JPS5816675A - 食用蛋白質生産菌 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、土壌サンプルから分離されたフーザリウムー
グ２きニアリウム・シュノｚ−ば（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　
ｇｒａｍｌｎｅａｒｕｍ　８ｃｈｗａｂｅ　）の新菌株
に係るものでＦＬ該斬新菌株食用蛋白質の製造に有用で
ある。

本出願人の出願に係る英国特許出願第５３３１２／６６
（通し脅号１２１０３５６）の発明は、不完全菌類に属
する微生物の無毒性菌株である有機体を、好気性条件下
で、必須な生長促進栄養物質 −この栄養物質中の炭素は同化可能な炭水化物の形態で
増殖時に限界基質を構成するものである□ を含有する培養基中において培養して増殖させ、次いで
、同化可能な炭水化物を消費した培地から、食用蛋白質
含有物質を構成する増殖有機体を分離することから成る
食用蛋白質含有物質を製造する方法に関するものである
。

本発明の目的線、又、ネズミ分析（ｒａｔ　ａｓｓａｙ
ｓ）Ｋ於いて、α−ア電ノ態窒素に基づいて、約７０と
いう高い蛋白質正味利用率（ＮＰＵ　）を有する菌の菌
糸体を提供することでもある。

本発明によれば、フーザリウム・グツｌｘアリウムの無
毒性菌株又はその変異株もしくはその突然変異株を、好
気性条件下で、生長促進物質中の炭素が、同化可能な炭
水化物の形態で増殖時に限界基質を構成するような必須
の生長促進栄養物質を含有する培養基中に於いて、培養
して増殖させ、次いで、食用蛋白質含有物質から成る、
増殖された有機体を分離することから成る、食用蛋白質
含有物質を製造する方法が提供される。

食用蛋白質含有物質から成る分離された有１機体は人間
又は動物が消費する食料に混入することが可能である。

培養段階に於いて用いられる基質は、植物源のもの例え
ば、澱粉、澱粉含有物質又はそれらの加水分解生成物ｊ
蔗糖・蔗糖含有物質又は加水分解した蔗糖即ち転化糖も
しくはその混合物である。

従って、該基質は加水分解された馬鈴薯・糖蜜萄葡糖・
加水分解された豆澱粉・又はカサバ（ｃａｓｓａマａ）
を包含している。

又一方、乳漿（ホエー）より成る動愉源の基質も用いら
れる。

好ましい無毒性菌株は、Ｉ　、Ｍ、Ｉ　、番号１４５４
２５（ＦＩＣＲＭ−Ｐ　Ｎｏ、　３７２１　）という番
号を以って国立微生物研究所に寄託されている、フーザ
リウム・グラ電エアリクム・シュパーハ（Ｆｕｓａｒｉ
薗ｇｙｍｌｎ報闇Ｓｅｈｗａｂ・）と称する本発明者の
菌株及びその変異株ならびに突然変異株である。

次のような新規な変異株も又用いられるニーＩ、Ｍ、１
．１５４２０９という番号を以って国立微生物研究所に
寄託されているＩ−７゜Ｉ、Ｍ、Ｉ、１！５４２１１　
とい５１号ｔ−以’ｐテｌＩ立黴生物研究所に寄託され
ているＩ−８゜１、Ｍ、Ｉ、１５４２１２という番号を
以って国立微生物研究所に寄託されているＩ−９゜１、
Ｍ、１．１５４２１Ｂという番号を以って国立微生物研
究所に寄託されている■−１５゜１、Ｍ、Ｉ、１５４２
１０という番号を以って国立微生物研究所に究託されて
いるｌ−１６゜フーザリウム・グツＺニアリウム・シエ
パーイと称する本発明者の新しい菌株１．Ｍ、Ｉ、　１
４５４２５（１ボＭ−Ｐ　Ｎｏ、　３７２１　）紘麦に
対して非病原性である。該菌株Ｉ、Ｍ、Ｉ、　１４５４
２５（ＦＥＲＭ−Ｐ　Ｎｏ。

３７２１　）は、英国ハイワイコーム（Ｈｌｇｈ　苛ａ
−＊）にある本出願人の中央研究所から約６Ｋｍ離れた
地点、すなわち、英国マーロー、マーローボトム（Ｍａ
ｒｌｃｎｒ　Ｂｏｔｔｏｍ　、　ｍｒｌｏｗ、　Ｔｈｇ
ｌａｎｄ　）で採取、された土壌サンプルから、常套手
段を用いて、分離、精製及びスクリーニングして得られ
たものである。

