JPS5921394A - ダウノマイシンの製造法 - Google Patents
ダウノマイシンの製造法Info
- Publication number
- JPS5921394A JPS5921394A JP57129370A JP12937082A JPS5921394A JP S5921394 A JPS5921394 A JP S5921394A JP 57129370 A JP57129370 A JP 57129370A JP 12937082 A JP12937082 A JP 12937082A JP S5921394 A JPS5921394 A JP S5921394A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- daunomycin
- streptomyces
- medium
- producing
- downmycin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
不完ψ］はダウノマイシン（別名ダウ７）［ビシン）と
節名芒ノまた抗楯性抗生物買を製造する一ｒしい方法に
関し、史に静しくは、ストレプトミセス属に桟するダウ
ノマイシン及びその類縁化合物を同時に生産する微生物
に由来し、ダウンマイシンＭ緑化合物の生産能が欠失し
たダウノマイシンを生産するｆｆｔ：力を有するｆ：異
ｍ株を栄誉培地で墳誉し、該尾来吻からダウンマイシン
を採取することを特徴とする、ダウノマイシンの８ｍ方
法を提供するものでわる。
節名芒ノまた抗楯性抗生物買を製造する一ｒしい方法に
関し、史に静しくは、ストレプトミセス属に桟するダウ
ノマイシン及びその類縁化合物を同時に生産する微生物
に由来し、ダウンマイシンＭ緑化合物の生産能が欠失し
たダウノマイシンを生産するｆｆｔ：力を有するｆ：異
ｍ株を栄誉培地で墳誉し、該尾来吻からダウンマイシン
を採取することを特徴とする、ダウノマイシンの８ｍ方
法を提供するものでわる。
で示されるタウノマイシンは、アントラサイクリン糸抗
生物買に祠し、癌化学僚法上、亜女な一斥用制馳刑の１
つで、特に急性白血病の治療には不司欠の業１１１ｊで
める〇 本物賀の製造に関しては、ストレプトミセスヒコ、セテ
イウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅａ ｐｅｕｃｅｔｌｕ
ｓ ）Ｎ、Ｃ７Ｌ Ｂ、 ９４７５ を１＠末するこ
とにより取得する方法（特公昭４４−１８９１．３号公
＠診照）、ストレプトミセス コエルレオルビダス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｒｕ −１ｅｏｒｕｂ
ｉｄｕｓ ）ＮＲＲＬ ３０４５及びＮＲＲＬ、 ａ（
１４６を培質し７、イ々Ｉられる抗生物實コンプレック
スをＩＫ処理により有効に変換し取得する方法（特公昭
４５−２４９６１号公報ｄ照）、ストレプトミセス グ
リセウス バライエティ ルビドファシエンス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｒｉａｅｕｓ ｖａｒ、ｒｕｂ
ｌｄｏｆａｃｉｅｎｓ ）Ｉ）Ｓ ３２０４１ を用
誉することにより取イ０する方法（ｌ侍公昭５０−１５
８８０ ＋’公ｍ ｍ ｎに）及びストレプトミセス
ピッアルカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｂｉｆｕｒ
ｃｕａ ） ＤＳ ２３２１９ ｆ ５Ｍ 来する方法
（特公昭５２−１８２７９り公報参照）が知られでいる
。
生物買に祠し、癌化学僚法上、亜女な一斥用制馳刑の１
つで、特に急性白血病の治療には不司欠の業１１１ｊで
める〇 本物賀の製造に関しては、ストレプトミセスヒコ、セテ
イウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅａ ｐｅｕｃｅｔｌｕ
ｓ ）Ｎ、Ｃ７Ｌ Ｂ、 ９４７５ を１＠末するこ
とにより取得する方法（特公昭４４−１８９１．３号公
＠診照）、ストレプトミセス コエルレオルビダス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｒｕ −１ｅｏｒｕｂ
ｉｄｕｓ ）ＮＲＲＬ ３０４５及びＮＲＲＬ、 ａ（
１４６を培質し７、イ々Ｉられる抗生物實コンプレック
スをＩＫ処理により有効に変換し取得する方法（特公昭
４５−２４９６１号公報ｄ照）、ストレプトミセス グ
リセウス バライエティ ルビドファシエンス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｒｉａｅｕｓ ｖａｒ、ｒｕｂ
ｌｄｏｆａｃｉｅｎｓ ）Ｉ）Ｓ ３２０４１ を用
誉することにより取イ０する方法（ｌ侍公昭５０−１５
８８０ ＋’公ｍ ｍ ｎに）及びストレプトミセス
ピッアルカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｂｉｆｕｒ
ｃｕａ ） ＤＳ ２３２１９ ｆ ５Ｍ 来する方法
（特公昭５２−１８２７９り公報参照）が知られでいる
。
しかしながら、ダウノマイシン生座凶として餡められて
いるストレプトミセス コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｒｕｌｏｏｒｕｂｌｄｕｓ
）の−画体ＭＥ１３０−Ａ４ によるパラマイシン類
の生産（特公昭５６−２０３１９号公龜及びＪ、 Ａｎ
ｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ３０． ６１９−６２１ 、 ６
２２−６２４ 、１９７７ ）で明らかにされた憾に、
上目己瞬ト公様に１し４載のダウノマイシン生産菌は本
来発情グロス中に最終生産物としてダウンマイシンを生
産蓄積すると同時にダウンマイシンのダウノツミンＣ−
４′位に更に中性糖体物質の結合した次を衣わす。
いるストレプトミセス コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｒｕｌｏｏｒｕｂｌｄｕｓ
）の−画体ＭＥ１３０−Ａ４ によるパラマイシン類
の生産（特公昭５６−２０３１９号公龜及びＪ、 Ａｎ
ｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ３０． ６１９−６２１ 、 ６
２２−６２４ 、１９７７ ）で明らかにされた憾に、
上目己瞬ト公様に１し４載のダウノマイシン生産菌は本
来発情グロス中に最終生産物としてダウンマイシンを生
産蓄積すると同時にダウンマイシンのダウノツミンＣ−
４′位に更に中性糖体物質の結合した次を衣わす。
て７］りされるバラ岩マイ／ン知を生ｐＬ葡（實する１
Ｆ質を有し７ている。従って、これらの発酵ブロスより
ダウノマイシンを七幼に柩侍するためには、発酵ブロス
を弛い【ＩダＦｆｊＦ’ （ｐＨ２，０以ド）で抽出乃
