JPS596640B2 - 還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法 - Google Patents
還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法Info
- Publication number
- JPS596640B2 JPS596640B2 JP12521781A JP12521781A JPS596640B2 JP S596640 B2 JPS596640 B2 JP S596640B2 JP 12521781 A JP12521781 A JP 12521781A JP 12521781 A JP12521781 A JP 12521781A JP S596640 B2 JPS596640 B2 JP S596640B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- extract
- membrane
- reduced
- concentration
- glutateone
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、還元型グルタテオン抽出液を濃縮精製する方
法に関するものである。
法に関するものである。
一般に、酵母から還元型グルタテオンを分離するには、
常法に従い酵母菌体を酸、たとえば１．ＯＮ硫酸水溶液
で抽出し、この抽出液を濃縮除濁した後濃縮液より銅塩
として単離することが出来る。
常法に従い酵母菌体を酸、たとえば１．ＯＮ硫酸水溶液
で抽出し、この抽出液を濃縮除濁した後濃縮液より銅塩
として単離することが出来る。
還元型グルタチオンは水溶液の状態では非常に不安定で
分解及び酸化反応を受け易く、更にこれらの反応は温度
の上昇にともない急速に進行し、収率、及び純度の低下
をきたす。
分解及び酸化反応を受け易く、更にこれらの反応は温度
の上昇にともない急速に進行し、収率、及び純度の低下
をきたす。
このため従来の蒸発濃縮法によって抽出液を濃縮するに
は、還元型グルタチオンの分解及び酸化反応を抑制すべ
く蒸発温度を可能なかぎり低くし、できれば常温で行な
うことが望ましい。
は、還元型グルタチオンの分解及び酸化反応を抑制すべ
く蒸発温度を可能なかぎり低くし、できれば常温で行な
うことが望ましい。
理論的には、蒸発温度を低くとることは、蒸発罐内圧力
を減圧すれば可能になる。
を減圧すれば可能になる。
しかしながら、実際面では装置の機能上減圧には限界が
あり、熱効率や設備費等を考慮すれば装置内の蒸発液温
としては５０〜６０゜Ｃが下限であり、常温下での濃縮
は非常に難かしいという欠点があった。
あり、熱効率や設備費等を考慮すれば装置内の蒸発液温
としては５０〜６０゜Ｃが下限であり、常温下での濃縮
は非常に難かしいという欠点があった。
本発明は、上記従来法の欠点を改良したもので、抽出液
を前処理として限外沢過膜により充分清澄化した後に、
逆浸透膜を用いて濃縮することにより、常温で且つ短時
間に還元型グルタテオンを分解及び酸化させることなく
濃縮精製することを可能にしたものである。
を前処理として限外沢過膜により充分清澄化した後に、
逆浸透膜を用いて濃縮することにより、常温で且つ短時
間に還元型グルタテオンを分解及び酸化させることなく
濃縮精製することを可能にしたものである。
一般に、酵母菌体より還元型グルタテオンを抽出処理し
た後、抽出液と抽出残酵母を分離するには、デラバル型
遠心分離機が使用される。
た後、抽出液と抽出残酵母を分離するには、デラバル型
遠心分離機が使用される。
この際得られる抽出液には、機械的に破砕された微細な
酵母破片や菌体より抽出された蛋白等コロイド状の濁質
物が、完全には分離されずに混入して来る。
酵母破片や菌体より抽出された蛋白等コロイド状の濁質
物が、完全には分離されずに混入して来る。
