JPS58170492A - アミラ−ゼｇ４，５によるオリゴ糖の製造方法 - Google Patents
アミラ−ゼｇ４，５によるオリゴ糖の製造方法Info
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- JPS58170492A JPS58170492A JP3753682A JP3753682A JPS58170492A JP S58170492 A JPS58170492 A JP S58170492A JP 3753682 A JP3753682 A JP 3753682A JP 3753682 A JP3753682 A JP 3753682A JP S58170492 A JPS58170492 A JP S58170492A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はでん粉からマルトテトラオースとマルトトリオ
ースを主成分とする軸化物の製造方法に−する−のであ
る。
ースを主成分とする軸化物の製造方法に−する−のであ
る。
従来、アミラーゼとしては、・−アミラーゼ、β−γ噸
ラーイ、ダルコア竜ラーセなどでん粉に刈する分１’ｊ
ｒｈｌ１式を異にする榴々のアミラーゼが知られ一グル
コースやマルトースの一造に知用されてきた。そして、
最近は、より分子皺の大きい、ガえは、マルトトリオー
ス（ＧＪ）、マルトテトラオース（Ｇｊ）、Ｖルトペン
タオース（Ｇｊ）マルトヘキサオース（Ｇ６）などのオ
リ：ｒｋ−＃技脩のｎｂ姥が＊Ｗされている。これらの
糖は食品のｕ；（１″科・柚嶺酌、賦杉剤、包接剤とし
て食品、輩品及び檜々の１．業練晶に広く利用できると
考えられているか、本だ鯛法は確立されていない。
ラーイ、ダルコア竜ラーセなどでん粉に刈する分１’ｊ
ｒｈｌ１式を異にする榴々のアミラーゼが知られ一グル
コースやマルトースの一造に知用されてきた。そして、
最近は、より分子皺の大きい、ガえは、マルトトリオー
ス（ＧＪ）、マルトテトラオース（Ｇｊ）、Ｖルトペン
タオース（Ｇｊ）マルトヘキサオース（Ｇ６）などのオ
リ：ｒｋ−＃技脩のｎｂ姥が＊Ｗされている。これらの
糖は食品のｕ；（１″科・柚嶺酌、賦杉剤、包接剤とし
て食品、輩品及び檜々の１．業練晶に広く利用できると
考えられているか、本だ鯛法は確立されていない。
本発明者は、これらオリゴ糖生産能の強い微生ＶｌＪ金
・求めて、ム〈土壊中より微生物の検索を行ってきた結
果、パシルスーの微生物か、でん粉をマルトテトラオー
ス（Ｇ４ｔ）と！ルトペンタオース（Ｇｊ）を主成分と
する微生物に分解するアミラーゼに一体外に着腫に生麺
することを關めた。
・求めて、ム〈土壊中より微生物の検索を行ってきた結
果、パシルスーの微生物か、でん粉をマルトテトラオー
ス（Ｇ４ｔ）と！ルトペンタオース（Ｇｊ）を主成分と
する微生物に分解するアミラーゼに一体外に着腫に生麺
することを關めた。
マルトテトラオースを生成する酵素としては、Ｐａ＠ｕ
ｄｏｍｏｎａｓ ５ｔｕｓｓｒｉ の生麺するアミラ
ーゼが、ア叱ロースやアミロペクチンの非趨冗株木端か
らマルトテトラオースを生成することが知られている（
＾ｒｅｈｉｖｅ ｏｆ ｊｉｌｏｃｈ＠ｍ１ｓｔｒｙ
ａｎｄ８１ｏｐｈｙａＬｃｓ ａｈ ／ ＩＩｊ巻、
ｉｏｓ 〜ｔｉ＋貴＜ｔ９７ ／ ））が、この酵素は
マルトペンタオースを生成しなφ。
ｄｏｍｏｎａｓ ５ｔｕｓｓｒｉ の生麺するアミラ
ーゼが、ア叱ロースやアミロペクチンの非趨冗株木端か
らマルトテトラオースを生成することが知られている（
＾ｒｅｈｉｖｅ ｏｆ ｊｉｌｏｃｈ＠ｍ１ｓｔｒｙ
ａｎｄ８１ｏｐｈｙａＬｃｓ ａｈ ／ ＩＩｊ巻、
ｉｏｓ 〜ｔｉ＋貴＜ｔ９７ ／ ））が、この酵素は
マルトペンタオースを生成しなφ。
一方、マルトペンタオースを生成するアミラーゼとして
は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ １ｉａｈ＠ｎｉｆｏｒｍｉｍの
生麺する耐熱性ローアミラー（がでん粉からＧｊを主成
分とする軸化物を生殖することが権告されているが、仁
の酵素のマルトテトラオースの生成舵はマルトペンタオ
ースの生成能に比べ着しく少なくｙ４４１１！度である
。また、この＃素はＧ／−Ｇ／コの各成分も同時に生成
する酵素である（ムｒｅｋｌマ・ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ 第１５５
Ｍ１２９０−２’／＃（／？７Ｊ）） 。
