JPS6034182A - 新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法 - Google Patents
新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法Info
- Publication number
- JPS6034182A JPS6034182A JP58142330A JP14233083A JPS6034182A JP S6034182 A JPS6034182 A JP S6034182A JP 58142330 A JP58142330 A JP 58142330A JP 14233083 A JP14233083 A JP 14233083A JP S6034182 A JPS6034182 A JP S6034182A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- enzyme
- maltopentaose
- hours
- amylase
- starch
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規アミラーゼ、その製法およびそれを用いて
マルトペンタオースを製造する方法に関する。
マルトペンタオースを製造する方法に関する。
従来、マルトペンタオースは各種アミラーゼによる澱粉
またはアミロースの加水分解によって製造されていた。
またはアミロースの加水分解によって製造されていた。
しかしながら、この従来法に使用されるアミラーゼとし
て、たとえばアミロースからマルトペンタオースを３６
．６％程度生成するものが知られている（ Ａｒｃｈｉ
ｖｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄＢｉ
ｏｐｈｙａｉｃａ 、 １５５ ２９０−２９８ （１
９７３） ）が、このアミラーゼを用いて得られる分解
生成物中にはマルトベンフォース以外のマルトオリゴ糖
も含まれ、マルトペンタオース生成アミラーゼとしては
満足し得るものではない。
て、たとえばアミロースからマルトペンタオースを３６
．６％程度生成するものが知られている（ Ａｒｃｈｉ
ｖｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄＢｉ
ｏｐｈｙａｉｃａ 、 １５５ ２９０−２９８ （１
９７３） ）が、このアミラーゼを用いて得られる分解
生成物中にはマルトベンフォース以外のマルトオリゴ糖
も含まれ、マルトペンタオース生成アミラーゼとしては
満足し得るものではない。
マルトペンタオースは近年血中アミラーゼ測定用の基質
として利用される等その利用範囲が拡大し、大量生産が
期待されている。しかし、上記の如く、従来法ではその
要請に十分には応じられない。
として利用される等その利用範囲が拡大し、大量生産が
期待されている。しかし、上記の如く、従来法ではその
要請に十分には応じられない。
そこで本発明者らは、マルトペンタオース生産能のすぐ
れたアミラーゼを検索すべく研究を重ねた結果、本発明
者らが土壌よ）分離したバチルス−セレウス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｉｌ ａｅｒｅｕｓ ） ＮＹ −１４を好気的
に培養することによりマルトペンタオース生ｉ能を有す
るアミラーゼが菌体外に生産・蓄積されること、しかも
このアミラーゼを澱ｆ３等に作用させるとマルトペンタ
オースを６０％以上の高比率で生成することを見出し、
この知見に基いて本発明を完成したのである。
れたアミラーゼを検索すべく研究を重ねた結果、本発明
者らが土壌よ）分離したバチルス−セレウス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｉｌ ａｅｒｅｕｓ ） ＮＹ −１４を好気的
に培養することによりマルトペンタオース生ｉ能を有す
るアミラーゼが菌体外に生産・蓄積されること、しかも
このアミラーゼを澱ｆ３等に作用させるとマルトペンタ
オースを６０％以上の高比率で生成することを見出し、
この知見に基いて本発明を完成したのである。
本発明は、第１に下記の性質を有する新規アミラーゼに
関する。
関する。
（１）１％可溶性澱粉０．５ｍ／および５０ ｍＭ酢酸
緩衝液（ｐＨ６，０、１０ｍＭ Ｏ＆０４含有）ｏ、２
ｓｄに本酵素０．２５ｍ／を作用させると５分後に＃粉
から３８％のマルトペンタオースが、また２時間後に６
７％のマルトペンタオースが生成する。
緩衝液（ｐＨ６，０、１０ｍＭ Ｏ＆０４含有）ｏ、２
ｓｄに本酵素０．２５ｍ／を作用させると５分後に＃粉
から３８％のマルトペンタオースが、また２時間後に６
７％のマルトペンタオースが生成する。
（２１本酵素は可溶性澱粉、アミロペクチン、アミロー
ス、デキストリン、マルトヘキサオースに作用し、プル
ラン、デキストラン、β−サイクロデキストリン、マル
トペンタオースカラマルトースまでのオリゴ糖には作用
しない。
ス、デキストリン、マルトヘキサオースに作用し、プル
ラン、デキストラン、β−サイクロデキストリン、マル
トペンタオースカラマルトースまでのオリゴ糖には作用
しない。
（３）本酵素は３０℃にてｐＨ６〜７が至適であり、ｐ
Ｈ６〜１０で安定である。
Ｈ６〜１０で安定である。
（４）本酵素の至適温度はｐｉｒ ６．０で５０〜５５
℃である。
℃である。
（５）本酵素はｐＨ５以下３０℃で１時間または４°Ｃ
で２４時間放置すると失活する。また、７０℃では５０
分間の加熱により失活する。
で２４時間放置すると失活する。また、７０℃では５０
分間の加熱により失活する。
（６）本酵素は４℃の５０ ｍＭ酢酸綴衝液（ＴＩＨ６
，ｏ ）に対して２４時間透析することにより完全に失
活し、失活酵素はＯａｋ／、を添加しても賦活しない。
，ｏ ）に対して２４時間透析することにより完全に失
活し、失活酵素はＯａｋ／、を添加しても賦活しない。
また、同じ緩衝液で１０ ｍＭ ０ａ０４を含む溶液に
