JPS5818072B2 - 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 - Google Patents
補酵素ｑ↓１↓０の製造法Info
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- JPS5818072B2 JPS5818072B2 JP54146032A JP14603279A JPS5818072B2 JP S5818072 B2 JPS5818072 B2 JP S5818072B2 JP 54146032 A JP54146032 A JP 54146032A JP 14603279 A JP14603279 A JP 14603279A JP S5818072 B2 JPS5818072 B2 JP S5818072B2
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、ロドシュードモナス・スフ主ロイデス（Ｒｈ
ｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅｒｏｉｄｅ
ｓ ）に属する光合成細菌による補酵素Ｑｌｏの発酵法
１こよる製造法に関するものである。
ｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅｒｏｉｄｅ
ｓ ）に属する光合成細菌による補酵素Ｑｌｏの発酵法
１こよる製造法に関するものである。
補酵素Ｑ１ｏはユビキノン１０とも呼ばれ、下等動植物
から高等動物に至るまで広く生物組織中に存在し、末端
呼吸系の電子伝達系の構成成分として、生物体内におけ
るエネルギー代謝に重要な生理的役割を有し、その薬理
機能として、高血圧症、冠状動脈硬化症、弁膜症などに
伴なう狭心症状、うつ血症状を改善することなどが報告
されており、それらの治療薬として実用に供されている
。
から高等動物に至るまで広く生物組織中に存在し、末端
呼吸系の電子伝達系の構成成分として、生物体内におけ
るエネルギー代謝に重要な生理的役割を有し、その薬理
機能として、高血圧症、冠状動脈硬化症、弁膜症などに
伴なう狭心症状、うつ血症状を改善することなどが報告
されており、それらの治療薬として実用に供されている
。
ロドシュードモナス属として分類される光合成細菌の生
成する補酵素Ｑ１ｏは、他の微生物あるいは高等動物に
比べて、その菌体内含量が高いことが知られている。
成する補酵素Ｑ１ｏは、他の微生物あるいは高等動物に
比べて、その菌体内含量が高いことが知られている。
たとえばロドシュードモナス・スフェロイデス（Ｒｈｏ
ｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅ−ｒｏｉｄ
ｅｓ）では、３００’０ｌｕｘ以上の光強側照射条件（
明条件）、嫌気下で５０００μｇ／ｇ乾燥菌体、暗、好
気下で２０００μ９７９乾燥菌体と報告されている。
ｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅ−ｒｏｉｄ
ｅｓ）では、３００’０ｌｕｘ以上の光強側照射条件（
明条件）、嫌気下で５０００μｇ／ｇ乾燥菌体、暗、好
気下で２０００μ９７９乾燥菌体と報告されている。
また、ロドシュードモナス・カプシュラタス（Ｒｈｏｄ
ｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃａｐｓｕｌ −ａｔｕ
ｓ ）では明、嫌気条件下で培養、集菌後、有機溶媒に
よって補酵素ＱＩＯを抽出分離する方法（特公昭４７−
７９５４号）、あるいは炭化水素を炭素源として好気的
に培養、集菌後、有機溶媒によって補酵素Ｑ１ｏを抽出
分離する方法（特公昭４８−２１５１９号）などが報告
されている。
ｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃａｐｓｕｌ −ａｔｕ
ｓ ）では明、嫌気条件下で培養、集菌後、有機溶媒に
よって補酵素ＱＩＯを抽出分離する方法（特公昭４７−
