JPH10221340A - 皮膚疾患の診断方法および薬効評価方法 - Google Patents
皮膚疾患の診断方法および薬効評価方法Info
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- JPH10221340A JPH10221340A JP3861997A JP3861997A JPH10221340A JP H10221340 A JPH10221340 A JP H10221340A JP 3861997 A JP3861997 A JP 3861997A JP 3861997 A JP3861997 A JP 3861997A JP H10221340 A JPH10221340 A JP H10221340A
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- skin disease
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- stratum corneum
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 皮膚疾患を簡便な方法で客観的に評価できる
診断法の提供。 【解決手段】 角層試料におけるインターロイキン１お
よびインターロイキン１レセプターアンタゴニストの存
在量の多寡を疾患の程度の指標とする皮膚疾患の診断方
法。
診断法の提供。 【解決手段】 角層試料におけるインターロイキン１お
よびインターロイキン１レセプターアンタゴニストの存
在量の多寡を疾患の程度の指標とする皮膚疾患の診断方
法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、皮膚疾患の診断方
法および皮膚疾患の治療用薬物の薬効評価方法、ならび
にそれらの方法を実施するためのキットに関する。
法および皮膚疾患の治療用薬物の薬効評価方法、ならび
にそれらの方法を実施するためのキットに関する。
【０００２】
【従来の技術】皮膚は外界からの異物の侵入を防ぐ物理
的なバリヤーとしての機能に加えて、重要な免疫反応の
場であることが解明されてきている。たとえば、炎症性
皮膚疾患における炎症反応は表皮角化細胞、湿潤してき
た炎症細胞が産生するサイトカインによって仲介される
ことが明らかにされてきた。それぞれの炎症性皮膚疾患
で、異なる組合せのサイトカインが炎症反応に関係して
いると考えることができる。
的なバリヤーとしての機能に加えて、重要な免疫反応の
場であることが解明されてきている。たとえば、炎症性
皮膚疾患における炎症反応は表皮角化細胞、湿潤してき
た炎症細胞が産生するサイトカインによって仲介される
ことが明らかにされてきた。それぞれの炎症性皮膚疾患
で、異なる組合せのサイトカインが炎症反応に関係して
いると考えることができる。
【０００３】各種サイトカインの中で、インターロイキ
ン１（本明細書では、「ＩＬ-１」と略記する場合があ
る）は、表皮角化細胞を初めとする細胞が産生する炎症
惹起性サイトカインの代表として研究されてきた。この
ＩＬ-１は正常角層中に多量に含まれており、角層が破
壊されるような外的、内的な機転が働くとＩＬ-１が放
出され、一連の炎症反応の引き金を引く重要な役割を担
っているものとみなされている。生体の恒常性を維持す
るため生体は前記炎症反応を抑制する機構をいくつか持
っている。その一つとしてＩＬ-１がその受容体に結合
するのを抑制するＩＬ-１レセプターアンタゴニスト
（本明細書では、「ＩＬ-１ｒａ」と略記する場合があ
る）が挙げられる。
ン１（本明細書では、「ＩＬ-１」と略記する場合があ
る）は、表皮角化細胞を初めとする細胞が産生する炎症
惹起性サイトカインの代表として研究されてきた。この
ＩＬ-１は正常角層中に多量に含まれており、角層が破
壊されるような外的、内的な機転が働くとＩＬ-１が放
出され、一連の炎症反応の引き金を引く重要な役割を担
っているものとみなされている。生体の恒常性を維持す
るため生体は前記炎症反応を抑制する機構をいくつか持
っている。その一つとしてＩＬ-１がその受容体に結合
するのを抑制するＩＬ-１レセプターアンタゴニスト
（本明細書では、「ＩＬ-１ｒａ」と略記する場合があ
る）が挙げられる。
【０００４】ＩＬ-１ｒａも表皮において産生され、乾
癬などでその存在が明らかにされているが、必ずしもそ
の生理的意義は明らかにされていない。たとえば、Ｃ．
Ｈａｍｍｅｒｂｅｒｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓ
ｔ.，９０：５７７−５８３（１９９２）によれば、乾
癬表皮から外科的に摘出した試料では、正常表皮に由来
するものより、ＩＬ-１に対するＩＬ-１ｒａの比率が有
意に高くなることが記載されている。一方、Ｍ．Ｋｒｉ
ｓｔｅｎｓｅｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１