至は史に熱処理（ｉ＋ｌＪえは特公昭４５−２４９６１
＋−ｉ′公報ト照）することにより、Ｃ−４′位に結
合している中性糖を離脱させダウノマイシンに変換せし
める必賢がある。本保作代は上ｈｔのいずれの時計公将
等にもψ（ｍｌされている鬼庫的操作である。ｌお、バ
ラフィシン左１しこ結合しているのと全く同一の中４！
Ｊ：砧によるタウンサミンＣ−４’位の修帥は、カルミ
ノマイノン生ＩＩ１． ｕ’４株（Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏ
ｔｉｃｓ ２７．２Ｍ、 ３４．７７４ ）でも明らか
にされており、ダウノマイシン、カルミノマイシンなと
同−柑・に属するアントラザイクリン仇生物買生韮困体
に共通した性徴といえる。
Ｆ質を有し７ている。従って、これらの発酵ブロスより
ダウノマイシンを七幼に柩侍するためには、発酵ブロス
を弛い【ＩダＦｆｊＦ’ （ｐＨ２，０以ド）で抽出乃
至は史に熱処理（ｉ＋ｌＪえは特公昭４５−２４９６１
＋−ｉ′公報ト照）することにより、Ｃ−４′位に結
合している中性糖を離脱させダウノマイシンに変換せし
める必賢がある。本保作代は上ｈｔのいずれの時計公将
等にもψ（ｍｌされている鬼庫的操作である。ｌお、バ
ラフィシン左１しこ結合しているのと全く同一の中４！
Ｊ：砧によるタウンサミンＣ−４’位の修帥は、カルミ
ノマイノン生ＩＩ１． ｕ’４株（Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏ
ｔｉｃｓ ２７．２Ｍ、 ３４．７７４ ）でも明らか
にされており、ダウノマイシン、カルミノマイシンなと
同−柑・に属するアントラザイクリン仇生物買生韮困体
に共通した性徴といえる。
本発明省らは、バラマイシン知がダウノマイシンエリ生
合成きれることを明らかにしており、（例えｋｊ Ｊ、
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、 ３３． １１５８ ）これ
らの９ｉ］児に従い生合成経路上の一点、即ちダウノマ
イシンに中性糖を結合せしめる＃索反応を欠失した変異
菌株を選別単離することにより、ダウノマイシンＭＭ化
合物を生産することなくダウノマイシンを直接敲終生産
物として蓄積、取得することが可能であるとの考えに基
いて鋭意研死した結果、ダウンマイシン及びバラマイシ
ンの生産菌ストレプトミーｔ：スコ！／Ｌ’レオルビダ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂ
ｉｄｕａ ） ＭＥＩ：１Ｏ−Ａ４ （傭工研薗奇第３
５４０号及びＡＴＣＣ３１２７６）の変異処理により、
ノくウマイラン類を？く生産せずに、それらの前駆体で
るるダウンマイシンを生産するように変化した目的の食
鶏画体の埠陥に成功した。
合成きれることを明らかにしており、（例えｋｊ Ｊ、
Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、 ３３． １１５８ ）これ
らの９ｉ］児に従い生合成経路上の一点、即ちダウノマ
イシンに中性糖を結合せしめる＃索反応を欠失した変異
菌株を選別単離することにより、ダウノマイシンＭＭ化
合物を生産することなくダウノマイシンを直接敲終生産
物として蓄積、取得することが可能であるとの考えに基
いて鋭意研死した結果、ダウンマイシン及びバラマイシ
ンの生産菌ストレプトミーｔ：スコ！／Ｌ’レオルビダ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂ
ｉｄｕａ ） ＭＥＩ：１Ｏ−Ａ４ （傭工研薗奇第３
５４０号及びＡＴＣＣ３１２７６）の変異処理により、
ノくウマイラン類を？く生産せずに、それらの前駆体で
るるダウンマイシンを生産するように変化した目的の食
鶏画体の埠陥に成功した。
本画体の如き！！４：質を有す・る変異株の単離につい
ては、今までまだ報告それておらず、□本発明者らによ
り初めて取得されたものである０ 本ｕＡ＃ｌｌ★でダウノマイシｙｔＤ類縁化合智と線、
上述のパラマイシン類抗生物負や１３２１３Ｒ，Ｐ−１
負（狩公昭４５−２４’１６１号公報参照）等を総称し
た意味で用いた。・ 。
ては、今までまだ報告それておらず、□本発明者らによ
り初めて取得されたものである０ 本ｕＡ＃ｌｌ★でダウノマイシｙｔＤ類縁化合智と線、
上述のパラマイシン類抗生物負や１３２１３Ｒ，Ｐ−１
負（狩公昭４５−２４’１６１号公報参照）等を総称し
た意味で用いた。・ 。
しかして、本うろ明によれば、ダウンマイシン及びその
類縁化合＠を同時に生産する微生物としては、内りｉ己
ストレフトミセス８，８９９、 ストレプトミセス
ビュ七ティウス、ストレプトミセス グリセウス パン
イエティ ルビド７アシエンス１）Ｓ３２１３４１ 、
ストレプトミセス ビ７アーカスＤＳ ２３２１９６
Ｌ ＜ ｄストレプトミセス コエルレメルビダスＭＥ
１３０−Ａ４ 又１はそれらの賞！Ａ―体を争けるこ
とができるが、これらの固体以外でもダウノマイシン及
びその類縁化合智を同時に生殖するストレプトミセス属
に属する微生物であれば、いずれも本光鴫に用いられる
ダウノマイシン胡縁化会物の生ａｉｉ：が□欠失したダ
ウノマイシンを生産するｙ！Ｂ力を有する変異画体の観
ｌ体として用いることかで＠る。これらのうち、本兄明
において好適に用いられるものとしては、ストレプトミ
セス コエルレオルビダスＭＥ１３０−Ａ４（＃工研薗
寄第ア４０号及びＡＴＣＣ３１２７６）及びこれに近似
するストレプトミセス８８９９ （ＮｌζＲＬ ３０４
６ ）が挙げられる。
類縁化合＠を同時に生産する微生物としては、内りｉ己
ストレフトミセス８，８９９、 ストレプトミセス
ビュ七ティウス、ストレプトミセス グリセウス パン
イエティ ルビド７アシエンス１）Ｓ３２１３４１ 、
ストレプトミセス ビ７アーカスＤＳ ２３２１９６
Ｌ ＜ ｄストレプトミセス コエルレメルビダスＭＥ
１３０−Ａ４ 又１はそれらの賞！Ａ―体を争けるこ
とができるが、これらの固体以外でもダウノマイシン及
びその類縁化合智を同時に生殖するストレプトミセス属
に属する微生物であれば、いずれも本光鴫に用いられる
ダウノマイシン胡縁化会物の生ａｉｉ：が□欠失したダ
ウノマイシンを生産するｙ！Ｂ力を有する変異画体の観
ｌ体として用いることかで＠る。これらのうち、本兄明
において好適に用いられるものとしては、ストレプトミ
セス コエルレオルビダスＭＥ１３０−Ａ４（＃工研薗
寄第ア４０号及びＡＴＣＣ３１２７６）及びこれに近似
するストレプトミセス８８９９ （ＮｌζＲＬ ３０４
６ ）が挙げられる。
゛また、ダウノマイシン類縁化合物の生産能が欠失した
ダウノマイシンを生産する変：Ａ−抹としては上６己ス
トレプトミセス緘に属する似生物に出来するもので、ダ
ウノマイシン及びそのＭ 線化合物を同時ＶＣ生産する
菌株の変異によって得られるダクノマイ／ン朔縁化合、
物の生産ｙｌヒが欠失したダウンマイシンを生産するｉ