対して透析するときは失活がない。
対して透析するときは失活がない。
（７） ＊ ＃ 素の分子ｔは約９ＱＱＱＯ（ＳＤＳ−
７クリルアミドゲル電気泳動による）である。
７クリルアミドゲル電気泳動による）である。
第２の本発明は、バチルス属に属し、上記の性質を有す
る新規アミラーゼ生産能を有する微生物を培養し、培養
物中に該アミラーゼを蓄積せしめ、これを採取すること
を特徴とする新規アミラーゼの製造法である。
る新規アミラーゼ生産能を有する微生物を培養し、培養
物中に該アミラーゼを蓄積せしめ、これを採取すること
を特徴とする新規アミラーゼの製造法である。
第５の本発明は、α−１，４−グルコシド８合を含むポ
リサッカライドまたはオリゴサツカライドに上記の性質
を有する新規アミラーゼを作用させることを特徴とする
マルトペンタオースの製造方法に関する。
リサッカライドまたはオリゴサツカライドに上記の性質
を有する新規アミラーゼを作用させることを特徴とする
マルトペンタオースの製造方法に関する。
本発明の新規アミラーゼの生産菌として用いられる微生
物はバチルス属に属し、上記した性質を有するアミラー
ゼを生産する能力を有するものであればよく、たとえば
本発明者らが土壌中から分離したバチルス睦セレウスＭ
Ｙ−１４があげられる。
物はバチルス属に属し、上記した性質を有するアミラー
ゼを生産する能力を有するものであればよく、たとえば
本発明者らが土壌中から分離したバチルス睦セレウスＭ
Ｙ−１４があげられる。
本菌の菌学的性質は次に示す通りである。
■ 形態的性質
■ 細胞の形および大きさ
０．５％塩化ナトリウム肉汁培地Ｋ ５０ ”Ｃ。
・２４時間好気的に培養した細胞はＩ Ｐ Ｘ ５．ｏ
〜４．０μの長桿菌で単独または２個から多い時は５〜
６個連鎖して存在する。
〜４．０μの長桿菌で単独または２個から多い時は５〜
６個連鎖して存在する。
■ 連動性の有無
運動性は無い。鞭毛も無い。
■ 胞子の形成
有シ。０．７〜０．９μの楕円形で、中央または中央に
近い所にある。胞子のう細胞はふくらまない。
近い所にある。胞子のう細胞はふくらまない。
■ グラム染色性
陽性である。
■ 各種培地における生育状態
■ 肉汁寒天平板培養＜５０℃、４８時間）集落は拡張
性で表面は平らで粗く、また周縁は耳状で灰色がかった
白色。
性で表面は平らで粗く、また周縁は耳状で灰色がかった
白色。
■ 肉汁寒天斜面培養（３０”Ｃ，４８時間）生育は豊
かで粗く、不透明、拡張性で周縁生育は裂状。粘着性は
無い。
かで粗く、不透明、拡張性で周縁生育は裂状。粘着性は
無い。
■ 肉汁穿刺培養（！１０’Ｃ，５日間）生育は表面−
面に厚く、また穿刺ＩＭ！に沿ってのみ生育する。
面に厚く、また穿刺ＩＭ！に沿ってのみ生育する。
■ 肉汁液体培養（３０°Ｃ，５日間）生育は良好で、
液は透明で沈査ができ、菌膜は産生せず、くずれやすい
菌膜を形成する。
液は透明で沈査ができ、菌膜は産生せず、くずれやすい
菌膜を形成する。
色素は生成しない。
■ ０．５％塩化ナトリウム肉汁寒天平板培養（６０℃
、４８時間） 集落の形は不規則で表面は平らで粗く、また周縁は耳状
で灰色がかった白色。コンマの形をした集落はない。
、４８時間） 集落の形は不規則で表面は平らで粗く、また周縁は耳状
で灰色がかった白色。コンマの形をした集落はない。
■ ０．５％塩化す） ＩＪウム肉汁寒天斜面培養（３
０°Ｃ１４８時間） 生育は豊かで粗く、不透明、拡張性で周縁生育は裂状。
０°Ｃ１４８時間） 生育は豊かで粗く、不透明、拡張性で周縁生育は裂状。
粘着性は無い。
■ ０．５％塩化ナトリウム肉汁穿刺培養（ＳＯ℃、５
日出口 生育は表面−面に厚く、また穿刺線に沿ってのみ生育す
る。
日出口 生育は表面−面に厚く、また穿刺線に沿ってのみ生育す
る。
■ ０．５％塩化す） ＩＪウム肉汁液体培養（３Ｏ℃
、５日間） 生育は良好で液は濁シ、沈査ができる。菌膜１色素は産
生じない。
、５日間） 生育は良好で液は濁シ、沈査ができる。菌膜１色素は産
生じない。
■ ミＡ・り寒天平板培養（５０°Ｃ２２４時間）カゼ
インの水解帯は広い。
インの水解帯は広い。
［相］ 肉汁ゼラチン穿刺培養（２０℃、７日間）噴火
状ないし層状に迅速に液化する。
状ないし層状に迅速に液化する。
■ 生理学的性質
■ 硝酸塩の還元 ：還元する
■ ■Ｐテスト ：アセチルメチノνカルビノールを生
ずる ■ ＭＲテスト ：陽性 ■ クエン酸の利用 ：利用する ■ インドールの生成 ：生成しない ■ 硫化水素の生成 ：生成する ■ アンモニアの生成 ：生成する ■ ミルクに対する作用：凝固する ■ カタラーぞ ：陽性 ［相］ 生育の範囲 ： ｐＨ５，２〜１０．２．温度
７〜３７℃ ■ 酸素に対する態度 ：好気性、嫌気性条件下でグル
コースに生育する。
ずる ■ ＭＲテスト ：陽性 ■ クエン酸の利用 ：利用する ■ インドールの生成 ：生成しない ■ 硫化水素の生成 ：生成する ■ アンモニアの生成 ：生成する ■ ミルクに対する作用：凝固する ■ カタラーぞ ：陽性 ［相］ 生育の範囲 ： ｐＨ５，２〜１０．２．温度
７〜３７℃ ■ 酸素に対する態度 ：好気性、嫌気性条件下でグル
コースに生育する。
＠ ｏ−ｐテスト ：嫌気的にも糖（グルコース）を分
解して酸を生成する。
解して酸を生成する。
Ｏサブロー・デキストロース培養Ｖ寒天斜面培養での生
育 ：生育する ■ 糖類から酸およびガスの生成の有無：Ｄ−キシロー
ス、Ｌ−アラビノース、Ｌ−ラムノース、マンニトール
、Ｄ−ラフィノース、グリセロール、Ｄ−ガラクトース
、Ｄ−マンノース、乳糖、ショ糖には生育しない。
育 ：生育する ■ 糖類から酸およびガスの生成の有無：Ｄ−キシロー
ス、Ｌ−アラビノース、Ｌ−ラムノース、マンニトール
、Ｄ−ラフィノース、グリセロール、Ｄ−ガラクトース
、Ｄ−マンノース、乳糖、ショ糖には生育しない。
可溶性澱粉、Ｄ−グルコース、Ｄ−フルクトース、トレ
ハロース、サリシン、麦芽糖に生育し、酸を生成するが
、ガスの発生はない。
ハロース、サリシン、麦芽糖に生育し、酸を生成するが
、ガスの発生はない。
