KR101738080B1 - 페닐설포닐옥사졸 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 천식 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 화학식 1로 표시되는 페닐설포닐옥사졸 유도체를 유효성분으로 포함하는 암 또는 천식 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 Pin1 이성질화효소의 활성뿐만 아니라, 암 세포주의 세포증식을 억제하는 효과가 우수하므로 이와 관련된 암 또는 만성 염증질환(천식 등)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

페닐설포닐옥사졸 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 천식 치료용 약학적 조성물{Phenylsulfonyloxazole derivatives, preparation method thereof, and pharmaceutical composition for use in treating cancer and asthma}
본 발명은 화학식 1로 표시되는 페닐설포닐옥사졸 유도체를 유효성분으로 포함하는 암 또는 천식 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
인간의 암세포는 AP1 (Activator protein 1), NFkB, b-catenin, NFAT (nuclear factor of activated T-cells), p53 등 여러 가지 암신호전달 경로의 이상에 의해 생성되는 질환이다. 상기와 같은 암유발유전자의 활성화 혹은 암억제유전자의 불활성화의 조절은 암세포를 치료하는데 좋은 수단으로 제공되고 있다.
최근 프롤릴 이성질화효소 (Proryl isomerase) Pin1 (Protein Interacting with Nima)의 발견으로 단백질의 인산화 반응 후에 수반되는 Pin1 매개의 단백질 구조변화가 단백질의 기능을 결정하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려지고 있다. 세포내 신호전달 과정 중 단백질의 serine, threonine, tyrosine 잔기에 인산화가 일어나는 것으로 알려지고 있는데, Pin1 유전자는 특정 단백질의 인산화된 serine 이나 threonine 아미노산 잔기 뒤의 proline 아미노산 부위, 즉 인산화된 Ser/Thr-Pro 부위에 결합하여 proline 잔기의 시스/트랜스 이성질화를 촉진함으로써 단백질의 구조를 변화시켜 세포내 단백질의 기능을 조절하는 역할을 담당한다 (비특허문헌 1).
Pin1 이성질화 효소는 암유발에 관여하는 beta-catenin, AKT, CyclinD1, Plk, NF-kB, Stat3, Neu, Mcl1, c-Jun, c-Fos, c-Myb Raf-1 등 19개 oncogene의 활성화를 시키고, p53, Bax, Bcl-1, Fbw7 등 13개의 tumor suppressor의 활성을 억제하여 전체적으로 암 발생에 중요한 역할을 하고 있음이 보고되고 있어, Pin1 단백질이 암의 진단 및 예후인자 및 유용한 신규항암제 개발의 표적으로 유망한 것으로 보고되고 있다.
환자의 암치료는 일차적인 외과적 수술 및 방사선 치료를 통해 환자의 생존율을 개선시키지만, 진전된(advanced) 암에 대한 효과적인 치료를 얻기 위하여 새로운 치료 대안이 필요한 실정이며 (비특허문헌 2), 이에 따라 화학요법(chemotherapy) 및 저분자량 물질 운반에 의한 세포사멸 유도가 떠오르는 대안으로 떠오르고 있다 (비특허문헌 3).
외과적으로 절제된 시료에서, Pin1은 대장암, 자궁경부암, 유방암, 폐암, 췌장암 등 여러 종류의 암에서 발현이 높은 것으로 보고되고 있다. Pin1 knockout 마우스는 노화의 초기증상 현상을 보여주거나 암을 유발하는 몇몇 발암유전자가 억제되어 있는 양상을 나타내고 있는 반면, Pin1을 과발현하는 transgenic 마우스는 중심체의 증가 및 암을 유발하는 표현형을 보여주고 있다. 또한 특정 억제제 또는 siRNA를 사용하여 Pin1 knockdown 된 암세포에서는 mitotic arrest와 세포사멸을 유도 할 수 있다. 따라서, Pin1 이성질화효소 억제제는 암과 같은 같은 Pin1-과발현 암종에서 부각되는 새로운 치료전략 및 대안이 될 수 있고, 상기 유형의 억제제는 진전된 고형암에 대한 현실적 치료 대안이 될 수 있다.
