質の生産能
を有する微生物はすべて使用することができる。

前記ストレプトミセス・エスピー・４３７ｇ０（以下、
単に「３７ｇｏ株丁という。）は、本発明者らＶてよっ
て富山県射水郡大門町で採取した土壌試料中よシ発見さ
れた微生物であり、工業技術院微生物工業技術研究所の
微生物受託番号は、微工研菌寄第７／７１号である。

３７ｇθ株は次の蘭学的性質を有する。

［１）　形態的特徴 ３７ｇθ株は、ストレグトミセス属に属し、スターチ無
機寒天培地、チロシン寒天培地、イースト麦芽寒天培地
、オートミール寒天培地上で良く生育し、豊富な気中菌
糸と螺旋状菌糸に多数の胞子を着生する。シュークロー
ス硝酸塩寒天培地及びグリセリン・アスパラギン寒天培
地上での発育は充分でなく、気中菌糸の着生も悪いが、
螺旋状菌糸と胞子の着生はみられる。しかし、グルコー
ス・アスパラギン寒天培地と栄養寒天培地での生育は不
良で、気中菌糸を生成せず、胞子の形成は認められない
。オートミール寒天培地、イースト麦芽寒天培地、スタ
ーチ無機塩寒天培地では、気中菌糸が豊富に着生したも
のの気中菌糸は白色女いし赤灰色を呈する。−基底菌糸
の裏面は、一般に淡黄色ないし淡黄褐色である。気中菌
糸は直線状だが、胞子を着生する先端は、７〜ｌＯ回螺
旋状になっておシ、電子顕微鏡の所見では、胞子は円筒
型で、長さ０７〜７μ、巾θｌ〜θＳμでおシ、とげ状
を有し、数十個が螺旋状に連らなっている。

チロシン寒天培地、ペプトン・イースト鉄寒天培地に生
育した本菌は、メラノイド色素を形成しない。炭素源の
資化性試験では、Ｌ−７２ビノース、Ｄ−キシロース、
Ｄ−グルコース、Ｄ−７ラクトース、シュークロース、
Ｌ−イノシトール、ラフィノース、Ｄ−マンニトール上
ではよく生育するが、Ｌ−ラムノース上では生育しない
。スターチ無機塩寒天培地上で、スターチを加水分解す
るが、ゼラチンは液化せず、脱脂乳は、わずかに凝固す
るが、ペプトン化はしない。

〔■〕各種培地上での生育状態 特許庁産業別審査基準に従い、各種培地を調製し、接柚
後３週間を経過したものについて観察した結果を次に記
載する。なお色調の記載においてカッコ内の記号はディ
スクリブチイブ・カラー・ネイムズ・ディクショナリー
（Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｖｅ　ＣｏｌｏｒＮａｍｅｓ　ｄ
ｉｃｔｉｏｎａｒｙ）第７版の色名記号に従ったもので
ある。