２７：３０５−３１１（１９９２）によれば、免疫組織
化学的に乾癬表皮を観察したところ、ＩＬ-１ｒａの発
現が低下していることを示唆している。このように、表
皮中におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量は、皮
膚疾患との関連性の存在を窺わせる研究成果もあるが、
その関連性は必ずしも明確なものでなかった。
癬などでその存在が明らかにされているが、必ずしもそ
の生理的意義は明らかにされていない。たとえば、Ｃ．
Ｈａｍｍｅｒｂｅｒｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓ
ｔ.，９０：５７７−５８３（１９９２）によれば、乾
癬表皮から外科的に摘出した試料では、正常表皮に由来
するものより、ＩＬ-１に対するＩＬ-１ｒａの比率が有
意に高くなることが記載されている。一方、Ｍ．Ｋｒｉ
ｓｔｅｎｓｅｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１
２７：３０５−３１１（１９９２）によれば、免疫組織
化学的に乾癬表皮を観察したところ、ＩＬ-１ｒａの発
現が低下していることを示唆している。このように、表
皮中におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量は、皮
膚疾患との関連性の存在を窺わせる研究成果もあるが、
その関連性は必ずしも明確なものでなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】かりに、表皮またはそ
れらに由来する試料中のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存
在量と皮膚疾患との関連性が存在するものであるなら
ば、上記Ｈａｍｍｅｒｂｅｒｇらのような外科的処置を
経ることなく入手できる試料を用いて上記関連性が検査
できることが望まれるであろう。したがって、本発明の
目的は非侵襲的かつ簡便な方法により入手できる試料を
用いる皮膚疾患の診断方法を提供することにある。
れらに由来する試料中のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存
在量と皮膚疾患との関連性が存在するものであるなら
ば、上記Ｈａｍｍｅｒｂｅｒｇらのような外科的処置を
経ることなく入手できる試料を用いて上記関連性が検査
できることが望まれるであろう。したがって、本発明の
目的は非侵襲的かつ簡便な方法により入手できる試料を
用いる皮膚疾患の診断方法を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】発明者らは、テープスト
リッピングという非侵襲的方法により得られる角層試料
中のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量は、健常部位の
値から一定の皮膚疾患の病変部位における値いが有意に
識別できることを見い出した。したがって上記課題は、
本発明に従う、角層試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-１
ｒａの存在量の多寡を、疾患の程度の指標とすることを
特徴とする皮膚疾患の診断方法、を提供することにより
解決できる。
リッピングという非侵襲的方法により得られる角層試料
中のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量は、健常部位の
値から一定の皮膚疾患の病変部位における値いが有意に
識別できることを見い出した。したがって上記課題は、
本発明に従う、角層試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-１
ｒａの存在量の多寡を、疾患の程度の指標とすることを
特徴とする皮膚疾患の診断方法、を提供することにより
解決できる。
【０００７】また、本発明の好ましい態様としては、
（Ａ）皮膚疾患に罹患していることが疑われる部位
（ａ）および該部位に相当もしくは近縁する健常部位
（ｂ）からの角層試料を用意する工程、（Ｂ）用意した
各試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量を測
定する工程、ならびに（Ｃ）部位（ａ）由来の試料にお
けるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの各存在量の比を、部位
（ｂ）由来の試料における同様の比と比較する工程、を
含んでなる皮膚疾患の診断方法が提供される。
（Ａ）皮膚疾患に罹患していることが疑われる部位
（ａ）および該部位に相当もしくは近縁する健常部位
（ｂ）からの角層試料を用意する工程、（Ｂ）用意した
各試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在量を測
定する工程、ならびに（Ｃ）部位（ａ）由来の試料にお
けるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの各存在量の比を、部位
（ｂ）由来の試料における同様の比と比較する工程、を
含んでなる皮膚疾患の診断方法が提供される。
【０００８】本発明によれば、皮膚疾患の病変部位にお
ける比（すなわちＩＬ-１／ＩＬ-１ｒａもしくはＩＬ-
１ｒａ／ＩＬ-１の値）は、健常部位における比の値と
有意な差異を示すので被験対象が皮膚疾患に罹患してい
るか否かが診断できる。具体的には、病変部位における
ＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値は、健常部位におけるＩＬ-
１ｒａ／ＩＬ-１の値より、一般に１０倍を越える値を
示す。
ける比（すなわちＩＬ-１／ＩＬ-１ｒａもしくはＩＬ-
１ｒａ／ＩＬ-１の値）は、健常部位における比の値と
有意な差異を示すので被験対象が皮膚疾患に罹患してい
るか否かが診断できる。具体的には、病変部位における
ＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値は、健常部位におけるＩＬ-
１ｒａ／ＩＬ-１の値より、一般に１０倍を越える値を
示す。
【０００９】さらに本発明に従えば、上記診断方法にお
ける病変部位と健常部位のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの
存在量比に代え、皮膚疾患を有する患者にある一定の薬
物を投与した前後の比を比較することにより、皮膚疾患
に対する使用薬物の薬効を評価する方法が提供される。
ける病変部位と健常部位のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの
存在量比に代え、皮膚疾患を有する患者にある一定の薬
物を投与した前後の比を比較することにより、皮膚疾患
に対する使用薬物の薬効を評価する方法が提供される。
【００１０】なお、本発明にいう、ＩＬ-１は、特記し
ない限り、ＩＬ-１αを表示する目的で使用している。
ない限り、ＩＬ-１αを表示する目的で使用している。
【００１１】
【発明の具体的な態様】本発明により診断できる皮膚疾
患には、ＩＬ-１とＩＬ-１ｒａの存在量比を健常部位の
該比と有意に識別できるものであれば、いかなる疾患も
包含される。しかし、本願により好適に診断できる疾患
としては、尋常性乾癬、アトピー性皮膚性、乏脂性皮膚
炎および皮膚真菌症を挙げることができる。
患には、ＩＬ-１とＩＬ-１ｒａの存在量比を健常部位の
該比と有意に識別できるものであれば、いかなる疾患も
包含される。しかし、本願により好適に診断できる疾患
としては、尋常性乾癬、アトピー性皮膚性、乏脂性皮膚
炎および皮膚真菌症を挙げることができる。
【００１２】皮膚疾患に罹患していることが疑われる部
位とは、外見上皮膚に異常が認められる場合だけでな
く、患者が皮膚に何等かの異常を感じている部位をも包
含する。また、かかる部位に「相当する健常部位」と
は、患者における診断部位に身体上対応する健常人の部
位を意味し、そして「相当する近縁する健常部位」と
は、患者の診断部位の近傍であって、上記異常が認めら
れない部位を意味する。
位とは、外見上皮膚に異常が認められる場合だけでな
く、患者が皮膚に何等かの異常を感じている部位をも包
含する。また、かかる部位に「相当する健常部位」と
は、患者における診断部位に身体上対応する健常人の部
位を意味し、そして「相当する近縁する健常部位」と
は、患者の診断部位の近傍であって、上記異常が認めら
れない部位を意味する。
【００１３】本発明によれば、上記の健常部位のいずれ
か一方における、たとえばＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を
診断の対象となる部位のＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を比
較することにより、皮膚疾患の有無を診断することがで
きる。しかし、上記両健常部位と診断の対象部位におけ
る、それぞれのＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を比較すれ
ば、疾患の進行状態まで知ることが可能である。
か一方における、たとえばＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を
診断の対象となる部位のＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を比
較することにより、皮膚疾患の有無を診断することがで
きる。しかし、上記両健常部位と診断の対象部位におけ
る、それぞれのＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を比較すれ
ば、疾患の進行状態まで知ることが可能である。
【００１４】本発明においてＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａ
の存在量を測定する対象となる試料は、上述のＣ．Ｈａ
ｍｍｅｒｂｅｒｇらによる外科的に摘出して（具体的に
は、角膜切開刀などを用いて）得られる全表皮でなく、
当該技術分野で通常角層の採取に用いられているテープ
ストリッピング等によって得られる試料を対象とする。
本発明は、全表皮試料でなく、角層試料におけるＩＬ-
１およびＩＬ-１ｒａの存在量が皮膚疾患と明確な関連
性を有することを見い出したことが前提となっている。
さらに、本発明で用いることのできる試料には、擦過等
により生じる角層片や、鱗屑、フケ、垢、爪なども包含
される。
の存在量を測定する対象となる試料は、上述のＣ．Ｈａ
ｍｍｅｒｂｅｒｇらによる外科的に摘出して（具体的に
は、角膜切開刀などを用いて）得られる全表皮でなく、
当該技術分野で通常角層の採取に用いられているテープ
ストリッピング等によって得られる試料を対象とする。
本発明は、全表皮試料でなく、角層試料におけるＩＬ-
１およびＩＬ-１ｒａの存在量が皮膚疾患と明確な関連
性を有することを見い出したことが前提となっている。
さらに、本発明で用いることのできる試料には、擦過等
により生じる角層片や、鱗屑、フケ、垢、爪なども包含
される。
【００１５】こうして用意した各試料におけるＩＬ-１
およびＩＬ-１ｒａの存在量は、各試料からそれ自体既
知の生化学的方法、たとえば凍結融解法、超音波破砕法
等を介して可溶性画分を調製する抽出方法によってＩＬ
-１またはＩＬ-１ｒａを抽出した後に、測定するのが好
ましい。
およびＩＬ-１ｒａの存在量は、各試料からそれ自体既
知の生化学的方法、たとえば凍結融解法、超音波破砕法
等を介して可溶性画分を調製する抽出方法によってＩＬ
-１またはＩＬ-１ｒａを抽出した後に、測定するのが好
ましい。
【００１６】ＩＬ-１の測定は、リンパ球増殖反応等を
指標としたバイオアッセイ法や、ＩＬ-１に対する抗体
との反応性に基づくエンザイムイムノアッセイ、ラジオ
イムノアッセイ、ウエスタンブロッティング等の方法を
用いることができる。ＩＬ-１ｒａの測定は、リンパ球
増殖反応の阻害等を指標としたバイオアッセイ法や、Ｉ
Ｌ-１ｒａに対する抗体との反応性に基づくエンザイム
イムノアッセイ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタンブ
ロッティング等の方法を用いて行うことができる。いず
れの方法によってもＩＬ-１の測定およびＩＬ-１ｒａの
測定が可能であるが、操作の簡便性、感度、設備等の点
から、上記抗体を用いるエンザイムイムノアッセイによ
る方法が好ましい。
指標としたバイオアッセイ法や、ＩＬ-１に対する抗体
との反応性に基づくエンザイムイムノアッセイ、ラジオ
イムノアッセイ、ウエスタンブロッティング等の方法を
用いることができる。ＩＬ-１ｒａの測定は、リンパ球
増殖反応の阻害等を指標としたバイオアッセイ法や、Ｉ
Ｌ-１ｒａに対する抗体との反応性に基づくエンザイム
イムノアッセイ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタンブ
ロッティング等の方法を用いて行うことができる。いず
れの方法によってもＩＬ-１の測定およびＩＬ-１ｒａの
測定が可能であるが、操作の簡便性、感度、設備等の点
から、上記抗体を用いるエンザイムイムノアッセイによ
る方法が好ましい。
【００１７】以上により測定されたＩＬ-１およびＩＬ-
１ｒａの値は、それぞれＩＬ-１／ＩＬ-１ｒａまたはＩ
Ｌ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を算出した上、それらの健常部
位の値と診断の対象となる部位（すなわち、皮膚疾患に
罹患していることが疑われる部位）の値が比較される。
この比較は、健常部位として健常人の部位における値を
用いる場合には、予め各部分について測定された値をコ
ンピューターに入力、貯蔵したデータを基準にして、行
ってもよい。
１ｒａの値は、それぞれＩＬ-１／ＩＬ-１ｒａまたはＩ
Ｌ-１ｒａ／ＩＬ-１の値を算出した上、それらの健常部
位の値と診断の対象となる部位（すなわち、皮膚疾患に
罹患していることが疑われる部位）の値が比較される。
この比較は、健常部位として健常人の部位における値を
用いる場合には、予め各部分について測定された値をコ
ンピューターに入力、貯蔵したデータを基準にして、行
ってもよい。
【００１８】以上の工程は、本発明のもう一つの態様で
ある、皮膚疾患に対して使用された薬物の薬効評価方法
においても、ＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａを測定する試料
を、患者への薬物の投与前後の病変部位とすること以
外、同様に実施される。なお、患者への薬物の投与は、
病変部位への投与（外用）に限定されないが、病変部位
への直接投与が望ましい。こうして、患者への薬物の投
与前後における、測定対象試料中のＩＬ-１に対するＩ