７９５４号）、あるいは炭化水素を炭素源として好気的
に培養、集菌後、有機溶媒によって補酵素Ｑ１ｏを抽出
分離する方法（特公昭４８−２１５１９号）などが報告
されている。
従来、光合成細菌の補酵素Ｑｌｏ含量が高くなるのは、
明（３０００１ｕｘ〜１００００１ｕｘの光強側照射）
、嫌気（無酸素状態）条件下での培養という特殊条件下
であり、３０００１ｕｘ以上の光照射条件というのは、
種々の培養装置が考えられているが、培養槽内に光を十
分に均一照射することの困難性、また光照射に要するエ
ネルギーと、それによる発熱の冷却に要するエネルギー
の大なることなどから実用化には困難があり、また菌体
内の補酵素ＱＩＯ含量は高いものの菌体の収量が低いこ
とから光合成細菌による補酵素Ｑｌｏの製造は実用に至
っていない。
明（３０００１ｕｘ〜１００００１ｕｘの光強側照射）
、嫌気（無酸素状態）条件下での培養という特殊条件下
であり、３０００１ｕｘ以上の光照射条件というのは、
種々の培養装置が考えられているが、培養槽内に光を十
分に均一照射することの困難性、また光照射に要するエ
ネルギーと、それによる発熱の冷却に要するエネルギー
の大なることなどから実用化には困難があり、また菌体
内の補酵素ＱＩＯ含量は高いものの菌体の収量が低いこ
とから光合成細菌による補酵素Ｑｌｏの製造は実用に至
っていない。
本発明者らは、これらの点に鑑み、鋭意研究した結果、
ロドシュードモナス・スフェロイデスに属する光合成細
菌を、特定の金属を特定量含有する培地を用いて培養す
ることにより、暗条件、すなわち光の強制照射をしなく
ても補酵素Ｑｌｏの生成を飛躍的に促進できることを見
出し、工業的に実施可能な光合成細菌による補酵素ＱＩ
Ｏの製造方法を発明した。
ロドシュードモナス・スフェロイデスに属する光合成細
菌を、特定の金属を特定量含有する培地を用いて培養す
ることにより、暗条件、すなわち光の強制照射をしなく
ても補酵素Ｑｌｏの生成を飛躍的に促進できることを見
出し、工業的に実施可能な光合成細菌による補酵素ＱＩ
Ｏの製造方法を発明した。
本発明は、ロドシュードモナス・スフェロイデス（Ｒｈ
ｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅｒ、ｏｉｄ
ｅｓ ）に属する光合成細菌による補酵素ＱＩＧの発酵
製造法において、培地中にマグネシウム塩、鉄塩および
マンガン塩からなる群から選ばれた少なくとも一種を、
マグネシウム塩については１．３ｍＭ以上、鉄塩につい
ては０．０６ｍＭ以上およびマンガン塩については０．
１５ｍＭ以上添加して暗条件下に培養することを特徴と
する補酵素Ｑｌｏの製造法に関する。
ｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅｒ、ｏｉｄ
ｅｓ ）に属する光合成細菌による補酵素ＱＩＧの発酵
製造法において、培地中にマグネシウム塩、鉄塩および
マンガン塩からなる群から選ばれた少なくとも一種を、
マグネシウム塩については１．３ｍＭ以上、鉄塩につい
ては０．０６ｍＭ以上およびマンガン塩については０．
１５ｍＭ以上添加して暗条件下に培養することを特徴と
する補酵素Ｑｌｏの製造法に関する。
以下に本発明の詳細な説明する。
本発明に使用されるロドシュードモナス・スフェロイデ
スに属する光合成細菌、ロドシュードモナス・スフェロ
イデス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｈａｅ
ｒｏｉｄｅｓ ） Ａ Ｓ−１０５６３微工研菌寄第５
２５２号）は、自然界から新たに分離した菌株であり、
その菌学的性質について述べると次のとおりである。
スに属する光合成細菌、ロドシュードモナス・スフェロ
イデス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｈａｅ
ｒｏｉｄｅｓ ） Ａ Ｓ−１０５６３微工研菌寄第５
２５２号）は、自然界から新たに分離した菌株であり、
その菌学的性質について述べると次のとおりである。
