JPH11505519A - ガランタミンの分離方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明はアルカロイドガランタミン(galanthamine,下記化学式(I)で示される)の分離方法、この方法により製造されるガランタミン、ガレヌス製剤で製造されたガランタミンの使用、及び狭角緑内障、アルツハイマー病、アルコールやニコチン依存症の治療のために作られたガランタミンを提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 ガランタミン(galanthamine)の分離方法 本発明は、アルカロイドガランタミンの分離方法、この方法によって製造され るガランタミン、ガレヌス製剤で作られたガランタミンの使用方法、及び狭角緑 内障、アルツハイマー病、アルコールやニコチン依存症の治療のために製造され たガランタミン(galanthamine)に関する。 ガランタミン（4a,5,9,10,11,12-ヘキサヒドロ-3-メトキシ-11-メチル-6H-ベ ンゾフロ(3a,3,2-ef)-(2)ベンゾアゼピン-6-オール）は、その薬理学的性質上、 逆作用のコリンエステラーゼ阻害薬の群に属する四環式アルカロイドである。そ の効果は、フィゾスチグミンやネオスチグミンと類似するが、モルヒネに匹敵す る高い鎮痛作用を有するといった独自の性質も持つ。フィゾスチグミンやネオス チグミンほどの毒性がないため、コリンエステラーゼ阻害薬に比べ、その治療範 囲は３〜６倍広範である。この利点は、投薬量の割にコリンエステラーゼ阻害効 果がやや弱いという点を補っている。ガランタミンは脊髄性小児麻痺や他の神経 系の疾病に使用されるが、狭角緑内障の治療やクラーレ適用後の解毒剤として主 に使用される。アルツハイマー病の治療におけるガランタミンの使用は試験段階 にある。最近、アルコールやニコチン依存症の治療にも使われていることが述べ られている（DE-OS 40 10 079，DE-OS 43 01 782）。 アルツハイマー病、アルコールやニコチン依存症、狭角緑内障の治療は、持続 型の剤型が必要である。狭角緑内障の治療については眼軟膏剤がこれを可能とす る。アルツハイマー病、アルコールやニコチン依存症の治療に、複雑な治療計画 や時間のかかる点滴が適していないことは言うまでもない。これらの疾病には、 例えば、DE-OS 43 01 783に記載されているような経皮吸収型製剤(TTS)が適して いる。無傷の皮膚も角膜も作用物質塩を吸収できない。このため、アルツハイマ ー病、アルコールやニコチン依存症、狭角緑内障の治療には、軟膏剤またはTTS の剤型でガランタミン水素酸塩またはガランタミン塩酸塩を使用することは不可 能である。従って、純粋なガランタミン基剤を使用しなければならない。 ３つの光学活性炭素原子をもつ四環式の複雑な構造のため、経済的に効率の良 いガランタミン基剤の合成は不可能である。この理由から、ガランタミンは通常 ヒガンバナ科の植物、例えば、スノードロップやロイコジャムエスティバム（Le ucojum aestivum）などのガランタス（galanthus）種から分離される。これらの 植物は、僅量のアルカロイドを伴い、濃度０．３％までのガランタミンを含むと いう利点を持つ。そのため、DE-PS 11 93 061記載の抽出方法を使うことができ る。しかし、ガランタス種もロイコジャムエスティバムも保護されている。一方 、DE-PS 11 93 061に記載の抽出方法は好ましくは、毒物学的理由から評判の悪 いクロロヒドロカーボンを使用する。それゆえに西洋諸国の薬局方では残留クロ ロヒドロカーボン量を１０ppm未満とすることを要求している。従って、薬物の 調剤においては、クロロヒドロカーボンはできる限り避けるべきである。尚、公 知の方法においては、樹脂質の物質と一緒に存在するアルコロイドを確実に分離 するために、溶媒抽出物はアルミナに吸着されなければならない。ろ過によりア ルミナを取り除いた後得られた溶液から、ガランタミンをガランタミン水素酸塩 によって精製する。ここでハロゲン塩の処理も行う。軟膏剤またはTTSで使用さ れる際には、その後更にガランタミン基剤が、このガランタミン水素酸塩から遊 離されなければならない。 従って、本発明は、従来技術の欠点を持たないガランタミンの分離方法と精製 方法を提供することを目的とする。