ａが全て・含まれるが、好適なものとしては、前記ＭＥ
１３０−ＡＪ ｍ株・（＋−変異処理することＶＣよ
つて得られるストレプトミセスコエルレオルビダス３Ｔ
−３７３＊＜株を挙げることができる。
ダウノマイシンを生産する変：Ａ−抹としては上６己ス
トレプトミセス緘に属する似生物に出来するもので、ダ
ウノマイシン及びそのＭ 線化合物を同時ＶＣ生産する
菌株の変異によって得られるダクノマイ／ン朔縁化合、
物の生産ｙｌヒが欠失したダウンマイシンを生産するｉ
ａが全て・含まれるが、好適なものとしては、前記ＭＥ
１３０−ＡＪ ｍ株・（＋−変異処理することＶＣよ
つて得られるストレプトミセスコエルレオルビダス３Ｔ
−３７３＊＜株を挙げることができる。
本兄明の目的ｅｃ遇する変異画体を年真住するには、り
゛ウノマイ７ン及びダウン・マイシンｂｔｈ化合物を同
時にＬＰＨＭすることが知られている１１Ｊ述の１株を
それ自体公知でめる通′にの俊典・処理によｐ取偕する
ことが出来る。その−例を示せば、ストレプトミセス
コエル、レオルピダスＭＥ１３０−ＡＪ ｔｓ体ｅＹ３
、Ａい、。４３％１工、ヤ７．１．。、５□ア７７’７
． １１．５−寒天、ｐＨ７，２）磨１１ＬＩに＋
＆株し、−週間２８℃でη 増資する。曇化ずる胞子をエーゼにてか！！果め、５
ｍｔ’の無１ｉＭ Ｏ，ＩＭ ）リス−１ｍＭ Ｅυ’
ｌｌ’Ａ ｙ淘柩（ｐＨ８，５）に休り、も１音波処
理Ｌ ｉ’ｏｍｙ ５ｅｉｋｏ ＋ Ｕｌｔｒａ−ｓｏ
ｎｉｃ Ｌ）ｉｓｒｕｐｔｏｒ 、 ＋ｎｏｄｅｌ Ｌ
ＪＲ−２ｔ１ＵＰで１５秒＋ｊｌｌ ） ｋ行い、次い
で無菌脱Ｈ′Ｆｔ綿をバックした小２ガラス管（φ１．
２ Ｘ ＺＭｎｎ ） 會ｍ １４ ’させ、ｉ＊ ｔ
＞ ｙｕ枠な均−胞子数４．５−を倚る〕 これに１０
〜／；７１７！ ＊ Ｋの Ｎ、−メチ □ルーＮ
′−二トローＮ−ニトロノグアニジｙ（ＮＴＧ）丞俗ａ
を０．５ ｒｎｌ ｍｉｉａＬ、ゆるやかに振盪しなが
ら２８℃で６０分間友Ａ処理を竹う。 この時点での収
□困率は９２．ｂ矛でわっだ０ 処理俊、腐凶
生理４賞塙水□ で適当に布釈し、での（）、ｌ−をＹＳＳ公転前出）を
プＶ、−）、Ｌ、固化妊ぜにシャレー子板上１１ＣＭ１
曲し、２８ｔＥで５日間項一する。任じるコロニーをＹ
ＳＩｖ大斜ｍｊ（ｓｉｔ出）に単離し、培養して以下の
方法ｔこよりタウノマイシン生題性を検する。
゛ウノマイ７ン及びダウン・マイシンｂｔｈ化合物を同
時にＬＰＨＭすることが知られている１１Ｊ述の１株を
それ自体公知でめる通′にの俊典・処理によｐ取偕する
ことが出来る。その−例を示せば、ストレプトミセス
コエル、レオルピダスＭＥ１３０−ＡＪ ｔｓ体ｅＹ３
、Ａい、。４３％１工、ヤ７．１．。、５□ア７７’７
． １１．５−寒天、ｐＨ７，２）磨１１ＬＩに＋
＆株し、−週間２８℃でη 増資する。曇化ずる胞子をエーゼにてか！！果め、５
ｍｔ’の無１ｉＭ Ｏ，ＩＭ ）リス−１ｍＭ Ｅυ’
ｌｌ’Ａ ｙ淘柩（ｐＨ８，５）に休り、も１音波処
理Ｌ ｉ’ｏｍｙ ５ｅｉｋｏ ＋ Ｕｌｔｒａ−ｓｏ
ｎｉｃ Ｌ）ｉｓｒｕｐｔｏｒ 、 ＋ｎｏｄｅｌ Ｌ
ＪＲ−２ｔ１ＵＰで１５秒＋ｊｌｌ ） ｋ行い、次い
で無菌脱Ｈ′Ｆｔ綿をバックした小２ガラス管（φ１．
２ Ｘ ＺＭｎｎ ） 會ｍ １４ ’させ、ｉ＊ ｔ
＞ ｙｕ枠な均−胞子数４．５−を倚る〕 これに１０
〜／；７１７！ ＊ Ｋの Ｎ、−メチ □ルーＮ
′−二トローＮ−ニトロノグアニジｙ（ＮＴＧ）丞俗ａ
を０．５ ｒｎｌ ｍｉｉａＬ、ゆるやかに振盪しなが
ら２８℃で６０分間友Ａ処理を竹う。 この時点での収
□困率は９２．ｂ矛でわっだ０ 処理俊、腐凶
生理４賞塙水□ で適当に布釈し、での（）、ｌ−をＹＳＳ公転前出）を
プＶ、−）、Ｌ、固化妊ぜにシャレー子板上１１ＣＭ１
曲し、２８ｔＥで５日間項一する。任じるコロニーをＹ
ＳＩｖ大斜ｍｊ（ｓｉｔ出）に単離し、培養して以下の
方法ｔこよりタウノマイシン生題性を検する。
（１戎゛
ｔず以下に示す４１ｊｉｆ母用培地４−を分注導凶した
試緘管に、上６０Ｉ−抹を一白金耳接柚ｔ、、２８℃で
２１間、往復振盪墳誉する。
試緘管に、上６０Ｉ−抹を一白金耳接柚ｔ、、２８℃で
２１間、往復振盪墳誉する。
４１１１母用培地
「］」府性アンシフ １Ｊ、５％グ
ルｊ−ス ｏ５％エスリ＞′ミー
ト（味の素付製、犬豆紛） １０％師母エキス
０．１％ＮａＣ１Ｏ，１％ Ｋ ２Ｉｌｌ’０４０．１ ％ Ｍｇ５（Ｊ４ ＠７Ｈ２００，１％ 水道水 ｐＨ７，４ ：１へ 次いでＦ Ｈ己の本培％培地２０ｍ１を分注凍菌した２
５０−ｒｎｌ、を三角フラスコに全警接袖し、２８℃で
７１−１１１１ 、ロータリーシェカー上で振鍾墳誉す
る。
ルｊ−ス ｏ５％エスリ＞′ミー
ト（味の素付製、犬豆紛） １０％師母エキス
０．１％ＮａＣ１Ｏ，１％ Ｋ ２Ｉｌｌ’０４０．１ ％ Ｍｇ５（Ｊ４ ＠７Ｈ２００，１％ 水道水 ｐＨ７，４ ：１へ 次いでＦ Ｈ己の本培％培地２０ｍ１を分注凍菌した２
５０−ｒｎｌ、を三角フラスコに全警接袖し、２８℃で
７１−１１１１ 、ロータリーシェカー上で振鍾墳誉す
る。
台ガ酵ｆＲ５俤
ｒ痔母エキス ０３愼１
１１１ｆに性テンノン ７５≠ＮａＣ６０，
２％ ＣａＣＯ３ｔｌ、３ ％ ミネラル米 ０．１２５≠水道水 ［市８０ 米ＣｕＳＯ４壷５Ｈ２０２，８ｒ 、 ｉＩ′ｅｓＯ４
７Ｈ２００，４ｆ 。
２％ ＣａＣＯ３ｔｌ、３ ％ ミネラル米 ０．１２５≠水道水 ［市８０ 米ＣｕＳＯ４壷５Ｈ２０２，８ｒ 、 ｉＩ′ｅｓＯ４
７Ｈ２００，４ｆ 。
ＭｎＣ７２−４Ｈ２０３，２ｙ、 ＺｎＳＯ４’７Ｈ２
００，８ｙ？Ｃ蒸曲水５００ ｎｄ″に的屓したもの。
００，８ｙ？Ｃ蒸曲水５００ ｎｄ″に的屓したもの。
合培来フラスコより、プロスｌ ｍｅをツンゾリンダし
、これにアセトン２ｍｌ全力（１え、サーモミキサ１ニ ーにて撹拌しくＬ越、Ｗ＞金欣鳩拙出する。遠〕１ツタ
１〜坤に△ 上り上６１と国体に分ち、−ｈｅｒ区分の２０μｌをソ
リカゲル簿ノー（メルク社製、Ｆ□、４）の下緬より２
ｒ１ｎの位置にｌ ｃｍ ＩＩＪＩ崗でスポットし、ク
ロロホルム／メタノール／水／酢酸（８０／２０／２１
０．２ ） で展開し、ダウンマイシン樟準品と比較
する。８ｍ株及び質メ（処理の大部分はバラマイシンＨ
４（ＡＩ ＋ Ａ２ ＋ Ｂ、＋８２等）及びアグリコ
ン胡から成る、多数の赤惜已のスポットを与えるが、本
発明のダウンマイシン生腕性ｆ異株でＶｉ備かにジヒド
ロダウノマイシン ：の０ｙ少スポツトを認めるが、
ダウンマイノン以外のアントラサイクリングリコシドの
スポットは検出されない。
、これにアセトン２ｍｌ全力（１え、サーモミキサ１ニ ーにて撹拌しくＬ越、Ｗ＞金欣鳩拙出する。遠〕１ツタ
１〜坤に△ 上り上６１と国体に分ち、−ｈｅｒ区分の２０μｌをソ
リカゲル簿ノー（メルク社製、Ｆ□、４）の下緬より２
ｒ１ｎの位置にｌ ｃｍ ＩＩＪＩ崗でスポットし、ク
ロロホルム／メタノール／水／酢酸（８０／２０／２１
０．２ ） で展開し、ダウンマイシン樟準品と比較
する。８ｍ株及び質メ（処理の大部分はバラマイシンＨ
