JPS604941B2 - ラテツクス凝集反応用試薬 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ラテックス凝集反応用試薬に関する。

近年、免疫学的な手法を用いた臨床検査診断法は、特異
的でしかも高感度であるため繁用されるようになった。

とりわけ抗原もしくは抗体で感作したラテックスの凝集
反応を利用する測定法は簡便であり、しかも非常に短時
間で測定結果を得ることができるという利点を有する。
しかしながら尿、血清あるいは血酸などの体液中の免疫
学的活性物質の測定に際して、従来のラテックス診断剤
は非特異的な凝集反応を生じ易く、このためいよいよ臨
床診断を謀まらせることがあった。本発明者らは上記し
た欠点を克服すべく鋭意研究した結果、一般式〔式中、
ＲＩは水素原子、低級アルキル基または低級ァルキル基
により薄換されていてもよいァミ／基を示し、Ｒ２およ
びＲ３はそれぞれ水素原子または低級アルキル基を示す
〕で表わされる化合物およびジ低級アルキルスルホキシ
ドの１種または２種以上の存在下にラテックス凝集反応
を行なうことにより、上記した非特異凝集反応を防止で
きるという意外な知見を得、さらに研究を進めて本発明
を完成するに至った。

すなわち、本発明は、上記−般式（１）で表わされる化
合物およびジ低級アルキルスルホキシドの１種または２
種以上を配合してなるラテツクス凝集反応用試薬である
。

前記一般式（１）に関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３としての低
級アルキル基は、炭素数２以下のものが好ましく、とり
わけメチル基が有利である。

ＲＩとしてのアミノ基は１もしくは２個の低級アルキル
基により置換されていてもよく、この低級ァルキル基は
炭素数２以下のものとりわけメチル基が好ましい。ジ低
級アルキルスルホキシドにおける低級アルキル基として
は、炭素数２以下のものとりわけメチル基が好都合であ
る。化合物（１）およびジ低級ァルキルスルホキシドの
代表例としては、たとえば尿素、Ｎ−メチル尿素、Ｎ・
Ｎ′−ジメチル尿素、Ｎ−メチルホルムアミド、Ｎ・Ｎ
−ジメチルホルムアミド、Ｎ・Ｎ−ジエチルホルムアミ
ド、Ｎーメチルアセタミド、Ｎ・Ｎ−ジメチルアセタミ
ド、Ｎ・Ｎ−ジエチルアセタミド、ジメチルスルホキシ
ド、ジエチルスルホキシドなどが挙げられる。これらの
化合物は、その１種を用いてもよく、２種以上を併用し
てもよい。とりわけ、尿素とＮ・Ｎ−ジメチルホルムア
ミドとを組み合せて使用するのが最も有利である。本発
明においては、上記した化合物の１種または２種以上（
以下、本化合物と略称する）の存在下にラテックス凝集
反応を行なうことにより、非特異凝集反応を防止するこ
とができ、ラテックス凝集反応の偽陽Ｉ性を減少させて
信頼度を顕著に向上させることができる。

本化合物は、被検液混合後の凝集反応系における濃度と
して、約１〜１３％（以下、パーセントは、重量／容量
パーセントである）、とりわけ約２〜７％程度、ラテッ
クス凝集反応系に存在させるのがよい。本発明は、対応
する抗原もしくは抗体で感作したラテックス粒子との凝
集を利用して０甫乳動物とりわけヒトの体液（尿、血清
、皿糠など）中の免疫学的活性物質を検出する反応のい
ずれにおいても適用することができる。

かかる免疫学的活性物質の代表例としては、血清蛋白た
とえばヒトィムノグロブリンＧ、ヒトイムノグロブリン
Ｍ、ヒトイムノグロプリンＡ、ヒトアルブミン、ヒトフ
イブリノーゲン（フィブリンおよびそれらの分解産物）
、Ｑ−フェトプロティン、Ｃ反応性蛋白、３２ーミクロ
グロブリン、ミオグロビンなど；ホルモン類たとえばヒ
ト胎盤性性腺刺戟ホルモン（以下ＨＣＧと略称する）、
ヒト胎盤性ラクトーゲン、インスリン、ステロイドなど
：イムノグロブリン分画とりわけ主としてイムノグロプ
リンＧもしくはィムノグロプリンＭに属する特異抗体（
たとえば抗ウイルス抗体、リウマチ因子）などが挙げら
れる。本発明において本化合物をラテックス凝集反応系
に存在させるには、本化合物をラテツクス粒子を含有す
る診断剤に添加しておいてもよく、被検液用の希釈液に
配合してもよい。

