JPS60104259A - ハロペリド−ル定量用試薬 - Google Patents
ハロペリド−ル定量用試薬Info
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- JPS60104259A JPS60104259A JP21292483A JP21292483A JPS60104259A JP S60104259 A JPS60104259 A JP S60104259A JP 21292483 A JP21292483 A JP 21292483A JP 21292483 A JP21292483 A JP 21292483A JP S60104259 A JPS60104259 A JP S60104259A
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- Japan
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- haloperidol
- protein
- antibody
- blood
- conjugate
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- Granted
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
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- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は免疫化学的測定法によるハロペリドール定量用
試薬に関する。
試薬に関する。
ハロペリドールは１９５６年Ｊａｎｓｓｅｎによって開
発されたブチロフェノン系抗精神病剤である。本則は精
神分裂病にみられる精神運動興奮状態、幻覚、妄想、無
為、自閉などの症吠改丹及び繰病の治療に優れた効果を
発揮するため我が国でも広く用いられている。
発されたブチロフェノン系抗精神病剤である。本則は精
神分裂病にみられる精神運動興奮状態、幻覚、妄想、無
為、自閉などの症吠改丹及び繰病の治療に優れた効果を
発揮するため我が国でも広く用いられている。
本則の副作用として血圧降下、弛度の筋強剛、頻扉、肝
障害、＠体外路症状、眼の調節障害、貧血１食欲不振、
悪心嘔吐、呼吸困難、不眠、焦８ｇ、眠は等が報告され
ており、患者のハロペリドール血中０度が高くなると副
作用が生じやすくなる。一方、薬効を維持するのに必要
な血中濃度は５〜１５ｎｇ／ｍｌ程度といわれている。
障害、＠体外路症状、眼の調節障害、貧血１食欲不振、
悪心嘔吐、呼吸困難、不眠、焦８ｇ、眠は等が報告され
ており、患者のハロペリドール血中０度が高くなると副
作用が生じやすくなる。一方、薬効を維持するのに必要
な血中濃度は５〜１５ｎｇ／ｍｌ程度といわれている。
各患者に体重当たり同量のハロペリドールを投与しても
同じ血中濃度は得られない。これは薬剤の吸収１分布２
代謝、排泄等に個体差があるためであり、更に併用され
る薬剤がある場合はそれとの相互作用による影響も考え
られる。このため各患者における血中濃度を測定し、上
記のレベルを保つように投与量を増減させることが必要
であり、迅速、正確かつ簡便なハロペリドール定量法の
開発が望まれていた。
同じ血中濃度は得られない。これは薬剤の吸収１分布２
代謝、排泄等に個体差があるためであり、更に併用され
る薬剤がある場合はそれとの相互作用による影響も考え
られる。このため各患者における血中濃度を測定し、上
記のレベルを保つように投与量を増減させることが必要
であり、迅速、正確かつ簡便なハロペリドール定量法の
開発が望まれていた。
従来、ラジオイムノアッセイによってハロペリドールを
定量することが行われており、ハプテン抗原としては、
ハロペリドールのカルボニル部分で牛血清アルブミンと
結合させたもの（■Ｃ１ａｒｋ ｅｔ ａｌ、 、 Ｌ
ｉｆｅ Ｓｃｉ、 。
定量することが行われており、ハプテン抗原としては、
ハロペリドールのカルボニル部分で牛血清アルブミンと
結合させたもの（■Ｃ１ａｒｋ ｅｔ ａｌ、 、 Ｌ
ｉｆｅ Ｓｃｉ、 。
２０、３１９ （１９７７） ；■５ｂｏｓｔａｋ Ｃ
１ａｌ、 。
１ａｌ、 。
Ｆｅｄ、Ｐｒｏｃ、、３ｃｊ、５３１（１９７６））及
びヒドロキシ部分で牛血ｉｎアルブミンと結合させたも
の（■Ｍｉｃｈｉｅｌｓ ｅｔ ａｌ、、 Ｊａｎｓｓ
ｃｎ社報（１９７７））が提案されている。
びヒドロキシ部分で牛血ｉｎアルブミンと結合させたも
の（■Ｍｉｃｈｉｅｌｓ ｅｔ ａｌ、、 Ｊａｎｓｓ
ｃｎ社報（１９７７））が提案されている。
しかしながら、これらの化合物から間装した抗体を用い
て血中ハロペリドールを定量すると、ａ元型ハロペリド
ールとの交差（■。
て血中ハロペリドールを定量すると、ａ元型ハロペリド
ールとの交差（■。
■）又は射水溶性の未知代謝物質との交Ｚ゛（■）によ
り実際より高い値に１１）ることか報告されている（
Ａｒｃｂ、 Ｇｃｎ、 Ｉ’５ｙｃｌ＋１ａＬｒｙ。
り実際より高い値に１１）ることか報告されている（
Ａｒｃｂ、 Ｇｃｎ、 Ｉ’５ｙｃｌ＋１ａＬｒｙ。
３７、 ＩＯ［１９（１９８０）及びＥｕｒ、Ｊ、Ｄｒ
