JPH0995444A

JPH0995444A - アミロイド蛋白凝集阻害剤

Info

Publication number: JPH0995444A
Application number: JP25491095A
Authority: JP
Inventors: Takami Tomiyama; 貴美富山; Kenichiro Kataoka; 健一郎片岡; Akira Shoji; 晃庄司; Noriaki Endo; 則明遠藤
Original assignee: Teijin Ltd
Current assignee: Teijin Ltd
Priority date: 1995-10-02
Filing date: 1995-10-02
Publication date: 1997-04-08

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】アミロイドの生成を抑え、アミロイド蛋白に
よって惹起される細胞毒性を抑制することで、特定臓器
へのアミロイド沈着を特徴とする疾病（アルツハイマー
病、II型糖尿病など）の治療または予防薬となりうる薬
剤を提供する。【解決手段】一般式［Ｉ］［式中、Ｒは水酸基または−ＣＯＯＲ⁴（ここで、Ｒ⁴は
水素原子、Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル基等を表す）で置換され
たＣ₁−Ｃ₅のアルキル基、アリール基、複素環基等を表
し、Ｒ¹およびＲ²はそれぞれ独立に、水素原子、Ｃ₁−
Ｃ₅アルキル基、またはフェニル基を表し、Ｒ³は、水素
原子、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル基、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシカルボ
ニル基等を表す）］で表されるチオナフタレン誘導体ま
たはその薬学的に許容される塩を含有するアミロイド蛋
白の凝集および沈着の阻害剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、チオナフタレン誘
導体を活性成分として含有する、アミロイド蛋白の凝集
および／または沈着阻害剤に関する。本発明はまた、チ
オナフタレン誘導体を活性成分として含有する、アミロ
イド蛋白によって惹起される細胞毒性の抑制剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】特徴的な線維構造をとって重合したアミ
ロイド蛋白が種々の臓器、組織の細胞外に沈着すること
を特徴とする疾病は、アミロイドーシスと総称される。
かかるアミロイドを構成する蛋白質としては、例えば、
アルツハイマー病において脳に沈着するアミロイドβ蛋
白、II型糖尿病において膵臓に沈着するアミリン、家族
性アミロイドニューロパチーにおいて末梢神経に沈着す
る血清プレアルブミン（トランスサイレチン）、原発性
および多発性骨髄腫に伴うアミロイドーシスの場合の免
疫グロブリン軽鎖由来ＡＬ蛋白、続発性アミロイドーシ
スの場合のＡＡ蛋白などがある（例えば、Ｓｉｐｅ，
Ｊ．Ｄ．（１９９２年）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ．，第６１巻，９４７−９７５頁など参照）。

【０００３】アミロイドはコンゴーレッド染色により偏
光下重屈折性を示し、アミロイドを構成する蛋白質は線
維化の過程で逆平行βシート構造をとることが種々のア
ミロイドに共通する特徴として知られている（例えば、
Ｓｉｐｅ，Ｊ．Ｄ．（１９９２年）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ．，第６１巻，９４７−９７５頁など参
照）。

【０００４】代表的アミロイド蛋白であるアミロイドβ
蛋白はアルツハイマー病において脳に沈着するアミロイ
ドの主要構成成分であり、約４０アミノ酸からなるペプ
チドである（例えば、Ｇｌｅｎｎｅｒ，Ｇ．Ｇ．；Ｗｏ
ｎｇ，Ｃ．Ｗ．（１９８４年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，第１２０巻，８８
５−８９０頁、Ｍａｓｔｅｒｓ，Ｃ．Ｌ．ら（１９８５
年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ，第８２巻，４２４５−４２４９頁、Ｋａｎｇ，Ｊ．
ら（１９８７年），Ｎａｔｕｒｅ，第３２５巻，７３３
−７３６頁など参照）。

【０００５】アミロイドβ蛋白は、自己凝集傾向があり
（例えば、Ｈｉｌｂｉｃｈ，Ｃ．ら（１９９１年），
Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，第２１８巻，１４９−１６３
頁、Ｂｕｒｄｉｃｋ，Ｄ．ら（１９９２年），Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．，第２６７巻，５４６−５５４頁など
参照）、凝集したアミロイドβ蛋白は神経細胞に対し毒
性を示す（例えば、Ｐｉｋｅ，Ｃ．Ｊ．ら（１９９３
年），Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，第１３巻，１６７６−
１６８７頁、Ｓｉｍｍｏｎｓ，Ｌ．Ｋ．ら（１９９４
年），Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，第４５巻，３７
３−３７９頁など参照）ことが知られている。この細胞
毒性がアルツハイマー病脳における神経細胞の脱落、ひ
いては痴呆の発症の原因となっていると考えられている
（例えば、Ｓｅｌｋｏｅ，Ｄ．Ｊ．（１９９１年），Ｎ
ｅｕｒｏｎ，第６巻，４８７−４９８頁など参照）。