（１）　シュークロース・硝酸塩寒天培地化　育：やヤ
不良（５ 気中菌糸の着生：殆ん（どなし 気中菌糸の色　：　、２’ｌ／／；ｌ　ｂａ（ｃｈａｒ
ｔｒｅｕｓｅ　ｔｉｎｔ）基底菌糸の色　：　／／／２
ｈｂ（ｐａｓｔｅｌ　ｙｅｌｌｏｗ）可溶性色素　：な
し くｊ　グルコース・アスパラギン寒天培地化　育：不良 気中菌糸の着生：なし 気中菌糸の色　：不明 基底菌糸の色　：　／／／、２　ｈｂ（ｐａｓｔｅｌ　
ｙｅｌｌｏｗ）可溶性色素　：なし ■　グリセロール・アスパラギン寒天培地化　育：やや
不良 気中菌糸の着生：殆んどなし 気中菌糸の色　：不明 基底菌糸の色　：　、２ｄｂ＋、２ｇｃ（ｉｖｏｒｙ−
１−ｃｉｔｒｏｎ）可溶性色素　：なし ←）スターチ無機塩寒天培地 生　育　：良好 気中菌糸の着生　：豊富 気中菌糸の色　：　ａ−１−４ｅａ（ｗｈｌｔｅ＋−１
１ｇｈｔ　ａｐｒｉｃｏｔ）基底菌糸の色　：　３ｃａ
＋、２ｇｃ（ｓｈｅｌｌ＋ｒｏｓｅｂｅｉｇｅ）可溶性
色素　：　なし くト）チロシン寒天培地 生　育：良好 気中菌糸の着生；豊富 気中菌糸の色　：　ａ＋Ｊｃａ（ｗｈｌｔｅ＋５ｈｅｌ
ｌ）基底菌糸の色　／　／／２ｆｂ＋３１ｅ（ｐａｓｔ
ｅｌ　ｙｅｌ　ｌｏＮ＋ｃａｍｅｌ　）可溶性色素　：
なし ら）　栄養寒天培地 生　育：不良 気中菌糸の着生　：なし 気中菌糸の色　：不明 基底菌糸の色　：　３ｃａ（ｓｈｅｌ　ｌ）ｃｊｆｍ性
色索　：なし く７）イースト麦芽寒天培地 生　育　：良好 気中菌糸の着生　：豊富 気中菌糸の色　：　＆−１−／／２ｆｂ−Ｈ’ｃａ（ｗ
ｈｌｔｅ＋ｐａｓｔｅｌｙｅｌｌｏｗ＋５ｈｅｌｌ　ｐ
ｉｎｋ）基底−糸の色　：　Ｊｎｃ＋３ｐｃ（ｂｒ（ｔ
ｅ　ｇｏｌｃｌ＋ａｍｂｅｒ）可溶性色素　：なし くＩ８′）　オートミール寒天培地 化　育：良好 気中菌糸の着生　：豊富 気中白糸の色　：　ａ＋５ｅｃ　（ｗｈ　ｉ　ｔｅ＋ｄ
ｕｓ　ｔｙ　ｐｅａｃｈ　）基底菌糸の色　：　／／／
２ｆｂ＋Ｊｅｃ（ｐａｓｔｅｌ　ｙｅｌｌｏｗ十ｌ　Ｉ
ｇｈｔ　ｒｏｓｅ　ｂｅｉｇｅ）可溶性色素　：なし く７）　ペグトン・イースト鉄寒天培地生　育　：やや
不良 気中菌糸の着生　：なし 気中菌糸の色　：不明 基底菌糸の色　：　／／／２ｆｂ（ｐａｓｔｅｌ　ｙｅ
ｌｌｏｗ）可溶性色素　：なし ｌ〕炭素源の資化性（ノリトノ・ム・ゴツトリープ寒天
培地） 発育状況 ／　Ｌ−アラビノース　＋＋＋ ２　Ｄ−キシロース　＋十＋ 、３　Ｄ−グルコース　＋十＋ グ　Ｄ−７ラクトース　＋十十 Ｓ　シュークロース　＋＋＋ ６１−イノシトール　＋＋＋ ７　Ｌ−ラムノース　− ざ　ラフィノース　＋＋＋ ９　Ｄ−マンニット　＋＋＋ ／θ　コントロール　− （発育状況二十士士非常によく発育する、＋十良く発育
する、十発育する、 ±稍々発育する、−発育し々い。） 叡〕その他の生理的性質 ／　生育温度範囲： 至適生育’ｔｈｕｉｔｉ、ｓ〜３θ℃ ス、　ゼラチンのｉ化（グルコース・ペグトンゼラチン
培地上）： 液化しない。

３、　スターチの加水分解（スターチ寒天培地上）：加
水分解する。

侶　脱脂牛乳の凝固ペグトン化： わずかに凝固するが、ペグトン化しない。

左　メラニン様色素の生成（チロシン寒天培地及びペゾ
トンイースト鉄寒天培地）： 色素の生成は認められない。

上記の諸性質を有するストレプトミセス属の菌種を野々
村氏によるジャーナル・オプ・ファーメンティジョン・
テクノロジー、３２巻−号記載の放線菌１．　Ｓ、　Ｐ
、４’　５　ｇ菌種の分類法の記載（キイ・フォア・ク
ラシイフイケイション中アンド・アイデンテイフイケイ
ション・オグ・７５ｇスペシーズ・オグ・デ・ストレプ
トミセス・インクルーデッド９・イン・１．ｓ、Ｐ、）
　（Ｋｅｙ　ｆｏｒ　Ｃ１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａ
ｎｄ　１ｄｅｎｔ目１ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＩＩ！；ｇ
　５ｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　５ｔｒｅｐｔ　−ｏｍｙｃｅ
ｓ　１ｎｃｌｕｄｅｄ　ｉｎ　１．　Ｓ、　Ｐ、　）に
よシ検索した。

