JPS5991848A - カゼインの分画方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はカゼインの分画方法、更に詳しくは、全カゼイ
ンをに一カゼインを主成分とする画分と、αＳ−カゼイ
ンおよびβ−カゼインを主ｒ分とする画分とに分画する
方法に関する。

乳のタンノ？り質の主成分であるカゼインは。

主としてα４％−ｓβ−およびに−カゼインから構成さ
れておシ、通常の状態（すなわち、室温下、ｐＨ７付近
、カルシウム含量２０〜３０オリモル）では相互に複合
体を形成し、更にそれらが集合したミセルの形態で存在
する。したがって、このようなミセル形態のカゼインを
上記各成分に分画するには和尚複雑な処理が必要となる
。例えば、従来、実験室的にはカゼインを尿素のような
食品添加剤として認められてない試薬の溶液に溶かした
ものについて沈殿法によシ分画する方法が知られている
が、この方法では遠心分離による操作を何回も縁返して
行ガわ匁ければならず、しかも分画によシ得られる各成
分の収率も極めて低いという欠点がみられる。

因みに、従来提案されている工業的に可能なカゼインの
分画技術としては、全カゼイン溶液に２５０ミリモルの
カルシウム塩を室温下に添加してα、−カゼインを分画
する方法（特公昭４６−４１５７３号）、全カゼイン溶
液に７５ミリモルのカルシウムを添加してα８−カゼイ
ンを分画する方法Ｃ特開昭５４−９５７６８号）、全カ
ゼイン溶液に５００ミリモルのカルシウムを添加してに
一カゼインヲ分画する方法（Ｊ、　Ｆｏｏｃｌ　Ｓｃ１
．４３．３９７（１９７８）　）等がみちれるが、これ
らの方法ではいずれも大量のカルシウムを添加する必要
があシ、加うるに分画して得られる各カゼインの純度お
よび収率も必ずしも良好とは言えず、場合によっては分
画後のカルシウムの除去工程が煩雑となる欠点がある。

また、全カゼイン溶液に０．１モルのリン酸緩衝液を用
いてゲルｒ過を行なって各カゼインに分画する試みもみ
られるが（Ｊ、　Ｄａｉｒｙ　Ｓｅｔ、　５５．３０（
１９７２）　：ｌ、シカシ、この方法では、用いる緩衝
液のイオン強度が高い九めにに一カゼインとαＳ−或い
はβ−カゼインが複合体を形成するので、集用可能な純
度を有するカゼイン成分が得られず、しかも食品添加物
として認められていまいエチレンジアミンテトラ酢酸（
ＥＤＴＡ）を使用しなければならないという欠点がある
。

上述したようなカゼインの分画操作の煩雑さおよび高純
度での分画の困難さの故に、従来はカゼインを乳中の一
成分としてその″！、マ市乳、チーズ。

ヨーグルト等のよう外孔加工品に利用するか、もしくは
凝似チーズ製品の製造に全カゼインのままで利用してい
るのが現状である。

而して、近年カゼインを構成する各成分の特異的な生理
活性に鎧み、これら成分を単独で利用するととが考慮さ
れるようになった。例えば、アンジオテンシン変換酵素
阻害因子の一つとしてカゼインから分離されるペプチド
が知られており、このペプチドはαＳ−カゼイン由来の
ものであるが。

該ベプチｒを全カゼインから分離する（・？７け、β−
又けに一カゼイン由来の多くのペプチドと分離すること
が必要となるため相当に煩雑な工程を要するようになる
。

ところが、上記ペプチドをα８−カゼインを出発物質と
してこれ２５＝ら分離し得るように序れは工程が非常に
簡略化されるととＫなる。−！！、た。αＳ−カゼイン
もしくはβ−カゼインに由来する乳化力の高いペプチド
も全カゼインを出発物質とするよりも、分画されたαＳ
−もしくはβ−カゼインを出発物質としてとれらから調
製した方が工程を簡易化し得るようになる。

