JPH10501405A - 異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法 - Google Patents
異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法Info
- Publication number
- JPH10501405A JPH10501405A JP8500055A JP50005595A JPH10501405A JP H10501405 A JPH10501405 A JP H10501405A JP 8500055 A JP8500055 A JP 8500055A JP 50005595 A JP50005595 A JP 50005595A JP H10501405 A JPH10501405 A JP H10501405A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino acid
- virus
- mutation
- vee
- codon
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 54
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 241000710959 Venezuelan equine encephalitis virus Species 0.000 title claims abstract description 25
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims abstract description 87
- 206010014611 Encephalitis venezuelan equine Diseases 0.000 claims abstract description 53
- 208000002687 Venezuelan Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims abstract description 53
- 201000009145 Venezuelan equine encephalitis Diseases 0.000 claims abstract description 53
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 41
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 53
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 53
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 claims description 36
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 claims description 36
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 claims description 36
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 claims description 36
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 claims description 36
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 29
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 28
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 28
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 27
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims description 25
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 25
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 11
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 10
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 6
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 claims description 5
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 claims description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 5
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 3
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 claims description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000713730 Equine infectious anemia virus Species 0.000 claims description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical class N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000003292 glue Substances 0.000 claims description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 36
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 18
- 101150039660 HA gene Proteins 0.000 description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 8
- 239000013605 shuttle vector Substances 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108091092330 cytoplasmic RNA Proteins 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 3
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 229940124590 live attenuated vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940023012 live-attenuated vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- 101150082674 E2 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- CUJMXIQZWPZMNQ-XYYGWQPLSA-N 13,14-dihydro-15-oxo-prostaglandin E2 Chemical group CCCCCC(=O)CC[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O CUJMXIQZWPZMNQ-XYYGWQPLSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 101150029662 E1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241001524679 Escherichia virus M13 Species 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241000726306 Irus Species 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N [3-[hydroxy(2-hydroxyethoxy)phosphoryl]oxy-2-[(e)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\CCCCCCCC HMNZFMSWFCAGGW-XPWSMXQVSA-N 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000012760 immunocytochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical class [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 101150012509 sub gene Proteins 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/193—Equine encephalomyelitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/285—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pasteurellaceae (F), e.g. Haemophilus influenza
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/20011—Coronaviridae
- C12N2770/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/36011—Togaviridae
- C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
- C12N2770/36141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2770/36143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/38—Vector systems having a special element relevant for transcription being a stuffer
Abstract
(57)【要約】
被験対象を病気から防御する方法は、免疫原性効果を発揮する量の組換えベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスを被験対象に投与することを含む。VEEウイルスは異種DNA断片を含み、異種DNA断片は、被験対象を病気から防御する効果を持つ免疫原性タンパク質またはペプチドをコードしているDNAに機能できるように結合された、被験対象内で作用するプロモーターを含む。好ましいプロモーターはVEE26Sサブゲノムプロモーターであり、好ましい免疫原はウイルス免疫原である。本発明の実施に有用な新しい弱毒化突然変異も開示されている。
Description
【発明の詳細な説明】
異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる
免疫応答の誘発方法
技術分野
本発明は、一般に弱毒化生ワクチンに関するもので、特にベネズエラウマ脳炎
(VEE)ウイルスから作製される弱毒化ワクチンに関する。
背景技術
弱毒化生ワクチンは、ウイルス疾患を抑制する最も成功率の高い手段の1つで