これら濁質物が濃縮抽出液に混入した状態で次の還元型
ン゛ルタｔオン単離のためのグルタテオン銅塩析出工程
に持ち込まれた場合、この濁質物は析出するグルタチオ
ン鋼塩フロックに凝集混入し、このため単離還元型グル
タチオンの純度が低下するのみならず、抽出液よりのグ
ルタチオン銅塩フロックの分離並びに洗滌操作に支障を
きたす。
ン゛ルタｔオン単離のためのグルタテオン銅塩析出工程
に持ち込まれた場合、この濁質物は析出するグルタチオ
ン鋼塩フロックに凝集混入し、このため単離還元型グル
タチオンの純度が低下するのみならず、抽出液よりのグ
ルタチオン銅塩フロックの分離並びに洗滌操作に支障を
きたす。
さらにこのグルタテオン銅塩フロックと共に分離された
濁質物は、グルタテオン銅塩懸濁水溶液に硫化水素を吸
収させ銅を硫化銅としてグルタテオン銅塩より分離沈澱
させ還元型グルタテオンを水溶液として再溶解せしめる
段階で、硫化水素と反応し蛋白質の硫化物に変化するた
め、還元型グルタテオン水溶液との分離を完全に行なう
ことが困難である。
濁質物は、グルタテオン銅塩懸濁水溶液に硫化水素を吸
収させ銅を硫化銅としてグルタテオン銅塩より分離沈澱
させ還元型グルタテオンを水溶液として再溶解せしめる
段階で、硫化水素と反応し蛋白質の硫化物に変化するた
め、還元型グルタテオン水溶液との分離を完全に行なう
ことが困難である。
このために、分離グルタテオン水溶液が着色し後工程で
の精製に支障をきたす。
の精製に支障をきたす。
従つ℃、抽出液の除濁は極めて重要なポイントである。
従来の蒸発濃縮法では、抽出液の濃縮段階で濁質物は凝
集フロック化するため濃縮液を珪藻土による通常の清澄
沢過を行なえばある程度の清澄濃縮抽出液が得られるが
、必ずしも完全ではないために後工程での精製処理の煩
雑さは避けられない。
集フロック化するため濃縮液を珪藻土による通常の清澄
沢過を行なえばある程度の清澄濃縮抽出液が得られるが
、必ずしも完全ではないために後工程での精製処理の煩
雑さは避けられない。
更に、珪藻土は溶存還元型グルタテオンの分解を促進す
る傾向にあるために、逆に還元型グルタチオンの収率な
低下させる結果となってしまう。
る傾向にあるために、逆に還元型グルタチオンの収率な
低下させる結果となってしまう。
このため、従来の蒸発濃縮・除濁法によれば、抽出液中
の還元型グルタテオンに対する最終濃縮液中の還元型グ
ルタテオンの収率は、せいぜい８０％程度であった。
の還元型グルタテオンに対する最終濃縮液中の還元型グ
ルタテオンの収率は、せいぜい８０％程度であった。
本発明者らは還元型グルタチオンの逆浸透膜による濃縮
工程の前処理としての除濁工程に、適切な膜を選択した
限外沢過膜分離法によりＰＨ２．０〜３．５の範囲内で
除濁することにより、抽出液中の溶存還元型グルタチオ
ンの分解を促進させることなく非常に清澄な抽出液を得
ることが出来ることを見出した。
工程の前処理としての除濁工程に、適切な膜を選択した
限外沢過膜分離法によりＰＨ２．０〜３．５の範囲内で
除濁することにより、抽出液中の溶存還元型グルタチオ
ンの分解を促進させることなく非常に清澄な抽出液を得
ることが出来ることを見出した。
即ち、本発明の特徴は、還元型グルタチオン抽出液を常
温且つ低ＰＲに℃限外沢過膜を用いて短時間に沢過する
ことにより必要且つ充分の清澄液を得、これを逆浸透膜
を用いて常温且つ短時間に沢過することにより抽出液中
の溶存還元型グルタテオンの酸化及び分解反応を抑制し
ながら濃縮することにある。
温且つ低ＰＲに℃限外沢過膜を用いて短時間に沢過する
ことにより必要且つ充分の清澄液を得、これを逆浸透膜
を用いて常温且つ短時間に沢過することにより抽出液中
の溶存還元型グルタテオンの酸化及び分解反応を抑制し
ながら濃縮することにある。
ここでいう限外沢過膜とは、分画分子量１５００００以
下の膜であり、還元型グルタテオン抽出液がもつ低ＰＨ