ｕｇ ＭｅＬａｂ１’ｈａｒｍａｃｏｋ ｉｎｅ ｔ、
、 ５．４５（１！１８０））。
ｕｇ ＭｅＬａｂ１’ｈａｒｍａｃｏｋ ｉｎｅ ｔ、
、 ５．４５（１！１８０））。
この弊害を避けるため、現在、−１−記試朶によってハ
［１ベリドールを定量するには、免疫反応を行う１１１
１に溶媒抽出を１１い、被検体からハロペリドールのみ
をとり出して行われているが、被検体１１ｔが多く必要
であること、よけいな手間がかかること、被検体毎に抽
出率か異なるので予めＲＩ標識ハ【１ベリトールを被検
体に加えておき抽出率を補正しなければならないこと等
の理由により、これらの試悲を日ｔＫ’検査に用いるこ
とは困難である。
［１ベリドールを定量するには、免疫反応を行う１１１
１に溶媒抽出を１１い、被検体からハロペリドールのみ
をとり出して行われているが、被検体１１ｔが多く必要
であること、よけいな手間がかかること、被検体毎に抽
出率か異なるので予めＲＩ標識ハ【１ベリトールを被検
体に加えておき抽出率を補正しなければならないこと等
の理由により、これらの試悲を日ｔＫ’検査に用いるこ
とは困難である。
本発明者等はこの欠点がなく、迅速、正確かつ簡便に血
中ハロペリドール濃度を測定し得る定量用試薬をめて鋭
意研究を行った結果、ハロペリドールのフッ素原子をア
ミ７基又はアシル化したアミ７基で置換したハプテンを
用いることにより所期の目的を達成できることを見出し
、更に研究を続けて本発明を完成した。
中ハロペリドール濃度を測定し得る定量用試薬をめて鋭
意研究を行った結果、ハロペリドールのフッ素原子をア
ミ７基又はアシル化したアミ７基で置換したハプテンを
用いることにより所期の目的を達成できることを見出し
、更に研究を続けて本発明を完成した。
本発明は、少なくとも次の成分を含むことを特徴とする
ハロペリドール定量用試薬及び化合物■又はその塩と蛋
白との結合体に関する。
ハロペリドール定量用試薬及び化合物■又はその塩と蛋
白との結合体に関する。
成分（八）；下記化合物又はその塩と蛋白との結合体を
動物に投与して生成せしめた抗体 成分（Ｂ）；下記化合物又はその塩を標識して得られる
ｅｓ識抗原 （式中Ｒは水素又は−ＣＯ−（ＣＨ２） ｒｌ−Ｒ’
ヲ２ｔわず。ここにおいてｎは１〜５の整数を、夏七′
はカルボキシル基、メルカプトノみ又はアミ７基を表わ
す。） 化合物■の塩としては、塩酸塩、硫酸塩。
動物に投与して生成せしめた抗体 成分（Ｂ）；下記化合物又はその塩を標識して得られる
ｅｓ識抗原 （式中Ｒは水素又は−ＣＯ−（ＣＨ２） ｒｌ−Ｒ’
ヲ２ｔわず。ここにおいてｎは１〜５の整数を、夏七′
はカルボキシル基、メルカプトノみ又はアミ７基を表わ
す。） 化合物■の塩としては、塩酸塩、硫酸塩。
リン酸塩、メタンスルホン酸塩等がある。
本試薬は成分（Ａ）、 （８）以外に必要に応じて、検
量腺作成用の標準へロベリドール含イｊ。
量腺作成用の標準へロベリドール含イｊ。
溶液、標識活性測定用試薬（標識が１′ｉＰ累である場
合には、例えば、基質、基質溶解液、酵素反応停止液等
）、第２抗体、緩υｆ化剤等から構成される。
合には、例えば、基質、基質溶解液、酵素反応停止液等
）、第２抗体、緩υｆ化剤等から構成される。
成分（Ａ＞における化合物Ｉと蛋白との結合体は、この
分野における常法によりＥｌ造することができる。例え
ばＲが−ＣＯ−（ＣＩＩ２）。−ＣＯＯＩＩの場合は、
活性エステルに変換しこれを蛋白のアミノ基と相合して
得る。Ｒが水素又は−ＣＯ−（ＣＨ２）。−ＮＨｚの場
合はこれと蛋白のアミン基の間を架橋する結合剤（例え
ばグルタルアルデヒド、トルエンジイソシアネート、ジ
ハロゲン化ニトロベンセン”Ｆ）を用いる。Ｒが水素の
場合はｔジアゾ化した後蛋白中のチロシン残基又はヒス
デシン残基とカップリングさせてもよい。Ｒが−ＣＯ−
（ＣＨ２） 、−５ｌｌの場合はＳＩＩＭと蛋白のアミ
ノ基の間を架信する結合剤（Ｎ−（ｍ−マレイミドベン
ゾイル」キシ）ザクシンイミドのようなマレイミドサク
シ／イミド誘４体等）を用いる。適当な蛋白としては、
アルブミン、グロブリン、ザイログルプリン、貝ヘモシ
アニン、エデスチ７等がある。
分野における常法によりＥｌ造することができる。例え
ばＲが−ＣＯ−（ＣＩＩ２）。−ＣＯＯＩＩの場合は、
活性エステルに変換しこれを蛋白のアミノ基と相合して
得る。Ｒが水素又は−ＣＯ−（ＣＨ２）。−ＮＨｚの場
合はこれと蛋白のアミン基の間を架橋する結合剤（例え
ばグルタルアルデヒド、トルエンジイソシアネート、ジ
ハロゲン化ニトロベンセン”Ｆ）を用いる。Ｒが水素の
場合はｔジアゾ化した後蛋白中のチロシン残基又はヒス
デシン残基とカップリングさせてもよい。Ｒが−ＣＯ−
（ＣＨ２） 、−５ｌｌの場合はＳＩＩＭと蛋白のアミ
ノ基の間を架信する結合剤（Ｎ−（ｍ−マレイミドベン
ゾイル」キシ）ザクシンイミドのようなマレイミドサク
シ／イミド誘４体等）を用いる。適当な蛋白としては、
アルブミン、グロブリン、ザイログルプリン、貝ヘモシ
アニン、エデスチ７等がある。
このようにして作製した結合体を適当なアジュバントと
混合してウサギ、モルモット、ヤギ、羊等の動物の皮下
又は筋肉内に投与し、血清を採取し公知の処理をなすこ
とによって成分（＾）の抗体が得られる。