ある。しかし、一部のウイルス性病原体に関しては、生のウイルス株による免疫
感作は実行不可能か、安全性に問題がある。それに代わる一方法は、このような
病原体の免疫感作抗原をコードしている遺伝子を、別のウイルスのワクチン株に
挿入する方法である。しかし、現在の所、利用可能なこのような系は比較的少な
い。
Hahn et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89,2679(1992)は、インフルエ
ンザ血球凝集素タンパク質の先端の切れた形状のもの(truncated form)を発現
するSindbisウイルス構成物を報告している。構成物は、in vitroおよびマウス
において、抗原のプロセシングと発現を研究するために使用されている。感染対
抗量は検討されていないが、このような構成物を利用して、防御作用を持つB細
胞とT細胞を介する免疫を誘発できる可能性も示唆されている。考察の章の最後
のパラグラフには次のように記されている。「SINがヒト用ワクチンとして認可
される可能性は低いが、本研究においてSINに用いられた方法と類似の方法を、
ベネズエラウマ脳炎ウイルスの弱毒化株のように、類似の複製法によりウイルス
を利用する弱毒化生ワクチン株の開発に応用できるかも知れない(Davis et al
.より引
用)」。出願人が知る限り、Sindbisベクターの問題点は、異種挿入断片がベク
ター内で不安定で、ベクターから「排斥」される点であり、挿入断片の安定性を
得るための実用的な限界値は約1kbである。
Davis et al.の米国特許第5,185,440号は、ワクチン作製に使用するためにそ
の中に組み入れることができるVEEウイルスと弱毒化突然変異をコードしているc
DNAを報告している。サブゲノムの発現系の使用は示唆も開示もされていない。
発明の概要
本発明の第1の点は、病気の予防方法(被験対象を病気から防御する方法)で
ある。この方法は、有効な免疫原性量の組換えベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイ
ルスを被験対象に投与することを含み、VEEウイルスは少なくとも1つの弱毒化
突然変異(典型的には2つまたは3つの異なる弱毒化突然変異)を含み、またVE
Eウイルスは異種DNA断片を含む。異種DNA断片は、被験対象を病気から防御する
効果を持つ免疫原性タンパク質またはペプチドをコードしているDNAに機能でき
るように結合した被験対象内で機能できるプロモーターを含む。異種挿入断片は
、選択により、そのものが弱毒化突然変異として作用する。
好ましい一実施例において、VEEウイルスの異種DNA断片は、病原性微生物のゲ
ノムに由来する。本実施例によれば、免疫原性タンパク質またはペプチドをコー
ドしているDNAに機能できるように結合したプロモーターを含む異種DNA断片は、
病原性微生物による疾患から被験対象を防御するのに有効である。
本発明の第二の点は、感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物を
コードしているcDNAクローンと、cDNAクローンの上流に位置し、機能できるよう
にcDNAクローンに結合している異種プロモーターとを含み、更に、弱毒化突然変
異を特定するE1アミノ酸の272番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミ
ノ酸の81番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコド
ンから成るグループから選択される少なくとも1つの弱毒化突然変異を含むDNA
である。
本発明の第三の点は、感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物を
コードしているcDNAクローンと、cDNAの上流に位置し、機能できるようにcDNAク
ローンに結合している異種プロモーターとを含み、更に、(a)弱毒化突然変異
を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンである第一の弱毒化突然変異遺伝子と
(b)不活化されたE3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位である第二の弱毒
化突然変異を含むDNAである。
本発明の更なる点は、本明細書中に示されるcDNAによりコードされている感染
性VEEウイルスRNA転写物、このようなRNA転写物を含む感染性VEEウイルス粒子、
および薬剤学的に許容可能な担体中に免疫原性を発揮する有効量のこのような感
染性VEEウイルス粒子を含む医薬製剤を含む。
Frolov et al.,第9回国際ウイルス学会議会報、グラスゴー、スコットランド
、1993年8月8〜13日、67ページ(Proceedings IXth International Congress of
Virology,Glasgow,Scotland,Augst 8-13,1993,pg.67)には、B型肝炎ウイ
ルス抗原タンパク質を発現する組換えVEEウイルスが検討されており、弱毒化VEE
ウイルスである、株230の利用が報告されている。しかし、弱毒化ウイルスその
もののヒトへの投与は示唆されていない。反対に、これらのウイルスは、抗原性
B型肝炎ウイルスタンパク質そのものを組織培養において作製し、次いでタンパ
ク質を収集し、ヒトに投与するために利用されている。株230そのものは、ヒト
において複製するとしても僅かである。
本発明の前記およびその他の目的と内容に関しては、下記の明細書に詳細に説
明されている。
図面の簡単な説明
図1は、シャトルベクターの構造図である。シャトルベクターは、3.2kb pUC1
18プラスミドの中に、E2遺伝子内に3つの弱毒化突然変異を持つVEEの構造遺伝
子と、E1のC末端の下流に直接挿入されている第二の26Sプロモーターとマルチ
クロ
ーニング部位を含む。
図2a〜2cは、ダブルプロモーターベクターを示している。
図3は、弱毒化VEE突然変異体を感染させた幼若ハムスター腎臓(BHK)細胞の
細胞内RNA全体のノザンブロット分析である。突然変異体は、第二のサブゲノム
プロモーターの下流に挿入されたHA遺伝子を含むか、あるいは非コーディングオ
リエンテーションでもって挿入されたHA遺伝子を含む。
図4a〜4dは、VEEベクターを感染させたBHK細胞単層の免疫細胞化学染色を
示す。細胞は、インフルエンザPR/8/34、完全なインフルエンザHA遺伝子を含むV
EEベクター、挿入断片を含まないVEEベクターのいずれかに感染させた。
図5a〜5cは、鼻腔内投与によりインフルエンザウイルスを投与された、接
種を受けたマウスにおいて観察された臨床症状のグラフである。マウスは、PBS
、挿入断片を含まないVEEベクター、あるいは完全なインフルエンザHA遺伝子を
含むVEEベクターのいずれかを接種された。
図6は、接種を受けたマウスから得られた血清のウイルス投与前の抗インフル
エンザIgGエリザ(ELISA)の力価を示すグラフである。マウスは、PBS、挿入断
片を含まないVEEベクター、あるいは完全なインフルエンザHA遺伝子を含むVEEベ
クターのいずれかを接種された。
図7は、インフルエンザ投与4日後の、接種を受けたマウスの肺組織に観察さ
れた生存可能なインフルエンザウイルスの力価のグラフである。マウスは、PBS
、挿入断片を含まないVEEベクター、あるいは完全なインフルエンザHA遺伝子を
含むVEEベクターのいずれかを接種された。
発明の詳細な説明
生のベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスをコードしている相補的DNA配列と、
それと同物質を含む薬剤学的に許容可能な医薬製剤は公知である。例えば、N.D
avis et al.の米国特許第5,185,440号を参照(出願者は、本明細書中で引用さ
れ
ている全ての特許を引用することによって本明細書にすべて組み込むことを、特
に意図している)。
本明細書に使用されている「弱毒化突然変異」と「弱毒化アミノ酸」という言
葉は、本技術における標準的用語によれば(例えば、B.Davis et al.,Microbi
ology,132(第3版、1980年参照)、突然変異が置換による突然変異であろうと
、フレーム内欠失突然変異であろうと、その宿主内で病気を引き起こす確率を低
下させるような(すなわち病原性の喪失)、ヌクレオチドの突然変異またはその
ような突然変異を起こすようにコードされたアミノ酸を意味する。「弱毒化突然
変異」という言葉から、ウイルスにとって致死的となり得る突然変異は除外され
る。公知のVEE弱毒化突然変異の例には、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸
の76番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の209番目のコドン、
弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の120番目のコドン(例えば、N.Davis et
al.の米国特許第5,185,440号を参照)、ウイルスRNAヌクレオチドの3番目に
おけるGからCへの突然変異が含まれる。
本発明を実施するために利用できる本明細書に開示されている新しい弱毒化突
然変異には、弱毒化突然変異(好ましくは置換による突然変異、例えばトレオニ
ンまたはセリン、最も好ましくはトレオニンの置換)を特定するE1アミノ酸の27
2番目のコドン、弱毒化突然変異(好ましくは置換による突然変異、例えばイソ
ロイシンまたはロイシン、最も好ましくはイソロイシンの置換)を特定するE1ア
ミノ酸の81番目のコドン、弱毒化突然変異(好ましくは置換による突然変異、例
えばセリンまたはトレオニン、最も好ましくはセリン)を特定するE1アミノ酸の
253番目のコドンが含まれる。
弱毒化VEEウイルスをコードしているcDNAクローンの中に一緒に挿入できる新
しい弱毒化突然変異の組み合わせは、(a)弱毒化突然変異を特定するE1アミノ
酸の253番目のコドンである第一の弱毒化突然変異、および(b)不活化されたE3
アミ
ノ酸の56から59番目の切断認識部位である第二の突然変異である。この弱毒化突
然変異の組み合わせの利点は、不活化された切断部位そのものが、ウイルスにと
って致命的である点である。従って、もしもE1アミノ酸の253番目の弱毒化突然
変異が毒性を持つ野生型に戻ったとしても、残りの突然変異がウイルスを死滅さ
せる。E3アミノ酸56から59番目の切断認識部位は、適切な方法のいずれによって
も不活化できる。切断認識部位は全体または一部を欠失できる。置換による突然
変異はその中で起こり得る(例えば、アミノ酸59におけるアルギニンからアスパ
ラギン酸への置換による突然変異)。
弱毒化突然変異は、部位指定当然変異誘起法などの適切な方法により生のVEE
をコードしているcDNAに導入できる(例えば、Kunkelの米国特許第4,873,192号
を参照)。
免疫原性タンパク質またはペプチド、または「免疫原」は、微生物、細菌、原
生動物、寄生虫、ウイルス性疾患を含むが、これらに限定されない疾患から、被
験対象を防御するのに適した免疫原となり得る。例えば、免疫原はインフルエン
ザウイルス免疫原(例、インフルエンザ血球凝集素(HA)表面タンパク質、または
ウマインフルエンザウイルス免疫原)、またはレンチウイルス免疫原(例、ウマ
感染性貧血ウイルス免疫原、HIV-1免疫原またはHIV-2免疫原等のヒト免疫不全ウ
イルス(HIV)免疫原)。免疫原はコロナウイルス免疫原(例、ブタの伝染性胃
腸炎ウイルス免疫原、またはニワトリの感染性気管支炎)、またはフラビウイル
ス免疫原(例、黄熱病ウイルス免疫原または日本脳炎ウイルス免疫原)も可能で
ある。所望であれば、本発明の利点は、上記の免疫原をコードしているDNAを含
む異種挿入断片は、比較的大きくてもよいことで、少なくとも1kbの長さが可能
である。
異種プロモーターは、好ましくは、ベネズエラウマ脳炎ウイルスの26Sサブゲ
ノムプロモーターである。この定義は、プロモーターとしての活性が保持されて
い
る限り、その欠失突然変異等のこのプロモーターの誘導体を含むことを意図して
いる。
本明細書に開示されている弱毒化生ウイルスとワクチン処方製剤を投与できる
被験対象には、ヒトと動物(例えば、ウマ、ロバ、ブタ、マウス、ハムスター、