（２．０〜３．５）域で長期間その特性が変らぬ限りど
のような材料でできていても良いが、沢過膜の型態はテ
ユーブラー状でなげればならない。
下の膜であり、還元型グルタテオン抽出液がもつ低ＰＨ
（２．０〜３．５）域で長期間その特性が変らぬ限りど
のような材料でできていても良いが、沢過膜の型態はテ
ユーブラー状でなげればならない。
例として、鍾淵化学工業ＫＫ製ＰＳ−１００及び１５０
、並びに日東電気工業ＫＫ製ＮＴＵ−２０１００−１８
Ａを挙げることができる。
、並びに日東電気工業ＫＫ製ＮＴＵ−２０１００−１８
Ａを挙げることができる。
更に、分画分子量１５００００以下の膜とは分子量２０
０００のポリエチレングライコールの阻止率２０％以上
の限外沢過膜をいう。
０００のポリエチレングライコールの阻止率２０％以上
の限外沢過膜をいう。
分画分子量が１５００００より大きい場合でも、抽出液
の除濁は可能で少くとも通常の清澄沢過による除濁以上
の効果はあるが、抽出液中の微細なコロイド状の濁質物
を完全には除くことができないため、次の工程である逆
浸透膜による除濁抽出液の濃縮の段階で膜の初期透過流
束が低くなったり、濃縮時間の経過に伴い透過流束の低
下が急速に進む等膜汚染による影響があらわれると同時
に濃縮液の液質の低下をも伴うことになる。
の除濁は可能で少くとも通常の清澄沢過による除濁以上
の効果はあるが、抽出液中の微細なコロイド状の濁質物
を完全には除くことができないため、次の工程である逆
浸透膜による除濁抽出液の濃縮の段階で膜の初期透過流
束が低くなったり、濃縮時間の経過に伴い透過流束の低
下が急速に進む等膜汚染による影響があらわれると同時
に濃縮液の液質の低下をも伴うことになる。
温度、ｐＨの沢過条件は抽出液の持つ特性から温度２５
〜３５゜Ｃ，ｐＨ２．０〜３．５附近で沢過を行なう。
〜３５゜Ｃ，ｐＨ２．０〜３．５附近で沢過を行なう。
沢過残液は水にて希釈し再度限外沢過を行なえば目的グ
ルタテオンの収率なさらに高めることが出来る。
ルタテオンの収率なさらに高めることが出来る。
除濁抽出液の濃縮に使用する逆浸透膜とは、シュークロ
ーズ除去率９９％以上の膜であり、還元型グルタチオン
抽出液の持つ低ｐＨ（２．０〜３．５）域で長期間その
特性が変らぬ限り如何なる材質でできていても良く、又
沢過膜の形態は平板状、筒状、あるいは非常に細い筒状
ないしは中空糸状その他一般に逆浸透沢過に適した形態
であるかぎり任意である。
ーズ除去率９９％以上の膜であり、還元型グルタチオン
抽出液の持つ低ｐＨ（２．０〜３．５）域で長期間その
特性が変らぬ限り如何なる材質でできていても良く、又
沢過膜の形態は平板状、筒状、あるいは非常に細い筒状
ないしは中空糸状その他一般に逆浸透沢過に適した形態
であるかぎり任意である。
例としては東レＫＫ製ＳＣ−５１００、米国オスモニツ
クス社製９７ＣＡがあげられる。
クス社製９７ＣＡがあげられる。
ここで、シュークローズ除去率９９係以上の逆浸透膜と
は、シュークローズ濃度０．１％（１０００ｐｐｍ ）
の原溶液を沢過した時透過液側のシュークローズ濃度が
０．００１％（ １ ０ ｐｐｍ ）以下となる逆浸透
膜である。
は、シュークローズ濃度０．１％（１０００ｐｐｍ ）
の原溶液を沢過した時透過液側のシュークローズ濃度が
０．００１％（ １ ０ ｐｐｍ ）以下となる逆浸透
膜である。
還元型グルタチオン抽出液の逆浸透膜による濃縮におけ
る重要なポイント（ζ還元型グルタテオンの膜透過性に
ある。
る重要なポイント（ζ還元型グルタテオンの膜透過性に
ある。
膜透過性が高ければ、濃縮による透過液の流出に伴ない
還元型グルタチオンの流失する量が増加し、還元型グル
タテオンの濃縮収率の低下につながる。
還元型グルタチオンの流失する量が増加し、還元型グル
タテオンの濃縮収率の低下につながる。
即ち、逆浸透膜として要求されるものは、還元型グルタ
テオンは透過せず、水の透過流束の高いものということ
