JPS595149A - 新規抗生物質ｔａ−２４３ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な抗生物質ＴＡ−２４３に関する。

本発明の抗生物質ＴＡ−２４３は、下記式ＣＩ］で表わ
される。

ＣＨ２−Ｃ０ＯＨ 本発明者らは、ストレフトマイセス属に属する菌株を培
養するととＫよって各種グラム陽性菌及びグラム陰性菌
に対する抗菌活性を有する新しい抗生物質を得るに成功
し、また該抗生物質が上記構造式［Ｉ）で表わされる化
合物であると同定ヂると共に該化合物を゛別途に化学合
成し、これを確認した。本発明はこの知見に基づいて完
成されたものである。

本発明の上記式［Ｉ）で表わされる抗生物質ＴＡ−２４
３は、また以下の理化学的性質を有している。

（α）元素分析結果； Ｃ＝４６．１４−　　　Ｈ＝　　６．９０％Ｎ＝１１．
９９−　　　〇　＝　３４．９７チ（ｂ）　　分子式； ％式％ （Ｃ）分子量（質量分析による）； ４７ （ｄ）　　融　点； １６０〜１６３　℃ （−）　　比旋光度； 〔α〕ヵ＝　＋　１０．１’　（Ｃ＝　１．０３　、水
）（イ）赤外線吸収スペクトル分析結果；ＫＢｒ錠とし
て第１図に示すＩＲ分析結果を示す。

主な吸収スペクトルピークは次の通りである。

ν（ｃｍ　’）　＝　３４５０．３２００．２９７５．
１６５０．１６００〜１５００．１３９０． １２９５．１２４０．１１８０．１０４０．７８０．６
２０ （ダ）核磁気共鳴スペクトル分析結果；重ジメチルスル
ホ士シト（ＤＭＳＯ−ｄ６）を用いたＮＭＲ分析図を第
２図に示す。その解析結果は次の通りである。

δ（ＰＰＭ　）　＝　０．８７　（３Ｈ、ｄ　、　Ｊ＝
１．０Ｈｚ　）、０−８８　（３Ｈ、ｃＬ　、　Ｊ　＝
　７．０Ｈｚ　）、０．８９　（３Ｈ、ｄ　、　Ｊ　＝
　７．０Ｈｚ　）、０．９１　（３Ｈ、ｃｌ　、　Ｊ　
＝　７．０Ｈｚ　）、１．９１　（ＩＮ、ｍ）、 ２．０３（ｌＨ，ｍ）、 ２．５２　（ＩＨ，ｄｄ　、　Ｊ＝　１５．９及び３．
０Ｈｚ）、 ２．６１　（ＩＨ，ｄｄ　、　Ｊ＝Ｉ５．９及び１０．
３７７２）、 ３．６１　（ＩＨ，ｄ、　／＝５．４７７２　）、４．
０９　（ＩＨ、ｄｄ、、　Ｊ＝８．９及び７．８Ｈｚ）
、 ４．１５　（ＩＮ、ｄｄ、Ｊ＝Ｉ０．３　及ヒ３．０Ｈ
ｚ）、 ８．４２　（Ｉ＃　、　ｃｌ　、　Ｊ＝８．９Ｈｚ　）
（Ａ）　　溶解性； 水、ジメチルスルホ十シトに可溶で、メタノール、エタ
ノール、ジメチルボルムアミドに難溶で、アセトシ、酢
酸エチル、り００ボルム、エーテル、ベシゼン、へ＋サ
シに不溶である。

（１）外　観； 白色粉末 ０）呈色反応； ニシヒドリシ反応：陽性 塩化第二鉄反応２：陽性 （Ａ）　　薄層りＯマドグラフィー分析結果；展開溶剤
としてルー′５０パノール＝２Ｎアシ七ニア−７：３を
用いたシリカゲル（メルク社製）上ＴＬＣ分析の結果Ｒ
ｆ値０．３７であ溶剤を用いた場合のＲＸ、　１２であ
る。

また本発明物質は、後述する通り各種のクラム陽性菌及
びづラム陰性菌に対して優れた抗菌活性を有しており、
この抗菌活性を利用して人及び動物用の抗菌剤として、
また廣園芸用、殺菌剤等の外用殺菌剤として有用である
。

以下本発明物質の製造法につき詳述する。

、本発明物質は、微生物を利用して又は化学合成手段に
より製造される。微生物を利用する方法は、具体的には
ストレプトマイセス属に属する抗生物質ＴＡ−２４３生
産菌を好気的条件下に培養すること忙より実施される。