４（ＡＩ ＋ Ａ２ ＋ Ｂ、＋８２等）及びアグリコ
ン胡から成る、多数の赤惜已のスポットを与えるが、本
発明のダウンマイシン生腕性ｆ異株でＶｉ備かにジヒド
ロダウノマイシン ：の０ｙ少スポツトを認めるが、
ダウンマイノン以外のアントラサイクリングリコシドの
スポットは検出されない。
以上の方法１１Ｃより、ネタも明の目的に逸する震異薗
抹はおよそ変異処理コロニー５０００田株中、 １徊の
割合で取得された。
抹はおよそ変異処理コロニー５０００田株中、 １徊の
割合で取得された。
かくして得られる画体の一つであるストレプトミセス
コ体ルレオルビメス３Ｔ−３フ３休の国学的性 （Ｋ
を Ｆ −己 に ４く ず 。
コ体ルレオルビメス３Ｔ−３フ３休の国学的性 （Ｋ
を Ｆ −己 に ４く ず 。
１、形 感
：１Ｔ−３７３休は 分枝した基中困丞よりｌｊ１稼状
わるいは／、−Ｊ法の気凶丞を形成し、輪庄孜は見られ
ない。成熟胞子鎖は１０ケ以」―で、 胞子の大きさは
０４〜０．８ Ｘ １．２〜２０ミクロン位で、胞子の
べ面＆−１舛３んど平ｔＨでめる。時に一部のｌ賎ｆ・
の人血に刺状突起の痕１・神の突起が涌かにｍｌめられ
る事がろる０ ２．６他培地におけるＩＳ’、 Ｈ状態（！）／ニーク
ローズ・如削ｔ４球大用地（２８℃培賓）うすｌどいた
い或はにぶだいたい、ないしは１ル（るい＋ （４ｅａ
〜４ｇｃ ）のａ−ｎ−上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気蘭丞をガイ化し、１ｒ４解性色累の生成は殆ん
ど認められない。
わるいは／、−Ｊ法の気凶丞を形成し、輪庄孜は見られ
ない。成熟胞子鎖は１０ケ以」―で、 胞子の大きさは
０４〜０．８ Ｘ １．２〜２０ミクロン位で、胞子の
べ面＆−１舛３んど平ｔＨでめる。時に一部のｌ賎ｆ・
の人血に刺状突起の痕１・神の突起が涌かにｍｌめられ
る事がろる０ ２．６他培地におけるＩＳ’、 Ｈ状態（！）／ニーク
ローズ・如削ｔ４球大用地（２８℃培賓）うすｌどいた
い或はにぶだいたい、ないしは１ル（るい＋ （４ｅａ
〜４ｇｃ ）のａ−ｎ−上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気蘭丞をガイ化し、１ｒ４解性色累の生成は殆ん
ど認められない。
（２）グルコース・アスパラギン外人培地（２８℃用食
） 灰ν（或は明るいオレンジ黄、ｌいＬ ｔ：ｊう−Ｉ゛
だいだい（３ｅｃ〜３ｅａ〜４ｅａ）の発＃をなす気凶
丞は殆んどル成されず、＃ｔ ）Ｗ ａｂ累も紹んど生
成されない。
） 灰ν（或は明るいオレンジ黄、ｌいＬ ｔ：ｊう−Ｉ゛
だいだい（３ｅｃ〜３ｅａ〜４ｅａ）の発＃をなす気凶
丞は殆んどル成されず、＃ｔ ）Ｗ ａｂ累も紹んど生
成されない。
（３）グリセリノーアスパラギン轢大培地（ＩＳＰ −
培地５．２８℃） う−！ｌといだい（４ｅａ、）或はだいだい、ないしＦ
ｉ、１１１ｔいだいだいの発Ｗ上に灰黄味ピンク（５、
ｅｂ）の気菌糸を庸生じ、齢解性色素は備かにだいてい
色を蛍びる。
培地５．２８℃） う−！ｌといだい（４ｅａ、）或はだいだい、ないしＦ
ｉ、１１１ｔいだいだいの発Ｗ上に灰黄味ピンク（５、
ｅｂ）の気菌糸を庸生じ、齢解性色素は備かにだいてい
色を蛍びる。
（４）無情場・スターチ寒天培地（ｌ５Ｐ−培地４゜２
８℃） 明るい撹貢或はうすだいだい（，３ｅａ〜４ｅａ）、な
いしは赤味だいだいの発育上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気菌糸を盾生し、俗解性色素はピンクを、或は僅、
かにピンク色を帯びる。
８℃） 明るい撹貢或はうすだいだい（，３ｅａ〜４ｅａ）、な
いしは赤味だいだいの発育上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気菌糸を盾生し、俗解性色素はピンクを、或は僅、
かにピンク色を帯びる。
（５）チロジＺ ９１大培地（ｌ５Ｐ−培地７．２８℃
）うすだいだい（４ｅａ ）或は黄茶、ないしは赤味た
いだいの発言上に、第ｆ！ｒ：蛍びた白（１３ｂａ ）
ｌｘいし灰黄味ビ、、ンク（５ｃｂ）の気菌糸を層生
じ、俗解憔色系は殆んど畔められない。
）うすだいだい（４ｅａ ）或は黄茶、ないしは赤味た
いだいの発言上に、第ｆ！ｒ：蛍びた白（１３ｂａ ）
ｌｘいし灰黄味ビ、、ンク（５ｃｂ）の気菌糸を層生
じ、俗解憔色系は殆んど畔められない。
培膏量期（約２０日）に及ぶとだいだい色を帝。
びる。 ・ 。
（６）栄来寒天培地（２８℃培貢） ′ □亦
ないし暗い赤の兄げ上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ）ない
し極うすい票（１１ｃｍ ）のＡ１糸を庸生し、ｍｐｓ
性色素はピンク色を蛍びる。
ないし暗い赤の兄げ上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ）ない
し極うすい票（１１ｃｍ ）のＡ１糸を庸生し、ｍｐｓ
性色素はピンク色を蛍びる。
１カイ−ストφ友芽緑大用地（ＩＳＰ−用地２．２８０
） にぶだいだい（４ＩＩｃ）或（は黄糸、ないしは亦味茶
の発育上に灰貢林ピンク（５ｃｂ）の気菌糸をはじめは
うつすらと、用驚佼１４１：Ｉ目頃より豊富に漕生じ、
苗解性色累はたいたい色を僅かに帯びる。
） にぶだいだい（４ＩＩｃ）或（は黄糸、ないしは亦味茶
の発育上に灰貢林ピンク（５ｃｂ）の気菌糸をはじめは
うつすらと、用驚佼１４１：Ｉ目頃より豊富に漕生じ、
苗解性色累はたいたい色を僅かに帯びる。
１８）オートミル参人培地（ｌ５Ｐ−培地、２８℃）明
るい赤系（５ｅａ ）双は赤系、ないしは茶の９ｔ５Ｈ
上に灰＃、味ピンク（５ｃｂ ）の気菌糸を屑生し、冶
屓社色系Ｉｉ惚く僅かにビン、り色を態ひる。
るい赤系（５ｅａ ）双は赤系、ないしは茶の９ｔ５Ｈ
上に灰＃、味ピンク（５ｃｂ ）の気菌糸を屑生し、冶
屓社色系Ｉｉ惚く僅かにビン、り色を態ひる。
（９）グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（２０’Ｃ
培養） 黄茶ないし暗い茶の）Ａ宵上に、うずく白色の気−系を
値かにＺＪ生し、俗′１１４ａ色素は僅かに茶色を呈す
る。
培養） 黄茶ないし暗い茶の）Ａ宵上に、うずく白色の気−系を
値かにＺＪ生し、俗′１１４ａ色素は僅かに茶色を呈す
る。
四脱加午乳培地（２８℃）
表向に発育し、カゼインは凝固しないか、ペプトン化を
生ずる０浴解任色素は茶色味を呈する。
生ずる０浴解任色素は茶色味を呈する。
３、生地的ａ賀
（１）生ｉ温嵐純囲
２０℃、２５℃、３０℃、 ３７℃、４６℃、５０℃の
各偏度で試験の精米、４６Ｃ及び５０℃を除いていずれ
の温度でも生育したが、最適温度ｔ１３０℃〜３７’Ｃ
付Ａ〔と思わｒＬる。
各偏度で試験の精米、４６Ｃ及び５０℃を除いていずれ
の温度でも生育したが、最適温度ｔ１３０℃〜３７’Ｃ
付Ａ〔と思わｒＬる。
（２）ゼラチンの欣化（グルコース・ペプトンΦゼラチ