サル、ニワトリ)の両者が含まれる。
本発明のワクチン製剤は、本明細書に開示されている免疫原性量の弱毒化生ウ
イルスと薬剤学的に許容可能な担体を含む。「免疫原性量」とは、免疫応答を惹
起するのに十分な弱毒化ウイルスの量であり、特に、そのウイルスを投与された
被験対象において、そのウイルスが保持する異種DNAによってコードされている
タンパク質またはペプチドに対する免疫応答を惹起するのに十分な弱毒化ウイル
スの量である。投与を受ける被験対象の年齢と種によって異なるが、1回の投与
につき約101〜105プラーク形成単位の量の生ウイルスが適切である。薬剤学的に
許容可能な担体の例として、発熱物質を含まない滅菌水と発熱物質を含まない無
菌的な生理食塩水が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に開示されている弱毒化生ウイルスの投与は、トリの場合には卵内注
入によるが、非経口注入(腹腔内、皮下または筋肉内注入等)と気道表面へのウ
イルスの局所塗布(典型的には医薬製剤により実施される)の両方が可能である
。ウイルスの気道への局所塗布は、鼻腔内投与により(例えば、医薬製剤を鼻腔
内に蓄積させる点鼻器、綿棒、または吸入装置の使用により)実施できる。ウイ
ルスの気道への局所塗布は、例えばエーロゾル懸濁液のようなウイルスを含む吸
入可能な粒子の医薬製剤(固体粒子と液体粒子の両者を含む)を調製し、次いで
吸入可能な粒子を被験対象に吸入させることによる、吸入投与によっても実施で
きる。吸入可能な粒子の医薬製剤を投与するための方法と装置は公知であり、い
ずれの従来の技術でも利用できる。例えば、D.Leithの米国特許第5,304,125号
、C.Davis and R.Snyderの米国特許第5,299,566号、Fisher and W.Metzgerの
米国
特許第5,290,550号、R.Boucherの米国特許第5,292,498号を参照。
以下の具体例は本発明を説明するためのもので、それらを限定することを目的
とするものではない。
例1
「第二のプロモーター」発現ベクターの作製
VEEのTRD株、pV3507由来であり、E2遺伝子内に3つの弱毒化突然変異を含む完
全な長さのcDNAクローンを本研究において使用した。Davis et al.,Virology 1
83:20(1991)に報告されているように、突然変異はE2の76番目のリジン、E2の1
20番目のリジンおよびE2の209番目のリジンに生じる。cDNAクローンは、Tth111I
で消化され、大腸菌DNAポリメラーゼのクレノウ断片により平滑末端に変換され
、次いでEcoRIで消化される。3.9kbの断片が単離され、その後、HindIIIによる
消化、クレノウ断片による処理、次いでEcoRIで消化されたM12 mp19 RF(増殖型
)DNAと結合される。得られたM13ファージである、TE3はpV3507の構造遺伝子領
域を含んでいたが、26Sプロモーター領域は含んでいなかった。HindIII部位は、
結合時に再生された。ファージ由来の一本鎖DNAは、TE3による大腸菌CJ236(dut
-ung-)の形質転換後に作製され、Kunkel、Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82:488
(1985)によって概説された手順により、以下の挿入断片(太字)を得るために
デザインされた合成オリゴヌクレオチドと共に使用された。
(配列番号1)Kinney et al.,Virol.170:19(1989)によって同定されたように
、挿入配列を挟む領域は、完全な長さのVEE配列に基づき、ヌクレオチドの数に
よって同定された。
正しい挿入断片は、まずファージRF DNAのClaI消化によるスクリーニングによ
って同定され、一本鎖ファージDNAのE1遺伝子と3'非翻訳領域の間の結合部分の
配列決定によって確認された。
その後、pV3507構造遺伝子と挿入された第二の26Sプロモーターを含むDNA断片
は、HindIIIとEcoRIを用いて、pUC118の中にサブクローニングされた。HindIII
とEcoRI部位は消化により除去され、その後クレノウ断片により平滑末端に変換
され、再結合され、pUC118第2のプロモータークローンが形成された。
開始AUGコドンを欠失している1.5kbのSalI-SalI「スタッファー(stuffer)」
断片が、TR5000の完全な長さのSindbisクローンの糖タンパク質遺伝子領域から
単離され(Schoepp et al.,Virology 193:149(1993)により同定)、Cla12アダ
プタープラスミドのSalI部位の中に挿入された。ClaI部位によって挟まれたマル
チクローニング部位(mcs)を含むCla12プラスミドが、Hughes et al.,J.Viro
l.61:3004(1987)によって同定された。
ClaIを用いて、挿入されたTR5000配列を含むマルチクローニング部位が、pUC1
18の第二のプロモータークローンのユニークなClaI部位の中にクローニングされ
た。Sallによる消化と自己結合により、図1に示す構造を持つシャトルベクター
が生成された。
その後、3つの弱毒化突然変異を含む生存可能な完全な長さのVEEの第二のプ
ロモーター発現ベクターが調製された。シャトルベクターから単離された、ウイ
ルスの構造遺伝子の一部、つまり、挿入された下流の第二のプロモーターと3'非
翻訳領域を含む3.4kbのAf1II-NotI断片を使用して、pV3507の完全な長さのクロ
ーンの相同なAf1II-NotI領域を置換した。形質転換体はClaIによりスクリーニン
グされた。ClaI部位を含むプラスミドは、ユニークなNotI部位で線状化され、T7
RNAポリメラーゼを用いてin vitroで転写された。転写物は、α-32P-標識UTPの
取り込みにより定量された。その後、細胞単層は、陽イオンリポソーム(Lipofe
ctin、BRL)を用いて転写物によりトランスフェクトされ、次いでプラーク形成
の分析の
ために、アガロースで覆われた。転写物は、毒性のあるpV3000親クローンから生
成されたものと同等の特異的感染力を持っていたことから、それらが完全に感染
力があったことが示された。図2a〜2cはダブルプロモーターベクターを示し
ている。図2bは、下流の第二のプロモーター発現ベクターの1つであるpV4002
の図である。
例2
インフルエンザHA遺伝子を含む発現ベクターの構成
PGem4のBamHI部位の中にクローニングされたインフルエンザ株PR/8のHA遺伝子
の完全なコーディング配列は、ウィスター研究所のAndy Caton博士から入手した
。HA配列を含む1.7kbのBamHI断片は、BamHIにより消化された、脱燐酸化された
シャトルベクターDNAに結合された。V4002 DNAは、ClaIにより切断され、脱燐酸
化された。その後、HA配列を含むClaI断片が、シャトルベクターから精製され、
V4002 DNAを調製するために結合された。第二の26Sプロモーターの下流にあるマ
ルチクローニング部位にHA遺伝子を含むクローンが、HpaIによる消化を利用して
同定された。コーディング(pV4002HA)および非コーディング(pV4002AH)オリ
エンテーションの両方を含むクローンが同定された。これらのクローンからの転
写物の特異的感染力のテストにより、これらが親転写物と同等の感染力を持つが
、これらのHA含有ゲノムは幼若ハムスターの腎臓(BHK)細胞単層により小さな
プラークを形成することが示された。これらの結果から、E2に3つの弱毒化突然
変異と挿入された1.7kbのHA遺伝子を含むVEE発現ベクターは、なお複製能力を有
しているが、挿入断片を持たないベクターよりもゆっくりと増殖するように見え
ることが明らかにされた。
例3
組織培養における複製中のHA含有ベクターの安定性試験
Sambrook et al.,Molecular Cloning pp 7.39-7.52に報告されているように
、
VEEに特異的なプローブまたはHAに特異的なプローブを用いたノザンブロットに
より、ベクター感染細胞から得られた全RNAをHA配列を含むサブゲノムRNA転写物
を分析した。精製された細胞質RNAはグリオキシル化され、0.01Mの燐酸ナトリウ
ム(pH7)を含むアガロースゲル上で電気泳動にかけられ、7.5Mの水酸化ナトリ
ウムを含むBiotransナイロンメンブラン(Biotrans nylon membrane,ICN)に移
された。VEEに特異的な32P-標識リボプローブは、pGEM3転写ベクターであるPGEM
19におけるVEE糖タンパク質領域(nt 9493から10486)のサブクローンを用いて
作製された。ウィスター研究所のAndy Caton博士から入手したpGEM4 HAクローン
を使用して、HAに特異的な32P-標識リボプローブを作製した。(使用されたHAク
ローンは、1つのヌクレオチドが欠失しており、その結果先端の切れた(tlunca
ted)タンパク質が翻訳された。この突然変異により、サブゲノムのHA含有ウイ
ルスRNAは検出されたが、このベクターからのタンパク質の発現を検出すること
ができなくなった。)2枚の膜をそれぞれどちらか一方のプローブとハイブリッ
ド形成させ、乾燥させ、X線フィルムに露光した。結果を図3に示す。レーンA
とDは、E2に3つの弱毒化突然変異を含むVEE株を感染させた細胞から得られた
全細胞質RNAを含む。レーンBとEは、第二のサブゲノムプロモーターに続いて
コーディングオリエンテーションのインフルエンザHA遺伝子(V40012HA)を含む
同じ突然変異株を感染させた細胞から得られた全細胞質RNAを含む。レーンCと
Fは、非コーディングオリエンテーションでインフルエンザHA遺伝子(V40012AH
)を含むVEEベクターにより感染させた細胞から得られた全細胞質RNAを含む。レ
ーンA、B、Cは、遺伝子HA遺伝子の一部に相補的な32P-標識リボプローブを用
いてプローブされた。レーンD、E、Fは、VEE糖タンパク質遺伝子の一部に相
補的な32P-標識リボプローブを用いてプローブされた。リボゾームRNAマーカー
の位置は、臭化エチジウムにより染色された平行なレーンにおいて決定された。
VEEゲノムの長さのRNA(40S)はこの実験では検出できなかった。
結果から、V4002HAベクターとV4002AHベクターの両者の欠失突然変異が組織培
養における複製中に生じていたことが示された。しかし、V4002HAを感染させた
細胞内の幾つかのサブゲノムRNAはなおHA配列を含んでおり、これらの大部分が
、完全なHA遺伝子を含めることができるサイズであった。結果から、挿入された
配列が多少不安定なことが明らかにされた。
例4
培養BHK細胞における2つの弱毒化突然変異を持つ
下流のプロモーター発現ベクターからのインフルエンザPR/8HA遺伝子の発現
pBR322のHindIII部位にクローニングされたインフルエンザPR/8由来のHA遺伝
子の完全なコーディング配列は、Mt.Sinai医科大学のP.Palese博士から入手し
た。HA含有HindIII断片は、HindIIIで切断され、脱燐酸化されたシャトルベクタ
ーに結合された(図1参照)。次に、これらのHA配列をコーディング(V4036a)
および非コーディング(V4036e)の両オリエンテーションで、2つの弱毒化突然
変異、E2 lys 209とE1 thr 272を持つVEEの第二のプロモーター発現ベクターに
挿入するために、CalIが使用された。これらのクローンからin vitroで転写され
たRNAは、HA遺伝子を持たない親クローンからのRNAと同等の特異的感染力を示し
た。陽イオンリポソームによるBHK細胞の転写後に得られたウイルスを含む上清
は、小さいプラークと大きなプラークの両方を含んでおり、時間の経過と共に大
きなプラークの比率が増大した。V4036eよりもコーディングオリエンテーション
でHAを持つV4036aの方が、大きなプラークの変異型の比率が大きかった。
卵で成長させたインフルエンザウイルス(PR/8株)、コーディングオリエンテ
ーションでHA遺伝子を持つ第二のプロモーター発現ベクター、または挿入断片を
持たないベクターのいずれかを、BHK細胞単層に感染多重度1で感染させた。感
染後6時間目に、細胞単層を−20℃でメタノール:アセトン(1:1)により固定し
、風乾した。西洋ワサビペルオキシダーゼ、ビオチン−アビジン検出システム(
Ve