この方法に有利に用いられる微生物としては、本発明者
らが新たに土壌中より採取した以下の菌学的及び生理学
的性質を有する菌株を例示できる。

（Ａ）　　形態学的性質 イｙターナショナル・ストレづトマイｔス・″ＪＪＯ，
；エクト（略称：　Ｉ　Ｓ　Ｐ　、　Ｉｎｔｅｒｎａｔ
ｉｏｎａ１５ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｐｒｏｊｅｃｔ
　）　２＊３ｙ４及び５の４種類の培地を用いて、２８
℃、２週間培養し観察した結果、気菌糸は単純分枝する
が、胞子のうの形成は認められない。胞子表面は平滑状
で、胞子鎖は螺旋状又はルーづ状をなす。胞子柄の着生
位置け、気中菌糸上にのみ認められ、１０〜５０個の連
鎖をなして胞子が形成される。

（Ｂ）　　各種培地忙おけも生育状態 各種培地上、２８℃、２週間後の生育状態を下記第１表
に示す。表中の各記号は次のことを表わすものとする。

Ｇ：生育状態　　　ＡＭ：気中菌糸 ＳＭ：基生基糸菌糸　　Ｒ：裏面 ＳＰ：可溶性色素 また表中で色調の記載は、カラー・バーをニー・マニュ
アル（Ｃ’ｏｌｏｕｒ　Ｈａｒｍｏｎｙ　Ｍａｎｎｕ、
ａｌ　、　Ｃｏｎ−ｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃα、Ｃｉｃαｙｏ　）　　に
よった。

第　　１　　表 （Ｃ）　　生理学的性質 生育温度範囲　　；１４〜５０℃ 至適生育温度範囲；３８〜４１℃ ゼラチシの液化（＊）；陽性 スターチの加水分解；陽性 ミルクの凝固　　　　；疑がゎしい ミルクのべつトン化；陽性 メラニシ様色素（経）；陰性 硝酸塩の還元性　　；陰性 （＊）ニゲルコース・べづトン・ゼラチシ培地上、２０
℃ ０米）ニトリづトン・イーストエ士ス・プロス、べづト
ン・トースト・鉄寒天培 地上、２８℃ （Ｄ）　　炭素源の利用性（づリドハム・ｊドリーづ寒
天培地上、２８℃、１４日間培養） 丹：よく利用する ＋：利用する −　：利用しない （Ｅ）　　細胞壁中のジアミノピメリシ酸は、ＬＬ−ジ
アミノピメリシ酸の型である。

以上を要約すると、本菌株はストレづトマイｔス属に属
する菌株で、イシターナショナル・ストレづトマイセス
・づＯジエクト（略称ｌ５Ｐ）の方法によれば、胞子形
成菌糸の形態は、セクショシ・スパイラルズに属し、抱
子表面は平滑状で、成熟した気菌糸の色は赤色系統（Ｒ
ｔｄ　ｃｏｌｏｒ　５ｏｖｉｅｔ　）で、メラニシ様色
素の産生はみられず、その他の可溶性色素は、チロシン
寒天培地（ｌ５Ｐ−１）でわずかＫうすい褐色の色素を
産生ずる。この色素は、ｐＨＫよる変化が認められない
。基糸菌糸の色は無色〜クリーム色で、コロニー裏面の
色はクリーム色〜淡褐色を呈する。炭素源としてはＤ−
クルコース、Ｌ−アラじノース、Ｄ−士シ〇−ス、Ｄ−
フルクトース及びＤ−マシニトールを利用するが、シェ
ーク０−ス、ラフィノース、ｉ−イノシトール、Ｌ−ラ
ムノース及びｔＬＯ−スは利用しない。

以上の性状より既知放線菌の中から最も近縁種と思われ
るストレづトマイセス・クリｔオファスカスＩＦ０１２
８７０株と同時培養によって比較検討した結果、以下の
通り極めて類似した性質、を有することが明らかになっ
た。即ち本菌株とＩＦｏｌ　２８７０株とは形態学的特
徴において一致し培養上の諸性状においても胞子の着生
状態が本菌株に比べて１１０１２８７０株がやや貧弱で
あったことを除けば気菌糸の色調及び生育状況にけ殆ん
ど差け々く、また生理学的性質における生育至適温度の
比較では、本菌株がＩＰ０１２８７０株に比べて４〜５
℃高かったこと以外は炭素源の利用性も含めてすべて一
致した。

以上のように本菌株は、ストレづトマイセス・クリをオ
フアスカ３１１０７２８７０株と若干の相違はあるが極
めて類似の性質を有することが明らかなため、ストレづ
トマイセス・クリをオファスカスと同定された。