ンＪＩＬＩ地、２０Ｃ坩誉、２０日間）欣化する。
ンＪＩＬＩ地、２０Ｃ坩誉、２０日間）欣化する。
１３）スターチの加水分ｍ（焦愼繊・スターチ球入用地
、２８℃Ｊ＠＊） スターチを水解する０ （４）脱脂乳の縦置、ペグトン化（脱脂牛乳培地、 ′
２８゛Ｃ培采） 凝固１Ｌ９ｉ３んどしないが、ペグトン化する。
、２８℃Ｊ＠＊） スターチを水解する０ （４）脱脂乳の縦置、ペグトン化（脱脂牛乳培地、 ′
２８゛Ｃ培采） 凝固１Ｌ９ｉ３んどしないが、ペグトン化する。
（５）メラニン（水色系の生１＋’ｔ（トリプトン・イ
ースト・グロス、ｌ５Ｐ−Ｎ地１；ベア’ ）”７ 囃
イース□ト・麩裸大、 ｌ５Ｐ−培地６：チロシン邸大
。
ースト・グロス、ｌ５Ｐ−Ｎ地１；ベア’ ）”７ 囃
イース□ト・麩裸大、 ｌ５Ｐ−培地６：チロシン邸大
。
ｌ５Ｉ）−培地７．何ノＬも２８℃培誉墳誉
′すλシン球入培地に於けるメラニン体色１の生成は夕
８んどないか或ｅｉ生戚りても迫跡桓吸竺められた。し
かし１１１１の２捕蘭の培地１ｃは □明らかにメラ
ニン株色糸の生地が認められる。
′すλシン球入培地に於けるメラニン体色１の生成は夕
８んどないか或ｅｉ生戚りても迫跡桓吸竺められた。し
かし１１１１の２捕蘭の培地１ｃは □明らかにメラ
ニン株色糸の生地が認められる。
（６）炭糸騨のオリ用性 （プリ トノ・ム・ゴトＩＪ
−７’瞭 ・ 。
−７’瞭 ・ 。
大槽地、 ｌ５Ｐ−橘地９．２８℃堵誉ンし一アラビノ
ース、 ｌ）−キシロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−フッ
ク）−ス、 Ｖ３．ｌ ｒｌ −ス、イノシトール、１
）−マンニット’ｅ−Ｍ Ｌてよ〈発胃する。Ｌ−ラム
ノース、ジフイノースの利用は僅かで疑わしい。
ース、 ｌ）−キシロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−フッ
ク）−ス、 Ｖ３．ｌ ｒｌ −ス、イノシトール、１
）−マンニット’ｅ−Ｍ Ｌてよ〈発胃する。Ｌ−ラム
ノース、ジフイノースの利用は僅かで疑わしい。
本陶株は、昭和５７年７月１３日付にて、工業抜本発明
によるダウンマイシンの製造は、ストレグトミセス編に
属するダウノマイシン及びその類縁化合物を同時に生理
する微生物に由来し、ダウンマイシン類縁化合物の生産
能が欠失したダウノマイシンを生理する叱方″を有する
変異函体、例えハ、上＾己ストレクトミセス コエルレ
オルビダス３Ｔ−３７３のノ泡子または一系を栄誉源官
有培地に接拙して、好気的に増殖させることによって生
理される。
によるダウンマイシンの製造は、ストレグトミセス編に
属するダウノマイシン及びその類縁化合物を同時に生理
する微生物に由来し、ダウンマイシン類縁化合物の生産
能が欠失したダウノマイシンを生理する叱方″を有する
変異函体、例えハ、上＾己ストレクトミセス コエルレ
オルビダス３Ｔ−３７３のノ泡子または一系を栄誉源官
有培地に接拙して、好気的に増殖させることによって生
理される。
その宋誉涼としては、放解凶の宋誉源として通常１史用
されるもの、例えば炭系諒としてはグルコース、グリセ
リン、鹿循、殿紛、マルトース、励４１１１物油などが
使用でき、輩素掠としてはガえ１よ大豆粉、肉エキス、
酵母エキス、ペプトン、コーンステイープ・リカー、綿
実粕などの有愼物並びに硫酵アンモニウム、塩化アンモ
ニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウムなどの
無４境体室本が１更用できる０又必賛に応じて食塩、聰
化カリウム、リン１Ｌその他事金属基などの無愼温類及
びビタミン類を硝茨加する他、りろ酔中の発心を針側す
るため、ヤリえばシリコーン（イば越化学に、に、Ｎ
−ＫＭ７５；商憚）などの消泡剰を適圧６加することが
できる。
されるもの、例えば炭系諒としてはグルコース、グリセ
リン、鹿循、殿紛、マルトース、励４１１１物油などが
使用でき、輩素掠としてはガえ１よ大豆粉、肉エキス、
酵母エキス、ペプトン、コーンステイープ・リカー、綿
実粕などの有愼物並びに硫酵アンモニウム、塩化アンモ
ニウム、硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウムなどの
無４境体室本が１更用できる０又必賛に応じて食塩、聰
化カリウム、リン１Ｌその他事金属基などの無愼温類及
びビタミン類を硝茨加する他、りろ酔中の発心を針側す
るため、ヤリえばシリコーン（イば越化学に、に、Ｎ
−ＫＭ７５；商憚）などの消泡剰を適圧６加することが
できる。
温度、ｐｌ４、通気撹拌および発酵時間のような晃酵朱
Ｈ；は用いられる函体が最大り一の該化合物を苗株する
ように選択する。例えば、発１１Ｆとしては２０〜４０
℃、好ましくは ２８℃の温度でｐｌ（５〜９、好筐し
くは７．４において１〜５日１ｉｔｌ Ｎ 好゛まし
くは３日間イ■９のが有オリで必る。
Ｈ；は用いられる函体が最大り一の該化合物を苗株する
ように選択する。例えば、発１１Ｆとしては２０〜４０
℃、好ましくは ２８℃の温度でｐｌ（５〜９、好筐し
くは７．４において１〜５日１ｉｔｌ Ｎ 好゛まし
くは３日間イ■９のが有オリで必る。
兄酔冶誉吻よりダウンマイシンを単離するには、アント
ラサイクリン禾υ１．庄物貝の装造の扶何分野に於ける
通常の手段、例えば遠心操作によるか、あるいは過当な
ケイ藻土の如き濾過助剤の存在下に墳誉献を濾過し、菌
体とＰ准に分離した後、菌体からはアセトン、メタノー
ル、エタノールモジくはブタノール等の水と混和する有
憬浴媒を用いて抽出し、またｐ欣からは、クロロホルム
、酔１１文エチル等の有憬ｍ媒を用いて抽出することが
できるが、これらの溶媒を過亘選択すること（（より、
困体を予め分別することなく培養物から１１ｉＬ徽３１
１１出することも口Ｊ ｔ＋ｔ４で必る。
ラサイクリン禾υ１．庄物貝の装造の扶何分野に於ける
通常の手段、例えば遠心操作によるか、あるいは過当な
ケイ藻土の如き濾過助剤の存在下に墳誉献を濾過し、菌
体とＰ准に分離した後、菌体からはアセトン、メタノー
ル、エタノールモジくはブタノール等の水と混和する有
憬浴媒を用いて抽出し、またｐ欣からは、クロロホルム
、酔１１文エチル等の有憬ｍ媒を用いて抽出することが
できるが、これらの溶媒を過亘選択すること（（より、
困体を予め分別することなく培養物から１１ｉＬ徽３１
１１出することも口Ｊ ｔ＋ｔ４で必る。
抽出物ヶ１、〜般に数（■の類は化合物を包含するため
、目的物を単離するには、史に、シリカゲル等を用いる
クロマトグラフィー、セファデックスＬＨ−２０（ファ
ルマシャ社装）、バイオφゲルＰ−２（バイオ・ランド
社製）等によるゲル濾過メタクリル又はアクリル系弱Ｉ
挾性陽イオン父侯倒Ｊ信等による収肩及び浴出等を七７
Ｌそれ単独で或いは處且組酋せて、嘔らに場合によって
は反（Ｍ して１史用される。
、目的物を単離するには、史に、シリカゲル等を用いる
クロマトグラフィー、セファデックスＬＨ−２０（ファ