になる。
テオンは透過せず、水の透過流束の高いものということ
になる。
シュークローズの除去率９９％以上の逆浸透膜ではほぼ
この目標に近い結果かえられるのに対し、除去率９９％
以下の膜ではこの除去率の減少にともない急激に還元型
グルタテオンの透過量は増太し収率が低下する。
この目標に近い結果かえられるのに対し、除去率９９％
以下の膜ではこの除去率の減少にともない急激に還元型
グルタテオンの透過量は増太し収率が低下する。
以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。
しかし本発明は実施例により何らの制限を受けるもので
はない。
はない。
〔実施例 １〕
常法に従い酵母菌体を１．ＯＮ硫酸水溶液で抽出し、デ
ラバル型遠心分離機にて分離したグルタテオン抽出液５
００ｌを日東電気工業ＫＫ製限外沢過膜ＮＴＵ−２ ０
１ ０ ０−１ ８Ａ（チューブラー状分画分子量１
０００００、膜面積１．６Ｊ）を用いて、透過圧６．０
Ｋｇ／，，１、循環液流量１８ｌ／分で濃縮側液を循環
しつつ透過液４５０ｌを得た。
ラバル型遠心分離機にて分離したグルタテオン抽出液５
００ｌを日東電気工業ＫＫ製限外沢過膜ＮＴＵ−２ ０
１ ０ ０−１ ８Ａ（チューブラー状分画分子量１
０００００、膜面積１．６Ｊ）を用いて、透過圧６．０
Ｋｇ／，，１、循環液流量１８ｌ／分で濃縮側液を循環
しつつ透過液４５０ｌを得た。
清澄沢液のミリポアー膜（０．４５μ孔径）について沢
過閉塞常数は５．５ Ｘ １ ０−’ （ １ ／ｍｅ
）で珪藻土沢過による清澄沢液の１／７であった。
過閉塞常数は５．５ Ｘ １ ０−’ （ １ ／ｍｅ
）で珪藻土沢過による清澄沢液の１／７であった。
次に、上記の限外沢過膜により除濁した清澄沢液を東レ
ＫＫ製逆浸透膜ＳＣ−５１００（スパイラル状、膜面積
６．５．’）を用い平均透過圧５０Ｋ９／ｃｒＡ、循環
液流量２０ｌ／分で濃縮液を循環しつつ濃縮度４倍迄濃
縮した。
ＫＫ製逆浸透膜ＳＣ−５１００（スパイラル状、膜面積
６．５．’）を用い平均透過圧５０Ｋ９／ｃｒＡ、循環
液流量２０ｌ／分で濃縮液を循環しつつ濃縮度４倍迄濃
縮した。
この際逆浸透膜透過液中への還元型グルタテオンの透過
はトレース程度であった。
はトレース程度であった。
抽出液中の還元型グルタテオンに対する最終濃縮液中の
還元型グルタチオン収率は、通常の蒸発濃縮・除濁法に
よる収率と比較して５％程高い結果が得られた。
還元型グルタチオン収率は、通常の蒸発濃縮・除濁法に
よる収率と比較して５％程高い結果が得られた。
昧施例 ２〕
実施例１と同様のグルタチオン抽出液５００ｌを日東電
気工業ＫＫ製限外沢過膜ＮＴＵ−２０１００−１８Ａ（
チューブラー状、分画分子量１０００００ ，膜面積１
．６ｉ）を用いて、透過圧６．ＯＫ９／ｃｒＡ循環液流
量１８ｌ／分で濃縮液側液を循環しつつ透過液４５０ｌ
を得た。
気工業ＫＫ製限外沢過膜ＮＴＵ−２０１００−１８Ａ（
チューブラー状、分画分子量１０００００ ，膜面積１
．６ｉ）を用いて、透過圧６．ＯＫ９／ｃｒＡ循環液流
量１８ｌ／分で濃縮液側液を循環しつつ透過液４５０ｌ
を得た。
この際得られた沢過残液は５０１であった。
このＰ過残液に当量（５０ｌ）の洗滌水を加えて２倍に
稀釈した後、前回と同一の条件でもって限外沢過を行な
い透過液７５ｌを得た。
稀釈した後、前回と同一の条件でもって限外沢過を行な
い透過液７５ｌを得た。
得られた透過液を最初の透過液と合せて５２５ｌの透過
液とした。
液とした。
この透過清澄液のミリポアー膜（孔径０．４５μ）につ
いての沢過閉塞常数は１．５ Ｘ １ ０−’ （ １
／薇）であった。
いての沢過閉塞常数は１．５ Ｘ １ ０−’ （ １
／薇）であった。
次に、上記の清澄透過液を東レＫＫ製逆浸透膜ＳＣ−５
１００を用い℃実施例１と同一の条件で濃縮度４倍迄濃
縮した。
１００を用い℃実施例１と同一の条件で濃縮度４倍迄濃