は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ １ｉａｈ＠ｎｉｆｏｒｍｉｍの
生麺する耐熱性ローアミラー（がでん粉からＧｊを主成
分とする軸化物を生殖することが権告されているが、仁
の酵素のマルトテトラオースの生成舵はマルトペンタオ
ースの生成能に比べ着しく少なくｙ４４１１！度である
。また、この＃素はＧ／−Ｇ／コの各成分も同時に生成
する酵素である（ムｒｅｋｌマ・ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ 第１５５
Ｍ１２９０−２’／＃（／？７Ｊ）） 。
この曲、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｌｌｉ＠のａ−ア
ミラーゼもでん粉からマルトテトラオースやマルトペン
タオースを言んｆ１ｍ々の楯の混合物を生成するがマル
トテトラ４−スやマルトペンタオースが主成’ｉｔ ｔ
なすものでないために、これら軸の製造には過していな
い。
ミラーゼもでん粉からマルトテトラオースやマルトペン
タオースを言んｆ１ｍ々の楯の混合物を生成するがマル
トテトラ４−スやマルトペンタオースが主成’ｉｔ ｔ
なすものでないために、これら軸の製造には過していな
い。
し、かるに、本発明のアミラーゼにより生産されるでん
松分隋物の輌ＩＡ成は、使用するでん粉のＤＥや帖１【
″、時の反め条件（でん粉４Ｍ、ｐＨ１酵嵩陸瓜）によ
っても典なるか、辿富、マルトテトラオースは７５〜３
５％、マルトテトラオースハｌｊへ３０％を古めており
、これら糖の合ＩＩｔは３０〜６０％に達する。＠／表
に典型的な糖化物の糖組成に不す〇 ＃ｓ ／ 慶 このように、本発明の生産する７ｔラー（はでん粉から
マルトテトラオースと！ルトペン★オースを主成分とす
る軸化物を生成するア建う−４であり、このような％敵
のある酵素は−を−で知られておらず、全く新規１ｋ１
１１素であり、本発明者は仁の酵素をア竜う−４Ｇ＃、
ｊと命名し友。以下に率ｒ＃索のれ電を記軟する。
松分隋物の輌ＩＡ成は、使用するでん粉のＤＥや帖１【
″、時の反め条件（でん粉４Ｍ、ｐＨ１酵嵩陸瓜）によ
っても典なるか、辿富、マルトテトラオースは７５〜３
５％、マルトテトラオースハｌｊへ３０％を古めており
、これら糖の合ＩＩｔは３０〜６０％に達する。＠／表
に典型的な糖化物の糖組成に不す〇 ＃ｓ ／ 慶 このように、本発明の生産する７ｔラー（はでん粉から
マルトテトラオースと！ルトペン★オースを主成分とす
る軸化物を生成するア建う−４であり、このような％敵
のある酵素は−を−で知られておらず、全く新規１ｋ１
１１素であり、本発明者は仁の酵素をア竜う−４Ｇ＃、
ｊと命名し友。以下に率ｒ＃索のれ電を記軟する。
ｔｌ１作用多でん粉、アミロース、アミロペクチン、デ
キストリンなでのグルカンをマルトテトラオースとマル
トペンタオースの単位で分解し、こわら糖を主成分とす
る軸化物を生成する。
キストリンなでのグルカンをマルトテトラオースとマル
トペンタオースの単位で分解し、こわら糖を主成分とす
る軸化物を生成する。
１２１作川作用範囲及び鰻逃作用瀉度菖約７０℃まで作
ハ＋ＬＳｉ自作用温度はｊＯ−ｊＪ″Ｃ（７％てん初濃
度、遊−作用ｐＨで３０分間反応、栴１図（ａ） ）
。
ハ＋ＬＳｉ自作用温度はｊＯ−ｊＪ″Ｃ（７％てん初濃
度、遊−作用ｐＨで３０分間反応、栴１図（ａ） ）
。
（３ｒ Ｍｆｌ ｐＨ軛囲及びＩ＆−作用ｐＨ＋ ｐＨ
勇ｊ〜／／の−ｊ四に作用し、最虐作用ｐＨは６５〜７
．５（第１図（ｂ））。
勇ｊ〜／／の−ｊ四に作用し、最虐作用ｐＨは６５〜７
．５（第１図（ｂ））。
ｆ４＋ 熱＊ ｍ性ＩＱＯｓＭトリス緩１ｂ靜（ｐＨ７
，０）の存仕上で加熱した場合、ｊＯ″ＣＩＯ分間の加
熱で７０−９０％矢活失活（第１ｆＮ（ｅ））。
，０）の存仕上で加熱した場合、ｊＯ″ＣＩＯ分間の加
熱で７０−９０％矢活失活（第１ｆＮ（ｅ））。
（Ｉｊｌ ｐ Ｈ安定性１００１Ｍ緩衝液で、室温で３
時間族ｌ１ｌｌＦ恢、残仔清性を無定した。その結果、
ｐＨｆＪ−〜ｙ）ｉｏの範囲で安定であった（第１図（
ｄ）見（６）安ｍ化！カルシウムイオンの存在により熱
安定性の増加か紹められた。
時間族ｌ１ｌｌＦ恢、残仔清性を無定した。その結果、
ｐＨｆＪ−〜ｙ）ｉｏの範囲で安定であった（第１図（
ｄ）見（６）安ｍ化！カルシウムイオンの存在により熱
安定性の増加か紹められた。
ｔ７）１１１１１１＋＋ｓ本酵素はｊ Ｘ ／ ０−ｊ
Ｍ ＯＨｇＣ１ｍ 、 Ｚｎ５ＯａＣｕ８０４ 、Ｆｅ