ルマシャ社装）、バイオφゲルＰ−２（バイオ・ランド
社製）等によるゲル濾過メタクリル又はアクリル系弱Ｉ
挾性陽イオン父侯倒Ｊ信等による収肩及び浴出等を七７
Ｌそれ単独で或いは處且組酋せて、嘔らに場合によって
は反（Ｍ して１史用される。
なお、１１１述したとおり、従来はダウノマイ／ン言有
用養物からダウノマイシンを凹状するＶこ除して、ダウ
ンマイシンのＦＪ４ｉ１化合＠をダウンマイシンに変快
せしめる処理を蔵した懐、削配回収手段ｋ ｉ−するこ
とが市収半下にダウンマイシンを倚るために必をでめる
が、本発明の方法によれば、かかる処理ｆ、（伶別ＶＣ
は賢しないたけでなく、上記のクロマトグラフィー処理
等もｒ蛸便１こ実ｈ１脇でさるだのダウノマイ／ン奮閥
収率で回収単離し侍るＯ以下に、本発明を夾ｈｌ！１例
によりさらに祥じくｉ兄明する。
用養物からダウノマイシンを凹状するＶこ除して、ダウ
ンマイシンのＦＪ４ｉ１化合＠をダウンマイシンに変快
せしめる処理を蔵した懐、削配回収手段ｋ ｉ−するこ
とが市収半下にダウンマイシンを倚るために必をでめる
が、本発明の方法によれば、かかる処理ｆ、（伶別ＶＣ
は賢しないたけでなく、上記のクロマトグラフィー処理
等もｒ蛸便１こ実ｈ１脇でさるだのダウノマイ／ン奮閥
収率で回収単離し侍るＯ以下に、本発明を夾ｈｌ！１例
によりさらに祥じくｉ兄明する。
実施例
ストレグ２セス コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅａ ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕａ ） ３
’ｌ’−３７３ｍ ｎのＹＳ糾而面喪よレー白金Ｊ４．
を休り、下ｄＩシラーる（忠１ｕ冶地ｌｏｏｍｌを分仕
秩因した！１ｏＯ−＋吐合玉角フラスコに接個し、２８
℃、ロータリーシェーカー（２２Ｌｌｒｐｍ）にて２日
間振盪培養して稙母を作成した。
ｍｙｃｅａ ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕａ ） ３
’ｌ’−３７３ｍ ｎのＹＳ糾而面喪よレー白金Ｊ４．
を休り、下ｄＩシラーる（忠１ｕ冶地ｌｏｏｍｌを分仕
秩因した！１ｏＯ−＋吐合玉角フラスコに接個し、２８
℃、ロータリーシェーカー（２２Ｌｌｒｐｍ）にて２日
間振盪培養して稙母を作成した。
徨母培地
ｉｒ＃性デングン０．５ ％
グルコース ０．５％ニスサン
ミート（大５Ｌケ、味の糸社敦） １０襞１＃ＩＵエ
キス ０．１％Ｎ ａ Ｃｔ
Ｏ，１％に
２１（）’０４Ｕ、１ ％ Ｍｇ５Ｏ，φ７Ｈ２０（１，１％ 水進水 ｐＨ７，４（殺凶前） 次いで、下β己組成の生産培地１５リットルを入れ、収
繭しｌこ３０リツトル谷ジヤーフアーメンタ−２基に上
ｌ己の柿母ｉ誉准を、−基当１７５０−（５≠に和尚）
ずつ硲加接拙した。
ミート（大５Ｌケ、味の糸社敦） １０襞１＃ＩＵエ
キス ０．１％Ｎ ａ Ｃｔ
Ｏ，１％に
２１（）’０４Ｕ、１ ％ Ｍｇ５Ｏ，φ７Ｈ２０（１，１％ 水進水 ｐＨ７，４（殺凶前） 次いで、下β己組成の生産培地１５リットルを入れ、収
繭しｌこ３０リツトル谷ジヤーフアーメンタ−２基に上
ｌ己の柿母ｉ誉准を、−基当１７５０−（５≠に和尚）
ずつ硲加接拙した。
生産培地
台ｐＨ酵母 ５ ≠
ｐ丁浴憔デンプン ７．５％
１１ｆ＠エキス ０．３ ≠ＮｔｓＣ１
Ｏ，２≠ ＣａＣＯ３ｕ、３ ％ ミネラル混故釆 （１，１２ｓ条水辿水 ｐＨ８，０（加ＲＭ、 ＋Ｗ Ａｆ＋ ）米ｅｕＳｃ１
４−５１（２０２，８ｒ ＋ １＋’ｅＳ（Ｊ４・７
Ｈ２０１１，４ｒ ＋ＭｎＣ／、２’４１１２０ ：３
．２９ 、 ＺｎＳｔ）４ｍ７ｉｉ２（、）υ、８Ｗを
魚笛水５ｏｏ ｍｅに浴解したもの。
Ｏ，２≠ ＣａＣＯ３ｕ、３ ％ ミネラル混故釆 （１，１２ｓ条水辿水 ｐＨ８，０（加ＲＭ、 ＋Ｗ Ａｆ＋ ）米ｅｕＳｃ１
４−５１（２０２，８ｒ ＋ １＋’ｅＳ（Ｊ４・７
Ｈ２０１１，４ｒ ＋ＭｎＣ／、２’４１１２０ ：３
．２９ 、 ＺｎＳｔ）４ｍ７ｉｉ２（、）υ、８Ｗを
魚笛水５ｏｏ ｍｅに浴解したもの。
通気−５リットル／分、攪拌４５０回転／分で、２８℃
、１２０時間坩賃すると陪食故は磯赤褐色を呈し、培養
液１ｍ７！中およそ３８０μノのダウノマイシンを畜４
賞した。なお、ダウンマイシンの刈二社はダウノマイ７
ン佃出欣全過当に希釈し、そのｌＯ〜２０ｐＬ ｆ
博１−ノリ力ゲルプレート（Ｆ２５４．メルクイ土紋）
の下端より２ ｔ７ｎ位１１スボ／トし、クロロホ
罎ルム／メタノール／水／ ＋ｖｐ ＋＊ （８１
）／２０／２１０．２ ）で展 □■開し、ダワ
ノマイ／ンスボノトを薄層用クロマト □スキャ
ンナー（呂律製作所製Ｃ８−９１０型）で測定し、係準
曲服より舞定して定ｔ Ｌ、た。
、１２０時間坩賃すると陪食故は磯赤褐色を呈し、培養
液１ｍ７！中およそ３８０μノのダウノマイシンを畜４
賞した。なお、ダウンマイシンの刈二社はダウノマイ７
ン佃出欣全過当に希釈し、そのｌＯ〜２０ｐＬ ｆ
博１−ノリ力ゲルプレート（Ｆ２５４．メルクイ土紋）
の下端より２ ｔ７ｎ位１１スボ／トし、クロロホ
罎ルム／メタノール／水／ ＋ｖｐ ＋＊ （８１
）／２０／２１０．２ ）で展 □■開し、ダワ
ノマイ／ンスボノトを薄層用クロマト □スキャ
ンナー（呂律製作所製Ｃ８−９１０型）で測定し、係準
曲服より舞定して定ｔ Ｌ、た。
陪食１２０時間俵、兄［ｙｌ：全中止し、ジャーファー
メンタ−２２んより墳誉故を果め（総Ｍ２７リツトル）
、迫Ｉし操作によ、！ｌｌｌｌ表体准に分離する。Ｐ成
牛のダウノマイシンは総ｊｔｌｏリットルのクロロホル
ムで抽出り、 １ｃ０一方、１体区分のダウノマイシン
は総置８リットルのア七トンで抽出し、その１出出上消
をおよそ１／３社まで減圧践縮する。次いでクロロホル
ム２リツトルで２回抽出した。１１ｉｌ記ｐ液からのり
Ｕロホルム！田出欲と合せ、Ｍ Ｍｄ ｒ、ｅｉ、 ）
固すると、純度Ｊ・・よぞ５０チの柑ダウノマインン憚
品８．４ＶＷが狗られた。
メンタ−２２んより墳誉故を果め（総Ｍ２７リツトル）
、迫Ｉし操作によ、！ｌｌｌｌ表体准に分離する。Ｐ成
牛のダウノマイシンは総ｊｔｌｏリットルのクロロホル
ムで抽出り、 １ｃ０一方、１体区分のダウノマイシン
は総置８リットルのア七トンで抽出し、その１出出上消
をおよそ１／３社まで減圧践縮する。次いでクロロホル
ム２リツトルで２回抽出した。１１ｉｌ記ｐ液からのり
Ｕロホルム！田出欲と合せ、Ｍ Ｍｄ ｒ、ｅｉ、 ）
固すると、純度Ｊ・・よぞ５０チの柑ダウノマインン憚
品８．４ＶＷが狗られた。
％ｈ１Ｍ？！１（ＩＩ）
表月例ｔ１）で得た粗探品全１ｔ／ｆ：３！Ｊノトルの
０．１八１１シト取（ｐＨ３，ｌＪ ）に）υ瀾、醒Ｗ
ｌさせ、不帰物を一過にて味云した。上薗金４Ｎ″ＡＩ
性ソーダーｔＮ欣で中７１１Ｌ、ｐＨを８．０に調部し
たのち、ゼ）びクロロホルムで抽出した。クロロホルム
抽出１１ｋを水洗、芒＜１１ □１：：：１′ で乾燥させたのち、少祉まで練縮し、過剰のｎ−ヘキサ