＠ ｏ、００１％ リゾチーム中での生育：生育する＠
ｏ、ｏ２％アザイド中での生育 ：生育する０ ７％
食塩中での生育 ：生育する 以上に示した性質をパージエイズ・マニュアル・オブ・
デターミナテイプ・バクテリオロジー第８版（１９７４
年） （Ｂｅｒｇｅｙ’ａ Ｍａｍｕａｌ ｏｆ Ｄｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ８
ｔｈ ｅｄ、 １９７４ ）に照合すると、本菌ハバチ
ルス・セレウスに属しており、本発明者らは本菌をバチ
ルス書セレウスＮＹ−１４と命名した。本菌は工業技術
院微生物工業技術研究所にＩＰ］ｌＩｉＲＭ Ｐ−６６
４８（ＦＥＢＭ ＢＦ−３２９） として寄託されてい
る。なお、前述した如く、本発明において使用する微生
物はバチルス属に属し、上記した性質を有するアミラー
ゼの生産能力を有するものであればよく、バチルス・セ
レウスＮＹ−１４およびその変種、変異種に限定される
ものではない。
ｏ、ｏ２％アザイド中での生育 ：生育する０ ７％
食塩中での生育 ：生育する 以上に示した性質をパージエイズ・マニュアル・オブ・
デターミナテイプ・バクテリオロジー第８版（１９７４
年） （Ｂｅｒｇｅｙ’ａ Ｍａｍｕａｌ ｏｆ Ｄｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ８
ｔｈ ｅｄ、 １９７４ ）に照合すると、本菌ハバチ
ルス・セレウスに属しており、本発明者らは本菌をバチ
ルス書セレウスＮＹ−１４と命名した。本菌は工業技術
院微生物工業技術研究所にＩＰ］ｌＩｉＲＭ Ｐ−６６
４８（ＦＥＢＭ ＢＦ−３２９） として寄託されてい
る。なお、前述した如く、本発明において使用する微生
物はバチルス属に属し、上記した性質を有するアミラー
ゼの生産能力を有するものであればよく、バチルス・セ
レウスＮＹ−１４およびその変種、変異種に限定される
ものではない。
本発明の新規アミラーゼを生産するための微生物の培養
は通常の微生物が利用し得る栄養物を含有する培地で行
なう。具体的には、新規アミラーゼの生産のためには、
α−１，４−グルコシド結合を含むポリサッカライドま
たはオリゴサツカライド、たとえば各種澱粉、アミロペ
クチン、アミロース、デキストリン、マルトヘキサオー
ス等が必要である。したがって、バチルス・セレウスＭ
Ｙ−１４の培地にはこれらポリサッカライドまたはオリ
ゴサツカライドの１種またはそれ以上と薩の生育に必要
な他の成分、たとえば有機・無機の窒素源；有機・無機
の塩類；ビタミン等を適宜含有するものが使用される。
は通常の微生物が利用し得る栄養物を含有する培地で行
なう。具体的には、新規アミラーゼの生産のためには、
α−１，４−グルコシド結合を含むポリサッカライドま
たはオリゴサツカライド、たとえば各種澱粉、アミロペ
クチン、アミロース、デキストリン、マルトヘキサオー
ス等が必要である。したがって、バチルス・セレウスＭ
Ｙ−１４の培地にはこれらポリサッカライドまたはオリ
ゴサツカライドの１種またはそれ以上と薩の生育に必要
な他の成分、たとえば有機・無機の窒素源；有機・無機
の塩類；ビタミン等を適宜含有するものが使用される。
本発明で用いる微生物の培養条件については、使用する
菌等によって異なるが、目的とする新規アミラーゼの生
産量が最大になるように選定すべきであり、具体的には
バチルス・セレウスＮＹ−１４株の場合、培地のｐＨを
８．０．培養温度は５０℃、培養時間は２４時間程度が
適当であり、好気的培養を行なう。培地に加えるポリサ
ッカライドまたはオリゴサツカライドの量は、たとえば
可溶性澱粉の場合、０．５〜２％の範囲が有効である。
菌等によって異なるが、目的とする新規アミラーゼの生
産量が最大になるように選定すべきであり、具体的には
バチルス・セレウスＮＹ−１４株の場合、培地のｐＨを
８．０．培養温度は５０℃、培養時間は２４時間程度が
適当であり、好気的培養を行なう。培地に加えるポリサ
ッカライドまたはオリゴサツカライドの量は、たとえば
可溶性澱粉の場合、０．５〜２％の範囲が有効である。
培養終了後、培養液から新規アミラーゼを採取・精製す
るには既知の適当な方法を組合せて行なうことができる
。たとえば、濾過、遠心分離等の適当な手段によって培
養物から固形分を除いて上清液を得、該上清液を硫安分
画、ゲル濾過やイオン交換などのクロマトグラフィー等
にかけてアミラーゼの精製品を得ることができる。
るには既知の適当な方法を組合せて行なうことができる
。たとえば、濾過、遠心分離等の適当な手段によって培
養物から固形分を除いて上清液を得、該上清液を硫安分
画、ゲル濾過やイオン交換などのクロマトグラフィー等
にかけてアミラーゼの精製品を得ることができる。
このようにして得られるアミラーゼは以下のような性質
を有している。
を有している。
（１） 作用
１％可溶性澱粉０．５ＷＬｌ、 ５０ ｍＭ酢酸緩衝液
（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａＯＬ２含有）ｏ、２５Ｉ
ＩＩ／に本酵素０．２５＋ｔ／ （１，８７Ｕ、活性測
定法は下記（４）に示す力価測定法にしたがった。）を
作用させると、反応５分後には澱粉から３８％、２時間
後には６７％のマルトペンタオースが生成する。
（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａＯＬ２含有）ｏ、２５Ｉ
ＩＩ／に本酵素０．２５＋ｔ／ （１，８７Ｕ、活性測
定法は下記（４）に示す力価測定法にしたがった。）を
作用させると、反応５分後には澱粉から３８％、２時間
後には６７％のマルトペンタオースが生成する。
（２） 基質特異性
本酵素は可溶性澱粉、アミロペクチン、アミロース、デ
キストリン、マルトヘキサオーろに作用し、プルラン、
デキストラン、β−サイクロデキストリン、マルトペン
タオースからマルトースまでのオリゴ糖には作用しない
。
キストリン、マルトヘキサオーろに作用し、プルラン、
デキストラン、β−サイクロデキストリン、マルトペン