本発明者らは本菌株をストレづトマイｔス・クリをオフ
ァスカスＯＦ　Ｒ１３８８（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｚ
ｇｒｉｇｔｏｆｕｓｃｕ、、？ＯＦＲ１３８８）と命名
した。尚本菌は通産省工業技術院微生物工業技術研究所
に微工研菌寄第６３２３号として寄託されている。

本発明物質は、上記０ＦＲ１３８８株又はその変異株等
のストレづトマイｔス属に属する本発明物質生産能を有
する微生物を利用して製造される。

本発明物質の製造は、より詳細には、まず上記微生物を
通常の栄養物及び添加物を含有する適当な培地で好気条
件下洗培養する。培養基としては通常用いられる窒素源
例えば大豆粉、綿実粉、肉工十ス、べづトシ、酵母工中
ス、乾燥酵母、コーンスチづリカー、カゼイシ加水分解
物等及び炭素源例えばブドウ糖、クリセリシ、麦芽糖、
デンづシ、乳糖、ショ糖、糖蜜等をいずれも使用できる
。

また培地に添加される添加物も通常の無機塩例えば塩化
ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、燐酸塩
等でよく、更に鉄、マシガシ、亜鉛等の重金属塩を微量
添加できることも一般の培地と同様である。

培養方法としては深部培養法、固体培養法、表面培養法
等があるが、好ましくは振盪培養、通気攪拌培養など好
気的液体深部培養法によるのがよい。又培養は、ｐ′Ｈ
４〜ＩＯ１好ましくは６．５〜７．５にて１４〜５０℃
、好ましくは３７℃程度にて１〜ｔＯ日、好ましくは１
〜３日間行なわれる。

次に上記培養液を濾過あるいは遠心分離し、培養Ｐ液よ
り本発明物質を採取する。

採取法としては特に制限されず生産された本発明物質の
理化学的性状を利用した公知の各種方法をいずれも採用
できる。例えば不純物との溶解度の差、通常の吸着剤例
えば活性炭、「アシパーライトＸＡＤ−２３（米国、Ｏ
−ム　アンド　ハース社製）、シリカゲル、イオシ交換
樹脂、セファデックス（ファルマシア　ファイシ　ケミ
カルス社製）等圧対する吸着親和力の差、二液相間の分
配率の差等を利用する方法及び之等方法の組み合せによ
ればよい。好ましい採取法としては、より具体的には、
まず培養済液をｐＨ８〜９に調整し、強塩基性陰イオン
交換樹脂のカラムに通し、水洗後酢酸で溶出し、強酸性
陽イオシ交換樹脂のカラムに通し、水洗後アンモニアで
溶出し、溶出活性画分を濃縮後メタノールを加え４℃で
放置し、遠心分離により沈殿を除き得られた上清を塩酸
でｐＨ３〜４に調整し、強酸性陽イオシ交換樹脂のカラ
ムに吸着させ、水洗後食塩水で溶出後、活性分画を得る
。水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７〜８に調整後、強塩基
性陰イオン交換樹脂のカラムに吸着後酢酸で溶出し、活
性分画を得る。水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７とし、陰
イオシ交換樹脂のカラΔに吸着後、水洗し食塩水で溶出
し活性分画を得、これを高速液体り０マドクラフイー忙
かけ、活性画分を集め凍結乾燥することにより白色粉末
の本発明物質を得る。

かくして本発明柳質ＴＡ−２４３を収得できる。

又本発明物質は、下記反応工程式に示す製造法によって
も収得可能である。

〈反応工程式〉 ［ＩＩ）　　　　　　　　　　［ＩＩＩ）■ ＣＨ２−Ｃ００Ｈ （ＩＶｌ ＣＨ２−Ｃ０ＯＨ 〔Ｉ〕 〔上記各式においてＲはアミノ基の保護基を示す〕上記
Ｒで示されるアミノ基の保護基としては、特に制限はカ
く、通常の公知のものをいずれも例示できる。その具体
例としては例えばべ、７ジルオ十ジカルボニル、Ｐ−ニ
ド０べ、７．；ルオ士ジカルボニル、Ｐ−メト士シベン
ジルオ士ジカルボニル、ｐ−フェニルアリベシジルオ士
ジカルボニル、ｐ−（ｐ′−メト牛ジフェニルアリ）−
ベンジルオ士ジカルボニル、ｐ−り０ルベシジルオ士ジ
カルボニル、ｐ−づ０ムベシジルオ士ジカルボニル、ｐ
−トリルオ牛ジカルボニル、α−ナフチルメト中ラジカ
ルボニルＰ−ドプシルオ中シベンジルオ士ジカルボニル
、　ｔａｒｔ−づチルオ中ジカルボニル、ｔａｒｔ−ア
ミルオ中ジカルボニル基等を例示できる。