【０００６】もう一つの代表的アミロイド蛋白であるア
ミリンは、インシュリン非依存性のII型糖尿病の膵臓に
沈着するアミロイドの主要構成成分であり、３７アミノ
酸からなるペプチドである（例えば、Ｗｅｓｔｅｒｍａ
ｒｋ，Ｐ．ら（１９８７年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第８４巻，３８８１−３８８
５頁、Ｃｏｏｐｅｒ，Ｇ．Ｊ．Ｓ．ら（１９８７年），
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第８
４巻，８６２８−８６３２頁、Ｓａｎｋｅ，Ｔ．ら（１
９８８年），Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，第２６３巻，
１７２４３−１７２４６頁など参照）。

【０００７】アミリンもアミロイドβ蛋白同様、凝集し
やすく、凝集したアミリンは膵β細胞に対して毒性を示
すことが報告されている（例えば、Ｌｏｒｅｎｚｏ，
Ａ．ら（１９９４年），Ｎａｔｕｒｅ，第３６８巻，７
５６−７６０頁など参照）。II型糖尿病患者の膵ランゲ
ルハンス氏島の組織所見などより、アミリン沈着は、膵
ランゲルハンス氏島β細胞の機能低下に関与しているこ
とが推測されている（例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｋ．
Ｈ．ら（１９９２年），Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．，第６
６巻，５２２−５３５頁など参照）。

【０００８】このように、いくつかのアミロイド蛋白
は、細胞に対して毒性を示すことが知られているが、か
かる細胞毒性は、アミロイド蛋白が凝集し、線維体を形
成して初めて発揮されること（例えば、Ｐｉｋｅ，Ｃ．
Ｊ．ら（１９９３年），Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，第１
３巻，１６７６−１６８７頁、Ｌｏｒｅｎｚｏ，Ａ．ら
（１９９４年），Ｎａｔｕｒｅ，第３６８巻，７５６−
７６０頁など参照）、さらには、その細胞毒性発現のメ
カニズムはいくつかのアミロイド蛋白に共通しているこ
と（例えば、Ｌｏｒｅｎｚｏ，Ａ．；Ｙａｎｋｎｅｒ，
Ｂ．Ａ．（１９９４年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第９１巻，１２２４３−１２２４
７頁、Ｓｃｈｕｂｅｒｔ，Ｄ．ら（１９９５年），Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第９２
巻，１９８９−１９９３頁など参照）が示唆されてい
る。

【０００９】これらの報告は、あるアミロイド蛋白（例
えばアミリンなど）の凝集を阻害する薬剤またはその細
胞毒性を抑制するような薬剤は、他のアミロイド蛋白の
凝集または細胞毒性をも抑制できる可能性を示してい
る。

【００１０】アミロイド蛋白の凝集や沈着を抑える作用
および／または凝集したアミロイド蛋白の細胞毒性を抑
える作用を持つとされる薬物はいくつか報告されてい
る。例えば、リファンピシン（例えば、Ｔｏｍｉｙａｍ
ａ，Ｔ．ら（１９９４年），Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐ
ｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，第２０４巻，７６−
８３頁など参照）、コンゴーレッド（例えば、Ｌｏｒｅ
ｎｚｏ，Ａ．；Ｙａｎｋｎｅｒ，Ｂ．Ａ．（１９９４
年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ，第９１巻，１２２４３−１２２４７頁など参照）、
ポリビニルサルフォネートや１，３−プロパンジオール
ジサルフェートなどの化合物群（例えば、Ｋｉｓｉｌｅ
ｖｓｋｙ，Ｒ．ら（１９９５年），ＮａｔｕｒｅＭｅ
ｄｉｃｉｎｅ，第１巻，１４３−１４８頁など参照）お
よびアントラサイクリン４’−ヨード−４’−デオキシ
ドキソルビシン（例えば、Ｍｅｒｌｉｎｉ，Ｇ．ら（１
９９５年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，第９２巻，１９８９−１９９３頁など参照）な
どである。

【００１１】しかし、これらは、リファンピシンを除い
ては臨床上使用されている薬剤ではない。また、リファ
ンピシンに関しても、抗菌剤として臨床上使用されてい
るものの、アルツハイマー病、II型糖尿病等に代表され
るアミロイドーシスの治療薬として臨床上有効であると
する報告はない。さらには、これらの薬剤は、本発明で
用いているチオナフタレン誘導体とは全く構造の異なる
化合物群である。

【００１２】一方、本発明で用いているチオナフタレン
誘導体は、免疫グロブリンＥ抗体産生抑制作用、リポキ
シゲナーゼ阻害作用等の抗アレルギー作用を有すること
が知られているが、かかるチオナフタレン誘導体がアミ
ロイド蛋白の凝集やアミロイド蛋白の細胞毒性に対して
抑制作用を有することは知られていない。また、かかる
抑制作用を有することを示唆するような事実はない。

【００１３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は種々のアミロ
イド蛋白の凝集を阻害することで、アミロイドの生成を
抑え、さらにはアミロイド蛋白によって惹起される細胞
毒性を抑制することで、特定臓器へのアミロイド沈着を
特徴とする疾病、たとえばアルツハイマー病、II型糖尿
病などの治療または予防薬となりうる薬剤を提供するこ
とを目的としている。