皺薗株は次のような形態学上の性質を有する：馬鈴薯２
５０ｇを洗って細 かく切ｐ、圧力蕎に入れて る。

次いで、その煮出し汁を二 層の毫スリン（圓５ｌｉｎ）を 通して絞り出す。

２＊ｏ’ｌｌｌ萄糖と２嘔の寒天 を濃密な濾過液に加え、と の培養基をオートクレーブ に入れ、分散させる。

生長条件　　２５℃で数週間　　２５℃で数週間生長速
度　　３日間で４．Ｑｍ　　　Ｓ日間で３．０ｆｉ生長
の特徴：白色気菌糸を有すゐ唱状の拡が妙のあるコロニ
ー。

培地Ｐ８Ａにおける基体（８ｕｂｓｔｒａｔｕｍ　）深
紅色乃至黄色の斑点を有する灰色がかったノリ色。

培地ＯＤＡでは幾らか青味がかった傾向になる。

特に、老化ＫＩＩして、しばしば、深紅色色素を生成す
る。

１乃至２週間後に気菌糸は褐色になり崩壊する傾向があ
る。

コロニーは分生子じよ（（ｓｐｏｒｏｄｏｃｈｉｍ）が
形成されるにつれて、ヤ＼ねばねばした状態となシ、色
は上記培地２８人上でピンク乃至褐色となシ、培地ＣＤ
Ａ上では鮭肉色となる。

分泌物は形成されず、色素形成は菌糸体の色に従う傾向
がある。

分生子：ンク買分生千紘この有機体によっては生成しな
い。マクロ分生子は単−側生梗子又は短かい梗子を有す
る多様に枝別れした分生胞子柄から生成する。比較的古
い培養体においては、分生胞子柄は集合して分生子褥を
形成し、％に培地ＣＤＡ上に著しく形成する。分生子は
泡状の紡錘状の背腹面から−った紡錘状の背腹面に変化
し、隔膜は３から５に変化し、比較的若い培養体では５
が普通である。

胞子の大きさは２５−５０μＸ２．５ａ　−４，０μに
変化する。

柄足細胞はしばしば叉尊状であ）、特に５の隔膜の長さ
にある。膨張した細胞が菌糸体中に生じ、しばしに、厚
膜胞子が介在的に単蝕もしくは鎖状をなして生ずる。

フーザリウム・ダッンニアリクム・シ具バーイ１、Ｍ、
Ｉ、１４１４２Ｂ（ＦＥＲＭ−Ｐ　Ｎｏ、３７２１）の
変異株（又は分離株＞Ｃｈｉｌｌ製例及びその形態学上
の特徴を次に述べる。

７−ザリクム・グ２ンエアリウム・シェメー４１４５４
２５（ＦＩＣＲＭ−Ｐ　　Ｎｏ、３７２１　）を、時間
ｍ　ｊ）　０．１乃至０．１５の稀釈適度で限界炭素を
有する１萄糖／塩類の培地上連続的培養条件下で、３０
’Ｃにおいて生長させ九培養タンクからのゾσス（ｂｒ
ｏｔｈ）を接種し九麦芽エキス寒天プレートから７−ザ
リクＡ１１ダＬｙンエアリクム・シェパーイＩ、Ｍ、Ｉ
、１５４２０Ｇ乃至１５４２１３ｔｌｌ択する。

培曹Ｉンクは凡そ１００時間の間隔をおいてサンプリン
グして、変異株の集団を評価し、！、Ｍ、　Ｉ　。

１５４２０１１乃至１５４２１３０分離株を、１，１０
０時間時のサンプルから調製したプレーＦよ〉採取する
。これらの分離株は培養の間に生成される形態学上の変
異株の大部分のタイプを代表↓ている。

この例において概説した如１条件下で、変異株杜８００
時間の経過後プレート上に現われ始める。

これらの変異株はこの時間の経過後頻繁に生成する。集
団の状態は各タイプのノ々−セントに関してゆつく）と
変化すΣ。培養タンクの条件は下記の過多である： （以ｌ・余白） 培　　養　　基　　　　　　　ｙ 溶液１ 隼　　　萄　　　糖　　　　　　　３．０硯酸アンモニ
ウム　　　　　０．２５ 燐酸二水素カリウム　　　　　　０．３０硫酸！グネシ
ウム　　　　　０．０２５泡止め剤、−ル〜ビレ４ハノ
コール　０．０１２０００　；１５ｐ、　ｍ、　ｔ、　
ｆ、で３０分間。