すなわち本願における「ラテックス凝集反応用試薬」は
感作ラテックス粒子を含有する診断剤ならびに被検液用
希釈液などを総称するものである。免疫学的活性物質に
対応する抗原もしくは抗体を感作させるラテックスとし
ては、たとえばスチレンもしくはその誘導体（メチルス
チレン、エチルスチレソ、クロロスチレンなど）、オレ
フイン（エチレン、プロピレンなど）、アクリル酸もし
くはそのエステル（メチルエステル、エチルエステルな
ど）、メタクリル酸もしくはその誘導体（エチルヱステ
ル、アクリ。

ニトリル、アクリルアミド）、ジエン（ブタジエン、ク
ロロプレン、イソプレンなど）、塩化ビニル、塩化ピニ
リデン、酢酸ビニルなどの均一重合体もしくは共重合体
のラテックスなどが挙げられ、とりわけスチレン、クロ
ロスチレン、アクリル酸、ビニルトルェン、メタクリル
酸メチルヱステルなどの均一重合体もしくは共重合体ラ
テツクスが有利に用いられる。上記ラテックス粒子を免
疫学的活性物質に対応する抗原もしくは抗体で感作する
処理は、自体公知の手法により行なうことができる。処
理条件は感作物質、ラテックス粒子の物理的化学的性質
により若干異なるが、例えば抗体で感作する場合は、次
のような方法で感作させることができる。抗血清を通常
の方法で塩折し、得られたｙ−グ。プリン画分を約０．
０１〜１％の濃度になるように解約７〜９の０．００５
〜０．２Ｍの緩衝液に溶解させる。緩衝液としては、グ
リシン緩衝液、リン酸緩衝液、ホゥ酸緩衝液もしくはＮ
−２ーハィドロキシェチルピベラジンーＮ′−２ーェタ
ンスルホン酸（以下、へべスと略称する）緩衝液などの
グッド緩衝液が有利に用いられる。この溶液に約０．１
〜１０％のラテックス粒子浮遊液を加えて、室温で約１
〜６時間もしくは約３７〜６０つ○で約０．５〜３時間
、静暦もしくは縄洋下でインキュベートして感作したの
ち、遠心分離する。かくして得られる感作ラテックス粒
子を、本化合物を添加した緩衝液に再浮遊させることに
より、診断用試薬が得られる。緩衝液としては、上託し
たＰＨが約７〜９のグリシン緩衝液、リン酸緩衝液、ホ
ウ酸緩衝液もしくはへべス緩衝液などのグッド緩衝液な
どが好都合に用いられる。本診断剤における本化合物お
よび感作ラテツクス粒子の好ましい濃度は、ラテツクス
凝集反応にさし、して被検液を希釈するか否かにより異
なるが、通常の希釈液で希釈した被検液と混合する診断
剤の場合は、本化合物を前記した濃度範囲（約１〜１３
％とりわけ約２〜７％）の約４倍濃度、感作ラテックス
粒子を約０．９〜１．４％程度含有させるのがよい。被
検液を希釈することなく直酸被検液と混合するタイプの
診断剤の場合は、本化合物を該濃度範囲（約１〜１３％
とりわけ約２〜７％）の約２倍濃度、感作ラテックス粒
子を約０．４〜０．７％程度含有させたものが好都合に
用いられる。本化合物を被検液の希釈液に含有させる場
合、基本組成としては通常の被検液希釈用緩衝液のいず
れを用いてもよく、たとえばグリシン緩衝液、ホゥ酸緩
衝液、リン酸緩衝液、へべス緩衝液などのグッド緩衝液
などが好都合に用いられ、解約６〜９、濃度約０．０５
〜０．３Ｍが好ましく、とりわけ０．１Ｍグリシン緩衝
液（ｐＨ８．２）、０．１Ｍへべス緩衝液（ｐＨ７．５
）などが有利に用いられる。

