JPS6017507B2 - 食用蛋白質生産菌 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、士壌サンプルから分離されたフ−ザリウム・
グラミニアリウム・シユバーべ（Ｆ聡ａｎｍｍ餅ａｍｌ
ｎｅａｍｍＳｃｈ肌ｂｅ）の新菌株に係るものであり、
該新菌株は食用蛋白質の製造に有用である。

本出願人の出願に係る英国特許出願第５３３１２／６６
（通し番号１２１０３５６）の発明は、不完全菌類に属
する微生物の無毒性菌株である有機体を、好気性条件下
で、必須な生長促進栄養物質−この栄養物質中の炭素は
同化可能な炭水化物の形態で増殖時に限界基質を構成す
るものである−を含有する培養基中において培養して増
殖させ、次いで、同化可能な炭水化物を消費した渚地か
ら、食用蛋白質含有物質を構成する増殖有機体を分離す
ることから成る食用蛋白質含有物質を製造する方法に関
するものである。

本発明の目的は、又、ネズミ分析（ｒａｔａｓｓａ＄）
に於いて、Ｑーアミノ態窒素に基づいて、約７０という
高い蛋白質正味利用率（ＮＰＵ）を有する菌の菌糸体を
提供することである。

本発明によれば、フーザリウム・グラミニアリウムの無
毒性菌株又はその変異株もしくはその突然変異株を、好
気性条件下で、生長促進物質中の炭素が、同化可能な炭
水化物の形態で増殖時に限果基質を構成するような必須
の生長促進栄養物質を含有する培養基中に於いて、培養
して増殖させ、次いで、食用蛋白質含有物質から成る、
増殖された有機体を分離することから成る、食用蛋白質
含有物質を製造する方法が提供される。食用蛋白質含有
物質から成る分離された有機体は人間又は動物が消費す
る食料に混入することが可能である。

培養段階に於いて用いられる基質は、植物源のもの例え
ば、澱粉、澱粉含有物質又はそれらの加水分解生成物・
藤糖・藤糖含有物質又は加水分解した藤糖即ち転化糖も
しくはその混合物である。

従って、該基質は加水分解された馬鈴薯・糖蜜葡萄糖・
加水分解された豆澱粉・又はカサバ（ｃａｓｓａｖａ）
を包含している。又一方、乳酸（ホェー）より成る動物
源の基質も用いられる。

好ましい無毒性菌株は、１．Ｍ．１．番号１４５４２５
（ＦＥＲＭ−Ｐ ＮＯ．３７２１）という番号を以つて
国立微生物研究所に寄託されている、フーザリウム・グ
ラミニアリウム・シユバーべ（Ｆ聡ａｎｍｍ群ａｍｌｎ
ｅａｍｍＳｃｈｗａ技）と称する本発明者の菌株及びそ
の変異株ならびに突然変異株である。

次のような新規な変異株も又用いられる：−１．Ｍ．１
．１５４２０９という番号を以つて国立微生物研究所に
寄託されている１一７。１．Ｍ．１．１５４２１１とい
う番号を以つて国立微生物研究所に寄託されている１−
８。

１．Ｍ．１．１５４２１２という番号を以つて国立微生
物研究所に寄託されている１−９。

１．Ｍ．１．１５４２１３という番号を以つて国立微生
物研究所に寄託されている１一１ふ１．Ｍ．１．１５４
２１０という番号を以つて国立微生物研究所に寄託され
ている１一ＩＱフーザリウム・グラミニアリウム・シユ
バーべと称する本発明者の新しい菌株１．Ｍ．１．１４
５４２５（ＦＥＲＭ−Ｐ ＮＯ．３７２１）は麦に対し
て非病原性である。