タオースからマルトースまでのオリゴ糖には作用しない
。
（３） 至適ｐＨおよび安定ＰＨ
本酵素は５０°ＣにてｐＨ６〜７が至適であり、ＰＨ６
〜１０で安定である。ｐＨ値とアミラーゼ活性との関係
は第１図に示す如くであり、その測定方法は以下の条件
下で下記（４）に示す力価測定法にしたがった。
〜１０で安定である。ｐＨ値とアミラーゼ活性との関係
は第１図に示す如くであり、その測定方法は以下の条件
下で下記（４）に示す力価測定法にしたがった。
測定条件二温度３０℃、 ｐＨ４，０〜６．０では０．
５Ｍ酢酸緩衝液、 ｐＨ６，０〜８．０では０；５Ｍリ
ン酸緩衝液、 ｐＨ８，０〜９．０では０．５Ｍ）リス
緩衝液。
５Ｍ酢酸緩衝液、 ｐＨ６，０〜８．０では０；５Ｍリ
ン酸緩衝液、 ｐＨ８，０〜９．０では０．５Ｍ）リス
緩衝液。
ｐＨ９，０〜１０．０では０，５Ｍグリシン緩衝液を使
用。
用。
（４） 力価測定法
１％可溶性澱粉０．５ｍｌに対し５Ｑｍｌｌ酢酸緩衝液
（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有）０．２５ｍに
酵素液０．２５＊ｔを加えて３０°Ｃで適当時間反応さ
せた後、反応液の０．２ｍ／を０，４ｍｌのジニトロサ
リチル酸（ＤＮＳ試薬）液に加え、５分間沸騰水浴中で
加熱した後、水１，８νｔを加えて５４０μｍにて比色
する。そして１分間に１μｍｏｌのグルコース相当の還
元力を生成する酵素社を１単位（Ｕ）とした。
（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有）０．２５ｍに
酵素液０．２５＊ｔを加えて３０°Ｃで適当時間反応さ
せた後、反応液の０．２ｍ／を０，４ｍｌのジニトロサ
リチル酸（ＤＮＳ試薬）液に加え、５分間沸騰水浴中で
加熱した後、水１，８νｔを加えて５４０μｍにて比色
する。そして１分間に１μｍｏｌのグルコース相当の還
元力を生成する酵素社を１単位（Ｕ）とした。
（５） 作用適温の範囲
本酵素の至適温度は第２図に示した如（ｐＨ６−０で５
０〜５５℃にある。なお、温度とアミラーゼ活性との関
係の測定は反応温度を５０〜８０℃に変化させたこと以
外は上記（４）の測定法処したがった。
０〜５５℃にある。なお、温度とアミラーゼ活性との関
係の測定は反応温度を５０〜８０℃に変化させたこと以
外は上記（４）の測定法処したがった。
（６）１１１Ｈ９温度などによる失活の条件本酵素はｐ
Ｈ５以下５０℃ で１時間または４“Ｃで２４時間放置
すると失活する。また、７０℃では５０分間の加熱によ
り失活する。
Ｈ５以下５０℃ で１時間または４“Ｃで２４時間放置
すると失活する。また、７０℃では５０分間の加熱によ
り失活する。
（７）阻害、活性化および安定化
本酵素は４℃の５０ ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，ｏ）に
対して２４時間透析することにより完全に失活し、失活
酵素は０ａ０４を添加しても賦活しない。
対して２４時間透析することにより完全に失活し、失活
酵素は０ａ０４を添加しても賦活しない。
また、同じ緩衝液で１０ ｍＭ （Ｉａ０４を含む溶液
に対して透析するときは失活がない。
に対して透析するときは失活がない。
本酵素の各種金属イオン（最終濃度１Ｘ １０−３Ｍ）
に対する影響（３０℃、１０分間処理）を第１表に示す
。表から明らかなように、鉄、銅、水銀。
に対する影響（３０℃、１０分間処理）を第１表に示す
。表から明らかなように、鉄、銅、水銀。
銀、亜鉛、カドミウムに阻害作用が認められた。
第 １ 表
−１００
Ｍｇ０４ ９０
１’ｅＳＯ４２
Ｃｏａｌ、 １１４
ＣＩｕｏ４ ０
ＨｇＣ４１
ＬｉＯｔ １ ０７
ＢａＣ！０３ ９５
ＺｎＳＯ４６５
０ａ０４ １０９
１Ｊｉ０４ １０２
Ｃ＋（１０４５７
ＡｇＮ０． ７
（８） 精製方法
５を三角フラスコによる液体培養によって得られた培養
液を濾過し、この濾液を粗酵素液として使用した。１
ｒｎｌ当り活性ａ、ｓ ５５単位の粗酵素液９５０ｙｓ
ｌを水冷し、０〜５℃に保ちながら硫安を添加し、０．
６から０．７飽和の間で沈でん画分な採取する。得られ
だ°沈でんを少量の５０１１１１Ｍ酢酔緩衝液（Ｉ’Ｈ
６，０、１０ｍＭ ０ａＯｔ２含有）に溶解後、０〜５
℃の温度で同緩衝液で１昼夜透析膜で透析を行なう。透
析された酵素液中に生じた不溶物はさらに遠心分離等に
よって除去する。次いで、本酵素を５０ ｍＭ酢酸緩衝
液（ｐＨ６，０、１０ｍＭＯａｃ４含有）により平衡化
したセファデックスＧ−１００カラム（カラム容積１．
ｓ Ｘ ２７．５ ｃｒｎ）に載せ、同緩衝液で液出す
る。このようにして得られた活性画分は凍結乾燥により
粉末とする。
液を濾過し、この濾液を粗酵素液として使用した。１
ｒｎｌ当り活性ａ、ｓ ５５単位の粗酵素液９５０ｙｓ
ｌを水冷し、０〜５℃に保ちながら硫安を添加し、０．
６から０．７飽和の間で沈でん画分な採取する。得られ
だ°沈でんを少量の５０１１１１Ｍ酢酔緩衝液（Ｉ’Ｈ
６，０、１０ｍＭ ０ａＯｔ２含有）に溶解後、０〜５
℃の温度で同緩衝液で１昼夜透析膜で透析を行なう。透
析された酵素液中に生じた不溶物はさらに遠心分離等に
よって除去する。次いで、本酵素を５０ ｍＭ酢酸緩衝
液（ｐＨ６，０、１０ｍＭＯａｃ４含有）により平衡化
したセファデックスＧ−１００カラム（カラム容積１．
ｓ Ｘ ２７．５ ｃｒｎ）に載せ、同緩衝液で液出す
る。このようにして得られた活性画分は凍結乾燥により
粉末とする。
上記の方法により精製された酵素はポリアクリルアミド
ゲルによる電気泳動で単一であった。また、その比活性
は５２５．６ （単位／ ｍｙ 蛋白）であった。
ゲルによる電気泳動で単一であった。また、その比活性
は５２５．６ （単位／ ｍｙ 蛋白）であった。
（９） 分子量
５ＤＳ−アクリルアミドゲル電気泳動（ｕθｔｈｏａｓ
ｉｎ Ｋｔ＋ｓｇｍｏｌｏｇｙ、 Ｔｏｌ、 ２６．５
〜２７頁、 １９７２年）によると、本酵素は分子量が
約９００００である。
ｉｎ Ｋｔ＋ｓｇｍｏｌｏｇｙ、 Ｔｏｌ、 ２６．５
〜２７頁、 １９７２年）によると、本酵素は分子量が