ctor Labs)を用いて、HAに特異的なモノクローナル抗体、またはVEEに特異的な
超免疫マウス腹水を一次抗体として用いて、細胞のウイルス抗原の存在をテスト
した。次に細胞をメイヤーズヘマトキシリン(Meyer's hematoxylin)により対
比染色した。インフルエンザPR/8またはコーディングHAベクターを感染させた細
胞単層は、HAに関して陽性の染色を示した。結果を図4a〜4dに示す。図4a
は、インフルエンザPR/8を感染させ、抗HA抗体で染色した細胞を示す。図4bは
、VEEHA-ベクターを感染させ、HA抗体で染色した細胞を示す。図4cは、挿入断
片を含まないVEEベクターを感染させ、抗VEE抗体で染色した細胞を示す。図4d
は、挿入断片を含まないVEEを感染させ、抗HA抗体で染色した細胞を示す。
HAベクターを感染させた細胞におけるHA染色は、細胞質染色で、これらの条件
下で、インフルエンザを感染させた対照実験の単層のHAの染色と同程度の強さで
あった。これらの結果は、インフルエンザHAは、この抗HAモノクローナル抗体に
より検出可能な形態で、第二の26Sプロモーターから正常レベルで発現させるこ
とが可能であり、挿入された遺伝子を含む感染性VEEウイルスが作製可能である
ことを示している。
例5
マウスにおけるインフルエンザ投与に対する防御作用
4週令のCD-1マウスの各後肢肉趾に、1×104pfuの(1)希釈液(PBA)のみ、
(2)HAを発現する二重に弱毒化されたベクター(V4036a)、または(3)挿入断
片を含まないワクチンベクターを皮下接種した。3週間後、マウスに105EID50(
50%卵感染量)のインフルエンザウイルスを鼻腔内投与した。結果を図5a〜5
cに報告する。24匹の対照マウス全てが重度の疾患に罹り、50%が死亡した。12
匹のHAベクターを接種されたマウスの内1匹だけが死亡し、もう1匹が疾病の徴
候を1日示してから、回復した。
インフルエンザウイルス投与前の抗インフルエンザ血清IgGエリザ力価が測定
さ
れ、結果が図6に示されている。HAベクターを接種されたマウスにおける抗HA血
清IgGの数学的平均エリザ力価は246であり、対照マウス24匹中3匹から得られた
血清だけが検出可能な力価を示し、それらは検討された最低希釈率(1:50)にお
いてのみ陽性であった。インフルエンザウイルス投与により発病した2匹のHAベ
クター接種マウスは、抗HA IgGが検出されなかった。従って、12匹中10匹のマウ
スにおいて、HAベクターは検出可能な濃度の抗HA血清IgGを惹起し、12匹中11匹
のマウスが致命的なインフルエンザ投与から防御された。
例6
マウスにおけるインフルエンザ投与に対する防御作用
4週令のCD-1マウスの各後肢肉趾に、1×104pfuの(1)希釈液(PBA)のみ、
(2)HAを発現する二重に弱毒化されたベクター(V4036a)、または(3)挿入断
片を含まないワクチンベクターを皮下接種した。3週間後、マウスに105EID50(
50%卵感染量)のインフルエンザウイルスを鼻腔内投与した。インフルエンザウ
イルス投与4日後に肺を切除した。肺組織をPBS+0.1%BSAの中にホモゲナイズ
し、20%懸濁液を得た。遠心分離し、アリコートに分けて、−70℃で凍結した。
各動物の2つのアリコートを0.1%のトリプシンを含むアガロースの下でMDCK細
胞のpfuを分析した。HAベクターで前もって免疫感作されたマウスの肺には、1.2
5×102pfu/gm組織(25pfu/平均的肺)の検出レベルでは、インフルエンザ感染
力は検出されなかった。測定可能なウイルス力価を持つ対照群の動物に関して計
算された数学的平均力価(固体の点によって表される)は、PBS接種マウスに関
しては3.04×106pfu/gm、VEEベクターのみを接種されたマウスに関しては1.93×
106pfu/gmであった。結果を図7に示す。結果は、ワクチン投与された動物にお
ける非常に低レベルの投与ウイルスの複製を示唆している。
上記は、本発明を説明するものであり、それを制限するためのものではない。
本発明は、以下の請求項と、そこに含まれるべき請求項と同等物によって定義さ
れる。
【手続補正書】特許法第184条の8
【提出日】1996年4月19日
【補正内容】
請求の範囲(補正)
1.被験対象を病気から防御する効果を持つ免疫原性タンパク質またはペプチ
ドをコードしているRNAに機能できるように結合された被験対象において作用で
きるプロモーターを含む異種RNA断片を含み、かつ少なくとも1つの弱毒化突然
変異を含む有効な免疫原性量の組換えベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスを前
記被験対象に投与することを含む病気の予防方法。
2.前記病気がウイルス性疾患である請求項1記載の方法。
3.前記免疫原性タンパク質またはペプチドが、インフルエンザ免疫原、レン
チウイルス免疫原、コロナウイルス免疫原、フラビウイルス免疫原から成るグル
ープから選択される請求項1記載の方法。
4.前記異種RNAが少なくとも1キロベースの長さである請求項1記載の方法
。
5.前記異種RNAがインフルエンザ免疫原をコードしている請求項1記載の方
法。
6.前記異種RNAがインフルエンザウイルス血球凝集素(HA)表面タンパク質を
コードしている請求項1記載の方法。
7.前記異種RNAがレンチウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方
法。
8.前記異種RNAがコロナウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方
法。
9.前記異種RNAがフラビウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方
法。
10.前記被験対象がウマであり、前記異種RNAがウマ感染性貧血ウイルス免
疫原をコードしている請求項1記載の方法。
11.前記プロモーターがベネズエラウマ脳炎ウイルス26Sサブゲノムプロモ
ーターである請求項1記載の方法。
12.少なくとも1つの弱毒化突然変異が、弱毒化突然変異を特定するE2アミ
ノ酸の76番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の209番目のコド
ン、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の120番目のコドン、ウイルスRNAヌク
レオ
チドの3番目におけるGからCへの突然変異、弱毒化突然変異を特定するE1アミ
ノ酸の272番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の81番目のコド
ン、および弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンから成るグ
ループから選択される請求項1記載の方法。
13.前記投与が非経口的な投与である請求項1記載の方法。
14.前記投与が前記被験対象の気道表面に前記ウイルスを局所塗布すること
により実施される請求項1記載の方法。
15.前記投与が鼻腔内への投与である請求項1記載の方法。
16.前記投与が吸入による投与である請求項1記載の方法。
17.感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物をコードしている
cDNAクローンと、前記cDNAクローンの上流に位置し、機能できるように前記cDNA
クローンに結合しているプロモーターとを含み、更に弱毒化突然変異を特定する
E1アミノ酸の272番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の81番目
のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンから成るグ
ループから選択される少なくとも1つの弱毒化突然変異を含むDNA。
18.請求項17記載のcDNAクローンによりコードされている感染性VEEウイ
ルスRNA転写物。
19.請求項18記載のRNA転写物を含む感染性VEEウイルス粒子。
20.薬剤学的に許容可能な担体中に有効な免疫原性量の請求項19記載の感
染性VEEウイルス粒子を含む医薬製剤。
21.感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物をコードしている
cDNAクローンと、前記cDNAの上流に位置し、機能できるように前記cDNAクローン
に結合しているプロモーターとを含み、
更に、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンである第一の
弱毒化突然変異と、不活化されたE3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位であ
る
第二の突然変異とを含むDNA。
22.前記E3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が欠失している請求項2
1記載のDNA。
23.前記E3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が不活化された置換によ
る突然変異を含む請求項21記載のDNA。
24.前記不活性化されたE3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が、アミ
ノ酸59番目においてアルギニンからアスパラギン酸への置換による突然変異を含
む請求項21記載のDNA。
25.請求項21記載のcDNAクローンによりコードされている感染性VEEウイ
ルスRNA転写物。
26.請求項25記載のRNA転写物を含む感染性VEEウイルス粒子。
27.薬剤学的に許容可能な担体中に有効な免疫原性量の請求項26記載の感
染性VEEウイルス粒子を含む医薬製剤。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI
C12R 1:92)
(72)発明者 デイヴィス,ナンシー・エル
アメリカ合衆国、27514 ノース・キャロ
ライナ、チャペル・ヒル、シャロン・ロー
ド 415
(72)発明者 スミス,ジョナサン・エフ
アメリカ合衆国、21780 メリーランド、
サビラスヴィル、アイラー・ヴァリー・フ
リント・ロード 6936
(72)発明者 グリーダー,フランツィスカ・ビー
アメリカ合衆国、20814 メリーランド、
ベセスダ、バッテリー・レイン 4998−
517
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.被験対象を病気から防御する効果を持つ免疫原性タンパク質またはペプチ ドをコードしているDNAに機能できるように結合された被験対象において作用で きるプロモーターを含む異種DNA断片を含み、かつ少なくとも1つの弱毒化突然 変異を含む有効な免疫原性量の組換えベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスを前 記被験対象に投与することを含む病気の予防方法。 2.前記病気がウイルス性疾患である請求項1記載の方法。 3.前記免疫原性タンパク質またはペプチドが、インフルエンザ免疫原、レン チウイルス免疫原、コロナウイルス免疫原、フラビウイルス免疫原から成るグル ープから選択される請求項1記載の方法。 4.前記異種DNAが少なくとも1キロベースの長さである請求項1記載の方法 。 5.前記異種DNAがインフルエンザ免疫原をコードしている請求項1記載の方 法。 6.前記異種DNAがインフルエンザウイルス血球凝集素(HA)表面タンパク質 をコードしている請求項1記載の方法。 7.前記異種DNAがレンチウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方 法。 8.前記異種DNAがコロナウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方 法。 9.前記異種DNAがフラビウイルス免疫原をコードしている請求項1記載の方 法。 10.前記被験対象がウマであり、前記異種DNAがウマ感染性貧血ウイルス免 疫原をコードしている請求項1記載の方法。 11.前記異種プロモーターがベネズエラウマ脳炎ウイルス26Sサブゲノムプ ロモーターである請求項1記載の方法。 12.