ｐＨ３゜０にて殺菌済 溶液２ Ｍｎ５０．４ＨｔＯＯ，０００５ Ｆ＠５Ｏ４７ＨＩＯＯ，０００５ Ｚｎ８０．７Ｈ＊０　　　　　　０．０００５ＣＯＣ４
６Ｈｍ０　　　　　　０．０００１ｃｕｓｏ、　！１Ｈ
ｔｏ　　　　　　　０．０００１Ｎａｇ　ＭＯＯ４２Ｈ
ｔＯＯ，０００１１５ｐ、ｓ、ｉ、ｇ、にて１５分間殺
菌済溶液３　ピオチン　　　０．１０又は２０ｐｆ／ぶ
コ　　リ　　ン　　　　　　０．１又は２岬／Ａメチオ
ニン　　　０又は５ｏｏｑ／Ｊ 濾過によシ別々に殺曹済 全部の溶液を、培養基貯槽に、必要に応じて無菌下で、
加え１次いで１次のような生長条件で８．５１のケモス
ター）　（ｅｈ＠ｍｏｓｔａｔ　）Ｋ供給する。

完全な調節壁を有する培養タンク中において温度３０℃
、通気１　ｖｖｍ、攪拌８００　ｒ、　ｐｏｍ、単−六
翼円盤形タービン、０．５Ｄ、　　培養タンクのｐＨは
無菌のアンモニアの自動的添加によ！７５．０に保持さ
れている。溶液３は、例えばビオチン単独又はビオチン
にコリンを加えたもの＼ような種々の嬌加物な加えるこ
とによって１μｍｔｘｔｌｌｌ定する種々の時間におけ
る組成を変化させる。

生長速度は時間当シロ。１乃至０．１５である。

５つの分離株は次のような形態学上の特徴を有する・ 培地　　馬鈴薯　蔗糖　寒天　　ガはツクート９ツクス
（Ｃ，Ｄ、　Ａ、　） 馬鈴薯２５０Ｆを洗って 細かく切り、圧力釜に人 れて１５分間、平方イン チ癲シ１５／ンｒの圧力 で蒸煮する０次いで、そ の煮出し汁を二層のモス リンを通して絞）出す。

２１ｇの葡萄糖と２−〇嘩 天を機密なｆ過液に加え。

この培養基をオートフレ ーブに入れ１分散させる。

生長条件：　２５℃　　　　　　　２５℃生長の特徴 分離株　Ｉ−７ コロニーの形態は、コロニーの直径が小さいことを除い
ては、Ｉ１株Ａ　３Ｊ　Ｋ類似してお）、その直径は、
上記培地Ｃ，Ｄ、　Ａ、上３０ｔで３日間培養して１．
５１である。柔毛Ｏある気曹体はコロニーからコロニー
へと少しは変化するが、Ｉ−８よりも変化は少ない、比
較的古い培養株は菌糸体が褐色に変色する。裏面は、黄
褐色乃至幾らか色素が拡散した灰色がかったパラ色の扇
状体である。

分離株　Ｉ−８ 非常に強い白色の栗毛のある気菌体。コロニーの直径は
又親株Ａ　３／）よシも小さく、培地Ｃ，Ｄ、ム。

上において３０℃で３日間培養してｌｏｚである。

裏面は、鮭肉色乃至灰色がかったパラ色の体筒（ｓｅｇ
ｍｅｎｔ　）である＠ 分離株　Ｉ−９ 巨視的な外観はＩ−８に近いが、裏面は一層淡く、鮭肉
色乃至透明がかった色である。

分離株　ｌ−１５ 小さな限られ九ト９−ム形のコロニー、菌糸体は短かく
、もつれておシ、且つ渦巻状の傾向がある。

多くの芽胞柄のような構造が形成され、それは塗抹接種
点にピンクの外観を４える。周囲はピンクの彩色、コロ
ニー直径祉培地Ｃ，Ｉ）、Ａ上において３０ｔ：にて３
日間培養して単に０．４ａｍにすぎない口分離株　ニー
１６ 分離株ｌ−１５は非常に不安定で、頻繁にｌ−１６を生
ずる。蚊分離株はＩ−７に似た外観を有するが、コロニ
ーは直径が僅かに大きくなる傾向があ夛、３日間で１４
１であって、外観上でさえ大キイ。■−１６はｌ−１５
よシずつと安定である。