その結果、気中菌糸が白色系ないし灰色系でメラニン様
色素と可溶性色素を生成せず、Ｌ−２ムノース以外の糖
を資化し、気中菌糸が螺旋状となシ、胞子にとげ状物を
有するものとして、ストレプトミセス・マラチティカス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｍａｌａｃｈｌ　−ｔｉ
ｃｕｓ八ストレへトミセス・スバルソダネス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐａｒｓｏｇｅｎｅｓ　）　、ス
トレプトミセス・パリアビリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ　ｖａｌ　Ｉａｂｌｌｌｓ　）、ストレプトミセス
・ビリ；−−シアスタテイカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ　ｖｉｒｉｄｏｄｌａｓｔａｔｉｃｕｓ）、ストレ
プトミセスーウエラエンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ　ｗｅｒｒａ−ｅｎｓｌｓ）等を挙げることができ、
３７ｇｏ抹け、これらの菌種と類似するが、糖料用の点
で必ずしも一致せず、ま、た抗生物質の生産能において
明らかに相違が認められるため、３７ｇ０株は、ストレ
プトミセス属に属する新菌種とすることが妥当であると
結論された。

次に、本発明の有効成分を得るに当っては、ストレプト
ミセス属に属する抗生物質３７ｇｏ物質生ノ忙菌を、抗
生物質を生産する通常の方法で培養することができる。

培養の形態は、液体培養でも固体培養でもよく、工業的
に有ｆ＋＊に培養するためには、Ｆ＞ｉｌ記生産菌の胞
子懸濁液又は培養液を培地に扱稲し、通気攪拌培養を行
なえばよい。

培地の栄養源としては特に限定されることはなく、微生
物の培養に通常用いられる炭素源、窒素源その他を培地
中に含有させることができる。炭素源としては、澱粉、
デキストリン、グリセリン、グルコース、シュークロー
ス、ガラクトース、イノシトール、マンニトールなどが
、また窒素源としては、ペグトン、大豆粉、肉エキス、
米ぬか、皺、尿素、コーンステイープリカー、アンモニ
ウム塩、硝酸塩、その他の有機または無機の窒素化合物
が用いられる。その他、無機塩類、たとえば食塩、燐酸
塩類、カリウム、カルシウム、亜鉛、マンガン、鉄等の
金属塩類等を適宜に添加してもよく、必要に応じて消泡
剤として、動１、植、鉱物油等を６５加してもよい。培
養温度、培養時間等の培養栄件ｅ、を使用菌の発育に適
し、しかも３７ｇ０物質の生産が最高となるよう表条件
が選ばれる。

たとえば、培地のｐＨに１Ｉ−９、特に中性付近がよく
、培養の適温Ｖｉ、２　、！ｔ−０−３！；　’Ｃ程度
がよい。しかし、これらの培養組成物、培地の水素イオ
ン濃度、培養温度、攪拌条件などの培養条件は使用する
菌株の＄Ｍ類や、外部の条件などに応じて好ましい結果
が得られるよう忙適宜調節されるべきであることはいう
までもない。このようにして得られる培養物から、３７
ｇｏ物質を得るには代謝産物を採取するのに通常用いら
れる手段を適宜に利用して採取し得る。たとえば、３７
ｇｏ物質と不純物との浴解度差を利用する手段、イオン
結合力の差を利用する手段、吸着親和力の差を利用する
手段、分子量の差を利用する手段、有機溶剤と水との分
配の差を利用する手段のいずれも、それぞれ単独で、ま
たは組合わせて、あるいは反復して使用される。

具体的には、３７ざθ物質は、培養ｆ液にその大部分が
存在するが、そのイオン結合力の性質を利用してイオン
交換樹脂、例えばダウエックスＳθ、ダウエックス／、
アンノ９−ライトｒＲ−４ｓ等で吸賠し、布アンモニア
水で溶出することができる。培養菌体中には約／／／ｂ
以下の３７ｇｏ物質が存在するが、これＶｉ菌体をアン
モニア性の含水アセトン又は含水メタノールで抽出し、
抽出液を減圧濃縮して得られた水溶液を、培養ｒ液の場
合と同様にイオン交換樹脂に吸着し、希アンモニア水で
溶出することによシ分離することができる。

