JPS59190664A - 生物学的流体の螢光イムノアツセイ用基材 - Google Patents
生物学的流体の螢光イムノアツセイ用基材Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
背景
本発明は生物学的流体の螢光イムノアッセイに関する。
よシ詳しくは、本発明は特異的蛋白質およびその他の生
物学的物体（例、ＤＮＡ）と結合することのできる螢光
イムノアッセイ用基材に関する。この基材は螢光イムノ
アッセイ（ＦＩＡ）の特異性および感度を高め、従って
、特異的抗原および抗体に随伴する病気の診断において
有用である。本発明は、愛玩動物、実験室用動物および
家畜を冒す病気に対する獣医学的アッセイ並びにヒトニ
オける病気２よび病態のアクセイに２いて有用である。
物学的物体（例、ＤＮＡ）と結合することのできる螢光
イムノアッセイ用基材に関する。この基材は螢光イムノ
アッセイ（ＦＩＡ）の特異性および感度を高め、従って
、特異的抗原および抗体に随伴する病気の診断において
有用である。本発明は、愛玩動物、実験室用動物および
家畜を冒す病気に対する獣医学的アッセイ並びにヒトニ
オける病気２よび病態のアクセイに２いて有用である。
８ｉハ光アツセイは複雑な混合物における少量の物質を
検出するための強力な技術である。特に、それを認識す
る少量の抗原および抗体を検出しなければならない血液
のような体液の螢光イムノアッセイ（ＦＩＡ）にお込て
有用である。
検出するための強力な技術である。特に、それを認識す
る少量の抗原および抗体を検出しなければならない血液
のような体液の螢光イムノアッセイ（ＦＩＡ）にお込て
有用である。
ＦＩＡはその病気の特徴的な特別の抗原又は抗体に対し
て特異的である病気の診断に有用である。
て特異的である病気の診断に有用である。
しかしながら、信頼性のある診断のためには、検出すべ
き物質がしばしば分析される流体中に極めて少量存在す
るために、特異的であるのみならず、又感度が高くなけ
ればならない。
き物質がしばしば分析される流体中に極めて少量存在す
るために、特異的であるのみならず、又感度が高くなけ
ればならない。
ＦＩＡの感度を高める従来の試みの中にｔ／′ｉ選択的
に蛋白質と結合する基材の開発或ｌ／′１は使用が台筐
れる。これらの基材は抗原抗体間の免疫反応がよシ容易
に観察されるように固体表面に固定することができる。
に蛋白質と結合する基材の開発或ｌ／′１は使用が台筐
れる。これらの基材は抗原抗体間の免疫反応がよシ容易
に観察されるように固体表面に固定することができる。
しかしながら、これらの基材は、一般的に、強く蛋白質
と結合しないポリスチレン或すはポリプロピレンのよう
な重合体よりなシ、従って、複雑な生物学的流体から微
量の蛋白質免疫原を選択する際には、使用上限度がある
。有用な診断アクセイには特別の抗体或いは抗原を効率
的に吸収する基材が必要とされる。
と結合しないポリスチレン或すはポリプロピレンのよう
な重合体よりなシ、従って、複雑な生物学的流体から微
量の蛋白質免疫原を選択する際には、使用上限度がある
。有用な診断アクセイには特別の抗体或いは抗原を効率
的に吸収する基材が必要とされる。
ＦＩＡは特別の発蛍光団よシ発光される光の検出を含む
ものであるから、感度は又そのように発光された光の強
度、およびその背景或−は散乱光に対する関係にも依存
する。発蛍光団の励起周波数に適合する入射波長の選択
は、感度を増大する際の一つの重要な要因である。米国
特許第４１．３’１０、！ｚグ号明細書には、重合体ビ
ーズを光散乱中心２よび散乱光を高めるバインダーで被
覆することよシなる固相免に基材が開示されて層る。基
材を改良し、透過光の量を増大するその他の方法も活発
に探索されている（例えば、米国特許裁乞λｊζ００−
号明細書参照）。
ものであるから、感度は又そのように発光された光の強
度、およびその背景或−は散乱光に対する関係にも依存
する。発蛍光団の励起周波数に適合する入射波長の選択
は、感度を増大する際の一つの重要な要因である。米国
特許第４１．３’１０、！ｚグ号明細書には、重合体ビ
ーズを光散乱中心２よび散乱光を高めるバインダーで被
覆することよシなる固相免に基材が開示されて層る。基
材を改良し、透過光の量を増大するその他の方法も活発
に探索されている（例えば、米国特許裁乞λｊζ００−
号明細書参照）。
閣墨
本発明（グ、三次元のコロイド状枠組みを形成する膨潤
性蛋白質結合重合体ゲル状物質およびその中ＩＣランダ
ムＩＣ分布された光散乱中心よりなる螢光イムノアッセ
イ用基材を提供するものである。
性蛋白質結合重合体ゲル状物質およびその中ＩＣランダ
ムＩＣ分布された光散乱中心よりなる螢光イムノアッセ
イ用基材を提供するものである。
より具体的に１は１不発明１−ま三次元マトリックスを
形成っ−る謄測往蛋白質結合重合体物質、前記重合体マ
トリックス中１・τ方布された可視光線を散乱すること
のできる粒状の非特異的光散乱中心、および前記重合体
マトリックス中に分散された特定の狭帯域螢光励起光線
を反射し、非特異的光線を吸収することのできる粒状の
特異的光散乱中心、よシなることを特徴とする螢光イム
ノアッセイ用基材を提供するものである。
形成っ−る謄測往蛋白質結合重合体物質、前記重合体マ
トリックス中１・τ方布された可視光線を散乱すること
のできる粒状の非特異的光散乱中心、および前記重合体
マトリックス中に分散された特定の狭帯域螢光励起光線
を反射し、非特異的光線を吸収することのできる粒状の
特異的光散乱中心、よシなることを特徴とする螢光イム
ノアッセイ用基材を提供するものである。
殆んどの固体基材と異なシ、本発明の基材は同様な大き
さの面積を有する、例えばポリスチレンする再水和可能
なフィルムである。このフィルムの特性は水性物質に曝
された際に液体を迅速に吸収する能力であり、再水和の
過程中に膨潤し、これによシ蛋白質のフィルム内の移動
を可能にするものであシ、その結果、例えば、特異的抗
体がそれらの相補的抗原に到達し、結合することができ
、或−は又その逆も可能であり、酵素はそれらの特異的
基質に到達することができる。
さの面積を有する、例えばポリスチレンする再水和可能
なフィルムである。このフィルムの特性は水性物質に曝
された際に液体を迅速に吸収する能力であり、再水和の
過程中に膨潤し、これによシ蛋白質のフィルム内の移動
を可能にするものであシ、その結果、例えば、特異的抗
体がそれらの相補的抗原に到達し、結合することができ
、或−は又その逆も可能であり、酵素はそれらの特異的
基質に到達することができる。
本発明の基材を用いた螢光イムノアッセイの感度を高め
る。
る。
フィルム内に運び込壕れた第一の反応体として導入され
てしる抗原成しは抗体が同定標識としての螢光染料分子
と結合する螢光イムノアッセイの光学的体系において、
該染料分子は染料の光吸収スペクトルに適合する波長の
光で励起される。この染料分子がその特異的励起スペク
トル内の光の光子を吸収すると電子がより高いエネルギ
ー状態に窩められ、次−で三重項状態変換によシ、よシ
低論エネルギー（よ〕長い波長）の光子が再発光される
。螢光を伴う特別の光散乱物はそのような光の検出器へ
の移動を高めることであろう。しかしながら、そのよう
な粒子は、又、元の励起光を吸収し、従って消滅させ、
それによシ染料の励起を妨げることとなるであろう。従
って、本発明の非特異的光散乱体は、励起光は吸収しな
いが、染料からの発光螢光は散乱することができるよう
に選ばｔたものである。
てしる抗原成しは抗体が同定標識としての螢光染料分子
と結合する螢光イムノアッセイの光学的体系において、
該染料分子は染料の光吸収スペクトルに適合する波長の
光で励起される。この染料分子がその特異的励起スペク
トル内の光の光子を吸収すると電子がより高いエネルギ
ー状態に窩められ、次−で三重項状態変換によシ、よシ
低論エネルギー（よ〕長い波長）の光子が再発光される
。螢光を伴う特別の光散乱物はそのような光の検出器へ
の移動を高めることであろう。しかしながら、そのよう
な粒子は、又、元の励起光を吸収し、従って消滅させ、
それによシ染料の励起を妨げることとなるであろう。従
って、本発明の非特異的光散乱体は、励起光は吸収しな
いが、染料からの発光螢光は散乱することができるよう
に選ばｔたものである。
本発明の基材の特異的光散乱中心は染料の螢光励起波長
に対応する狭い帯域の光のみを散乱するものである。こ
れらの特別の光散乱体はその光散乱スペクトルが螢光染
料のスペクトルを吸収する光に適合する顔料である。螢
光標識を励起するとのスペクトル範囲の波長を有する入
射光の移動は、このようにして高められる。場合にょシ
、異った波長の干渉背景光が吸収され、かようにこれら
の特別の光散乱体によシ消滅される。螢光光線の移動が
高められる一方、背景光はこれらの特別の光散乱体によ
り減少するので、本発明の基材を用いたＦＩＡの感度が
改良される。
に対応する狭い帯域の光のみを散乱するものである。こ
れらの特別の光散乱体はその光散乱スペクトルが螢光染
