JPS58157719A - 生化学的作用物質、該作用物質の調製法及び該作用物質を含有する薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、生化学的作用物質、この物質の調製及びこの
作用ｖ／Ｊ質を含有する薬剤に係わる。

動物飼料中には成長を促進する物質が、より早い成長と
食肉生産の向上とを目赤して投入される。

公知の成長促進物質は抗生物質のグループか、化学的に
製造さわる成長促進剤のグループか、あるいは性ホルモ
ンのグループかに属する。性ホルモンを成長促進剤とし
て動物動！科中に用いることは、特に糧特異性に基づい
て法律上厳県されてお如、従ってこｎ．を避けて他の物
質グループを利用することが提案ざｎ．できた。例えば
最近では、例えばエレウテロコツカス●センテイコサス
（ｇｌｅｕｔｈｅｒＯ　−ｃｏｃｃｕｓ　ｓｅｎｔｉｃ
ｏｓｕｓ）から得られる、適轟たｐ得る特性を臭えた植
物エキス−　゜゛フイトアダプトゲ７　（Ｐｈｙｔｏａ
ｄａｐｔｏｇｅｎｅ　）”一が試験さＶた　（Ｋａｅｍ
ｍｅｒｅｒ　　ｕｎｄ　　Ｍｉｔａｒｂｅｉｔｅｒ　　
、　　　Ｄｅｒｐｒａｋｔｉｓｃｈｅ　Ｔｉｅｒａｒｚ
ｔ　　９　／　１　９　８　０　、　８　。

７４８−７６０）。しかしこの成長促進剤にはその非常
に多大な必賛誓に起因する製造上の限界が存在し、即ち
、例えばドイツ連邦共和国において消費さｎ，る家禽用
配合飼料の僅か１０％に対して】％の上記成長促進剤を
添加する場合、約３　５　０　０　０　０ｋｇのエレウ
テロコッカスの乾燥塊が製造さｎ．ることになろう（上
掲書参照）。しかも上記のような植物エキスの特性は、
栽培及び収穫条件、耕地並びに植物品種に依って変動し
、才だ広大な作付は面積が必要とさわる。

問題になる植物性物質の別のグループは、（ＭａＣｈ。

Ｗ．Ｊ．：　Ｄｉｅ　Ｅｒｎｉｈｒｕｎｇｓｕｍｓｃｈ
ａｕ　７　（　１　９７１　）。

←→Ｓ．２５９ー２６０によわ，は 死後出現する、メラノイジン型のラジカル反応連続生成
物（例えはメイラード反応の反応生成物）である。この
ような物質の認知によって特に褐色千草（Ｂｒａｕｎ　
−　Ｈｅｕ）乃至焦がし千草（Ｂｒｅｎｎ　−Ｈｅｕ）
における死後化合物の化学機構について調査がなされ、
該化合物の畜類の食欲を高める作用は公知である，／　
（Ｈａｎｄｂｕｃｈ　ｄｅｒ　Ｆｕｔｔｅｒｍｉｔｔｅ
ｌ。

Ｂａｎｄ　　１，　　Ｐ　　、　　Ｐａｒｅｙ，　　Ｂ
ｅｒｌｉｎ，　　　１　　９　　６　　７　　）　　が
、そわまでは体系的に適用されていなかった。

褐色乃至焦がし千草の製造方法は確かに制御が困難で経
街上有意義ではないが、その工程が正しく進行するなら
　Ｅｍｍｅｒｌｉｎｇ　　が既に１００年以上前に指摘
し得たように芳香族−キノン形の連続生成物が発生機の
キノンとの反応原理に従って出現し、該生成物はメラノ
イジンのグループにｐＡ−すると見做され、る　（前述
参照）。メラノイジンという仲念は褐変生成物の集合概
念としてあｐ１即ちメラノイジンは例えば神々の食品全
加熱した際にも望ましい、あるいは望才し７くない反応
生成物として出現する（Ｅ：ｒｎ；ｉｈｒｕｎｇｓ　−
Ｕｍｓｃｈａｕ１９７１、Ｓ、２９５’（ｉ−比較参照
さｎたイ）。ここで重要なのは植物性の死後反応連続生
成物の不良に単離され、得る形態（ラジカル縮合生成物
）であり、そわ、らは不対電子を具えた、ＥＳＲ分光器
によって検出さｒ１得る鴇造単位を有し得る。メラノイ
ジンはまた生理学的条件下において、リグニンを含有し
ていわば細物性のバラスト物質からも腸酌によって形成
さワ、得る（　Ｄｉｒｓｃｈｅｒｌ、ＩｔｅｖｕｅＲｏ
ｕｍａｉｎｅ　ｄｅ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｅ　ｌ　、　　
１９６６　）。

丈に、メラノイジンの大きくかつ化学的には僅かにしか
定義さｎていないグループに属する天然物質が比較的少
ヤ１でかつ様々な化学後徊において、：Ｉ−ヒ−ｘ　キ
ス、細菌培養（例えばｂａｃ、　５ｕｂｔｉｌｅｓ。

ｂａｃ、Ｃｏ１１　等）及び下等菌類の培養（例えはア
クチノミセス菌類）にも見出され、る。また人工的にも
６メラノイジン”が、ヒドロキノンの酸化反応によって
、また光放射化学的合成（例えばＵＶ＋チロシン）によ
って眺製され、得る。加えてこのような物質は、一定の
腐植生成物（Ｒｏｔｔｅ　−Ｐｒｏｄｕｋｔｅｎ　）、
泥炭、ビール及び多くの植物エキス中にも見出される。