２Ｏ２ｓ ＣｏＣ１ｍ 、ムｇＮＯｓなどにより？ｊ−
以上失活した。
Ｍ ＯＨｇＣ１ｍ 、 Ｚｎ５ＯａＣｕ８０４ 、Ｆｅ
２Ｏ２ｓ ＣｏＣ１ｍ 、ムｇＮＯｓなどにより？ｊ−
以上失活した。
（８）精練方法及び分子量富本酵素は液体＠撤物のＰ鯉
散から、硫女分圓、ＤＥＡＥ−セ７アロース力うムクロ
マトダラフイー（ＫＣＩ（ｌ−〜０４Ｖでグラジエント
ギ出）、セファデックスＧ−２ＯＯカラムクロマトグラ
フィーと４７アテツタスＧ−７００ｊＪラムクロマトグ
ラフイーなどにより、クロマト的に皐−まで棺製される
。セファデックスＧ−ＪＯＯ２ラムクロｉトゲラフイー
により、分子−が幻参万と豹／／万の一つのアイソマー
分屹されるが、通電、分子−の／ＪＳさい成分〃・十戎
分を占めている。そして、Ｉｄｌｉ者の酵素的り伽には
太き４左は細められない。
散から、硫女分圓、ＤＥＡＥ−セ７アロース力うムクロ
マトダラフイー（ＫＣＩ（ｌ−〜０４Ｖでグラジエント
ギ出）、セファデックスＧ−２ＯＯカラムクロマトグラ
フィーと４７アテツタスＧ−７００ｊＪラムクロマトグ
ラフイーなどにより、クロマト的に皐−まで棺製される
。セファデックスＧ−ＪＯＯ２ラムクロｉトゲラフイー
により、分子−が幻参万と豹／／万の一つのアイソマー
分屹されるが、通電、分子−の／ＪＳさい成分〃・十戎
分を占めている。そして、Ｉｄｌｉ者の酵素的り伽には
太き４左は細められない。
（９）力価翻定法； ａｉＭリン＠緩−液に溶解させた
７％ｕｌ浴性でん粉液（ｐ Ｈ７，０） Ｑ ｊ−に適
量のｒ−素を加え、水で全鍵／−とし、ｔＯ℃で反応さ
せる。この条件で１時１…に／ ＋ｎ９のグルツースに
４＋１嬰１するθπ力を生成する敞累量をｌ学位とした
。
７％ｕｌ浴性でん粉液（ｐ Ｈ７，０） Ｑ ｊ−に適
量のｒ−素を加え、水で全鍵／−とし、ｔＯ℃で反応さ
せる。この条件で１時１…に／ ＋ｎ９のグルツースに
４＋１嬰１するθπ力を生成する敞累量をｌ学位とした
。
バシルス サーキュランスを挙ける。本菌株の菌・ト的
ｒ４．′ＩＭは）記の曲りであり、本菌株は微工研菌奇
第ｔ２３７＠として、工業技内院微生物工業技ＩＦ４研
宛所に奇此きれている。
ｒ４．′ＩＭは）記の曲りであり、本菌株は微工研菌奇
第ｔ２３７＠として、工業技内院微生物工業技ＩＦ４研
宛所に奇此きれている。
（１ｊ杉シ）；桿菌、大きさ、巾０７〜ａｔμ×長さ、
ＬｊＡ−ｊμ、２〜３個ｉ！７！なったものが多い。非
運動性、ダラム陰性 （２）胞子ｌ１ｌｉ１１子−細胞はふくらみ、球形〜惰
円形の胞子を形成する。
ＬｊＡ−ｊμ、２〜３個ｉ！７！なったものが多い。非
運動性、ダラム陰性 （２）胞子ｌ１ｌｉ１１子−細胞はふくらみ、球形〜惰
円形の胞子を形成する。
（８）ゼラチン菖液化する。
（４）肉汁寒天；生育良好、黄味がかった薄褐色（６）
ダルコース肉汁寒天募生育不良、ＩＩ！黄色（６）グル
コース硝酸塩寒天墨わずかに生育、半噛明（γ）肉汁募
わずかに混濁、白濁、沈鼾する。
ダルコース肉汁寒天募生育不良、ＩＩ！黄色（６）グル
コース硝酸塩寒天墨わずかに生育、半噛明（γ）肉汁募
わずかに混濁、白濁、沈鼾する。
（８）食塩肉汁１／〜１０ｓ食塩濃度でも生育、ｌ〜ｊ
％で生育促進＠ （９）ｔルナ１分解力強くないが、ｋ−１その後ペプト
ン化する、リドマス越元 ＯＱｌボテ）！生育曽通、色素の生成なし。
％で生育促進＠ （９）ｔルナ１分解力強くないが、ｋ−１その後ペプト
ン化する、リドマス越元 ＯＱｌボテ）！生育曽通、色素の生成なし。
（１１）チロシン寒天１生宵かなり良好、淡貿色、チｐ
シナーーＶ噛性 一グルコースアスパラギン庫天富殆んど生育しないＯ （吻インドール；生成しない。
シナーーＶ噛性 一グルコースアスパラギン庫天富殆んど生育しないＯ （吻インドール；生成しない。
（四アセチルメチルカルビノール；生成しない。
に）眞化水集；弱いが生成する。
ｕｎ ＆ｌ’ｌ Ｉ！！Ｉ塩の谷冗；陥性、Ｌ７）ウレ
アーゼ−生成しない。
アーゼ−生成しない。
（Ｉ６１カタラーセＩ賜性
四Ｊでん粉の加水分解Ｎ動性
四級水＋ｒ、ｖＡの杓））１１グルコース、フラクトー
ス、マンノース、ガラクトース、Ｄ−キシロース、し−
７ラビ７−ス、シュークロニス、マルトース、し−ソル
ホース、マンニトール、でん粉をＩｒ３Ｉ ＩＭ 、生
鉦するが、方スの発生なし。ラクトース、ラフィノース
、′ソルビット、イヌリンから生麺は弱いか畑んどなし
。
ス、マンノース、ガラクトース、Ｄ−キシロース、し−
７ラビ７−ス、シュークロニス、マルトース、し−ソル
ホース、マンニトール、でん粉をＩｒ３Ｉ ＩＭ 、生