料のスペクトルを吸収する光に適合する顔料である。螢
光標識を励起するとのスペクトル範囲の波長を有する入
射光の移動は、このようにして高められる。場合にょシ
、異った波長の干渉背景光が吸収され、かようにこれら
の特別の光散乱体によシ消滅される。螢光光線の移動が
高められる一方、背景光はこれらの特別の光散乱体によ
り減少するので、本発明の基材を用いたＦＩＡの感度が
改良される。
従って、本発明の基材は効率的に蛋白質と結合し、且つ
透過螢光を増強し、かようにして螢光測定を含むアッセ
イの感度を増大する。
透過螢光を増強し、かようにして螢光測定を含むアッセ
イの感度を増大する。
具体的説明
好ましくは、本発明の蛋白質結合重合体物質は好ましく
はアクリル共重合体樹脂の水をベースとするエマルジ冒
ン、である三次元重合体マトリッジスである。このコロ
イドフィルム中には二つのタイプ、即ち、ｌ）非特異的
、および、２）特異的光散乱体の光散乱中心が埋め込ま
れている。各光散乱体はミクロン未満の径であシ、水性
媒体に不溶である。非特異的粒状光散乱中心としては、
個別或は結合した酸化亜鉛または二酸化チタン（ルチル
形）の粒子が最も好ましい。非特異的光散乱粒子は、ア
ナタース形成はルチル形二酸化チタン、酸化亜鉛、炭酸
カルシウムのような無機物質、或はカオリン（ｃｈｉｎ
ａ ｃｌａｙ ） 、ベントナイトまたはフラー土な
どの粘土起源のものであってもよく、或はデンプンなど
の有機物起源のものであってもよい。これらの光散乱体
は、粒状であｐ１均一に分散されており、全ての光を効
率的に散乱し、たとえその元々の光路においてではなく
とも、反射後の励起光光子が発螢光団に到達する可能性
を増大するものである。
はアクリル共重合体樹脂の水をベースとするエマルジ冒
ン、である三次元重合体マトリッジスである。このコロ
イドフィルム中には二つのタイプ、即ち、ｌ）非特異的
、および、２）特異的光散乱体の光散乱中心が埋め込ま
れている。各光散乱体はミクロン未満の径であシ、水性
媒体に不溶である。非特異的粒状光散乱中心としては、
個別或は結合した酸化亜鉛または二酸化チタン（ルチル
形）の粒子が最も好ましい。非特異的光散乱粒子は、ア
ナタース形成はルチル形二酸化チタン、酸化亜鉛、炭酸
カルシウムのような無機物質、或はカオリン（ｃｈｉｎ
ａ ｃｌａｙ ） 、ベントナイトまたはフラー土な
どの粘土起源のものであってもよく、或はデンプンなど
の有機物起源のものであってもよい。これらの光散乱体
は、粒状であｐ１均一に分散されており、全ての光を効
率的に散乱し、たとえその元々の光路においてではなく
とも、反射後の励起光光子が発螢光団に到達する可能性
を増大するものである。
本発明の特異的光散乱中心も又粒状であシ、蛋白質結合
重合体ラテックス中にランダムに分布されており、最も
好ましくは、特別の所望の分光反射率を有する着色化合
物である。最も好ましいのは、金属フタロシアニン塩、
例えば、銅フタロシアニンである。７タロシアニン化合
物（以下、場合によシ、「顔料」と称する）は、そのス
ペクトル散乱分布が使用される螢光染料の励起スペクト
ルに適合し、従って自動螢光或は背景散乱の如何を問わ
ず任意の望ましくない波長の光を減少させる特別の光吸
収体である。即ち、そのスペクトル吸光度が４ｔ７（１
）ｎｍにおけるスペクトルの「青色」部分にピークがあ
る染料としてイソチオシアン酸フルオＶセイン（ＦｉＴ
ｃ）を使用する場合には、その分光反射率或いは散乱が
≠７０ ｎｍにおいて最適であると示された銅フタロシ
アニンの粒子を使用することになる。使用される染料が
、スペクトルの「緑色」領域において吸収し、スペクト
ルの「橙色」領域において螢光を発するローダミン誘導
体である場合には、約！３θｎｍの波長において散乱が
最大になる最適の顔料を使用すべきであろう。酵素標識
化技術において使用される光度測定変化における如く、
非螢光光学的効果が決定され、励起および発光の両者が
同一である場合には、コロイドフィルムを形成するエマ
ルジ冒ンに何等の特異的スペクトル散乱粒子を添加する
必要はなへ非特異的光散乱中心は特異的光散乱中心に対
して約３０対ｌの重量比で使用するのが好ましい。
重合体ラテックス中にランダムに分布されており、最も
好ましくは、特別の所望の分光反射率を有する着色化合
物である。最も好ましいのは、金属フタロシアニン塩、
例えば、銅フタロシアニンである。７タロシアニン化合
物（以下、場合によシ、「顔料」と称する）は、そのス
ペクトル散乱分布が使用される螢光染料の励起スペクト
ルに適合し、従って自動螢光或は背景散乱の如何を問わ
ず任意の望ましくない波長の光を減少させる特別の光吸
収体である。即ち、そのスペクトル吸光度が４ｔ７（１
）ｎｍにおけるスペクトルの「青色」部分にピークがあ
る染料としてイソチオシアン酸フルオＶセイン（ＦｉＴ
ｃ）を使用する場合には、その分光反射率或いは散乱が
≠７０ ｎｍにおいて最適であると示された銅フタロシ
アニンの粒子を使用することになる。使用される染料が
、スペクトルの「緑色」領域において吸収し、スペクト
ルの「橙色」領域において螢光を発するローダミン誘導
体である場合には、約！３θｎｍの波長において散乱が
最大になる最適の顔料を使用すべきであろう。酵素標識
化技術において使用される光度測定変化における如く、
非螢光光学的効果が決定され、励起および発光の両者が
同一である場合には、コロイドフィルムを形成するエマ
ルジ冒ンに何等の特異的スペクトル散乱粒子を添加する
必要はなへ非特異的光散乱中心は特異的光散乱中心に対
して約３０対ｌの重量比で使用するのが好ましい。
本発明の好ましい実施態様において、免疫吸着性基材は
固体支持体と組合わされる。最も好ましくは、固体支持
体は、例えば、試験スライドのそれのような本質的に平
坦な表面を有してなるものである。しかしながら、最も
好ましくは、免疫吸着性基材は固体支持体中の試験ウェ
ルの本質的に平たい底上に比較的厚い層（グθ〜ｓｏミ
クロンの深さ）として設けられる。これらの試験ウェル
は例えば同時係属中の米国特許出願第３タタ、ｔオｊ号
明細書（／ＹＡ−年７月７９日出願、この出願内容は本
発明において準用する）に開示されているような急勾配
の壁を有する円形寸法のものである。
固体支持体と組合わされる。最も好ましくは、固体支持
体は、例えば、試験スライドのそれのような本質的に平
坦な表面を有してなるものである。しかしながら、最も
好ましくは、免疫吸着性基材は固体支持体中の試験ウェ
ルの本質的に平たい底上に比較的厚い層（グθ〜ｓｏミ
クロンの深さ）として設けられる。これらの試験ウェル
は例えば同時係属中の米国特許出願第３タタ、ｔオｊ号
明細書（／ＹＡ−年７月７９日出願、この出願内容は本
発明において準用する）に開示されているような急勾配
の壁を有する円形寸法のものである。
本発明の免疫吸着性基材は、更に免疫原性試薬−抗原或
いは抗体のいずれかを含むものであってもよい。これら
の実施態様における基材は、病気、特にウィルス、細菌
或いは寄生虫の感染によって引き起こされる病気の特徴
を示す免疫原性試薬用の血液その他の体液の分析に特に
有用である。
いは抗体のいずれかを含むものであってもよい。これら
の実施態様における基材は、病気、特にウィルス、細菌
或いは寄生虫の感染によって引き起こされる病気の特徴
を示す免疫原性試薬用の血液その他の体液の分析に特に
有用である。
本発明の基材は、小さな愛玩動物、家畜および実験室用
動物の生物学的流体の普通のウィルス、寄生虫および細
菌に拠る病気の免疫原的アッセイによる診断に有用であ
シ、その診断はネコ白血病ウィルス、ネコ感染性腹膜炎
、トキソプラズマ症、ネコ感染性貧血、心臓虫イヌプル
セラ症、イヌパルボウィルス、抗核抗体、！Ｊ、−マチ
様因子およびイヌジステンパーに対する生物学的流体の
免疫原性アッセイによシ行われ、又ウマ類動物について
は、ウマ感染性貧血、ウマ妊娠、ウマ腺疫、ウマ肺炎、
ウマ子宮炎およびウマインフルエンザに対する診断に、
実験室用のマウスおよびラットについてはウィルスパネ
ルの診断に、ウシプルセラ症の診断に、ニーーカッスル
病ウィルス、オウム病および白血病を含むトリの障害、
旋毛虫症、胃腸炎、凝性狂犬病およびアフリカブタ熱の
ようなブタの病気の診断に有用である。
動物の生物学的流体の普通のウィルス、寄生虫および細
菌に拠る病気の免疫原的アッセイによる診断に有用であ
シ、その診断はネコ白血病ウィルス、ネコ感染性腹膜炎
、トキソプラズマ症、ネコ感染性貧血、心臓虫イヌプル
セラ症、イヌパルボウィルス、抗核抗体、！Ｊ、−マチ
様因子およびイヌジステンパーに対する生物学的流体の
免疫原性アッセイによシ行われ、又ウマ類動物について
は、ウマ感染性貧血、ウマ妊娠、ウマ腺疫、ウマ肺炎、
ウマ子宮炎およびウマインフルエンザに対する診断に、
実験室用のマウスおよびラットについてはウィルスパネ
ルの診断に、ウシプルセラ症の診断に、ニーーカッスル
病ウィルス、オウム病および白血病を含むトリの障害、
旋毛虫症、胃腸炎、凝性狂犬病およびアフリカブタ熱の
ようなブタの病気の診断に有用である。
本発明の基材を用いて使用するのに適したトキソブラス