上記反応工程式に従う水洗はまず一般式［１１］で表わ
される公知のカルポジ酸と式■で表わされるアミン塩酸
塩とを反応させ、一般式既で表わされる化合物を得、次
いで該化合物面よりアミノ基の保護基を脱離するととＫ
より実施される。

上記においてカルポジ酸（ＩＩＩとアミル（塩酸塩）・
〔１旧との反応は、通常のアミド生成反応の条件下に行
なわれる。該アミド生成反応方法としては、（イ）混合
酸無水物法、例えばカルポジ酸（ＩＩ）にアル＋ルハロ
カルポシ酸を反応させて混合酸無水物とし、これにアミ
：Ｊ（ｍ）を反応させる方法、（０）活性エステル法、
例えばカルポジ酸（ＩＩ）を例えばｐ−二ト０フェニル
エステル、Ｎ−しドロ士シコハク酸イ三ドエステル、ｌ
−しドロ＋シベシリトリアジールエステルなどの活性エ
ステルとし、こｉＬＫアミン（ＩＩＩ）を反応させる方
法、（ハ）ガルボジイミド法、すなわちカルポジ酸（ｎ
）にアミｙ（ＩＩＩ）を例えばジシクＤへ士ジルカルボ
ジイミド、カルボニルシイ三タリール々どの脱水剤の存
在下に脱水縮合させる方法、（ニ）カルポジ酸ハライド
法、す々わちカルポジ酸（ＴＩ）をハライド体に誘導し
、これにアミル（Ｉｌｌ）を反応させる方法、（ホ）そ
の他の方法としてカルポジ酸（ＩＩ）を例えば無水酢酸
々どの脱水剤により、カルポジ酸無水物とし、これにア
ミル（ＩＩＩ）を反応させる方法、カルポジ酸（ＩＴ）
と例えば低級アルコールとのエステルにアミル（ｍ）を
高圧高温下に反応させる方法などを挙げることができる
。またカルポジ酸（ＩＩ）をトリフェニルホスフィンや
ジエチルクロ０ホスフエート等のリシ化合物で活性化し
、これに：Ｐ三シ（ｍ）を反応させる方法等によること
もできる。

上記（イ）Ｋ示す混合酸無水物法において、用いられる
混合酸無水物は通常のショツテシーバウマン反応により
得られ、これを通常単離することなくアＥ　：Ｊ（Ｉ［
Ｄと反応させることにより一般式（Ｉ）の本発明物質が
製造される。シ］ツテシーバウマン反応は、通常ショツ
テンーバウマシ反応に慣用の塩基性化合物例えばトリエ
チルアミル、トリメチルアミシ、ヒリジシ、ジメチルア
ニリン、Ｎ−メチル七ルホリシ、４−ジメチルアミノじ
り、、；シ、タ、／　（ＤＡＢＣＯ）等の有機塩基及び
炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭
酸水素ナトリウム等の無機塩基の存在下、約−２０〜１
００℃好ましくは０〜５０℃において、約５分〜１０時
間好ましくは５分〜２時間を要して行われる。

得られた混合酸無水物とア、：′：Ｊ（■）との反応は
、約−２０〜１５０℃好ましくは１０〜５０℃において
約５分〜１０時間好ましくは約５分〜５時間を要して行
われる。また上記混合酸無水物法は、一般にこの種混合
酸無水物法に慣用の溶媒、具体的には塩化メチレジ、り
００ホルム、ジクロ０エタシ等のハロゲン化炭化水素類
、べ、７ｔ！シ、トルエン、士シレシ等の芳香族炭化水
素類、ジエチルエーテル、テトラヒト０フラン、ジメト
＋シエタυ等のエーテル類、酢酸メチル、酢酸エチル等
のエステル類、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチ
ルスルホ＋シト、へ牛すメチルリシ酸トリアミド等の非
プロトン性極性溶媒などの適当な溶媒の存在下又は非存
在下で行なわれる。尚上記混合酸無水物の製造において
使用されるアル中ルハＤカルポジ酸としてはり００蟻酸
メチル、づ口℃蟻酸メチル、り００蟻酸エチル、づ０モ
蟻酸エチル、り００蟻酸イソブチル等を例示でき、之等
は通常カルポジ酸（ＩＩ）　Ｋ対し少なくとも等ＥＪＬ
７量、好ましくは約１〜２倍モル量用いられる。またア
ミυ（ＩＩＩ）の使用割合は、通常カルボン酸（ＩＴ）
　Ｋ対して少なくとも等七ル好ましくは約１〜２倍モル
とするのが好ましい。