ンを６加して沈殿させ、１ｆｉ過にて来４★せし
：・□ め、Ａ生乾燥すると、赤褐色の挑就およそ８５％のダウ
ノマイシン粉末４．５７９が得られた０次いで、このダ
ウノマイシン粉木全−をクロロホルム３００ｍ／に浴解
し、これにノリ力ゲル（Ａｒｔ。
０．１八１１シト取（ｐＨ３，ｌＪ ）に）υ瀾、醒Ｗ
ｌさせ、不帰物を一過にて味云した。上薗金４Ｎ″ＡＩ
性ソーダーｔＮ欣で中７１１Ｌ、ｐＨを８．０に調部し
たのち、ゼ）びクロロホルムで抽出した。クロロホルム
抽出１１ｋを水洗、芒＜１１ □１：：：１′ で乾燥させたのち、少祉まで練縮し、過剰のｎ−ヘキサ
ンを６加して沈殿させ、１ｆｉ過にて来４★せし
：・□ め、Ａ生乾燥すると、赤褐色の挑就およそ８５％のダウ
ノマイシン粉末４．５７９が得られた０次いで、このダ
ウノマイシン粉木全−をクロロホルム３００ｍ／に浴解
し、これにノリ力ゲル（Ａｒｔ。
７７３４ メルク？Ｊ：製）２０２を加え、混合吸有
せしめ紙圧鍼締乾１固した２、これを同／リカグル１５
０ｖを１： クロロホルムｌｄｍし充填したカラム（φ：’＋、２
Ｘ ｌｂΔ ｍ）上にのせ、クロロホルム／メタノール／水（”５／
２１０．２ ） （’） ５９ ′）’ｔ′１ｍＭｔｌ
ｊ Ｌｆｃ、 ｌ’ ！／ ／ 、。
せしめ紙圧鍼締乾１固した２、これを同／リカグル１５
０ｖを１： クロロホルムｌｄｍし充填したカラム（φ：’＋、２
Ｘ ｌｂΔ ｍ）上にのせ、クロロホルム／メタノール／水（”５／
２１０．２ ） （’） ５９ ′）’ｔ′１ｍＭｔｌ
ｊ Ｌｆｃ、 ｌ’ ！／ ／ 、。
マインン浴出区分を果め、水洗したのち、芒硝？：′□
腰 加えて乾燥させ、−６１個して純度９８．５≠のダウノ
マイシンの亦褐色ケ末３．３１ ？を取侍した。
腰 加えて乾燥させ、−６１個して純度９８．５≠のダウノ
マイシンの亦褐色ケ末３．３１ ？を取侍した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 ストレプトミセス属に属するダウンマイシン及び
その類縁化合物を同時に生産する微生物に由来し、ダウ
ンマイクン類縁化合物の生韮叱が欠失１−またダウノマ
イシンを生産する１比力を有する変異菌株を栄誉培地で
培養し、該培養物からダウンマイシンを採取することを
材色とするダウノマイシンの製造方法。 ２゜ ストレプトミセス属に域するダウノマイシン及び
ぞの類ｔ、吹化合物を同時に生産する誠生物が、ストレ
ットミセス（Ｓｔｒａｐｔｏｍｙｃｅｓ ） ８８９９
（ＮＲＲＬ ３０４６ ） 、ストレプトミセス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ）３１７２３ （Ｎ１ｔＲ
Ｌ ３（１４５） 、ストレプトミセス ピコ −ヒ
デ ィ 書シ ス （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｅｅｓ
ｐｅｕｃｅｔｉｕｓ ） （Ｎ。 Ｃ，１，Ｂ、 ９４７５ ） 、ストレプトミセス グ
リセクス、パラエディ ルビドファ／エンス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏ−ｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ、ｖａｒ、ｒｕ
ｂｉｄｏｆａｃｉｅｎａ ）ＤＳ ３２０４１、スト
レプトミセス ビファーカス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃ
ｅｓ ｂｉｆｕｒｃｕｓ ） １．ｓ ２３２１９ （
Ｎｊ（ｔｔＬ ３５３９ ） ｉｔｓしくバストレフト
ミセス コエルレオルビダス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕ＋ ）ＭＥ１３０−
Ａ４ （値工ψ１凶を第３５４０号及びＡＴＬ’Ｃ３１
２７ｔｉ ）又はそれらの変異菌株である特ま’ｆ ｓ
Ｉ４水の範囲第１坦に６己帷のタウノマイシンの製造方
法。 ３、 ダウノマイシンＤＡ ｔ、を化合物の生Ｔｉ ６
Ｑが欠失［７たメウノマイゾン金生蔵するｆＸ困休体ス
トレプトミセス コエルレオルビタス３１ｒ−３７３で
める待計祠釆の範１１．＋１第１項又は第２唄り載のダ
ウノマイシンの製造方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57129370A JPS5921394A (ja) | 1982-07-24 | 1982-07-24 | ダウノマイシンの製造法 |
| US06/514,678 US4592999A (en) | 1982-07-24 | 1983-07-18 | Process for producing daunomycin |
| EP83107221A EP0100075A3 (en) | 1982-07-24 | 1983-07-22 | Process for producing daunomycin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57129370A JPS5921394A (ja) | 1982-07-24 | 1982-07-24 | ダウノマイシンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5921394A true JPS5921394A (ja) | 1984-02-03 |
| JPH0365157B2 JPH0365157B2 (ja) | 1991-10-09 |
Family
ID=15007897
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57129370A Granted JPS5921394A (ja) | 1982-07-24 | 1982-07-24 | ダウノマイシンの製造法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4592999A (ja) |
| EP (1) | EP0100075A3 (ja) |
| JP (1) | JPS5921394A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20020008297A (ko) * | 2000-07-21 | 2002-01-30 | 채문식 | 안스라사이클린계 항생물질 도노마이신을 이용한식물병방제용 살균제 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK356087A (da) * | 1987-07-09 | 1989-01-10 | Biogal Gyogyszergyar | Fremgangsmaade til isolering af et antibiotikum |