浴出液を減圧下に濃縮すると３７ｇ０物質が沈澱する。

沈＃をＰ取し、冷水で洗滌後乾燥すると３７ｇｏ物質の
粗粉末が得られる。このようにして得た３７ｇ０物質の
粗粉末は夾雑する不純物を除く目的で、セファデックス
Ｇ−１０等を用いたグルｆ過法で精製することができる
。用いる醪媒系により不純物との分離状態が異なシ、溶
媒系の組合せで単一な３７ｇｏ物質を得ることができる
。

例えば、重炭酸アンモニウム水溶液で調製したセファデ
ックスＧ−１０のカラムを用い、先ず、正炭ｒ疫アンモ
ニウム水溶液で溶出し、次いで水で溶出する。活性区分
を集め、減圧濃縮し、凍結乾燥すると３７ｇ０物質の微
褐色の精製粉末を得ること麻できる。なお、溶媒として
重炭酸アンモニウム水溶液を使用した場合には３７ｇ０
ｑＩ／Ｊ＊はアンモニウム塩となるが、これを酢酸酸性
で沈澱させ、水で洗浄することにょシ完全に遊離状態の
３７ｇθ物質を得ることができる。

かくして得られた３’１ｇＯ物質の理化学的性質は次の
とおりである。

〔抗生物質３７ｇθ物質の理化学的性質〕（１）元素分
析； 炭素＝３左ｓｏ％、水素：　３．　／　、！−チ、窒素
二ダ１ｇ／チ ＠分子針（質量分析による）： ／乙り ■融点： ３５０℃以上 的比旋光度： 〔α〕Ｄ　θ０（Ｃ＝θ５、ｌＮ−Ｎａ０Ｈ）（，１）
紫外線吸収スペクトル： ｊｍａ’ｘ　ｎｍ　（Ｅ　”　”　） ＣＩｎ ７００ｍＭリン酸緩衝液ｐｌ’Ｚｏ中：、２３’ｌ（／
／／ダ）１．２９θ（３弘５） θ　／　Ｎ　ト１α　中　：　２！；２　（、！！−７
，２）、２７６肩＜３７’ｌ） θ／　Ｎ　ＮａＯＨ中　：２３０肩（／　００３　）１
．２Ｓ６肩（３／コ） ２ｇ乙（８３＞ （Ａ）赤外線吸収スペクトル：（にＢ「錠剤中）次の主
な極大値を有する。

３３５θ、３／３θ、２ｑ２θ、／７０３．＃乙θ、／
Ｓ！；０．　／グｇＯ，／、３９．２、／、３１．！；
、　／３グＳ１／ム４、／コ１０．　／／’１２、／／
、２２、／θ９θ、／θ３Ｓ％ｇＡ７、ｇ４’ｇ、　７
’／θ、７／ユ、６３コ、ｓｇθ、３３３，３０ｇ、ｌ
１２０ｃｍ−’（η浴解性： 希アンモニア、濃塩酸に溶ける。