少なくとも1つの弱毒化突然変異が、弱毒化突然変異を特定するE2アミ ノ酸の76番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の209番目のコド ン、弱毒化突然変異を特定するE2アミノ酸の120番目のコドン、ウイルスRNAヌク レオ チドの3番目におけるGからCへの突然変異、弱毒化突然変異を特定するE1アミ ノ酸の272番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の81番目のコド ン、および弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンから成るグ ループから選択される請求項1記載の方法。 13.前記投与が非経口的な投与である請求項1記載の方法。 14.前記投与が前記被験対象の気道表面に前記ウイルスを局所塗布すること により実施される請求項1記載の方法。 15.前記投与が鼻腔内への投与である請求項1記載の方法。 16.前記投与が吸入による投与である請求項1記載の方法。 17.感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物をコードしている cDNAクローンと、前記cDNAクローンの上流に位置し、機能できるように前記cDNA クローンに結合している異種プロモーターとを含み、更に弱毒化突然変異を特定 するE1アミノ酸の272番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の81 番目のコドン、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンから成 るグループから選択される少なくとも1つの弱毒化突然変異を含むDNA。 18.請求項17記載のcDNAクローンによりコードされている感染性VEEウイ ルスRNA転写物。 19.請求項18記載のRNA転写物を含む感染性VEEウイルス粒子。 20.薬剤学的に許容可能な担体中に有効な免疫原性量の請求項19記載の感 染性VEEウイルス粒子を含む医薬製剤。 21.感染性ベネズエラウマ脳炎(VEE)ウイルスRNA転写物をコードしている cDNAクローンと、前記cDNAの上流に位置し、機能できるように前記cDNAクローン に結合している異種プロモーターとを含み、 更に、弱毒化突然変異を特定するE1アミノ酸の253番目のコドンである第一の 弱毒化突然変異と、不活化されたE3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位であ る 第二の突然変異とを含むDNA。 22.前記E3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が欠失している請求項2 1記載のDNA。 23.前記E3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が不活化された置換によ る突然変異を含む請求項21記載のDNA。 24.前記不活性化されたE3アミノ酸の56から59番目の切断認識部位が、アミ ノ酸59番目においてアルギニンからアスパラギン酸への置換による突然変異を含 む請求項21記載のDNA。 25.請求項21記載のcDNAクローンによりコードされている感染性VEEウイ ルスRNA転写物。 26.請求項25記載のRNA転写物を含む感染性VEEウイルス粒子。 27.薬剤学的に許容可能な担体中に有効な免疫原性量の請求項26記載の感 染性VEEウイルス粒子を含む医薬製剤。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US250,445 | 1994-05-27 | ||
US08/250,445 US5505947A (en) | 1994-05-27 | 1994-05-27 | Attenuating mutations in Venezuelan Equine Encephalitis virus |
PCT/US1995/006739 WO1995032733A1 (en) | 1994-05-27 | 1995-05-26 | Method of inducing an immune response with a live venezuelan equine encephalitis virus expressing a heterologous immunogen |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH10501405A true JPH10501405A (ja) | 1998-02-10 |
Family
ID=22947786
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP8500055A Pending JPH10501405A (ja) | 1994-05-27 | 1995-05-26 | 異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法 |
JP2005199854A Pending JP2006006335A (ja) | 1994-05-27 | 2005-07-08 | 異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005199854A Pending JP2006006335A (ja) | 1994-05-27 | 2005-07-08 | 異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5505947A (ja) |
EP (1) | EP0762894B1 (ja) |
JP (2) | JPH10501405A (ja) |
AT (1) | ATE261312T1 (ja) |
CA (1) | CA2193210C (ja) |
DE (1) | DE69532672T2 (ja) |
WO (1) | WO1995032733A1 (ja) |
Families Citing this family (112)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6015686A (en) * | 1993-09-15 | 2000-01-18 | Chiron Viagene, Inc. | Eukaryotic layered vector initiation systems |
US5505947A (en) * | 1994-05-27 | 1996-04-09 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Attenuating mutations in Venezuelan Equine Encephalitis virus |
US5792462A (en) | 1995-05-23 | 1998-08-11 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Alphavirus RNA replicon systems |
US6465634B1 (en) | 1996-04-05 | 2002-10-15 | Chiron Corporation | Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis |
US6451592B1 (en) | 1996-04-05 | 2002-09-17 | Chiron Corporation | Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis |
US5811407A (en) * | 1997-02-19 | 1998-09-22 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | System for the in vivo delivery and expression of heterologous genes in the bone marrow |
US6261570B1 (en) | 1997-05-20 | 2001-07-17 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Live attenuated virus vaccines for western equine encephalitis virus, eastern equine encephalitis virus, and venezuelan equine encephalitis virus IE and IIIA variants |
US6699478B1 (en) * | 1997-09-19 | 2004-03-02 | Wyeth Holdings Corporation | Enhanced immune response to attachment (G) protein of Respiratory Syncytial Virus |
US7179892B2 (en) | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
AU1710699A (en) * | 1997-12-18 | 1999-07-05 | G.D. Searle & Co. | Venezuelan equine encephalitis virus vectors expressing tumor-associated antigens to induce cancer immunity |
US20020147143A1 (en) | 1998-03-18 | 2002-10-10 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of lung cancer |
US6844188B1 (en) | 1998-04-08 | 2005-01-18 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Methods and modified cells for the treatment of cancer |
AU754320B2 (en) | 1998-04-08 | 2002-11-14 | University Of North Carolina At Chapel Hill, The | Methods and modified cells for the treatment of cancer |
GB2337755B (en) * | 1998-05-29 | 2003-10-29 | Secr Defence | Virus vaccine |
US20030235557A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-12-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
US8647864B2 (en) * | 1999-04-14 | 2014-02-11 | Novartis Ag | Compositions and methods for generating an immune response utilizing alphavirus-based vector systems |
JP4637368B2 (ja) * | 1999-04-14 | 2011-02-23 | ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | アルファウイルスに基づくベクター系を利用する免疫応答を生成するための組成物および方法 |
UA81216C2 (en) | 1999-06-01 | 2007-12-25 | Prevention and treatment of amyloid disease | |
EP1208217B1 (en) * | 1999-08-31 | 2008-10-29 | The University of North Carolina at Chapel Hill | Antibody dependent enhancement (ade) of alphavirus infection |
CA2400842C (en) | 2000-02-23 | 2013-01-15 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Novel compounds |