鉦するが、方スの発生なし。ラクトース、ラフィノース
、′ソルビット、イヌリンから生麺は弱いか畑んどなし
。
■メチレンブルーＩｉＭ元する。
−タエンー！杓用し１に−０
一生育温度Ｓａｔ迩生育温度は約３０℃、Ｉ＆高生育温
度は１０Ａ−３７℃ に）死滅ｉｌ！度、１００℃で７０分間加熱しても死滅
しな− ■最適生育ｐ Ｈｉ ？、 １〜ｊ、５以上の１学的性
質につ−て、Ｂ＠ｒｇ＠ｙｓ Ｍａｎｎｕａｌｏｆ Ｄ
＠ｔ＊ｒｍｉｍａｔｉマ・Ｂａ＠ｔａｒｉｏｌＯｇｙの
第７版及びｍｙ版（Ｔｈ＠Ｗｌｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉ
ｌｋｌｎｓ Ｃｏｍｐａｎｙ１９！７年及び／９７参年
）を番照し、事績生物は、バシルス サーキユランス（
Ｂａ＠１ｌｌｕｓｓｉｒａｔｘｌａｎｓ） に近−の
命生物であると１０１ｍした。
度は１０Ａ−３７℃ に）死滅ｉｌ！度、１００℃で７０分間加熱しても死滅
しな− ■最適生育ｐ Ｈｉ ？、 １〜ｊ、５以上の１学的性
質につ−て、Ｂ＠ｒｇ＠ｙｓ Ｍａｎｎｕａｌｏｆ Ｄ
＠ｔ＊ｒｍｉｍａｔｉマ・Ｂａ＠ｔａｒｉｏｌＯｇｙの
第７版及びｍｙ版（Ｔｈ＠Ｗｌｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉ
ｌｋｌｎｓ Ｃｏｍｐａｎｙ１９！７年及び／９７参年
）を番照し、事績生物は、バシルス サーキユランス（
Ｂａ＠１ｌｌｕｓｓｉｒａｔｘｌａｎｓ） に近−の
命生物であると１０１ｍした。
本ｉｌＩ株はアミラーゼＧ ＊、ｔと同時にプルラナー
ゼを生麺し、崗酊素は共同して、でん粉、アミロペタチ
ンなど分肢結合（−−＋４−ダルコシド結合）のある基
質からマルトテ）フォースとマルトペンタオースを収臘
よく生ｎユするのに嵐賛な役割をしている。
ゼを生麺し、崗酊素は共同して、でん粉、アミロペタチ
ンなど分肢結合（−−＋４−ダルコシド結合）のある基
質からマルトテ）フォースとマルトペンタオースを収臘
よく生ｎユするのに嵐賛な役割をしている。
杢−〇生ルするプルラナーゼのＩｈ累的性簀は下記にか
す通りである。
す通りである。
（１）作用；プルランに存在する４−７，６−グルコシ
ド結自を分ｍ Ｌ 、マルトトリオースを生成する。
ド結自を分ｍ Ｌ 、マルトトリオースを生成する。
また、でん粉、アミロペクチン、グリコーゲン又はその
γ代生物の６− ／６−グルフシド結合を分解する。
γ代生物の６− ／６−グルフシド結合を分解する。
一拌用Ｊｉｎ曳−・、・囲及び最適作用温度；刺７０℃
までｆ１＝用し、ｔ＆自作用山度は！０−５５’ｃ（７
弾プルラン、ａｏｓＭトリス緩伽液のもとて３０分間反
応）Ｏ Ｉ副作用ｐ Ｈ範囲及びＩＩｋ逃作期ｐ Ｈｊ ｐ Ｈ
約Ｓ〜約９の１囲に作用し、最適作用ｐＨは７付近にあ
る（１％プルラン、００１Ｍトリ、ス１１６８０下で参
〇℃で反応）。
までｆ１＝用し、ｔ＆自作用山度は！０−５５’ｃ（７
弾プルラン、ａｏｓＭトリス緩伽液のもとて３０分間反
応）Ｏ Ｉ副作用ｐ Ｈ範囲及びＩＩｋ逃作期ｐ Ｈｊ ｐ Ｈ
約Ｓ〜約９の１囲に作用し、最適作用ｐＨは７付近にあ
る（１％プルラン、００１Ｍトリ、ス１１６８０下で参
〇℃で反応）。
（４）熱安定性ｉ ＱＯＩＭトリス嬢軸液（ｐ ｌ（７
，０）のもとで、各温度で１０分Ｉｌカロ鮎俊、惰存粘
性を測定した・その結果、ｊＯ℃、１０分間の加熱で約
７３−失活し、ｊｊ℃、１０分曲の加熱で約９７％失活
した。
，０）のもとで、各温度で１０分Ｉｌカロ鮎俊、惰存粘
性を測定した・その結果、ｊＯ℃、１０分間の加熱で約
７３−失活し、ｊｊ℃、１０分曲の加熱で約９７％失活
した。
（５１ｐ Ｈ置傘性；ｐＨｆＪ６〜約９で安定（Ｑ／Ｍ
６ＴＦ敵ａｍ液にはリンー縫徴液のｔで、室温（２５℃
）で放寵債、残存活性をＩＩ＆定）。
６ＴＦ敵ａｍ液にはリンー縫徴液のｔで、室温（２５℃
）で放寵債、残存活性をＩＩ＆定）。
＋６）ｌｌ１１［ＱＩ不＃票はＣｕ” 、Ｚｔｓ” 、
Ａｇ◆、Ｈｇ”、Ｆ＠”などにより強く１１１１ｗされ
る。
Ａｇ◆、Ｈｇ”、Ｆ＠”などにより強く１１１１ｗされ
る。
（７）を足化蓚カルシウムイオンは本＃票の熱安定性を
増加する。
増加する。
（８）ｈＪ製方法；本酵素はｊ＆ｍＷ波から、艷安分−
１ＤＥＡＥ−七７アーースカラムク關マトダラフイー（
ＫＣＩＱコ〜ｄｊＭでダラシエンド溶損することにより
、アミラーゼＧダ、ｊと分離できその飯、セファデック
スＧ−ＪＯＱカラムクロマトグラフィーによりクロマト
的に均一まで積鯛できる。
１ＤＥＡＥ−七７アーースカラムク關マトダラフイー（