上記（０）Ｋ示す活性エステル法は、例えばＮ−ヒトＯ
＋シコハク酸イミドエステルを用いる場合を例にとれば
、反応に影響を与え々い適当々溶媒中で行なわれる。該
溶媒としては、具体的には塩化メチレジ、り００ホルム
、ジクロ０エタシ等のハロゲン化炭化水素類、ベコ１！
シ、トルニジ、十シレシ等の芳香族炭化水素類、ジエチ
ルエーテル、テトラヒドロフラジ、ジメト牛シエタシ等
のエーテル類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類
、ｎ、ｎ　−＝；メチルホルムアミド、ジメチルスルホ
＋シト、へ士すメチルリシ酸ドリア三ド等の非づＤトル
性極性溶媒などが挙げられる。反応は、０〜１５０℃、
好ましくは１０〜１００℃で、５〜３０時間で終了する
。アミル（ＴＩＴ）とＮ−ヒト０士シコハク酸イ三ドエ
ステルとの使用割合は、後者に対して前者を通常、少な
くとも等モル、好ましくは等七ル〜２倍モルとするのが
望ましい。

上記（ニ）に示すカルポジ酸ハライドにアミυ（ＩＩＩ
）を反応させる方法を採用する場合、該反応は脱ハロゲ
ン化水素剤の存在下適当な溶媒中にて行なわれる。この
脱ハロゲン化水素剤としては、通常の塩基性化合物が用
いられる。該塩基性化合物としては公知のものを広く使
用でき、例えば上記ショツテシーバウマシ反応に用いら
れる塩基性化合物のほかに水酸化ナトリウム、水酸化カ
リウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、炭酸銀、
ナトリウムメチラート、ｆ）リウムエチラートなどのア
ルコラード等を挙げることができる。なお、アミル（ｍ
）を過剰量用いて脱ハロゲン化水素剤として兼用できる
。溶媒としては、上記ショッテシーバウマシ反応に用い
られる溶媒のほかに例えばメタノール、エタノール、づ
０パノール、づタノール、３−メト士シー１−ブタノー
ル、エチル上０ツルづ、メチルｔＯツルづ等のアルコー
ル類、ピリジシ、アセトル、アセトニトリル等又は上記
溶媒の二つ以上の混合溶媒等を挙げることができる。ア
ミル（ｌ［Ｄとカルボン酸ハライドとの使用割合は特に
限定がなく広い範囲内で適宜選択されるが、通常前者に
対して後者を少なくとも等七ル景程度、好ましくけ等芒
ル〜２倍七ル量用いるのがよい。該反応は通常−３０〜
１８０℃程度、好ましくは約０〜１５０℃にて行なわれ
、一般に５分〜３０時間で反応は完結する。ここでカル
ポジ酸ハライドの製造法としては、上記カルポジ酸（Ｔ
Ｉ）とハロゲン化剤とを無溶媒あるいは溶媒の存在下で
反応させること釦より行なわれる。溶媒としては、反応
に悪影響を与えないものであれば使用でき、例えばベシ
ｔ！シ、トルニジ、士シレシなどの芳香族炭化水素類、
り００ホルム、塩化メチレン、四塩化炭素などのハロゲ
ン化炭化水素類、ジオ士サン、テトラしドロフラジ、ジ
エチルエーテルなどのエーテル類、ジメチルホルムアミ
ド、ジメチルスルホ中シトなどが挙げられる。ハロゲン
化剤としては、ガルボ士シ基の水酸基をハロゲンに変え
る、通常のハロゲン化剤を使用でき、例えば塩化チオニ
ル、オ十シ塩化すシ、オ士シ臭化すシ、五塩化リン、五
臭化リンなどが例示される。カルポジ酸（Ｉｔ）とへ０
ゲシ化剤との使用割合はとくに限定されず適宜選択され
るが、無溶媒下で反応を行う場合には、通常前者に対し
て、後者を大過剰量、また溶媒中で反応を行う場合には
、通常前者に対して後者を少なくとも等モル量程度、好
ましくけ、２〜４倍モル量を用いる。その反応温度（お
よび反応時間）もとくに限定されないが、通常室温〜１
００℃程度、好ましくけ５０〜８０℃にて、３０分間〜
６時間程度で行なわれる。