水に難治。他の有機溶媒に不溶。

σ）呈色反応： ヨード蒸気、過マンガン酸カリ反応は陽性、ニンヒドリ
ン、アニリン水素フタレート反応は陰性である。

（９）塩基性、酸性、中性の区別： 酸性物質（本項の性質は遊離酸について示しておる。） （１０）物質の形態： 微褐色結晶性粉末。

（／／）　Ｒｆ値＝（薄層クロマトグラフィー）ブタノ
ール：酢酸：水（４ｔ：／：、２）　θ３０エタノール
二／Ｎアンモニア（！；：３）　θ７２ブタノール：メ
タノール：水（侘／：、２）　０２１゜７５チフエノー
ル　θ３／ グロパノール：／Ｎアンモニア（５：、？）　θ５．２
、セルロース（メルク社製セルロースＦ）溶媒系　Ｒｆ
値 エタノール：ｌＮアンモニア（５＋　３　）　θｌＩコ
グタノール：エタノール：水（４ｔ：／：コ）　θ２４
ｔ７Ｓチフェノール　θ４′ｓ プロノリール：／Ｎアンモニア（、！−：３）　０３０
アセトン：水（／：／）　θｔ３ Ｃ３’／ｇＯ物質の製造例〕 グルコース２．５％、大豆粉θ３％、乾燥酵母０３％、
硝ｔｍアンモニウムθグチ、炭酸カルシウム０３％、ｊ
Ｉｉ１′塙θ３％（滅菌前ｐｉｔ　２２）の組成からな
る培地ｇ　ｍｅに、前記３７にθ株（微工研菌寄ＩＡ７
／７／号）を接種して、ｑｇ待時間２ｇ℃で振盪培養す
る。この培養液／　ｍ７！を同組成の培地／θＱ　ｍｅ
　Ｋ接値し、ｌＩｇ時間、２ｇ″Ｃで振盪培養する。前
記培地にリン酸マグネシウムθＳ％を加えた培地（滅菌
前ｐＨム乙）Ｓｌを含むジャーファーメンタ−（アイラ
醗酵槓Ｍ−２θθ型；東京理化製）゛に前記培養液を接
種し、約２を時間、コｇ℃で通気攪拌培養を行う。培養
条件は毎分１．１の通気を行い、毎分３５０回転の攪拌
を行う。培養＃：、　（１Ｊｌｌム０）を冷却遠心機で
毎分９３００回転、７０分間遠心する。上清４！、７Ｉ
ｊをダウエックスｓｏｗ−Ｘコ（Ｈ型）のカラム（直径
＝６θ龍、長ｉ：３２０ｗｈｔｒ）にかける。カラムを
水洗後コ規定のアンモニア水３１で溶出する。溶出液を
減圧濃縮し、約３０θ−とし、希塩酸でｐｌｌをｓ〜乙
に調整する。これをアンバー２イトＩ”Ｒ−１５の力９
ム（Ｔ！径：４’４ｍｍ、長さ：ｌＩ００ｍ）Ｋかけ水
洗後、／規定のアンモニア水２１で浴出する。溶出液を
減圧濃縮し、約／Ｓゴとしたところで氷冷する。生じた
沈澱をｒ取し、冷水で洗滌後乾燥すると粉末２６２Ｓ〜
が得られる。これをｇ、、５−一の０１モル重炭酸アン
モニウム及び／−の濃アンモニア水に溶かし、０１モル
重炭酸アンモニウムで調製したセファデックスＧ−１０
のカラム（直径：２ｇ龍、長ざニアｇθｔｎｍ　）にか
ける。まず、０１モルの重炭酸アンモニウム（７ラクシ
ヨン扁／〜７θ）で展開溶出を行った後、蒸留水で展開
溶出を行い、溶出液を６１ずつの両分に分取する。

（フラクションＡ　７　／〜／２θ）。抗菌活性は７ラ
クシヨン扁７３〜９Ｓの一分に溶出される。これを合せ
て濃縮し、凍結乾燥して、３りざθ物質のアンモニウム
塩の粉末／　ｇ　３．７ηを得る。

得られたアンモニウム塩１１３ｍｇを／規定のアンモニ
ア水３　ｍｌ　Ｋ　Ｍかし、酢酸θ３−を滴下し、生じ
た沈澱をＰ取し、水、エタノール、エーテルの順で洗浄
後乾燥すると、３７ｇｏ物質の遊離酸３９．２　ｍ９を
得る。

次に、本発明の抗真菌剤について述べる。

本発明の抗真菌剤を患部に適用するＫは、３７ｇ０物質
を粉剤、あるいは適当な溶媒に溶解あるいは分散した液
、あるいはこれを適宜軟膏基剤等と混合した軟膏やクリ
ーム等の形にして患部に噴霧、撒布浸漬、塗布等により
接触せしめる。

３７ｇθ物質は、前記の如く水あるいは有機溶剤に対し
難溶又は不溶であるので、軟膏又はクリーム等の形態で
用いるのが適当である。

軟膏基剤としては、脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン
、グリセリン、ロウ、樹脂、硬コウ剤、高級アルコール
、グリコール類又はこれらの混合９勿が用いられる。

本発明の抗Ａ：菌剤の有効成分の含有量は、上記軟膏剤
の場合θ／〜３０重量係１重量ましくはθ／〜１０ｉｌ
ｉ！％、最も好ましくはθ／〜Ｓ重量ヂである。

次に、本発明の有効成分の毒性について述べる。

〔急性毒性試験〕

３７ｇ０物質をθＳ％ＣＭＣ生理食塩水に！濁して、ｄ
ｄｙ雄マウマウス重平均２３ｇ）の腹腔内に投与し、／
週間における死亡の有無を観察してＬＤ５ｏ値をリッチ
フィールドーウィルコックンン（Ｌｉｔｃｈｆｌｅｌｄ
＝Ｗｉｌｃｏｘｏｎ）法によシ算出した。なお、／＃６
匹のマウスを用いた。この結果、３７ｇθ物質のＬＤ５
ｏ値は、ｋ、３ｍ９／に９である。

