JPS5987366A - カテコ−ルアミンの分析用前処理キツト - Google Patents
カテコ−ルアミンの分析用前処理キツトInfo
- Publication number
- JPS5987366A JPS5987366A JP19850182A JP19850182A JPS5987366A JP S5987366 A JPS5987366 A JP S5987366A JP 19850182 A JP19850182 A JP 19850182A JP 19850182 A JP19850182 A JP 19850182A JP S5987366 A JPS5987366 A JP S5987366A
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- Japan
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- sample
- catecholamine
- column
- sealed
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明け、生体試料からカテコールアミンを抽出するた
めの前処理キットに関する。
めの前処理キットに関する。
カテコールアミンは、３・４−ジヒドロオキシフェニル
を持つ生体アミンの総称で、これを血液や尿等の生体試
料から分析することにより疾病の診断や治療に有用なデ
ータを得ることができるが、生体試料中にはごく微量し
か含有されていないので、分析に際しては試料に含まれ
ている夾雑物による妨害を受は易いとＡう問題があり、
このため、生体試料からカテコールアミンだけを取出す
だめの前処理が行なわれている。この前処理は、例えば
血液に例を採ると、試料血漿を除タンパクしたものに安
定剤を添加して酵素活性を抑え、酢酸アンモニウムで水
素イオン濃度を調整した試料に活性化アルミナ粉末を添
加し、１モルの酢酸アンモニウム（ＰＨ９，５）を滴下
してアルミナ粉末の表面にカテコールアミンを吸着させ
、遠心脱水した後、酢酸を注入してカテコールアミンを
離脱させるようにしていた。
を持つ生体アミンの総称で、これを血液や尿等の生体試
料から分析することにより疾病の診断や治療に有用なデ
ータを得ることができるが、生体試料中にはごく微量し
か含有されていないので、分析に際しては試料に含まれ
ている夾雑物による妨害を受は易いとＡう問題があり、
このため、生体試料からカテコールアミンだけを取出す
だめの前処理が行なわれている。この前処理は、例えば
血液に例を採ると、試料血漿を除タンパクしたものに安
定剤を添加して酵素活性を抑え、酢酸アンモニウムで水
素イオン濃度を調整した試料に活性化アルミナ粉末を添
加し、１モルの酢酸アンモニウム（ＰＨ９，５）を滴下
してアルミナ粉末の表面にカテコールアミンを吸着させ
、遠心脱水した後、酢酸を注入してカテコールアミンを
離脱させるようにしていた。
いうまでもなく、アルミナ粉末を活性化するには、酸洗
いに始まって長時間の熱処理を必要とする。このように
、従来の前処理法は、分析試料を得るまでに１時間半も
の時間がかかるため、集団検診等のように多数の検体を
分析する場合には多大の時間と労力を要するばかりでな
く、工稈が複雑なため得られた分析試料にバラツキが生
じ易いという問題があった。
いに始まって長時間の熱処理を必要とする。このように
、従来の前処理法は、分析試料を得るまでに１時間半も
の時間がかかるため、集団検診等のように多数の検体を
分析する場合には多大の時間と労力を要するばかりでな
く、工稈が複雑なため得られた分析試料にバラツキが生
じ易いという問題があった。
本発明は、このような問題に鑑み、生体試料からカテコ
ールアミンを簡単かつ短時間ｒ抽出することのできる前
処理キットを提供することを目的とする。
ールアミンを簡単かつ短時間ｒ抽出することのできる前
処理キットを提供することを目的とする。
すなわち、本発明の特徴とするところは、着脱自在な共
栓を有するカラムに、緩衝剤と安定剤と活性化吸着組体
を密封して保存可能とし、分析時には栓を外して生体試
料を注入するだけでカテコールアミンを吸着１旦体に捕
獲した状態で得ることができるようにした点にあり、以
下、本発明の詳細を図示した実施例に基づいて説明する
。
栓を有するカラムに、緩衝剤と安定剤と活性化吸着組体