ｔたカルボン酸（ＩＩ）をトリフェニルホスフィンやジ
エチルクロ０ホスフエート等のリン化合物で活性化し、
これにア″−：、Ｉ（（社）を反応させる方法は、適当
な溶媒中で行うことが出来る。ここで溶媒としては反応
に影響を与えないものなら何れでも使用できるが、具体
的にけ塩化メチレジ、り００ホルム、ジグ００エタン等
のハロゲン化炭化水素類、ベシゼシ、トルニジ、士シレ
シ等の芳香族炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラし
ドロフラジ、ジメト牛シエタシ等のエーテル類、酢酸メ
チル、酢酸エチル等のエステル類、Ｎ、Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルスルホ中シト、へ士すメチルリシ
酸トリアミド等の非づ０トシ性極性溶媒などが挙げられ
る。上記反応では、アミン（ｍ）自体が塩基性化合物と
して働くため、これを理論量より過剰量用いることによ
り、反応は良好に進行するが、必要に応じて、他の塩基
性化合物例えば、トリエチルアミン、トリメチルアミン
、ピリジシ、ジメチルアニリン、Ｎ−メチルモルホリシ
、１）ＢＮ％ＤＢＵ％ＤＡＢＣＯ等の有機塩基及び炭酸
カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水
素ナトリウム等の無機基基を用いることもできる。該反
応は約０〜１５０℃好ましくは約０〜１００℃において
行われ、反応時間は約１〜３０時間である。カルポジ酸
（ＴＩ）　Ｋ対するリン化合物及びアミン（ＴＩＩ）の
使用割合は夫々通常少なくとも等モル量程度好ましくは
１〜３倍モル量とされる。

オだ上記反応により得られる化合物（ＩＶ）からのアミ
ノ基の保護基（Ｒ）の離脱反応は、常法により行われる
。該方法としては例えば還元的方法（例パラジウム、パ
ラジウム黒等の触媒を用いる水素添加、液体アシモニア
中金属ナトリウムによる還元）、アシドリシス（例、ト
リフルオロ酢酸、弗化水素、メタンスルホン酸、臭化水
素酸等の強酸によるアシドリシス）等があげられる。

上記触媒を用いる水素添加は、例えば水素圧１気圧、０
〜４０℃にて行ない得、一般に１〜４８時間程度で反応
は終了する。また上記アシドリシスは、上記強酸を用い
て無溶媒下、通常Ｏ〜３０℃程度好ましくはθ〜２０″
Ｉｃで約１５分〜１時間程度を要して行ない得る。酸の
使用量は原料化合物に対し通常５〜１０倍量程度とする
のがよい。

更に上記液体アシモニア中金属ナトリウムによる還元は
、反応溶液が、パーマネシトづルーに３０秒〜ｌＯ分間
程度呈色しているような量の金属ナトリウムを用い、通
常−４０〜−７０℃程度にて行ない得る。

かくして本発明の抗生物質ＴＡ〜２４３を得る。

得られる物質は、各反応工程の終了後の適当な時期に通
常の単離精製手段により単離精製することができる。該
手段としては、例えば溶媒抽出法、希釈法、再結晶法、
カラムク０マドシラフイー、づしバラテイプ薄層りＯマ
ドグラフィー等を例示できる。

本発明物質は、前記した式［Ｉ）で表わされる構造を有
するととから明らかな通り両性化合物であり、通常の医
薬として許容される酸性化合物又は塩基性化合物と容易
Ｋｍを形成させることができる。

該酸性化合物としては例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭
化水素酸等の無機酸、シュウ酸、マレイシ酸、フマール
酸、リシｊ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸等の有機酸
をあげることができ、又該塩基性化合物としては、例え
ば水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化カリウム
、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸リチウム、
炭酸カリウム等の水酸化物及び炭酸化物及びアｙ七ニア
、エチルアミシ、ジエチルアミン等のアミン類を倒木発
明の抗生物質ＴＡ−２４３及びその塩は、とれを抗菌剤
として用いるに当り、そのｉｔで又はこれらを有効成分
として慣用の製剤担体と共に、人及び動物に投与するこ
とができる。その際投与経路及び投与単位形態は、特に
制限されず、例えば錠剤、顆粒剤、経口用溶液剤等の経
口剤、クリーム、軟膏剤などの非経口局所投与剤や注射
剤等の非経口剤等として、経口的にもしくは非経口的に
投与できる。有効成分の投与量は、投与経路、投与単位
形態、所望の薬理効果等に応じて適宜決定される。通常
１８轟り体重Ｉ　Ｋｑ当りの有効成分投与量は、約０．
１〜５０■とすればよく、これは１日１回乃至３回に分
けて投与できる。また単位形態中に配合される有効成分
量は約１〜５００■とするのが適当である。上記の投与
単位形態は、常法に従い容易に製造され、その際用い得
る担体も通常のものでよい。例えば錠剤は、有効成分を
、（５ラチシ、澱粉、乳糖、ステアリン酸マグネシウム
、滑石、アラビアづム等の賦形剤と混合して賦形される
。力づセル剤は有効成分を不活性の製剤充填剤もしくは
希釈剤と混合し、硬質ゼラチン力づセル、軟質力づセル
等に充填される。また注射等の非経口投与用薬剤は有効
成分を滅菌した液状担体に溶解又は懸濁して製造される
。好ましい担体は水又は塩水である。

