JPH01153693A - 大豆オリゴ糖の改質法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は、α−ガラクトシダーゼの転移作用を利用して
大豆オリゴ糠中のスタキオースのα−ガラクトシル基を
同じく大豆オリゴ糠中のシュークロースに転移結合させ
、腸内有用細菌であるビフィズス菌の増殖因子として有
効であるラフィノース含量を増加させると同時に、肥満
、糖尿病、虫歯の発生などの原因物質であるシュークロ
ースの含量を減らす方法を提供するものである。

［従来の技術］ 近年、ラフィノース、スタキオースなどのオリゴ糖が腸
内有用細菌であるビフィズス菌の増殖因子として有効で
゛あることが認められ、これらオリゴ糖を甘味料として
用いることが検討されている。

ラフィノース、スタキオースの供給源としては、大豆オ
リゴ糖またはビート中のラフィノースが知られている。

大豆オリゴ糖は、主としてラフィノース、スタキオース
、シュークロースから成り、その組成比は、７　：　２
３　：　４４である。

［発明が解決しようとする問題点コ しかしながら、上記の組成比より分かるように大豆オリ
ゴ糠中には、ビフィズス菌の増殖因子であるラフィノー
ス、スタキオース以外に肥満、糖尿病、虫歯の発生など
の原因物質であるシュークロースが人足に含まれている
。

［発明の目的コ したがって、本発明の目的は大豆オリゴ糖の効果をさら
に高めるなめに、このシュークロース含景を減らし、ラ
フィノース、スタキオースなどの有効成分の量を高める
ことである。

［問題点を解決するための手段］ そこで、本発明者らは、酵素を利用して、大豆オリゴ糠
中のラフィノース含量を高めると共にシュークロース含
量を減らすことを目的に鋭意研究しな。その結果、転移
活性の強いα−ガラクトシダーゼを大豆オリゴ糖に作用
させることによりスターキオースのガラクトシル基がシ
ュークロースに転移し、ラフィノース含量が増加すると
共にシュークロース含量が減少することを見いだし本発
明を完成するに至った。

以下に、本発明について詳述する。

大豆オリゴ糖の調製は従来の方法でよく、原料としては
大豆種子、脱脂大豆、濃縮大豆蛋白、分離大豆蛋白、そ
れら大豆蛋白ホエー等があるが、これらのみに限定され
るものではない。

本発明で用いるα−ガラクトシダーゼは、スタキオース
とシュークロースを含む溶液に作用してスタキオースの
α−ガラクトシル基をシュークロースのグルコースのＣ
６位に転移してラフィノースを生成しうる酵素であれば
良く、酵素の起源、種類に限定されない。例えば、ピク
ノボラス・シナパリス（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ　ｃｉｎ
ｎａｂａｒｉｎｕｓ）、ストレプトコッカス“ボビス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｂｏｖｉｓ）、デプロコ
ツカス・ニューモニア（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｎ
ｅｕｍｏｎｉａｅ）、モルティエレラ・ビナセ（Ｍｏｒ
ｔｉｅｌｌｅｌａ　ｖｉｎａｃｅａ）などの微生物やビ
シア・サテイバ（Ｖｉｃｉａｓａｔｉｖａ）などの植物
が生産するα−ガラクトシダーゼが使用できる９これら
の微生物からα−ガラクトシダーゼを生産する方法は、
通常液体培養もしくは固体培養が用いられる。液体培養
の場合はその培養上澄液を、固体培養の場合はその抽出
液を、その才ま酵素剤として利用できる。また、場合に
よっては、菌体をそのまま酵素剤として利用することも
可能である。また、必要に応じて、既知の方法で精製し
た酵素も使用できる。α−ガラクトシダーゼあるいは菌
体を固定化してカラムに詰めなり膜に固定化して、連続
式で反応に利用することも、バッチ式で繰り返し反応に
利用することも自由である。α−ガラクトシダーゼの作
用条件は、この種の酵素の糖転移反応を利用する通常の
条件を採用することができる９すなわち、α−ガラクト
シダーゼは本来加水分解酵素であるので効率よく糖転移
反応を行わせるためには基質濃度を高くする必要がある
。一般には５〜７０重量％でよく、５０重１％前後が特
に好ましい。ｐＨは、使用する酵素の種類によって異な
るが一般に３．０〜１０．０、好ましくは５．０〜８．
０である。作用温度は５〜８０℃でよいが好ま□しくは
３０〜７０℃である。

反応時間は、酵素の使用景によって異なるが、大豆オリ
ゴ糠中のスターキオースの分解が７０〜８０％程度にな
るまで反応を行うことが望ましく、通常２０〜４０時間
である。しかしながら本発明は、以上の条件あるいは反
応形態のみに限定されない。