特に、精製は容易化され、クロロヒドロカー ボンの使用、ガランタミン塩を使っての精製は省略される。本発明においては、 その目的は、請求項１を特徴づける方法によって達成される。好ましい実施形態 はサブクレームによって特徴づけられている。 詳しくは、本発明の主題は、農業的に培養されたヒガンバナ種からまたは通常 「雑草」とみなされ、保護されていない種から取り出された生物物質、好ましく は植物の鱗茎からガランタミンを分離する方法である。これらのヒガンバナ種に は、例えば、スイセン、ハマユウ種がある。特に最適なのは、スイセン属プソイ ドスイセン「カールトン」（Narcissus pseudonarcissusu "Carlton"）または、 アジア産翠縁植物ハマオモト属アマビル（amabile）である。これらの植物に含 まれるガランタミンの量は保護されている植物に含まれている量のわずか１０分 の１で、さらに、最高１２のアルカロイドを伴っているにもかかわらず、本発明 の方法はガランタミン基剤をそれらの植物から分離し、あわせて薬物での使用に 適する精製をすることを驚くほどに可能にした。 本発明によれば、ガランタミン含有生物物質、好ましくは、粉砕されアルカリ 粉末、好ましくは苛性ソーダペレット剤、ソーダ、カリウムもしくは生物物質か ら塩基を遊離し、薬理学的活性物質を調整するのに適した類似の塩と混合された 生物物質を毒性的に安全な有機溶媒を用いて抽出し、その抽出されたガランタミ ンを液・液抽出の手段によって精製する。本発明の方法を成功させるためには、 液・液抽出の第一段階のpH値を維持することが特に重要である。液・液抽出は第 一段階ではpH値約４で行われ、第二段階ではpH値約９で行われる。pH値を調整す るためには濃縮されたアンモニアの他に、他の塩基のソーダ溶液を使用してもよ い。毒性的に安全な溶媒として、ジエチルエーテルまたはスペシャルボイリング ポイント（special boiling point）ガソリンが使用される。好ましくはスペシ ャルボイリングポイントガソリンが使用される。それとともに特定の予備的精製 が可能である。溶媒が取り除かれ、ガランタミンは最適な溶媒、好ましくはイソ プロパノールから再結晶化される。融点１２９〜１３０℃のホワイトガランタミ ン基剤が得られる。こうして得られたガランタミンの純度をＨＰＬＣ−クロマト グラム（図２）に示す。 DE-PS 11 93 061記載の従来の方法は少量のガランタミンと、１２に及ぶアル カロイドを伴っている生物物質からガランタミンを分離するのには適さないこと がわかったため、この結果は驚くべきものである。DE-PS 11 93 061 に記載され ている方法は、破壊できないエマルジョンに帰着するものであるため、抽出は不 可能である。HPLC-クロマトグラム(図１)によれば、若干変形された方法は、残 留物が少なくとも４つの物質で混成されている油性残物に帰着するものである。 従って、フリーなガランタミン基剤が純粋な形態で、高歩どまりで、多数のア ルカロイド伴っている他に少量のガランタミンを含む生物物質から、アルミニウ ム酸化物への追加的吸着工程なしの簡単な手段で分離することができる。 本発明によって作られたガランタミン基剤は、狭角緑内障、アルツハイマー病 、またはアルコールやニコチン依存症の治療に使用できる。更に、本発明により 製造されたガランタミン基剤は、上記疾病の治療にも使える眼軟膏剤や経皮吸収 型製剤などのガレヌス製剤で使用してもよい。 以下、実施例を用いて、本発明をより詳しく説明するが、これらに限定される ものではない。実施例１（比較） DE-PS 11 93 061に記載された方法に従って、空気乾燥され、粉砕されたスイ セン属プソイドスイセン(Narcissus pseudonarcissus)「カールトン」(Carlton) の鱗茎１０kgを、２．５リットルの８％アンモニア溶液とよく混合する。混合物 質は膨張し、材料全体がペースト状になる。抽出用のジクロロエタン２３リット ルを追添加し、破壊されない安定なエマルジョンを作り出す。実施例２（比較） 従来技術（DE-PS 11 93 061）で知られるガランタミンの分離方法を修正する 。空気乾燥され、粉砕されたスイセン属プソイドスイセン「カールトン」の鱗茎 １０kgと４００gの炭酸ナトリウムとをよく混合する。２３リットルのジクロロ エタンを追添加する。