ＫＣＩＱコ〜ｄｊＭでダラシエンド溶損することにより
、アミラーゼＧダ、ｊと分離できその飯、セファデック
スＧ−ＪＯＱカラムクロマトグラフィーによりクロマト
的に均一まで積鯛できる。
（９）分子ｍｒ七７７ｆ７？スＧ−２００’ｆｋｆ’ｌ
ａ法による分子−は約７カであった。
ａ法による分子−は約７カであった。
１、＋１．力１曲Ｉ］１１１庫沫； ＯＨＭリンル緩価
液に溶解させた１％プルラン液（ｐＨｔ、ｏ）ｏ、５ｖ
ｎｔに４置の酵￥を加え、水で全ｆｉ／−とし、１７０
℃で反応させる。この条件で１時間にｌ〜のマルトトリ
オースに相当する蕗冗力を生成する酵素量をｌ単１ｉＬ
とした。
液に溶解させた１％プルラン液（ｐＨｔ、ｏ）ｏ、５ｖ
ｎｔに４置の酵￥を加え、水で全ｆｉ／−とし、１７０
℃で反応させる。この条件で１時間にｌ〜のマルトトリ
オースに相当する蕗冗力を生成する酵素量をｌ単１ｉＬ
とした。
＋）６明による酔嵩生産のための培葺は、ｍ常、用いら
れる固体培地又は油体培地が使用蕩れ、液朴蝙査のため
の培地の窒素源としては、ペプトン、肉エキス、酵母エ
キス、カゼイン、コーン・ステイープ・リカーなどが使
用され、炭素源としてはでん粉、デキストリン、マルト
ース、グルコースシュークロースなどが使用される。そ
してこれに補足する栄Ｉｉ！源として、無機窒素源、リ
ン酸塩、マグネシウム塩、金゛鵬塩を含む培地か使用さ
れる。
れる固体培地又は油体培地が使用蕩れ、液朴蝙査のため
の培地の窒素源としては、ペプトン、肉エキス、酵母エ
キス、カゼイン、コーン・ステイープ・リカーなどが使
用され、炭素源としてはでん粉、デキストリン、マルト
ース、グルコースシュークロースなどが使用される。そ
してこれに補足する栄Ｉｉ！源として、無機窒素源、リ
ン酸塩、マグネシウム塩、金゛鵬塩を含む培地か使用さ
れる。
培養はｐ Ｈ６” ？、涼ｉコ３〜ｊｊ”ｃで２〜３日
間好気的に行なわれる。アセラーゼＧダ、ｊ及びブ有機
溶剤又はル折による沈＃回収するか、ｍｌ記（精製方法
に従−Ｗ！葉を精製する。
間好気的に行なわれる。アセラーゼＧダ、ｊ及びブ有機
溶剤又はル折による沈＃回収するか、ｍｌ記（精製方法
に従−Ｗ！葉を精製する。
沈に＃ｆ索によるでん粉の糖化条件につ−て記載する。
ア虎ロース、アを四ペクチンやでん粉は糖１じに際して
液化される。液化は拳又は−一アミラー（を用いて、常
法に１１１１１＆行なわれるが、でん粉の液比ルはマル
トテトラオースとマルトペンタオースのＬ−に者しく１
曽するので、これらオリゴ糖の生＾“、のための−まし
いでん粉の妙化度ＤＥ（ｄ＠ｘｔｒｏｕｓ ｅｑｕｉｖ
ａｌｅｎｔ の略で、固形分中の遠］Ｕ、釦繊をグル
コースとして辰わした自分事）は／３以−トであり、こ
のような液化でん紛を便用した場Ｃ１７／Ｉ／トチトラ
オースとマルトペンタオースの収凧は糺−ＩＩｏ〜６０
％になる。
液化される。液化は拳又は−一アミラー（を用いて、常
法に１１１１１＆行なわれるが、でん粉の液比ルはマル
トテトラオースとマルトペンタオースのＬ−に者しく１
曽するので、これらオリゴ糖の生＾“、のための−まし
いでん粉の妙化度ＤＥ（ｄ＠ｘｔｒｏｕｓ ｅｑｕｉｖ
ａｌｅｎｔ の略で、固形分中の遠］Ｕ、釦繊をグル
コースとして辰わした自分事）は／３以−トであり、こ
のような液化でん紛を便用した場Ｃ１７／Ｉ／トチトラ
オースとマルトペンタオースの収凧は糺−ＩＩｏ〜６０
％になる。
ノ、＋１１メは通常ｊ〜１０％で行なわれる。糖化Ｊ：
ｆのｐ■「は、特にマルトペンタオースの収斂に影−す
る。す々わち、糖化時のｐＨが約７以下では、−ｍ生成
したマルトペンタオースがマルトースとマルトトリオー
スに分解されやすい。そしてこの分ｈｔ ＩＸ応を即納
するためには、反応時のｐＨは約７．０）上室ましくは
約１以上に維持することが望ましり・。反応温度は通常
、参〇〜６０℃で行なわれる。
ｆのｐ■「は、特にマルトペンタオースの収斂に影−す
る。す々わち、糖化時のｐＨが約７以下では、−ｍ生成
したマルトペンタオースがマルトースとマルトトリオー
スに分解されやすい。そしてこの分ｈｔ ＩＸ応を即納
するためには、反応時のｐＨは約７．０）上室ましくは
約１以上に維持することが望ましり・。反応温度は通常
、参〇〜６０℃で行なわれる。
杢＃瓢はカルシウムイオンにより鮎を定性が着しく項一
するので、糖化反応に際して、例えは環化ｔＪｋシＷ）
ムをｓ Ｘ ／ ０−’ Ｍ ＮＪ Ｘ ／ ｏ−”
Ｍ＆［添加する。
するので、糖化反応に際して、例えは環化ｔＪｋシＷ）
ムをｓ Ｘ ／ ０−’ Ｍ ＮＪ Ｘ ／ ｏ−”