混合してウサギ、モルモット、ヤギ、羊等の動物の皮下
又は筋肉内に投与し、血清を採取し公知の処理をなすこ
とによって成分（＾）の抗体が得られる。
なお成分（＾）は後に説明するようにＨ／Ｆ分離のため
に細菌の細胞壁、天然の不溶性多糖類、化学処理したデ
キストランゲル、寒天ゲル、プラスデックビーズ、アク
リルアミドゲル、ガラスピーズ、微細金鵜粉末１合成ゴ
ムチューブＩＦによって不溶化しておくことができる。
に細菌の細胞壁、天然の不溶性多糖類、化学処理したデ
キストランゲル、寒天ゲル、プラスデックビーズ、アク
リルアミドゲル、ガラスピーズ、微細金鵜粉末１合成ゴ
ムチューブＩＦによって不溶化しておくことができる。
成分（１１）の標識抗際け、化合物Ｉを適当に標識する
ことによって製造されるが、この際に用いる化合物■は
成分（＾）の化合物１と必ずしも同一であることを要し
ない。例えば成分（＾）をＲ＝ −ＣＯ−（ＣＩ（２）
２ ＣＯＯ１１ｆ）化合物から製し、成分（Ｅｌ＞を
Ｒ＝ −１１の化合物から製しても、本発明の目的を達
成することができる。
ことによって製造されるが、この際に用いる化合物■は
成分（＾）の化合物１と必ずしも同一であることを要し
ない。例えば成分（＾）をＲ＝ −ＣＯ−（ＣＩ（２）
２ ＣＯＯ１１ｆ）化合物から製し、成分（Ｅｌ＞を
Ｒ＝ −１１の化合物から製しても、本発明の目的を達
成することができる。
ｔＭ識には、酵素、放射性同位元素、蛍光体、スピン化
合物等が用いられる。酵素標識抗原の場合ならば、化合
物Ｉと酵素とを、既に説明した化合物Ｉと蛋白との結合
の場合と同様にして結合せしめることによって製造され
る。適当な酵素としては、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、
パーオキ７ダーゼ、リパーゼ。
合物等が用いられる。酵素標識抗原の場合ならば、化合
物Ｉと酵素とを、既に説明した化合物Ｉと蛋白との結合
の場合と同様にして結合せしめることによって製造され
る。適当な酵素としては、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、
パーオキ７ダーゼ、リパーゼ。
アルカリホ、スフ１ターゼ、グルコース−６−ホスフェ
ートデヒドロゲナーゼ等がある。
ートデヒドロゲナーゼ等がある。
分析を実施するにあたって、゛被検体中のハロペリドー
ルと成分（ＩＩ）とを成分（Δ）に対して競合的に抗原
抗体反応せしめた後、成分（＾）と結合している成分（
１１）と成分（＾）と結合していない成分（ＩＩ）とを
ＩＩ／Ｆ分ｍする必要がある。
ルと成分（ＩＩ）とを成分（Δ）に対して競合的に抗原
抗体反応せしめた後、成分（＾）と結合している成分（
１１）と成分（＾）と結合していない成分（ＩＩ）とを
ＩＩ／Ｆ分ｍする必要がある。
本ＲＩＰ分離には三方法がある。一つは、成分（＾）を
予め細菌の細胞壁で不溶化しておき、抗原抗体反応を行
わせる方法である。もう一つは、抗原抗体反応の前後又
は同時に成分（＾）とＩｇＧに対する抗体ＩＷ２抗体）
とを反応せしめて不溶化する方法である。第２抗体は通
常、溶液状態で用いられるが、前もって第２抗体を細菌
の細胞壁等で不溶化しておくと、その使用量が少なく、
反応時ｒ１が短時間ですむ利点がある。ＤＩＰ分殖登行
った後、沈殿又は上澄のいずれかの標識活性を標識手段
に応じた公知の方法で測定する。
予め細菌の細胞壁で不溶化しておき、抗原抗体反応を行
わせる方法である。もう一つは、抗原抗体反応の前後又
は同時に成分（＾）とＩｇＧに対する抗体ＩＷ２抗体）
とを反応せしめて不溶化する方法である。第２抗体は通
常、溶液状態で用いられるが、前もって第２抗体を細菌
の細胞壁等で不溶化しておくと、その使用量が少なく、
反応時ｒ１が短時間ですむ利点がある。ＤＩＰ分殖登行
った後、沈殿又は上澄のいずれかの標識活性を標識手段
に応じた公知の方法で測定する。
本発明の定量用試薬によれば、血液サンプルについて面
倒な前処理操作をすることなしに０５〜４０口ｇ／曹１
の血中ハロペリドールを迅速に精度よく、かつ再現性よ
（定量することができる。
倒な前処理操作をすることなしに０５〜４０口ｇ／曹１
の血中ハロペリドールを迅速に精度よく、かつ再現性よ
（定量することができる。
成分（Ａ）及び（Ｄ）の作製に用いられる化合物■のう
ちＲ＝ −ＩＩの化合物は公知であって、Ｊ、 Ｍｅｃ
ｌ、 Ｃｈｅｍ、 １８，５３３（１９７５）にその合
成法が記載されている。その他の化合物は新規であるが
、上記化合物を常法によりアシル化することにより得ら
れる。
ちＲ＝ −ＩＩの化合物は公知であって、Ｊ、 Ｍｅｃ
ｌ、 Ｃｈｅｍ、 １８，５３３（１９７５）にその合
成法が記載されている。その他の化合物は新規であるが
、上記化合物を常法によりアシル化することにより得ら
れる。
本発明を更に詳細に説明するため、以下に実施例を示す
が、勿論、本発明はこれらに限定されるものではない。
が、勿論、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１
塩酸塩の合成
４′−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−４−ｐ−クロロ
フェニルピペリジノ）ブチロフェノ７ｆ３．６ ｇと無