約９００００である。
Ｑｌ ポリアクリルアミドディスク電気泳動ディビスノ
原法（Ｂ、 、ｒ、 Ｄａｖｉｓ 、 Ａｎｎ、 １８
ｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄ。
原法（Ｂ、 、ｒ、 Ｄａｖｉｓ 、 Ａｎｎ、 １８
ｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄ。
８ｃｉ、、 １２１． Ａｒｔ ２ 、４０４ （１９
６４） ） を参考にしてトリス−グリシン緩衝液（ｐ
Ｈ８，５）中７．５％の標準ゲルにて５ｍＡ／１本で９
０分間泳動し、その後クマシーブルーにて染色すると、
本酵素は第３図の如く１つのバンドを示した。
６４） ） を参考にしてトリス−グリシン緩衝液（ｐ
Ｈ８，５）中７．５％の標準ゲルにて５ｍＡ／１本で９
０分間泳動し、その後クマシーブルーにて染色すると、
本酵素は第３図の如く１つのバンドを示した。
なお、マルトペンタオースの比率は高速液体クロマトグ
ラフィーで調べ、蛋白質は牛血清アルブミンを標準とし
２てローリ−法で測定した。
ラフィーで調べ、蛋白質は牛血清アルブミンを標準とし
２てローリ−法で測定した。
本発明の方法によって得られるアミラーゼは澱粉等から
高比率でマルトペンタオースを生成することができる。
高比率でマルトペンタオースを生成することができる。
すなわち、α−１，４−グルコシドＪｉｌを含むポリサ
ッカライドまたはオリゴサツカライド、たとえば各種澱
粉、アミロペクチン。
ッカライドまたはオリゴサツカライド、たとえば各種澱
粉、アミロペクチン。
アミロース、デキストリン、マルトヘキサオースなどに
上記本発明のアミラーぞを作用させると、反応液中にマ
ルトペンタオースが生成・蓄積する。
上記本発明のアミラーぞを作用させると、反応液中にマ
ルトペンタオースが生成・蓄積する。
反応はマルトペンタオースの生成量が最大となるような
栄件下で行なうべきであり、上記アミラーゼの性質を考
慮して適宜決定すればよい。
栄件下で行なうべきであり、上記アミラーゼの性質を考
慮して適宜決定すればよい。
反応終了後、加熱してアミラーゼを失活させて反応を停
止し、反応液をゲル濾過やイオン交換などのクロマトグ
ラフィー等にかけることによってマルトペンタオースの
精製品を得ることができる。
止し、反応液をゲル濾過やイオン交換などのクロマトグ
ラフィー等にかけることによってマルトペンタオースの
精製品を得ることができる。
本発明によれば、マルトペンタオースを効率よく大垣に
生産することが可能であシ、前記した用途をはじめマル
トペンタオースの利用分野の拡大が期待される。しかも
、本発明の方法は従来法と異なりマルトペンタオース以
外の？６質の副生が少ないため、精製操作が容易である
という特色を有している。
生産することが可能であシ、前記した用途をはじめマル
トペンタオースの利用分野の拡大が期待される。しかも
、本発明の方法は従来法と異なりマルトペンタオース以
外の？６質の副生が少ないため、精製操作が容易である
という特色を有している。
次に、本発明を実施例により詳しく説明する。
なお、実施例における炭水化物量はフェノール・硫酸法
によりグルコース換算で示し、糖の分析には高速液体ク
ロマトグラフィーと以下の方法によるペーパークロマト
グラフィーを実施しだ。糖含有液の一定量を東洋濾紙Ａ
５０ （１９Ｘ１９ｃｍ）にスポットし、密閉容器中で
６５％Ｈ−フａ ヒルアルコールを展開剤として７０°
Ｃで上昇法により２回展開した。展開後、グルファミラ
ーゼで４０℃、３０分間処理して各オリゴ糖を加水分解
させ、アルカリ性アセトン−硝酸銀浸漬法により発色さ
せた。マルトペンタオースの生成量は上記方法で培養液
もしくは反応液をペーパークロマトグラフィーにより展
開後、グルコアミラーゼ処理をしたものについてマルト
ペンタオース相当部分を切り抜き、１００°Ｃで１５分
間熱水抽出したものＫついてフェノール−硫酸法でグル
コース換算で測定し、マルトペンタオース重量とした。
によりグルコース換算で示し、糖の分析には高速液体ク
ロマトグラフィーと以下の方法によるペーパークロマト
グラフィーを実施しだ。糖含有液の一定量を東洋濾紙Ａ
５０ （１９Ｘ１９ｃｍ）にスポットし、密閉容器中で
６５％Ｈ−フａ ヒルアルコールを展開剤として７０°
Ｃで上昇法により２回展開した。展開後、グルファミラ
ーゼで４０℃、３０分間処理して各オリゴ糖を加水分解
させ、アルカリ性アセトン−硝酸銀浸漬法により発色さ
せた。マルトペンタオースの生成量は上記方法で培養液
もしくは反応液をペーパークロマトグラフィーにより展
開後、グルコアミラーゼ処理をしたものについてマルト
ペンタオース相当部分を切り抜き、１００°Ｃで１５分
間熱水抽出したものＫついてフェノール−硫酸法でグル
コース換算で測定し、マルトペンタオース重量とした。
また、必要に応じて高速液体クロマトグラフィーも併用
した。
した。
アミラーゼ活性は１％可溶性澱粉０．５１に対し、５０
ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有
）０．２５ｉＩ／に酵素液０．２５１１７を加えて３０
°Ｃで適当時間反応させた後、反応液の０．２−を０．
４ Ｈｌのジニトロサリチル酸液に加え、５分間沸騰水
浴中で加熱した抜水Ｌ８ｍｌを加えて５４０μｍにて比
色し、１分間に１μｍｏｌのグルコース相当の還元力を
生成する酵素量を１単位とした。
ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有
）０．２５ｉＩ／に酵素液０．２５１１７を加えて３０
°Ｃで適当時間反応させた後、反応液の０．２−を０．
４ Ｈｌのジニトロサリチル酸液に加え、５分間沸騰水
浴中で加熱した抜水Ｌ８ｍｌを加えて５４０μｍにて比
色し、１分間に１μｍｏｌのグルコース相当の還元力を
生成する酵素量を１単位とした。
実施例１
各種炭水化物０．５％、ペプトン１％１食塩０．５％を
含む培地（１）Ｈ８，０）１０１１／を試験管（２１×