を密封して保存可能とし、分析時には栓を外して生体試
料を注入するだけでカテコールアミンを吸着１旦体に捕
獲した状態で得ることができるようにした点にあり、以
下、本発明の詳細を図示した実施例に基づいて説明する
。
第１図は、本発明の一実施例を示すキ・ソトの外観で、
図中符号１け、遠心分離管をなすポリプロピレン製カラ
ムで、その上端には、ロート状の試料注入口２が、また
下端には排出口３が形成され、それぞれ共栓４と可撓性
のキャップ５により密栓さ冶１、棟だその内部には活性
化処理した一定粒度のアルミナ粉末７、及び緩衝剤をな
す０７８モルのトリス・ヒドロキシ・メチール・アミノ
・メタン４と、カテコールアミンに対する酵素活性を抑
える安定剤をなす０，２モルのエチレンジアミン四酢酸
二ナトリウムニ水塩により調製した薬剤８が封入されて
いる。なお、図中符号９け、カラム１内の溶液排出時や
遠心脱水時にアルミナ粉末７が流出するのを防止するた
めのガラスフィルタを示している。
図中符号１け、遠心分離管をなすポリプロピレン製カラ
ムで、その上端には、ロート状の試料注入口２が、また
下端には排出口３が形成され、それぞれ共栓４と可撓性
のキャップ５により密栓さ冶１、棟だその内部には活性
化処理した一定粒度のアルミナ粉末７、及び緩衝剤をな
す０７８モルのトリス・ヒドロキシ・メチール・アミノ
・メタン４と、カテコールアミンに対する酵素活性を抑
える安定剤をなす０，２モルのエチレンジアミン四酢酸
二ナトリウムニ水塩により調製した薬剤８が封入されて
いる。なお、図中符号９け、カラム１内の溶液排出時や
遠心脱水時にアルミナ粉末７が流出するのを防止するた
めのガラスフィルタを示している。
この実施例において、予じめ作ってお（八たキットの共
栓４を外し、採取した血漿又は尿を注入口２から滴下し
、共栓４をもって密封した後、これを振盪すると、トリ
ス・ヒドロキシ・メチ−ルアミノメタンは、カラム内を
ｐ）Ｊａ３程度に維持して、アルミナ粉末７に選択吸着
性を発揮させる。
栓４を外し、採取した血漿又は尿を注入口２から滴下し
、共栓４をもって密封した後、これを振盪すると、トリ
ス・ヒドロキシ・メチ−ルアミノメタンは、カラム内を
ｐ）Ｊａ３程度に維持して、アルミナ粉末７に選択吸着
性を発揮させる。
これによりアルミナ粉末７は、その表面にカテコールア
ミンを吸着し、同時にエチレンジアミン四酢酸二ナトリ
ウムニ水塩が酵素活性を抑える。この振盪を１０分間は
ど続けた後、カラム内の薬剤８をアスピレータで排出し
、下端のキャップ５を外して蒸留水を注入し、アルミナ
粉末７を洗浄した後、そのまま遠心分離器にかけて脱水
する。このときガラスフィルタ９は、カテコールアミン
を吸着したアルミナ粉末７を捕獲して、これが流出する
のを防止する。脱水後、再びキャップ５を嵌め、注入口
２から０．４規定の酢酸を注入すると、アルミナ粉末７
は吸着してい九カテコールアミンを脱離する。
ミンを吸着し、同時にエチレンジアミン四酢酸二ナトリ
ウムニ水塩が酵素活性を抑える。この振盪を１０分間は
ど続けた後、カラム内の薬剤８をアスピレータで排出し
、下端のキャップ５を外して蒸留水を注入し、アルミナ
粉末７を洗浄した後、そのまま遠心分離器にかけて脱水
する。このときガラスフィルタ９は、カテコールアミン
を吸着したアルミナ粉末７を捕獲して、これが流出する
のを防止する。脱水後、再びキャップ５を嵌め、注入口
２から０．４規定の酢酸を注入すると、アルミナ粉末７
は吸着してい九カテコールアミンを脱離する。
緩衝液の水素イオン濃度を決定すべく、トリス・ヒドロ
キシ・メチール・アミノ・メタンに濃塩酸を混入して溶
液のＰＨをａ２からα１ずつａ９まで変えたものを準備
し、同一の血漿試料についてカテコールアミンであるノ
ルアドレナリン（ＮＡ）及びアドレナリンＦＡ）の回収
率の変化を液体クロマトグラフを使用して調らべたとこ
る第２図に示しだようにＰＩ（ａ２から８，９の籟囲内
ではほぼ一定であることがわかった。また、本発明によ
るカテコールアミンの回収率と従来法による本のと比較
するため、０．７８モルのトリス・ヒドロキシメチルア
ミノメタン４．７１９に、０．２モルのエチレン・ジア
ミン四酢酸二ナトリウム２水塩２．５ ｍｌを添加し、
最Ｐ：量が５０１ｔｌとなるように濃塩酸でＰＩ（ａ３
に調製したものを２４と、活性化アルミナ１００Ｉｌｖ
をカラムに収容し共栓により密封して冷暗所に保管した