【００１４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、種々のア
ミロイド蛋白の凝集を阻害する薬剤および／または種々
のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性を抑制す
る薬剤の可能性を鋭意研究した。この結果、一定構造の
チオナフタレン誘導体が、代表的なアミロイドであるア
ミリンおよびアミロイドβ蛋白の凝集を阻害すること、
およびアミリンやアミロイドβ蛋白によって惹起される
細胞毒性を抑制することを見い出し、本発明に到達し
た。

【００１５】すなわち本発明は、下記式［Ｉ］

【００１６】

【化２】

【００１７】［式中、Ｒは水酸基または−ＣＯＯＲ
⁴（ここで、Ｒ⁴は水素原子、置換もしくは非置換のＣ₁
−Ｃ₁₀アルキル基、置換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀ア
ルケニル基、または置換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀環
状アルキル基を表す）で置換されたＣ₁−Ｃ₅のアルキル
基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基、−Ｃ
ＯＲ⁵で表される基（ここで、Ｒ⁵は置換もしくは非置換
のＣ₁−Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、または複素環基を表す）、−ＣＯＮＨＲ⁶で表され
る基（ここで、Ｒ⁶は置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅ア
ルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複
素環基を表す）、またはシアノ基を表し、Ｒ¹およびＲ²
はそれぞれ独立に、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル基、ま
たはフェニル基を表し、Ｒ³は、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅ア
ルキル基、または−ＣＯＲ⁷で表される基（ここで、Ｒ⁷
は−ＯＲ⁸¹、−Ｒ⁸²もしくは−ＮＲ⁸³ ₂を表し、Ｒ⁸¹、
Ｒ⁸²およびＲ⁸³はそれぞれＣ₁−Ｃ₄アルキル基を表
す）］で表されるチオナフタレン誘導体またはその薬学
的に許容される塩を有効成分として含有する、アミロイ
ド蛋白の凝集および／または沈着阻害剤である。

【００１８】本発明はまた、上記式［Ｉ］で表されるチ
オナフタレン誘導体またはその薬学的に許容される塩を
有効成分として含有する、アミロイド蛋白によって惹起
される細胞毒性の抑制剤である。

【００１９】

【発明の実施の形態】上記式［Ｉ］で表されるチオナフ
タレン誘導体またはその薬学的に許容される塩におい
て、Ｒは水酸基または−ＣＯＯＲ⁴（ここで、Ｒ⁴は水素
原子、置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₁₀アルキル基、置
換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀アルケニル基、または置
換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀環状アルキル基を表す）
で置換されたＣ₁−Ｃ₅のアルキル基、置換もしくは非置
換のアリール基、複素環基、−ＣＯＲ⁵で表される基
（ここで、Ｒ⁵は置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅アルキ
ル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複素環
基を表す）、−ＣＯＮＨＲ⁶で表される基（ここで、Ｒ⁶
は置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅アルキル基、置換もし
くは非置換のアリール基、または複素環基を表す）、ま
たはシアノ基を表す。

【００２０】Ｒが−ＣＯＯＲ⁴で置換されたＣ₁−Ｃ₅の
アルキル基をあらわす場合の、Ｒ⁴としての非置換のＣ₁
−Ｃ₁₀アルキル基の好ましい例としては、メチル基、エ
チル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソ
ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペ
ンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ヘキシル
基、３，３−ジメチルブチル基、ヘプチル基、オクチル
基、ノニル基、デシル基などが挙げられる。Ｒ⁴の非置
換のＣ₃−Ｃ₁₀アルケニル基の好ましい例としては、２
−プロペニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２
−ペンテニル基、４−ペンテニル基、２−ヘキセニル
基、３−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、メタリル
基、シトロネリル基、ゲラニル基などが挙げられる。Ｒ
⁴の非置換のＣ₃−Ｃ₁₀環状アルキル基の好ましい例とし
ては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘ
プチル基が挙げられる。これらのアルキル基、アルケニ
ル基または環状アルキル基の置換基としては、１つある
いは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のようなハロゲ
ン基、アルコキシ基などを挙げることができる。

【００２１】Ｒが水酸基または−ＣＯＯＲ⁴で置換され
たＣ₁−Ｃ₅のアルキル基を表す場合、このＣ₁−Ｃ₅のア
ルキル基部分の好ましい例としては、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチ
ル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチ
ル基、イソペンチル基、ネオペンチル基などを挙げるこ
とができる。これらのアルキル基の任意の位置におい
て、水酸基または−ＣＯＯＲ⁴のいずれかが置換してい
てよい。

【００２２】Ｒが置換もしくは非置換のアリール基の場
合、その非置換のアリール基の例として、フェニル基、
１−ナフチル基、２−ナフチル基などを好ましいものと
して挙げることができる。この場合の置換基としては１
つあるいは複数のクロロ、ブロモ、フルオロ基のような
ハロゲン基、トリフルオロメチル基、メトキシ基、シア
ノ基、テトラゾリル基、カルボキシル基、アルコキシカ
ルボニル基などを挙げることができる。