２１０ｍ）に分注して殺菌後、バチルス・セレウスＮＹ
−１４（ＴＥＲＭ ＢＰ −３２９）を１白金耳接種
して３０℃で２４時間振とり（２５０ｆ戸、振幅２０ｍ
）培黍した。
含む培地（１）Ｈ８，０）１０１１／を試験管（２１×
２１０ｍ）に分注して殺菌後、バチルス・セレウスＮＹ
−１４（ＴＥＲＭ ＢＰ −３２９）を１白金耳接種
して３０℃で２４時間振とり（２５０ｆ戸、振幅２０ｍ
）培黍した。
培養終了後、培養物を濾過して菌体を除去した上清中の
アミラーゼ活性を測定した。結果を第２表に示す。
アミラーゼ活性を測定した。結果を第２表に示す。
第 ２ 表
マルトース ｏ、２７０
マルトトリオース ０．５０８
マルトテトラオース ０．２７４
マルトペンタオース ０．４１４
マルトヘキサオース ０．４５８
アミロース（ＤＰ＝１７） ０・６３８デキストリン
０．４７９ 可溶性澱粉 ０．５５４ アミロペクチン ０．６２９ 上記上清を十分に冷却（３〜５°Ｃ）Ｌ、０．９飽和に
なるように硫安を添加して沈でん区分を採取した。得ら
れた沈でんを最少量の５０ ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，
０、１０ｍＭ ０ａＣ４含有）に溶解後、透析膜を用い
て同緩衝液に対して１昼夜透析を行なった。透析された
酵素液中に生じた不溶物はさらに遠心分離によって除去
した。この酵素液を凍結乾燥することにより粉末酵素製
剤を得た（収率９０〜１００％）。
０．４７９ 可溶性澱粉 ０．５５４ アミロペクチン ０．６２９ 上記上清を十分に冷却（３〜５°Ｃ）Ｌ、０．９飽和に
なるように硫安を添加して沈でん区分を採取した。得ら
れた沈でんを最少量の５０ ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，
０、１０ｍＭ ０ａＣ４含有）に溶解後、透析膜を用い
て同緩衝液に対して１昼夜透析を行なった。透析された
酵素液中に生じた不溶物はさらに遠心分離によって除去
した。この酵素液を凍結乾燥することにより粉末酵素製
剤を得た（収率９０〜１００％）。
実施例２
可溶性澱粉０．５％、ペプトン１％１食塩０．５％を含
む培地（ｐＨ８，０）５００ｍを５０００ｍ／容ヘソ付
三角フラスコに分注し、殺菌した。一方、この培地と同
じ組成の培地にバチルス・セレウスＭＹ−１４（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ −５２９）を３０℃で２４時間振とり培養し
、この前培養液１０ｍｇを前記培地に接種し、３０°Ｃ
で２４時間毎分１２０回転で振とり培養を行なった。
む培地（ｐＨ８，０）５００ｍを５０００ｍ／容ヘソ付
三角フラスコに分注し、殺菌した。一方、この培地と同
じ組成の培地にバチルス・セレウスＭＹ−１４（ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ −５２９）を３０℃で２４時間振とり培養し
、この前培養液１０ｍｇを前記培地に接種し、３０°Ｃ
で２４時間毎分１２０回転で振とり培養を行なった。
培養終了後、培養物を遠心分離して上清液を得た。この
上清液についてアミラーゼの力価を測定したところ０．
５３５単位／ｄであり、その比活性は０．２９４単位／
■蛋白であった。
上清液についてアミラーゼの力価を測定したところ０．
５３５単位／ｄであり、その比活性は０．２９４単位／
■蛋白であった。
次に、該上清液９５０ ｍｌを十分に冷却（３〜５℃）
し、硫酸アンモニウムを添加して０．６から０．７飽和
の間で生ずる沈でん区分を採取した。得られた沈でんを
少量の５０１！ＩＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０゜１０ ｍ
Ｍ ＱＢＱ４含有）に溶解後、透析膜を用いて同緩衝液
に対して２４時間透析を行なった。透析された酵素液中
に生じた不溶物をさらに遠心分離によって除去した。次
いで、本酵素を５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０、１０
ｍＭ Ｃａ０４含有）で平衡化したセファデックスＧ−
１００カラム（カラム容積＝１．５×２７．５ｃ１ｎ）
に載せ、同緩衝液で溶出した。得られた活性区分はポリ
アクリルアミドゲルによる電気泳動で単一であった。ま
た、本酵素の比活性は５２５．６単位／ｘｙ蛋白であり
、１７８８倍に精製された。この酵素液を凍結乾燥する
ことにより精製酵素粉末を得た。
し、硫酸アンモニウムを添加して０．６から０．７飽和
の間で生ずる沈でん区分を採取した。得られた沈でんを
少量の５０１！ＩＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０゜１０ ｍ
Ｍ ＱＢＱ４含有）に溶解後、透析膜を用いて同緩衝液
に対して２４時間透析を行なった。透析された酵素液中
に生じた不溶物をさらに遠心分離によって除去した。次
いで、本酵素を５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，０、１０
ｍＭ Ｃａ０４含有）で平衡化したセファデックスＧ−
１００カラム（カラム容積＝１．５×２７．５ｃ１ｎ）
に載せ、同緩衝液で溶出した。得られた活性区分はポリ
アクリルアミドゲルによる電気泳動で単一であった。ま
た、本酵素の比活性は５２５．６単位／ｘｙ蛋白であり
、１７８８倍に精製された。この酵素液を凍結乾燥する
ことにより精製酵素粉末を得た。
実施例３
可溶性澱粉０，５％、ペプトン１％１食塩０．５％を含
む培地（ＩＩＩＨ８，ｏ） １０ ｔを５Ｑｔ容ジヤー
７アーメンターに入れ、１２１°Ｃで１０分間殺菌した
。これに同一組成の培地で前培養したバチルス・セレウ
スＮＹ −１４（ＦＥＲＭ ＢＰ−３２９）の菌懸濁液
２００ ｍｌを接種し、５０°Ｃで２４時間通気量１６
ｔ／分、振とう数１ｓｏｒｐ■で振とう培養を行なった
。
む培地（ＩＩＩＨ８，ｏ） １０ ｔを５Ｑｔ容ジヤー
７アーメンターに入れ、１２１°Ｃで１０分間殺菌した
。これに同一組成の培地で前培養したバチルス・セレウ