これらの緩衝液に本化合物を前記濃度範囲（約１〜１３
％とりわけ約２〜７％）の約４倍濃度含有させるのが好
ましい。上託した診断用試薬は、所望により血清アルブ
ミン好ましくは牛血清アルブミンを約０．０１〜０．２
％程度含有させてもよく、また防腐剤たとえばアジ化ナ
トリウムを約０．０２〜０．２％程度添加してもよい。

本発明の試薬は自体公知の手法たとえばスライド法、試
験管法などのいずれにも利用可能である。

また被検液は適当な炉過材で前処理してもよく、未炉過
のまま反応に供してもよい。本発明によれば、ラテック
ス凝集反応における非特異的凝集反応を顕著に防止する
ことができ、これにより測定の信頼度を大きく向上させ
ることができる。

以下に、本発明の効果を実施例および実験例によりさら
に具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を制限す
るものではない。

実施例 １ ｏグリシン ３．７５タｏ尿
素 ６０夕。

アジ化ナトリウム ０．５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを８．２に
調整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用
希釈液実施例 −２ ｏへべス（ドータイト試薬） １１．９多ｏＮ・Ｎ
一ジメチルホルムアミド １００夕。

アジ化ナトリウム ０．５夕を４００
肌の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを７．５に調
整したのち蒸留水で全量を５００叫とした被検液用希釈
液実施例 ３ ｏグリシン ７．５夕ｏＮ・
Ｎ一ジメチルアセトアミド ７５夕。

アジ化ナトリウム ０‐５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ一ＮａＯＨで舟を８．６に調
整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用希
釈液実施例 ４ ｏへべス（ドータィト試薬） ５．９５タｏジメ
チルスルホキシド １００夕。

アジ化ナトリウム ０．５夕を４００の
‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを７．２に調
整したのち蒸留水で全量を５００叫とした被検液用希釈
液実施例 ５ ｏへべス（ドータィト試薬） １１．９タｏ尿素
５０夕ｏＮ・Ｎ一ジメチ
ルホルムアミド ５０夕。

アジ化ナトリリム ０．５夕を４００の
‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨで肉を７．５に調整
したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用希釈
液実施例 ６ ｏグリシン ３．７５タｏ
Ｎ・Ｎ一ジメチルホルムアミド ５０夕。

アジ化ナトリウム ０‐５夕を４００
のとの蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨで−を８．０に調
整したのち蒸留水で全量を５００机とした被検液用希釈
液実施例 ７ ｏグリシン ７．５夕ｏＮ・
Ｎ一ジメチルホルムアミド ５０夕。

アジ化ナトリウム ０‐５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでＰＨを７．８に
調整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用
希釈液実施例 ８ ｏへべス（ドータィト試薬） １１．９タｏジエチ
ルスルホキシド ３０夕。

アジ化ナトリワム ０．５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを７．５に
調整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用
希釈液実施例 ９ ｏへべス（ドータィト試薬） １１．９タｏＮ−
メチル尿素 ７５夕。

アジ化ナトリウム ０．５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでＰＨを８．２に
調整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用
希釈液実施例 １０ ｏグリシン ３．７５タｏ
Ｎ−メチルホルムアミド １００多〇アジ化ナ
トリウム ０‐５夕 ２を４００私
の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨで斑を８．６に調整し
たのち蒸留水で全量を５００の‘とした彼検液用希釈液
実施例 １１ｏグリシン
３．７５夕 ２０Ｎ−メチルアセトアミド
７５夕。

アジ化ナトリワム ０．５夕を４００
肌の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを８．６に調
整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした被検液用希
釈液 ３実施例 １
２｛１｝ 家免を免疫して得られた抗Ｃ反応性蛋白血清
を常法により硫酸アンモニウムで塩析して得たｙーグロ
ブリン画分を透析後、ｐＨ８．２の０．０１Ｍリン酸緩
衝液に溶解した０．２％ンーグロブリン３溶液１０の‘
に、等容量の２％ポリスチレンラテックス液（粒子径０
．２仏、ｐＨ８．２の０．０１Ｍリン酸緩衝液で分散）
を加えて３７ｏ０で２時間、ときどき振浸しながら感作
させた。１２００仇ｐｍで１粉ご間遠０分離し沈殿状の
抗Ｃ反応性製白抗体感作ラチテックス粒子を得た。