ａ、形態学的性質
初期培養のものは、鞭毛を持って運動性があり、通常直
径０．７〜４μｍの球菌であるが多形現象を示す。
径０．７〜４μｍの球菌であるが多形現象を示す。
またダラム染色性は陰性で抗酸性を有している。
ｂ、生育状態（明・嫌気）
生育 生育
グルコース ＋＋ 酪 酸 丹フラクトース
丹 チオ硫酸ソーダ − マンノース 千十 エタノール ＋マルトース
＋ グリセリン ＋ 乳 酸 ＋ マンニット ← リンゴ酸 ＋ ソルビット ←コハク酸
＋ アラニン ＋酒石酸 ＋ アス
パラギン 士クエン酸 −アスパラギイ酸 土 酢 酸 ＋＋ グルタミン酸 十プロピオン酸
土 肉 汁 − ＋−）−：よく生育する ＋：生育する 士：殆んど生育しない 一：生育しない （いずれも基質濃度は０．２％を使用） Ｃ０生理学的性質 （１）インドールの生成：なし く２）硫化水素の生成：なし く３）デンプンの加水分解：なし く４）クエン酸の利用：なし く５）アンモニウム塩の利用性：あり （６）赤色色素（脂溶性）生成：あり （７）窒素ガスの固定能：あり （８）カタラーゼ生成：あり （９）生育範囲： ｐＨ６，０〜９．０、温度１０℃〜
４２℃、（暗、明いずれでも生 育）、最適生育範囲： ｐＨ６，８１ 、温度２８〜３２°Ｃ （１０） 酸素に対する挙動：嫌気〜好気で生育（１
υ チオ硫酸ソーダ利用性：なし ０２）還元型メチレンブルー、還元型メチル（またはベ
ンジル）バイオロジン色素の酸化能カニあり ０３）ビオチン、チアミン、ニコチン酸を生育因子とし
て要求する。
丹 チオ硫酸ソーダ − マンノース 千十 エタノール ＋マルトース
＋ グリセリン ＋ 乳 酸 ＋ マンニット ← リンゴ酸 ＋ ソルビット ←コハク酸
＋ アラニン ＋酒石酸 ＋ アス
パラギン 士クエン酸 −アスパラギイ酸 土 酢 酸 ＋＋ グルタミン酸 十プロピオン酸
土 肉 汁 − ＋−）−：よく生育する ＋：生育する 士：殆んど生育しない 一：生育しない （いずれも基質濃度は０．２％を使用） Ｃ０生理学的性質 （１）インドールの生成：なし く２）硫化水素の生成：なし く３）デンプンの加水分解：なし く４）クエン酸の利用：なし く５）アンモニウム塩の利用性：あり （６）赤色色素（脂溶性）生成：あり （７）窒素ガスの固定能：あり （８）カタラーゼ生成：あり （９）生育範囲： ｐＨ６，０〜９．０、温度１０℃〜
４２℃、（暗、明いずれでも生 育）、最適生育範囲： ｐＨ６，８１ 、温度２８〜３２°Ｃ （１０） 酸素に対する挙動：嫌気〜好気で生育（１
υ チオ硫酸ソーダ利用性：なし ０２）還元型メチレンブルー、還元型メチル（またはベ
ンジル）バイオロジン色素の酸化能カニあり ０３）ビオチン、チアミン、ニコチン酸を生育因子とし
て要求する。
以上の菌学的性質を、バージエイ・マニュアル・オブ・
デターミナイテイブ・バクテリオロジイ第８版の記載と
対照すると、本菌株はロドスピリラシー科ロドシュード
モナス属スフェロイデス種ト同定される。
デターミナイテイブ・バクテリオロジイ第８版の記載と
対照すると、本菌株はロドスピリラシー科ロドシュード
モナス属スフェロイデス種ト同定される。
本発明においては、上記のようなロドシュードモナス・
スフェロイデスに属する光合成細菌をマグネシウム塩、
鉄塩およびマンガン塩から選ばれた塩の少なくとも一種
を添加した培地中に培養する。
スフェロイデスに属する光合成細菌をマグネシウム塩、
鉄塩およびマンガン塩から選ばれた塩の少なくとも一種
を添加した培地中に培養する。
培養条件は、３０〜３５℃、嫌気ないし好気条件下、暗
条件下において３〜７日間培養する。
条件下において３〜７日間培養する。
ここで、暗条汁と畔、強制照射ではないことを意味し、
培養器に自然光がもれこんだり、のぞき窓から微光が入
ったりしてもさしつかえない。
培養器に自然光がもれこんだり、のぞき窓から微光が入
ったりしてもさしつかえない。
これらの微光が補酵素ＱＩＯ生成に影響しないことは、
後述の実施例２に示される。
後述の実施例２に示される。
基本となる培地は、適当な炭素源、窒素源、その他金属