該菌株１．Ｍ．１．１４５４２５（ＦＥＲＭ−ＰＮＯ．
３７２１）は、英国ハイワィコーム（Ｈｉ鮒Ｗｙｃｏｍ
ｂｅ）にある本出願人の中央研究所から約６奴離れた地
点、すなわち、英国マーロー、マーロ‐ボトム（Ｍａｒ
ｌｏｗ ＢＭｏｍ、船ｒｌｏｗ、Ｅｎｇｌａｎｄ）で採
取された土壌サンプルから、常套手段を用い、分離、精
製及びスクリーニングして得られたものである。該菌株
は次のような形態学上の性質を有する：培 地 馬鈴
薯．藤糖．寒天 ッアベック・ドツクス（ＰＳＡ）
（Ｃｚａｐｅｋ−Ｄｏｘ）（変性された）寒天（オ
キソィ ド） （ＣＤＡ） 馬鈴薯２５０夕を洗っ て細かく切り、圧力 釜に入れて１５分間、 平方ィンチ当り１５ポ ンドの圧力で蒸煮す る。

次いで、その煮出 し汁を二層のモスリ ン（ｍ順風）を通 して絞り出す。

２％の萄葡糖と２ ％の寒天の濃密な炉 過液に加え、この塔 養基をオートクレー ブに入れ、分散させ る。

生長条件 ２５００で数週間 ２５ｑｏで数週
間生長速度 ３日間で４．０肌 ３日間で３．０
肌生長の特徴：白色気菌糸を有する毛状の拡がりのある
コロニ一ｏ培地ＰＳＡにおける基体（Ｓ伽ｓｔｒａｔｍ
ｍ）深紅色乃至黄色の斑点を有する灰色がたったバラ色
。

培地ＣＤＡでは幾らか青味がかった煩向になる。特に、
老化に際して、いまいま、深紅色色素を生成する。

１乃至２週間後に気菌糸は褐色になり崩壊する傾向があ
る。

コロニーは分生子じよく（ｓｐｏｍｄｏｃｈｉａ）が形
成されるにつれて、や）ねばねばした状態となり、色は
上記培地ＰＳＡ上でピンク乃至褐色となり、培地ＣＤＡ
上では鮭肉色となる。

分泌物は形成されず、色素形成は菌糸体の色に従う頚向
がある。

分生子：ミクロ分生子はこの有機体によっては生成しな
い。

マクロ分生子は単一生側榎子又は短かし・梗子を有する
多様に枝別れした分生胞子柄から生成する。比較的古い
培養体においては、分生胞子柄は集合して分生子擬を形
成し、特に培地ＣＤＡ上に著しく形成する。分生子は錐
状の紡錘状の背腹面から曲つた紡錘状の背臆面に変化し
、隔膜は３から５に変化し、比較的若い培養体では５が
普通である。胞子の大きさは２５一５０仏×２．５ムー
４．０仏に変化する。

柄足細胞はいまいま叉疎状であり、特に５の隔膜の長さ
にある。

膨張した細胞が菌糸体中に生じ、いよいよ、厚膜胞子が
介在的に単独もしくは鎖状をなして生ずる。フーザリウ
ム・グラミニアリウム・シユバーべ１．Ｍ．１．１４５
４２５（ＦＥＲＭ−Ｐ ＮＯ．３７２１）の変異株（又
は分離株）の調製例及びその形態学上の特徴を次に述べ
る。

連続的培養体から得られる分離株 フーザリウム・グラミニアリウム・シユバーべ１４５４
２５（ＦＥＲＭ−Ｐ ＮＯ．３７２１）を、時間当り０
．１乃至０．１５の稀釈速度で限界炭素を有する葡萄糖
／塩類の培地上連続的培養条件下で、３０午０において
生長させた培養タンクからのブロス（ｂｒｏ比）を接種
した麦芽エキス寒天プレートからフーザリウム・グラミ
ニアリウム・シユバーべ１．Ｍ．１．１５４２０９乃至
１５４２１３を選択する。