分生子 分離株　１−７ 豊富なマクロ分生子は親株ムぢと同様な方法で生成され
る。分生子褥は比較的古い培養体に形成される。個々Ｏ
マクロ分生子は形や大きさが親株Ａ　３／’ｉに類似し
ておＬ　２５−５０μＸ３．Ｏ−５，０μである。比較
的古い培養体では多くの分生子褥が形成される。有莢砲
子鉱又、該分離株の菌糸体の間にはさまれた部分やその
末端に豊富に存在する。

皺育英脂子は球形で滑らかであシ、１０−１２μである
。しばしば、マクロ分生子の単一細胞は育英胞子を形成
する。

分−抹　Ｉ−８ マクロ分生子はＩ−７よシ少く、これらは主として、１
乃至３の隔膜であシ、長さに於ては２ｓ−３５Ｎという
ように小さく単純である。はんのわずかの分生子褥が形
成される。育英胞子は又。

間にはさまれた部分、末端において豊富であ〕独立して
いたシ、鎖状をなしている。

分離株　Ｉ−９ マクロ分生子がさらに多い以外はＩ−８に非常に似てお
夛、はとんど数に於てはＩ−７と同等である・ 分離株　■−１５ マクロ分生子状非常に少く、分生子褥型構造社。

実際に、育英胞子の束を形成する。又、菌糸体中に多く
の育英胞子が存在する。マクロ分生子は親株よりも小さ
く、単に２隔膜を有するのみで３Ｏ−３５ｐＸ４Ｎであ
る。

分離株　ｌ−１６ 豊富なマクロ分生子ならびに育英胞子を有していて非常
ＫＩ−７に似ている。マクロ分生子は典製的であシ、３
０−４５／ＩＸ４μである。

本発明の製造方法に於ける培養の温度は、一般的には２
５℃と３４℃の間であるが、３０℃近辺が望ましい。

本製造方法の始めに行われる接種は、例えば２嘔乃至１
０−１通常は５１Ｇ乃至ｌＯ−の範囲の接種物から成る
発芽前の種の段階によって良好に実施される。

培養の間の基質培養基のｐＨＦｉｌ例えば３゜５乃至７
といった生長を最大に維持する適当な範囲内に保つこと
が好ましい。

上述の条件下で、ノ２ツチ式培養での生長期間は。

通常２０乃至４８時間である。バッチ方式ならびに連続
方式の何れにおいても限界生長因子となる酸素欠乏を克
服するために充分な水準の溶解酸素を提供すぺく、通気
および攪拌を実施しなければならない。

当業者にとって周知の如く、物質の生長は菌類に対し有
効な炭水化−によってのみ限界されるように１例えば、
窪素、硫黄、燐、その他の微量元素の如き必須の生長栄
養素の充分な量が基質培養基中に保持される。

上述せる如き栄養素に加うるに１例えばビオチンの如き
ピタ電ンの一種もしくはそれ以上を存在させることが、
最高生長速度を維持するために望ましい。

培養の間に発泡することを制御するために基質培養基に
無毒性な泡止め剤を加えることもま九望ましい。

本発明によって製造される物質は、当業者にとつて周知
の適当な手段で分離される。したがって、得られる菌糸
体は分離、洗滌、濾過、及び乾燥によって回収される。

しかしながら、上記に関して、もしも、物質の湿分含有
量が圧力下でのＰｉａＫよシ約Ｒｏｌｌ（Ｗ／Ｗ）の臨
界レイル以下に減じられるならば、その後に使用される
乾燥方法は、これらの物質の経済的処理法に於て重要な
因子である厳重な温度限定を受ける必要のないことが判
り九。

乾燥方法社、菌糸体の栄養価に対し損失を生じさせては
ならず、７５℃における通風状態での乾燥もしくは凍結
乾燥であればよい。

本発明の方法によシ製造される菌類の菌糸体は、非常に
良好な水和能力を示し、糊稠剤及びゲル化剤として有用
である。単離した亀のでなければ。

骸菌糸体は、脂質中炭水化物のような他の栄養的に有用
な物質表らびにンタミンを保有する。菌類Ｏ菌糸体は蛋
白質で強化され九ノ５ン、朝食々品。

スナック食品に価値のある満足のゆくパイキング特性を
有する。菌類の菌糸体は、その繊維状構造のために焼い
たりフライにあげたり、ふんわシとふくら壕せた〉する
ことが可能であ夛、かつ食用として習慣的に用いられて
いる一般食品と、外観及び有用性に於て匹敵し得る食品
としての多くの類似性を示す。

