JPS60251876A - 細胞融合装置 - Google Patents
細胞融合装置Info
- Publication number
- JPS60251876A JPS60251876A JP10836084A JP10836084A JPS60251876A JP S60251876 A JPS60251876 A JP S60251876A JP 10836084 A JP10836084 A JP 10836084A JP 10836084 A JP10836084 A JP 10836084A JP S60251876 A JPS60251876 A JP S60251876A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- electrodes
- plates
- electrode
- cell
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- Pending
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は細胞融合、特に雑種細胞のみを大量かつ自動的
に生成するための細胞融合装置に関するものである。
に生成するための細胞融合装置に関するものである。
細胞融合では遺伝的性質の異なったＡ、Ｂ２種類の細胞
から雑種細胞ＡＢを能率的に作り出す必要がある。融合
剤の代表的なものにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
がある。
から雑種細胞ＡＢを能率的に作り出す必要がある。融合
剤の代表的なものにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
がある。
ところで、この場合、雑種細胞としてＡＢのみを作り出
すだけではなく、同種細胞同志の融合ＡＡ、ＢＢも生成
する。このため各種細胞の遺伝子マーカや色素の特性を
利用して選抜が行われている。
すだけではなく、同種細胞同志の融合ＡＡ、ＢＢも生成
する。このため各種細胞の遺伝子マーカや色素の特性を
利用して選抜が行われている。
しかしながら、これらの方法は対象細胞が限定されてい
たり成功例が限られていたりして、−膜性がなく、また
、前記雑種細胞の選抜はすべて検鏡下での手作業で行う
ものであり、能率が非常に悪いという問題がある。
たり成功例が限られていたりして、−膜性がなく、また
、前記雑種細胞の選抜はすべて検鏡下での手作業で行う
ものであり、能率が非常に悪いという問題がある。
これに対して、最近、雑種細胞のみを選択的に生成する
方法として、誘電電気泳動法（ＤＥＰ）が提案されてい
る。この方法は、Ｊ、Ｖｉｅｎｋｅｎ ｅｔａｌｏ、“
Ｅ！１ｅｃｔｒｉｃ Ｆｉｅｌｄ−Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｆ
ｕｓｉｏｎ ニーＥｌｅｃｔｒ。
方法として、誘電電気泳動法（ＤＥＰ）が提案されてい
る。この方法は、Ｊ、Ｖｉｅｎｋｅｎ ｅｔａｌｏ、“
Ｅ！１ｅｃｔｒｉｃ Ｆｉｅｌｄ−Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｆ
ｕｓｉｏｎ ニーＥｌｅｃｔｒ。
−ｈｙｄｒａｕｌｉｃ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｆｏｒ
Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆＨｅｔａｒｏｋａｒｙｏｎ
Ｃｅ１ｌｓ ｉｎ Ｈｉｇｈ Ｙｉｅｌｄ”、 Ｐｌ
ａｎｔａｙＶｏｌ、 １３７． Ｎ１１ｌ、 Ｐ１１〜
１３． Ｊａｎｕａｒｙ、 １９８２にあり、その原理
を第１図にて説明する。
Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆＨｅｔａｒｏｋａｒｙｏｎ
Ｃｅ１ｌｓ ｉｎ Ｈｉｇｈ Ｙｉｅｌｄ”、 Ｐｌ
ａｎｔａｙＶｏｌ、 １３７． Ｎ１１ｌ、 Ｐ１１〜
１３． Ｊａｎｕａｒｙ、 １９８２にあり、その原理
を第１図にて説明する。
電極１，２間の電界中に、まずＢの細胞を入れ電極に２
分した後、Ａの細胞を注入してＢの細胞の先端に付着さ
せ、電気融合によりＡＢの雑種細胞を生成する方法であ
る。この方法では雑種細胞は作れるが、細胞の注入時期
や、電気パルスの印加時期は顕微鏡下で熟練者の判断を
必要とする。
分した後、Ａの細胞を注入してＢの細胞の先端に付着さ
せ、電気融合によりＡＢの雑種細胞を生成する方法であ
る。この方法では雑種細胞は作れるが、細胞の注入時期
や、電気パルスの印加時期は顕微鏡下で熟練者の判断を
必要とする。
またＡの細胞の先端に必ずＢの細胞が付着する保証がな
く、Ｂの細胞が電極に付着することもあり。
く、Ｂの細胞が電極に付着することもあり。
必要な量の融合細胞を得られないこともある。
また、これとは別に、第２図に示す如く、Ａ。
Ｂの細胞を別々に金属板３，４の孔にセットし。