培養タンクは凡そ１００時間の間隔をおいてサンプリン
グして、変異株の集団を評価し、１．Ｍ．１．１５４２
０９乃至１５４２１３の分離株を、１１０加時間時のサ
ンプルから調製したプレートより採取する。これらの分
離株は培養の間に生成される形態上の変異株の大部分の
タイプを代表している。この例において概談した如き条
件下で、変異株は８０Ｍ時間の経過後プレート上にわれ
始める。これらの変異株はこの時間の経過後頻繁に生成
する。集団の状態は各タイプのパーセントに関してゆっ
くりと変化する。培養タンクの条件は下記の通りである
：培養基 ％ 溶液１ 葡萄糖 ３．０硫酸ア
ンモニウム ０．２５燐酸二水素
カリウム ０．３０硫酸マグネシ
ウム ０．０２５泡止め剤、ポリ
プロピレングリコール ０．０１２０００；１５ｐ．
ｓ．ｉ．ｇ．で３０分間、ＰＨ３．０にて殺菌済溶液２
ＭｎＳ０４４日２０
０．０００５ＦｅＳ０４７日２０
０．０００５ＺｎＳ０４７日２０
０．０００５ＣｏＣ１２８
Ｌ〇 ０．０００１Ｃｕ
Ｓ０４８ＬＯ ０．０００
１Ｎａ２Ｍｏｏ４２ＬＯ ０
．０００１１５ｐ．ｓ．ｉ．ｇ．にて１５分間殺菌済溶
液３ ビオチン ０．１０又は２０メタ／ク
コリン ０．１又は２の９／〆
メチオニン ０又は６００の９／そ炉
週により別々に殺菌済全部の溶液を、培養基貯槽に、必
要に応じて無菌下で、加え、次いで、次のような生長条
件で８．５そのケモスタート（ｃｈｅｍｏｓｔａｔ）に
供給する。

完全な調節壁を有する培養タンク中において温度３０つ
○、通気ｌｖｖ仇、鷹拝８０仇．ｐ．ｍ．単一六翼円盤
形タービン、０．印。培養タンクのＰＨは無菌のアンモ
ニアの自動的添加により５．０に保持されている。溶液
３は、例えばビオチン単独又はビオチンにコリンを加え
たもの）ような種々の添加物を加えることによって、仏
ｍａｘを測定する種々の時間における組成を変化させる
。生長速度は時間当り０．１乃至０．１５である。

５つの雛株は次のような形態学上の特徴を有する。

培 地 馬鈴薯 鷲糖 寒夫 ッアベック・ドツクス
（Ｐ．Ｓ．Ａ．） 寒天（オキソィド）（Ｃ．Ｄ．
Ａ．）馬鈴薯２５０夕を洗って 細かく切り、圧力釜に 入れて１５分間、平方イ ンチ当り１５ポンドの圧 力で蒸煮する。

次いで、その煮出し汁を二層の モスリンを通して絞り 出す。

２％の葡萄糖と ２％の寒天を濃密な炉， 過液に加え、この培養 基をオートクレープに 入れ、分散させる。

生長条件：２９０ ２５０
０生長の特徴分離株 １一７ コロニーの形態は、コロニーの直径が小さいことを除い
ては、親株Ａ３／５に類似しており、その直径は、上記
培地Ｃ．Ｄ．Ａ．上３０℃で３日間培養して１．５加で
ある。

柔毛のある気菌体はコロニ−かりコロニーへと少しは変
化するが、１一８よりも変化は少ない。比較的古い培養
株は菌糸体が褐色に変色する。裏面は、黄褐色乃至幾ら
か色素が拡散した灰色がかったバラ色の扇状体である。
分離株 １−８非常に強い白色の柔毛のある気菌体。

コロニーの直径は又親株Ａ３′５よりも４・さく、培地
Ｃ．Ｄ．Ａ上において３０ｏｏで３日間培養して２．０
伽である。裏面は、鮭肉色乃至灰色がかったバラ色の体
節（ｓｅｇｍｅｎｔ）である。分離株 １一９ 巨視的な外観は１一８に近いが、髪面は一層淡く、鮭肉
色乃至透明がかった色である。

分離株 １一１５ 小さな限られたドーム形のコロニー。

菌糸体は短か〈、もつれており、且つ渦巻状の傾向があ
る。多くの芽胞柄のような構造が形成され、それは塗抹
接種点にピンクの外観を与える。周囲はピンクの彩色。
コロニー直径は培地Ｃ．Ｄ．Ａ上において３０ｑ０にて
３日間培養して単に０．４肌にすぎない。分離株 １一
１６ 分離株１−１５は非常に不案定で、頻繁に１一１６を生
ずる。

