JPS6058927A - 放射能標識血小板製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、血栓の検出を目的とする核医学診断に有用な
放射能標識血小板製剤に関するものであり、更に、該放
射能標識血小板製剤を調製するに有用な放射性ヨウ素標
識化合物並びにこれを用いた該放射能標識血小板の標識
法に関するものである。

従来この目的に適した放射性診断剤として、放射能標識
フィブリノーゲンが試みられてきたが。

動脈系血栓の診断には適していないことが指摘されてい
るところである。一方、動脈系血栓の診断剤として優れ
た性質を有する放射能標識血小板の調製法が検討され、
インジウム−１１１（”’　Ｉｎ）オキシン法がかなり
の成功を収めたが９次のような欠点を有する事から汎用
されるに至っていない。

（１）血りｎの不存在下に標識を行わなければならない
ために放射能標識血小板の生理活性が大幅に損なわれる
こと。

（２）オキシンそのものの化学毒性が強く、これを無視
できないこと。

（３）調製の際、／８解度の関係から有機溶媒を用いな
ければならず、これの完全除去が困難であり毒性上の問
題があるごと。

（４）比較的長半減期核種（半減期２．８１日）である
インジウム−１１１を用いるため、患者の被曝を無視し
得ないこと。

本発明者らはこれらの欠点を有しない全く新しい手法に
よる放射能標識血小板調製法を見出した。

以下この新しい放射能標識血小板調製法について詳しく
説明する。本発明者らはメタラミノール（α−（１−ア
ミノエチル）−３−ヒドロキシベンゼンメタノール）の
持つ七ロ１−ニンレセプクー指向性（または集積性）に
着目し、このメタラミノールの放射性ヨウ素標識体を調
製、血小板と各種の条件下に接触させて血小板の放射能
標識化を試みた。その結果、極めて簡便な条件下に短時
間で目的とする放射能標識血小板を調製し得ることを見
出し、更にその放射能標識血小板の生理学的性質を検索
して、その生理活性が殆ど損なわれていない事を確認す
るに至った。更に１本法によって作られた放射能標識血
小板製剤を人工的に血栓を形成させた動物に投与し、そ
の体内挙動を追跡して、血栓への高い集積率、速い血中
クリアランス、他臓器への特異的集積のない事等を確認
し。

本放射能標識血小板製剤が核医学的血栓診断に極めて有
効であることを確信するに至った。更に有利な事には拳
法で用いられるメタラミノールそのものは本来血圧上昇
剤として市販され常用されているものであって、毒性に
関してはすでにデータがあり、確認されていることがあ
げられる。事実実施例で詳しく説明するように、放射性
ヨウ素−１２５標識メタラミノール製剤を用いて標識し
た放射性ヨウ素−１２５標識血小板製剤の安全性が証明
された。放射性ヨウ素標識メタラミノールは。

メタラミノールを出発物質として通常有機化合物のヨウ
素化標識に用いられる方法（例えば、クロラミン１′法
）により放射性ヨウ素と接触させることにより高率に得
る事が出来る。

次いで、　０．２２μのメンブレンフィルターを通して
除菌し、目的とする放射性ヨウ素標識メタラミノール製
剤を得た。放射性ヨウ素標識血小板製剤の調製法につい
て簡単に箇条的に記述すると次の様であり、非常に簡便
である。

（１）採取血に抗凝固剤を加え遠心分離により赤血球、
および白血球を除去する。

（２）　これに適当量の放射性ヨウ素標識メタラミノー
ル製剤を加えインキュベートする。

（３）　インキュベート後、再び遠心分離して、放射能
標識された血小板成分のみを無菌的に取り出す。

（４）次いで、医薬として通常許容される適当な溶液を
加え放射性ヨウ素標識血小板製剤を得る。

本発明における放射能標識血小板の調製に有用な放射性
ヨウ素標識メタラミノール製剤の製品形態は１通富、水
溶液の形で供される。しかし、これに限らず本発明の実
施を、妨げないものであれば他の形態を取り得ることは
言うまでもない。その際、放射線分解を防止するための
安定化剤、塩化ナトリウムの如き等張化剤、ヘンシルア
ルコールの如き保存剤、さらにはｐＨ＃Ｊ！Ｊ整のため
の酸、塩基等を該水溶液に添加することは１本発明の用
途を何ら妨げるものではない。

本発明の実施の今一つの形態である放射能標識血小板製
剤は、前述した如く血小板と該放射性ヨウ素標識メタラ
ミノール製剤を接触させることにより得られる。この最
終製品である放射能標識血小板製剤においても、放射線
分解を防止するための安定化剤、塩化ナトリウムの如き
等張化剤、ヘンシルアルコールの如き保存剤、　ｐＨｉ
ｌｌ整のための酸、塩基等の添加は１本発明の用途を何
ら妨げるものではない。

本発明に係わる放射性ヨウ素は、すべての放射性ヨウ素
を意味するが、核医学診断に汎用されているヨウ素−１
２５（１２’Ｉ）、ヨウ素−１３１（Ｉｌｌ　■）及び
ヨウ素−１２３（”Ｉ）が好適である。