천식 (Asthma)은 기도에 생성되는 만성 염증질환의 일종으로 Mast cell, eosinophil, T Cell infiltration이 관여하여 기도에 염증을 유발하게 된다. 천식은 북중미, 남미, 유럽, 오세아니아 등에서 발병률이 높고 1970년대 이래 꾸준하게 발병률이 증가해 오고 있으며, 매년 3억명의 환자가 발생과 25만명의 사망원인이 되고 있다. 기도로 들어온 각종 항원은 Mast cell이나 Th2 Cell를 불러들이고, 여기에서 발현되는 Interleukin-4, GM-CSF, Interleukin-5와 같은 사이토카인들이 bone marrow로부터 eosinophil을 유도하여 혈관을 통해 기도로 들어온 eosinophil의 생존률을 높여주게 된다. 이로 인해 각종 사이토카인이 활성화되고 Granule protein, Leukotriene, neurotoxin, peroxidase, cationic protein과 같은 단백질의 발생을 촉진하고 기도에 injury를 발생시킨다. 활성화된 TGF-beta1 또한 이러한 메커니즘에 의해 기도에 영향을 주어 천식유발에 기여하는 것으로 알려지고 있다.
Pin1 이성질화효소는 천식환자의 eosinophil에서 활성화 되어 있으며, GM-CSF의 mRNA를 안정화시키고 (비특허문헌 4), TGF-beta1과 Interleukin-5를 조절하는 것으로 알려져 있다 (비특허문헌 5). Pin1 저해제를 처리하게 되면 GM-CSF와 Interleukin-5의 발현이 감소하고 eosinophil에 의해 유도된 알레르기 염증이 줄어들고, rat을 이용한 천식 동물모델에서 eosinophil에 의해 유도된 폐염증의 감소와 TGF-beta1의 발현감소가 유발된다 (비특허문헌 6). 따라서, Pin1 이성질화효소 억제제는 천식환자에서 부각되는 새로운 치료전략 및 대안이 될 수 있고, 일부 Pin1 억제제는 현재 임상 2상에서 시험되고 있다.
이에, 본 발명자들은 Pin1 이성질화효소 억제하는 화합물을 연구하던 중, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 Pin1 이성질화효소의 활성억제 효과가 현저히 우수하여 암과 천식의 예방 또는 치료제로 유용할 수 있음을 밝히고 본 발명을 완성하였다.
Lu PJ et al. Science. 1999, Feb 26;283(5406):1325-8 Pikarsky E et al.Nature. 2004, 431: 461-466 Llovet JM et al. Hepatology. 2003, 37: 429-442 Shen ZJ et al. Nature Immunology. 2005, Dec 6(12):1280-1287 Esnault S et al. J Allergy Clin Immunol. 2007, Nov;120(5):1082-1088 Shen ZJ et al. J Clin Invest. 2008, Feb;118(2):470-490
본 발명의 목적은 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암 또는 만성 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암 또는 만성 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure 112016027444170-pat00001
상기 화학식 1에서,
Figure 112016027444170-pat00002
는 단일결합 또는 이중결합이고;
R1은 C6-10의 아릴 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5-10원자 헤테로아릴이고, 여기서 상기 C6-10의 아릴에는 C1-6의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이 하나 이상 치환될 수 있고;
R2는 수소, C1-6의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이고;
X는 -N= 또는 -NH-이다.
여기서, 상기 암은 유방암, 자궁암, 대장암, 췌장암, 난소암, 자궁경부암 등일 수 있다. 또한, 상기 만성 염증질환은 천식 등일 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 Pin1 이성질화효소의 활성뿐만 아니라, 암 세포주의 세포증식을 억제하는 효과가 우수하므로 이와 관련된 암 또는 만성 염증질환(천식 등)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1(a)는 실시예 1에서 제조한 화합물을 농도별로 HeLa 세포에 처리한 다음 세포 성장 저해율을 측정한 그래프이다.
도 1(b)는 실시예 1에서 제조한 화합물의 루시퍼라아제 활성을 측정한 이미지이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암 또는 만성 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
Figure 112016027444170-pat00003
상기 화학식 1에서,
Figure 112016027444170-pat00004
는 단일결합 또는 이중결합이고;
R1은 C6-10의 아릴 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5-10원자 헤테로아릴이고, 여기서 상기 C6-10의 아릴에는 C1-6의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이 하나 이상 치환될 수 있고;
R2는 수소, C1-6의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이고;
X는 -N= 또는 -NH-이다.