マ症のアッセイは次の文献に記載されている： Ａ、 Ｂ、サビン、Ｈ，Ａ、フェルトマン、「ＷＣ生動
物寄生虫（トキソブラスマ）に影響を及ぼす新らしい免
疫現象のミクロ化学指示薬としての染料」［５ａｂｉｎ
、 Ａ、 Ｂ＋、 Ｆｅｌｄｍａｎ、 Ｈ，Ａ、 ＊
Ｄｙｅｓ ａｓＭｉｃｒｏｃｂｅｍｊ、ｃａｌ
Ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｏｆ ａ Ｎｅｗ Ｉｍｍ
ｕｎｉｔｙＰｈｅｎｏｍｅｎｏｎ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ
Ｐｒｏｔｏｚｏａｎ Ｐａｒａｓｉｔｅ （Ｔｏｘ
ｏｐｌａｓｍａ ）、−５ｃｉｅｎｃｅ 、 １０
ざ ｔｌｒＯ−６４３／りｐＩｒｌ。
マ症のアッセイは次の文献に記載されている： Ａ、 Ｂ、サビン、Ｈ，Ａ、フェルトマン、「ＷＣ生動
物寄生虫（トキソブラスマ）に影響を及ぼす新らしい免
疫現象のミクロ化学指示薬としての染料」［５ａｂｉｎ
、 Ａ、 Ｂ＋、 Ｆｅｌｄｍａｎ、 Ｈ，Ａ、 ＊
Ｄｙｅｓ ａｓＭｉｃｒｏｃｂｅｍｊ、ｃａｌ
Ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｏｆ ａ Ｎｅｗ Ｉｍｍ
ｕｎｉｔｙＰｈｅｎｏｍｅｎｏｎ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ
Ｐｒｏｔｏｚｏａｎ Ｐａｒａｓｉｔｅ （Ｔｏｘ
ｏｐｌａｓｍａ ）、−５ｃｉｅｎｃｅ 、 １０
ざ ｔｌｒＯ−６４３／りｐＩｒｌ。
Ｌ、ヤコプス、Ｍ、Ｎ、ルンデ、「トキソプラスマ症の
血球凝集試験Ｊ ［Ｊａｃｏｂｓ、 Ｌ、 、 Ｌｕｎ
ｄｅ、 Ｍ、Ｎ、 。
血球凝集試験Ｊ ［Ｊａｃｏｂｓ、 Ｌ、 、 Ｌｕｎ
ｄｅ、 Ｍ、Ｎ、 。
Ａ ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ Ｔｅ５ｔ
ｆｏｒ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ 。
ｆｏｒ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ 。
Ｊ、 Ｐａｒａｓｉｔｏｌ、 １７３３０１−３／ＩＩ
／り！７〕。
／り！７〕。
Ａ、 Ｊ、 サルツアー、Ｅ、 Ｃ，ホール、「寄生
虫病に対する間接螢光抗体試験■、トキソブラスマ症に
対する間接螢光抗体（ＩＦＡ）における変化の統計的研
究Ｊ ［５ｕｌｚｅｒ、 Ａ、 Ｊ、 、 Ｈａｌｌ、
Ｅ、 Ｃ，。
虫病に対する間接螢光抗体試験■、トキソブラスマ症に
対する間接螢光抗体（ＩＦＡ）における変化の統計的研
究Ｊ ［５ｕｌｚｅｒ、 Ａ、 Ｊ、 、 Ｈａｌｌ、
Ｅ、 Ｃ，。
Ｉｎｄｉｒｅｃｔ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ａｎｔｉ
ｂｏｄｙ Ｔｅｓｔｇ ｆｏｒＰａｒａａｉｔｉａ Ｄ
ｉｓｅａｓｅｓ ■、 ５ｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ５ｔ
ｕｄｙ ｏｆＶａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｂｅ
Ｉｎｄｉｒｅｃｔ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ａ
ｎｔｉｂｏｄｙ（Ｉ Ｆ Ａ ） ｆｏｒ Ｔｏｘ
ｏｐｌａｓｍｏｓｉｇ、 Ａｍ、 Ｊ、 Ｅｐｉｄｅ
ｍｉｏ。
ｂｏｄｙ Ｔｅｓｔｇ ｆｏｒＰａｒａａｉｔｉａ Ｄ
ｉｓｅａｓｅｓ ■、 ５ｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ５ｔ
ｕｄｙ ｏｆＶａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｂｅ
Ｉｎｄｉｒｅｃｔ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ａ
ｎｔｉｂｏｄｙ（Ｉ Ｆ Ａ ） ｆｏｒ Ｔｏｘ
ｏｐｌａｓｍｏｓｉｇ、 Ａｍ、 Ｊ、 Ｅｐｉｄｅ
ｍｉｏ。
ざ＆ １１０／−≠０７ ／り６７ ］。
Ａ、Ｄ、 ボラ−１Ｇ、ピッドウェル、Ｅ、ハルト、
Ａ。
Ａ。
エングバル、「トキソブラスマ抗体に対する酵素結合イ
ムノアッセイのマイクロブＶ−）方法」［Ｖｏｌｌｅｒ
、 Ａ、Ｄ、、 Ｂｉｄｗｅｌｌ、 Ｇ、 Ｈｕｌｄｔ
、 Ｅ。
ムノアッセイのマイクロブＶ−）方法」［Ｖｏｌｌｅｒ
、 Ａ、Ｄ、、 Ｂｉｄｗｅｌｌ、 Ｇ、 Ｈｕｌｄｔ
、 Ｅ。
Ｅｎｇｖａｌｌ Ａ、、 Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｓ Ｍｅ
ｔｈｏｄ ｏｆ ＥｎｚｙｍｅＬｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕ
ｎｏａｓａａｙ ｆｏｒ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｙ 。
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ｎｏａｓａａｙ ｆｏｒ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｙ 。
Ｊ、Ｃ１１ｎ、 Ｐａｔｈｎｌ、 ２タ ／！０−／
１３ ／りｑａ ］ 。
１３ ／りｑａ ］ 。
本発明の基材を用いた使用に適するネコ感染性腹膜炎に
対するアッセイは次の文献に記載されている： ヘターソン等、「ネコ感染性腹膜炎ウィルスのその他の
種のコロナウィルスに対する抗原的関係」［Ｐｅｄａｒ
ｓｏｎ ｅｔ ｍｌ＋、 ” Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ
Ｒｅ１ａｔｉｏｎｓｈｉｐｏｆ ｔｈｅ Ｆｅ１ｉｎ
ｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ
Ｖｉｒｕｓｔｏ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ ｏｆ
０ｔｈｅｒ ５ｐｅｃｉｅｓ ｎ、 Ａｒｃｈｌｖｅ
ｓｏｆ Ｖｌｒｏｌｏ Ｊざ、 弘ｓ −ｙ
、、？ （１ｙ７ｒ ） ：） 。
対するアッセイは次の文献に記載されている： ヘターソン等、「ネコ感染性腹膜炎ウィルスのその他の
種のコロナウィルスに対する抗原的関係」［Ｐｅｄａｒ
ｓｏｎ ｅｔ ｍｌ＋、 ” Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ
Ｒｅ１ａｔｉｏｎｓｈｉｐｏｆ ｔｈｅ Ｆｅ１ｉｎ
ｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ
Ｖｉｒｕｓｔｏ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ ｏｆ
０ｔｈｅｒ ５ｐｅｃｉｅｓ ｎ、 Ａｒｃｈｌｖｅ
ｓｏｆ Ｖｌｒｏｌｏ Ｊざ、 弘ｓ −ｙ
、、？ （１ｙ７ｒ ） ：） 。
ペダーンン、「自然発生的ネコ感染症腹膜炎の血清学的
研究Ｊ ［Ｐｅｄｅｒｓｏｎ、 ” Ｓｅｒｏｌｏｇ
ｉｃ ５ｔｕｄｉｅｓｏｆ Ｎａｔｕｒａｌｌｙ
Ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ Ｆｅ１ｉｎａ Ｉｎｆｅｃｔ
ｉｏｕｓＰｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ ”、 Ａｍ、 Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔ、 Ｒｅｓ、、 、？７Ｎｎ
／コ、 ｌグ弘ター／４１３３ （／り７ ）〕
。
研究Ｊ ［Ｐｅｄｅｒｓｏｎ、 ” Ｓｅｒｏｌｏｇ
ｉｃ ５ｔｕｄｉｅｓｏｆ Ｎａｔｕｒａｌｌｙ
Ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ Ｆｅ１ｉｎａ Ｉｎｆｅｃｔ
ｉｏｕｓＰｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ ”、 Ａｍ、 Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔ、 Ｒｅｓ、、 、？７Ｎｎ
／コ、 ｌグ弘ター／４１３３ （／り７ ）〕
。
ホルチネック等、「ネコ感染性腹膜炎のウィルス学およ
び病原論Ｊ ［Ｈｏｒｚｌｎｅｋ、 ａｔ ａｌ、、Ｖ
ｉｒｏｌｏｇ）’ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅａｉｓ
ｏｆ Ｆｅ１ｉｎｅ Ｉｎｆｅａｔｉｏｕ＋５Ｐｅｒ
ｉｔｏｎｉｔｉｓ ＋＋、 Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ
Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ！；９ ／ −／３（ｌり７タ