しかしこれらの原料のはとんどは、経済上の利益ケもた
らさないかまたは化学−物理学的に不適当であるので、
工業的な利用には適さない。

しかし、コーヒー−メラノイジンなどのメラノイジン（
前掲のＥｒｎｉｈｒｕｎｇｓ　−［Ｊｍｓｃｈａｕ　参
照）、いわゆるカルボコツイア（Ｃａｒｂｏ　Ｃｏｆｆ
ｅａｅ）及びチベット酪汁（ｄｅｒ　Ｂｕｔｔｅｒｔｅ
ｅ　ｄｅｒ　Ｔｉｂｅｔｅｒ）が消化管及び代謝作用に
及ぼす人体治療的な効果を解明する詳細な研究によって
、この型の？ｌ！Ｉ質グループ（メラノイジン酸）はそ
の抗へノ（トキシン作用が有用であるだけでなく成長促
進作用を有してもいることが明らかになった。褐色乃至
焦かし千草の、曲知の食欲を増す作用の場合はおそらく
、確実な成長促進効果よりもむしろ感覚生理学的（芳香
）効果の方が間鵬なのである。

５ｃｈｏｌｅによれば（１９８１年１０月２１日にクリ
スハーフエンにて行なわ石た講演に基づく公開）、同化
物質の成長促進作用は本質的に細胞の合成代謝を刺激す
ることに依っており、この刺激は細胞の膜系に存在する
ラジカル形成酵素の活性を制限することによって誘発さ
れ、る。このラジカル形成酵素は合成代謝を、細胞質及
び核のあらゆる合成サイクルに含まわ、る感応ＳＨ酵素
ヲ醒化することによって制限する。ＳＨＩ！Ｉ）素を保
−するために、細胞はレドックス系（例えはグルタチオ
ン系）を具有していなけｎ、ばならない。しかしラジカ
ルを形成する月ｔｆｉ酵素が外部からもたらされる因子
によってブロックされれは、細胞の合成代謝は細胞質及
び細胞核の合成サイクルを１′＾性化することによって
高められる。同化因子としては、そｎ自体が活性なレド
ックス系（′￥ｌＬ子供与体−電子受容体系）を明示す
る物質が考慮の対象となる。高めらｒ１５た合成代謝は
、よｐ多くのエネルギ量ヲアデノシン三リン酸（ＡＴｐ
）の形態で必嶽とする。

このエネルギを保証するべく、合成代謝が高めらｎ、る
と生体内でホルモンの逆反応が誘発される。

異化作用を行なう副腎皮質ホルモン並びにチロキシンが
貯蔵物質の分解を、またそわによってＡＴＰの供給を司
る。従って細胞は、ある同化因子か合成式１Ｉｌｔを抑
制する酵素ラジカルを減少させ、そｎ。

と同時に複数個の異化因子が十分なＡＴＰを供給しても
ホルモンまたはその他の余分な異化反応が生起しない場
合に、最も望才しい成果に達し得るであろう。

細物性の成長促進剤の実験上把握され得る代謝調整作用
（アダプトゲン作用）は、異化活性の構成要素と同化活
性の構成要素の共存を基礎とすることが今や判明した。

実験によりは、動物飼育に適した他物性成長促進剤の同
化及び異化活性全適切に調整することは絶対的な前提条
件である。

こイ１．らの実験に基づき、新たに水浴性メラノイジン
（メラノイジン酸のアルカリ塩は陽イオン交換稜、ｐｌ
（領域７．０〜５０において真に水溶性である物質を形
成する）の研究を行なったところ、篤くべきことに次の
事が明らかになった。卵ち、ラジカルの縮合反応の芳香
族−キノン形であり再吸収さｎ、得る連続生成物（ＦＯ
Ｉｇｅｐｒｏｄｕｋｔｅ）　カ重要である、同化活性及
び異化活性の構造単位を有するリグニンのメラノイジン
の同化及び異化活性は、異化活性を一定限度抑制するこ
とによって、制御し平衡化（適切に調整）することがで
きるという事実である。同化活性及び異化活性をこのよ
うに制御し平衡化せずには動物飼育における永続的な成
長促進は、リグニンのメラノイジン全成長促進剤として
用いることによっては達成さｎ、ない。また、本発明に
適した木質天然物質の石炭化物（Ｉｎｋｏｈｌｕｎｇｓ
ｐｒｏｄｕｋｔｅ　Ｉｉｇｎｏｉｄｅｒ　Ｎａｔｕｒｓ
ｔｏｆｆｅ）はキノン形構造単位、即ちキノン形、セミ
キノン形及びキンヒドロン形の構造学位を有し、またＥ
ＳＲ分光器によって検出さｎ、得る不対電子を持ってい
ることも判明した。

従って本発明は、高等生物の細胞内代謝及び全身性代謝
に影響を及ぼす、同化生物活性（ａｎａｂｏｌｅｒＢｉ
ｏａｃｔｉｖｊｔ：ｉｔ）を有する生化学的作用物質の
提供を目的とし、この作用物質は脱陽イオン化されたア
ルカリ塩の形態（ｉｎ　Ｆｏｒｍ　　ｅｎｔｋａｔｉｏ
ｎｉｓｌｅｒｔｅｒＡｌｋａｌｉｓａｌｚｅ）で存在す
る、木質天然物質の水飽性でかつ陪”性である石炭化物
から成り、この石炭化物の異化活性は微重金属イオンと
の反応によって一定限度抑制されていることを物像とす
る。