ものに、試料として尿を４００μを注入して分析用試料
を得て、従来法と比較したところ、表１に示したように
、本発明のキットによる前処理が非常に簡便であるにも
かかわらすカテコールアミンの回収率おいて何ら遜色の
ないことがわかった。
キシ・メチール・アミノ・メタンに濃塩酸を混入して溶
液のＰＨをａ２からα１ずつａ９まで変えたものを準備
し、同一の血漿試料についてカテコールアミンであるノ
ルアドレナリン（ＮＡ）及びアドレナリンＦＡ）の回収
率の変化を液体クロマトグラフを使用して調らべたとこ
る第２図に示しだようにＰＩ（ａ２から８，９の籟囲内
ではほぼ一定であることがわかった。また、本発明によ
るカテコールアミンの回収率と従来法による本のと比較
するため、０．７８モルのトリス・ヒドロキシメチルア
ミノメタン４．７１９に、０．２モルのエチレン・ジア
ミン四酢酸二ナトリウム２水塩２．５ ｍｌを添加し、
最Ｐ：量が５０１ｔｌとなるように濃塩酸でＰＩ（ａ３
に調製したものを２４と、活性化アルミナ１００Ｉｌｖ
をカラムに収容し共栓により密封して冷暗所に保管した
ものに、試料として尿を４００μを注入して分析用試料
を得て、従来法と比較したところ、表１に示したように
、本発明のキットによる前処理が非常に簡便であるにも
かかわらすカテコールアミンの回収率おいて何ら遜色の
ないことがわかった。
表１ カテコールアミンの回収率の比較なお、上述した
実施例においては緩衝剤の濃度を０．７８モルにしてい
るが、これに限られることはなく、さらに吸着坦体とし
てアルミナ以外に硼酸ゲル、強陽イオン又は弱陽イオン
交換樹脂を使用することができる。
実施例においては緩衝剤の濃度を０．７８モルにしてい
るが、これに限られることはなく、さらに吸着坦体とし
てアルミナ以外に硼酸ゲル、強陽イオン又は弱陽イオン
交換樹脂を使用することができる。
以上で・訣明゛したように本発明によれば、緩衝剤、安
定剤、及び吸着担体を分析カラムに密封してキット化し
たので、簡単な操作で多数の検体を迅速かつ同じ条件で
前処理を行なうことができ、分析精度を向上できるばか
りでなく、一つの容器内で処理を済せられ、目的成分の
損失が少なく微量の試料で分析を可能とする。さらに、
吸着組体を条件の一定した溶液に浸漬した状態で保管す
るため、カテコールアミンに対する吸着性を低下させる
虞れもない。
定剤、及び吸着担体を分析カラムに密封してキット化し
たので、簡単な操作で多数の検体を迅速かつ同じ条件で
前処理を行なうことができ、分析精度を向上できるばか
りでなく、一つの容器内で処理を済せられ、目的成分の
損失が少なく微量の試料で分析を可能とする。さらに、
吸着組体を条件の一定した溶液に浸漬した状態で保管す
るため、カテコールアミンに対する吸着性を低下させる
虞れもない。
第１図は、本発明の一実施例を示す前処理キットの外観
図、第２図は、本発明によるカテコールアミンの回収率
を示す説明図である。 １・・・カラム ７・・・活性化アルミナ粉末９
・・・ガラスフィルタ 出願人 島津製作所 代理人 弁理士 西 川 慶 治 四 木村勝彦 竿／ゾ
図、第２図は、本発明によるカテコールアミンの回収率
を示す説明図である。 １・・・カラム ７・・・活性化アルミナ粉末９
・・・ガラスフィルタ 出願人 島津製作所 代理人 弁理士 西 川 慶 治 四 木村勝彦 竿／ゾ
Claims (1)
- 着脱自在な共栓及びキャップにより注入口及び排出口が
密封された容器に、トリス・ヒドロキシ・メチール・ア
ミノ・メタンと、エチレンジアミン四酢酸ニナトリウム
ニ水塩と、カテコールアミン吸着坦体とを封入してなる
カテコールアミンの分析用前処理キット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19850182A JPS5987366A (ja) | 1982-11-11 | 1982-11-11 | カテコ−ルアミンの分析用前処理キツト |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19850182A JPS5987366A (ja) | 1982-11-11 | 1982-11-11 | カテコ−ルアミンの分析用前処理キツト |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5987366A true JPS5987366A (ja) | 1984-05-19 |