水フハク酸９ｇを無水ピリジン６５−１にとかじ重湯−
夜放置後、７０℃で２０分間加温し、冷後析出する沈殿
を濾取した。沈殿を水３００ ｍｌ、エタノール１５０
１、エーテル１５０１で順に洗浄し、乾燥して無色結晶
性粉末の４’ −（３−カルボキンプロピオニルアミノ
）−４−（４−ヒドロキシ−４−ｐ−りｔｊｏフェニル
ピペリジノ）ブチロフェノン７ｇを得た。
フェニルピペリジノ）ブチロフェノ７ｆ３．６ ｇと無
水フハク酸９ｇを無水ピリジン６５−１にとかじ重湯−
夜放置後、７０℃で２０分間加温し、冷後析出する沈殿
を濾取した。沈殿を水３００ ｍｌ、エタノール１５０
１、エーテル１５０１で順に洗浄し、乾燥して無色結晶
性粉末の４’ −（３−カルボキンプロピオニルアミノ
）−４−（４−ヒドロキシ−４−ｐ−りｔｊｏフェニル
ピペリジノ）ブチロフェノン７ｇを得た。
ｍ、９．２５８−２６３℃（分解）
元素分析（Ｃ２ｓｌｂｓｃ ｌ Ｎ２０ｓ）計算値
ｃｕｅ３．４９１−１；６．１８ Ｎ；５．９２ Ｃ１
；７．５０実測値 Ｃ；０３．７２ Ｈ；６．３３ Ｎ；５．９？ Ｃ１；
７．３３本品０．９ｇをジオキサン３０１１１１１ｅ
懸濁し、重湯撹拌下に濃塩酸０．２２ｍ１をジオキサン
５■１にとかした溶液を加えた後、１時間撹拌した。析
出する沈殿を濾取しエーテル１０１で洗浄後メタノール
−エーテル混液から再結晶し、無色結晶の目的物０．８
７ ｇを得た。
；７．５０実測値 Ｃ；０３．７２ Ｈ；６．３３ Ｎ；５．９？ Ｃ１；
７．３３本品０．９ｇをジオキサン３０１１１１１ｅ
懸濁し、重湯撹拌下に濃塩酸０．２２ｍ１をジオキサン
５■１にとかした溶液を加えた後、１時間撹拌した。析
出する沈殿を濾取しエーテル１０１で洗浄後メタノール
−エーテル混液から再結晶し、無色結晶の目的物０．８
７ ｇを得た。
ｍ、ｐ、２３５−２３８℃
元素分析（Ｃ２５１１２９ＣＩ Ｎ２Ｏ５・ｌｌＣｌ・
０．７５１ｆ２０）ｚ１算値 Ｃ；５７．４２ Ｈ：Ｇ、 ０７ Ｎ；５．３８ Ｃ１
；１３．５Ｇ実測値 Ｃ；５７．２４１１；（ｉ、 ２４ Ｎ；５．１５ Ｃ
１；１３．８０実施例２ 製 実施例１で合成した４’ −（３−カルボキシプロピオ
ニルアミノ＞−４−（４−ヒ１゛【１キシ−４−ｐ−ク
ロロフェニルピペリジノ）ゾヂロフェノン塩酸塩（以下
［化合物ＡＪという）０．５１ｇ、Ｎ−ヒドロキシザク
シンイミド０．１３ｇ、１−エヂルー３−（３−ジメヂ
ルアミノプロビル）カルボジイミド塩酸塩０、１１ ｇ
及び無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）６ｍｌの混合
物を室温で一夜放置した後、ＤＭＦを減圧下に留去し、
残渣をエーテル５０１で洗い、エーテル不溶部に水を加
えて析出する沈殿を濾取した。これをＤＭＦ−酢酸ニブ
ル−エーテル混液から再結晶して、化合物ＡのＮ−ヒド
ロキシコハク酸イミドニスデル０．３８ｇを無色結晶と
して得た（ｍ。
０．７５１ｆ２０）ｚ１算値 Ｃ；５７．４２ Ｈ：Ｇ、 ０７ Ｎ；５．３８ Ｃ１
；１３．５Ｇ実測値 Ｃ；５７．２４１１；（ｉ、 ２４ Ｎ；５．１５ Ｃ
１；１３．８０実施例２ 製 実施例１で合成した４’ −（３−カルボキシプロピオ
ニルアミノ＞−４−（４−ヒ１゛【１キシ−４−ｐ−ク
ロロフェニルピペリジノ）ゾヂロフェノン塩酸塩（以下
［化合物ＡＪという）０．５１ｇ、Ｎ−ヒドロキシザク
シンイミド０．１３ｇ、１−エヂルー３−（３−ジメヂ
ルアミノプロビル）カルボジイミド塩酸塩０、１１ ｇ
及び無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）６ｍｌの混合
物を室温で一夜放置した後、ＤＭＦを減圧下に留去し、
残渣をエーテル５０１で洗い、エーテル不溶部に水を加
えて析出する沈殿を濾取した。これをＤＭＦ−酢酸ニブ
ル−エーテル混液から再結晶して、化合物ＡのＮ−ヒド
ロキシコハク酸イミドニスデル０．３８ｇを無色結晶と
して得た（ｍ。
ｐ、１０４〜１６７℃）。該エステルの８０１ｇをＤＭ
Ｆ４ｍｌに溶かし、牛血清アルブミ／（ＢＳ＾） （Ｆ
ｒａｃｔｉｏａＶ ；アーマ−社、米国）２５０■ｇを
０．２Ｍリン１ｉｌＩ緩衝液（ｐＨ７，０）２０＋＋
ｌに溶解した溶液に全量加え、撹拌しながら２時間重湯
に保った。この反応液を透析チューブ（グイスキフグ社
、米国）に入れ一夜流水透析した。沈殿を生ずるのでＩ
ＮＮａ０ＩＩでｐＨを８にし、水不溶物を遠心分Ｆｌ
Ｆ （１００００ｒ、Ｐ、ｍ、、１０分間）し、上清を
水で平衡化したＳｃｐｈａｄｅｘＧ−２５（）７ルマシ
ア社、スウェーデン）をつめたカラム（φ２．９ｃｓ
８２７ｃｍ ）に添加し、水で展開し１０ｗ１ずつ分画
した。各フラクシ茸／について２８Ｏｎ園の吸光度を測
定し吸光度の高い７ラクシ、７Ｎｏ、１１〜１６を集め
限外濾過器（限外濾過ｇ！ＰＭ＝３０使用）（アミコツ
社。
Ｆ４ｍｌに溶かし、牛血清アルブミ／（ＢＳ＾） （Ｆ
ｒａｃｔｉｏａＶ ；アーマ−社、米国）２５０■ｇを
０．２Ｍリン１ｉｌＩ緩衝液（ｐＨ７，０）２０＋＋
ｌに溶解した溶液に全量加え、撹拌しながら２時間重湯
に保った。この反応液を透析チューブ（グイスキフグ社
、米国）に入れ一夜流水透析した。沈殿を生ずるのでＩ
ＮＮａ０ＩＩでｐＨを８にし、水不溶物を遠心分Ｆｌ