本発明を１！施する方法の実施例を次に示す。

実施例１乃至４はパッチ方式の培養法による。

（以下余白） 実施例　１ 次の如き培養基１０ノを調製し、攪拌器付き培養タンク
中で上述したように殺菌する。

砂糖分が８１Ｗ／ＶＫなるようにした蔗糖密硫酸アンモ
ニア　　　　　　　１．２％ＮａＨｓＰＯｎ　　　　　
　　　　　　０．２５％１５Ｆｓｉｇで３０分間の殺菌 ＣａＣ０ｍ　　　　　　　　　　　　Ｏ，５ｆｂ　Ｗ／
　Ｖｌ　５　ｐｓｉｇで３時間の殺菌 培養基成分を無菌の状態で加え温度を３０ｃに上げる。

培養基の５〜１ｏ容量−に和尚する振と５７５）スス中
のグルコース／コーン　スチーズリカー培養基かもしく
は、他の適当な物質上に生長させた接種体を、７−ザリ
クム、グツミニアリウム−シュパー＜　（Ｆｕｇａｒｉ
ｕｍ　ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ　５ｃｈ−穐ｂ・）の菌
株１．Ｍ、　１．１４５４２５　（ＦＥＲＮ−Ｐ　Ｊ１
６３７２１　）から成る有機体の胞子懸濁と共に接種し
、ロータリーシェーカー上で３０ｃの温度で１８乃至２
４時間生長させ、無菌状態で培養タンクに加える。３０
Ｃで培養させた培養タンクはついで充分な調節壁を有す
る容器中の６翼円盤形タービン（０，５Ｄ）で回転率８
００　ｒｐｍを以って攪拌させ、無菌性空気ＩＶＶＭを
通す、３５時間懐、生長した菌糸体を培養タンクから回
収し、遠心分離機にかけ、水で洗浄し、空気温度７５Ｃ
で温熱空気帯状乾燥機中で乾燥する。

乾燥生成物は次のような組成を有する：全窒素　　　　
　　８．０％ 灰　　分　　　　　　　　　５．３鋒 脂質　　　２．７− ＮＰＵｏｐ、　　　　　　　　５２全窒素（ＴＮ）に基
づく６９α−アミノ態窒素（ＡＮ） に基づ〈 実施例　２ 次のような培養基１０ノを調製し、１４ノの新プランス
ヴイック（Ｂ　ｒｕｎｓｗｉ　ｃｋ　）　、　　ミクロ
ファルム（Ｍｉｏｒｏｆ＠ｒｍ）ｓ培養タンク中で上述
の如く殺菌する。

最終− 溶液１　葡萄糖　　　　ｐＨ３，０３，０溶液２　硫酸
アンモニウム　　　　　　　　０．７溶液３　燐酸二水
素カリウム　　ｐＨ５，０１，０溶液４　　Ｆｅ５Ｏｉ
　７ＨｓＯｐＨ２，５０，００１Ｍｎ　８０４４ＨＩＯ
Ｏ，０００５ ＣｕＳＯＪＨｓＯＯ，０００１ ＭＥ　８０４７ＨｓＯＯ，０２５ 溶液５　　ＮａｓＭｏ０４２ＨｓＯＯ，０００１Ｃｏ　
Ｃｊｓ　６ＨＩＯＯ，０００１ ＣａＣｊｓ２＆ＯＯ，００１５ 溶液６　　ＮａＯＨＯ，１ 上記溶液の全ては、１５ｐｍｊｊｒにて１５分間加熱し
て殺菌する。