本発明はまた、この作用物質の、１＃！ｌ製方法及びこ
の物質を含有する薬剤をも目的とする。

上記の生化学的作用物質物質を眺製するには、広乗樹、
針葉樹または木木科他物などのリグニンを含む天然物餉
の天然または人工の石炭化形態′ｆｆ５〜３５℃におい
て、好ましくは１５〜２５℃（例えば室温）において水
酸化アルカリ溶液（ナトリウム、カリウム、リチウム、
アンモニウム、好ましくはカリウム）を用いて抽出する
。次に抽出物から例えは遠心分離苗たは傾夛寥などの適
当な方法によって、真に溶解していない＠濁物質を除去
し、５〜３５℃、好ましくは１５〜２５℃（例えは室温
）において３〜６０日間、好ましくは５〜３０日間貯蔵
する（より長時間の貯蔵は、通常最終生成物の油性がよ
シ僅少となってしまうので避けるべきである）。次いで
末だ強アルカリ性の抽出物（ｐ＋１約１３）全制酸性に
、好ましくはｐＨ値５０から６５に調整する。この調整
は奸才しくは、水素形である強酸性のイオン交換体（例
えばアンノ々−ライトＩｉ’１１２０）’を少しづつ添
加することによって行ない、その際イオン交換体はＰ９
ｒ望のｐＨ値に達した後分離する。続いて弱酸性溶液の
乾煉物質含量を定量する。

次に弱酸性溶液を、微量金属塩溶液と混合する。

後者の溶液は、コバルト、鉄、銅、ニッケル、マンガン
及び／または亜鉛のような主要な微量金属の塩、特に塩
化物の溶液が適当であり、その際コバルト塩がよシ好ま
しい。金属塩溶液の濃度は、好ましくは０１〜０，５ｍ
に達する。金鵬埴の添加によって開始され、る反応の調
ＩＥ（ｉｔ導度測定）から、メラノイジンが添加された
金属イオンと共にキレート錯体を形成することが知得さ
ｎる。ＥＳＲシグナルの強度低下をもたらすこの銘形成
によって、メラノイジンの異化活性の構成要素は明らか
にブロックされる。従って原則としては上記の主賛な＃
當金属の替わシに他の金属も、そわらが生仰学的に安全
であり、かつ異化活性を錯彫成によってブロックし得る
ことを前提として使用可能であり得る。とはいえ上述の
ＭＪＪに照らして、メラノイジンの異化活性を完全にブ
ロックした場合望才しい成長促進は概して得らｎないこ
とが明らかである。故にメラノイジンの金属塩溶液との
反応は、メラノイジンの異化活性が部分的にブロックさ
れ、るように実施さｎ、ることが好ましい。従って６一
定限度の抑制”という概念は本来異化活性の部分的ブロ
ックを意味するものであるが、所与の適用次第では（後
段参照：　？！＋えは＃Ｉ物の種類その他の要素）、異
化活性である構造単位の完全なブロック（ＢＳＲシグナ
ルの墨夾上完全な消滅）も包含し得る。部分的ブロック
は場合によって、ブロックされていない分（旧ｃｈｔ　
ｂｌｏｃｋｉｅｒｔｅＣｈａｒｇｅｎ）と完全にまたは
ほぼ完全にブロックさｎ、た分とを所望の割合で混合す
ることによっても達成され得る。この方法によって調製
は簡略化され１、微量金属塩溶液と混合する抽出物量は
減少される。更にこの方法は、一度最適のブロック度が
見出されたなら、一定のブロック度の作用物質の容易な
磨製を可能にする。

脱イオン化されたリグニンのメラノイジンにおいては極
めて複雑に構成さｎた多様なレドックス系が問題であシ
、その上細胞内代謝調整作用は本来やはシ極めて複雑な
電子生物学的反応連鎖を含むので、この化合物の異化活
性を化学的、定量的に定めること、乃至所与の飼料中酵
数によって表ねされる成長促進作用とキレートに依拠す
る（ｃｈｅｌａｔｂｅｄ’ｉｎｇｔｅｎ）　Ｅ　Ｔ　Ｕ
抑制（本漬構造のｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｔｒａｎｓｆｅｒ
　ｕｎｉｔｓ　＝電子伝達系の存在は、異化活性を確実
化するものとされる）との間に直線的な関係を見出すこ
とは不可能である。

むしろ、所与のメラノイジン型物質と異化活性の金属に
依拠した不活化の度合との間に、純粋に動物実験的に確
立される一致が見出さｎなけｎ、ばならない。ただしど
のような場合にも、使用されるメラノイジンはＥＡＲ分
光器によって検出さｎ、得るフリーラジカルを支配する
ことが前提条件である。即ち、異化活性の概念で問題な
のは定量的かつ化学的に定められる量ではなく生物学的
な活性であシ、この活性は実質的に個々の動物の種類に
、あるいは糠た例えば飼料中μ数のような他の要素に従
属する。換１すｎは、異化活性はＥＳＲシグナルの存在
によって定性的に検出され得るが、定量的、物理的には
把握さｒ＋、得ない。従って才ず上述の方法でリグニン
の石炭化物から様々な金鵬含前の生成物が調製さ石２、
それらは次いで動物実験によって検討される。この方法
では、動物の各種類及び各金属に関し異化活性の最適の
部分的ブロックを、即ち動物の各種類に関して本発明作
用物質の最適金属含量を、出発物質の異化活性が定量的
に測定される心安を伴わずに調べることが可能である。