■ ｏグリシン ３．７５
タｏ尿素 ３０夕ｏＮ・Ｎ
一ジメチルホルムアミド ２５夕ｏ牛血清アルブミ
ン ０．２５夕。

アジ化ナトリつム ０．２５夕を４００
叫の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを８．２に調
整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした溶液に、上
記｛…こおいて調整した感作ラテックス粒子を０．６％
の濃度に分散させ、抗Ｃ反応性蛋白抗体感作ラテックス
を含有するＣ反応性蛋白測定用診断剤を得た。実施例
１３ ‘１｝ 家免を免疫して得られた抗ヒトフィブリノ−ゲ
ン血清を常法により硫酸アンモニウムで塩析して得たｙ
ーグロブリン画分を透析後、ｐＨ８．０の０．０１Ｍリ
ン酸緩衝液に溶解した０．２％ｙ−グロブリン溶液１０
の‘に、等容量の２％ポリスチレンラテックス液（粒子
径０．２５仏、ｐＨ８．２の０．０１Ｍリン酸緩衝液で
分散）を加えて室温で６時間、ときどき振浸しながら感
作させた。

１０００仇ｐｍで１８分間遠心分離し、沈殿状の抗ヒト
フィブリノーゲン抗体感作ラテックス粒子を得た。

■ ｏへべス（ドータィト試薬） ５．９５タｏ
尿素 ２５夕ｏＮ・Ｎ−ジ
メチルホルムアミド ２５タｏ牛血清アルブミン
０．２５夕。

アジ化ナトリウム ０‐２５夕を４００
のとの蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを７．５に
調整したのち蒸留水で全量を５００泌とした溶液に、上
記｛１｝において調整した感作ラテックス粒子を０．６
％の濃度になるように分散させ、フイブリノーゲン、フ
イブリンおよびそれらの分解産物測定用診断剤を得た。
実施例 １４ 【１１ヒトｙ−グロブリン（Ｃｏｈｎのフラクシヨンロ
）をｐＨ８．０の０．０１Ｍリン酸緩衝液に溶解して０
．３％溶液とし、その１０の‘に等容量の２％ポリスチ
レンラテツクス液（粒子径０．１５仏、ｐＨ８．０の０
．０１Ｍリン酸緩衝液で分散）を加えて５がｏで２時間
、ときどき振溢しながら感作させた。

１５００仇ｐｍで３０分間遠心分離し、沈殿状のりゥマ
チ因子検出用ヒトｙ−グロブリン感作ラテックス粒子を
得た。

（２１ ｏグリシン ３．
７５タｏＮ・Ｎ−ジメチルホルムアミド ３０タｏ
牛血清アルブミン ０．２５夕。

アジ化ナトリウム ０‐２５夕を４００
机‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨで斑を８．０に調
整したのち蒸留水で全量を５００のとした溶液に、上記
‘１）において調整した感作ラテツクス粒子を０．６％
の濃度になるように分散させｔリチウム因子検出用診断
剤を得た。実施例 １５ 【１｝ ２の９のＨＣＣ（５０００１Ｕ′の９）を１の
‘の生理食塩水に溶解し、１の‘のフロィントの完全ア
ジュバンドと混合し、家免に３週間隔で４回以上免疫し
て抗日ＣＧ血清を得た。

この抗血清を常法により硫酸アンモニウムで塩折して得
たｙーグロブリン画分を透析後、ｐＨ８．２の０．０１
Ｍリン酸緩衝液に溶解した０．２％ｙ−グロブリン溶液
ｌｏｗとに、等容量の２％ポリスチレンラテツクス液（
粒子径０．３仏、ｐＨ８．２の０．０１Ｍリン酸緩衝液
で分散）を加えて３７ｏ０で２時間、ときどき振溢しな
がら感作ごせた。９００仇ｐｍで１５分間遠心分離し沈
殿状の抗日ＣＧ感作ラテックス粒子を得た。