しかし２本発明の実施において、核医学診断の被検者の
被曝線量の低減１診断像の質的向上等を考慮するときヨ
ウ素−１２３がより好ましい。

本発明の実施における放射性ヨウ素標識血小板製剤の投
与量（放射能）は任意であるが、目的とする核医学診断
を実施するに際して、充分な情報が得られるような放射
能であり、かつ、被検者の放射線被曝を可能な限り低く
するような放射能の範囲であることが望ましいのはいう
までもなく。

好ましくは、　０．０５乃至１０ｍＣ＋を投与するのが
一般的である。

また、投与方法については、一般に静脈内投与が行われ
るが、放射能標識血小板製剤の投与後。

その活性が発現されるのに有利な投与方法であればよく
、他の方法も実施し得る。

なお９本発明にあたっては、血栓診断剤としての例示に
よりおこなってきたが、血小板ならびに放射能標識血小
板の生理学的性質から判断すると。

水剤は単に血栓の診断薬として有用であるばかりでなく
、ガン、炎症等の検出を目的とした核医学診断にも同様
に有用であることは明らかであり。

当業者により容易に理解されるものである。

以下に実施例を示し１本発明を更に具体的に説明する。

実施例１　放射性ヨウ素−１２５標識メタラミノール製
剤の製造 ホウ酸緩衝液に溶解したメタラミノール（５×１０−６
モル／ｍ＋）を０．２ｍｌ　（Ｉ　Ｘ　１０−６モル）
取り。

それにヨウ素−１２５標識ヨウ化ナトリウムの０゜ＩＮ
水酸化ナトリウム溶液（１０ｍＣ＋、１００μｍ）を加
えよく混和後、更に０．３ｍｌのクロラミンＴ（２×１
０−６モル）を加え、室温で２０分間攪拌反応させた。

反応後、０．２ｍｌのナトリウムメタビスサルファイド
（２ｘｌＯ−６モル）を加えて反応を停止させた。

反応溶液を陰イオン交換樹脂カラム（１φ×３ｃｍ）に
添加し、　０．０ＩＮ塩酸で溶出することによりヨウ素
−１２５標識メクラミノールを得た。

標識収率：９３％ 純　度＝９９％以上 薄層クロマトグラフィー 保持層　：　シリカゲル 熔　媒　：　メタノール：酢酸−１００：’　ＩＲｆ＝
０．５　（遊離ヨウ素イオン、　Ｒｆ＝０．７５）次い
で１ｍＣ４／ｍｌの放射能濃度になるよう　０．０１Ｎ
塩酸溶液で容量を調整した後、　０．２２μのメンブレ
ンフィルターを通して除菌して、目的とする放射性ヨウ
素−１２５標識メタラミノール製剤を得た。

実施例２　ヨウ素−１２５標識メタラミノール製剤中の
ヨウ素−１２５標識メタラミノールの性質ヨウ素−１２
５標識メタラミノールが血小板中ノセロトニンレセプタ
ー指向性化合物であることを証明すべく一定条件下で各
種薬剤共存下での血小板への取り込み率の変化を調べた
。結果を表１に示す。

表１　各種薬剤によるヨウ素−１２５標識メクラミノー
ルの血小板への取込率の変化 ＊ヨウ素−１２５標識メタラミノールのみの場合の血小
板への取込率を１００％として換算。

ヨウ素−１２５標識メタラミノールはｌＸｌ０−’モル
濃度になるように添加。結果は３回の実験の平均値上標
準偏差。

本実施例の結果より、実施例１により製造したヨウ素−
１２５標識メタラミノール製剤中のヨウ素−１２５標識
メタラミノールが、極めて高いセロトニンレセプター指
向性化合物であることが示された。

実施例３　ヨウ素−１２５標識メタラミノール製剤を用
いたヨウ素−１２５標識血小板製剤の製造抗凝固剤を添
加した家兎血液１０ｍ１を１２０Ｏｒｐｍで１０分間遠
心分離し、血小板に富む血りｎ（以下ＰＰＰと略称）を
得た。これを１ｍｌ取り３７℃で１０分間インキュベー
トした後、実施例１で得たヨウ素−１２５標識メタラミ
ノール製剤（１ｍＣｉ）を加え。

３７℃、３０分間インキュベート反応させた。その後。

３４００ｒｐｍで７分間遠心分離することによりヨウ素
−１２５標識血小板を得た。

標識収率　：４４％ 上記で得たヨウ素−１２５標識血小板を抗凝固剤を含ん
だ生理食塩液に溶解し、　０．４ｍＣ４／ｍｌになるよ
う調整し、目的とするヨウ素−１２５標識血小板製剤を
得た。

以上の操作は全て無菌的に行った。

実施例４　ヨウ素−１２５標識血小板製剤の性質ヨウ素
−１２５標識血小板製剤凝集能を非標識血小板と比較検
討した。

実施例３により得たヨウ素−１２５標識血小板製剤及び
非標識血小板（本則と同溶媒系）を各々一定量（同量）
を取り、アデノシンニリン酸の異なる添加量のもとにお
ける光透過度（凝集率に対応）の変化を調べた。結果を
表２に示す。