、ビタミンなどを含む培地であればよい。
、ビタミンなどを含む培地であればよい。
たとえば、グリセリン、硫安、リン酸−カリ、佑酸マグ
ネシウム、微量の鉄塩、マンガン塩、力／１シウム塩、
コバルト塩、生長因子として微量のニコチン酸、ビオチ
ン、チアミンを加え、ｐＨ６，８４ζ調節した合成培地
が使用される。
ネシウム、微量の鉄塩、マンガン塩、力／１シウム塩、
コバルト塩、生長因子として微量のニコチン酸、ビオチ
ン、チアミンを加え、ｐＨ６，８４ζ調節した合成培地
が使用される。
その他、炭素源としてはリンゴ酸、コハク酸等の有機酸
、エタノール、プロパツール等のアルニール類、炭化水
素類、グルコース、フラクト−２等の糖類、大豆油、ヤ
シ油等の油類が用いられ、窒素源としては塩安等のアン
モニア態窒素、ポリペプトン、酵母エキス、カザミノ酸
等の有機窒諌が用いられる。
、エタノール、プロパツール等のアルニール類、炭化水
素類、グルコース、フラクト−２等の糖類、大豆油、ヤ
シ油等の油類が用いられ、窒素源としては塩安等のアン
モニア態窒素、ポリペプトン、酵母エキス、カザミノ酸
等の有機窒諌が用いられる。
また、その他カリウム塩、ナｌ−ＩＪウム塩、カルシウ
ム塩、リン酸塩等の無機塩類、金属は硫酸塩、硝酸塩な
どが用いられる。
ム塩、リン酸塩等の無機塩類、金属は硫酸塩、硝酸塩な
どが用いられる。
上記の培地に添加するマグネシウム塩、鉄塩またはマン
ガン塩の添加量は、次のようにして法外された。
ガン塩の添加量は、次のようにして法外された。
下記組成を有する基本培地に、硫酸マグネシウム、硫酸
第１鉄または硫酸マンガンを各々添加し下記の培養条件
で培養して、それぞれの塩の補酵素Ｑ１ｏ生成に及ぼす
効果を調べた。
第１鉄または硫酸マンガンを各々添加し下記の培養条件
で培養して、それぞれの塩の補酵素Ｑ１ｏ生成に及ぼす
効果を調べた。
その結果を江１図に示すと共に、表１ないし３に記載し
た。
た。
培地組成：（基本組成）
グリセリン４％、硫安１慢、リン酸−カリ０．０５係、
リン酸二カリ０．０５％、硫酸マグネシウム（Ｍｇ Ｓ
０４・７Ｈ２０）０．０２係、炭酸カルシウム０．５
％、 硫酸コバルトｏ、ｏｏｏ１’ｌ、ニコチン酸１
．５Ｘ１０’係、チアミン３Ｘ１０’％、ビオチン６×
１０″３係（ｐＨ６，８） 培養条件： 好気、暗条件、３５℃で５日間培養後、集菌し菌体中の
補酵素Ｑ１ｏを常法により、ケン化、抽出後、シアノ酢
酸エチルによる比色定量を行なう。
リン酸二カリ０．０５％、硫酸マグネシウム（Ｍｇ Ｓ
０４・７Ｈ２０）０．０２係、炭酸カルシウム０．５
％、 硫酸コバルトｏ、ｏｏｏ１’ｌ、ニコチン酸１
．５Ｘ１０’係、チアミン３Ｘ１０’％、ビオチン６×
１０″３係（ｐＨ６，８） 培養条件： 好気、暗条件、３５℃で５日間培養後、集菌し菌体中の
補酵素Ｑ１ｏを常法により、ケン化、抽出後、シアノ酢
酸エチルによる比色定量を行なう。
好気とは、歯の生育に最小限必要な通気を意味する第１
図および表１ないし表３の結果から判るように、硫酸マ
グネシウム、硫酸第１鉄および硫酸マンガンは、各個別
に補酵素Ｑｌｏの生成に対し促進効果を示しており、補
酵素Ｑ１ｏの生成に対して促進効果を示す添加量は、Ｍ
ｇＳＯ４・７Ｈ２０１，３〜６０ｍＭ、ＦｅＳＯ４・７
Ｈ２００，１５〜６ｍＭおよびＭｎ ８０４ ・４Ｈ２
００，１５〜４．５ ｍ Ｍである。
図および表１ないし表３の結果から判るように、硫酸マ
グネシウム、硫酸第１鉄および硫酸マンガンは、各個別
に補酵素Ｑｌｏの生成に対し促進効果を示しており、補
酵素Ｑ１ｏの生成に対して促進効果を示す添加量は、Ｍ
ｇＳＯ４・７Ｈ２０１，３〜６０ｍＭ、ＦｅＳＯ４・７
Ｈ２００，１５〜６ｍＭおよびＭｎ ８０４ ・４Ｈ２
００，１５〜４．５ ｍ Ｍである。
これらＭｇ、Ｆｅ、Ｍｎの塩は、ロドシュードモナス属
細菌の通常の培養においても微量添加されるが、光強側
照射のない条件（暗条件）下での培養においては、菌体
内補酵素Ｑｌｏ含量は低い。
細菌の通常の培養においても微量添加されるが、光強側
照射のない条件（暗条件）下での培養においては、菌体