以下本発明の抗生物質ＴＡ−２４３の製造例を実施例と
して挙げる。

実施例　ｌ 前々培養、前培養及び本培養のために次の組成の培地を
作成し滅菌後のｐＨを７とした。

「ア、；づ０ンＭ　７２　Ｊ　　　　　　　　　　Ｉチ
（味の素株式会社製） 硫酸マグネシウム・７水和物　　　　　０．０５チ（和
光純薬株式会社製） リシＴ＊２水素カリウム　　　　　　０．０２％（和光
純薬株式会社製） リン酸１水素ナトリウム　　　　　０．０５％（同上社
製　　　） 硫酸第１鉄・７水和物　　　　　（１，０００１チ（） 塩化マシガン・４水和物　　　　ｏ、ｏｏｏｔチ（） 硫酸亜鉛・７水和物　　　　　　０　、０００１チ（ｌ
　　　　） 水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１ｔシリコーン（信越化学社製）　　　　０．５チ
前々培養として５０００Ｃの三角フラスコに前記組成の
培地１０（ＭＡ’を入れ、斜面培養力１ら１白金耳の本
菌株（ストＬ／−５１−マイセス・クリｔオファスカス
０ＦＲ１３８８）を植菌し、２８℃にて２日間振盪培養
した。

次に前培養として前記組成の培地５００ｄを２Ｌの坂ロ
フラスコに入れ、前々培養に工９得らｈた培養液５ＣＣ
を加え３０℃、２日間振盪培養し六〇さら罠本培養とし
て前記組成の培地８００ｔを１トシタシクに入れ前培養
により得られた培養液８ｔを加え、１分間に８００ｔの
割合で通気し、内圧０．２Ｋｇ／ｃｄとし、１５０　ｒ
ｐｍで攪拌し、３７℃、２５時間培養した。培養終了後
、［パーライトＡ３４Ｊ（東興バーライト工業社製）を
３％加えフィルタープレスで瀘過して炉液７２０ｔを得
た。これを２Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＥＦ３〜９に
調整し、強塩基性陰イオシ交換樹脂［タイヤイオシＩ）
　Ａ　４０６　Ｊ　（ＣＨ３ＣＯＯ−１三菱化成社製）
４０ｔＶｃ吸着させた。水洗後、１七ルの酢酸１００ｔ
で溶出を行ない、活性分画７０ｔを得た。

これを強酸性陽イオシ交換樹脂「Ｄｏｗｅｘ５０ｗＸ４
Ｊ（ｆｆ＋）ｉウケミカル社製）４ｔに吸着させ、水洗
後、１モルアシ七ニア８．ＯＬで溶出を行ない、活性分
画５．２ｔを得た。これをロータリーエバポレーターで
濃縮してｉ、＋　ｔとしメタノール２ｔを加えて４℃で
一夜放置した。生じた沈殿を遠心分離して除ぎ、上清を
Ｄ−タリーエバポレーターで濃縮して５５０ｍ１とした
。これに２Ｎ塩酸５０ｍ／を加えて、Ｐ　Ｈ３〜４に調
整し、ｒ　Ｄｏｗｐｘ５０ｔａｘ４Ｊ　（、Ｚｒ＋）　
　（タウケミカル社製＞１ｔに吸着させた。水洗後、塩
化ナトリウム０〜１．０モルで勾配溶出を行ない活性分
画１．２１を得た。これを水で希釈して２０１とし、２
Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７〜８に調整した後、強
塩基性陰イオシ交換樹脂［Ｄｏｗｇｘ　Ｉ　Ｘ　２　Ｊ
　（ＣＨ３ＣＯＯ０）（〈ウケミカル社製）ＩｔＫ吸着
させた。水洗後０．１ｔル酢酸で溶出し活性分画５００
ｍ１を得た。