） 〕 。
び病原論Ｊ ［Ｈｏｒｚｌｎｅｋ、 ａｔ ａｌ、、Ｖ
ｉｒｏｌｏｇ）’ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅａｉｓ
ｏｆ Ｆｅ１ｉｎｅ Ｉｎｆｅａｔｉｏｕ＋５Ｐｅｒ
ｉｔｏｎｉｔｉｓ ＋＋、 Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ
Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ！；９ ／ −／３（ｌり７タ
） 〕 。
本発明の基材を用いて使用するに適したネコ白血病につ
いてのアッセイは次の文献に記載されている： ジャノット等、「ネコ白血病ウィルス診断ノ三つの方法
の比較Ｊ ［：Ｊａｒｒｅｔｔ、 ｅｔ ａｌ、、
” ＡＣｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｂｒｅｅ Ｍ
ｅｔｂｏｄａ ｏｆ ＦｅｌｉｎｅＬｅｕｋｅｍｉａ
Ｖｉｒｕａ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａ、 Ｔｂｅ Ｖ
ｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｃｏｒｄ 、 ３．２！ −
３２ｇ（／ｙｒｓ ） ：］。
いてのアッセイは次の文献に記載されている： ジャノット等、「ネコ白血病ウィルス診断ノ三つの方法
の比較Ｊ ［：Ｊａｒｒｅｔｔ、 ｅｔ ａｌ、、
” ＡＣｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｂｒｅｅ Ｍ
ｅｔｂｏｄａ ｏｆ ＦｅｌｉｎｅＬｅｕｋｅｍｉａ
Ｖｉｒｕａ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａ、 Ｔｂｅ Ｖ
ｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｃｏｒｄ 、 ３．２！ −
３２ｇ（／ｙｒｓ ） ：］。
ヒルシー等、「ネコの血液におけるネコ白血病ウィルス
抗原の検出のためのＥＬＩＳＡおよび免疫螢光アッセイ
の比較Ｊ ［Ｈｉｒｓｃｂ、 ｅｔ ＊１．。
抗原の検出のためのＥＬＩＳＡおよび免疫螢光アッセイ
の比較Ｊ ［Ｈｉｒｓｃｂ、 ｅｔ ＊１．。
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ＥＬＩＳＡ ａｎｄ Ｉ
ｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒａｓｃｅｎｅｅＡｓｓａｙｓ
ｆｏｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｌｉｎ
ｅ ＬｅｕｋｅｍｉａＶｉｒｕｓ Ａｎｔｉｇｅｎ
ｓ ｉｎ Ｂｌｏｏｄ ｏｆ Ｃａｔｓ ”、
Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒ、 Ａ
ｎｉｍａｌ Ｈｏｇ １ｔａｌ Ａｓ５ｏｃ、１ｇ
り３３−タ３ざ （ｌり♂２ ）〕 。
ｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒａｓｃｅｎｅｅＡｓｓａｙｓ
ｆｏｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｌｉｎ
ｅ ＬｅｕｋｅｍｉａＶｉｒｕｓ Ａｎｔｉｇｅｎ
ｓ ｉｎ Ｂｌｏｏｄ ｏｆ Ｃａｔｓ ”、
Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒ、 Ａ
ｎｉｍａｌ Ｈｏｇ １ｔａｌ Ａｓ５ｏｃ、１ｇ
り３３−タ３ざ （ｌり♂２ ）〕 。
この様に、例えば、ネコ白血病ウィルスのＰ−２７抗原
が基材に結合されている本発明の好ましい実施態様を使
用して、ネコの血液のネコ白血病ウィルスの存在を診断
することができる。同様に、ＴＧＥピリオン（ｖｉｒｉ
ｏｎ、ウィルス粒子）が基材内に結合されている実施態
様を使用して、ネコ感染性腹膜炎を診断することができ
、トキソブラスマ拳ゴンデイ−（ｔｏｘｏｐｌａａｍａ
ｇｏｎｄｉｉ ） 抗原が結合されている好まし
い実施態様を使用して、ネコの血液のトキンプラスマ症
抗体の分析を行うことができる。
が基材に結合されている本発明の好ましい実施態様を使
用して、ネコの血液のネコ白血病ウィルスの存在を診断
することができる。同様に、ＴＧＥピリオン（ｖｉｒｉ
ｏｎ、ウィルス粒子）が基材内に結合されている実施態
様を使用して、ネコ感染性腹膜炎を診断することができ
、トキソブラスマ拳ゴンデイ−（ｔｏｘｏｐｌａａｍａ
ｇｏｎｄｉｉ ） 抗原が結合されている好まし
い実施態様を使用して、ネコの血液のトキンプラスマ症
抗体の分析を行うことができる。
蛋白質結合免疫基材は、５０チの樹脂および５０％のｐ
Ｈ約ｔ〜りの水よシなるアクリル系共重合体（成分Ａ）
を、二酸化チタンおよび酸化亜鉛の懸濁液と混合したア
クリル系樹脂と水とのエマルジョン（成分Ｂ）、および
二酸化チタンおよび銅フタロンアニンの懸濁液と混合し
たアクリル系樹脂と水とのエマルジョン（成分Ｃ）と混
合することによシ製造することができる。成分Ｂは更に
流動性改良剤、例えば、トールエステル樹脂を含むこと
もできる。好筺しくは、成分Ｂは約３〜！係の１−−ル
エステル樹脂を含有する。これらの成分は好１しくはＡ
： Ｂ ： Ｃ＝、２Ｊ：、２．ｊ：／の比で組合わ
せるのがよく、使用前に５部の蒸留水で希釈する。
Ｈ約ｔ〜りの水よシなるアクリル系共重合体（成分Ａ）
を、二酸化チタンおよび酸化亜鉛の懸濁液と混合したア
クリル系樹脂と水とのエマルジョン（成分Ｂ）、および
二酸化チタンおよび銅フタロンアニンの懸濁液と混合し
たアクリル系樹脂と水とのエマルジョン（成分Ｃ）と混
合することによシ製造することができる。成分Ｂは更に
流動性改良剤、例えば、トールエステル樹脂を含むこと
もできる。好筺しくは、成分Ｂは約３〜！係の１−−ル
エステル樹脂を含有する。これらの成分は好１しくはＡ
： Ｂ ： Ｃ＝、２Ｊ：、２．ｊ：／の比で組合わ
せるのがよく、使用前に５部の蒸留水で希釈する。
アクリル系共重合体は、アクリル系エマルジョン源、例
えば、メタクリル酸又はポリメチルメタクリレート或い
はこれらの組合せの共重合体よシ得ることができる。
えば、メタクリル酸又はポリメチルメタクリレート或い
はこれらの組合せの共重合体よシ得ることができる。
、Ｍ ４Ａ−は又、酢酸ビニル類およびその誘導体、或
−はブタジェン−スチレンおよびこれらとその他の重合
体との共重合体から得ることができる。それは又エポキ
シ重合体物質、塩化ビニル物質および上記の任意および
全ての共重合体であシ得る。
−はブタジェン−スチレンおよびこれらとその他の重合
体との共重合体から得ることができる。それは又エポキ
シ重合体物質、塩化ビニル物質および上記の任意および
全ての共重合体であシ得る。
成分Ａ、ＢおよびＣ中の樹脂は、好葦しくはビーズ状形
態がよく、ビーズの直径は約０．／−／−０ミクロンで
あシ、最も好ましくは約０．２ミクロンである。成分Ｂ
およびＣ中の酸化物は試料に向けられる光線の波長の約
半分の径であるように選ばれた粒子である。本発明の螢
光アッセイのためには、例えば、粒子は好ましくは、約
０．２ミクロンである。重合体マトリックス中にランダ
ムに分布するフタロシアニン化合物は０．／ミクロン未
満であシ、好ましくはｏ、ｏｒ〜０，１ミクロンである
。
態がよく、ビーズの直径は約０．／−／−０ミクロンで
あシ、最も好ましくは約０．２ミクロンである。成分Ｂ
およびＣ中の酸化物は試料に向けられる光線の波長の約
半分の径であるように選ばれた粒子である。本発明の螢
光アッセイのためには、例えば、粒子は好ましくは、約
０．２ミクロンである。重合体マトリックス中にランダ
ムに分布するフタロシアニン化合物は０．／ミクロン未
満であシ、好ましくはｏ、ｏｒ〜０，１ミクロンである
。
好ましい実施態様は染料標識としてＦＩＴＣを含み、散
乱性顔料粒子として銅フタロシアニンを含有する。粒子
の最適寸法は、ｍｉｅ散乱理論に基づいておシ、これは
粒子直径が光の波長のほぼ半分である場合に最適の散乱
が起こることを示す。
乱性顔料粒子として銅フタロシアニンを含有する。粒子
の最適寸法は、ｍｉｅ散乱理論に基づいておシ、これは
粒子直径が光の波長のほぼ半分である場合に最適の散乱
が起こることを示す。
ＦＩＴＣを染料分子として用いた場合には波長≠２θ〜
グＩＯｎｍｒ肯色」光線がフィルムに向けられるので０
．２〜０．３ミクロン直径の粒子を有することが理想的
である。
グＩＯｎｍｒ肯色」光線がフィルムに向けられるので０
．２〜０．３ミクロン直径の粒子を有することが理想的
である。
アクリル系重合体ビーズおよび二酸化チタンは最大約θ
、２ミクロンの直径分布を有するのが好ましい。銅フタ
ロシアニンは幾分よシ小さな粒子からなるが、なお効率
のよい散乱断面を示すものが好ましい。