内補酵素Ｑｌｏ含量は低い。
しかし、ここに例示の如く、通常使用濃度の数〜１０倍
以上の高濃度に金属イオンを添加する時に初めて補酵素
Ｑ１ｏ生成への促進効果が発揮され、暗条件下において
も多量の補酵素Ｑｌｏが生産される。
以上の高濃度に金属イオンを添加する時に初めて補酵素
Ｑ１ｏ生成への促進効果が発揮され、暗条件下において
も多量の補酵素Ｑｌｏが生産される。
また、これら３者を合わせ添加した時には相乗効果が見
られ、さらに補酵素Ｑ１ｏの生成を促進することは、後
述の実施例１に示される如くである。
られ、さらに補酵素Ｑ１ｏの生成を促進することは、後
述の実施例１に示される如くである。
これら金属は、通常、硫酸塩、塩酸塩あるいは硝酸塩等
いずれの形も用いることができ、鉄については２価、３
価いずれの形の塩も用いることができる。
いずれの形も用いることができ、鉄については２価、３
価いずれの形の塩も用いることができる。
上記の如くして培養後、補酵素Ｑ１ｏの単離は、常法ど
おり、たとえば連続式遠心分離機あるいはドラムフィル
ターを用いて集菌し、抗酸化剤存在下でケン化後、有機
溶剤（たとえばメタノール、エタノール、クロロホルム
、ヘキサン等）で抽出し、シリカゲルによるカラムクロ
マトグラフィーによって精製することにより、精製補酵
素ＱＩＯを得ることができる。
おり、たとえば連続式遠心分離機あるいはドラムフィル
ターを用いて集菌し、抗酸化剤存在下でケン化後、有機
溶剤（たとえばメタノール、エタノール、クロロホルム
、ヘキサン等）で抽出し、シリカゲルによるカラムクロ
マトグラフィーによって精製することにより、精製補酵
素ＱＩＯを得ることができる。
以上述べたところから明らかなように、本発明において
は、暗条件下で培養するため、従来の製常法のように培
養装置（強制照射）的に工業化困難という問題点がない
。
は、暗条件下で培養するため、従来の製常法のように培
養装置（強制照射）的に工業化困難という問題点がない
。
また、従来法の生産性（５０００μｇ／ｇ乾燥菌体）よ
りはるかに高い補酵素Ｑ１ｏの生産性（１３８００ｐｇ
／Ｅｌ乾燥菌体）を有する。
りはるかに高い補酵素Ｑ１ｏの生産性（１３８００ｐｇ
／Ｅｌ乾燥菌体）を有する。
したがって、本発明によれば、嫌気ないし好気条件かつ
暗条件下という通常の培養条件でも、工業的に容易に安
価に収率良く多量の補酵素Ｑ１ｏを製造することかでき
る。
暗条件下という通常の培養条件でも、工業的に容易に安
価に収率良く多量の補酵素Ｑ１ｏを製造することかでき
る。
以下、実施例を挙げて説明する。
実施例 １
金属イオン添加効果の検討。
（１） 使用菌株 ロドシュードモナス・スフェロイ
デスＡＳ−１０５６３株 （２）培地組成 グリセリン４％、硫安１％、リン酸−カリ０．０５％、
リン酸二カリ０．０５％、硫酸マグネシウム（Ｍ ｇ
Ｓ ０４・７Ｈ２０）０．０２チ、炭酸カルシウム０．
５ ％、 硫酸コバル）０．０００１ ％、ニコチン酸
１．５Ｘ１０’チ、チアミン３Ｘ１０４弘 ビオチン６
Ｘ１０−６％（ｐＨ６，８）からなるものを基本組成と
した。
デスＡＳ−１０５６３株 （２）培地組成 グリセリン４％、硫安１％、リン酸−カリ０．０５％、
リン酸二カリ０．０５％、硫酸マグネシウム（Ｍ ｇ
Ｓ ０４・７Ｈ２０）０．０２チ、炭酸カルシウム０．
５ ％、 硫酸コバル）０．０００１ ％、ニコチン酸
１．５Ｘ１０’チ、チアミン３Ｘ１０４弘 ビオチン６
Ｘ１０−６％（ｐＨ６，８）からなるものを基本組成と
した。
（３）培養方法
対照区：２０ノ容培養槽に培地を１２１入れ、１５０ｒ
ｌｌｌｌ、 ０．５ ｒｒｍｓ暗条件下、３２℃で９０
時間培養後、生成した補酵素Ｑｒｏを常法によりケン化
抽出し、定量した。
ｌｌｌｌ、 ０．５ ｒｒｍｓ暗条件下、３２℃で９０
時間培養後、生成した補酵素Ｑｒｏを常法によりケン化
抽出し、定量した。
Ｍｇ区：対照区と同法でＭｇＳＯ４・７Ｈ２０を０．３
％ （１２，２ｍＭ ）添加。
％ （１２，２ｍＭ ）添加。
Ｆｅ区：対照区と同法でＦｅＳＯ４・７Ｈ２０を０．０
５ ％ （１，８ｍＭ ）添加。