次に、本発明を実施例及び試験例によって説明する。

実施例１（粉剤） ３７ｇθ物質３０部にタル２７０部を加えよく混合して
粉剤とする。

実施例λ、（軟膏） ３７ｇｏ物質コ部、サリチル酸２部、ブラント４フ６２
部、水２部部、エタノール−０部、マクロゴール軟膏５
２ｇ部よ如なる軟膏組成物。

実施例、２（軟膏） ３７ｇＯ物質３部、サリチル酸コ部、サリチル酸メチル
０５部、酸化亜鉛Ｓ部、白色ワセリンｇγＳ部よシなる
軟膏組成物。

試験例（抗菌力試験） 検定菌 Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　（略号Ｃａｎ　Ａ
　）カンジダ菌Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　Ｎ
ＨＬ　４ｔθ／り（ＣａｎＡ　ＮＨＬＩＩθ／ｑ）Ｔｒ
ｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ
　（略号Ｔｍ）石膏様白癖菌 Ｔｒｉｃｈｏｐｌｌｙｔｏｎ　ｒｕｂｒｕｍ　（略号Ｔ
ｒ）　狸紅色白癖菌まず検体を約ダｍｙＮ秤し、θ／　
Ｎ　ＮａＯＨｋＣ溶解して１０θＯμｌ／ｍｌとする。

これを順次コ倍希釈シテ、Ｓθ０１．２．５−θ、／：
ｌ！；、Ａ３．３／、／６、ざ、夕、λμガ礫度の検液
をつくる。希釈の溶媒として水を用いる。

次に各濃にの検液／Ｓ−と５０℃に保飄したサブロー寒
天培地／　３．３　ｍｌをメキサーで充分に混和後、シ
ャーレにまいて検体を／θθ、！；ＯＳ２！；。

／　、２．３−、ム３．３／、／６．０ｇ、θダ、θλ
μ９／ｍｌ　ａ　ｍで含有する寒天平板をつくる。

コントロールとしてθ／　Ｎ　ＮａＯＨｉ　！；−とサ
グロー寒天培地／３．Ｓゴを混和した寒天平板をつくる
。

接種菌液の調製法 サブロー寒天Ｒ面培地で、２７℃−日（ＣａｎＡ、Ｃａ
ｎＡ　ＮＨＬ’ｌＯ／９　）又は、２７℃、７日（Ｔｍ
、Ｔｒ）培養した菌を滅菌生理食塩水に懸濁し、１０　
ＣＦＵ（Ｃｏ１ｏｎｙ　Ｆｏｒｍｉｎｇ　Ｕｎｉｔ　）
／−のオーダーに調製する。

検定法 ３７ｇｏ物質を各種濃度含有する寒天平板及びコントロ
ールの寒天平板に１接種菌液を直径コ關前後の白金耳で
／白金耳量ずつ各λ回スデットし１．２７℃で培養する
。

ＣａｎＡ　Ｓ、ＣａｎＡ　ＮＨＬＩＩＯ／ｑの場合は２
日培養後、Ｔｍ。

Ｔ「の場合は７日培養後、コントロールの寒天平板の検
定菌の発育を指標とし、菌の発育が阻止された最小間層
を最小発育阻止濃度１牲１ｎｉｍｕｍ　１ｎｈｌｂｌ　
−ｔｏｒｙ　Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　：　ＭＩＣ
）とする。

この結果を第１表に示す。

紀　／　表 この結果、３７ｇｏ物質はトリコフイ］・ンに対しては
、１０θμｙ〆〃ｇ以上であったが、カンジダ・アルビ
カンスに対してはＭＩＣ，？、／〜ム３μｇ／ｍｌと強
い抗菌力を示すことがわかった。

このように３７ｇθ物質は、カンジダ菌に対して特異的
な抗菌活性を有することが示され、抗真菌剤、特に抗カ
ンジダ剤として有効であることが分った。

特許出願人　理化学研究所 同　上　株式会社池田模範堂 手続補正書 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示　昭和５８年特許願第１７７６３０号２
発明の名称　抗　真　閑　剤 ３、補正をする者 事件との関係　出願人 名称　（６７９）理化学研究所 ４、代理人 ６、補正の対象　明細書の発明の詳細な説明の欄明細山
を次のとおり３］正する。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 抗生物質３７ｇｏ物質を有効成分として含有することを
   特徴とする抗真菌剤。