、２ミクロンの直径分布を有するのが好ましい。銅フタ
ロシアニンは幾分よシ小さな粒子からなるが、なお効率
のよい散乱断面を示すものが好ましい。
本発明の好ましい実２ＩＩ！ｉ態様において、基材は固
体支持体上に固定されている。固体支持体は、その上に
少なくとも一つの分離された領域に基材が置かれる本質
的に平坦な表面を有することが好ましい。最も好ましく
は、固体支持体は、更に、実質的に平坦な底面および放
散する側壁を有する１以上の試験ウェルを含むものであ
る。基材は、好ましくは、ウェルの平坦な底面上に固定
される。
体支持体上に固定されている。固体支持体は、その上に
少なくとも一つの分離された領域に基材が置かれる本質
的に平坦な表面を有することが好ましい。最も好ましく
は、固体支持体は、更に、実質的に平坦な底面および放
散する側壁を有する１以上の試験ウェルを含むものであ
る。基材は、好ましくは、ウェルの平坦な底面上に固定
される。
基材を置いたウェルは、このように、流体を収容する領
域を与え、そこで流体のアッセイが進行する。：ｌｊ制
御された温度および湿度糸外（例６ｇ″Ｆ（約２０’Ｃ
）および７０％湿度）で固定されると、コロイド状フィ
ルムはｑｏ−ｓｏミクロンの厚さで形成され、水透過性
である。
域を与え、そこで流体のアッセイが進行する。：ｌｊ制
御された温度および湿度糸外（例６ｇ″Ｆ（約２０’Ｃ
）および７０％湿度）で固定されると、コロイド状フィ
ルムはｑｏ−ｓｏミクロンの厚さで形成され、水透過性
である。
制御された割合での乾燥（温度および湿度は変動せず、
或いは極端にならず、又風への曝露が許容されない）に
おいて、且つ配合組成に示された適当な稀釈率での蒸留
水での稀釈において、約７Ｓミクロンの高さのエマルジ
ョンの液状堆積物は合一シ、電子顕微鏡写真に示される
ように約グｏ −４３ミクロンの厚いフィルムを形成ス
る。
或いは極端にならず、又風への曝露が許容されない）に
おいて、且つ配合組成に示された適当な稀釈率での蒸留
水での稀釈において、約７Ｓミクロンの高さのエマルジ
ョンの液状堆積物は合一シ、電子顕微鏡写真に示される
ように約グｏ −４３ミクロンの厚いフィルムを形成ス
る。
乾燥時には、典型的には、フィルム重量は乙θ〜ｔＳミ
リグラムである。水性溶液に１０分間曝した後（例えば
水或いは体液の滞シ液中の予備浸漬後）、フィルムの重
量は、／ｌ！ミリグラム、即ち水分による７５％増加分
までに増加する。引続いて室温において／３４時間乾燥
した後においても、ｔ〜７チ水分の残存過剰量が存在し
、これは漸次消滅する。
リグラムである。水性溶液に１０分間曝した後（例えば
水或いは体液の滞シ液中の予備浸漬後）、フィルムの重
量は、／ｌ！ミリグラム、即ち水分による７５％増加分
までに増加する。引続いて室温において／３４時間乾燥
した後においても、ｔ〜７チ水分の残存過剰量が存在し
、これは漸次消滅する。
本発明の固定化基材は、基材およびその上およびその中
に吸収されている反応物質が透過する特別の波長の光の
量を測定する試験装置と共にイムノアッセイに使用する
ことができる。参考迄に本願明細書に記載する同時係属
中の米国特許出願第３６．２．ＡＰＩ、号明細書＜／り
１２年３り’２９日出１ｉＪＡ）には、そのような試験
機械の一つが開示されている。
に吸収されている反応物質が透過する特別の波長の光の
量を測定する試験装置と共にイムノアッセイに使用する
ことができる。参考迄に本願明細書に記載する同時係属
中の米国特許出願第３６．２．ＡＰＩ、号明細書＜／り
１２年３り’２９日出１ｉＪＡ）には、そのような試験
機械の一つが開示されている。
ダリルラボラトリーズ社（Ｄａｒｙｌ Ｌａｂｏｒａｔ
ｏｒｉｅｓ ）からＴＲＡＣＫ ＸＩ の商標名で市販
されているこの試験装置および系を用いると、発螢光団
の励起モードと実質的に同様な波長を有する光線が基材
に向けられる。入射光は基材上および基材中に存在する
反応物質の量に比例する量で反射、透過或いは吸収され
る。入射光が螢光標識の励起スペクトルにある波長のも
のである場合には、基材中の粒状物質、好ましくはフタ
ロシアニン顔料、例えば銅フタロシアニンは、この特別
の入射光を反射し、任意の非螢光活性化光線を吸収する
。望ましくない反射光線の背景水準が減少し、反射螢光
光線の信号対背景比が高くなるので、分析の感度はこの
ように極めて増大する。
ｏｒｉｅｓ ）からＴＲＡＣＫ ＸＩ の商標名で市販
されているこの試験装置および系を用いると、発螢光団
の励起モードと実質的に同様な波長を有する光線が基材
に向けられる。入射光は基材上および基材中に存在する
反応物質の量に比例する量で反射、透過或いは吸収され
る。入射光が螢光標識の励起スペクトルにある波長のも
のである場合には、基材中の粒状物質、好ましくはフタ
ロシアニン顔料、例えば銅フタロシアニンは、この特別
の入射光を反射し、任意の非螢光活性化光線を吸収する
。望ましくない反射光線の背景水準が減少し、反射螢光
光線の信号対背景比が高くなるので、分析の感度はこの
ように極めて増大する。
固定化基材は又、その他の発色団を含む分析、例えば酵
素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、の感度も高める。ＥＩＡ
においては、入射光は液体媒体中を移動して免疫反応が
起こる固定化基材に至シ、そこから色変化を行う酵素反
応体である液体媒体を通じて戻される。
素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、の感度も高める。ＥＩＡ
においては、入射光は液体媒体中を移動して免疫反応が
起こる固定化基材に至シ、そこから色変化を行う酵素反
応体である液体媒体を通じて戻される。
本発明の好ましい実施態様においては基材は更に７以上
のその他の物質と反応して螢光生成物を形成することの
できる第一の物質を含有することができる。例えば、基
材は適当な発螢光団の標識を付されたそれぞれの配位子
と反応することのできる抗原又は抗体を結合して有する
ことができる。
のその他の物質と反応して螢光生成物を形成することの
できる第一の物質を含有することができる。例えば、基
材は適当な発螢光団の標識を付されたそれぞれの配位子
と反応することのできる抗原又は抗体を結合して有する
ことができる。
この実施態様においては、基材は特定のウィルス、寄生
虫或いは細菌感染症に特徴的な抗原又は抗体を含有する
生物学的流体の分析に有用であシ、従って有用な診断道
具となる。高感度の分析をスピードおよび再現性をもっ
て行うことができるので、感染の疑われた動物からの多
量の試料の日常のスクリーニングに有用である。本発明
の基材に結合することのできる物質のその他の例として
は、ペプチド類、ホルモン類、薬品類或いは酵素基質な
どがある。これらの物質は発螢光団で標識された試薬に
よる直接分析によシ、或いはサンドイッチ技術などの間
接分析によシ、検出することができる。
虫或いは細菌感染症に特徴的な抗原又は抗体を含有する
生物学的流体の分析に有用であシ、従って有用な診断道
具となる。高感度の分析をスピードおよび再現性をもっ
て行うことができるので、感染の疑われた動物からの多
量の試料の日常のスクリーニングに有用である。本発明
の基材に結合することのできる物質のその他の例として
は、ペプチド類、ホルモン類、薬品類或いは酵素基質な
どがある。これらの物質は発螢光団で標識された試薬に
よる直接分析によシ、或いはサンドイッチ技術などの間
接分析によシ、検出することができる。
以下の具体例は病気の診断における流体のイムノアッセ
イにおける本発明の用途を例示するものである。しかし
ながら、本発明はこれらの具体例によっては限定されな
いものと理解されるべきである。
イにおける本発明の用途を例示するものである。しかし
ながら、本発明はこれらの具体例によっては限定されな
いものと理解されるべきである。
！ＬＬ
基材を、グリル・ラボラトリーズ社によシ商標コリミュ
ーン（ＣＯＬＬＩＭＭＵＮＥ）として提供され、本発明
において基材組成物および米国特許出願第３７”ｙｙ、
：ｚｏ号（／りｒコ年／り／り日出願）の試験方法に関
して説明されたのと同様にして調製された固体支持体内
の試験ウェルの底面上に固定した。ネコ白血病ウィルス
の核抗原の一つであるＰ−２７抗原を成長細胞系統Ｆ／
−〃から収穫し、第一試験ウェル上に置込た。
ーン（ＣＯＬＬＩＭＭＵＮＥ）として提供され、本発明
において基材組成物および米国特許出願第３７”ｙｙ、
：ｚｏ号（／りｒコ年／り／り日出願）の試験方法に関
して説明されたのと同様にして調製された固体支持体内
の試験ウェルの底面上に固定した。ネコ白血病ウィルス
の核抗原の一つであるＰ−２７抗原を成長細胞系統Ｆ／
−〃から収穫し、第一試験ウェル上に置込た。
補助試験ウェル中において、Ｐ−２７抗原を含有する試
料をウサギ中で発育させた抗−Ｐ −，２７抗体と共に
インキュベートさせた。７０分間のインキュベーシヨン
後、この混合物の一部を第一の試験ウェル中に移し、試
料抗原に未だ結合して込ない遊離の抗体を基材中のＰ−
