NO316380B1 - Fremgangsmåte for ekstrahering av galantamin, det derved oppnådde galantamin, galeniske preparatformer, anvendelse av galantamin samtfarmas degree ytisk preparatinneholdende galantamin - Google Patents

Description

Gjenstanden for foreliggende oppfinnelse er en fremgangsmåte for ekstrahenng av alkaloidet galantamin, det ved denne fremgangsmåten fremstilte galantaminet selv, anvendelsen av det derved fremstilte galantaminet i galeniske preparatformer, de galeniske preparatformene samt farmasøytisk preparat inneholdende galantamin

Galantamin (4a,5,9,10,ll,12-heksahydro-3-metoksy-ll-metyl-6-H-benzofuro-(3a,3,2-ef(-(2)-benzazepin-6-ol) er et tetracyklisk alkaloid som på grunn av de farmakologiske egenskapene tilhører gruppen av reversibelt virkende chohnesterase-hemmestoffer, og i sine virkninger står nær fysostigmin og neostigmin Det har imidlertid også egne spesifikke egenskaper, som eksempelvis med morfin sammenlignbare sterke analgetiske virkninger Som chohnesterasehemmer har galantamin, på grunn av den sammenlignet med fysostigmin og neostigmin lavere toksisitet, en 3 - 6 ganger større terapeutisk bredde Denne fordelen oppveier den doserelaterte noe lavere chohesterase-hemmevirkningen Galantamin anvendes ved poliomyelitt og forskjellige sykdommer i nervesystemet, hovedsakelig imidlertid ved behandlingen av trangvinkel-glaukom og som antidot etter curare tilførsler Fortrinnsvis anvendes galantamin ved Alzheimers sykdom I den senere tid er også behandlingen av alkohol- og nikotin-avhengighet beskrevet (DE-OS 40 10 079, DE-OS 43 01 782)

Såvel behandlingen av Alzheimers sykdom, alkohol- og nikotin-avhengighet som også trangvinkelglaukom krever legemiddelformer som er langvarig virksomme og tilpasset de spesielle omstendighetene Som sådan er ved behandling av trangvinkelglaukom en øyensalve nærliggende Tungtveiende terapeutiske fremgangsmåter og vedvarende infusjoner kommer av nærliggende grunner ikke på tale for behandling av Alzheimers sykdom, alkohol- og nikotin-avhengighet Ved disse sykdommene anvendes derimot et transdermalt terapeutisk system (TTS), som eksempelvis beskrevet i DE-OS 43 01 783 Hverken den intakte huden eller cornea av øyet tillater en resorpsjon av virksomme salter Galantaminhydroklond eller galantaminhydrobromid kan følgelig ikke anvendes ved behandling av trangvinkelglaukom, av Alzheimers sykdom eller alkohol- eller nikotin-avhengighet med salter eller TTS Av denne grunn må følgelig den rene galantaminbasen anvendes

På grunn av den kompliserte tetracykhske struktur med tre optisk aktive karbonatomer er en økonomisk syntese av galantaminbasen ikke mulig Galantamin isoleres følgelig overveiende fra planter av amaryllidaceen, eksempelvis av galantus-arter som sneklokker eller Leucojum aestivum Disse plantene har riktignok den fordelen at de inneholder galantamin i konsentrasjoner på inntil 0,3 %, ved samtidig lav andel av bialkaloider, slik at den i DE-PS 11 93 061 omtalte ekstraksjonsrfemgangsmåten kan finne anvendelse Såvel Galantus-artene som også Leucojum aestivum står imidlertid under naturbeskyttelse For det andre anvender den i DE-PS 11 93 061 omtalte ekstraksjonsfremgangsmåte fortrinnsvis klorerte hydrokarboner som av toksikologiske grunner er kommet i vanry Legemiddelhåndbøker i den vestlige verden krever følgelig at restinnholdet av klorerte hydrokarboner begrenses til mindre enn 10 ppm Anvendelsen av klorerte hydrokarboner bør følgelig i størst mulig grad unngås ved tilveiebringelsen av legemiddelstoffer Videre må ved den kjente fremgangsmåten oppløsmngsmiddelekstraktet adsorberes på aluminiumoksyd for å sikre fraskillelse av harpiksstoffer og bialkaloider Fra den etter frafiltrenngen av aluminiumoksydet oppnådde oppløsning, renses galantaminet så via galantamin-hydrobromidet med den derav følgende avhendingen av halogensalter For anvendelse i salver og TTS må så galantaminbasen også settes fri fra dette galantaminhydrobromidet