Ｌ-１ｒａの比が、有意に変動する場合は、使用薬物
は、皮膚疾患に対して、薬効（副作用を示すときを含
む）を有することが確認できる。
ある、皮膚疾患に対して使用された薬物の薬効評価方法
においても、ＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａを測定する試料
を、患者への薬物の投与前後の病変部位とすること以
外、同様に実施される。なお、患者への薬物の投与は、
病変部位への投与（外用）に限定されないが、病変部位
への直接投与が望ましい。こうして、患者への薬物の投
与前後における、測定対象試料中のＩＬ-１に対するＩ
Ｌ-１ｒａの比が、有意に変動する場合は、使用薬物
は、皮膚疾患に対して、薬効（副作用を示すときを含
む）を有することが確認できる。
【００１９】以上の各方法において、ＩＬ-１およびＩ
Ｌ-１ｒａを測定する手段としては、それぞれＩＬ-１に
対する抗体およびＩＬ-１ｒａに対する抗体を用いるこ
とが好適である。このような抗体は、それぞれ既知の作
製方法により得ることができるが、市販されているもの
を販売元の推奨する態様に従って使用することが好都合
である。
Ｌ-１ｒａを測定する手段としては、それぞれＩＬ-１に
対する抗体およびＩＬ-１ｒａに対する抗体を用いるこ
とが好適である。このような抗体は、それぞれ既知の作
製方法により得ることができるが、市販されているもの
を販売元の推奨する態様に従って使用することが好都合
である。
【００２０】こうして、本発明によれば、特に、ＩＬ-
１およびＩＬ-１ｒａをそれぞれ測定するための抗体を
組み合わせて使用できるように構成した、キットも提供
される。組み合わせて使用できるとは、ＩＬ-１および
ＩＬ-１ｒａをその場合で測定するか、あるいは時また
は場所を異にして測定するかを問わないが、測定結果が
最終的に比較できる状態にあることを意味する。このキ
ットには、上記測定の実施を容易にする、試薬類（例え
ば緩衝剤等）や備品（マイクロタイタープレート、ピペ
ット等）を含めることができる。
１およびＩＬ-１ｒａをそれぞれ測定するための抗体を
組み合わせて使用できるように構成した、キットも提供
される。組み合わせて使用できるとは、ＩＬ-１および
ＩＬ-１ｒａをその場合で測定するか、あるいは時また
は場所を異にして測定するかを問わないが、測定結果が
最終的に比較できる状態にあることを意味する。このキ
ットには、上記測定の実施を容易にする、試薬類（例え
ば緩衝剤等）や備品（マイクロタイタープレート、ピペ
ット等）を含めることができる。
【００２１】
【実施例】以下、本発明を実施例を引用しながらさらに
具体的に説明する。
具体的に説明する。
【００２２】（角層試料の用意および測定試料の調製
例）尋常性乾癬、アトピー性皮膚炎、乏脂性皮膚炎、真
菌症などの炎症性皮膚疾患の病変部位に粘着性セロハン
テープを貼付して直ちに剥離した。テープに付着した角
層にリン酸緩衝生理食塩液を加えて、超音波処理を施し
た後、遠心分離により、ＩＬ-１αおよびＩＬ-１ｒａを
含む可溶性タンパク質画分を得た。
例）尋常性乾癬、アトピー性皮膚炎、乏脂性皮膚炎、真
菌症などの炎症性皮膚疾患の病変部位に粘着性セロハン
テープを貼付して直ちに剥離した。テープに付着した角
層にリン酸緩衝生理食塩液を加えて、超音波処理を施し
た後、遠心分離により、ＩＬ-１αおよびＩＬ-１ｒａを
含む可溶性タンパク質画分を得た。
【００２３】上記それぞれの試料に対する操作は、以
下、具体的に記載する共通の方法によって行った。
下、具体的に記載する共通の方法によって行った。
【００２４】角層の採取は、Ｉ．Ｈｏｒｉｉら、Ｂｒ．
Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１２１：５８７−５９２（１
９８９）に記載の方法を若干改良して行った。まず、粘
着性テープ片を試料採取部によく貼付し、そのテープ片
を剥がした。このテープ片（２４ｍｍ×４５ｍｍ）を細
断した後、ペニシリン、ストレプトマイシンおよびＦｕ
ｎｇｉｚｏｎｅ（Ｇｉｂｃｏ製）を補足したダルベッコ
のリン酸緩衝生理食塩液に浸漬し、抽出を行うまで−２
０℃で貯蔵した。抽出は、前記浸漬液をプローブを備え
た超音波処理器（Ａｓｔｒａｓｏｎ（商標）Ｈｅａｔ
Ｓｙｓｔｅｍｓ-Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ製）を用い、
氷上で２分間処理して行った。不溶物を、４℃で１０分
間１４,０００ｇの遠心により除去した。こうして、得
られた上澄を以下に実験に供した。
Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１２１：５８７−５９２（１
９８９）に記載の方法を若干改良して行った。まず、粘
着性テープ片を試料採取部によく貼付し、そのテープ片
を剥がした。このテープ片（２４ｍｍ×４５ｍｍ）を細
断した後、ペニシリン、ストレプトマイシンおよびＦｕ
ｎｇｉｚｏｎｅ（Ｇｉｂｃｏ製）を補足したダルベッコ