【００２３】Ｒが複素環基の場合には、その複素環基の
好ましい例として、フリル基、チエニル基、ピロリル
基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル
基、イソチアゾリル基、ピラニル基、ピリジル基、ピラ
ジニル基、トリアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリ
ル基、テトラゾリル基、ピロリル基、ピペラジニル基、
ピリミジル基、ベンゾフラニル基、インドリル基、ベン
ゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサ
ゾリル基、キノリル基、イソキノリル基、キナゾリル
基、プリニル基、プテリジニル基、モルホリニル基、ピ
ペリジニル基などの酸素、窒素または硫黄原子を持つ単
環状または二環状の基を挙げることができる。なかでも
特に好ましい例として、チエニル基、ピリジル基、チア
ゾリル基、オキサゾリル基などを挙げることができる。

【００２４】Ｒが−ＣＯＲ⁵で表される基である場合
に、Ｒ⁵としての置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅アルキ
ル基の好ましい例としては、上記Ｒ⁴の置換もしくは非
置換のアルキル基の例のうち、Ｃ₁−Ｃ₅の範囲のものを
そのまま当てはめることができる。Ｒ⁵としての置換も
しくは非置換のアリール基、複素環基の好ましい例とし
ては、上記Ｒの置換もしくは非置換のアリール基、複素
環基の説明で挙げた好ましい例をそのまま当てはめるこ
とができる。

【００２５】Ｒが−ＣＯＮＨＲ⁶で表される基である場
合に、Ｒ⁶としての置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅アル
キル基、置換もしくは非置換のアリール基、複素環基の
好ましい例としては、上記Ｒ⁵の置換もしくは非置換の
Ｃ₁−Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール
基、複素環基の説明で挙げた好ましい例を、それぞれそ
のまま当てはめることができる。

【００２６】上記式［Ｉ］で表されるチオナフタレン誘
導体またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ¹お
よびＲ²はそれぞれ独立に、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅アルキ
ル基、またはフェニル基を表す。

【００２７】Ｒ¹およびＲ²としてのＣ₁−Ｃ₅アルキル
基、の具体例としてはメチル基、エチル基、プロピル
基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ
−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペ
ンチル基、ネオペンチル基などが挙げられる。

【００２８】上記式［Ｉ］で表されるチオナフタレン誘
導体またはその薬学的に許容される塩において、Ｒ
³は、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル基、または−ＣＯＲ⁷
で表される基（ここで、Ｒ⁷は−ＯＲ⁸¹、−Ｒ⁸²もしく
は−ＮＲ⁸³ ₂を表し、Ｒ⁸¹、Ｒ⁸²およびＲ⁸³はそれぞれ
Ｃ₁−Ｃ₄アルキル基を表す）を表す。

【００２９】Ｒ³がＣ₁−Ｃ₅アルキル基である場合の具
体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソ
プロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル
基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル
基、ネオペンチル基などが挙げられる。

【００３０】Ｒ³が−ＣＯＲ⁷で表される基である場合
に、Ｒ⁷は−ＯＲ⁸¹、−Ｒ⁸²もしくは−ＮＲ⁸³ ₂を表すが
この場合のＲ⁸¹、Ｒ⁸²およびＲ⁸³としてのＣ₁−Ｃ₄アル
キル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピ
ル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅ
ｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基などを挙げることが
できる。

【００３１】本発明のチオナフタレン誘導体には、その
分子中に存在する場合の酸性基または塩基性基に起因し
て、公知の塩基（例えばナトリウム、カリウム）または
酸（例えば無機酸、有機酸）と形成され得る薬学的に許
容される塩が存在する場合にはそのような塩も含まれ
る。具体的には、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、シュウ
酸、マロン酸、フマル酸、アスコルビン酸、乳酸、酒石
酸、グルタミン酸、メタンスルホン酸等を用いて調製さ
れる塩が挙げられる。

【００３２】本発明で用いられるチオナフタレン誘導体
は、既知の合成法で容易に合成することが可能である
（ＷＯ９０／１２００１参照）。

【００３３】本発明で用いられるチオナフタレン誘導体
は、Ｒ、Ｒ¹、およびＲ²が置換している炭素が不斉炭素
となるために、２種類の光学異性体が存在する場合があ
るが、本発明ではいずれの光学異性体も、あるいはそれ
らの任意の割合の混合物をも用いることができる。