Oppgaven ved foreliggende opfinnelse er følgelig tilveiebringelse av en fremgangsmåte for ekstrahenng og rensing av galantamin, som ikke oppviser ulempene ved de fra teknikkens stand kjente fremgangsmåter Spesielt skal rensingen forenkles, anvendelsen av klorerte hydrokarboner og rensingen over galantaminsaltene unngås Oppgaven løses ifølge oppfinnelsen ved en fremgangsmåte med de karakteristiske trekkene fra krav 1 Foretrukne utførelsesformer er angitt i underkravene

Gjenstand for oppfinnelsen er nærmere bestemt en fremgangsmåte for isolering av galantamin fra biologisk materiale, som oppnås fra landbruksmessig frembragte amaryllidaceen-arter eller fra slike som generelt regnes som "ugress" og ikke står under naturbeskyttelse, fortrinnsvis fra løken av disse plantene Til disse amarylhdaceene hører eksempelvis narsisser henholdsvis cnmum-arter Spesielt egnede er Narcissus pseudonarcissus "Carlton" eller den asiatiske klatreplanten Cnmum amabile Selv om disse plantene bare inneholder ca 1/10 av galantaminmengden fra de under naturbeskyttelse stående plantene og dessuten inneholder inntil 12 bialkaloider, lykkes det overraskende med fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen herfra å isolere galantaminbasen i for legemidler egnet renhet

Ifølge oppfinnelsen blandes galantaminholdig, biologisk matenale som fortrinnsvis er findelt og blandet med alkahpulver, fortrinnsvis natnumhydroksydplater, soda, pottaske eller lignende salter, som er egnede for å sette fri base fra biologisk materiale, for fremstilling av farmakologiske virkestoffer, ekstraheres med toksikologisk godtagbare organiske oppløsningsmidler og galantaminet renses fra dette ekstraktet ved væske/væske-ekstraksjon Av spesiell betydning for vellykketheten av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er opprettholdelsen av pH-verdien i det første trinnet av væske/væske-ekstraksjonen Væske/væske-ekstraksjonen gjennomføres i et første tnnn ved en pH-verdi på ca 4 og i et andre tnnn ved en pH-verdi på ca 6 For innstilling av pH-verdien kan det ved siden av konsentrert ammoniakk også anvendes sodaoppløsning eller en annen base Som toksikologisk godtagbart organisk oppløsmngsmiddel anvendes dietyleter eller spesialbensm Fortrinnsvis anvendes spesialbensin, idet det dermed allerede lar seg oppnå en viss for-rensing Oppløsningsmidlet fjernes, galantaminet omkrystalliseres fra et egnet oppløsmngsmiddel, fortnnnsvis fra isopropanol Man oppnår den hvite galantaminbasen med et smeltepunkt på 129 - 130°C Renheten av det derved oppnådde galantaminet fremgår i HPLC-kromatogram (fig 2)

Dette resultatet forbløffer desto mer idet den hittil anvendte fremgangsmåten fra DE-PS 11 93 061 viste seg uegnet for isolering av galantamin fra biologisk matenale, som inneholder lite galantamin og inntil 12 bialkaloider Med fremgangsmåten beskrevet i DE-PS 11 93 061 oppstår en emulsjon som ikke kan brytes, slik at en ekstraksjon ikke er mulig En lett modifisert fremgangsmåte førte til en oljeformig rest som ifølge HPLC-kromatogram er forurenset med minst fire stoffer (fig 1)

Det må følgelig anses som uttalt overraskende at det fra biologisk matenale som inneholder lite galantamin ved siden av et stort antall bialkaloider, ved hjelp av den enkle fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er mulig å isolere den frie galantaminbasen i ren form og med godt utbytte, uten at et ytterligere adsorbsjonstnnn på aluminiumoksyd er påkrevet