のリン酸緩衝生理食塩液に浸漬し、抽出を行うまで−２
０℃で貯蔵した。抽出は、前記浸漬液をプローブを備え
た超音波処理器（Ａｓｔｒａｓｏｎ（商標）Ｈｅａｔ
Ｓｙｓｔｅｍｓ-Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ製）を用い、
氷上で２分間処理して行った。不溶物を、４℃で１０分
間１４,０００ｇの遠心により除去した。こうして、得
られた上澄を以下に実験に供した。
【００２５】（ＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの測定例）上
述の方法で調製した測定用試料（上澄）中のＩＬ-１、
ＩＬ-１ｒａの測定は、それぞれＩＬ-１、ＩＬ-１ｒａ
測定用エンザイムイムノアッセイ（ＥＬＩＳＡ）キット
（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて行った。
述の方法で調製した測定用試料（上澄）中のＩＬ-１、
ＩＬ-１ｒａの測定は、それぞれＩＬ-１、ＩＬ-１ｒａ
測定用エンザイムイムノアッセイ（ＥＬＩＳＡ）キット
（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ社製）を用いて行った。
【００２６】試料中のＩＬ-１ｒａを測定する場合は、
上記上澄をキットに備えられている希釈液で１０倍希釈
した。ＥＬＩＳＡの結果は、光学濃度をＴｉｔｅｒｔｉ
ｋＭｕｌｔｉｓｋａｎ（Ｌａｂｓｙｔｅｍｓ製）で測定
した。
上記上澄をキットに備えられている希釈液で１０倍希釈
した。ＥＬＩＳＡの結果は、光学濃度をＴｉｔｅｒｔｉ
ｋＭｕｌｔｉｓｋａｎ（Ｌａｂｓｙｔｅｍｓ製）で測定
した。
【００２７】採取される角層の量は、対象部位、皮膚疾
患により異なるため、測定試料中のタンパク質をＢｒａ
ｄｆｏｒｄ法（ＭＭ．Ｂｒａｄｆｏｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ.，７２：２４８−２５４，１９７６）に
より測定し、タンパク質量あたりのＩＬ-１あるいはＩ
Ｌ-１ｒａを算出し、角層中ＩＬ-１値、ＩＬ-１ｒａ値
とした。また、生物活性の指標となるＩＬ-１ｒａ／Ｉ
Ｌ-１比を算出した。
患により異なるため、測定試料中のタンパク質をＢｒａ
ｄｆｏｒｄ法（ＭＭ．Ｂｒａｄｆｏｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ.，７２：２４８−２５４，１９７６）に
より測定し、タンパク質量あたりのＩＬ-１あるいはＩ
Ｌ-１ｒａを算出し、角層中ＩＬ-１値、ＩＬ-１ｒａ値
とした。また、生物活性の指標となるＩＬ-１ｒａ／Ｉ
Ｌ-１比を算出した。
【００２８】（結果）健常人の角層中ＩＬ-１値、ＩＬ-
１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１比は部位により異なる
ことが知られている（Ｔ．Ｈｉｒａｏら、Ｊ．Ｉｎｖｅ
ｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１０６：１１０２−１１０
７，１９９６）。そこで、採取部位別に、皮膚疾患患者
の角層中ＩＬ-１値、ＩＬ-１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ／Ｉ
Ｌ-１比を比較した。結果を、表Ｉ〜IIIに示す。
１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１比は部位により異なる
ことが知られている（Ｔ．Ｈｉｒａｏら、Ｊ．Ｉｎｖｅ
ｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ.，１０６：１１０２−１１０
７，１９９６）。そこで、採取部位別に、皮膚疾患患者
の角層中ＩＬ-１値、ＩＬ-１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ／Ｉ
Ｌ-１比を比較した。結果を、表Ｉ〜IIIに示す。
【００２９】
【表１】
【００３０】
【表２】
【００３１】
【表３】
【００３２】なお、各測定値は、それぞれの表中に示さ
れる例数の平均値である。
れる例数の平均値である。
【００３３】上記各層から、尋常性乾癬、アトピー性皮
膚炎、乏脂性皮膚炎および真菌症などの炎症性皮膚疾患
の病変部位において角層中ＩＬ-１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ
／ＩＬ-１比の著しい亢進が認められる。
膚炎、乏脂性皮膚炎および真菌症などの炎症性皮膚疾患
の病変部位において角層中ＩＬ-１ｒａ値、ＩＬ-１ｒａ
／ＩＬ-１比の著しい亢進が認められる。
【００３４】（尋常性乾癬およびアトピー性皮膚炎の薬
物を用いる治療前後における試料中のＩＬ-１、ＩＬ-１
ｒａの測定例）上記の測定法に従って、尋常性乾癬およ
びアトピー性皮膚炎をステロイド外用剤により治療し