Ｍ＆［添加する。
次にｓｋｋＬＭ栖により本妬明ｏ１１娠を鋺明する。
実施例１
λ）の玉周フラスコに、ポリペ１トン８（大兄−１和光
純楽］、殖抹式金社販売）ダ％、ＫｚＨＰＯｎＱ Ｊ
％ 、Ｍｇ８０４・７１ｈＯＱ ／ ％、ＥｌｊＩＩ４
性でん粉／％をし椙し、３０’Ｃで一日曲振盪場蚕した
０桁−執廊心分絣機で除菌し、得られた−１：６ｆ故に
つ−て生麺されたアミラー−ｋＦＧｌｌ、ｊを１定した
ｍ氷、培地１当りｔｉ４位であった。
純楽］、殖抹式金社販売）ダ％、ＫｚＨＰＯｎＱ Ｊ
％ 、Ｍｇ８０４・７１ｈＯＱ ／ ％、ＥｌｊＩＩ４
性でん粉／％をし椙し、３０’Ｃで一日曲振盪場蚕した
０桁−執廊心分絣機で除菌し、得られた−１：６ｆ故に
つ−て生麺されたアミラー−ｋＦＧｌｌ、ｊを１定した
ｍ氷、培地１当りｔｉ４位であった。
４−相量液中に４１一時にプルラナーゼが生産されてい
るため、ｊ＆餐１遥から、−安９０％で沈澱する区分を
集め、ａｌＩＩＩＩ水で遇析衾、ＱＪＭＫＣＩ を含む
Ｑ ＯＪ ３ Ｍ ） リＸｌ１ｌｌｋＩｔ＆テ駿１１
化ＬりＤＥＡＥ−七７アロース力ラムに数層させ、ＱＪ
ＭＫＣＩからＱｒＭ ＫＣＩ ｔでグラジェントに溶
出することによりプルラナーゼを含まないア電う−七区
Ｉｆを得た（６７亭位１０Ｄｔｓｏ諷μ）。
るため、ｊ＆餐１遥から、−安９０％で沈澱する区分を
集め、ａｌＩＩＩＩ水で遇析衾、ＱＪＭＫＣＩ を含む
Ｑ ＯＪ ３ Ｍ ） リＸｌ１ｌｌｋＩｔ＆テ駿１１
化ＬりＤＥＡＥ−七７アロース力ラムに数層させ、ＱＪ
ＭＫＣＩからＱｒＭ ＫＣＩ ｔでグラジェントに溶
出することによりプルラナーゼを含まないア電う−七区
Ｉｆを得た（６７亭位１０Ｄｔｓｏ諷μ）。
ｏｚｒｏｚの液化でん粉／ｑに、該酵素液２０嚇位と塩
化カルシウムをｊｔＸ１０１Ｍｇ鰯加し、全ｋｔｌＯ−
にし、５０℃でλダ時間反応させた。
化カルシウムをｊｔＸ１０１Ｍｇ鰯加し、全ｋｔｌＯ−
にし、５０℃でλダ時間反応させた。
そして、侮られたでん粉糖化物中の糖組成を、高ｍｈ体
クロマトグラフ（カラムＩ昭和電工■ＮＨｐａｃｋ Ｊ
−ダ／／、浴出液嘉ア七トニトリルＩＪ番水３ｓ％）で
分離定量を行った結果、ダルコ−ス仏ｊ％、！ルトース
ｌａ７≦、！ルトトリオース／ ／、コ弧、！シトテト
ラオー１２３４％、マルトテトラオースコＩ ％ 、ｖ
ルトヘキザオース１０からなる糖組成であった。
クロマトグラフ（カラムＩ昭和電工■ＮＨｐａｃｋ Ｊ
−ダ／／、浴出液嘉ア七トニトリルＩＪ番水３ｓ％）で
分離定量を行った結果、ダルコ−ス仏ｊ％、！ルトース
ｌａ７≦、！ルトトリオース／ ／、コ弧、！シトテト
ラオー１２３４％、マルトテトラオースコＩ ％ 、ｖ
ルトヘキザオース１０からなる糖組成であった。
実施例２
メチドでん粉をバシルス属の一一ア考う−（（大和化成
四極クライスターゼＫＭ）で液化して優られたＤＥ
ＪＬＪｌ、仏２１．１１／％１０１．／２４と２７２
の各液化でん粉液（乾物量として１００■）に、塩化カ
ルシウムＺｘ１０’ＭＭと＃集コ単位を添加し全ｆｉ／
−として、５０℃で２参時間反応させた。反応後、得ら
れた砧化物につ−て糖組成を定置した結果、第２図に示
す通りであった。
四極クライスターゼＫＭ）で液化して優られたＤＥ
ＪＬＪｌ、仏２１．１１／％１０１．／２４と２７２
の各液化でん粉液（乾物量として１００■）に、塩化カ
ルシウムＺｘ１０’ＭＭと＃集コ単位を添加し全ｆｉ／
−として、５０℃で２参時間反応させた。反応後、得ら
れた砧化物につ−て糖組成を定置した結果、第２図に示
す通りであった。
図から明らかなように、マルトテトラオースとマルトペ
ンタオースの生産のためには、ＤＥＩｉ３ｔｓ以下が適
当であることがわかった。
ンタオースの生産のためには、ＤＥＩｉ３ｔｓ以下が適
当であることがわかった。
実り汐１ｊ３
実施沙！Ｉｌと同様にして自製したア之う−ゼＧ眠ｊと
プルラナーゼ、それぞれ２０堆位と３０４位及び層化カ
ルシウムをＩＸ／（ｆ”Ｍ＊ｋＤＥ仏３の液化でん粉液
（固形物として／９）に添加し、ｐＨを７５に＃４姫し
、全に１０帷としてｊ（１１℃でλダ時間反ト〔、・さ
せた。反応後、得られた糖化物の糖組成を分析したｋｉ
米は１８１表に示す匈りであった。
プルラナーゼ、それぞれ２０堆位と３０４位及び層化カ
ルシウムをＩＸ／（ｆ”Ｍ＊ｋＤＥ仏３の液化でん粉液
（固形物として／９）に添加し、ｐＨを７５に＃４姫し
、全に１０帷としてｊ（１１℃でλダ時間反ト〔、・さ
せた。反応後、得られた糖化物の糖組成を分析したｋｉ
米は１８１表に示す匈りであった。
第 ７ 表