更に、α畠−カゼインには抗原性があるため、該カゼイ
ンを分画除去したカゼインから調製された育児粉乳はい
わゆるミルクアレルギーを防止するとともにそのカゼイ
ン組成も母乳のそれに近伊するようになシ、このような
育児粉乳の調製法も提案されている（特開昭５４−９５
７６８号）６また、β−カゼインから単離される、鎮痛
活性を有するペプチドであるβ−カッモルフインの調製
本全カゼインを出発物質とすゐよシも分画されたβ−カ
ゼインを出発物πとする方が得策である。

なお、近年大豆タンノｑり質の利用として注目されてき
ている豆乳の製造に際しても、に−カゼインがα、−或
いはβ−カゼインと複合体を形成してカルシウムによる
これらカゼインの沈殿を防止するのみならず、大豆タン
ノｑり質のカルシウムによる沈殿を防止するのに役立つ
ものであシ、このよりなに−カゼインの性質を利用した
豆乳の製造法も提案されている（特開昭５４−９５７７
１号）。

上述したよう々、α８−１β−並びにに−カゼインの種
々な機能に鑑み、とれらの各カゼインの全カゼインから
の分画が容易となればこれら各カゼインの工業的利用の
うえ極めて有利であると言える。

本発明は、上述したような状況に鑑みなされたものであ
って、全カゼインから主としてｔ−カゼインからなる両
分と主としてαＳ−およびβ−カゼインからなる両分を
簡易な手法にょシ有利に分画し得る方法を提供すること
にある。

本発明者は、さきに示した従来提案された方法が、カゼ
インに大量のカルシウムを添加するとそのミセル形態が
部分的に破壊されるという原理に基づいているのに対し
て、カゼインにおけるミセルの形成にけに一カゼインの
存在が不可欠であることからカゼインからますに一カゼ
インを除去するととが分画上必要であるとの観点に基づ
いて検討した結果、本発明をなすに至った。すなわち。

本発明は従来の分画技術とは本質的に異なる原理に基づ
くと言える。以下本発明の詳細な説明する。

本発明の主要な特徴は、全カゼインを脱イオン水もしく
は１価の塩濃度０．０２以下で２価のアルカリ土類金属
塩を含まない緩衝液に溶解して得られる溶液をデル濾過
又は限外濾過の手法を適用してに一カゼインを主成分と
する両分と、α８−カゼインおよびβ−カゼインを主成
分とする両分とに分けることにある。

本発明ではまず全カゼインを、脱イオン水（ｐＨ’ｙ付
近）もしくはイオン強度０．０２以下のｐＨ７付近の緩
衝液に溶解してカゼイン溶液を調製する。このカゼイン
溶液の調製に尚って脱イオン水もしくは上記緩衝液を用
いるのは、該溶液中の１価の塩濃度が０．０２を越える
と或いは２価のアルカリ土類金属塩が存在するとに一カ
ゼインはα、−やβ−カゼインと複合体を形成すること
に因υに一カゼインを分画除去することが困難となるこ
とに基づく。したがって、上記緩衝液はｐＨ７付近のも
のであればよいが、しかし、塩化す）　ＩＪウムや塩化
カリウムのよりな１価の塩濃度が０．０２モル以下であ
って、塩化カルシウムのような２価のアルカリ土類金属
塩を含んでいてはならない。

また、全カゼインの上記溶解に肖っては、得られる溶液
の濃度を１乃至３０％にするととが好ましい。

なお、ここで言う１全カゼイン〃とは、酸カゼインをｐ
Ｈ７前後に調整して再溶解したもの、全乳や脱脂乳から
酸カゼインを調製してｐＨを７付近に調整したもの、市
販のソーダカゼイン、並びにカルシウムカゼイネートを
ｐＨ調整するか又はキレート剤で処理して再溶解させた
後脱塩によシカルシウムを除去したものを包含する。