両金属板を接触させた状態で、融合剤を流す方法も提案
されているが、細胞を上記金属板の孔３゜４にセットす
るのは顕微鏡下での手作業であり、煩わしい作業である
点では同じ問題がある。
されているが、細胞を上記金属板の孔３゜４にセットす
るのは顕微鏡下での手作業であり、煩わしい作業である
点では同じ問題がある。
本発明の目的は、従来の細胞融合装置における上述の如
き問題を解消し、雑種細胞を決められた量だけ大量にか
つ自動的に生成する装置を提供することにある。
き問題を解消し、雑種細胞を決められた量だけ大量にか
つ自動的に生成する装置を提供することにある。
本発明の要点は、電気泳動力を使って細胞を配列させた
平板同士を対向させることにより、細胞融合を自動化し
た点にある。
平板同士を対向させることにより、細胞融合を自動化し
た点にある。
以下、本発明を実施例をもちいて詳細に説明する。細胞
は細胞膜の分子構造によって、通常、負に帯電している
。たとえば、赤血球は一１４ｍＶ、リンパ球は一１１ｍ
Ｖに帯電している。従って、電極間に上記帯電した細胞
を置き直流電圧をがけると、細胞は正の電極に向って移
動する。これが細胞電気泳動の原理であり、本発明はこ
の原理を応用したものである。
は細胞膜の分子構造によって、通常、負に帯電している
。たとえば、赤血球は一１４ｍＶ、リンパ球は一１１ｍ
Ｖに帯電している。従って、電極間に上記帯電した細胞
を置き直流電圧をがけると、細胞は正の電極に向って移
動する。これが細胞電気泳動の原理であり、本発明はこ
の原理を応用したものである。
第３図は本発明の一実施例である細胞融合装置の要部を
示す平面図である。平板３０．および平板３１の間に融
合細胞の一方の細胞Ａ３２を導き、前述した細胞電気泳
動力を使って、平板に配列されている電極３３の電位を
正電位にすることによって吸引する。次に電極３４を電
極３３より高い電位にすることにより、細胞Ａを電極３
４に吸引する。さらに次の段階として電極３５を電ｗＡ
３４より高い電位にすることによ一す、電極３５へ吸引
する。以下この操作を繰り返えすことにより、電極３５
→電ｗ３３６→電極３７へと移していく。
示す平面図である。平板３０．および平板３１の間に融
合細胞の一方の細胞Ａ３２を導き、前述した細胞電気泳
動力を使って、平板に配列されている電極３３の電位を
正電位にすることによって吸引する。次に電極３４を電
極３３より高い電位にすることにより、細胞Ａを電極３
４に吸引する。さらに次の段階として電極３５を電ｗＡ
３４より高い電位にすることによ一す、電極３５へ吸引
する。以下この操作を繰り返えすことにより、電極３５
→電ｗ３３６→電極３７へと移していく。
細胞Ａを左側から次々に送り込むようにして、細胞Ａを
電極３５，３３へ吸着させることができる。平板３０．
３１と同じセット３８．３９が向い合せにあり、細胞Ｂ
が細胞Ａの場合と同じように電極４０，４１，４２へ吸
着できる。
電極３５，３３へ吸着させることができる。平板３０．
３１と同じセット３８．３９が向い合せにあり、細胞Ｂ
が細胞Ａの場合と同じように電極４０，４１，４２へ吸
着できる。
第３図は吸着した細胞Ａ、Ｂが３対の場合を示している
が、電極を多数１次、２次元的に配列することにより、
細胞を平板に整列させることが可能となる。
が、電極を多数１次、２次元的に配列することにより、
細胞を平板に整列させることが可能となる。
第３図の次の段階として中間の平板３１．３８を除去す
る。第４図はこのような状況を示している。電極３３と
４０．電極３５と４１．電極３７と４２は互いに対向し
ているので、中間の平板をとり去った後は、第４図に示
すように細胞Ａ、 Ｂは対向する。
る。第４図はこのような状況を示している。電極３３と
４０．電極３５と４１．電極３７と４２は互いに対向し
ているので、中間の平板をとり去った後は、第４図に示
すように細胞Ａ、 Ｂは対向する。
第４図の次の段階として、平板３０．３９を接近させ細
胞Ａ、Ｂを接触させる（第５図）。この状態で対向する
電極３３−４０．３５−４１゜３７−４２の間で高電圧
のパルスを印加するか、もしくは細胞同士の接触点にレ
ーザ光を照射し、細胞融合を実行する。
胞Ａ、Ｂを接触させる（第５図）。この状態で対向する
電極３３−４０．３５−４１゜３７−４２の間で高電圧
のパルスを印加するか、もしくは細胞同士の接触点にレ
ーザ光を照射し、細胞融合を実行する。
（発明の効果〕
以上述べた如く、本発明によれば、対象となる２組の多
数の細胞を対向的に配列して、同時に融合させることが
可能となるので、融合操作が大量かつ確実に自動的に実
施できる。
数の細胞を対向的に配列して、同時に融合させることが
可能となるので、融合操作が大量かつ確実に自動的に実
施できる。
第１図は従来の細胞融合方法切原理を示す図、第２図は
従来の細胞融合装置の断面図、第３図は本発明の原理で
ある電極へ細胞をトラップする過程を示す平面図、第４
図は中間の電極板をとり去った状態を示す平面図、第５
図は細胞融合状態を示す平面図である。 第 １ 図 葛 ２ 図 冗 ３ 図 第 ４ 図