縮した。
この際得られた還元型グルタチオンの収率は、蒸発濃縮
法と比較して１５％程の収率増が見られた。
法と比較して１５％程の収率増が見られた。
峡施例 ３〕
実施例１と同様のグルタテオン抽出液２００ｌを鍾淵化
学工業ＫＫ製限外沢過膜ＰＳ−１５０（テユーブラー状
、分画分子量１５００００膜面積０． ４１７ ）を用
い透過圧３−ＯＫｔｉ／ｃｄ、循環液流量１０３ｌ／分
で濃縮液側液を循環しつつ透過液１６０ｌを得た。
学工業ＫＫ製限外沢過膜ＰＳ−１５０（テユーブラー状
、分画分子量１５００００膜面積０． ４１７ ）を用
い透過圧３−ＯＫｔｉ／ｃｄ、循環液流量１０３ｌ／分
で濃縮液側液を循環しつつ透過液１６０ｌを得た。
清澄液のミリポアー膜（０．４５μ孔径）についての沢
過閉塞常数は１２．４Ｘ１ ０−’ （ １ ／ｍｅ
）で珪藻土沢過による清澄液の約１／３であった。
過閉塞常数は１２．４Ｘ１ ０−’ （ １ ／ｍｅ
）で珪藻土沢過による清澄液の約１／３であった。
上記の限外沢過膜により除濁した清澄液を、オスモ製逆
浸透膜９７ＣＡ（スパイラル状、膜面積５ｍ２）を用い
て、平均透過圧３０Ｋｇ／ｃｒＩＬ、循環液流量２０ｌ
／分で濃縮液を循環しつつ濃縮度４倍迄濃縮した。
浸透膜９７ＣＡ（スパイラル状、膜面積５ｍ２）を用い
て、平均透過圧３０Ｋｇ／ｃｒＩＬ、循環液流量２０ｌ
／分で濃縮液を循環しつつ濃縮度４倍迄濃縮した。
この際逆浸透膜透過液中への還元型グルタチオンの透過
は２ｐｐｍ弱であった。
は２ｐｐｍ弱であった。
抽出液中の還元型グルタテオンに対する最終濃縮液中の
還元型グルタチオンの収率は９３％であり、通常の蒸発
濃縮・除濁法による収率と比較して１６係程高い結果が
得られた。
還元型グルタチオンの収率は９３％であり、通常の蒸発
濃縮・除濁法による収率と比較して１６係程高い結果が
得られた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 酵母を酸性下で抽出処理した還元型グルタテオン抽
出液をＰＨ２．０〜３．５の範囲内で分画分子”−１５
００００以下の合成樹脂系テユーブラー状里 限外沢過膜を用いて沢過精製を行なった後、シュークロ
ーズ除去率９９％以上の逆浸透膜を透過させて濃縮する
ことを特徴とする還元型ク゛ルタチオン抽出液の濃縮精
製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12521781A JPS596640B2 (ja) | 1981-08-12 | 1981-08-12 | 還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12521781A JPS596640B2 (ja) | 1981-08-12 | 1981-08-12 | 還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5828299A JPS5828299A (ja) | 1983-02-19 |
| JPS596640B2 true JPS596640B2 (ja) | 1984-02-13 |
Family
ID=14904756
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12521781A Expired JPS596640B2 (ja) | 1981-08-12 | 1981-08-12 | 還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS596640B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5881797A (ja) * | 1981-11-10 | 1983-05-17 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | グルタチオンの製造法 |