Ｆ （１００００ｒ、Ｐ、ｍ、、１０分間）し、上清を
水で平衡化したＳｃｐｈａｄｅｘＧ−２５（）７ルマシ
ア社、スウェーデン）をつめたカラム（φ２．９ｃｓ
８２７ｃｍ ）に添加し、水で展開し１０ｗ１ずつ分画
した。各フラクシ茸／について２８Ｏｎ園の吸光度を測
定し吸光度の高い７ラクシ、７Ｎｏ、１１〜１６を集め
限外濾過器（限外濾過ｇ！ＰＭ＝３０使用）（アミコツ
社。
米国）で濾過して約２０１まで濃縮し凍結乾燥し乾燥品
２００１ｇを得た。
２００１ｇを得た。
実施例３
調製
４′−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−４−ｐ−クロロ
フェニルピペリジノ）ブヂＩＪフェノ／（以下「化合物
Ｂ」という＞６０１ＥをＤＭＦ４ｍｌｋ：溶解し、０．
２Ｎ 塩ｆｆ１４．１３ｍＢ＝１＜１１ｒ［１８ｍｇ及
び精製水を加えて１３．２ｍｌとし水冷した。亜硝酸ソ
ーダ溶１ｆＲ（７，１ｍｇ／■１）ａ ２ ｍｌを上゛
紀反応液に加え水冷下１時間保つた。牛血清グロブリン
（Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｌ ；シグマ社、米国）２５０−
ｇを０． ＯＩ Ｍホウ酸緩衝液（ｆ）Ｈａｌｊ’−）
２５ｍ１に溶解し、水冷下撹拌しながら、さきに反応
させた溶液を３０分間にわたって徐々に加えた。この間
０．２Ｎ Ｎａ０１（を加えながらｐ Ｈを９．０に保
った。反応液は水冷下で４時間保った。その後０．０％
ＮａＣ１２Ｉに対して３日間透析し、この間外液を６回
交換した。透析内液をとり出し、凍結乾燥し乾燥物とし
て２８０ ｍｇを得た。
フェニルピペリジノ）ブヂＩＪフェノ／（以下「化合物
Ｂ」という＞６０１ＥをＤＭＦ４ｍｌｋ：溶解し、０．
２Ｎ 塩ｆｆ１４．１３ｍＢ＝１＜１１ｒ［１８ｍｇ及
び精製水を加えて１３．２ｍｌとし水冷した。亜硝酸ソ
ーダ溶１ｆＲ（７，１ｍｇ／■１）ａ ２ ｍｌを上゛
紀反応液に加え水冷下１時間保つた。牛血清グロブリン
（Ｆｒａｃｔｉｏｎｌｌ ；シグマ社、米国）２５０−
ｇを０． ＯＩ Ｍホウ酸緩衝液（ｆ）Ｈａｌｊ’−）
２５ｍ１に溶解し、水冷下撹拌しながら、さきに反応
させた溶液を３０分間にわたって徐々に加えた。この間
０．２Ｎ Ｎａ０１（を加えながらｐ Ｈを９．０に保
った。反応液は水冷下で４時間保った。その後０．０％
ＮａＣ１２Ｉに対して３日間透析し、この間外液を６回
交換した。透析内液をとり出し、凍結乾燥し乾燥物とし
て２８０ ｍｇを得た。
実施例４
化合物Ｂとβ−Ｄ−ガラクトシダーゼとの結合体の調製
大腸菌南米β−叶ガラクトシダーゼ（べ一り７が一社、
西独＞１ｍｇ（蛋白として）を０．２Ｍリン酸緩衝液（
ｐＨ７、０）４ ｍｌに溶解し、これに化合物１３５ｍ
ｇをＤＭＦｌｍｌに溶解した溶液０．２１を添加し、次
いで撹拌しながら１．５％グルタルアルデヒド水溶液０
．２ｍｌを添加し室温２時間撹拌した。乙の液を０．０
２ Ｍリンｆｉｌ衝液（ｐＨ７、０）−α９％ＮａＣ１
（以下［α０２ＭＰＩＩＳＪという）で平衡化した５ｅ
ｐｈａｄｅｘ Ｇ２５カラム（ファルマシア社、スウェ
ーデン）（φ２ｃｍＸ ２５ｃ■）にかけ０．０２＋、
ＩＰＩＩＳで溶出し、５１ずつ分画した。＃索活性の高
いＮｏ、６〜８フラクシＲンを集め、ＰＭ−３０較を用
いて限外濾過した。股上に残った残渣を０．０２ＭＰ
１３５（ｐＨ７，０＞１００ｍｌで洗浄した後０．９％
ＮａＣ１−０，１％Ｂ Ｓ Ａ −０，１％Ｎ ａ Ｎ
ｓ含イ丁０．０４Ｍリン酸緩衝液（Ｐｉｔ ７．０）
（以下ｒ ｌ１ｕＮａｒＡＪという）８−１できり出し
最終容量１０１とした。これをｅ［抗原原液とし、冷蔵
庫中に保存した。
西独＞１ｍｇ（蛋白として）を０．２Ｍリン酸緩衝液（
ｐＨ７、０）４ ｍｌに溶解し、これに化合物１３５ｍ
ｇをＤＭＦｌｍｌに溶解した溶液０．２１を添加し、次
いで撹拌しながら１．５％グルタルアルデヒド水溶液０
．２ｍｌを添加し室温２時間撹拌した。乙の液を０．０
２ Ｍリンｆｉｌ衝液（ｐＨ７、０）−α９％ＮａＣ１
（以下［α０２ＭＰＩＩＳＪという）で平衡化した５ｅ
ｐｈａｄｅｘ Ｇ２５カラム（ファルマシア社、スウェ
ーデン）（φ２ｃｍＸ ２５ｃ■）にかけ０．０２＋、
ＩＰＩＩＳで溶出し、５１ずつ分画した。＃索活性の高
いＮｏ、６〜８フラクシＲンを集め、ＰＭ−３０較を用
いて限外濾過した。股上に残った残渣を０．０２ＭＰ
１３５（ｐＨ７，０＞１００ｍｌで洗浄した後０．９％
ＮａＣ１−０，１％Ｂ Ｓ Ａ −０，１％Ｎ ａ Ｎ
ｓ含イ丁０．０４Ｍリン酸緩衝液（Ｐｉｔ ７．０）
（以下ｒ ｌ１ｕＮａｒＡＪという）８−１できり出し
最終容量１０１とした。これをｅ［抗原原液とし、冷蔵
庫中に保存した。
実施例５
大腸菌由来β−〇−ガラクトシダーゼ
（ベーリ／ガー社、西独ン１ｍｇ（ｆｆｌ白として）を
０．２ Ｍリン＠緩衝液（ｐＨ７、０）Ｏ＋＋１に溶解
し、これに実施例２第１バラグラフで調製した化合物Ａ
のＮ−ヒドロキシ０／１り酸イミドエステル２■ｇをＤ
Ｍ Ｆ １ｍｌに溶解した溶液α５１を添加し、室温
２時間撹拌した。この液をα０２Ｍ Ｅ’ＢＳ２ １に
対して２４時間透析した。透析内液をとり出し遠心分離
して不溶物を除去した。上清液を限外濾過器（限外濾過
膜ＰＭ− ３０；アミコン社、米国）で濾過し、０．０２ＭＰＩ）