| CA2256318A1 (en) * | 1997-03-06 | 1998-09-11 | Pharmacia & Upjohn S.P.A. | Process for preparing doxorubicin |
| WO1999029708A1 (fr) * | 1997-12-05 | 1999-06-17 | Mercian Corporation | Anthracycline cristalline antibiotique et son procede de production |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3989598A (en) * | 1962-05-18 | 1976-11-02 | Rhone-Poulenc S.A. | Antibiotic daunorubicin and its preparation |
| FR1551195A (ja) * | 1967-11-15 | 1968-12-27 | ||
| JPS52148064A (en) * | 1976-05-31 | 1977-12-08 | Microbial Chem Res Found | Antitumors |
-
1982
- 1982-07-24 JP JP57129370A patent/JPS5921394A/ja active Granted
-
1983
- 1983-07-18 US US06/514,678 patent/US4592999A/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-07-22 EP EP83107221A patent/EP0100075A3/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20020008297A (ko) * | 2000-07-21 | 2002-01-30 | 채문식 | 안스라사이클린계 항생물질 도노마이신을 이용한식물병방제용 살균제 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0100075A2 (en) | 1984-02-08 |
| EP0100075A3 (en) | 1986-10-01 |
| JPH0365157B2 (ja) | 1991-10-09 |
| US4592999A (en) | 1986-06-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kunze et al. | Apicularens A and B, new cytostatic macrolides from Chondromyces species (myxobacteria): production, physico-chemical and biological properties | |
| JPS6041489A (ja) | 新規生理活性物質ｋ―２５２ | |
| JP2802097B2 (ja) | 新規な制癌抗生物質ｍｉ４３―３７ｆ１１及びその製造法 | |
| US4229440A (en) | Pharmaceutical composition containing the polysaccharide KGF-C as active ingredient | |
| JPS5921394A (ja) | ダウノマイシンの製造法 | |
| DE2028403B2 (de) | Pepstatin | |
| HU191849B (en) | Process for preparing compounds with pharmaceutical activity and compositions containing such compounds by means of a new chromobacterium violaceum strain | |
| FR2547594A1 (fr) | Nouveaux complexes antitumoraux antibiotiques et leur procede de production par culture d'une souche d'actinomadura verrucosospora | |
| EP0660825B1 (de) | Entzündungshemmende makrolactame (cyclamenol) | |
| DE3028594C2 (ja) | ||
| WO2000053792A1 (fr) | Substances wk-5344a et wk-5344b et leur procede de production | |
| DE2931792A1 (de) | Antifibrotische substanz p-1894b, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende arzneimittel | |
| JP2592468B2 (ja) | 新規抗生物質ベナノマイシンａおよびｂならびにその製造法 | |
| JPH01131177A (ja) | Ｎｆ−１６１６−９０４物質 | |
| AT206582B (de) | Verfahren zur biosynthetischen Herstellung des neuen O-Diazoacetyl-1-serins | |
| DE2610557A1 (de) | Neues naphthacenderivat, seine herstellung und dieses enthaltende zusammensetzungen | |
| JP2546239B2 (ja) | 新規物質オバリシン | |
| JP2578486B2 (ja) | 新規物質ｋｓ―５０２ | |
| EP0304400A2 (de) | Phenanthridinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Mittel zur Ausführung des Verfahrens | |
| JP2780828B2 (ja) | ポリエーテル抗生物質ｍｉ２１５―ｎｆ３物質及びその製造法、並びに鶏のコクシジウム症の防除剤 | |
| JPS59148795A (ja) | アントラサイクリン化合物、その製造法およびその用途 | |
| DE2638400A1 (de) | Neue organische verbindung, ihre herstellung und verwendung | |
| US3743635A (en) | 27-demethoxy-27-hydroxyrifamycin derivatives | |
| JPS58152487A (ja) | Ｆｒ−９００２２０物質およびその製造法 | |
| JPS6265692A (ja) | レプトマイシンａの製造法 |