■ ｏグリシン ３．７５
タｏ尿素 ７５夕ｏＮ・Ｎ
一ジメチルホルムアミド ５０タｏ牛血清アルブミ
ン ０．５夕。アジ化ナトリウム
０．５夕を４００地の蒸留水に溶解し、
Ｎ−ＮａＯＨでｐＨを８．２に調整したのち蒸留水で全
量を５００の‘とした溶液に、上記‘１｝‘こおいて調
整した抗日ＣＧ感作ラテックス粒子を１％の濃度に分散
させ、抗日ＣＧ感作ラテックスを含有する妊娠診断剤を
得た。実施例 １６ ｏへべス（ドータィト試薬） ５．９５多ｏ尿素
３０夕ｏＮ・Ｎ−ジメ
チルホルムアミド ２５タｏ牛血清アルブミン
０．２５夕。

アジ化ナトリウム ０．２５夕を４００
の‘の蒸留水に溶解し、Ｎ−ＮａＯＨでＰＨを７．５に
調整したのち蒸留水で全量を５００の‘とした溶液に、
実施例１５【１ーで調製した抗日ＣＧ感作ラテックス粒
子を０．６％の濃度になるように分散させ、抗日ＣＧ感
作ラテックスを含有する妊娠診断剤を得た。本品は、被
検液を希釈することなく凝集反応に供することができる
。実験例 １ 実施例１２１｝で得られた抗Ｃ反応性蛋白抗体感作ラテ
ツクス粒子を１．２％の濃度で０．１％牛血清アルブミ
ン、０．１％アジ化ナトリウムを含むｐＨ８．２の０．
１Ｍグリシジン緩衝液に分散させた。

被検ヒト血清約５０ムそを清浄なガラス板上に滴下し、
次に実施例１〜５で述べた希釈液およびコントロールと
して、０．１％アジ化ナトリウムを含むｐＨ８．２の０
．１Ｍグリシン緩衝液（以下希釈液（以下希釈液Ｇと略
称する）、０．１％アジ化ナトリウムを含むｐＨ７．５
の０．１Ｍへべス緩衝液（以下希釈液（以下希釈液日と
略称する）を約２５仏メ加え、次に上記感作ラテツクス
浮遊液２５ムそを加えて３分間揺動し、凝集の有無を調
べた。また被検液希釈液を用いないシステムについても
、被検血清約５０メタに実施例ｌａ２｝で得られたＣ反
応性蛋白測定用診断剤約５０ム〆を加えて揺動し３分後
の凝集の有無を観察した。結果は表１に示されるとおり
であった。表Ｉ Ｃ反応性蛋白の検出十：丁場性、士：
凝傷性、‐：陰性（以下同様）表１から明らかなように
、被検液用希釈液あるいはラテックス分散液に尿素、Ｎ
・Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ・Ｎ−ジメチルアセト
アミドもしくはジメチルスルホキシドを配合していない
場合、通常の毛細管内沈降法による診断結果と比べたと
き偽陽性例が出現した。

これに対し、実施例１〜５の被検液希釈液を用いるシス
テム、実施例ｌａ２ーで得られたＣ反応性蛋白測定用診
断剤を用いるシステムでは毛細管内沈降法による結果と
良い一致を示した。実験例 ２ 被検ヒト血清約５０メタを清浄なガラス板上に滴下し、
ついで実施例１３‘２）により得られた抗ヒトフイプリ
ノーゲン抗体感作ラテックス粒子浮遊液を約５０ｒそ加
えて２分間揺動し凝集の有無を調べた。

別にコントロールとして、実施例１３１｝で得られた沈
殿状の感作ラテックス粒子を０．０５％牛血清アルブミ
ン、０．０５％アジ化ナトリウムを含むｐＨ７．５の０
．０８Ｍへべス緩衝液に０．６％の濃度で分散させた抗
ヒトフィブリノーゲン感作ラテツクス粒子浮遊液を用い
て比較した。結果は表２に示されるとおりであった。表
２ フィブリンおよびフィブリノーゲン分解・産物の検
出表２から明らかなように不一致例（試料番号４、８）
がみられ、これらの試料は抗ヒトフイブリノーゲン抗体
で処理しても吸収されないところから、コントロールを
用いた反応結果が偽陽性であると判断された。