바람직하게,
상기 R1은 C6-8의 아릴 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 5-7원자 헤테로아릴이고, 여기서 상기 C6-8의 아릴에는 C1-4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이 하나 이상 치환될 수 있고;
R2는 수소, C1-4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 할로겐이다.
더욱 바람직하게,
상기 R1은 페닐 또는 퓨라닐이고, 여기서 상기 페닐에는 메틸, F 또는 Cl이 치환될 수 있고;
R2는 수소, 메틸, F, Cl 또는 Br이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 바람직한 예로는 하기의 화합물들을 들 수 있고, 하기의 화합물들은 ChemBridge Corporation (16981 Via Tazon, Suite G, San Diego, CA 92127, USA)에서 구입하였다.
1) (E)-3-(1H-이미다졸-1-일)-N-(2-페닐-4-토실옥사졸-5(4H)-일이덴)프로판-1-아민;
2) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(4-플루오로페닐)-4-(4-플루오로페닐설포닐)옥사졸-5-아민;
3) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-클로로페닐설포닐)-2-(2-플루오로페닐)옥사졸-5-아민;
4) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(퓨란-2-일)-4-(페닐설포닐)옥사졸-5-아민;
5) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-브로모페닐설포닐)-2-페닐옥사졸-5-아민;
6) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-클로로페닐설포닐)-2-o-토릴옥사졸-5-아민; 및
7) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(2-클로로페닐)-4-(페닐설포닐)옥사졸-5-아민.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 아세트산, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산등과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염의 종류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 유도체를 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜서 제조할 수 있다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
나아가, 유기산에 아미노기를 붙인 아미노산을 사용하여 약학적으로 허용가능한 염을 제조할 수 있으며, 상기 아미노산 염으로는 예를 들면, 글라이신, 알라닌, 페닐알라닌, 발린, 라이신, 글루타믹산 등의 천연 아미노산을 제조하는 것이 제약상 적합하며, 가장 바람직하게는 L-라이신을 제조하는 것이 제약상 적합하다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등을 모두 포함한다.
본 발명의 암 또는 만성 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에서, 상기 암은 유방암, 자궁암, 대장암, 췌장암, 난소암, 자궁경부암 등일 수 있고, 상기 만성 염증질환은 천식 등일 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 Pin1 이성질화효소를 저해하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용 액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁 용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.001-100 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.01-35 mg/kg/일이다. 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.07-7000 mg/일이며, 바람직하게는 0.7-2500 ㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
하기 실시예 1-7의 화합물들은 ChemBridge Corporation (16981 Via Tazon, Suite G, San Diego, CA 92127, USA)에서 구입하여 사용하였다.
< 실시예 1> (E)-3-(1H-이미다졸-1-일)-N-(2-페닐-4- 토실옥사졸 -5(4H)- 일이덴 )프로판-1-아민
< 실시예 2> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(4- 플루오로페닐 )-4-(4- 플루오로페닐설포닐 )옥사졸-5-아민
< 실시예 3> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4- 클로로페닐설포닐 )-2-(2-플루오로페닐)옥사졸-5-아민
< 실시예 4> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-( 퓨란 -2-일)-4-( 페닐설포닐 )옥사졸-5-아민
< 실시예 5> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4- 브로모페닐설포닐 )-2- 페닐옥사졸 -5-아민
< 실시예 6> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4- 클로로페닐설포닐 )-2-o-토릴옥사졸-5-아민
< 실시예 7> N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(2- 클로로페닐 )-4-( 페닐설포닐 )옥사졸-5-아민
하기 표 1에 실시예 1-7에 따른 화합물의 화학구조식을 나타내었다.