再現可能な比率を創出するために、上述の方法はすす、
金属塩浴液の添加前にメラノイジン溶液の乾燥物質含蓄
を定量にすることによって実施される。この定量は例え
ば、溶液の試料を赤外線乾燥によって最高７５℃の表面
温度で蒸発させ、残留固形物量を調べることによって行
なゎゎる。次に、予め調べられ、た既知の乾燥物質含量
を有するメラノイジン溶液に濃度の判明している金属塩
溶液を様々な量で添加し、そゎ、にょって、メラノイジ
ンー乾燥物質の金属塩乃至金属イオンに対する　　　　
　　　１比率が様々である試料を得る。動物実験を行な
ったところ、乾燥物質比（乃至本発明作用物質の金属金
蓋）の値が高すぎても低すぎても成長促進作用は全く、
または少なくとも′Ｍ適には表われないことが判明した
。出発物質に亜炭を、微量金属にコバルトン使用してこ
の方法を実施した際、−例を挙げれば、豚に関し飼料中
濃度５ｏ博において最適の成長促進が達成されるために
は乾燥物質比は１７．３（メラノイジン俗液の固形９勿
１ｇ当たシＣｏＣｆｆ１２　・６　Ｈ２Ｏが５８ｍｙ）
でなけｎ、はならないことが明らかになった。

金属塩溶液添加後に倚らｎる反応混合物から本発明作用
物質か、最高７５℃での穏やかな凝縮及び／または凍結
乾燥によって取得される。他の場合には、乾燥はトウモ
ロコシの軸の粉末（Ｍａｉｓｓｐｉｎｄｅｌ　ｍｅｈｌ
）、小麦の二番粉、その他の二次製粉物または通常の無
磯の賦形物質のような適当な賦形材料と共に天施さ眉、
得る。通常、賦形材料の配分は５０〜９５％、好才しく
は８０〜９０チとなる。作用物質のｔｈ！度が比較的高
い場合には、飼料が用いつくされるまで引７．＆き十分
に混合する必要があり、そうしないと飼料中の僅かな作
用物質含量（上段参照、、　ｐｌえば５０ｐ１］１）は
確実に混入され得ない。

出発物質には場合によって、既に前述した他のメラノイ
ジン含有物質も、そｎ、らが十分なフリーラジカル含量
を有し、かつ金属塩浴液との反応によって異化活性の部
分的ブロックを可能にするということを前提条件として
使用され得る。才だ本発明に適したメラノイジン（リグ
ニンメラノイジン酸）は、おがくず才たは粉末薬の生物
技術的変換によって（例えは選別さｎ、た腐植生成物（
Ｖｅｒｒｏｔｔｕｎｇｓｐｒｏｄｕｋｔｅ））　取得さ
れ、得る。更に、例えば人工的な石炭化状物質（石炭化
誘導体）として１石炭化さｎた”広葉樹リグニンか使用
され得、このリグニンは酸素存在下でのアルカリ反応（
過酸化水素）及びコロイド状画分 （ｐｅｐｔｊｓｉｅｒｔｅｎ　　Ｆｒａｋｔｉｏｎｅｎ
、）　　の分離によって取得され得る。

以下余白 次に述べる調製方法によって得られる生成物は、本発明
の特に好ましい実施例として実証された。

亜炭の粉末を室１ｍで０．４ｍのＫＯＨ溶液中に、溶け
ているカリウム塩を攪拌しつつ加え、２４時時間面形物
分離（遠心機、デカンタ）によってアルカリ不溶性成分
を除去する。沈積物は廃棄する。

上澄み液を至温で約２８日間貯蔵し、次いで予めＨ形の
強Ｖ性イオン交換樹脂（アンバーライトＩＲ−１２０ｐ
ｒａｃｔ、）−ｉ用いて強アルカリ性（ＰＨ１２〜１３
）の亜炭アルカリ溶液を脱イオン化し、−値を５．５と
した後に試料を取出し、最高７５℃の表面温度での赤外
線乾燥によって乾燥物質を定緻する。続いて１％の亜炭
メラノイジンは性溶液１００麻に２．４２３ｍＪの０．
１ｍ−４化第−コバルト溶液）：ｊ：２０℃において攪
拌下に付加する。反応を１０分後に終了する。得られる
、亜炭コノζルトキレートを含有した酸性溶液を穏やか
な条件下に、即ち例えば大気中で７５℃以下の温度にお
いて、あるいはまた凍結乾燥によって乾燥状態となし、
更には例えば適当な賦形材料、その他の通常の脩加物及
び別の作用物質と十分混合すること（こよって公知の形
態に刀ロエすることが可能である。有利には賦形材料も
亜炭コバルトキレートｓ液の濃縮以前に添加し得、その
結果亜炭コバルトキレートは乾燥後賦形材料に付着状態
になる。これに関連して、例えば有機賦形剤を用いる場
合は流動層噴射乾燥が非常に好韮しいと判明した。

−値約７．２における冷抽出ｌこよって（例えば粉末試
料３ｇに対して弱アルカリ性にされた脱塩水１００ｍＪ
）亜炭コバルトキレートと賦形材料との混合物から得ら
れる溶液は、約１９０〜５００ｍｍのＵＶスはクトルｌ
こおいて一様な吸収を示し、顕著な極大点は形成しない
。これに対して螢光発光スペクトルは３６９ｎｍと５４
８ｍｍの間にピークを有し、その際４５０ｎｍのところ
に極点が位置し、また５　００　ｎｍのところには良好
に形成された屑が存在する。史に上記の溶液は、メチレ
ンツルーによるレドックス試験の際にメチレンブルーの
吸収スぼクトルを変祇し、即ち極点の位置及びその高さ
が変化し、このことはシト９ツクス反応に基づくロイコ
メチレンブルーの形成を示吠している。