溶液７１１１過によル殺菌され九ビタミン及び／又はア
ミノ酸。

これらの溶液を容器に無菌の状態で加える。培養タンク
中の最終濃度を菌糸体を乾燥重量で０．５〜／ノ提供す
るように調整することを除いて娘。

実施例１に於けると同様に接種体を生長さ場、且つ添加
する。

生長条件は温度３０Ｃ；通気ＩＶＶＭであシ。

攪拌器の速度は、ニュープランスヴイツク社り。

試験法（Ｎｅｗ　Ｂｒｕｎｓｗｌｃｋ　Ｉｎｃ　Ｄｏ　
ｐｒｏｂｅ　）によって測定して、培養基中の溶解酸素
の水準を２５−以上の飽和値に維持するように調整する
。

殺菌した泡止め剤のポリプロピレングリコール２．００
０を泡の発生を抑えるに必要なだけ加え、ｐＨを殺菌し
丸背性カリ溶液の添加によ）６．Ｏ乃至６．３０関に維
持する。

生長速度（時間当り） （最少限培地） （Ｈ）　　培養基中のピオチンの　　　　　　０．２最
終濃度が５０ｓｌ／Ｊ であるような溶液７ ０ｉＤ　　培養基中のピオチンの　　　　　　０．２５
最終濃度が５０μｍ１／Ｊ であシ；塩化コリンの それが３０岬／ｉ、メ チオニンのそれが３００ ｑ／ノであるような溶液７ 実施例　３ 培養基と条件社実施例２と同じであるが、葡萄糖の代シ
に麦芽糖を用いる。

（１）　　実施例２　（ＩＩ）と同じ溶液７　　　　　
０．１８（ＩＩ）　　実施例２１１Ｄと同じ溶液７　　
　　　０．２１実施例　４ 次の如き培養基１００Ｊを調製し、１３０ノのステンレ
ス鋼培養タンク中にて、既に述べた如く殺菌する。

最終濃度嘩 葡萄糖　　　　　　　　４，０ 硫酸アンモニウム　　　　　　　　　０．２燐酸二水索
カリウム　　　　　　　０．２Ｍｇ５Ｏ４７Ｈ鵞０　　
　　　　　　　　　　　　　０．０２５ＺｎＳＯ４７Ｈ
ｓＯＯ，０００５ Ｆｓ８０ｉ７ＨｔＯＯ，０００５ Ｍｎ５Ｏ４４Ｈ鵞０　　　　　　　　　　０．０００１
培養基を５ｐＨ３，ｏにおいて、　１５　ｐａｉｇで３
０分間殺菌し１次いで３０Ｃに冷却し、殺菌したアンモ
ニヤを添加してｐＨ５，０に調整する。

濾過によって殺菌したピオチンを、最終濃度が４０μＩ
Ｉ／ノになるように無菌的に添加する。

容ｉｉ＋Ｋ、下帆のものを含有する塔養基上に、３０Ｃ
で１８時間スノで一ジ容器中で生長させた培養体１０ｊ
’ｉ−接種し、次いで１５　ｐｌｉｇで４５分間殺菌し
、７−ザリウム　グラミニアリウム　シュパー（１，Ｍ
、１．１４５４２５（ＦＩＲＭ−Ｐム３７２１）の胞子
懸濁を接種する。

グルコース　　　　　　　　２９６ トリプトン（オキソイ）’）　　　　　０．４チ酵母エ
キス（オキソイト”）　　　　０．１％硫硫酸アン−ニ
ヤ　　　　　　ｏ、１５係燐酸二水素カリウム　　　　
　１　嘩 水酸化ナトリウム　　　　　　ｏ、１−硫酸マグネシウ
ム　　　　　　０．０２５１Ｇ硫酸第一鉄　　　　　　
　　　０．０（１１饅硫酸亜鉛　　　　　　　　　０．
００１−硫酸マンガン　　　　　　　　０．０００２１
硫酸鋼　　　　　　　　ｏ、ｏ　ｏ　ｉ　−泡止め剤の
ポリプロピレン グリコール２０００　　　　　　　０．０５１１生長条
件は温度３０Ｕに保ち、溶解酸素濃度を培養基グロスに
対して約１０−以上の飽和値になるように通気を調整す
る。殺菌した泡止め剤のポリプロピレングリコール２０
００を泡の発生を抑えるために添加し、殺菌したアンモ
ニヤを添加してｐＨを５．０に維持する。生長期間中に
回収される菌糸体のサンプルは乾燥重量換算で全窒素（
ＴＮ）８．０乃至８．６１：α−アミノ態窒素（ＡＮ）
６．４乃至６．６％を含有する。パッチ方式の培養基乃
至接種体の双方よプ成っている該複合培養基中に於ける
最初の生長速度は凡そ時間当６０．３である。