実験例 ３ 被検ヒト血清約５０仏そを清浄なガラス板上に滴下し、
ついで実施例１４（２｝により得られたヒトｙ−グロブ
リン感作ラテックス粒子浮遊液を約５０仏そ加えて２分
間揺動し凝集の有無を調べた。

別にコントロールとして、実施例１４‘１｝で得られた
沈殿状の感作ラテックス粒子を０．０５％牛血清アルブ
ミン、０．０５％アジ化ナトリウムを含むＰＨ８．０の
０．１Ｍグリシン緩衝液に０．６％の濃度で分散させた
ヒトｙ−グロブリン感作ラテックス粒子浮遊液を用いて
比較した。結果は表３に示されるとおりであった。表３
リウマチ因子の検出 表３から明らかなように、不一致例（試料番号５、９）
がみられ、これらの試料は通常の希釈液による２ぴ音希
釈法で血清成分の影響を防いだ場合、陰性となり一致し
た。

本発明の診断剤を用いれば、このように被検血清を希釈
することなくＩＪウマチ因子測定に供することができる
。実験例 ４ 実施例１９１｝で得られた抗日ＣＧ感作ラテックス粒子
を１％の濃度でｐＨ８．２の０．１Ｍグリシン緩衝液に
分散させた。

被検尿として、非妊娠婦人尿より、非特異的凝集を生じ
やすいｌｑ例を選択した。被検液用希釈液として、実施
例１〜５で述べた希釈液およびコントロールとして、前
記希釈液Ｇ、希釈液日を用いた。被検尿２滴を清浄なガ
ラス板上に滴下し、希釈液１滴を加えて混ぜ合せ、つぎ
に上記抗日ＣＯ感作ラテックス浮遊液１瓶を加えて３分
間揺動し、凝集の有無を調べた結果を後記表４に示す。
被検液用希釈液が尿素、Ｎ・Ｎ−ジメチルホルムアミド
、Ｎ・Ｎ一ジメチルアセトアミドもしくはジメチルスル
ホキシドを含まない場合、非妊娠者であるにもかかわら
ず非特異的凝集反応のため、妊娠であると判定される率
は凝陽性例も含めて希釈液Ｇで１０／１０、希釈液日で
１０／１０であった。

実施例１〜５の希釈液を用いた場合、それぞれの希釈液
で全例陰性となり誤判定例はなかった。

つぎにＨＣＧ濃度０．５〜５０００１Ｕ／地の標準溶液
および低ＨＣＧ量の妊娠初期尿（約１１Ｕ′の‘）につ
いて、実施例１〜５の希釈液を用いてラテツクス凝集反
応の鋭敏さ（感度）を調べた結果を後記表５に示す。実
験例 ５ 非妊娠婦人尿２０の列こついて、実施例１、２、５の希
釈液およびコントロールとして希釈液Ｇ、日を用い、実
験例４で述べた手技で妊娠診断ラテツクス凝集反応を行
なった。

後記表６に示したように２０の例中、希釈液Ｇでは陽性
６例、凝陽性２ｑ例、希釈液日では腸性７例、凝陽・性
１９列であった。

実施例１、２、５の被検液用希釈液を用いた場合、全例
が陰性を示した。実験例 ６ 妊娠診断を受診して臨床診断の結果、妊娠と確定された
２００例の婦人尿について、実施例１、２、５の希釈液
を被検液用希釈液に用いて、実験例４で述べた手技でラ
テックス凝集反応を行なった。

それぞれの希釈液において、全例が確定診断の結果と一
致して陽性を示した。実験例 ７ 非妊娠婦人血清５Ｍ例および妊娠と確定診断された婦人
血清５川例について、実施例１、２、５の希釈液を被検
液用希釈液に用いて、実験例４で述べた手技でラテック
ス凝集反応を行なった。

それぞれの希釈液で、非妊娠婦人血清では全例とも陰性
、妊娠血清で全例とも陽・性を示した。表４ 非妊娠尿
に対する彼検液用希釈液の表５ 標準ＨＣＧ液および妊
娠初期尿に対する彼検液用希釈液の比較表６ 非妊娠婦
人尿２００例における彼検液帯希釈液の比較実験例 ８ 実施例１９１｝で得られた抗日ＣＧ感作ラテツクス粒子
を１％の濃度で０．１％アジ化ナトリウムを含むＰＨ７
．５の０．０９Ｍのホウ酸緩衝液に分散させて妊娠診断
ラテックス凝集反応用診断剤を調製した。