Den ifølge oppfinnelsen fremstilte galantaminbase er anvendbar for behandling av trangvinkelglaukom, for behandling av Alzheimers sykdom eller alkohol- og nikotin-avhengighet Den ifølge oppfinnelsen fremstilte galantaminbase kan i tillegg anvendes i galeniske preparatformer, som eksempelvis i øyensalver eller i transdermale terapeutiske systemer, som likeledes kan anvendes for behandling av de ovenfor angitte sykdommer

Foreliggende oppfinnelse omfatter videre galantamin, som er kjennetegnet ved at det foreligger i farmasøytisk kvalitet med > 99 % renhet, fremstilt ved en fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen

Videre omfatter oppfinnelsen galeniske preparatformer, kjennetegnet ved et innhold av galantamin ifølge oppfinnelsen

Videre omfatter foreliggende oppfinnelse anvendelse av galantamin for fremstilling av øyensalver, for fremstilling av transdermale terapeutiske systemer, for fremstilling av et middel for behandling av trangvinkelglaukom, for fremstilling av et middel for behandling av Alzheimers sykdom, for fremstilling av et middel for behandling av alkohol-avhengighet, og endelig for fremstilling av et middel for behandling av nikotin-avhengighet

Endelig omfatter oppfinnelsen et farmasøytisk preparat, kjennetegnet ved at det ved siden av i og for seg kjente farmasøytiske hjelpestoffer inneholder galantamin ifølge oppfinnelsen

De etterfølgende eksempler skal belyse oppfinnelsen

Eksempel 1 ( Sammenligning^

Analogt fremgangsmåten som er beskrevet i DE-PS 11 93 061 blandes 10 kg lufttørkede, findelte løk av Narcissus pseudonarcissus "Carlton" omhyggelig med 2,5 1 av en 8 %'s vandig ammoniakkoppløsmng Materialet sveller opp, hele blandingen klistrer seg sammen Den for ekstraksjonen forutsatte tilsats av 23 1 dikloretan fører til en emulsjon som ikke kan brytes

Eksempel 2 ( Sammenligning)

Den ifølge teknikkens stand kjente fremgangsmåte for isolering av galantaminet (DE-PS 11 93 061) ble modifisert 10 kg lufttørkede, findelte løker av Narcissus pseudonarcissus "Carlton" blandes omhyggelig med 400 g natnumkarbonat Deretter tilsettes 23 liter dikloretan Blandingen blir stående i 10 timer, deretter helles oppløsningsmidlet av Løkene overhelles på nytt med 23 1 dikloretan, som etter 2 - 3 timer helles av I tilknytning til dette blandes løkene en tredje gang med 17 1 dikloretan, som imidlertid helles direkte av igjen De samlede dikloretan-ekstrakter ekstraheres ved hjelp av 10 % svovelsyre (2 x hver gang 600 ml, 2 x hver gang 300 ml) De sure ekstraktene forenes og renses ved utrystning med dietyleter for spor av dikloretan Deretter tilsettes under omrøring og avkjøling til 15 - 20°C ca 200 ml av en 25 % vandig ammoniakkoppløsmng inntil alkalisk lakmus-reaksjon pH-verdien ligger ved 7

- 8 I motsetning til det som er angitt innen teknikkens stand utfelles ikke bialkaloidene Den alkaliske oppløsningen mettes med koksalt og ekstraheres med dietyleter Etter

avdampning av eteren blir det igjen, i motsetning til det som er angitt innen teknikkens stand, en neglisjerbar liten rest Ved metting med pottaske innstilles pH-verdien av den vandige fasen på ca 14 Den vandige fasen ekstraheres flere ganger med dietyleter De forenede eterekstrakter inndampes til tørrhet, den tilbakebhvende galantaminholdige resten oppløses i aceton (50 ml) I motsetning til det som er angitt innenfor teknikkens stand, dannes det ikke noe bunnfall Det suppleres med 350 ml aceton, 200 g aluminiumoksyd tilsettes og det omrøres 145 min Aluminiumoksydet frafiltreres og vaskes to ganger, hver gang med 100 ml aceton De forenede acetonoppløsmngene inndampes til tørrhet Man oppnår 1,3 g av en oljeformig rest som undersøkes ved hjelp av HPLC Kromatogrammet er angitt i fig 1 Hovedtoppen, galantaminet, er angitt Man erkjenner tydelig at det på denne måten isolerte galantamin er forurenset med minst fire stoffer