また、このような全カゼインを溶解するのに用いる前記
緩衝液としてはイミダゾール緩衝液、酢酸ナトリウム緩
衝液、トリス緩衝液等を例示し得る。

本発明では上述のようにして調製したカゼイン溶液をゲ
ル濾過もしくは限外濾過に付する。このゲル濾過もしく
は限外濾過による処理は０乃至１０Ｃの温度下で行かう
とゲル濾過でボイドボリウムに溶出する両分と他の両分
に分画すると′ｅｔ−カゼインは主としてボイドボリウ
ム画分となシ、α８−およびβ−カゼインは主として他
の両分と力って両者の分画が容易となる。又、限外濾過
でもに一カゼインは主としてリチンテートの画分として
、α−一およびβ−カゼインは主としてｒ液の画分とし
て分画される。因みに、ゲル濾過又は限外濾過を室温以
上で行なうと、β−カゼインは温度上昇に伴なって自己
会合するため、上記ボイドボリューム画分並びにリチン
テート画分はに一カゼインと自己会合したβ−カゼイン
を含むようになシ、一方、上記他の両分並びにｒ液画分
はαＳ−がゼインと未会合のβ−カゼインを含むように
なって、に−カゼインと自己会合したβ−カゼインを主
とする両分とαＢ−カゼインおよび未会合のβ−カゼイ
ンを主とする両分とに分画される。

本発明におけるゲル１過は、前記カゼイン溶液の調製に
用いた脱イオン水又は緩衝液で平衡化した↓ ゲルを充テンしたカラム具えた、分子［１０万以上のも
のを分画できるゲル濾過装置を、また、限外濾過は常法
によシ同じく分子量１０万以上のも１４画し得る限外濾
過膜をそれぞれ用いて行ない得るが、上記ゲルＫ例えば
セファデックスＧ−１００を用いると、溶液の流速が速
く、且つ入手も容易なので実用上好ましい。また、限外
ｒ過膜としてはアミコン社製のＸＭ−３００等が使用で
きる。

上述したように、本発明によると、ゲルｒ過もしくは限
外ｒ過の手法を適用して全カゼインを主としてに一カゼ
インから成る両分と、主としてα８−カゼインおよびβ
−カゼインから成る両分とに有利に分画し得るので、こ
れら各カゼイン成分の利用が容易となる利点がある。以
下に実施例を示して本発明およびその効果を具体的に説
明する。

実施例１ 市販のソーダカゼインにュージランドから輸入のエディ
プルカゼイン）を、１０チ濃度になるように１０ミリモ
ルのイミダゾール緩衝液（ｐＨ７，１）に溶解した。得
られた溶液の３１をセファデックスＧ−１００を充テン
したカラム（直径２薗、高さ７０α）に収容し、これに
上記緩衝液を５Ｃの温度下で通液して溶出し、ボイｒボ
リウムに溶出した両分（以下、画分■と称す）とその他
の両分（以下画分■と称す）に分画した。

得られた各両分の組成および回収率は表１に示すとおシ
である。

表　　　　１ 実施例２ 酸カゼインを苛性ソーダでｐＨ７に調整したものを、濃
度が６チになるように脱イオン水に溶解した。得られた
溶液の３ｄを、ｐＨ７の脱イオン水で平衡化したセファ
クリルＳ−２００を充テンしたカラム（サイズは実施例
１と同様）を用いて察淵下でゲルｒ過を行なって１画分
■と両分Ｈに分画した。得られた各両分の組成および回
収率は表２に示すとおシである。

表　　　　２ 実施例３ 市販のソーダカゼイン１００Ｊｉｌを２１の脱イオン水
（ｐＨ７）に溶解して得られる溶液を４Ｃの温度下で限
外ｒ過（アミコン社製ＸＭ　−３００の膜使用）して画
分■と画分■に分画した。得られた各画分の組成と回収
率は表３に示すとおシである。

表　　　　３

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）全カゼインを脱イオン水もしくは１価の塩濃度０
   ．０２以下で２価のアルカリ土類金属塩を含まない緩衝
   液に溶解し、得られる溶液をゲルｒ過又は限外濾過で処
   理してに一カゼインを主成分とする両分と、α８−カゼ
   インおよびβ−カゼインを主成分とする画分に分けるこ
   とを特徴とするカゼインの分画方法。