実験例４で述べた被検尿および実施例１〜５の被検液用
希釈液を組合せ被検尿２滴（約５０〃夕）に被検液用希
釈液１滴（約２５仏そ）を加えて混合し、本診断剤１滴
（約２５ｒそ）を加えてラテックス凝集反応を行ない、
被検液用希釈液の効果について調べた。結果を後記表７
に示したが、被検液用希釈液に尿素、Ｎ・Ｎ一ジメチル
ホルムアミド、Ｎ・Ｎ−ジメチルアセトアミドもしくは
ジメチルスルホキシドが含まれていない場合「非妊娠者
であるにもかかわらず非特異的凝集反応のため、妊娠で
あると判定される率は凝陽‘性例も含めて、希釈液Ｇで
１０／１０、希釈液日で１０／１０であった。

実施例１〜５の希釈液を用いた場合、それぞれの希釈液
で全例陰性となり誤判定例はなかった。つぎに非妊娠婦
人尿２００例および妊娠と確定診断された尿２０の例に
ついて、実施例１〜５の希釈液を被検液用希釈液に用い
てラテックス凝集反応を行なったが、それぞれの被検液
用希釈液で、非妊娠婦人尿では全例とも陰性、妊娠尿で
全例とも陽性を示した。表７ 非妊娠尿に対する彼検液
用希釈液の比較実験例 ９被検尿２滴（約５０仏夕）を
清浄なガラス板上に滴下し、０．１％アジ化ナトリウム
を含むｐＨ８．２の０．１Ｍグリシン緩衝液（希釈液Ｇ
）１滴（約２５ｒ〆）を加えて混ぜ合せ、ついて実施例
１９２ｉで得られた抗日ＣＯ感作ラテックス粒子含有妊
娠診断剤を１滴（約２５仏夕）加えて３分間揺動し、凝
集の有無を調べた。

被検液として、非妊娠婦人尿２００例および妊娠と確定
診断された尿２０ｑ例についてラテックス凝集反応を行
なったところ、非妊娠婦人尿では全例Ｚとも陰性、妊娠
尿で全例とも陽性を示した。

実験例 １０被検尿２滴（約５０山夕）を清浄なガラス
板上に滴下し、ついで実施例１６により得られた抗日Ｃ
Ｇ感作ラテックス粒子含有妊娠診断剤を２滴（約５０Ｚ
仏そ）加えて３分間揺動し凝集の有無を調べた。

被検尿として、非妊娠婦人尿２００例および妊娠と確定
診断された尿２０の例についてラテツクス凝集反応を行
なったところ、非妊娠婦人尿では全例とも陰性、妊娠尿
では全例とも陽性を示した。実験例 １１被検尿２滴（
約５０仏そ）を清浄なガラス板上に滴下し、実施例１０
により得られた彼検液用希釈液１滴（約２５仏ぞ〕を加
えて混ぜ合せ、ついで実施例１５１１で得られた抗日Ｃ
Ｇ感作ラテックス粒子を１％の濃度でｐＨ７．８の０．
１Ｍグリシン緩衝液に分散させたラテツクス試薬を１滴
（約２５仏〆）を加えて３分間揺動し、凝集の有無を調
べた。

被検液として、非妊娠婦人尿２００例および妊娠と確定
診断された尿２０の例についてラテツクス凝集反応を行
なったところ、非妊娠婦人尿では全例とも陰性、妊娠尿
で全例とも陽Ｉ性を示した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＾１は水素原子、低級アルキル基または低級
   アルキル基により置換されていてもよいアミノ基を示し
   、Ｒ＾２およびＲ＾３はそれぞれ水素原子または低級ア
   ルキル基を示す〕で表わされる化合物およびジ低級アル
   キルスルホキシドの１種または２種以上を配合してなる
   ラテツクス凝集反応用試薬。 ２ 感作ラテツクス粒子を含有してなる特許請求の範囲
   第１項記載の試薬。