同様をこ、ニュートラルレッドの吸収スペクトルも上記
溶液との反応の際に変更される。他の前述の金属の、同
様の方法で調製された亜炭キレートも同様の結果を示す
。

本発明物質は、ラット及び豚を用いた成長テストをこ８
いて明らかな成長促進作用（ヌルコントロールに比べよ
り多い成長）を提示した。これについては実施例３〜６
において詳細に取扱う。同様の作用は、家需頑、仔牛、
反制動物及゛びその曲の漬粟上の有用動物の場合番こも
厨祭されよう。ここで″有用動物″という載念には、毛
皮供給動、ｌｌｌ！７も包含される。細胞の合成（〜謝
に影響を及ばすことから、本発明作用ｍ賞は代謝障害に
関する人体及び／または動物医療上の適用にも適してい
る。従って、特に種畜の場合（自然の運動の自由の′制
限）、本発明・作用切質を便用づ−ることによって骨が
より良く形成され、また毛皮動物の場合はその上より美
しい毛皮が得られる。人体医療の領域では本発明作用物
質は、例えば運動家の骨折を早く治癒させるのに有用で
ある。

上述の、経口で与え得る付与形ｒｍに°並んで、本発明
による作用物質は注射剤の形態にも、即ち例えば殺閑さ
れた、注射に適した水浴液にも加工され得る。

本発明を、実施例に基づき以下に詳述する。

実施例　１ 粉末亜炭６００ｇを室温で、１０リツトルの０，４ｍＫ
ＯＨ溶液中に、この溶性カリウム塩を攪拌しつつ加え、
２４時間後同形物分離（遠心機、デカンタ）によってア
ルカリ不溶性成分を除去する。

沈積物は！Ａ棄した。４週間後、室温において上澄み液
（遠心分離物）にＨ形の強酸１生イオン交換樹脂（アン
バーライトＩＲ−１２０ｐｒａｃｔ　）　　を少しずつ
添加し、それによって−値を弱酸性の約５．５とした。

イオン交換体を分離後２０ｍ１の試料を取出し、最高７
５℃の表面温度での赤外−乾燥によって、乾燥物質を定
量した。更に、安定なフリーラジカルの存在を制御する
ための試料をＥＳＲ分光学的に調べた。

続いて塩化第一コパル１４１液との反応を、次のような
割合に従って実現した。即ち、２０℃において、１％の
亜炭メラノイジン酸性溶液１００ｍｊにつき礼４２３ｍ
１の０．１ｍ塩化第一コバルト溶液を攪拌下に加える。

亜炭メラノイジン改註溶液はその乾燥物質含量が３．２
９％であったので、上記の指示に従いこの溶液１００ｍ
１に対して塩化第一コバルトの０．１モル浴液７，９７
１ｒｎｌを２０℃において攪拌下に添加した。即ち亜炭
メラノイジン晦液の乾燥物質３．２９ｇ当たりＣ０Ｃｅ
２・６Ｈ２０は０．１８７　、！ｉ’となった（亜炭メ
ラノイジン溶液の乾燥物質１ｇ当たりｃｏｃ１２・６Ｈ
２０は〜５８ｍ９）。

得られた亜炭コバルトキレート酸性溶液は、磁場の強さ
３，３５７．８ガウスにおいてピーク幅４．６ガウスの
Ｅ８Ｒシグナル（単線スはクトル）を示した（　Ｐａ１
ｏ　Ａｌｔｏ　、ＫａｌｉｆｏｒｎｉｅｎのＶａｒｉａ
ｎ社製分光器Ｖａｒｉａｎ−Ｅ−１２’、周波数変調１
００　ｋＨｚ。

マイクロ波エネルギー２　ｍ　Ｗ　）。

亜炭コバルトキレート酸性溶液を、通常の賦形物質を用
い、７５℃よりも低い温度で噴射乾燥によって、あるい
は賦形物質を用いずに、あるいは凍結乾燥によって乾燥
状態となした。残留した試験物質を作用物質として、後
述する動物飼育テストに適用した。

実施例　２ 実施例１に述べられた手順に従い、乾燥物質含量２．８
３％の能炭メラノイジン酸性高液をＡ製した。この溶液
を実施りｕｌに示された条件下に、塩化第一コノマルト
の０．１モル溶液８．５７　ｍｌと混合した。即ち、亜
炭メラノイジン餅液の乾燥物質２，８３ｇ当たりＣｏＣ
１ｒ２・６Ｈ２０は０．２０４ｇとなつｔ、７　（亜炭
メラノイジン溶液の乾燥物＊ｉｙ当たりＣ０ＣＡ！２・
６Ｈ２０は〜７２ダ）。このことは、実施例１における
作用物質のコバルト含量が本実施しＵにおけるよりも約
２０％少なかったことを意味する。

亜炭コバルトキレート酸性浴液の乾燥は、ここでも実施
例１に述べられたようｌこして行なった。

卸しジ Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ系及びＳ　Ｐ　Ｆ　−Ｗ
ｉｓｔａｒ系のラットヲ用いて飼育テストを行なった。