CA2410948C (en) * | 2000-05-31 | 2012-07-17 | Chiron Corporation | Method for the purification of alphavirus replicon particles |
ATE396265T1 (de) | 2000-06-28 | 2008-06-15 | Corixa Corp | Zusammensetzungen und verfahren für therapie und diagnose von lungenkrebs |
US6783939B2 (en) | 2000-07-07 | 2004-08-31 | Alphavax, Inc. | Alphavirus vectors and virosomes with modified HIV genes for use in vaccines |
US6982087B2 (en) * | 2000-09-07 | 2006-01-03 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Vectors derived from South African Arbovirus No. 86 |
PE20020574A1 (es) | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
US20070128229A1 (en) * | 2002-04-12 | 2007-06-07 | Wyeth | Surface proteins of Streptococcus pyogenes |
JP2004533236A (ja) * | 2001-04-13 | 2004-11-04 | ワイエス | 化膿性連鎖球菌(Streptococcuspyogenes)の表面タンパク質 |
WO2002083855A2 (en) | 2001-04-16 | 2002-10-24 | Wyeth Holdings Corporation | Novel streptococcus pneumoniae open reading frames encoding polypeptide antigens and uses thereof |
JP2005504513A (ja) | 2001-05-09 | 2005-02-17 | コリクサ コーポレイション | 前立腺癌の治療及び診断のための組成物及び方法 |
US7446185B2 (en) * | 2001-07-18 | 2008-11-04 | The Regents Of The University Of California | Her2/neu target antigen and use of same to stimulate an immune response |
DE60233061D1 (de) * | 2001-09-06 | 2009-09-03 | Alphavax Inc | Alphavirus replikon-vektorsysteme |
JP4475561B2 (ja) | 2001-10-11 | 2010-06-09 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | C型肝炎ウイルスワクチン |
EP2172552A3 (en) | 2001-10-11 | 2010-07-21 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Recombinant nucleic acids comprising regions of AD6 |
AU2002365279B2 (en) | 2001-12-17 | 2009-08-13 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of inflammatory bowel disease |
JP2006504435A (ja) * | 2002-05-10 | 2006-02-09 | ザ ヘンリー エム. ジャクソン ファウンデイション | HIV−1のgp120のgp41への相互作用部位 |
WO2004000872A2 (en) * | 2002-06-21 | 2003-12-31 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Improved alphavirus vectors having attenuated virion structural proteins |
WO2008103472A2 (en) | 2007-02-23 | 2008-08-28 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
US8506959B2 (en) | 2002-11-01 | 2013-08-13 | Neotope Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
TW200509968A (en) | 2002-11-01 | 2005-03-16 | Elan Pharm Inc | Prevention and treatment of synucleinopathic disease |
NZ540657A (en) * | 2002-12-13 | 2006-09-29 | Alphavax Inc | High-yielding, GMP-compatible, commercially feasible process for producing highly purified alphavirus replicon particle (ARP) preparations for use in human and veterinary medicine |
ES2618309T3 (es) * | 2002-12-13 | 2017-06-21 | Alphavax, Inc. | Partículas de replicón de alfavirus multi-antigénico y métodos |
MXPA05007295A (es) | 2003-01-06 | 2005-09-30 | Corixa Corp | Ciertos compuestos de fosfato de aminoalquil glucosaminida y su uso. |
US7960522B2 (en) | 2003-01-06 | 2011-06-14 | Corixa Corporation | Certain aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use |
KR101454842B1 (ko) | 2003-03-20 | 2014-11-04 | 알파벡스, 인크. | 개선된 알파바이러스 레플리콘 및 헬퍼 구축물 |
WO2005000881A2 (en) * | 2003-05-29 | 2005-01-06 | United States Army Medical Research Institute For Infectious Diseases | Live attenuated viral vaccines for eastern equine encephalitis virus |
EP1629004B1 (en) * | 2003-06-05 | 2008-08-13 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions comprising venezuelan equine encephalitis virus replicon vectors and paramyxovirus protein antigens |
US20060099587A1 (en) * | 2003-06-20 | 2006-05-11 | Johnston Robert E | Alphavirus vectors having attentuated virion structural proteins |
AU2004257214B2 (en) * | 2003-07-11 | 2010-04-22 | Alphavax, Inc. | Alphavirus-based cytomegalovirus vaccines |
US20050266550A1 (en) * | 2004-05-18 | 2005-12-01 | Alphavax, Inc. | TC-83-derived alphavirus vectors, particles and methods |
CA2572921C (en) * | 2004-07-09 | 2017-01-03 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Replication-competent and propagation-defective venezuelan equine encephalitis (vee) viral adjuvants |
MX2007001679A (es) | 2004-08-09 | 2007-05-23 | Elan Pharm Inc | Prevencion y tratamiento de la enfermedad sinucleinopatica y amiloidogenica. |
ES2472441T3 (es) | 2004-09-22 | 2014-07-01 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Composición inmunog�nica para uso en vacunación contra estafilococos |
WO2007001423A2 (en) | 2004-10-21 | 2007-01-04 | Wyeth | Immunogenic compositions of staphylococcus epidermidis polypeptide and polynucleotide antigens |
CA2597921A1 (en) * | 2005-02-15 | 2007-04-26 | University Of North Carolina At Chapel Hill | New live virus vaccines |
EP2570423B1 (en) | 2005-06-17 | 2023-05-03 | MSD Italia S.r.l. | Hepatitis C virus nucleic acid vaccine |
EP1979488A4 (en) | 2006-01-09 | 2009-05-27 | Univ California | IMMUNOSTIMULATORY COMBINATIONS OF TNFRSF, TLR, NLR, RHR, PURINERGIC RECEPTOR AND CYTOKINE RECEPTOR AGONISTS USED FOR VACCINES AND ANTI-TUMOR IMMUNOTHERAPY |
EP2066346B1 (en) | 2006-09-12 | 2019-07-03 | AlphaVax, Inc. | Alphavirus replicon particles encoding il-12 as immunological adjuvants |
US20090022760A1 (en) * | 2006-09-12 | 2009-01-22 | Alphavax | Alphavirus Replicon Particles Matched to Protein Antigens as Immunological Adjuvants |
NZ576563A (en) * | 2006-11-03 | 2012-09-28 | Alphavax Inc | Alphavirus and alphavirus replicon particle formulations and methods |