５ ％ （１，８ｍＭ ）添加。
Ｍｎ区：対照区と同法でＭｎＳＯ４”４Ｈ２０を０．０
２ ％ （０，９０ｍＭ ）添加。
２ ％ （０，９０ｍＭ ）添加。
Ｍｇ−Ｆｅ−Ｍｎ区：対照区と同法でＭｇＳＯ４−７Ｈ
２０を０．３％、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０を０．０５％、
ＭｎＳＯ４” ４Ｈ２００，０２％添加。
２０を０．３％、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２０を０．０５％、
ＭｎＳＯ４” ４Ｈ２００，０２％添加。
４）成績 表４に示した。
ν実施例 ２
照度の影響の検討
（１）使用菌株 ロドシュードモナス・スフェロイデ
スＡｓ−１０５６３株 （２）培地組成 実施例１のＭｇ−Ｆｅ−Ｍｎ区に同じ
。
スＡｓ−１０５６３株 （２）培地組成 実施例１のＭｇ−Ｆｅ−Ｍｎ区に同じ
。
１（３）培養方法
対照区：５００ｄ容坂ロフラスコに培地を１００＋７１
１入れ、好気条件下に５日間暗培養後集菌し、補酵素Ｑ
ＩＯを常法によりケン化、抽出し、定量した。
１入れ、好気条件下に５日間暗培養後集菌し、補酵素Ｑ
ＩＯを常法によりケン化、抽出し、定量した。
’ １００ ｌｕｘ区：対照区と同法で照度１００
１ｕｘ。
１ｕｘ。
５００Ａｕｘ区：対照区と同法で照度５００１ｕＸ。
（４）成績 表５に示した。
）実施例 ３
補酵素Ｑｌｏの単離精製
（１）使用菌株 ロドシュードモナス・スフェロイデ
スＡｓ−１０５６３株 （２）培地組成 実施例１のＭｇ−Ｆｅ−Ｍｎ区に同じ
。
スＡｓ−１０５６３株 （２）培地組成 実施例１のＭｇ−Ｆｅ−Ｍｎ区に同じ
。
（３）培養方法 実施例１に同じ。
（４）成 績 １３６００ ｆｉＥＩＱｌｏ／ｇ乾燥菌
体。
体。
（５）精 製 培養液より遠心分離により得た湿菌体６
００ｇを常法によりケン化し、エタノールにより抽出後
、シリカゲルカラムに吸着させ、クロロホルム：ベンゼ
ン−９５：５の溶剤で溶出後、エタノール晶析すること
により、１０．４ｇの補酵素Ｑｉｏ結晶を得た。
００ｇを常法によりケン化し、エタノールにより抽出後
、シリカゲルカラムに吸着させ、クロロホルム：ベンゼ
ン−９５：５の溶剤で溶出後、エタノール晶析すること
により、１０．４ｇの補酵素Ｑｉｏ結晶を得た。
この結晶は、薄層クロマトグラフィー、紫外部吸収スペ
クトル、赤外部吸収スペクトル、マススペクトル等カラ
補酵素Ｑｌｏであることを確認した。
クトル、赤外部吸収スペクトル、マススペクトル等カラ
補酵素Ｑｌｏであることを確認した。
紫外部吸収スペクトルを第２図に、赤外部吸収スペクト
ルを第３図に示す。
ルを第３図に示す。
実施例１に示されるように、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｍｎの各各に
ついて補酵素Ｑ１ｏ生成促進効果が認められると共に、
その相乗効果が認められた。
ついて補酵素Ｑ１ｏ生成促進効果が認められると共に、
その相乗効果が認められた。
また、実施例２に示されるように、実質的に暗条件、す
なわち強制照射でなければ、自然光がもれこんだり、の
ぞき窓からの微光などが入っても補酵素ＱＩＧ生成に影
響はない。
なわち強制照射でなければ、自然光がもれこんだり、の
ぞき窓からの微光などが入っても補酵素ＱＩＧ生成に影
響はない。
第１図は硫酸マグネシウム、硫酸第１鉄または硫酸マン
ガン添加の補酵素Ｑｌｏ生成に及ぼす効果を示す図表、
第２図は本発明で得た補酵素Ｑｒｏのの紫外部吸収スペ
クトル、第３図は本発明で得た補酵素Ｑｌｏの赤外部吸
収スペクトルである。
ガン添加の補酵素Ｑｌｏ生成に及ぼす効果を示す図表、
第２図は本発明で得た補酵素Ｑｒｏのの紫外部吸収スペ
クトル、第３図は本発明で得た補酵素Ｑｌｏの赤外部吸
収スペクトルである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ロドシュードモナス・スフェロイデス（Ｒｈｏｄｏ
ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａ’ｅｒｏｉｄｅｓ