動物たち８７日間にわたって研究所特製の食ｇ（表１参
照）及びテスト条件に適応させ、次いで同品種でかつほ
ぼ等しい出発体重の＊ｍ同士を谷々８〜ｌＯ頭から成る
グループにまとめた。このようにして三つのテストグル
ープを形成し、これらのグループに実施例２によって調
製した作用物質の添加された研究所特製の食１４を任意
に与えた。適量は、予圃テストで決定し、該瀘は飼料１
に／ｉ当たり作用物［３２１夕となった。動物たちの体
重は、テスト開始時には平均約７０ｇであった。各グル
ープには、各々１８乃至１９頭から成る、対応するヌル
コントロールグループを配した。

作用物質は小麦粉に固定し、食餌の中へ混入する時菫で
４℃で貯蔵した。

テスト期間は１７日間に達した。ｌＩｈ物たちの体重を
テスト開始時及び終了時に測定し、作用物質を含んだ飼
料を与入られていた動物の体Ｊ！増加を対応するコント
ロール動物のそれと比較した。結果を第２表にまとめた
。三つのテストグループ内部での、各々のコントロール
グループに比較して優勢な体重増加の平均は、７．８％
、９．９％及び５．７％でめった。

表　　　１ １生鮮飼料“ ４４％　　砿割り小麦 ３３％　　砿割りトウモロコシ １５％　　砿割り大豆 ３％　　脱脂粉乳 ２％　　ムラサキウマゴヤシの生粉末 子） ２％　　混合ミネラル １％　　混合ビタミン １００％ ＋）４０　　　％　　第ニリン酸カルシウムの炭酸塩３
０　　　％　　第ニリン酸カルシウムのリン酸塩２４．
５　　％　岩塩 ５　　　％　　リン酸マグネシウム ０．５　　　％　　微奮元素 Ｆ　ａ　：　Ｃｕ　：　Ｍ　ｎ　：　Ｃ。

５：１，５：１：０，２ １００　　　％ ６生鮮飼料”用混合ビタミン ビタミンＡ　　　　　　　　　　　２０００　　　ＩＵ
ｔｔ　　　Ｂ５　　　　　　　　　　　２０　　　ＩＵ
〃　　Ｅ　　　　　　　　　　　　３０　〜ｔｔ　　　
Ｋ５　　　　　　　　　　　　２　　　’？ｙ　　　Ｂ
１　　　　　　　　　　　　４　　１ダ〃　　Ｂ２　　
　　　　　　　　　６　　ダｔｔ　　　Ｂ６　　　　　
　　　　　　　４　　　＋ｎｇパントテン酸カルシウム
　　　　　　　　３　　　ｔｎｙニコチン酸　　　　　
　　　　　　　　　８ｎジコリン［（Ｃｈｏ１１ｎｓ’
ａｕｒｅ）　　　　　　２００　　１１４葉酸　　　　
　　１　ｔｎ９ イノジット　　　　　　　　　　　１〜ビオチン　　　
　　　　　　　　　８０　〜小麦粉に固定 表　　　２ 増加（肯） ■ テスト動物　　　　９　　　　１０８．０±１４．９　
　　　　７，８醒 テスト動物　　　９　　　　　９５．６±９．４　　　
　　９９テスト動物　　　ＩＱ　　　　　　９１．６＋
１１．８　　　　　５．７友施例　４ 実施例１に従って５ｓ製した作用物質を、実施しＵ３に
述べたテスト条件の維持ドに試験した。テスト期間は２
１日間に及び、配縦は飼料１す当たり作用物質５０〃夕
であった。但しここでは一つの動物グループのみをコン
トロールグループと比較して観察した。

結果を羨３にまとめる。テスト動物の“コントロール動
物に比べて優勢な体重増加の平均は、４．６７％であっ
た。

増力口（ジｂ　） コントロール 動ｖ！Ｊ２０　　１１９・９ｉニア・２テスト動物　　
　１０　　　　１２５．５±４．５　　　４．６７−３
１　一 実施例　５ 本発明作用物質を、実施例１に述べた方法に従って調製
した。但しカリウム亜炭溶液を脱イオン化前（こセファ
デツクスーモレキュラーシーゾのカラムクロマトグラフ
に掛け、ＭＧが２４，０００より大である両分を廃莱し
た。このようにして得たカリウム亜誕の異化をブロック
するのに、実施例１に述べたものより約り５％少ない塩
化第一コバルトを使用した。最終生成物を得るためのそ
の他の方法段階は、実施例１のものと同様であった。

調製物を、実施例３に述べたテスト条件の維持下に試験
した。

配ｔは、飼料／　ｋ１当たり作用物質が１４■であった
。テスト結果を表４にまとめる。三つのテストグループ
の内部での、各々のコントロールグループに比較して優
勢な体重増加の平均は５．０％、９．１％及び４．９％
であった。

−３２− 表　　　　４ 増加（１０） ！ テスト動物　　　　９　　　　１０６．Ｏ±　９．３　
　　　　５．Ｏテスト動物　　　　　９　　　　９４．
５−＋　１４．４　　　　　９．１テスト動物　　　　
９　　　　９０．９＋　　９．０　　　　　４，９実施
例６ 平均開始時体−１ｚ１５Ｋ）の市、暢用仔豚を用いて豚
肥育テストを行なった。動物は諾て１軒の家曲小屋内の
敷端上に、５頗ずっ組にして収容した。銅材及び水は任
意に与えた。１頭当たりの平均体貞まで岐路肥育飼料を
与えた（表５参照）。