スＮＹ −１４（ＦＥＲＭ ＢＰ−３２９）の菌懸濁液
２００ ｍｌを接種し、５０°Ｃで２４時間通気量１６
ｔ／分、振とう数１ｓｏｒｐ■で振とう培養を行なった
。
培養終了後、培養物を集め４°Ｃにて遠心分離を行ない
、菌体を除去した。得られた上清液のアミラーゼの力価
を測定したところ０．５１５単位／ｄであシ、比活性は
０．２９０単位／ｍｙ蛋白であった。
、菌体を除去した。得られた上清液のアミラーゼの力価
を測定したところ０．５１５単位／ｄであシ、比活性は
０．２９０単位／ｍｙ蛋白であった。
次に１この上清液から実施例２と同様にして精製酵素粉
末を得た。
末を得た。
実施例４
１％可溶性澱粉０．５ｍ、５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６
，０、１０ｍＭＯａ０４含有）０．２５ｉｕに本発明の
アミラーゼ液０．２５ｍ （１，８７Ｕ）を加えて６０
°Ｃで反応させ、２時間後に加熱して反応を停止した。
，０、１０ｍＭＯａ０４含有）０．２５ｉｕに本発明の
アミラーゼ液０．２５ｍ （１，８７Ｕ）を加えて６０
°Ｃで反応させ、２時間後に加熱して反応を停止した。
反応液中のマルトペンタオースは５−１７Ｍ９７ｍ１で
あり、対澱粉比６７％であった。当該反応液を活性疾カ
ラムと液体クロマトカラムに通して得た溶液を濃縮後、
凍結乾燥を行なってマルトペンタオースの白色粉末３■
を得た。
あり、対澱粉比６７％であった。当該反応液を活性疾カ
ラムと液体クロマトカラムに通して得た溶液を濃縮後、
凍結乾燥を行なってマルトペンタオースの白色粉末３■
を得た。
第１図は本発明のアミラーゼのｐＨと活性との関係を示
すグラフ、第２図は同じく温度と活性の関係を示すグラ
フである。第３図は精製されたアミラーゼのアクリルア
ミドゲルディスク電気泳動図である。 特許出願人 サッポロビール株式会社 第１ ｉＬ＆ （’（、）
すグラフ、第２図は同じく温度と活性の関係を示すグラ
フである。第３図は精製されたアミラーゼのアクリルア
ミドゲルディスク電気泳動図である。 特許出願人 サッポロビール株式会社 第１ ｉＬ＆ （’（、）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 下記の性質を有する新規アミラーゼ。 （１）１％可溶性澱粉０．５ゴおよび５０ ｍＭ酢酸緩
衝液（Ｉ）Ｈ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有） ０，
２５ｒｎｌに本酵素０．２５１１１７を作用させると５
分後に澱粉から５８％のマルトペンタオースが、また２
時間後に６７％のマルトペンタオースが生成する。 （２）本酵素は可溶性澱粉、アミロペクチン、テミロー
ス、デキストリン、マルトヘキサオースに作用し、プル
ラン、デキストラン、β−サイクロデキストリン、マル
トペンタオースからマルトースまでのオリゴ糖には作用
しない。 （３）本酵素は３０℃にてｐＨ６〜７が至適であり、ｐ
Ｈ６〜１０で安定である。 （４）本酵素の至適温度はｐＨ６，０で５０〜５５℃で
ある。 （５）本酵素はｐＨ５以下３０°Ｃで１時間または４°
Ｃで２４時間放置すると失活する。また、７０°Ｃでは
５０分間の加熱により失活する。 （６）本酵素は４°Ｃの５０ｆｆ１Ｍ酢酸綬衝液（ｐＨ
６，０）に対して２４時間透析することによシ完全に失
活し、失活酵素はＯａ Ｏ４を添加しても賦活しない。 また、同じ緩衝液で１０ｍＭ０ａ０４を含む溶液に対し
て透析するときは失活がない。 （７）本酵素の分子址は約９（１０００（８ＤＳ−アク
リルアミドゲル電気泳動による）である。 ２、 バチルス属に属し、下記の性質を有する新規アミ
ラーゼ生産能を有する微生物を培養し、培養物中に該ア
ミラーゼを蓄積せしめ、これを採取することを特徴とす
る新規アミラーゼの製造法。 （１）１％可溶性澱粉０．５１および５０ｍＭ酢酸綬衝
液緩衝液Ｈ６，０、１０ｍＭ ０ａ０４含有）［１，２
５履！に本酵素０．２５＋ｌ／を作用させると５分後に
澱粉から６８％のマルトペンタオースが、また２時間後
に６７％のマルトペンタオースが生成する。 （２）本酵素は可溶性澱粉、アミロペクチン、アミロー
ス、デキストリン、マルトヘキサオースに作用し、プル
ラン、デキストラン、β−サイクロデキストリン、マル
トペンタオースからマルトースまでのオリゴ糖には作用
しない。 （３）本酵素は５０°ＣにてｐＨ６〜７が至適であシ、
ｐＨ６〜１０で安定である。 （４）本酵素の至適温度はｐＨ６，０で５０〜５５℃で
ある。 （５）本酵素はｐＨ５以下５０℃で１時間または４℃で
２４時間放置すると失活する。また、７０℃では３０分
間の加熱によシ失活する。 （６）本酵素は４°Ｃの５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６，
０）に対して２４時間透析することにより完全に失活し
、失活酵素は０ａ０４を添加しても賦活しない。また、
同じ緩衝液で１０ｍＭ０ａ０４を含む溶液に対して透析
するときは失活がない。 （７）本酵素の分子量は約９００ｏ Ｏ（８ＤＳ−アク
リルアミドゲル電気泳動による）である。 五 バチルス属に属する新規アミラーゼ生産菌がバチル
ス・セレウスＮＹ −１４（ＦＩＲＭ ＢＰ−５２９）
である特許請求の範囲第２項記載の製造法。 ４、 α−１，４−グルコシド結合を含むポリサッカラ
イドまたはオリゴサツカライドに下記の性質を有する新
規アミラーゼを作用させること全特徴とするマルトペン
タオースの製造方法。 （１）１％可溶性澱粉０．５ｄおよび５０ｍＭ酢酸緩衝
液（ｐＨ６，０、１０ｍＭ ＣｊｈＱ１４含有）０．２
５ｍ１ｌｌｃ本酵素０．２５ｄを作用させると５分後に
澱粉から５Ｂ％のマルトペンタオースが、また２時間後
に６７％のマルトペンタオースが生成する。 （２）本酵素は可溶性澱粉、アミロペクチン、アミロー
ス、デキストリン、マルトヘキサオースに作用し、プル
ラン、デキストラン、β−サイクロデキストリン、マル
トペンタオースからマルトースまでのオリゴ糖には作用