該分離株は１−７に似た外観を有するが、コロニーは直
径が僅かに大きくなる煩向があり、３日間で２．４ｃｍ
であって、外観上でさえ大きい。１−１６は１−１５よ
りずっと安定である。

分生子分離株 １−７ 豊富なマクロ分生子は親株Ａ３′５と同機な方法で生成
される。

分生子凝は比較的古い培養体に形成される。個々のマク
ロ分生子は形や大きさが親株Ａ３／５に類似しており、
２５一５０仏×３．０一５．０山である。比較的古い培
養体では多くの分生子梶が形成される。有茨胞子は又、
該分離株の菌糸体の間にはさまれた部分やその末端に豊
富に存在する。該有英胞子は球形であり、１０−１２ｒ
である。いまいま、マクロ分生子の単一細胞は有茨胞子
を形成する。分離株 １−８ マクロ分生子は１−７より少く、これらは主として、１
乃至３の隅膜であり、長さに於ては２５−３５山という
ように小さく単純である。

ほんのわずかの分生子凝が形成される。有※胞子は又、
間にはさまれた部分、末端において豊富であり独立して
いたり、鎖状をなしている。分離株 １一９マクロ分生
子がさらに多い以外は１−８に非常に似ており、ほとん
ど数に於ては１一７と同等である。

分離株 １−１５ マクロ分生子は非常に少く、分生子嬢型構造は、実際に
、有茨胞子の東を形成する。

又、菌糸体中に多くの有茨胞子が存在する。マクロ分生
子は親株よりも小さく、単に２隔膜を有するのみで３０
一３５仏×４仏である。分離株 １一１６ 豊富なマクロ分生子ならびに有※胞子を有していて非常
に１−７に似ている。

マクロ分生子は典型的であり、３０−４５山×４山であ
る。本発明の製造方法に於ける培養の温度は、一般的に
は２５℃と３４ｑｏの間であるが、３ぴ０近辺が望まし
い。

本製造方法の始めに行われる接種は、例えば２％乃至１
０％、通常は５％乃至１０％の範囲の接種物から成る発
芽前の種の段階によって良好に実施される。培養の間の
基質培養基のｐＨは、例えば３．５乃至７といった生長
を最大に維持する適当な範囲内にタ保つことが好ましい
。

上述の条件下で、バッテ式培養での生長期間は、通常２
０乃至４報時間である。

バッチ方式ならびに連続方式の何れにおいても限界生長
因子となる酸素欠乏を克服するために充分な水準の溶解
酸素ｏを堤供すべく、通気および蝿拝を実施しなければ
ならない。当業者にとって周知の如く、物質の生長は菌
類に対し有効な炭水化物によってのみ限界されるように
、例えば、窒素、硫黄、燐、その他の徴量元タ素の如き
必須の生長栄養素の充分な量が基質培養基中に保持され
る。

上述せる如き栄養素に加うるに、例えばビオチンの如き
ビタミンの一種もしくはそれ以上を存在させることが、
最高生長速度を維持するために望○ましい。

培養の間に発泡することを制御するために基質培養基に
無毒性な泡止め剤を加えることもまた望ましい。

本発明によって製造される物質は、当業者にとつて周知
の適当な手段で分離される。

したがって、得られる菌糸体は分離、洗練、炉過、及び
乾燥によって回収される。しかしながら、上記に関して
、もしも、物質の湿分含有量が圧力下での炉過により約
５０％（ｗ／ｗ）の臨界レベル以下に減じられるならば
、その後に使用される乾燥方法は、これらの物質の経済
的処理法に於て重要な因子である厳重な温度限定を受け
る必要のないことが判った。乾燥方法は、菌糸体の栄養
価に対し損失を生じさせてはならず、７５ｑｏにおける
通風状態での乾燥もしくは凍結乾燥であればよい。本発
明の方法により製造される菌類の菌糸体は、非常に良好
な水和能力を示し、糊鋼剤及びゲル化剤として有用であ
る。