［発明の効果］ 本発明によれば、大豆オリゴ糖にα−ガラクトシダーゼ
を作用させることにより、スタキオースからα−ガラク
トシル基を同じく大豆オリゴ糠中のシュークロースに転
移結合させ、シュークロースを有用なラフィノース、ス
タキオースに変換すると共に、シュークロース含量を減
少させることができ、これらの効果により大豆オリゴ糖
をさらに有用な糖質に改質することができる。

［実施例］ α−゛ラクトシダーゼの゛パ１２ １０ｍＭ　ＰＮＰ−ａ−ガラクトシド　０．２ｍｌと１
００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５，５）　０．２ｍｌにα−
ガラクトシダーゼ溶液０．０５ｍ１を加えて４０℃１０
分間反応させる。

反応後、０．２Ｍ　ＮａｚＣＯ３ｏ、　５ｍｌを加えて
反応を止め、遊離してくるＰＮＰ景を分光光度計にて４
００ｎｍの吸光度を計ることにより測定した。酵素活性
−単位は、この条件下で１分間に１μｍｏｌｅのＰＮＰ
を生成する酵素景と定義した。

ス０．５％、（ＮＨ４）２３０４１％、ＫＨ２ＰＯ４０
，５％ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，０５％からなる培地５
リツトル（ｐＨ５，０）を殺菌後、ピクノボラス・シナ
パリス（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ　ｃｉｎｎａｂａｒｉｎ
ｕｓ）ＩＦｏ　６１３９株を植菌し、３０℃１０日間振
どう培養しな。遠心分離によって得な上澄液に０．７５
飽和になるように硫安を加え、−夜装置しな。

沈澱物を集め２００ｍ１のｐＨ５，０の酢酸緩衝液に溶
解し、同緩衝液に対して透析した標品をα−ガラクトシ
ダーゼの粗酵素標品としな。

■ラクトース１％、グルコース１％、コーンステイープ
リカー１％、硫安１％、ＣａＣＯ３１％、ＫＨ２ＰＯ４
０，３％、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，２％からなる培地
１５リツトルを殺菌後、モルティエレラ・ビナセ（Ｍｏ
ｒｔｉｅｌ　１ｅｌａ　ｖｉｎａｃｅａ）の胞子を植菌
し、３０℃で６５〜７０時間ジャーファメンターにより
培養しな。遠心分離により得た菌糸を十分に水洗後、０
．２Ｍグリシン−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ８，７）に懸濁
し、５０℃で２４時間処理して自己消化させた。遠心分
離により得な菌体内抽出液に０，９飽和になるように硫
安を加えた。

この沈澱画分を集めて、凍結乾燥したものを粗酵素標品
としな。

実施例１ 大豆オリゴ糖と同じ組成になるようスタキオース１．１
５ｇ、ラフィノース３５０ｍｇ　、シュークロース２．
２ｇを２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐ）（５，０）　１０ｍ１
に溶解させた。この溶液に、上記酵素標品の調製■で調
製しなα−ガラクトシダーゼ溶液０．５ｍｌ　　（２単
位／ｍｌ）を加え、７０℃２４時間反応させた。反応液
を１００℃で１０分間加熱し酵素を失活させた後、反応
液５μｌを用いて高速液体クロマトグラフィーにより反
応生成物を分析しな。その結果、スタキオース、ラフィ
ノース、シュークロースの組成比は、”Ｉｌｌ　：　９
　：　６０　（重量％）から、約８　：　４３　：　４
９になった。

実施例２ 脱脂大豆粉から用材らの方法（栄養と食糧（１９６６年
）第１９巻　２６８ページ）に準じて８０％濃度のエタ
ノール水溶液で熱抽出を行い大豆オリボ糖画分を得た。

この大豆オリゴ糖３ｇを２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５，
０）　１０ｍ１に溶解させた。この溶液に、上記酵素標
品の調製■で調製しなα−ガラクトシダーゼを１単位加
え、７０℃２４時間反応させた。反応液を１００℃で１
０分間加熱し酵素を失活させた後、反応液５μｍを用い
て高速液体クロマトグラフィーにより反応生成物を分析
した。その結果、スタキオース、ラフィノース、シュー
クロースの組成の百分率は、それぞれ３８：９：５Ｂか
ら、約１２：４５：４３になり、大豆オリゴ糖を改質す
ることができた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 大豆より得られるオリゴ糖（大豆オリゴ糖）にα−ガラ
   クトシダーゼを作用させることを特徴とする大豆オリゴ
   糖の改質法