| JPH0224468B2 JPH0224468B2 (ja) | 1990-05-29 |
Family
ID=16392177
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19850182A Granted JPS5987366A (ja) | 1982-11-11 | 1982-11-11 | カテコ−ルアミンの分析用前処理キツト |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5987366A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100772970B1 (ko) | 2006-06-30 | 2007-11-02 | 메디칸(주) | 원심분리기 및 원심분리방법 |
| JP2014228467A (ja) * | 2013-05-24 | 2014-12-08 | 栗田工業株式会社 | アニオン性ポリマー濃度測定方法及び装置 |
| WO2016098757A1 (ja) * | 2014-12-15 | 2016-06-23 | 積水メディカル株式会社 | アミノ酸またはアシルカルニチンの検出方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06302352A (ja) * | 1993-04-19 | 1994-10-28 | Yazaki Corp | 防水コネクタ |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56133649A (en) * | 1980-03-24 | 1981-10-19 | Japan Spectroscopic Co | Method and device for measurig catechol amines using natural fluorescent method |
| JPS57191548A (en) * | 1981-05-20 | 1982-11-25 | Yanagimoto Seisakusho:Kk | Analysing apparatus of catechol amine |
-
1982
- 1982-11-11 JP JP19850182A patent/JPS5987366A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56133649A (en) * | 1980-03-24 | 1981-10-19 | Japan Spectroscopic Co | Method and device for measurig catechol amines using natural fluorescent method |
| JPS57191548A (en) * | 1981-05-20 | 1982-11-25 | Yanagimoto Seisakusho:Kk | Analysing apparatus of catechol amine |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100772970B1 (ko) | 2006-06-30 | 2007-11-02 | 메디칸(주) | 원심분리기 및 원심분리방법 |
| JP2014228467A (ja) * | 2013-05-24 | 2014-12-08 | 栗田工業株式会社 | アニオン性ポリマー濃度測定方法及び装置 |
| WO2016098757A1 (ja) * | 2014-12-15 | 2016-06-23 | 積水メディカル株式会社 | アミノ酸またはアシルカルニチンの検出方法 |
| JP6031636B1 (ja) * | 2014-12-15 | 2016-11-24 | 積水メディカル株式会社 | アミノ酸またはアシルカルニチンの検出方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0224468B2 (ja) | 1990-05-29 |
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