連続方式の培養を次の実施例５乃至６で示す。

次のような組成の培養基を調製する・ 溶液１　　　　　　　　　　最終係 グルコース　　　　　　　　　　　３．０硫酸アンモニ
ヤ　　　　　　　　　　０．２５燐駿二水素カリウム　
　　　　　０．３硫酸マダネシウム　　　　　　　０．
０２５泡止め他、ポリプロピレングリコ＋２００００．
０１１５ｐｓｉｇで３０分間ｐＨ３で殺１済溶液２ Ｍｎ８０＊４Ｈｍ０　　　　　　　　　　　　０．００
０５Ｆ＠８０４７ＨＩＯＯ，０００５ ２１１８０４７ＨＩＯＯ，０００５ ｃｏｃＪ＝　６ＨｍＣ））０．０００１Ｃｕ８０．５Ｈ
，００，０００１ Ｎａ、ＭｏＯ４２Ｈ１００，０００１ １５ｐｇｉｇで１ｓ分関殺薗済 溶液　３ 濾過によシ殺菌されたビタミン及び／又はアＺノ酸。

これら全ての溶液を必要であれば８．５Ｊのクモスター
ト中に無菌的に添加する。該クモスタート中に於ける生
長の条件は下記の如くである：温度３０Ｃ；通気ＩＶＶ
Ｍ：充分な調節−を有する容器中の単−内翼円盤形ター
ビン０．５Ｄで回転率８００　ｒｐｍを以って攪拌、７
−ザリウム・グツミニアリウム・シ５−メーイの菌株１
．Ｍ、Ｉ、１４５４２５（ＦＥＲＭ−Ｐ轟３７２１　）
の有機体。殺菌したアンモニヤの自動的添加によシ５．
０に維持したｐＨｅ実施例　６ 次のような組成の培養基を調製する。

チ コーンステープリカー　　　　　　　　１．３３硫酸ア
ンモニウム　　　　　　　　　　０．２５燐酸二水素カ
リウム　　　　　　　　　０．１５硫酸マグネシウム　
　　　　　　　　　０．０２５１　ｓ　ｐｓｉｇにて３
０分間ｐＨ４，０で殺菌済ｐＨの変化は３．５と６．０
の間であって、生長速度は、培養期間を通して時間肖り
０．１である事を除いては、実施例５と同一の条件下で
、８．５リツトルのケモスタートにて４養を行なう。次
のような結果を得た。

ｐＨ６，０で生長した生成物　７．７　　５．９　　６
１　　８０奥膣例　６（ｂ） 培養期間を通してｐＨを５．０に保ち、温度変化が２６
Ｃと３４０の間である事を除いては、培養基及びその条
件は実施例６と同じである。最適温度は３０〜３２Ｃで
ある。

フーザリウム・グラ建ニアリウム・ジェノζ−Ｒ１、Ｍ
、１．１４！＄４２５　（ＦＥＲＭ−Ｐ　４３７２１　
）の５つの賢異株又は分離株の培養に関しては実施例７
乃至１２に示す。

実施例　７ 次のような培養基２００　ｍ１ｍを１リツトル容量の二
重振とうフラスコ中に調製する。

最終濃度− 溶液１　グルコース　　　　　　　　　３．０別々に殺
薗済） 溶液２　硫酸アンモニウム　　　　　　　０．５６５燐
酸二水素カリウム　　　　　　１．０Ｍｇ５Ｏ，：　７
Ｈｅ　ＯＯ，０２５ Ｆｓ１８０４：（ＮＨ＊）ｍｓＯ４：６４０　０．００
０５ＭｎＳＯａ　：　４ｋｌｓＯｏ、ｏ　００５ＣｕＳ
Ｏ４：　５Ｈｚ０　　　　　　　　　０．０００１Ｃｏ
Ｃ１，：　６Ｌ０　　　　　　　　０．０００１ＣａＣ
Ｉ＊：　２ＬＯＯ，００１５ Ｎｍ１ＭＯＯ４２Ｈｔ　０　　　　　　　　０．０００
０１ＮａＱＨ０，２ １５ｐ、ａ、ｉ、ｇ、にて１５分間殺菌済のｔＩｉ最終
ｐＨ６，０ 溶液３　濾過によシ殺菌された下記の如きビタミン・ これらの溶液を無菌的に添加し、最終容量を２００ｗｊ
にする。次いで、フーザリウム・グラミニアリウムＩ　
−７１，Ｍ、１．　１５４２０９の菌株の洗浄された胞
子を骸フラスコに接槍し、濃度を８Ｘ１０”／−とする
。生長の条件は温度３０Ｇ、２インチのスロー（ｔｈｒ
ｏｗ　）を有する軌道シェーカー上で回転率１４０　ｒ
、ｐ、職で以って行なう。