単離したものでなければ、該菌糸体は、脂質や炭水化物
のような他の栄養的に有用な物質ならびにビタミンを保
有する。菌類の菌糸体は蛋白質で強化されたパン、朝食
々品、スナック食品に価値のある満足のゆくバイキング
特性を有する。菌類の菌糸体は、その繊維状構造のため
に焼いたりフライにあげたり、ふんわりとふくらませた
りすることが可能であり、かつ食用として習慣的に用い
られている一般食と、外観及び有用性に於て匹敵し得る
食品としての多くの類似性を示す。本発明を実施する方
法の実施例を示す。

実施例１乃至４はバッチ方式の培養法による。

実施例 １次の如き培養基１０そを調製し、縄梓器付き
培養タンク中で上述したように殺菌する。

砂糖分が６％Ｗ／Ｖになるようにした熊糖密硫酸アンモ
ニア １．２％ＮａＱＰ０４
０．２５％１５ｐｓｉ
ｇで３０分間の殺菌ＣａＣ０３
０．５％Ｗ′Ｖ１５ｐｓｉｇで３時間の殺菌培
養基成分を無菌の状態で加え温度を３０ＣＯに上げる。

培養基の５〜１戊容量％に相当する振とうフラスコ中の
グルコース／コーン スチーブ リカー培養基かもし〈
は、他の適当な物質上の生長させた接種体を、フーザリ
ウム、グラミニアリウム、シユバ−べ（Ｆ雌ａｎ山ｍ
ｇｒａｍｌｎｅａｒ山ｍＳｃｈｗａ氏）の菌株１．Ｍ．
１．１４５４２５（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．３７２１）から
成る有機体の胞子懸濁と共に接種し、ロータリーシェー
カー上で３０ｑｏの温度で１８乃至２４時間生長させ、
無菌状態で培養タンクに加える。３０００で培養させた
培養タンクはついで充分な調節壁を有する容器中の６翼
円盤形タービン（０．印）で回転率８０仇ｐｍを以って
櫨拝させ、無菌性空気ＩＶＶＭを通す。

３５間後、生長した菌糸体を培養タンクから回収し、遠
Ｄ分離機にかけ、水で洗浄し、空気温度７５３０で温熱
空気帯状乾燥機中で乾燥する。

乾燥生成物は次のような組成を有する： ０全窒素 ８．０％灰
分 ５．３％脂 質
２．７％ＮＰＵｏｐ
．５２全窒素（ＴＮ）に基づく６９Ｑ−アミノ態窒素（
ＡＮ）に基づく実施例 ２ 次のような培養基１０〆を調整し、１４その新プランス
ヴイツクス（Ｂｒ肌ｓＭｃｋ）、ミクロフアルム（Ｍｉ
ｃｒｏｆｅ肌）、培養タンク中で上述の如く殺菌する。

最終％溶液１ 葡萄糖 ｐＨ３．０
３．０溶液２ 硫酸アンモニウム
０．７溶液３ 燐酸二水素カリウム ＰＨ５．０
１．０溶液４ ＦｅＳ０４７日２０ ｐＨ２．５
０．００１ＭｎＳ０４日２０
０．０００５ＣｕＳ０４９ＬＯ
０．０００１ＭｇＳ０４７日２０
０．０２５溶液５ Ｎａ２Ｍｏｏ４２
ＬＯ Ｏ．０００１Ｃ。

ＣＩ２母ＬＯ Ｏ．０００１Ｃａ
Ｃ１２２ＬＯ ０．００１５溶液
６ ＮａＯＨ Ｏ．１上記
溶液の全ては、１５ｐｓｉｇにて１８分間加熱して殺菌
する。溶液７ 薄遇により殺菌されたビタミン及び／又
はアミノ酸。