【００３４】化合物の好適な例としては、下記の構造を
持つものが挙げられる。

【００３５】

【化３】

【００３６】

【化４】

【００３７】

【化５】

【００３８】本発明のアミロイド蛋白の凝集および／ま
たは沈着阻害剤は、好ましくは製薬学的に許容される担
体を配合する。かかる製薬学的に許容される担体として
は、後記賦形剤と同様のものを挙げることができる。こ
の場合の活性成分と担体との配合量については、後記の
ような活性成分の投与量に従うが、特に限定されず広範
囲に選択され、通常活性成分は全組成物中１〜７０重量
％、好ましくは５〜５０重量％である。得られた組成物
は、さらに公知の方法で適当な賦形剤等を用いて軟カプ
セル剤、硬カプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤、懸濁剤、
液剤、シロップ剤等の経口剤、注射剤、坐剤または外用
剤として提供される。かかる賦形剤としては植物油（例
えばトウモロコシ油、綿実油、ココナッツ油、アーモン
ド油、落花生油、オリーブ油等）、中鎖脂肪酸グリセラ
イド油等の油状エステル、鉱物油、トリカプリリン、ト
リアセチル等のグリセリンエステル類、エタノール等の
アルコール類、生理食塩水、プロピレングリコール、ポ
リエチレングリコール、ワセリン、動物油脂、セルロー
ス誘導体（結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセ
ルロース）、ポリビニルピロリドン、デキストリン、乳
糖、マンニトール、ソルビトール、デンプン等が挙げら
れる。

【００３９】活性成分の投与量は、疾患の程度、患者の
年令等にもよるが、通常１０〜１０００ｍｇ／日／人程
度で、好ましくは１００〜６００ｍｇ／日／人であり、
このような条件を満足するように製剤するのが好まし
い。

【００４０】

【実施例】以下、参考例および実施例により本発明を詳
細に説明する。実施例で用いたチオナフタレン誘導体は
全て、ＷＯ９０／１２００１の明細書中に記載されてい
る既知の方法に従って合成した。

【００４１】［参考例１］チオフラビンＴを用いたアミロイド蛋白の凝集測定法チオフラビンＴ（ＴｈＴ）は、凝集したアミロイド蛋白
のβシート構造に結合して、遊離の状態では示さなかっ
た新たな蛍光（４８２ｎｍ）を発することが知られてお
り、以下に述べるＴｈＴを用いた方法は、凝集アミロイ
ド蛋白の定量法として有用である（ＨａｒｒｙＬｅＶ
ｉｎｅ III，（１９９３年），ＰｒｏｔｅｉｎＳｃ
ｉｅｎｃｅ，第２巻，４０４−４１０頁）。ここで、蛍
光強度はＴｈＴが結合するアミロイド蛋白の凝集の程度
に比例する。

【００４２】具体的実施方法は以下の通りである。すな
わち、ある薬剤を含むアミロイド蛋白の試料溶液２０μ
ｌを５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）に
３μＭの濃度で溶かされたＴｈＴ溶液２ｍｌに加え、撹
拌した。撹拌後、速やかにスペクトロフルオロメーター
（ＪＡＳＣＯ製）を用いて、励起波長４５０ｎｍ、蛍光
波長４８２ｎｍで溶液の蛍光を測定した。得られた蛍光
強度の値を薬剤を含まないアミロイド蛋白のみの溶液
（コントロール）の値と比較することにより、その薬剤
のアミロイド蛋白凝集阻害活性を調べた。

【００４３】［参考例２］ＰＣ１２細胞を用いたアミロイド蛋白の細胞毒性測定法ラット副腎褐色細胞腫由来ＰＣ１２細胞は、アミロイド
β蛋白などのアミロイド蛋白の細胞毒性を測定するのに
広く用いられている細胞である（例えば、Ｓｈｅａｒｍ
ａｎ，Ｍ．Ｓ．ら（１９９４年），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第９１巻，１４７０−
１４７４頁参照）。理研細胞バンクより入手したＰＣ１
２細胞（登録番号ＲＣＢ０００９）を１０％ウシ胎児血
清、５％馬血清を含むＤＭＥＭ培地で培養した。細胞毒
性試験前日に細胞をトリプシン処理してフラスコよりは
がし、５０００細胞／２００μｌ／ウェルの濃度でポリ
−Ｌ−リジンでコートされた９６ウェルプレートに播き
込んだ。翌日、被験化合物を含むペプチド溶液を１ウェ
ルあたり１０μｌまたは２０μｌ培養液中に加え、
さらに１日間培養を続けた。また、コントロールとし
て、ＰＢＳのみを１ウェルあたり１０μｌまたは２０
μｌ培養液中に加え、さらに被験化合物自身の毒性を
みるため、被験化合物を含むＰＢＳを１ウェルあたり１
０μｌまたは２０μｌ培養液中に加えた。

【００４４】ペプチド溶液を加えた翌日、細胞の還元能
力をＭＴＴ法により測定した。ＭＴＴ法は被験物質の細
胞毒性を測定する方法として広く用いられている方法で
ある（例えば、Ｈａｎｓｅｎ，Ｍ．Ｂ．ら（１９８９
年），Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，第１１９
巻，２０３−２１０頁など参照）。具体的には、ＰＢＳ
に５ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解したＭＴＴ（シグマ製）溶
液を２００μｌの培養液に対し２０μｌずつ加え、３７
℃で５時間培養した。培地を除去した後、０．０４Ｎ塩
酸を含むイソプロピルアルコールを１ウェルあたり１０
０μｌずつ加え、ＭＴＴ還元の結果できた細胞表面のフ
ォルマザンをピペッティングにより溶解した。かかるフ
ォルマザン溶液の吸光度（５７０ｎｍ−６５０ｎｍ）を
ＥＬＩＳＡリーダーで測定し、ＰＢＳ添加のコントロー
ルの値を１００として各ウェルについて値を計算した。
毒性が強くなるほど値は０に近くなる。