その混合物を１０時間放置した後、溶媒を別の容器に移し 替える。鱗茎を再び、２〜３時間後に取り出した２３リットルのジクロロエタン に一旦に入れる。その後、１７リットルのジクロロエタンと鱗茎との３度目の混 合を行う、しかし、これはすぐに移し替える。混合されたジクロロエタン抽出液 は１０％の硫酸(それぞれ２×６００ミリリットル、２×３００ミリリットル)に よって抽出する。酸性の抽出液を混合し、ジエチルエーテルを分離することによ って少量のジクロロエタンを精製する。攪拌しながら、１５〜２０℃に冷却し、 その後２５％のアンモニア水溶液約２００ミリリットルをアルカリリトマス反応 を示すまで加えていく。pHは７〜８の範囲である。従来技術との違いは、一緒に 存在するアルカロイドが沈殿しないことである。アルカリ溶液を塩で飽和させ、 ジエチルエーテルで抽出する。エーテルを蒸発後、ごく僅かの残留物が残る。そ れもまた従来技術との相違点である。水相のpH値は、カリウムで飽和することに よって約１４にする。水相はジエチルエーテルによって、繰り返し抽出される。 混合されたエーテル抽出物は蒸発させ、乾燥させる。残ったガランタミン含有残 留物はアセトン（５０ミリリットル）中に溶解される。従来技術と比較すると沈 殿物が全くない。３５０ミリリットルのアセトンを補充し、２００グラムのアル ミニウム酸化物を追添加し、４５分間の攪拌を行う。アルミニウム酸化物をろ過 し、１００ミリリットルのアセトンでそれぞれ２回洗浄する。混合アセトン溶液 を蒸発させ、乾燥させる。１．３グラムの油性残留物が得られる。それをHPLCに よって検査する。そのクロマトグラムを図１に示す。主なピーク、ガランタミン が示される。こうして分離されたガランタミンは、少なくとも４つの物質で混成 されていることが明らかである。実施例３ 空気乾燥され、粉砕されたスイセン属プソイドスイセン「カールトン」の鱗茎 １００kgと４kgの炭酸ナトリウムをよく混合する。その混合物を３等分し、それ ぞれ１５リットルのスペシャルボイリングポイントガソリン８０/１１０に浸す 。その混合物を２４時間放置する。溶媒はそれぞれ２回取り替え、採集し、低真 空下で蒸発させ、乾燥させる。その抽出液を２％の硫酸水溶液に入れ、濃縮され たアンモニア水溶液を使ってpH値を４に調整する。続いてジエチルエーテルによ る抽出を行う。その水相は、濃縮されたアンモニア水溶液を使ってpH値を９にし ている。ジエチルエーテルを使った抽出を５回行う。これらのエーテル破片を 採集し、硫酸ナトリウムによって乾燥させ、蒸発させる。２０グラムのやや黄色 い油性の残留物が得られた。それは熱いイソプロパノールの再結晶である。融点 １２９〜１３０℃の持つホワイトガランタミン基剤１０グラムが得られる。HPLC クロマトグラムにはピークが１つだけ見られる(図２)。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】１９９７年５月１６日 【補正内容】 請求の範囲 ８．生物物質としてヒガンバナの植物成分が使用されることを特徴とする請求項 １〜７のいずれかに記載の方法。 ９．植物成分として鱗茎が使用されることを特徴とする請求項８に記載の方法。 １０．ヒガンバナ科の植物としてスイセン種またはハマオモト種が使用されるこ とを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の方法。 １１．スイセン種としてスイセン属プソイドスイセン「カールトン」(Narcissus pseudonarcissusu "Carlton")が、ハマオモト種としてハマオモト属アマビル（ amabile）が使用されることを特徴とする請求項１０に記載の方法。 １２．請求項１〜１１のいずれかに記載の方法で製造された純度９９％以上の薬 物的性質を持つガランタミン。 １３．請求項１２に記載のガランタミンの内容によって特徴づけられたガレヌス 製剤(Galenic administration)。 １４．眼軟膏剤製造のための請求項１２に記載のガランタミンの使用方法。 １５．経皮吸収型製剤製造のための請求項１２に記載のガランタミンの使用方法 。 １６．狭角緑内障の治療用薬物製造のための請求項１２に記載のガランタミンの 使用方法。 １７．アルツハイマー病の治療用の薬物製造のための請求項１２に記載のガラン タミンの使用方法。 １８．