これらの溶液を容器に無菌の状態で加える。

培養タンク中の最終濃度を菌糸体で乾燥重量で０．５の
９／〆提供するように調整することを除いては、実施例
１に於けると同様に接種体を生長させ、且つ添加する。
生長条件は温度３０ｏｏ；通気ＩＶＶＭであり、蝿梓器
の速度は、ニュープランスヴィツク社ＤＯ試験法（Ｎｅ
ｗＢｒｕｎｓｗｉｃｋ ＩｎｃＤＯ ｐｒｏｂｅ）によ
って測定して、培養基中の溶解酸素の水準を２５％以上
の飽和値に維持するように調整する。

殺菌した泡止め剤のポリプロピレングリコール２０００
を泡の発生を抑えるに必要なだけ加え、斑を燐酸二水素
カリウム １％水酸化ナトリウム
０．１％硫酸マグネシウム
０．０２５％硫酸第一鉄
０．００１％硫酸亜鉛
０．００１％硫酸マンガン
０．０００５％硫酸鋼
０．００１％ Ｚ泡止め剤のポリプロピ
レングリコール２０００ ０．
０５％生長条件は温度３０ｑｏに保ち、溶解酸素濃度を
培養基ブロスに対して約１０％以上の飽和値になるよう
に通気を調整する。

殺菌した泡止め剤のポリプ ヱロピレングリコール２０
００を泡の発生を抑えるために添加し、殺菌したアンモ
ニャを添加して舟を５．０に維持する。生長期間中に回
収される菌糸体のサンプルは乾燥重量換算で全窒素（Ｔ
Ｎ）８．０乃至８．６％；Ｑ−アミノ態窒素（ＡＮ）６
．亀乃至６．６％ ２を含有する。バッチ方式の培養基
乃至接種体の双方より成っている該複合培養基中に於け
る最初の生長速度は凡そ時間当り０．３である。連続方
式の培養を次の実施例５乃至６で示す。

実施例 ５次のような組成の培養基を調製する。

溶液１ 最終％グルコー
ス ３．０硫酸アン
モニャ ０．２５燐酸二水素カ
リウム ０．３硫酸マグネシウム
０．０２５泡止め剤、ポリプロピ
レングリコール２００００．０１１５ｐｓｉｇで３脱ふ
間ＰＨ３で殺菌済溶液２ ＭｎＳ０４日２０
０．０００５ＦｅＳ０４７日２０
０．０００５ＺｎＳ０４７日２０
０．０００５Ｃ。

ＣＩ２母Ｌ〇 ０．０００
１ＣｕＳ０４８ＬＯ ０．
０００１Ｎａ２Ｍｏｏ４２ＬＯ
０．０００１１５ｐｓｉｇで１粉ご間殺菌済溶液３ 猿過により殺菌されたビタミン及び／又はアミノ酸。

これら全ての溶液を必要であれば８．５そのケモスター
ト中に無菌的に添加する。

該ケモスタート中に於ける生長の条件は下記の如くであ
る：殺菌した苛性カリ溶液の添加により６．０乃至６．
３の間に維持する。生長速度（時間当り） （ｉ）殺菌７を省いたもの（最小限培地）非常にゆっく
り （ｉｉ〕培養基中のビオチンの最終濃度が５０仏＃／そ
であるような溶液７ ０．２『ｉｉ）
培養基中のビオチンの最終濃度が５０ムク／そであり
；塩化コリンのそれが３０雌／夕、メチオニンのそれが
３００の９′そであるような溶液７０．２５実施例 ３ 培養基と条件は実施例２と同じであるが、葡萄糖の代り
に麦芽糖を用いる。

（ｉ）実施例２（ｉｉ）と同じ溶液７ ０
．１８（ｉｉ）実施例２Ｇｉｉ）と同じ溶液７
０．２１実施例 ４次の如き培養基１００〆を調
製し、１３０そのステンレス鋼培養タンク中にて、既に
述べた如く殺菌する。

最終濃度％ 葡萄糖 ４．０コ
ーンスチーブリカー（全固形分５０％） ０．８硫酸
アンモニウム ０．２燐酸二
水素カリウム ０．２ＭｇＳ０
４７日２０ ０
．０２５ＺｎＳ０４７日２０
０．０００５ＦｅＳ０４７日２０
０．０００５ＭｎＳ〇４４日
２〇 〇‐０００１培
養基を、ｐＨ３．０において、１５ｐｓｉｇで３０分間
殺菌し、次いで３０℃に冷却し、殺菌したアンモニアを
添加して柵５．０に調整する。