| CN102335594B (zh) * | 2011-06-16 | 2013-03-20 | 中国科学院长春应用化学研究所 | 一种带谷胱甘肽配体的亲和层析多孔介质的制备方法和应用 |
| CN106282280A (zh) * | 2016-09-21 | 2017-01-04 | 河北美邦工程科技股份有限公司 | 一种谷胱甘肽提取方法 |
-
1981
- 1981-08-12 JP JP12521781A patent/JPS596640B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5828299A (ja) | 1983-02-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2010202280B2 (en) | Process for the purification of organic acids | |
| JPS5850633B2 (ja) | アントシアニン抽出物の処理方法 | |
| US4623723A (en) | Process for separating ribonucleic acids from a solution containing deoxyribonucleic acids | |
| Charcosset | Ultrafiltration, microfiltration, nanofiltration and reverse osmosis in integrated membrane processes | |
| US4863609A (en) | Process for the fractional separation of protein mixtures by means of membranes | |
| JPS596640B2 (ja) | 還元型グルタチオン抽出液の濃縮精製法 | |
| JPS59156402A (ja) | 逆浸透膜による有機物の濃縮方法 | |
| Higuchi et al. | Rejection of single stranded and double stranded DNA by porous hollow fiber membranes | |
| JP3676914B2 (ja) | 茶飲料の製造方法 | |
| JPS5922608A (ja) | 電気透析法 | |
| CN106146608A (zh) | 一种蜜蜂抗菌肽的提取制备方法 | |
| WO2020104728A1 (en) | A method and apparatus for treatment of saline water | |
| JPS6240261A (ja) | 液状食品の脱色法 | |
| JP3371783B2 (ja) | 菌体分離方法 | |
| JPH11215980A (ja) | 菌体含有液の処理方法 | |
| JPS5918088B2 (ja) | 液中の有価物の精製方法 | |
| JPS6019919B2 (ja) | グリチルリチンの精製法 | |
| FR2479834A1 (fr) | Procede de purification des glucosaminoglucanes | |
| JPH05329339A (ja) | 濾過システム | |
| JP2878816B2 (ja) | 水溶性染料の製造方法 | |
| JP2004237280A (ja) | ミネラル液の製造方法及び製造装置 | |
| JPH06114400A (ja) | 汚泥の濃縮方法 | |
| JPH0431466A (ja) | 水溶性染料の製造方法 | |
| JP2538223B2 (ja) | 魚介類エキスの清澄化法 | |
| TWI432580B (zh) | 有機酸純化方法 |