Ｓ５０ｍｌで洗浄し、０．１％ｌｌ５Ａ含存０．０２Ｍ
ＰＢＳ５ｗ＋ｌ”ｔ’とり出し、０．０２Ｍ ＰＢＳ
で平衡化した５ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ ２５ ＜スーパー
ファイン〉（ファルマシア社、スウェーデン）をつめた
カラム（φ２．７ ｃｓ Ｘ ２５Ｃ１１）に添加し同
上緩衝液で展開し、１アラクシ１ノ５ｍｌずつ分画した
。酵素活性の高いＮｏ、７〜９フラクシミンを集め、こ
れにＢＳＡ Ｉ ５ ｍｇ、 ＮａＮ３１５ ｍｇを加
え４℃で保存した。
０．２ Ｍリン＠緩衝液（ｐＨ７、０）Ｏ＋＋１に溶解
し、これに実施例２第１バラグラフで調製した化合物Ａ
のＮ−ヒドロキシ０／１り酸イミドエステル２■ｇをＤ
Ｍ Ｆ １ｍｌに溶解した溶液α５１を添加し、室温
２時間撹拌した。この液をα０２Ｍ Ｅ’ＢＳ２ １に
対して２４時間透析した。透析内液をとり出し遠心分離
して不溶物を除去した。上清液を限外濾過器（限外濾過
膜ＰＭ− ３０；アミコン社、米国）で濾過し、０．０２ＭＰＩ）
Ｓ５０ｍｌで洗浄し、０．１％ｌｌ５Ａ含存０．０２Ｍ
ＰＢＳ５ｗ＋ｌ”ｔ’とり出し、０．０２Ｍ ＰＢＳ
で平衡化した５ｅｐｈａｄｅｘ Ｇ ２５ ＜スーパー
ファイン〉（ファルマシア社、スウェーデン）をつめた
カラム（φ２．７ ｃｓ Ｘ ２５Ｃ１１）に添加し同
上緩衝液で展開し、１アラクシ１ノ５ｍｌずつ分画した
。酵素活性の高いＮｏ、７〜９フラクシミンを集め、こ
れにＢＳＡ Ｉ ５ ｍｇ、 ＮａＮ３１５ ｍｇを加
え４℃で保存した。
実施例６
へＵペリドール抗体の調製
実施例２で調製した化合物Ａと牛血清アプミンとの結合
体を０．９％ＮａＣＩに１％ρ「になるように溶かし、
等量のフロイントの″全アジュバントを加えてエマルジ
ョン化しものをウサギの足随左右各１か所、ずデ部皮８
か所に０．１１ずつ注射した。１２週間後に背部皮下５
か所に０，１１ずつ注射した。その後週間毎に６回注射
を行い、最終注射の１０１後にｇａｌ＋脈より全採血す
ることによって抗、ロペリドール血１ｉ１７を得たり 実施例７ 抗つザギｌ［Ｇ山羊血清の不溶化 抗つサギＩｇＧ山羊血清（マイルス社、米国）５１に０
．ＩＭＩＪ７ｆｉｌｌ衝液（ｐＨ７、０）５ ｍｌを加
え、水冷下これに飽和硫安溶液１０１シ加え２０分間撹
拌した後、＋２（１００Ｘ ｇ、 １０分間遠心分離し
沈殿を集めた。この操作を２回操１返した後の沈殿物を
０．１ Ｍす／Ｗｔ緩ひｉ液（Ｐ１１７、Ｏ）５ｍｌｋ
： 溶解し１１０２Ｍ ＰＢＳ２ １に：対して２４時
間透析し抗つサギＩｇＧ山羊血清の１し ＩｇＧ＠分を
得た（ ０．０ｍ１）、抗つ＋ −ｔ’ ＩｇＧ山羊血
ｉｆｆのＩｇＧ画分８１１．Ｌａｃｔｏｂ＆ｃｉｌｌｕ
ｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ１０ １７）細胞壁１００ ｍ
ｇ、水１２．６ ｍｌ、 Ｉ Ｍ酢ｍ１ａＮ液（ｐＨ４
，９） １ ｍｌを混合し撹拌しながら２５Ｆ ％グル
タルアルデヒド水治液０．４１を加え室温下２時間撹拌
した。この反応液を１２０００ｘ ｇ。
体を０．９％ＮａＣＩに１％ρ「になるように溶かし、
等量のフロイントの″全アジュバントを加えてエマルジ
ョン化しものをウサギの足随左右各１か所、ずデ部皮８
か所に０．１１ずつ注射した。１２週間後に背部皮下５
か所に０，１１ずつ注射した。その後週間毎に６回注射
を行い、最終注射の１０１後にｇａｌ＋脈より全採血す
ることによって抗、ロペリドール血１ｉ１７を得たり 実施例７ 抗つザギｌ［Ｇ山羊血清の不溶化 抗つサギＩｇＧ山羊血清（マイルス社、米国）５１に０
．ＩＭＩＪ７ｆｉｌｌ衝液（ｐＨ７、０）５ ｍｌを加
え、水冷下これに飽和硫安溶液１０１シ加え２０分間撹
拌した後、＋２（１００Ｘ ｇ、 １０分間遠心分離し
沈殿を集めた。この操作を２回操１返した後の沈殿物を
０．１ Ｍす／Ｗｔ緩ひｉ液（Ｐ１１７、Ｏ）５ｍｌｋ
： 溶解し１１０２Ｍ ＰＢＳ２ １に：対して２４時
間透析し抗つサギＩｇＧ山羊血清の１し ＩｇＧ＠分を
得た（ ０．０ｍ１）、抗つ＋ −ｔ’ ＩｇＧ山羊血
ｉｆｆのＩｇＧ画分８１１．Ｌａｃｔｏｂ＆ｃｉｌｌｕ
ｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ１０ １７）細胞壁１００ ｍ
ｇ、水１２．６ ｍｌ、 Ｉ Ｍ酢ｍ１ａＮ液（ｐＨ４
，９） １ ｍｌを混合し撹拌しながら２５Ｆ ％グル
タルアルデヒド水治液０．４１を加え室温下２時間撹拌
した。この反応液を１２０００ｘ ｇ。
２ １０分間遠心分離することによって沈殿を集］ め
、コノ沈殿’ｔｔ Ｈｕ４ｆｅｒＡ ５０ｗ１ｔ’ ３
Ｄｏ遠心洗浄した。この沈殿を上記緩衝液に懸濁して
２５■１とし、これを不溶化抗つサギＩｇＧ山羊血清と
した。
、コノ沈殿’ｔｔ Ｈｕ４ｆｅｒＡ ５０ｗ１ｔ’ ３
Ｄｏ遠心洗浄した。この沈殿を上記緩衝液に懸濁して
２５■１とし、これを不溶化抗つサギＩｇＧ山羊血清と
した。
実施例８
血中ハσペリドール測定キットの製造
（ｌキット ５０回分）
標準溶液
ハロペリドール４．０１ｇをメタノール１００ｍ１２
に溶解し更にメタノールで１０倍希釈（４μｇ／ｌ）し
た。人血清にｌ７１００量添加して標べへ溶液４０（ハ