た、前記の病変部位におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａ
の量を測定し、それぞれＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の比を算
出した。
物を用いる治療前後における試料中のＩＬ-１、ＩＬ-１
ｒａの測定例）上記の測定法に従って、尋常性乾癬およ
びアトピー性皮膚炎をステロイド外用剤により治療し
た、前記の病変部位におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａ
の量を測定し、それぞれＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の比を算
出した。
【００３５】結果を表IVに示す。
【００３６】
【表４】
【００３７】治療後、症状の軽快とともに、表IVからみ
られるように、角層中のＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の比が有
意に低下することがわかる。
られるように、角層中のＩＬ-１ｒａ／ＩＬ-１の比が有
意に低下することがわかる。
【００３８】
【発明の効果】本発明によれば、皮膚疾患の進行状況を
も客観的に評価できる、診断方法が提供される。また、
この方法は、測定対象試料を代えることによって、皮膚
疾患に対して用いた薬物の薬効評価方法に改変すること
もできる。
も客観的に評価できる、診断方法が提供される。また、
この方法は、測定対象試料を代えることによって、皮膚
疾患に対して用いた薬物の薬効評価方法に改変すること
もできる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 佐藤 悦久 神奈川県横浜市金沢区福浦２−12−１ 株 式会社アドバンストスキンリサーチ研究所 内 (72)発明者 照井 正 宮城県仙台市泉区桂３−５−10 (72)発明者 田上 八朗 宮城県仙台市青葉区貝ケ森３−27−１
Claims (7)
- 【請求項１】 角層試料におけるインターロイキン１
（ＩＬ-１）およびインターロイキン１レセプターアン
タゴニスト（ＩＬ-１ｒａ）の存在量の多寡を、疾患の
程度の指標にすることを特徴とする皮膚疾患の診断方
法。 - 【請求項２】 （Ａ）皮膚疾患に罹患していることが疑
われる部位（ａ）および該部位に相当もしくは近縁する
健常部位（ｂ）からの角層試料を用意する工程、 （Ｂ）用意した各試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒ
ａの存在量を測定する工程、ならびに （Ｃ）部位（ａ）由来の試料におけるＩＬ-１およびＩ
Ｌ-１ｒａの各存在量の比を、部位（ｂ）由来の試料に
おける同様の比と比較する工程、を含んでなる請求項１
記載の診断方法。 - 【請求項３】 皮膚疾患が、尋常性乾癬、アトピー性皮
膚炎、乏脂性皮膚炎および皮膚真菌症からなる群より選
ばれる請求項１または２記載の診断方法。 - 【請求項４】 用意する角層試料がテープストリッピン
グもしくは擦過に由来するか、あるいは自然に剥離した
ものである請求項２または３記載の診断方法。 - 【請求項５】 皮膚疾患を有する患者への薬物の投与前
後での、角層におけるＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａの存在
量の多寡を薬効の指標とすることを特徴とする皮膚疾患
に対して使用された薬物の薬効評価方法。 - 【請求項６】 （Ａ）薬物の投与前後における皮膚疾患
の病変部位からの角層試薬を用意する工程、 （Ｂ）用意したそれぞれの前記試料におけるＩＬ-１お
よびＩＬ-１ｒａの各存在量を測定する工程、ならびに （Ｃ）それぞれの前記試料におけるＩＬ-１およびＩＬ-
１ｒａの各存在量の比を、相互に比較する工程、を含ん
でなる請求項５記載の薬効評価方法。 - 【請求項７】 角層中のＩＬ-１およびＩＬ-１ｒａをそ
れぞれ測定する手段を組み合わせて使用できるように構
成した、請求項１記載の診断方法または請求項６記載の
薬効評価方法を実施するためのキット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3861997A JPH10221340A (ja) | 1997-02-07 | 1997-02-07 | 皮膚疾患の診断方法および薬効評価方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3861997A JPH10221340A (ja) | 1997-02-07 | 1997-02-07 | 皮膚疾患の診断方法および薬効評価方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10221340A true JPH10221340A (ja) | 1998-08-21 |
Family
ID=12530267