【００４５】［参考例３］アミロイドβ１−４０蛋白の合成ペプチドの合成は、Ｆｍｏｃ−アミノ酸を原料として、
固相法によりペプチド合成機（アプライド・バイオシス
テムズ製）を用いて行なった。合成終了後、ペプチドを
樹脂から切り出し、Ｃ１８カラムを用いた逆相高速液体
クロマトグラフィー（ウオーターズ製）によってこれを
精製した。得られたペプチドが目的のアミノ酸配列を有
していることをペプチドシーケンサー（アプライド・バ
イオシステムズ製）によって確認した。このようにして
得られたペプチドを凍結乾燥し、以下の実施例に用い
た。

【００４６】［実施例１］アミリン（ペプチド研究所
製）を２００μＭの濃度になるようＤＭＳＯに溶解した
後、２回脱イオン水で５倍希釈して４０μＭのペプチド
溶液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブ（商
標）に５０μｌずつ分注した。次に１０ｍＭ、１ｍＭ、
または０．１ｍＭとなるようにＤＭＳＯに溶解した被験
化合物１μｌを、上記チューブにｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ
で加えて撹拌した。コントロールとして、ＤＭＳＯのみ
を１μｌずつ３本のチューブに加えた。続いて、５０μ
ｌの２×ＰＢＳ溶液をこれらのチューブに加えて撹拌
し、最終的に２０μＭのペプチド溶液を得た（化合物の
最終濃度は１００μＭ、１０μＭ、または１μＭとな
る）。これらの溶液を３７℃で７日間インキュベートし
た後、参考例１の方法に従って、溶液中のペプチドの凝
集度を測定した。

【００４７】表１に示すように、被験化合物はいずれ
も、凝集ペプチドに対するＴｈＴの結合によって生じる
蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結果は、本発明
の薬剤がアミリンの凝集抑制に効果があることを示して
いる。

【００４８】

【表１】

【００４９】なお、表中で番号により特定されている被
験化合物は、「化合物の好適な例」のところで述べた同
一番号の化合物である（以下同じ）。

【００５０】［実施例２］アミロイドβ１−４０蛋白
（Ｂａｃｈｅｍ社製）を２００μＭの濃度となるようＤ
ＭＳＯに溶解した後、２回脱イオン水で５倍希釈して４
０μＭとし、さらに等量の２×ＰＢＳ溶液を加えて２０
μＭのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペンドルフ
チューブに１００μｌずつ分注した。次に１０ｍＭ、１
ｍＭまたは０．１ｍＭとなるようＤＭＳＯに溶解した被
験化合物１μｌを、上記チューブにｔｒｉｐｌｉｃａｔ
ｅで加えて撹拌した。コントロールとして、ＤＭＳＯの
みを１μｌずつ３本のチューブに加えた。これらの溶液
を３７℃で２週間インキュベートした後、参考例１の方
法に従って溶液中のペプチドの凝集を測定した。

【００５１】表２に示すように、被験化合物８および被
験化合物１１は、凝集ペプチドに対するＴｈＴの結合に
よって生じる蛍光発光を濃度依存的に抑制した。この結
果は、本発明の薬剤がアミロイドβ１−４０蛋白の凝集
抑制効果を有することを示している。

【００５２】

【表２】

【００５３】［実施例３］アミリン（ペプチド研究所
製）を２００μＭの濃度となるようＤＭＳＯに溶解した
後、２回脱イオン水で５倍希釈して４０μＭとし、さら
に等量の２×ＰＢＳ溶液を加えて２０μＭのペプチド溶
液を得た。この溶液をエッペンドルフチューブに１００
μｌずつ分注した。次に２０ｍＭまたは２ｍＭとなるよ
うＤＭＳＯに溶解した被験化合物１μｌを、上記チュー
ブにｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで加えて撹拌した。コントロ
ールとして、ＤＭＳＯのみを１μｌずつ３本のチューブ
に加えた。これらの溶液を３７℃で７日間インキュベー
トした。次にこれらの溶液を１００，０００×ｇで２０
分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除去し
た後、ペレットに上清と等量のＰＢＳを加えて撹拌し、
凝集ペプチド懸濁液を得た。この懸濁液１０μｌを細胞
培養液２００μｌに加え、参考例２の方法に従って、そ
の細胞毒性（ＭＴＴ還元能低下作用）を測定した。

【００５４】表３に示すように被験化合物８、被験化合
物９、および被験化合物１１はアミリンが引き起こす細
胞のＭＴＴ還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のＭＴＴ還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤がアミリンによる細胞毒
性を抑制する効果を有することを示している。