時間毎に区切つ九場合の生長状態はサンプルの光学会度
を６００−の波長を用いて測定することによシ測定する
。この結果１次のような生長速度が確認された。

溶液３ 実施例　３ 実施例７０手順の繰シ返しであるが、菌株ｌ−７（Ｄ代
ＤＫフーザリウムΦグラミニアリウム・ジェノ２−イＩ
−８の菌株を用いる。次のような生長速度が確認された
。

時間ｍシＯ生長速度 （１）　　実施例７（１）と同じ　　　　　非常にゆつ
く〕（Ｍ）　　実施例７　（ｉｆ）と同じ　　　　　　
　０．２２（■　実施例７（２）と同じ　　　　　　　
も２７爽施例　９ 実施例７の手順の繰ｐ返しであるが、菌株ニー７０代夛
にフーザリウム・グラ電ニアリウムーシエＡ−−！　ニ
ー９の菌株を用いる。次のような生長速度が確認された
。

時間当りの生長速度 （１）　　実施例７中と同じ　　　　　非常にゆつくシ
（Ｈ）　　実施例７（１）と同じ　　　　　　　０．２
１（Ｉｌｌ）　　ｌ！施例７（−と同じ　　　　　　　
０．２７実施例　１０ 実施例７０手順の繰シ返しであるが、菌株ニー７０代プ
にフーザリウムΦダラ建ニアリウムのシ二パーばｌ−１
５の菌株を用いる。次のような生長速度が確認された。

時間当）の生長速度 （り　　実施例７中と同じ　　　　　　非常にゆりくシ
（ｉｔ）　　実施例７　（ｉｔ）と同じ　　　　　　　
０．２１（２）実施例７（ｉｌと同じ　　　　　　　０
．２７夾施例　１１ 実施例７０手順の繰シ返しであるが、菌株ｌ−７０代）
Ｋフーザリウム・グツミニアリウム・ジェノξ−’ｌ−
１６０１１株を用いる。次のような生長速度が確認され
た。

時間当プＯ生長速度 （１）　　実施例７中と同じ　　　　　非常にゆつくシ
（舖）実施例７（論）と同じ　　　　　　　０．２１（
２）実施例７（ｉ＆１１と同じ　　　　　　　０．２７
夾施例　１２ 実施例７０手順の繰り返しであるが、菌株ｌ−７０代り
にツーずリウム・グツミニアリウム・シａ、Ｊ　　４）
親菌株１．Ｍ、１．１４５４２５（ＦＩＲＭ−Ｐ４７２
１）を用いる。次のような生長速度が確認された。

時間轟〕Ｏ生長速度 （：）　　実施例７中と同じ　　　　　非常にゆっく夛
（舖）　実施例７（船と同じ　　　　　　０．２２１１
　　実施例７（ｌｉと同じ　　　　　　　ｏ、２７全窺
素（ＴＮ）の分析方法 自動キエルダール（Ｋｊ＠１ｄａｈｌ　）　／イジェス
ター（チク具；ン）を使用する。Ａ、Ｆ＠ｒｒａｒｌ＋
Ａｎｎ、Ｎ、Ｙ。

Ｓｃ１４１７，７９２（１％０）参照。

アミノ態窒素（ＡＮ）ＴＮＢＳ（修正済）の分析方法は
ｓ　Ｍ、Ａ、Ｐｉｎｎ＠ｇａｒ、７＠ａｈｎｉｅｏｎ　
５７１ｍ％ｌ１ｕｎａ　Ｚ９６５＠Ｐ、８０を参照。

本発明の実施の別の態様を要約すると次の通シである。

（１）　食用蛋白質含有物質から成る分離された増殖有
機体を人間又は動物の消費用食料に混入することを特徴
とする特許請求の範囲第（１）項に記載の製造方法。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　食用蛋白質生産性を有する７−ザリウム・グ
   ラ擢具アリウム◆シ：Ｓ−ノーイ　Ｉ・Ｍ・Ｉ・１４５
   ４２５　（微工研薗寄第３７２１号）。