PT3067066T (pt) | 2007-02-23 | 2019-06-17 | Univ California | Prevenção e tratamento da doença sinucleinopática e amiloidogénica |
WO2008156829A2 (en) | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Alphavax, Inc. | Promoterless cassettes for expression of alphavirus structural proteins |
US20090162395A1 (en) * | 2007-09-26 | 2009-06-25 | Crowe Jr James E | Vaccine for rsv and mpv |
NZ586875A (en) | 2007-12-28 | 2012-10-26 | Elan Pharm Inc | Treatment and prophylaxis of amyloidosis with an antibody that binds a specific epitope of human amyloid A peptide |
US20100040650A1 (en) * | 2008-05-30 | 2010-02-18 | Crowe Jr James E | Virus-Like paramyxovirus particles and vaccines |
WO2009155484A2 (en) | 2008-06-20 | 2009-12-23 | Wyeth | Compositions and methods of use of orf1358 from beta-hemolytic streptococcal strains |
LT3335728T (lt) | 2008-10-10 | 2020-03-10 | Children`S Medical Center Corporation | Biocheminiu požiūriu stabilizuota živ-1 env trimero vakcina |
EP2356135B1 (en) | 2008-11-05 | 2017-10-25 | Wyeth LLC | Multicomponent immunogenic composition for the prevention of beta-hemolytic streptococcal (bhs) disease |
WO2010059732A1 (en) | 2008-11-18 | 2010-05-27 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Antiviral vaccines with improved cellular immunogenicity |
JP2012509664A (ja) | 2008-11-26 | 2012-04-26 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | スタフィロコッカス・アウレウス(staphylococcusaureus)に対する防御免疫応答を誘導するポリペプチド |
JP2012509665A (ja) | 2008-11-26 | 2012-04-26 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | スタフィロコッカス・アウレウス(staphylococcusaureus)に対する防御免疫応答を誘導するポリペプチド |
ES2525707T3 (es) | 2008-12-01 | 2014-12-29 | Alphavax, Inc. | Uso de microRNAs para el control de ácidos nucleicos colaboradores de virus |
EP2413962A1 (en) | 2009-03-30 | 2012-02-08 | Mount Sinai School of Medicine | Influenza virus vaccines and uses thereof |
JP5931724B2 (ja) | 2009-06-29 | 2016-06-08 | ジェノセア バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | StreptococcusPneumoniaeに対するワクチンおよび組成物 |
CA2792537A1 (en) | 2010-03-30 | 2011-10-06 | Mount Sinai School Of Medicine | Influenza virus vaccines and uses thereof |
EP2665490B1 (en) | 2011-01-20 | 2020-03-04 | Genocea Biosciences, Inc. | Vaccines and compositions against streptococcus pneumoniae |
MX2013013627A (es) | 2011-06-21 | 2014-04-25 | Oncofactor Corp | Composiciones y metodos para la terapia y diagnostico de cancer. |
AU2012311234B2 (en) | 2011-09-19 | 2017-09-28 | Axon Neuroscience Se | Protein-based therapy and diagnosis of tau-mediated pathology in Alzheimer's disease |
EP2758075B1 (en) | 2011-09-20 | 2023-05-03 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | Influenza virus vaccines and uses thereof |
JP6379041B2 (ja) | 2012-01-20 | 2018-08-22 | ジェノセア バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | ストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococcuspneumoniae)に対する融合抗原ワクチンおよび組成物 |
JP2016508133A (ja) | 2012-12-18 | 2016-03-17 | アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ | インフルエンザウイルスワクチン及びその使用 |
SG11201505229XA (en) | 2013-01-07 | 2015-08-28 | Beth Israel Hospital | Stabilized human immunodeficiency virus (hiv) envelope (env) trimer vaccines and methods of using the same |
PE20152004A1 (es) | 2013-03-13 | 2016-02-07 | Prothena Biosciences Ltd | Inmunoterapia tau |
US9908930B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-03-06 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Antibodies against influenza virus hemagglutinin and uses thereof |
WO2015051270A1 (en) | 2013-10-04 | 2015-04-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Stabilized human immunodeficiency virus (hiv) clade c envelope (env) trimer vaccines and methods of using same |
JP6534654B2 (ja) | 2013-10-10 | 2019-06-26 | ベス イスラエル デアコネス メディカル センター インコーポレイティッド | Tm4sf1結合性タンパク質およびそれを使用する方法 |
RS61902B1 (sr) | 2014-09-26 | 2021-06-30 | Beth Israel Deaconess Medical Ct Inc | Metodi i kompozicije za indukovanje zaštitnog imuniteta protiv infekcije virusom humane imunodeficijencije |
JP2018504412A (ja) | 2015-01-23 | 2018-02-15 | アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ | インフルエンザウイルスワクチン接種レジメン |
EP3270897A4 (en) | 2015-03-20 | 2018-12-05 | The Regents Of The University Of Michigan | Immunogenic compositions for use in vaccination against bordetella |
AU2016369326B2 (en) | 2015-12-15 | 2019-02-21 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Human immunodeficiency virus antigens, vectors, compositions, and methods of use thereof |
KR102506091B1 (ko) | 2016-05-02 | 2023-03-07 | 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 | 타우 면역요법 |
CU24537B1 (es) | 2016-05-02 | 2021-07-02 | Prothena Biosciences Ltd | Anticuerpos monoclonales que compiten por unirse a tau humano con el anticuerpo 3d6 |
PE20190208A1 (es) | 2016-05-02 | 2019-02-07 | Prothena Biosciences Ltd | Anticuerpos que reconocen tau |
EP3471767A4 (en) | 2016-06-15 | 2020-01-15 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | INFLUENZA VIRUS HEMAGGLUTININS AND USES THEREOF |
US10273268B2 (en) | 2016-06-16 | 2019-04-30 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | HIV vaccine formulation |
WO2018018082A1 (en) | 2016-07-26 | 2018-02-01 | The Australian National University | Immunostimulatory compositions and uses therefor |
AU2017318689A1 (en) | 2016-09-02 | 2019-04-11 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods for inducing an immune response against human immunodeficiency virus infection in subjects undergoing antiretroviral treatment |