アルコール依存症の治療用の薬物製造のための請求項１２に記載のガラン タミンの使用方法。 １９．ニコチン依存症の治療用の薬物製造のための請求項１２に記載のガランタ ミンの使用方法。 ２０．それ自身公知の補佐薬に加えて請求項１２に記載のガランタミンを含むこ とを特徴とする医薬品。 ２１．局所適用のための請求項２０に記載の医薬品。 ２２．狭角緑内障の治療のための請求項２０または２１に記載の医薬品。 ２３．アルツハイマー病の治療のための請求項２０または２１に記載の医薬品。 ２４．アルコール依存症の治療のための請求項２０または２１に記載の医薬品。 ２５．ニコチン依存症の治療のための請求項２０または２１に記載の医薬品。 ２６．請求項１０に記載のガランタミンまたは請求項２０または２１に記載の医 薬品を使うことを特徴とする人体の治療プロセス。 【手続補正書】 【提出日】１９９８年８月２８日 【補正内容】 （１）明細書の１頁２行目の発明の名称を「ガランタミンの分離方法」と補正し ます。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 クレー，ミルコ ドイツ、デー 35039 マルブルグ、アム シュッツェンプラツ 10 (72)発明者 マトゥシュ，ルードルフ ドイツ、デー 35041 マルブルグ、アム ハーゼンクッペル 18アー

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．ガランタミン(galanthamine)含有生物物質が毒性的に安全な有機溶媒で抽出 されること、及びこの抽出物からガランタミンが液・液抽出の手段によって精製 されることを特徴とするガランタミンの分離方法であって、前記液・液抽出が第 一段階においてpH値約４で行われるガランタミンの分離方法。 ２．前記生物物質が粉砕され、抽出前にアルカリ粉末と混合されることを特徴と する請求項１に記載の方法。 ３．前記液・液抽出が第二段階においてpH値約９で行われることを特徴とする請 求項１または２に記載の方法。 ４．アルカリ粉末として炭酸ナトリウムが使用されることを特徴とする請求項１ から３のいずれかに記載の方法。 ５．毒性的に安全な有機溶媒として、ジエチルエーテルまたはスペシャルボイリ ングポイント（special boiling point）ガソリンが、好ましくはスペシャルボ イリングポイントガソリンが使用されることを特徴とする請求項１から４のいず れかに記載の方法。 ６．得られたガランタミンは最適な溶媒が再結晶化したものであることを特徴と する請求項１から５のいずれかに記載の方法。 ７．溶媒としてイソプロパノールが使用されることを特徴とする請求項６に記載 の方法。 ８．生物物質として植物成分、好ましくはヒガンバナの鱗茎が使用されることを 特徴とする請求項１から７のいずれかに記載の方法。 ９．ヒガンバナ科の植物としてスイセン種、好ましくはスイセン属プソイドスイ セン「カールトン」、またはハマオモト種、好ましくはハマオモト属アマビル（am abile）が使われることを特徴とする請求項１から８のいずれかに記載の方法。 １０．請求項１から９のいずれかの方法によって製造されたガランタミン。 １１．ガレヌス製剤での請求項１０に記載のガランタミンの使用方法。 １２．眼軟膏剤での請求項１０に記載のガランタミンの使用方法。 １３．経皮吸収型製剤での請求項１０に記載のガランタミンの使用方法。 １４．狭角緑内障の治療のための請求項１０に記載のガランタミンの使用方法。 １５．アルツハイマー病の治療のための請求項１０に記載のガランタミンの使用 方法。 １６．アルコール依存症の治療のための請求項１０に記載のガランタミンの使用 方法。 １７．ニコチン依存症の治療のための請求項１０に記載のガランタミンの使用方 法。 １８．それ自体公知の補佐薬に加えて請求項１０に記載のガランタミンを含むこ とを特徴とする医薬品。 １９．局所適用のための請求項１８に記載の医薬品。 ２０．狭角緑内障の治療のための請求項１８または１９に記載の医薬品。 ２１．アルツハイマー病の治療のための請求項１８または１９に記載の医薬品。 ２２．アルコール依存症の治療のための請求項１８または１９に記載の医薬品。 ２３．ニコチン依存症の治療のための請求項１８または１９に記載の医薬品。 ２４．請求項１０に記載のガランタミンまたは請求項１８または１９に記載の医 薬品を使った人体の治療方法。