表から明らかなように、プルラナーゼの存在下で反応を
行うことにより、マルトテトラオースとマルトペンタオ
ースの含ｋＯ＆−軸化物が侮られ先。
行うことにより、マルトテトラオースとマルトペンタオ
ースの含ｋＯ＆−軸化物が侮られ先。
１７図（ａ）、（ｂ）、（ｃ）と（ｄ）はそれぞれアミ
ラー（Ｇ参、ｊによるでん粉分解反応ＯＩ＆一温度、最
適ｐＨ熱安定性とｐＨ″＆定性を示して−る。 第２図は各種０ＤＩＯ＊化ポテトでん粉をアセラー４Ｇ
Ｏ！ｊで糖化し先陣の糖化物中のＧ／（グルコース）、
ＧＪ（マルトース）、ＧＪ（マルトＦリオース）、ＧＪ
（マルトテトラオース）とＧｊ（マルトペンタオース）
の含ｆｌｉｔ示して−る。 稗Ｉ ５３＆／ｌ（”ｃ） ｖ’ＡうＩ
Ｌ＆（”Ｃ）
ｙシ１臂２ 田 Ｅ ＋Ｇ３ 手続補正書 （方式） ％式％ １、 小骨の表示 昭和 ５７年特許願第 ３７５
３６ 号２、 発明の名称 アミラーゼＧ４，５によるオリゴ糖の製造方法氏 名
（１１４） 工業技術院長 石 坂 鍼 −
（発送１］ 昭和５７年６月２９日）６、 補正によ
り増加する発明の詳細な説明細１第１頁の発明の名称［
アミラーゼＧ４５によるオリゴ糖の製造方法１を「アミ
ラーゼＧ４，５によるオリゴ糖の製造方法」に訂正しま
す。
ラー（Ｇ参、ｊによるでん粉分解反応ＯＩ＆一温度、最
適ｐＨ熱安定性とｐＨ″＆定性を示して−る。 第２図は各種０ＤＩＯ＊化ポテトでん粉をアセラー４Ｇ
Ｏ！ｊで糖化し先陣の糖化物中のＧ／（グルコース）、
ＧＪ（マルトース）、ＧＪ（マルトＦリオース）、ＧＪ
（マルトテトラオース）とＧｊ（マルトペンタオース）
の含ｆｌｉｔ示して−る。 稗Ｉ ５３＆／ｌ（”ｃ） ｖ’ＡうＩ
Ｌ＆（”Ｃ）
ｙシ１臂２ 田 Ｅ ＋Ｇ３ 手続補正書 （方式） ％式％ １、 小骨の表示 昭和 ５７年特許願第 ３７５
３６ 号２、 発明の名称 アミラーゼＧ４，５によるオリゴ糖の製造方法氏 名
（１１４） 工業技術院長 石 坂 鍼 −
（発送１］ 昭和５７年６月２９日）６、 補正によ
り増加する発明の詳細な説明細１第１頁の発明の名称［
アミラーゼＧ４５によるオリゴ糖の製造方法１を「アミ
ラーゼＧ４，５によるオリゴ糖の製造方法」に訂正しま
す。
Claims (1)
- でん粉又はその部分分解物からマルトテトラオースと！
ルシペンタオー”スを生成するパシルス属の７セラーゼ
Ｇ ｌ、ｊを、でん粉、ア畿ロース、了叱ロペタチン又
はその部分分解物に作用させることを特徴上するパシル
ス調ア々ツー４Ｇ亭、ｊによるマルトテトラオースとマ
ルトペンタオース含有軸液のｉｌｌｌｌ法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3753682A JPS594119B2 (ja) | 1982-03-09 | 1982-03-09 | アミラ−ゼｇ４，５によるオリゴ糖の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3753682A JPS594119B2 (ja) | 1982-03-09 | 1982-03-09 | アミラ−ゼｇ４，５によるオリゴ糖の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58170492A true JPS58170492A (ja) | 1983-10-07 |
| JPS594119B2 JPS594119B2 (ja) | 1984-01-27 |
Family
ID=12500240
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3753682A Expired JPS594119B2 (ja) | 1982-03-09 | 1982-03-09 | アミラ−ゼｇ４，５によるオリゴ糖の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS594119B2 (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61285998A (ja) * | 1985-06-11 | 1986-12-16 | Shokuhin Sangyo Baioriakutaa Syst Gijutsu Kenkyu Kumiai | マルトオリゴ糖の製造方法 |
| JPS6225978A (ja) * | 1985-06-29 | 1987-02-03 | Agency Of Ind Science & Technol | アミラ−ゼｇ４の製造法 |