Eksempel 3

100 kg lufttørkede, findelte løker av Narcissus pseudonarcissus "Carlton" blandes omhyggelig med 4 kg natnumkarbonat Blandingen deles i tre like deler og overhelles med 15 1 spesialbensin 80/110 Man lar dette stå 124 timer Oppløsningsmidlet blir 2 ganger på nytt samlet og inndampet til tørrhet i svakt vakuum Ekstraktene opptas i 2 % vandig svovelsyre og innstilles med konsentrert vandig ammoniakkoppløsmng på en pH-verdi på 4 Deretter ekstraheres det fem ganger med dietyleter Den vandige fasen innstilles med konsentrert ammoniakk på en pH-verdi på 9 og ekstraheres fem ganger med dietyleter Disse eter fraksjonene samles, tørkes med natnumsulfat og inndampes Det oppnås 20 g av en svakt gulfarget oljeformig rest som omkrystalhseres fra varm isopropanol Man oppnår 10 g hvit galantaminbase med et smeltepunkt på 129-130°C

I HPLC-diagram erkjennes utelukkende en topp (fig 2)

Claims (26)

1 Fremgangsmåte for ekstrahenng av galantamin, karakterisert v e d at galantaminholdig, biologisk matenale ekstraheres med toksikologisk godtagbare organiske oppløsmngsmidler og galantaminet fra dette ekstraktet renses ved væske/væske-ekstraksjon, hvorved væske/væske-ekstraksjonen i det første tnnnet gjennomføres ved en pH-verdi på ca 4

2 Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det biologiske materialet før ekstraksjonen findeles og blandes med alkahpulver

3 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1 eller 2, karakterisert v e d at væske/væske-ekstraksjonen i det andre tnnnet gjennomføres ved en pH-verdipåca 9

4 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-3, karakterisert v e d at det som alkahpulver anvendes natnumkarbonat

5 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-4, karakterisert v e d at det som toksikologisk godtagbart organisk oppløsmngsmiddel anvendes dietyleter eller spesialbensin, fortnnnsvis spesialbensin

6 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-5, karakterisert v e d at det oppnådde galantaminet omkrystalhseres fra et egnet oppløsmngsmiddel

7 Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det som oppløsmngsmiddel anvendes isopropanol

8 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-7, karakterisert ved at det som biologisk materiale anvendes plantedeler fra amarylhdaceer

9 Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at det som plantedeler anvendes løker

10 Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1-9, karakterisert v e d at det som amaryllidaceer anvendes narsissus-typer eller knnumarter

11 Fremgangsmåte ifølge krav 10, karakterisert ved at det som narsissus-typer, anvendes Narcissus pseutonarcissus "Carlton", henholdsvis som knnumart Cnnum amabile

12 Fremgangsmåte ifølge ett av kravene 1 til 11, karakterisert v e d at det oppnås galantamin i en renhet på > 99 %

13 Galantamin, karakterisert ved at det foreligger i farmasøytisk kvalitet med > 99 % renhet, fremstilt ved en fremgangsmåte ifølge ett av kravene 1 til 12

14 Galeniske preparatformer, karakterisert ved et innhold av galantamin ifølge krav 13

15 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av øyensalver

16 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av transdermale terapeutiske systemer

17 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av et middel for behandling av trangvinkelglaukom

18 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av et middel for behandling av Alzheimers sykdom

19 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av et middel for behandling av alkohol-avhengighet

20 Anvendelse av galantamin ifølge krav 13 for fremstilling av et middel for behandling av nikotin-avhengighet

21 Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det ved siden av i og for seg kjente farmasøytiske hjelpestoffer inneholder galantamin ifølge krav 13

22 Farmasøytisk preparat ifølge krav 21 for topisk anvendelse

23 Farmasøytisk preparat ifølge krav 21 eller 22 for behandling av trangvinkelglaukom

24 Farmasøytisk preparat ifølge krav 21 eller 22 for behandling av Alzheimers sykdom

25 Farmasøytisk preparat ifølge krav 21 eller 22 for behandling av alkoholavhengighet

26 Farmasøytisk preparat ifølge krav 21 eller 22 for behandling av nikotmavhengighet