ロペリドール４０ｎｇ／Ｎ）を調製した。人血清９９に
メタノールを１−の割合で加えた溶液を調製し、これで
標準溶液４０を倍数希釈してｗ窄溶液２０，１０，５，
２．５゜１．２５及び０．０２５を調製した。標準溶液
０は人血清９９にメタノールを１の割合で加えた溶液を
用いた。
に溶解し更にメタノールで１０倍希釈（４μｇ／ｌ）し
た。人血清にｌ７１００量添加して標べへ溶液４０（ハ
ロペリドール４０ｎｇ／Ｎ）を調製した。人血清９９に
メタノールを１−の割合で加えた溶液を調製し、これで
標準溶液４０を倍数希釈してｗ窄溶液２０，１０，５，
２．５゜１．２５及び０．０２５を調製した。標準溶液
０は人血清９９にメタノールを１の割合で加えた溶液を
用いた。
酵素標識抗原
実施例４で調製した探識抗原堅液１４０μにｎｕｒｆｅ
ｒＡ １１．８６ ｍｌを加えて希釈した。
ｒＡ １１．８６ ｍｌを加えて希釈した。
これを１５−１容態色びんに詰めた。
抗血清
実施例６で調製した抗血清をｒｌｕ［ｅｒＡで１０００
倍希釈したもの５．５１を１０ｍ１容褐色びんに詰めた
。
倍希釈したもの５．５１を１０ｍ１容褐色びんに詰めた
。
不溶化第２抗体
実施例７で調製した不溶化抗つザギＩ ｇ Ｇ ＋Ｉｊ
羊血清を０．５％Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａ
ｎｔａｒｕｓの細胞壁−ｎｕｒｆｅｒＡで１０倍希釈し
たもの１１ｍ１ヲ１５ ｍｌ容褐色びんに詰めた。
羊血清を０．５％Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａ
ｎｔａｒｕｓの細胞壁−ｎｕｒｆｅｒＡで１０倍希釈し
たもの１１ｍ１ヲ１５ ｍｌ容褐色びんに詰めた。
基質
０．８％２−二トロ７エエルーβ−■）−ガラクトピラ
ノシド−４０％エヂレ／グリコールー ｎｕ（ｒｅｒＡ
５．５ ｍｌを１０ｍ１容褐色びんに詰めた。
ノシド−４０％エヂレ／グリコールー ｎｕ（ｒｅｒＡ
５．５ ｍｌを１０ｍ１容褐色びんに詰めた。
酵素反応用緩衝液
［１ｕｆｆｅｒＡ ２ Ｂ ｍｌを３０ｍ１容掲色びん
に詰めた。
に詰めた。
１ 反応停止液
１Ｍリン酸２カリ言ンムーＮ ａｏＩ夏緩衝液（Ｐｌｌ
ｌｌ、０）２０鵬１を３ｏ■１容プラスブーツクびんに
詰めた。
ｌｌ、０）２０鵬１を３ｏ■１容プラスブーツクびんに
詰めた。
実施例９
血中ハロベリドール定量法
実施例８で調製したキットを用い次の手順に従って人血
中へロペリドールの定量を行った。
中へロペリドールの定量を行った。
別々の試験管に入れた検体及び標準溶液ｌＯμｍにそれ
ぞれ標識抗原２００μｍ、次いで抗血清１００μｍを加
え室温１０分間放置後、不溶化第２抗体を撹拌しながら
２００μｍずつ加え全試験管を撹拌後３７℃３０分間イ
／キュベーションした。０９％ＮａＣ１４ｍ１を加え遠
心分ｍ （１０００Ｘ ｇ、１０分子ｎｌ） Ｌ、テ上
ｉｎを除去した。酵素反応用緩衝液０．５１を全試験管
に加え沈殿を均一に分散させ３７°Ｃの恒温槽に２〜３
分漬け、予熱した後基質溶液０．１１を加え３７℃３０
分間インキュベージ只ンした。酵素反応停止液層液を精
製水で１０倍希釈したもの２．５１を各試験管に加え酵
素反応を停止した。３０００ｒ、ｐ、ｍ、、１０分間遠
心分離し十清液について精製水を対照に４１０ ｎ園の
吸光度を測定した。標準曲線（第１図）から検体中へロ
ベリドール濃度をめた。
ぞれ標識抗原２００μｍ、次いで抗血清１００μｍを加
え室温１０分間放置後、不溶化第２抗体を撹拌しながら
２００μｍずつ加え全試験管を撹拌後３７℃３０分間イ
／キュベーションした。０９％ＮａＣ１４ｍ１を加え遠
心分ｍ （１０００Ｘ ｇ、１０分子ｎｌ） Ｌ、テ上
ｉｎを除去した。酵素反応用緩衝液０．５１を全試験管
に加え沈殿を均一に分散させ３７°Ｃの恒温槽に２〜３
分漬け、予熱した後基質溶液０．１１を加え３７℃３０
分間インキュベージ只ンした。酵素反応停止液層液を精
製水で１０倍希釈したもの２．５１を各試験管に加え酵
素反応を停止した。３０００ｒ、ｐ、ｍ、、１０分間遠
心分離し十清液について精製水を対照に４１０ ｎ園の
吸光度を測定した。標準曲線（第１図）から検体中へロ
ベリドール濃度をめた。
実施例１０
血中ハロペリドールの定量
実施、例８における酵素標識抗原及び抗血清の代わりに
次のものを使用して血中ハロペリドール測定キットを製
造した。
次のものを使用して血中ハロペリドール測定キットを製
造した。
酵素標識抗原
実施例５で調製した標識抗原原液３００μｍに８ｕｒｒ
ｅｒＡ １１．７ ｍｌを加えて希釈した。
ｅｒＡ １１．７ ｍｌを加えて希釈した。
これを１５１容褐色びんに詰めた。
抗血清
化合物Ｂと牛丸清グロブリンとの結合体（実施例３で調
製）を用い、実施例６と同様に処理して得た抗血清をＢ
ｕｔｔｅｒ八で１０００ 倍希釈したもの５．５１を１
０１容褐色びんに詰めた。
製）を用い、実施例６と同様に処理して得た抗血清をＢ
ｕｔｔｅｒ八で１０００ 倍希釈したもの５．５１を１
０１容褐色びんに詰めた。
上記キットを用いて、実施例９と同じ手順に従って傑作
し血中ハロペリドール濃度を測定した。この方法により
０．５〜４０ ｎｇ／ ｍｌの血中ハロペリドールの定
量が可能であった。
し血中ハロペリドール濃度を測定した。この方法により