この分画をロータリーエバポし一ターで濃縮して２０ｍ
１とし２Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７Ｖｃ調整した
後、「Ｄｏｗｅｒ　Ｉ　Ｘ　２　Ｊ　（ｃｗ３Ｃ’００
−　）　２００ｍ１Ｋ吸着させた。水洗後、塩化ナトリ
ウム０〜０．５七ルで勾配溶出を行表い、活性分画６４
０ｍ１を得た。この分画を０−タリーエバポレーターで
濃縮し、析出した塩化ナトリウムを沖過して除き、ろ液
を高速液体りＯマトジラフで分画した。カラムはｒＬｓ
４１０ＫＧ」（Ｉφ１ｎｃｈ　ｘ　３　Ｑｃｒｎ、東洋
曹達工業社製）を使用し、展開溶媒として０．０１七ル
酢酸：メタノール＝１９：１を用い、９　ｍｌ　／ｍｉ
ｎで展開してｌ　９．５　ｍｉｎにピークを示す目的物
質を得た。この活性ピークをくり返し実験することによ
って集め、凍結乾燥して本発明物質の白色粉末１，５０
２を得た。

この物質は、前述の理化学的性質を示した。

実施例　２ α−アミノオ牛シ］ハク酸塩酸塩１ｖのジメチルホルム
アミド溶液３０ｄＫ）リエチルアミシ３２を加え、室温
で攪拌しながら更にｔ−づチルオ士ジカルボニルーＬ−
バリル−Ｌ−バリシーＮ−オ十シコハク酸イミドエステ
ル２ｖを加え、−夜攪拌した。次いで水冷下にて水ｌｏ
ｏｍ／を加え、塩酸酸性とし、酢酸エチル３００−で抽
出し、抽出液を留去後、残渣にトリフルオロ酢酸２０−
を加え室温で１時間攪拌した。減圧下でトリフジオ０酢
酸を留去し残渣を水ＩＱｍ／に溶解し、シリカゲルＯＤ
Ｓの高速液体り０マドグラフイー（ＬＳ４１０、ｌ　１
ｎｃｈφＸ３０ｃｍｔ東洋曹達株式会社）を行い、本発
明物質及びそのジアステレオマーを含む溶出液を得た。

この時の溶出溶媒は、Ｏ，ＩＭクエシ酸水溶液３０−１
０．２Ｍリン酸二ナトリウム水溶液２０ｒｎ１．メタノ
ールｌ０ｍ１に水を加えｌｔに調整した液を用いた。本
発明物質を含む溶出液は減圧で濃縮し、更にシリカゲル
ＯＤＳの高速液体り０マドグラフイーを行い、凍結乾燥
をし純粋な本発明物質の白色粉末５４０■を得た。

２度目の高速液体りＤマドクラフィーは、溶出溶媒にメ
タノール３．５％を含む０．０１＆酢酸水溶液を用い１
分間に９ｄの流量で溶出した。

かくして得られた本発明物質は以下の構造を有し、前述
の理化学的性質を示した。

Ｉ （Ｌ）（Ｌ）ＣＨ２−ＣＯＯＨ 以下本発明の抗生物質ＴＡ−２４３を用いた製剤例を挙
げる。

製剤例　１ づドウ糖　　　　　　　　　　　　　　２５０叩全　　
　　　　量　　　　　　　　　　　　５ｍ、／注射用蒸
留水に本発明の抗生物質ＴＡ−２４３の２ナトリウム塩
及びづドウ糖を溶解させた後、５ｍｌのアシづルに注入
する。窒素で置換後１２１℃で１５分間加圧滅菌を行い
注射剤を得る。

製剤例　２ 本発明の抗生物質ＴＡ−２４３の塩酸塩　　　　５００
Ｗ９シヨ糖　　　　　　　　　　　　　２００■全　　
　　　　量　　　　　　　　　　　　５　ｍｌ製剤例Ｉ
Ｋ準じて注射剤を得る。

以下、本発明の抗生物質ＴＡ−２４３につき行なったー
抗菌試験例を挙げる。

〈抗菌試験例〉 本発明抗生物質ＴＡ−２４３を水溶液とし、これを水で
所定濃度に希釈しく２倍希釈法）、各希釈液１　ｍｌを
シャーレにとり、下記組成の培地と混合して、平板を作
成し、６菌につき最小阻止濃度（μｆ／ａ／）を求めた
結果を下記第２表に示す。

培地 （） （同上社製　　　） 寒　　　天　　　　　　　　　　　　　　　　２ヒトプ
ラズマ　　　　　　　　　５ 第　　２　　表

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の抗生物質ＴＡ−２４３の赤外線吸収ス
ペクトル図及び第２図は同物質の核磁気、共鳴スペクト
ル図を示す。 （以　上）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ０式 ％式％ で表わされる新規抗生物質ＴＡ−２４３、