）′に属する光合成細菌による補酵素Ｑｒｏの発酵製
造法において、培地中にマグネシウム塩□、鉄塩および
マンガン塩から選ばれた塩の少なくとも一種を、マグネ
シウム塩については１．３ｍＭから６０ｍＭ。 鉄塩については０．１５ｍＭから６ｍＭ、およびマンガ
ン塩については０．１５ｍＭかｉ；４．５ｍＭ添加して
、暗条件下に培養することを特徴とする補酵素Ｑ１ｏの
製造法。 □２ ロドシュードモナス・スフェロ
イデス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａ
ｅｒｏ ｉｄ’ｅｓ ）に属する光合成細菌が、ロドシ
ュードモナス・スフェロイデス（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ５ｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）ＡＳ−１０５
６３株である特許請求の範囲第１項記載の補酵素ＱＩＯ
の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP54146032A JPS5818072B2 (ja) | 1979-11-13 | 1979-11-13 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP54146032A JPS5818072B2 (ja) | 1979-11-13 | 1979-11-13 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5672694A JPS5672694A (en) | 1981-06-16 |
| JPS5818072B2 true JPS5818072B2 (ja) | 1983-04-11 |
Family
ID=15398558
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP54146032A Expired JPS5818072B2 (ja) | 1979-11-13 | 1979-11-13 | 補酵素ｑ↓１↓０の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5818072B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008100782A2 (en) * | 2007-02-12 | 2008-08-21 | Cargill, Incorporated | Process for the preparation of coenzyme qlo by culturing rhodobacter sphaeroides in a defined medium |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5539730A (en) * | 1978-09-11 | 1980-03-19 | Res Inst For Prod Dev | Preparation of ubiquinone q10 |
-
1979
- 1979-11-13 JP JP54146032A patent/JPS5818072B2/ja not_active Expired
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5539730A (en) * | 1978-09-11 | 1980-03-19 | Res Inst For Prod Dev | Preparation of ubiquinone q10 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5672694A (en) | 1981-06-16 |
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