【００５５】

【表３】

【００５６】［実施例４］アミリン（Ｎｏｖａｂｉｏｃ
ｈｅｍ社製）を４０μＭの濃度となるよう２回脱イオン
水に溶解した後、等量の２×ＰＢＳ溶液を加えて２０μ
Ｍのペプチド溶液を得た。この溶液を３７℃で７日間イ
ンキュベートし、ペプチドを凝集させた。この凝集した
ペプチド溶液をＰＢＳで２０μＭに希釈した後、１００
μｌずつエッペンドルフチューブに分注した。次に２０
ｍＭの濃度となるようＤＭＳＯに溶解した被験化合物１
μｌを、上記チューブにｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで加えて
撹拌した。コントロールとして、ＤＭＳＯのみを１μｌ
ずつ３本のチューブに加えた。これらの溶液を３７℃で
さらに７日間インキュベートした。次に、これらの溶液
を１００，０００×ｇで２０分間遠心し、凝集ペプチド
を沈降させた。上清を除去後ペレットに上清と等量のＰ
ＢＳを加えて撹拌し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。こ
の懸濁液１０μｌを細胞培養液２００μｌに加え、参考
例２の方法に従って、その細胞毒性（ＭＴＴ還元能低下
作用）を測定した。表４に示すように、被験化合物８、
被験化合物９および被験化合物１１は凝集したアミリン
が引き起こす細胞のＭＴＴ還元能低下を抑制した。この
結果は、本発明の薬剤が、予め凝集させたアミリンによ
って惹起される細胞毒性の抑制にも効果があることを示
している。

【００５７】

【表４】

【００５８】［実施例５］上記参考例３で得られたアミ
ロイドβ１−４０蛋白を８０μＭの濃度となるよう２回
脱イオン水に溶解した後、等量の２×ＰＢＳ溶液を加え
て４０μＭのペプチド溶液を得た。この溶液をエッペン
ドルフチューブに１００μｌずつ分注した。次に２０ｍ
ＭとなるようＤＭＳＯに溶解した被験化合物１μｌを、
上記チューブにｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで加えて撹拌し
た。コントロールとして、ＤＭＳＯのみを１μｌずつ３
本のチューブに加えた。これらの溶液を３７℃で７日間
インキュベートした。次にこれらの溶液を１００，００
０×ｇで２０分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。
上清を除去した後、ペレットに上清と等量のＰＢＳを加
えて懸濁し、凝集ペプチド溶液を得た。この溶液１０μ
ｌを細胞培養液２００μｌに加え、参考例２の方法に従
って、その細胞毒性（ＭＴＴ還元能低下作用）を測定し
た。

【００５９】表５に示すように被験化合物９および被験
化合物１１はアミロイドβ１−４０蛋白が引き起こす細
胞のＭＴＴ還元能低下を抑制した。一方、かかる化合物
単独では細胞のＭＴＴ還元能に何ら影響を与えなかっ
た。この結果は、本発明の薬剤が、アミロイドβ１−４
０蛋白による細胞毒性の抑制効果を有することを示して
いる。

【００６０】

【表５】

【００６１】［実施例６］上記参考例３で得られたアミ
ロイドβ１−４０蛋白を８０μＭの濃度となるよう２回
脱イオン水に溶解した後、等量の２×ＰＢＳ溶液を加え
て４０μＭのペプチド溶液を得た。この溶液を３７℃で
７日間インキュベートし、ペプチドを凝集させた。この
凝集したペプチド溶液を１００μｌずつエッペンドルフ
チューブに分注した。次に２０ｍＭの濃度となるようＤ
ＭＳＯに溶解した被験化合物１μｌを、上記チューブに
ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで加えて撹拌した。コントロール
として、ＤＭＳＯのみを１μｌずつ３本のチューブに加
えた。これらの溶液を３７℃でさらに７日間インキュベ
ートした。次に、これらの溶液を１００，０００×ｇで
２０分間遠心し、凝集ペプチドを沈降させた。上清を除
去した後、ペレットに上清と等量のＰＢＳを加えて撹拌
し、凝集ペプチドの懸濁液を得た。この懸濁液１０μｌ
を細胞培養液２００μｌに加え、参考例２の方法に従っ
て、その細胞毒性（ＭＴＴ還元能低下作用）を測定し
た。表６に示すように、被験化合物９および被験化合物
１１は、凝集したアミロイドβ１−４０蛋白が引き起こ
す細胞のＭＴＴ還元能低下を抑制した。この結果は、本
発明の薬剤が、予め凝集させたアミロイドβ蛋白の細胞
毒性の抑制にも効果があることを示している。