猿過によって殺菌したビオチンを、最終濃度が４０山タ
′のこなるように無菌的に添加する。

容器に、下記のものを含有する培養基上に、３０℃で１
朝時間スパージ容器中で生長させた培養体１０〆を接種
し、次いで１５ｐｓｉｇで４５分間殺菌し、フーザリウ
ム グラミニアリウム シユバーべ１．Ｍ．１．１４５
４２５（ＦＥＲＭ−Ｐ ＮＯ．３７２１）の胞子懸濁を
接種する。グルコース ２％ト
リブトン（オキソイド） ０．４％酵母エ
キス（オキソイド） ０．１％硫酸アンモ
ニヤ ０．１５温度３０℃
；通気ＩＶＶＭ；充分な調節壁を有する容器中の単一六
翼円盤形タービン０．印で回転率８０仇ｐｍを以つて燈
拝。

フーザリウム・グラミニアリウム・シュバーべの菌株１
．Ｍ．１．１４５４２５（ＦＥＲＭ−Ｐ Ｎｏ．３７２
１）の有機体。殺菌したアンモニャの自動的添加により
５．０に維持したｐＨ。菌 糸体実施例 ６ 次のような組成の培養基を調製する。

％ 豆澱粉（Ｑ−アミラーゼにより処理された） ２夕３
．０（炭水化物として）コーンスチーブリカー
１．３３硫酸アンモニウム
０．２５燐酸二水素カリウム
０．１５硫酸マグネシウム
０．０２５舞０・泡止め剤、ポリプロピレング
リコール２０００（Ｖ／Ｗ）
０．０２５１５ｐｓｉｇにて３晩ご間ＰＨ４
．０で殺菌済ｐＨの変化は３．５と６．０の間であって
、生長速度は、培養期間を通して時間当り０．１である
事を除いては、実施例５と同一の条件下で、８．５リッ
トルのケスタートにて培養を行なう。

次のような結果を得た。実施例 ６‘ｂ） 培養期間を通してｐＨを５．０に保ち、温度変化が２が
ｏと３４ｏｏの間である事を除いては、培養基及びその
条件は実施例６と同じである。

最適温度は３０〜３が０である。０ フーザリウム・グ
ラミニアリウム・シユバーべ１．Ｍ．１．１４５４２５
（ＦＥＲＭ−Ｐ Ｎｏ．３７２１）の５つの変異株又分
離株の培養に関しては実施例７乃至１２に示す。

実施例 ７ 次のような培養基２０仇ｈｉｓを１リットル容量の二重
振とうフラスコ中に調製する。

最終濃度％ 溶液１ グルコース（１帆．ｓ．ｉ．ｇ．にて１庇ふ間
ＰＨ３０で別々に殺菌済） ３．０タ溶
液２ 硫酸アンモニウム ０．５６５燐
酸二水素カリウム １．０ＭｇＳ０４：７
日２０ ０．０２５ＦｅＳ０４：
（ＮＨ４）２Ｓ０４：細２０ ０．０００５ＭｎＳ０
４：４日２０ ０．０００５ＺＣｕ
Ｓ０４：９日２０ ０．０００１Ｃ
。

ＣＩ２：母ＬＯ Ｏ．０００１Ｃａ
Ｃ１２：２日２０ ０．００１５
Ｎａ２ＭＯＯ４２も０ ０．００００
１ＮａＯＨ Ｏ．２
Ｚ１５ｐ．ｓ．ｉ．ｇにて１５分間殺菌済の塩最終ｐＨ
６．０溶液３ 櫨過により殺菌された下記の如きビタミ
ン。これらの溶液を無菌的に添加し、最終容量を２００
地にする。