，２７抗原と結合させた。７５分のインキユベーション
および簡単な洗浄後、イソチオシアン酸フルオレセイン
（ＦＩＴＣ）標Ｂｋ化されたヤギ抗−ウサギイムノグロ
ブリンＧ （ＩｇＧ）を基材に添加した。１０分間のイ
ンキ二ベーション後、基材を洗浄し、本発明で説明した
グリル・トラック夏装置中に挿入し、透過螢光光線を測
定した。白血病ウィルスの検量試料は、公知濃度のＰ−
２７抗原を含有する正常なネコ血清であった。
料をウサギ中で発育させた抗−Ｐ −，２７抗体と共に
インキュベートさせた。７０分間のインキュベーシヨン
後、この混合物の一部を第一の試験ウェル中に移し、試
料抗原に未だ結合して込ない遊離の抗体を基材中のＰ−
，２７抗原と結合させた。７５分のインキユベーション
および簡単な洗浄後、イソチオシアン酸フルオレセイン
（ＦＩＴＣ）標Ｂｋ化されたヤギ抗−ウサギイムノグロ
ブリンＧ （ＩｇＧ）を基材に添加した。１０分間のイ
ンキ二ベーション後、基材を洗浄し、本発明で説明した
グリル・トラック夏装置中に挿入し、透過螢光光線を測
定した。白血病ウィルスの検量試料は、公知濃度のＰ−
２７抗原を含有する正常なネコ血清であった。
１０４を個の予め凍結したネコ血清試料についての臨床
試験は、比較としてのＥＬＩＳＡの主観的サンドイッチ
アッセイ〔ヒツトマン・ムーア社製のリューカッセイ（
Ｌｅｕｋａｓｓａｙ ） ＦＴＭ（商標）〕に対してｒ
ｓｓの特異性およびりｊ係の感度を示した。
試験は、比較としてのＥＬＩＳＡの主観的サンドイッチ
アッセイ〔ヒツトマン・ムーア社製のリューカッセイ（
Ｌｅｕｋａｓｓａｙ ） ＦＴＭ（商標）〕に対してｒ
ｓｓの特異性およびりｊ係の感度を示した。
ＦＩＰ抗体に対するグリル・トラック℃ システムアク
セイは標準的な「サンドイッチ型」アツセイであるが、
各試料は抗原被覆ウェルおよび対照被覆ウェルの両者に
ついて行われる。コリミューン基材は例／で使用された
ものと同一であった。
セイは標準的な「サンドイッチ型」アツセイであるが、
各試料は抗原被覆ウェルおよび対照被覆ウェルの両者に
ついて行われる。コリミューン基材は例／で使用された
ものと同一であった。
交互のウェルに対照調剤および抗原調剤が適用された。
対照調剤は培養されたブタ腎臓（ＰＫ）細胞から得られ
た上溌液を０，１Ｍ重炭酸塩緩衝液（ｐＨ？ ）で／：
３に希釈したものであった。抗原調剤はＴＧＥウィルス
（ミラー株）に感染した培ａｐＫａ胞からの上と液から
得られたＴＧＥピリオンであった。ネコ感染性腹膜炎抗
原けＴＧＥウィルスと強く交差反応する。
た上溌液を０，１Ｍ重炭酸塩緩衝液（ｐＨ？ ）で／：
３に希釈したものであった。抗原調剤はＴＧＥウィルス
（ミラー株）に感染した培ａｐＫａ胞からの上と液から
得られたＴＧＥピリオンであった。ネコ感染性腹膜炎抗
原けＴＧＥウィルスと強く交差反応する。
ネコ血液試料を対照および抗原ウェルの両者に適用し、
１０分間インキュベートした。洗浄後、ＦＩＴＣ標識を
有するウサギ抗−ネコニｇＧをウェルに適用した。７０
分間のインキュベーションおよび最終水跳後、ウェルの
螢光をトラックＸＩ 螢光読み取り器で観察した。結果
を分析するに当り、対照例の蛍光を検量試料および未知
試料の両者の抗原ウェルから得られた螢光から差し引き
（正味の蛍光の読みを得た。検量試料は他の技術によシ
求められた公知のＦＩＰ力価のプールされた血清である
。予め凍結したネコ血清試料の／２’ｌの試料について
行われた臨床試験は、公知の動的酵素結合アッセイ（Ｋ
ＥＬＡ）と対比して、♂０チの特異性を示した。トラッ
クＸＩアッセイはＫＥＬＡアクセイに対比して７０％の
感度を示した。
１０分間インキュベートした。洗浄後、ＦＩＴＣ標識を
有するウサギ抗−ネコニｇＧをウェルに適用した。７０
分間のインキュベーションおよび最終水跳後、ウェルの
螢光をトラックＸＩ 螢光読み取り器で観察した。結果
を分析するに当り、対照例の蛍光を検量試料および未知
試料の両者の抗原ウェルから得られた螢光から差し引き
（正味の蛍光の読みを得た。検量試料は他の技術によシ
求められた公知のＦＩＰ力価のプールされた血清である
。予め凍結したネコ血清試料の／２’ｌの試料について
行われた臨床試験は、公知の動的酵素結合アッセイ（Ｋ
ＥＬＡ）と対比して、♂０チの特異性を示した。トラッ
クＸＩアッセイはＫＥＬＡアクセイに対比して７０％の
感度を示した。
旦
トキソプラズマ・ボンデイーは多くの異なった動物を冒
すが、ネコはその天然の貯蔵所として役立つ。家ネコか
ら妊娠した飼主への伝染は胎児における悲劇的出産欠陥
に導く可能性があるので、それは非常に臨床的に重要で
ある。従って、妊娠した女性および彼女のネコを、妖気
期間内に血清学によシ定期的に試験するべきである。
すが、ネコはその天然の貯蔵所として役立つ。家ネコか
ら妊娠した飼主への伝染は胎児における悲劇的出産欠陥
に導く可能性があるので、それは非常に臨床的に重要で
ある。従って、妊娠した女性および彼女のネコを、妖気
期間内に血清学によシ定期的に試験するべきである。
例／と同様な基材に粉砕したトキソプラズマ・ボンティ
ー菌から抽出した可溶性抗原を添加した。
ー菌から抽出した可溶性抗原を添加した。
基材および抗原を試験ウェル内で固定した。／ ｆＭの
全未希釈血清或いは血液を各ウェル中に人！ｔだ。
全未希釈血清或いは血液を各ウェル中に人！ｔだ。
ウェルを室温で７０分間インキュベートさせてＴ。
ｇｏｎｄｉｉ ＶＣ対する抗体と固定抗原間の反応を行
わせた。ウェルな洗浄し、次いでイソチオシアン酸フル
オレセイン（ＦＩＴＣ）で標識化した抗−ネコ抗体と接
触させた。７０分間のインキュベーション後、ウェルを
洗浄し、螢光を観察した。公知の力価の対照試料を同時
に実験して検ｆ２ｇを作成した。
わせた。ウェルな洗浄し、次いでイソチオシアン酸フル
オレセイン（ＦＩＴＣ）で標識化した抗−ネコ抗体と接
触させた。７０分間のインキュベーション後、ウェルを
洗浄し、螢光を観察した。公知の力価の対照試料を同時
に実験して検ｆ２ｇを作成した。
旦ム
以下のアッセイは例／〜３の一般的方法、基材に予備適
用しなかった。血清はウェル内に１０分間入れられた。
用しなかった。血清はウェル内に１０分間入れられた。
全血清蛋白質は吸収された。洗浄後、ＦＩＴＣ標識を伺
された抗−ネコＩｇＧ抗体を適用した。それは結合Ｉｇ
Ｇのみと反応した。７０分間のインキュベーション後、
過剰の抗−ネコＩｇＧを洗浄して除去し、螢光をトラッ
クＸＩ装置内において読んだ。検量計は血液１ｏｏｍｌ
当りのＩｇＧ 、Ｒで゛・−計量を与えた。
された抗−ネコＩｇＧ抗体を適用した。それは結合Ｉｇ
Ｇのみと反応した。７０分間のインキュベーション後、
過剰の抗−ネコＩｇＧを洗浄して除去し、螢光をトラッ
クＸＩ装置内において読んだ。検量計は血液１ｏｏｍｌ
当りのＩｇＧ 、Ｒで゛・−計量を与えた。
ウマＩｇＧアッセイはネコＩｇＧアッセイにおけるのと
同様に行われたが、ウマの新生児が免疫不全−メスウマ
から初乳を採っていない−かどうかを決定するために低
水準に対して検量が行われた。
同様に行われたが、ウマの新生児が免疫不全−メスウマ
から初乳を採っていない−かどうかを決定するために低
水準に対して検量が行われた。
イヌジステンパー抗体、イヌ・ζルボウイルス抗体およ
びプルセラに対するイヌ抗体は全て例３と同様にして行
われたサンドインチ技術であシ適当な抗原に向けられた
ものである。全て、二回の７０分間のインキュベーショ
ンおよび二回の簡単な洗浄を使用した。いずれも例−の
ＦＩＰ試験で必要としたような対照ウェルの使用を必要
としなかった。イヌにおけるリューマチ様因子試験につ
ｂては、抗原は、あるイヌの場合においては、ＩｇＭ抗
体が向けられた「変化させられた」ウサギＩｇＧであっ
た。抗−イヌＩｇＭＦＩＴＣ標識化抗体が例７〜３と同
様にして使用された。イヌ抗核抗体試験につ−ては、二
本鎖および一本鎖ＤＮＡプラスリボ核蛋白質が抗原とし
て組合わされた。試験は例／〜３と同様にして行われた
。
びプルセラに対するイヌ抗体は全て例３と同様にして行
われたサンドインチ技術であシ適当な抗原に向けられた
ものである。全て、二回の７０分間のインキュベーショ
ンおよび二回の簡単な洗浄を使用した。いずれも例−の
ＦＩＰ試験で必要としたような対照ウェルの使用を必要
としなかった。イヌにおけるリューマチ様因子試験につ
ｂては、抗原は、あるイヌの場合においては、ＩｇＭ抗
体が向けられた「変化させられた」ウサギＩｇＧであっ
た。抗−イヌＩｇＭＦＩＴＣ標識化抗体が例７〜３と同
様にして使用された。イヌ抗核抗体試験につ−ては、二
本鎖および一本鎖ＤＮＡプラスリボ核蛋白質が抗原とし
て組合わされた。試験は例／〜３と同様にして行われた
。
本発明に従って行うことのできるウェルズ、細菌、およ
び寄生虫の抗原又は抗体の検出を含む免疫学的試験には