【００６２】

【表６】

【００６３】

【発明の効果】このように、本発明の前記式［Ｉ］で表
されるチオナフタレン誘導体またはその薬学的に許容さ
れる塩を有効成分として含有する薬剤は、代表的なアミ
ロイド蛋白であるアミリンおよびアミロイドβ蛋白等の
凝集を阻害する作用を有している。さらに、本発明の薬
剤は、かかるアミロイド蛋白により惹起される細胞毒性
を抑制する作用を有している。したがって、本発明の薬
剤は、アミロイド蛋白の凝集阻害剤として有用であり、
特定臓器へのアミロイド沈着を特徴とする疾病、たとえ
ばアルツハイマー病、II型糖尿病などの治療薬または予
防薬として有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 31/235 Ａ６１Ｋ 31/235 31/275 ＡＥＤ 31/275 ＡＥＤ 31/38 31/38 31/41 31/41 31/42 31/42 31/425 31/425 31/44 31/44 Ｃ０７Ｄ 213/50 Ｃ０７Ｄ 213/50 // Ｃ０７Ｃ 323/21 Ｃ０７Ｃ 323/21 323/56 7419−4Ｈ 323/56 323/60 323/60 Ｃ０７Ｄ 257/04 Ｃ０７Ｄ 257/04 Ｃ 257/06 257/06 277/24 277/24 (72)発明者遠藤則明東京都日野市旭が丘４丁目３番２号帝人株式会社東京研究センター内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式［Ｉ］【化１】［式中、Ｒは水酸基または−ＣＯＯＲ⁴（ここで、Ｒ⁴は
水素原子、置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₁₀アルキル
基、置換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀アルケニル基、ま
たは置換もしくは非置換のＣ₃−Ｃ₁₀環状アルキル基を
表す）で置換されたＣ₁−Ｃ₅のアルキル基、置換もしく
は非置換のアリール基、複素環基、−ＣＯＲ⁵で表され
る基（ここで、Ｒ⁵は置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅ア
ルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、または複
素環基を表す）、−ＣＯＮＨＲ⁶で表される基（ここ
で、Ｒ⁶は置換もしくは非置換のＣ₁−Ｃ₅アルキル基、
置換もしくは非置換のアリール基、または複素環基を表
す）、またはシアノ基を表し、Ｒ¹およびＲ²はそれぞれ独立に、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅ア
ルキル基、またはフェニル基を表し、Ｒ³は、水素原子、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル基、または−ＣＯ
Ｒ⁷で表される基（ここで、Ｒ⁷は−ＯＲ⁸¹、−Ｒ⁸²もし
くは−ＮＲ⁸³ ₂を表し、Ｒ⁸¹、Ｒ⁸²およびＲ⁸³はそれぞ
れＣ₁−Ｃ₄アルキル基を表す）］で表されるチオナフタ
レン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分
として含有する、アミロイド蛋白の凝集および／または
沈着阻害剤。
【請求項２】上記式［Ｉ］において、Ｒ¹およびＲ²が
それぞれ独立に水素原子またはＣ₁−Ｃ₅アルキル基であ
る請求項１に記載のアミロイド蛋白の凝集および／また
は沈着阻害剤。
【請求項３】上記式［Ｉ］おいて、Ｒが−ＣＯＲ⁵で
表される基（ここで、Ｒ⁵は置換もしくは非置換のＣ₁−
Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、ま
たは複素環基を表す）である請求項１または請求項２に
記載のアミロイド蛋白の凝集および／または沈着阻害
剤。
【請求項４】上記式［Ｉ］おいて、Ｒが−ＣＯＮＨＲ
⁶で表される基（ここで、Ｒ⁶は置換もしくは非置換のＣ
₁−Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、
または複素環基を表す）である請求項１または請求項２
に記載のアミロイド蛋白の凝集および／または沈着阻害
剤。
【請求項５】アミロイド蛋白がアミリンおよび／また
はアミロイドβ蛋白である請求項１から請求項４のいず
れかに記載のアミロイド蛋白の凝集および／または沈着
阻害剤。
【請求項６】上記式［Ｉ］で表されるチオナフタレン
誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とし
て含有する、アミロイド蛋白によって惹起される細胞毒
性の抑制剤。
【請求項７】上記式［Ｉ］において、Ｒ¹およびＲ²が
それぞれ独立に水素原子またはＣ₁−Ｃ₅アルキル基であ
る請求項６に記載のアミロイド蛋白によって惹起される
細胞毒性の抑制剤。
【請求項８】上記式［Ｉ］おいて、Ｒが−ＣＯＲ⁵で
表される基（ここで、Ｒ⁵は置換もしくは非置換のＣ₁−
Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、ま
たは複素環基を表す）である請求項６または請求項７に
記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性の抑
制剤。
【請求項９】上記式［Ｉ］おいて、Ｒが−ＣＯＮＨＲ
⁶で表される基（ここで、Ｒ⁶は置換もしくは非置換のＣ
₁−Ｃ₅アルキル基、置換もしくは非置換のアリール基、
または複素環基を表す）である請求項６または請求項７
に記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞毒性の
抑制剤。
【請求項１０】アミロイド蛋白がアミリンおよび／ま
たはアミロイドβ蛋白である請求項６から請求項９のい
ずれかに記載のアミロイド蛋白によって惹起される細胞
毒性の抑制剤。