| EP2288714A1 (en) | 2008-05-09 | 2011-03-02 | Cargill, Incorporated | Low-viscosity reduced-sugar syrup, methods of making, and applications thereof |
| US20150342229A1 (en) * | 2008-05-09 | 2015-12-03 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
| US9540668B2 (en) | 2012-01-31 | 2017-01-10 | Tate & Lyle Ingredients Americas Llc | Reduced sugar syrups and methods of making reduced sugar syrups |
| US11291222B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-04-05 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
-
1982
- 1982-03-09 JP JP3753682A patent/JPS594119B2/ja not_active Expired
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61285998A (ja) * | 1985-06-11 | 1986-12-16 | Shokuhin Sangyo Baioriakutaa Syst Gijutsu Kenkyu Kumiai | マルトオリゴ糖の製造方法 |
| JPS6225978A (ja) * | 1985-06-29 | 1987-02-03 | Agency Of Ind Science & Technol | アミラ−ゼｇ４の製造法 |
| JPH0131879B2 (ja) * | 1985-06-29 | 1989-06-28 | Kogyo Gijutsuin | |
| EP2288714A1 (en) | 2008-05-09 | 2011-03-02 | Cargill, Incorporated | Low-viscosity reduced-sugar syrup, methods of making, and applications thereof |
| US20130210764A1 (en) * | 2008-05-09 | 2013-08-15 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
| EP2288714A4 (en) * | 2008-05-09 | 2014-12-03 | Cargill Inc | REDUCED SUGAR LEVEL VISCOSITY SYRUP, METHODS OF MAKING SAME, AND APPLICATIONS THEREOF |
| US20150342229A1 (en) * | 2008-05-09 | 2015-12-03 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
| US9730464B2 (en) | 2008-05-09 | 2017-08-15 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
| US9540668B2 (en) | 2012-01-31 | 2017-01-10 | Tate & Lyle Ingredients Americas Llc | Reduced sugar syrups and methods of making reduced sugar syrups |
| US11291222B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-04-05 | Cargill, Incorporated | Carbohydrate compositions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS594119B2 (ja) | 1984-01-27 |
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