各々雄及び雌の動物５頭から成る１ｍを、一つのテスト
グループに統合した。このグループに、１ｑにつき実施
例１の作用物質５　Ｑ　＋９　ｆ添／Ｊ１１した飼料を
与えた。調換物は、１６．７’％のトウモロコシ１紬粉
と８３．３％のトウモロコシグルテン飼料トから成る賦
形物質に固定され６微細な″形態であり、１史用時まで
４℃で貯蔵しておいた。

動物９頭のグループをヌルコントロールグループとして
用いた。このグループの動物の飼料には、対応する暖の
賦形物質のみを添加した（表５参照）。

更にポジティブコントロールグループ（Ｐｏｓｉｔｉｖ
ｅ−Ｋｏｎｔｒｏｌ　Ｉｇｒｕｐｐｅ　）を設け、この
グループの動物の飼料には、Ｍ料１　ｋｙζζつき本発
明作用物質の替わりに２０ｍ９の抗生物質を添加した。

以下余白 表　５　：　飼料の組成 １痕割リオート麦’　　　　　　　５，００　　　１５
，００砿割りトウモロコシ　　　　７，００　　１０，
００４割り小麦　　　　　　　　２４，００　　　１９
，００頒割り大豆　　　　　　　１７，５０　　１１．
００ふすま　　　５，７０　１５，００ 祖タンノぞり賞（％）　　　　１６，６　　　　　１４
．６粗　繊　維　（％）　　　　４，７　　　　　５，
５全栄＃累　　（−７ｏ）　　　７１，１　　　　６９
．６−３５− ビタミ７Ａ　　　（ＩＵ）　　　　　　　　２０００／
’　　　Ｄ５　　（ＩＵ）　　　　　　　　　　４００
／／　　　Ｅ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
３／／　　　Ｂ　１　　　　　　　　　　　　　　　０
　、４ｔｔ　　　１３２　　　　　　　　　　　　　　
　１，２／／　　　５３６　　　　　　　　　　　　　
　　Ｑ　、　８／／　　　Ｂ１２（μｆＩ）　　　　　
　　　　　４ｔｔ　　　Ｋ３　　　　　　　　　　　　
　　０，８パントテン酸カルシウム　　　　　　　　　
２，４ニコチン酸　　　　　　　　　　　　８葉　　酸
　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２イノジツト
　　　　　　　　　　　　　１ビオチン（μｇ　）　　
　　　　　　　　８０−５６− テスト期間は１２３日間であった。動物たちの体重はテ
スト開始時と、その陵週に１度の割で測定した。テスト
動物の体重増加の展開を、ヌルコントロールグループ及
びポジティブコントロールグループと比較した。テスト
結果を表６及び第１図に示す。

表　　　６ な増加（％） 実施例１に従って調製した作用物質はテスト終ｒに至る
まで、ヌルコントロールに比べて約５％優勢な体重増加
をもたらし、一方抗生物質コントロールはヌルコントロ
ールとほぼ一致したところで終息した。テスト結果をグ
ラフによって示す第１図から明らかに知見されるように
、テスｌ−、４１週の同は抗生′＋／Ｊ質が２０％の優
勢増加をもたらす一方、本発明作用′１質による優勢増
加は１０％にすぎなかった。しかし抗生物質にＩＡする
値はｉ＆終肥育の開始に至るまでに既にヌルコントロー
ルと等しくなるが、−万事発明による作用物質と共に調
料を与えられたグループは偲じて約５％の曖勢増加をテ
スト終了時まで維持し傅た。

抗生＊質の作用は恐らく、７週１司から８週間の内に緩
やかに始才るコルチコステロイド生成物乃至チロキシン
生成物の増加によって補償され、−万事発明による作用
物質の場合ｌこおいては明らかに、持続する優勢増加を
抑制する内生的な異化因子供給が、組織非特異性の異化
因子が同時に導入されることによって圧倒（ｕｎｔｅｒ
ｌａｕｆｅｎ）される。

実施例　７ 粉末亜炭１０２ｇを室温で１，７００１１１Ａ！の０．
３ｍ水酸化カリウムｍ液に、この温性カリウム塩を攪拌
しつつ加え、２４時＋ＩＪＪ後固形物分＊Ｃ４心機）に
よってアルカリ不溶性成分を除去した。沈積物を廃棄し
、浴液を２８日間室温で光を連断して貯蔵した。その後
溶液を、アンバーライト−Ｉ　Ｒ１２０ｐｒａｃｔ、　
（Ｈ形）を少しずつ添加することによってｐＨ値５．５
とした。イオン交換体分離後に得た１００ｇの試料は、
乾燥吻合ｉｉ３，９３％（Ｇ／Ｇ　）を提示した。

このようにして得られたｍｆＬの、谷々２５０ｙずつで
ある一部分を櫨々の金属塩ｍ液と混合し、続いてＥＳＲ
分光学的に分析した。この過程は次のとおりである。

ａ）コントロール（金Ｈ４を添加していない亜炭溶液） ｂ）　４化第−コバルト浴液との反応：亜炭溶液（２５
０，９）に塩化第一コバルトのｏ、ｉモル溶液２３．９
５ｄを２０℃で撹拌下に添加し、それｌこよって実施例
１同様、亜炭浴液の乾ｍ吻質１ｇ当たりＣｏＣＡ２ｅ６
Ｈ２０は約５８ｍｇ）となった。塩化第一コバルト浴液
添加後金活性は、浴液２７３．９５９中１０．１３ｇと
なり、これは乾゛繰物責合祉３．７０　ｉｎ　（Ｑ／Ｇ
）に相当する。