表２　アデノシンニリン酸による凝集率の変化＊数字は
透過度の変化を％で示したものである。

数値は５〜８回の実験の平均信士標準偏差。

本実施例は実施例３により調製したヨウ素−１２５標識
血小板製剤が出発原料である非標識血小板と何らかわり
のない生理活性を有することを示している。

実施例５　ヨウ素−１２５標識血小板製剤の担血栓ウサ
ギ体内における挙動 家兎の大腿静脈部にホルマリン塗布法により。

血栓を形成せしめ、この家兎に実施例３の方法で製造さ
れたヨウ素−１２５標識血小板製剤の０．５ｍ＋　（０
，２ｍＣ４）を耳静脈より投与した。投与後３０分及び
１時間後に、一定量の血液を採取し、ただちに血栓部位
を取り出した。これら採取した血液及び血栓部位を試料
とし１両者の放射能をａ１測した。

両者の同一重量中に含まれる放射能を表３に示す。

表３　ウサギにおける血栓／血液比 ＊使用動物数は３〜４匹、数値は平均信士標準偏差。

本実施例の結果から１本則は血栓検出を目的とした核医
学診断に極めて有用なものであると考えられる。

実施例６　ヨウ素−１２３標識メタラミノール製剤及び
ヨウ素−１２３標識血小板製剤の製造実施例１の放射性
ヨウ素であるヨウ素−１２５のかわりにヨウ素−１２３
を用いる他は、実施例Ｉと同じ方法により目的とするヨ
ウ素−１２３標識メタラミノール製剤を得た。

更に、実施例３のヨウ素−１２５標識メタラミノール製
剤のかわりに前記で得たヨウ素−１２３標識メタラミノ
ール製剤を用いる他は、実施例３と同じ方法によりいま
一つの目的製剤であるヨウ素−１２３標識血小板製剤を
得た。

実施例７　ヨウ素−１２３標識メタラミノール製剤中の
ヨウ素−１２３標識メクラミノールの性質及びヨウ素−
１２３標識血小板製剤の性質実施例６で得たヨウ素−１
２３標識メタラミノール製剤及びコラ素−１２３標識血
小板製剤を実施例２及び４の方法により、それぞれの性
質を調べた。その結果、ヨウ素−１２３標識メタラミノ
ール製臀１中のヨウ素−１２３標識メタラミノールの性
質及びヨウ素−１２３標識血小板製剤の性質は実施例２
及び４の結果とほぼ同様の結果を得た。

すなわち、放射性ヨウ素標識メタラミノール及び放射性
ヨウ素標識血小板製剤の性質は、その放射性ヨウ素の種
類に何ら影響を受けないことが確認された。

実施例８　ヨウ素−１２３標識血小板製剤の担血栓ウサ
ギ体内における挙動 実施例６で得たヨウ素−１２３標識血小板製剤を実施例
５の方法により１担血栓ウサギ体内における挙動を調べ
た。その結果、実施例５とほぼ同様の結果が得られ１本
剤も血栓検出を目的とした核医学診断に極めて有用であ
ることが確認された。

実施例９　ヨウ素−１２５標識メタラミノール製剤の安
定性 実施例１で製造したヨウ素−１２５標識メタラミノール
製剤を常温（２４〜２７°Ｃ）で１ケ月間保存した後、
実施例１に示ず薄層クロマトグラフィー系で展開し、更
に実施例２の方法により七ロトニンレセプター指向性を
調べた。

いづれの場合も、製造直後のヨウ素−１２５標識メタラ
ミノール製剤について得られた結果と同様の結果が得ら
れ１Ｍ造面直後び１ケ月間保存後のヨウ素−１２５標識
メタラミノ一ル製剤間に何ら差異を認めなかった。

実施例１０　放射性ヨウ素標識血小板製剤の毒性放射性
ヨウ素標識血小板製剤の毒性については実施例５で行っ
た動物実験において、けいれん。

ショック症状及び各臓器の変色等の副作用発現は全くみ
られなかった。また、ヨウ素−１２５標識血小板製剤を
実施例５の３倍量を体重的２Ｋｇのウサギ３匹に静脈内
投与した場合でも、少なくとも１ケ月間は全く異常は認
められず１本則の安全性が確認された。

以上の実施例を示して本発明を説明してきたが。

当業者は、これらの実施例が９本発明を例示するために
意図されたものであり、その範囲をなんら制限するもの
ではないことを理解すべきである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１核医学診断に適した放射能標識血小板製剤の調製
   に有用な放射性ヨウ素標識メタラミノール製剤。 （２）放射性ヨウ素標識メタラミノールを用いて標識す
   ることを特徴とする放射性ヨウ素標識血小板製剤。 （３）放射性ヨウ素標識メタラミノールを用いて血小板
   を標識する方法。 （４）放射性ヨウ素標識メタラミノールを用いて標識し
   た放射性ヨウ素標識血小板製剤を投与し、核医学的手法
   により疾患部位を検出する方法。