従来の細胞融合装置の断面図、第３図は本発明の原理で
ある電極へ細胞をトラップする過程を示す平面図、第４
図は中間の電極板をとり去った状態を示す平面図、第５
図は細胞融合状態を示す平面図である。 第 １ 図 葛 ２ 図 冗 ３ 図 第 ４ 図
Claims (1)
- １、複数の電極を１次元もしくは２次元状に配列した対
向する３枚の平板間の一方に複数の細胞を導入し、電気
泳動力を使って各電極に個別に吸着し、−刃具種細胞を
上記平板間の別の一方に導入して同様に各電極に個別に
吸着したのち、中間の平板を取り払い、残り２枚の平板
電極に高電圧を印加するか、もしくは細胞の接触点にレ
ーザ光を照射することにより、一対の細胞を同時に融合
させることを特徴とする細胞融合装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10836084A JPS60251876A (ja) | 1984-05-30 | 1984-05-30 | 細胞融合装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10836084A JPS60251876A (ja) | 1984-05-30 | 1984-05-30 | 細胞融合装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60251876A true JPS60251876A (ja) | 1985-12-12 |
Family
ID=14482758
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10836084A Pending JPS60251876A (ja) | 1984-05-30 | 1984-05-30 | 細胞融合装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60251876A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6349083A (ja) * | 1986-08-20 | 1988-03-01 | Advance Co Ltd | 電気細胞融合方法 |
| DE10127247A1 (de) * | 2001-06-05 | 2002-12-19 | Eppendorf Ag | Vorrichtung und Verfahren zur elektrischen Behandlung suspendierter biologischer Partikel |
| DE10359189A1 (de) * | 2003-12-17 | 2005-07-28 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verfahren und Vorrichtung zur Elektrofusionierung von Zellen |
-
1984
- 1984-05-30 JP JP10836084A patent/JPS60251876A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6349083A (ja) * | 1986-08-20 | 1988-03-01 | Advance Co Ltd | 電気細胞融合方法 |
| DE10127247A1 (de) * | 2001-06-05 | 2002-12-19 | Eppendorf Ag | Vorrichtung und Verfahren zur elektrischen Behandlung suspendierter biologischer Partikel |
| DE10127247B4 (de) * | 2001-06-05 | 2006-12-07 | Eppendorf Ag | Vorrichtung und Verfahren zur elektrischen Behandlung suspendierter biologischer Partikel |
| DE10359189A1 (de) * | 2003-12-17 | 2005-07-28 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verfahren und Vorrichtung zur Elektrofusionierung von Zellen |
| DE10359189B4 (de) * | 2003-12-17 | 2005-12-22 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verfahren und Vorrichtung zur Elektrofusionierung von Zellen |
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