Ｃ）塩化第一ニッケル漬液との反応： 亜炭溶液（２５０ｇ）を２３．９５１ｎｌの０．１ｍ塩
化第一ニッケル溶液と２０℃で攪拌下に混合し、それに
よって、亜炭ｍ液の乾燥物質１ｐ当たりＮｉＣ７２・６
Ｈ２０は５７．９５Ｉｎ９となった（ｂ）のコバルトと
等分子ｔ）。

塩化第一ニッケル浴液添加後金活性は、浴液２７３．９
５ｇ中１０．１３ｇとなり、これは乾燥′ａ質責合　３
．７０　’ｆｏ　（Ｇ　／　Ｇ　）に相当する。

ｄ）硫酸第一鉄溶液との反応： 亜炭浴１（２５（１）を２３．９　ｔｎｌの０．１ｍ硫
酸第一鉄溶液と２０℃で攪拌下に混合し、それによって
亜炭溶液の乾燥物質１ｐ当たりＦａＳ０４＊７Ｈ２０は
６７．７５１Ｑとなった（ｂ）のコノ々ルトと等モル）
。硫酸相−鉄溶液添加後全活性は、溶液２７３．９９中
１０、１９　ｇとなり、これは乾燥物質含１ｄＨ３，７
２％（Ｇ／Ｇ　）に相当する。

ｅ）　　ｄ）において述べたようにして、亜炭浴液（２
５０１を０．１ｍ硫酸第一鉄溶液で処理した。但し鉄含
量を２０％はど高めるため、ここでは２８．７３１ｎ９
の硫酸第一鉄溶液を添加し、それによって亜炭溶液の乾
＊＊＊　１ｐ当たりＦｅＳＯ４”７Ｈ２０は８１．３ｐ
となった。

＠！＃Ｒ第一鉄の添加後金活性は溶液２７８．７３ｇ中
１０．２５ｇとなり、これは乾燥物責合ｊｔ３．６８％
（Ｇ／Ｇ　）に相当する。

種々の金属塩ｍ液との反応後に得た亜炭キレートｄ液を
、ＥＳＲ分光学的に（分光器Ｍａｒｊａｎ　−Ｅ−１２
）分析した。その際上記の檀々の生成物に関して次表に
示すようにＥＳＲＩＮ号の相対強度が明らかになった。

表　　７ 生成物　　　　　ＥＳＲ信号の相対強度ａ　　　　　　
　　　７６３ ｂ　　　　　　　　　５３０ ５９ ｄ　　　　　　　　　３８０ １６ ６参照）を示すグラフである。

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）高等生物の細胞内代謝及び全身性代謝に影響を及
   ぼす、同化生物活性を有する生化学的作用物質であって
   、脱陽イオン化されたアルカリ塩の形態で存在する、木
   質天然物質の水浴性でかつ酸性である石炭化物から成り
   、この石炭化物の異化活性は微量金属イオンとの反応に
   よって一定限度抑制さ石、ていることを特徴とする作用
   物質。
2. （２）異化活性がコバルト塩との反応によって一定限度
   抑制さｎていることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   に記載の１負
3. （３）乾燥ベースの１グラム当だ９５〜５０〜、好まし
   くは１３．０〜１７．５■のコバルトを含有することを
   特徴とする特許請求の範囲第２項に記載の物質。
4. （４）木質天然物質の石炭化物を水酸化アルカリ溶液で
   処理し、得られた溶液から真に溶解していない懸濁物置
   を除去し、更に （ａｌ　　この溶液のｐＨ値を弱酸性を示す値に調整し
   、 ｆｂ）　　この弱師性爵液を、リグニンの石炭化物の異
   化活性を一定限度抑制するのに十分な童の微量金極塩浴
   液と攪拌下に混合し、及び ｆｃｌ　　得られた反応混合物を、場合によっては作用
   物質に適した賦ル材料を添加した後最尚７５℃で乾燥す
   る ことを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の作用物
   質のｖ部製方法６
5. （５）天然の石炭化物として亜炭を使用することを特徴
   とする特許請求の範囲第４項に記載の方法。
6. （６）段階（ａ）　　でのｐＨ値調整を、水素形である
   強酸性のイオン交侠体を少しずつ添加することによって
   実現することを特徴とする請求の範囲第４項または第５
   ｙ４に記載の方法。
7. （７）段階（ａ　）においてｐＨ値を５．　０　〜６．
   　５にｉＪＡＩ整することを特徴とする特許請求の範囲
   第４項乃至第６項のいず石，かに記載の方法。
8. （８）微量金属塩電液として、コバルト塩、鉄塩、銅塙
   、ニッケル塩、マンガン塩及び７才たけ亜鉛地の溶液を
   使用することを特徴とする特許請求の範囲第４項乃至第
   ７唄のいずれかに記載の方法。
9. （９）賦形材料として、トウモロコシの軸の粉本小麦の
   二番，粉、その他の二次製粉物または通常の無機の賦形
   物質を使用することを特徴とする特許請求の範囲第４項
   乃至第８項のいず石かに記載の方法。 ００）”段階（Ｃ）で凍結乾燥することを特徴とする特
   許請求の範囲第４項乃至第９項のいす石かに記載の方法
   。 Ｑｌｌ　　高等生物の成長促進乃至代謝抑制に適用する
   ための薬剤、特に飼料添加剤または注射剤であって、場
   合によっては通常の添加物、補助物備及ひ／または賦形
   材料を含有し、更に特許請求の範囲第１項乃至弟３項の
   いずｒｌかに記載の作用物質を単独で、または他の作用
   物質との組合せで含有することを特徴とする薬剤。