HUE052008T2 (hu) | 2016-09-15 | 2021-04-28 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Trimert stabilizáló HIV-burokfehérje-mutációk |
RU2642312C1 (ru) * | 2016-09-20 | 2018-01-24 | Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) | Способ профилактики и лечения опасных нейровирусных инфекций |
US11230572B2 (en) | 2016-10-17 | 2022-01-25 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Signature-based human immunodeficiency virus (HIV) envelope (Env) trimer vaccines and methods of using the same |
EP3606555A4 (en) | 2017-04-07 | 2021-08-04 | Icahn School of Medicine at Mount Sinai | INFLUENZA VIRUS TYPE B ANTI-NEURAMINIDASE ANTIBODIES AND THEIR USES |
AU2018263935A1 (en) | 2017-05-02 | 2019-12-19 | Prothena Biosciences Limited | Antibodies recognizing tau |
WO2018208856A1 (en) | 2017-05-08 | 2018-11-15 | Gritstone Oncology, Inc. | Alphavirus neoantigen vectors |
MA49397A (fr) | 2017-06-15 | 2020-04-22 | Bavarian Nordic As | Vecteurs à poxvirus codant pour des antigènes du vih, et leurs procédés d'utilisation |
BR112020000867A2 (pt) | 2017-07-19 | 2020-07-21 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | mutações da proteína do envelope do hiv estabilizando o trímero |
WO2019099970A1 (en) | 2017-11-20 | 2019-05-23 | Janssen Pharmaceuticals Inc. | Method of providing safe administration of adenoviral vectors encoding a zika virus antigen |
JP2022524588A (ja) | 2019-03-03 | 2022-05-09 | プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド | タウ認識抗体 |
TW202110870A (zh) | 2019-05-30 | 2021-03-16 | 美商葛利史東腫瘤科技公司 | 經修飾之腺病毒 |
KR20220134622A (ko) | 2020-01-31 | 2022-10-05 | 베쓰 이스라엘 디코니스 메디칼 센터 인크 | 코로나바이러스 감염 예방 및 치료용 조성물 및 방법 - sars-cov-2 백신 |
WO2021236809A2 (en) | 2020-05-19 | 2021-11-25 | Othair Prothena Limited | Multi-epitope vaccine for the treatment of alzheimer's disease |
CN116438308A (zh) | 2020-08-06 | 2023-07-14 | 磨石生物公司 | 多表位疫苗盒 |
US20230233667A1 (en) | 2021-09-08 | 2023-07-27 | Affinivax, Inc. | Coronavirus vaccine |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5185440A (en) * | 1989-06-20 | 1993-02-09 | North Carolina State University | cDNA clone coding for Venezuelan equine encephalitis virus and attenuating mutations thereof |
SE9003978D0 (sv) * | 1990-12-13 | 1990-12-13 | Henrik Garoff | Dna expressionssystem baserade paa ett virus replikon |
US5505947A (en) * | 1994-05-27 | 1996-04-09 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Attenuating mutations in Venezuelan Equine Encephalitis virus |
-
1994
- 1994-05-27 US US08/250,445 patent/US5505947A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-05-19 US US08/444,563 patent/US5643576A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-26 EP EP95922131A patent/EP0762894B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-26 WO PCT/US1995/006739 patent/WO1995032733A1/en active IP Right Grant
- 1995-05-26 DE DE69532672T patent/DE69532672T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-05-26 JP JP8500055A patent/JPH10501405A/ja active Pending
- 1995-05-26 AT AT95922131T patent/ATE261312T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-05-26 CA CA002193210A patent/CA2193210C/en not_active Expired - Lifetime
-
2005
- 2005-07-08 JP JP2005199854A patent/JP2006006335A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO1995032733A1 (en) | 1995-12-07 |
DE69532672T2 (de) | 2005-02-17 |
EP0762894A1 (en) | 1997-03-19 |
AU709795B2 (en) | 1999-09-09 |
CA2193210A1 (en) | 1995-12-07 |
ATE261312T1 (de) | 2004-03-15 |
CA2193210C (en) | 2007-02-20 |
JP2006006335A (ja) | 2006-01-12 |
EP0762894B1 (en) | 2004-03-10 |
US5643576A (en) | 1997-07-01 |
AU2692395A (en) | 1995-12-21 |
US5505947A (en) | 1996-04-09 |
DE69532672D1 (de) | 2004-04-15 |
EP0762894A4 (en) | 1997-11-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH10501405A (ja) | 異種免疫原を発現する生のベネズエラウマ脳炎ウイルスによる免疫応答の誘発方法 | |
JP7113924B2 (ja) | 組み換え改変ワクシニアウイルスアンカラ(mva)フィロウイルスワクチン | |
KR970011149B1 (ko) | 재조합 아비폭스 바이러스 | |
Taylor et al. | Newcastle disease virus fusion protein expressed in a fowlpox virus recombinant confers protection in chickens | |
KR100877019B1 (ko) | 야생형 및 키메릭 인플루엔자 바이러스성입자(브이엘피)의 조립 | |
US6800288B2 (en) | Recombinant influenza A viruses | |
JP7244455B2 (ja) | ウイルス様粒子からの感染性インフルエンザウイルスの生成 | |
JP2023511444A (ja) | 安定化されたnaを有する組換えインフルエンザウイルス | |
JPH01500161A (ja) | Aidsの原因ウィルスの糖蛋白質、該糖蛋白質の製造方法及びワクチン | |
WO2019084310A1 (en) | HAS RECOMBINANT INFLUENZA VIRUSES STABILIZED FOR EGG REPLICATION | |
US20230190917A1 (en) | Viral vaccine vector for immunization against a betacoronavirus | |
CN108715866B (zh) | 一种重组病毒载体、疫苗及其制备方法与应用 | |
US20230174588A1 (en) | A vaccine against sars-cov-2 and preparation thereof | |
JPH06511392A (ja) | 組換えネコヘルペスウイルスのベクターワクチン | |
WO2021207848A1 (en) | Mers-cov vaccine | |
AU709795C (en) | Method of inducing an immune response with a live venezuelan equine encephalitis virus expressing a heterologous immunogen | |
AU753566B2 (en) | Method of inducing an immune response with a live Venezuelan equine encephalitis virus expressing heterologous immunogen | |
WO1991002804A1 (en) | Recombinant adenovirus sequence expressing rhabdovirus antigen and use as a vaccine | |
CA2090005C (en) | Cross-reactive influenza a immunization | |
KR101302245B1 (ko) | 넓은 범위의 교차 방어능력을 갖는 신규한 보강 인플루엔자 백신 | |
CA1341403C (en) | Recombinant a vipox virus | |
WO2023227758A1 (en) | Vaccine with reduced anti-vector antigenicity | |
KR20180070701A (ko) | 호흡기 세포융합 바이러스 백신 | |
IE60309B1 (en) | Recombinant viruses, vaccines containing them and in vitro cell cultures thereof |