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3861997A Pending JPH10221340A (ja) | 1997-02-07 | 1997-02-07 | 皮膚疾患の診断方法および薬効評価方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10221340A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006098523A1 (ja) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする皮膚性状の評価方法 |
| WO2007108523A1 (ja) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする肌の感受性の程度の評価方法 |
| JP2007279024A (ja) * | 2006-03-17 | 2007-10-25 | Shiseido Co Ltd | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする肌の感受性の程度の評価方法 |
| WO2010073983A1 (ja) * | 2008-12-24 | 2010-07-01 | 株式会社ファンケル | シワ形成リスク評価方法 |
| JP2010162016A (ja) * | 2002-09-25 | 2010-07-29 | Genentech Inc | 乾癬の治療のための新規組成物と方法 |
| WO2011158798A1 (ja) * | 2010-06-14 | 2011-12-22 | 国立大学法人山口大学 | 乾癬治療効果の経過観察及び早期の予測方法並びにそれらに使用するキット |
| JP2014041043A (ja) * | 2012-08-22 | 2014-03-06 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 皮膚状態の評価方法 |
| JP2015072226A (ja) * | 2013-10-03 | 2015-04-16 | 住友ベークライト株式会社 | 検査方法 |
-
1997
- 1997-02-07 JP JP3861997A patent/JPH10221340A/ja active Pending
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010162016A (ja) * | 2002-09-25 | 2010-07-29 | Genentech Inc | 乾癬の治療のための新規組成物と方法 |
| WO2006098523A1 (ja) * | 2005-03-18 | 2006-09-21 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする皮膚性状の評価方法 |
| JP5059600B2 (ja) * | 2005-03-18 | 2012-10-24 | 株式会社 資生堂 | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする皮膚性状の評価方法 |
| WO2007108523A1 (ja) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Shiseido Company, Ltd. | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする肌の感受性の程度の評価方法 |
| JP2007279024A (ja) * | 2006-03-17 | 2007-10-25 | Shiseido Co Ltd | 扁平上皮細胞癌関連抗原を指標とする肌の感受性の程度の評価方法 |
| WO2010073983A1 (ja) * | 2008-12-24 | 2010-07-01 | 株式会社ファンケル | シワ形成リスク評価方法 |
| JP2010151480A (ja) * | 2008-12-24 | 2010-07-08 | Fancl Corp | シワ形成リスク評価方法 |
| WO2011158798A1 (ja) * | 2010-06-14 | 2011-12-22 | 国立大学法人山口大学 | 乾癬治療効果の経過観察及び早期の予測方法並びにそれらに使用するキット |
| JP2014041043A (ja) * | 2012-08-22 | 2014-03-06 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 皮膚状態の評価方法 |
| JP2015072226A (ja) * | 2013-10-03 | 2015-04-16 | 住友ベークライト株式会社 | 検査方法 |
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