しない。 （３）本酵素は３０℃にてＰＨ６〜７が至適であシ、ｐ
Ｈ６〜１０で安定である。 （４）本酵素の至適温度はｐＨ６，ｏで５０〜５５℃で
ある。 （５）本酵素はｐＨ５以下３０℃で１時間または４℃で
２４時間放置すると失活する。また、７０℃では５０分
間の加熱によシ失活する。 （６）本酵素は４°Ｃの５０ ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６
，０）Ｋ対して２４時間透析することによシ完全に失活
し、失活酵素はＯａＯ／４を添加しても賦活しない。ま
た、同じ緩衝液で１０ｍＭ０ａ０４を含む溶液に対して
透析するときは失活がない。 （７）本酵素の分子量は約９００００（ＥＩＤＳ−アク
リルアミドゲル電気泳動による）である。 ５、 α−１，４−グルコシド結合を含むポリサッカラ
イドまたはオリゴサツカライドが澱粉。 アミロペクチン、アミロースおよびデキストリンの中か
ら選ばれた少なくとも１種の物質である特許請求の範囲
第４項記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58142330A JPS6034182A (ja) | 1983-08-03 | 1983-08-03 | 新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58142330A JPS6034182A (ja) | 1983-08-03 | 1983-08-03 | 新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6034182A true JPS6034182A (ja) | 1985-02-21 |
| JPH0369509B2 JPH0369509B2 (ja) | 1991-11-01 |
Family
ID=15312836
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58142330A Granted JPS6034182A (ja) | 1983-08-03 | 1983-08-03 | 新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6034182A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103088085A (zh) * | 2012-12-31 | 2013-05-08 | 天津北洋百川生物技术有限公司 | 淀粉废水及麦芽根制备培养基及发酵普鲁兰多糖的方法 |
-
1983
- 1983-08-03 JP JP58142330A patent/JPS6034182A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103088085A (zh) * | 2012-12-31 | 2013-05-08 | 天津北洋百川生物技术有限公司 | 淀粉废水及麦芽根制备培养基及发酵普鲁兰多糖的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0369509B2 (ja) | 1991-11-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS5953038B2 (ja) | サイクロデキストリンの製造法 | |
| US5102800A (en) | Method for preparing novel cyclomaltodextrin gluccanotransferase | |
| US4628028A (en) | Novel thermostable pullulanase enzyme and method for its production | |
| JPH0118717B2 (ja) | ||
| JP3026857B2 (ja) | 新規プルラナーゼおよびその製造法 | |
| JP3360291B2 (ja) | γ−サイクロデキストリンの増収方法 | |
| JPS6034182A (ja) | 新規アミラ−ゼ，その製法およびそれを用いてマルトペンタオ−スを製造する方法 | |
| JPH04200386A (ja) | β―フラクトフラノシダーゼ及びその製造方法 | |
| JP3027449B2 (ja) | 新規シクロマルトデキストリナーゼ、その製造法及び該酵素を生産する微生物 | |
| JP2559400B2 (ja) | マルトオリゴ糖生成アミラ−ゼ及びその製造法 | |
| JPS6170985A (ja) | 新規オリゴ−１，６−グルコシダ−ゼおよびその製法 | |
| KR830002250B1 (ko) | 사이클로덱스트린(Cyclodextrine)의 제조법 | |
| JPH0761264B2 (ja) | 新規なシクロマルトデキストリナーゼ及びその製造方法 | |
| JPH0632611B2 (ja) | γ―サイクロデキストリン合成酵素及びその製造法 | |
| JPS6342696A (ja) | 糖類の製造法 | |
| JPS60188061A (ja) | シユ−ドモナスｋｏ−８９４０ | |
| JPH01228465A (ja) | 新規なβ−アガラーゼ及びその製造法 | |
| JPS61170387A (ja) | 新規マルタ−ゼおよびその製造法 | |
| JPS61274680A (ja) | サイクロデキストリングリコシルトランスフエラ−ゼの製造法 | |
| JP2866460B2 (ja) | 多糖類の糖化方法 | |
| JPS60188065A (ja) | 新規なマルトペンタオース生成酵素およびその製造方法 | |
| JPH0119878B2 (ja) | ||
| JPH0134037B2 (ja) | ||
| JPS61162169A (ja) | 新規なバシルス・ズブチルスｔｕ株 | |
| JPH0681598B2 (ja) | 澱粉の糖化によるグルコースの製造方法 |