、特に次のものが含まれる：小愛玩動物： ネコ白血病ウィルス ネコ感染性腹膜炎 ネコトキソプラスマ症 ネコ感染性貧血症 イヌ心；臓虫 イヌプルセラ症 イヌパルボウィルス イヌ抗−核抗体 イヌリューマチ様因子 イヌジステンパー ウマ： ウマ感染性貧血症 ウマ妊娠 ウマ腺、疫 ウマ肺炎 ウマ子宮炎 ウマインフルエンザ 実験室： マウスおよびラットに対するウイルスノ（ネル 食物および繊維： ウシプルセラ症 旋毛虫 ブタの胃腸炎 前古ウィルス病 トリ類： ニューカッスル病ウィルス オウム病 白血症 更に、ＩｇＧ、ＩｇＡ、 ＩｇＭおよびＩｇＥ、相補系
の血清蛋白成分およびＣ反応性蛋白質などのその他の血
清蛋白質の定量も可能である。
び寄生虫の抗原又は抗体の検出を含む免疫学的試験には
、特に次のものが含まれる：小愛玩動物： ネコ白血病ウィルス ネコ感染性腹膜炎 ネコトキソプラスマ症 ネコ感染性貧血症 イヌ心；臓虫 イヌプルセラ症 イヌパルボウィルス イヌ抗−核抗体 イヌリューマチ様因子 イヌジステンパー ウマ： ウマ感染性貧血症 ウマ妊娠 ウマ腺、疫 ウマ肺炎 ウマ子宮炎 ウマインフルエンザ 実験室： マウスおよびラットに対するウイルスノ（ネル 食物および繊維： ウシプルセラ症 旋毛虫 ブタの胃腸炎 前古ウィルス病 トリ類： ニューカッスル病ウィルス オウム病 白血症 更に、ＩｇＧ、ＩｇＡ、 ＩｇＭおよびＩｇＥ、相補系
の血清蛋白成分およびＣ反応性蛋白質などのその他の血
清蛋白質の定量も可能である。
出願人代理人 猪 股 清
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ／、 ｆｉ＋ 三次元マトリックスを形成する膨潤性
再水和可能な蛋白質結合重合体物質、 （２）前記重合体マトリックス中に分布された、可視光
線を散乱することのできる粒状の非特異的光散乱中心、
および （３） 前記重合体７トリノクス中に分散された、特異
的螢光励起光線を反射し、非特異的光線を吸収すること
のできる粒状の特異的光散乱中心、を含んでなることを
特徴とする螢光イムノアッセイ用基材。 ２、 該蛋白質結合重合体物質がアクリル系共重合体で
ある、特許請求の範囲第１項記載の基材。 ３、 該アクリル系共重合体がメタクリル酸およびポリ
メチルメタクリレートを含んでなる、特許請求の範囲第
一項記載の基材。 ｔ、 該非特異的光散乱中心がチタンおよび亜鉛の酸化
物の各々或いは組合せである、特許請求の範囲第１項記
載の基材。 ！、 該特異的光散乱中心がフタロシアニン化合物であ
る、特許請求の範囲第１項記載の基材。 乙、 固体支持体に固定されている、特許請求の範囲第
１項記載の基材。 ７、 該固体支持体が本質的に平坦な平面よシなる、特
許請求の範囲第２項記載の固定化基材。 ｒ、 固体支持体が、実質的に平坦な底面および放散す
る側壁を有する７個以上の試験ウェルを含んでなり、前
記基材がその底に固定化されているものである９許請求
の範囲第７項記載の基材。 り、 ７以上の他の物質と反応して螢光生成物を形成す
ることのできる第一の物質を結合して有する、特許請求
の範囲第１項記載の基材。 １０、該第−の物質が抗原又は抗体である、特許請求の
範囲第７項記載の基材。 ／／、該全抗原酸いはその分画がＴＧＥビリオン（ｖｉ
ｒｉｏｎ 、ウィルス粒子）、ネコ白血病ウィルスのＰ
−，２７抗原、トキソブラスマ・ボンデイー（Ｔｏｘｏ
ｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ ） 、イヌジステンノ
（−ウィルス、イヌパルホウィルス、イヌプルセラ菌（
ｃａｎｉｎｅＢｒｕｃｅｌｌａ ｏｒｇａｎｉａｍａ
） Ｘプルセラ流産菌・心臓虫酸いは旋毛虫属（Ｔｒｉ
ｃｈｉｎｅｌｌａ ）である、特許請求の範囲第１Ｏ項
記載の基材。 ／、２．下記の基材を用いることを特徴とする流体のイ
ムノアッセイ。 上記の基材は、 （１） 三次元マ） ＩＪソックス形成する膨潤性再
水和可能な蛋白質結合重合体物質、 （２） 前記重合体マトリックス中に分布された。 可視光憩を散乱することのできる粒状の非特異的光散乱
中心、および （３）前記重合体マトリックス中に分散された、特異的
螢光励起光線を反射し、非特異的光線を吸収することの
できる粒状の特異的光散乱中心を含んでなる螢光用イム
ノアッセイ用基材である。 ／３．螢光イムノアッセイよシなる、特許請求の範囲第
１−項記載のイムノアッセイ。 ／４’、 酵素結合イムノアッセイよりなる、特許請
求の範囲第１２項記載のイムノアッセイ。 ／！、細菌、ウィルス、寄生虫或いは真菌の感染症によ
シ引起こされる病気に対する哺乳動物の診断法にお因て
、１ｍ下記の基材を用−た該哺乳動物の体液のイムノア
ッセイよシなることを特徴とする診断法。 上記の基材は、 （１）三次元マトリックスを形成する膨潤性再水和可能
な蛋白質結合重合体物質、 （２） 前記重合体マトリックス中に分布された、可
視光線を散乱することのできる粒状の非特異的光散乱中
心、および （３）前記重合体マトリックス中に分散された、特異的
螢光励起光線を反射し、非特異的光線を吸収することの
できる粒状の特異的光散乱中心を含んでなる螢光用イム
ノアッセイ用基材である。 ／ｚ、 ネコ白血病ウィルス、ヒトその他の哺乳動物
におけるトキソプラスマ症、ネコＩｇＧ、イヌＩｇＧ。 イヌジスチンバー、イヌバルポウィルス或すはイヌプル
セラに対する、特許請求の範囲第７ｊ項記載の診断方法
。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/483,055 US4540660A (en) | 1983-04-07 | 1983-04-07 | Substrate for fluoroimmunoassay of biological fluids |
| US483055 | 1983-04-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59190664A true JPS59190664A (ja) | 1984-10-29 |
| JPH0614046B2 JPH0614046B2 (ja) | 1994-02-23 |
Family
ID=23918460
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59009929A Expired - Lifetime JPH0614046B2 (ja) | 1983-04-07 | 1984-01-23 | 生物学的流体の螢光イムノアツセイ用基材 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4540660A (ja) |
| JP (1) | JPH0614046B2 (ja) |
| AU (1) | AU571476B2 (ja) |
| BR (1) | BR8400396A (ja) |
| CA (1) | CA1229301A (ja) |
| DE (1) | DE3412340C2 (ja) |
| DK (1) | DK159175C (ja) |
| FR (1) | FR2544081B1 (ja) |
| GB (1) | GB2138131B (ja) |
| IT (1) | IT1179356B (ja) |
| SE (1) | SE8307004L (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08211059A (ja) * | 1994-11-04 | 1996-08-20 | Boehringer Mannheim Gmbh | 生物発光および化学発光反応におけるシグナル検出を高めるための白色トリガー調製物 |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE8300553D0 (sv) * | 1983-02-02 | 1983-02-02 | Pharmacia Diagnostics Ab | Sett och anordning vid biospecifika affinitetsreaktioner |
| US4596723A (en) * | 1984-05-02 | 1986-06-24 | Daryl Laboratories, Inc. | Immunoassay substrate |
| US4853325A (en) * | 1986-03-26 | 1989-08-01 | Synbiotics Corporation | Saliva test for feline leukemia virus |
| US4962021A (en) * | 1986-06-20 | 1990-10-09 | Personal Diagnostics, Inc. | Analyte determination using gel including a reagent system reacts with analyte to change transmissive property of gel detectable by light beam transmitted through gel by total internal reflectance |