次いで、フーザリウム・グラミニ２アリウム１一７１．
Ｍ．１．１５４２０９の菌株の洗浄された胞子を該フラ
スコに接種し、濃度を８×１ぴ／凧【とする。生長の条
件は温度３０ｏ０、２インチのスロー（ｔｈｒｏｗ）を
有する軌道シェーカー上で回転率１４仇．ｐ．ｍ．で以
つて行なう。時間毎に区切った場合の生長状態はサンプ
ルの光学密度を６００ｍ山の波長を用いて測定すること
により測定する。

この結果、次のような生長速度が確認された。時間当り
の生長速度 （ｉ）溶液３を省いたもの（最少限済地）非常にゆっく
り （ｉｉ） 培養基に於けるピオチンの最終濃度が５０ム
タ／そであるような溶液３ ０．２２皿 培
養基に於けるビオチンの最終濃度が５０メタ／そであり
、塩化コリンのそれが５０雌′そであるような溶液３
０．２７実施例 ８実施例７の手順
の繰り返しであるが、菌株１−７の代りにフーザリウム
・グラミニアリウム・シュバーべ１一８の菌株を用いる
。

次のような生長速度が確認された。時間当りの生長速度 （ｉ）実施例７（ｉ）と同じ 非常にゆっくり
（ｉｉ） 実施例７（ｉｉ）と同じ
０．２２Ｇｉｉ） 実施例７皿と同じ
０．２７実施例 ９実施例７の手順の繰り返しで
あるが、菌株１−７の代りもこフーザリウム・グラミニ
アリウム・シュバーべ１一９の菌株を用いる。

次のような生長速度が確認された。時間当りの生長速度
（ｉ）実施例７川と同じ 非常にゆっくり（ｉ
ｉ） 実施例７（ｉｉ）と同じ ０
．２１Ｇｉｉ） 実施例７血と同じ
０．２７実施例 １０実施例７の手順の繰り返しであ
るが、菌株１−７の代りにフーザリウム・グラミニアリ
ウム・シュバーべ１一１５の菌株を用いる。

次のような生長速度が確認された。時間当りの生長速度
（ｉ）実施例７（ｉ）と同じ 非常にゆっくり
（ｉｉ） 実施例７（ｉｉ｝と同じ
０．２１凧 実施例７『ｉｉ）と同じ
０．２７実施例 １１実施例７の手順の繰り返しで
あるが、菌株１−７の代りにフーザリウム・グラミニア
リウム・シュバーべ１一１６の菌株を用いる。

次のような生長速度が確認された。時間当りの生長速度
（ｉ）実施例７（ｉ）と同じ 非常にゆっくり
（ｉｉ） 実施例７（ｉｉ）と同じ
０．２１皿 実施例７ｑｉｉ）と同じ
０．２７実施例 １２実施例７の手順の繰り返し
であるが、菌株１−７の代りにフーザリウム・グラミニ
アリウム・シュバーべの親菌株１．Ｍ．１．１４５４２
５（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．３７２１）を用いる。

次のような生長速度が確認された。時間当りの生長速度 （ｉ｝ 実施例７（ｉ）と同じ 非常にゆっく
り（ｉｉ｝ 実施例７（ｉｉ）と同じ
０．２２『ｉｉ）実施例７６ｉｉ）と同じ
０．２７全窒素（ＴＮ）の分析方法自動キ
ェルダール（Ｋｉｅｌｄａｈｌ）ダィジェスター（テク
ニコン）を使用する。

Ａ．Ｆｅｒｒａｒｉ、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ｓｃｈ ８７、
７９２（１９６０）参照。アミノ態窒素（ＡＮ）ＴＮＢ
Ｓ（修正済）の分析方法 は 、Ｍ．Ａ．Ｐｉｎｎｅｇ
ａｒ 、ＴｅｃｈｎｉｃｏｎＳＭｍｐｏｓｌ山ｍｌ９６
５、Ｐ．８０を参照。本発明の実施の別の態様を要約す
ると次の通りである。ｔｌ’食用蛋白質含有物質から成
る物離された増殖有機体を人間又は動物の消費用食料に
混入することを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載
の製造方法。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 食用蛋白質生産性を有するフーザリウム・グラミニ
   アリウム・シユバーベＩ・Ｍ・Ｉ・１４５４２５（微工
   研菌寄第３７２１号）。