０．５〜４０ ｎｇ／ ｍｌの血中ハロペリドールの定
量が可能であった。
実施例１１
ガスクＩフマトグラフ法との相関
ハロペリドールを投与された患者血清サンプル３５例に
ついて、それぞれ実施例９の方法及びガスクロマトグラ
フ法により血清中ハロペリドール０度を測定した。
ついて、それぞれ実施例９の方法及びガスクロマトグラ
フ法により血清中ハロペリドール０度を測定した。
結果は第２図に示すように、相関係数ｒ＝０、９８ Ｅ
！ 、回帰式Ｙ ＝ １． ＯＩ Ｘ ＋ ０．３７で
あり、両者はよく相関し、本発明のＥＩＡキットによっ
て血中ハロペリドールの測定が正確にできることが認め
られた。
！ 、回帰式Ｙ ＝ １． ＯＩ Ｘ ＋ ０．３７で
あり、両者はよく相関し、本発明のＥＩＡキットによっ
て血中ハロペリドールの測定が正確にできることが認め
られた。
第１図は本発明試薬を用いて作成したハ「ｌベリドール
の検ｆｆｌ腺であり、第２図は血中ハロペリドール濃度
測定における本発明試薬とＧ Ｌ Ｃ法との相関関係で
ある。 特許出願人 大日本製薬株式会社 代 理 人 小 島 −晃 ・′１ｊｌ（）′ｊ
の検ｆｆｌ腺であり、第２図は血中ハロペリドール濃度
測定における本発明試薬とＧ Ｌ Ｃ法との相関関係で
ある。 特許出願人 大日本製薬株式会社 代 理 人 小 島 −晃 ・′１ｊｌ（）′ｊ
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１） 少なくとも次の成ｌｉ）を含むことを４７徴と
するハロペリドール定量用試薬 成分（＾）；下記化合物又はその塩と蛋白との結合体を
動物に投与して生成せしめた抗体成分（Ｂ）；下記化合
物又はその塩を標識して得られる標識抗原 （式中ｒ＜ Ｉｔ水索又Ｌｉ −ＣＯ−（ＣＩＩ２）
、Ｉ−Ｒ’を表わす。ここにおいてｎは１〜５の整数を
、Ｒ′はカルボキシル基、メルカプト基又はアミン基を
表わす。） （２） 成分（＾）の抗体が、Ｒが水素又は−Ｃｏ −
（ＣＨ２） ２−Ｃ０ＯＨである化合物又はその塩と牛
血清アルブミン又は牛血清グロブリンとの結合体から調
製したものであり、成分（Ｂ）の標識抗原が、Ｒが水素
又は−ＣＯ−（ＣＨ，） ＊−ＣＯＯＨである化合物又
はその塩をβ−Ｄ−ガラクトシダーゼで標識して得られ
たものである特許請求の範囲第１項記載の試薬 （３） 下記化合物又はその塩と蛋白との結合体 （式中Ｒは水素又は−Ｃｏ （ＣＩＩ２） Ｌｌ−Ｒ’
を表わす。ここにおいてｎは１〜５の整数を、Ｒ′はカ
ルボキシル基、メルカプト基又はアミ７基を表わす。） （４） Ｒが水素又は−ＣＯ−（ＣＨｚ） ２−Ｃ０Ｏ
Ｈである特許請求の範囲第３現記戦の結合体（５） 蛋
白がアルブミン又はグロブリンである特許請求の範囲第
３項又は第４ ＪＪｌ紀戟の結合体 （６） 蛋白が酵素である特許請求の範囲第３項又は第
４項配転の結合体 （７） 酵素がβ−Ｄ−ガラクトシダーゼである特許請
求の範囲第６項記社の結合体
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21292483A JPS60104259A (ja) | 1983-11-11 | 1983-11-11 | ハロペリド−ル定量用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21292483A JPS60104259A (ja) | 1983-11-11 | 1983-11-11 | ハロペリド−ル定量用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60104259A true JPS60104259A (ja) | 1985-06-08 |
| JPH0317300B2 JPH0317300B2 (ja) | 1991-03-07 |
Family
ID=16630537
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21292483A Granted JPS60104259A (ja) | 1983-11-11 | 1983-11-11 | ハロペリド−ル定量用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60104259A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008068991A (ja) * | 2006-09-15 | 2008-03-27 | Mesac Corp | 静電植毛室 |
-
1983
- 1983-11-11 JP JP21292483A patent/JPS60104259A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008068991A (ja) * | 2006-09-15 | 2008-03-27 | Mesac Corp | 静電植毛室 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0317300B2 (ja) | 1991-03-07 |
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