| US5494793A (en) * | 1986-12-15 | 1996-02-27 | British Technology Group Usa Inc. | Monomeric phthalocyanine reagents |
| US5346670A (en) * | 1986-12-24 | 1994-09-13 | British Technology Group U.S.A. Inc. | Phthalocyanine and tetrabenztriazaporphyrin reagents |
| US4837162A (en) * | 1987-06-05 | 1989-06-06 | Pall Corporation | Non-fluorescing, non-reflective polyamide for use in diagnostic testing |
| DK269889A (da) * | 1988-06-06 | 1989-12-07 | Photest Diagnostics Inc | Heterogen immunoassay |
| FR2747387B1 (fr) * | 1996-04-12 | 1998-07-03 | Conseil General De L Orne | Moyens pour la detection de bacteries du genre taylorella et applications biologiques |
| US5795784A (en) | 1996-09-19 | 1998-08-18 | Abbott Laboratories | Method of performing a process for determining an item of interest in a sample |
| US5856194A (en) | 1996-09-19 | 1999-01-05 | Abbott Laboratories | Method for determination of item of interest in a sample |
| US7935539B2 (en) * | 2003-02-14 | 2011-05-03 | Siemens Healthcare Diagnostics, Inc. | Generic method for latex agglutination assays |
| WO2010052306A1 (de) * | 2008-11-07 | 2010-05-14 | Roche Diagnostics Gmbh | Feinkörnige füllstoffe für photometrische reaktionsfilme |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4061466A (en) * | 1974-10-16 | 1977-12-06 | Ingvar Gosta Holger Sjoholm | Biologically active composition and the use thereof |
| SE388694B (sv) * | 1975-01-27 | 1976-10-11 | Kabi Ab | Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar |
| DE2721267C2 (de) * | 1977-05-11 | 1985-05-02 | Hans A. Dipl.-Chem. Dr. 8000 München Thoma | Antikörpergel |
| DE2733380A1 (de) * | 1977-07-23 | 1979-02-08 | Behringwerke Ag | Immunologisches analysenverfahren |
| JPS5468696A (en) * | 1977-11-04 | 1979-06-01 | Int Diagnostic Tech | Method of making sampler for immunological quantity measurement |
| US4363634A (en) * | 1980-07-18 | 1982-12-14 | Akzona Incorporated | Glass support coated with synthetic polymer for bioprocess |
| US4340564A (en) * | 1980-07-21 | 1982-07-20 | Daryl Laboratories, Inc. | Immunoadsorptive surface coating for solid-phase immunosubstrate and solid-phase immunosubstrate |
| AU7451481A (en) * | 1980-07-21 | 1982-02-16 | Harte, Richard A. | Immunoadsorptive surface coating for solid-phase immunosubstrate and solid-phase immunosubstrate |
| US4483759A (en) * | 1982-07-02 | 1984-11-20 | Thermedics, Inc. | Actinic radiation cured polyurethane acrylic copolymer |
| US4468371A (en) * | 1982-07-19 | 1984-08-28 | Daryl Laboratories, Inc. | Immunoassay test slide |
-
1983
- 1983-04-07 US US06/483,055 patent/US4540660A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-12-19 SE SE8307004A patent/SE8307004L/xx not_active Application Discontinuation
- 1983-12-20 CA CA000443709A patent/CA1229301A/en not_active Expired
- 1983-12-23 AU AU22841/83A patent/AU571476B2/en not_active Ceased
-
1984
- 1984-01-12 GB GB08400807A patent/GB2138131B/en not_active Expired
- 1984-01-23 JP JP59009929A patent/JPH0614046B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1984-01-31 BR BR8400396A patent/BR8400396A/pt unknown
- 1984-02-27 DK DK105984A patent/DK159175C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-03-15 FR FR8403987A patent/FR2544081B1/fr not_active Expired
- 1984-03-26 IT IT47933/84A patent/IT1179356B/it active
- 1984-04-03 DE DE3412340A patent/DE3412340C2/de not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08211059A (ja) * | 1994-11-04 | 1996-08-20 | Boehringer Mannheim Gmbh | 生物発光および化学発光反応におけるシグナル検出を高めるための白色トリガー調製物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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| DE3412340A1 (de) | 1984-10-11 |
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| GB2138131B (en) | 1987-01-21 |
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| BR8400396A (pt) | 1985-02-12 |
| AU2284183A (en) | 1984-10-11 |
| GB8400807D0 (en) | 1984-02-15 |
| SE8307004L (sv) | 1984-10-08 |
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