실시예 화학구조식
1
Figure 112016027444170-pat00005
2
Figure 112016027444170-pat00006
3
Figure 112016027444170-pat00007
4
Figure 112016027444170-pat00008
5
Figure 112016027444170-pat00009
6
Figure 112016027444170-pat00010
7
Figure 112016027444170-pat00011
< 실험예 1> AP1- luciferase reporter, NFkB - luciferase를 활용한 활성 평가
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물의 Pin1 이성질화효소에 대한 억제활성을 평가하기 위하여 AP1-luciferase, NFkB-luciferase 리포터를 이용, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
Pin1에 의해 활성이 증가하는 AP1과 NFkB 전사인자의 luciferase reporter vector 2.2㎍, pcDNA-Pin1 DNA 1㎍, Renilla luciferase DNA 300ng을 10㎕ FuGENE? HD (Promega, WI, USA), 1ml DMEM을 넣은 후 20분간 방치한 다음, 웰당 10㎕의 liposome-DNA 혼합물을 96웰 플레이트에 분주하였다. 여기에 293T Cell을 각웰당 50,000개/100㎕를 분주한 다음 37℃ 인큐베이터에서 24시간 동안 배양시킨 후, 1μM 농도로 실시예 1-7의 화합물을 세포에 처리하였다. Control 저해제로 Juglone (5-hydroxy-1,4-naphthalenedione)을 사용하였다. 인큐베이터에서 48시간 동안 추가 배양시킨 후 reporter의 활성을 측정하였다. Luciferase 분석은 유전자 이식 후 48시간 뒤 웰당 40㎕ DMEM (10% serum+1% antibiotics) 배지로 교체후 40㎕ Luciferase 기질용액을 넣은 다음 3분간 방치하였다. 50㎕ 반응액을 96웰 플레이트 (Corning, CA, USA)로 옮긴 후 마이크로플레이트 판독기(microplate reader; Infinite M200 pro, TECAN, Switzerland)를 이용하여 루시퍼라아제 (Luciferase) 활성을 측정하였다.
하기 표 2에 AP1 전사인자 활성 분석결과를 나타내었고, 하기 표 3에 NF-kB 전사인자 활성 분석결과를 나타내었다.
실시예 활성 (%)
Control 100.0
Juglone 62.4
1 68.8
2 54.0
3 60.2
4 51.8
5 49.4
6 51.2
7 51.6
실시예 활성 (%)
Control 100.0
Juglone 51.6
1 63.4
2 24.8
3 23.9
4 28.9
5 30.9
6 29.5
7 26.2
상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 화합물 1-7은 Pin1 이성질화효소에 의해 활성이 되는 AP1 전사인자의 활성억제에 우수한 것으로 나타났다. 특히, 실시예 2, 3, 4, 5, 6, 7은 양성 대조군인 Juglone에 비해 좋은 효과를 나타내었으며, 5번의 경우 1μM의 농도에서 50% 이상의 AP1 활성 감소를 유도하는 것으로 나타났다.
표 3의 경우 또한 실시예 화합물 1-7은 Pin1 이성질화효소에 의해 활성이 되는 NF-kB 전사인자의 활성억제에 우수한 것으로 나타났다. 특히, 실시예 2, 3, 4, 5, 6, 7은 양성 대조군인 Juglone에 비해 좋은 효과를 나타내었으며, 1μM의 농도에서 50% 이상의 NF-kB 활성 감소를 유도하는 것으로 나타났다.
<실험예 2> Pin1 효소를 활용한 In vitro enzyme 활성 평가
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물의 Pin1 이성질화효소에 대한 활성억제를 평가하기 위하여 Pin1 효소를 이용, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 정제된 Pin1 단백질과 Trypsin(Thermo Pierce scientific inc)은 35mM Hepes pH 7.5 버퍼에 녹이고, 기질 (H-Trp-Phe-Tyr-Ser(PO3H2)-Pro-Arg-pNA)은 0.47M LiCl/TFE(tri플루오로ethanol)(Bachem L-2075)에 녹인다. Pin1 저해제는 3배로 희석하여 10개의 다른 농도(200μM-0.01μM)로 희석하여, 96well plate에 각 well에 50㎕에 넣는다. 그 후에 기질(1mg/ml)을 16㎕는 넣고, 정제된 Pin1 단백(10uM) 5㎕를 넣는다. 마지막으로 Trypsin(0.1mg/ml) 5㎕를 넣고, 마이크로플레이트 판독기를 이용하여, 390nm, 510nm 파장으로 측정한다. 각각의 Pin1 저해제의 IC50는 측정값을 Graphpad Prism 프로그램을 이용하여 fitting, IC50값을 얻었으며, Control 저해제로 Juglone을 사용하였다.
실시예 IC50 (uM)
Juglone 2.178
1 1.571
2 1.373
5 8.450
표 4의 경우 NF-kB 전사인자의 활성억제와 AP1 전사인자의 활성억제에서 좋은 효과를 나타낸 실시예 화합물 1, 2, 5를 선택하여 Pin1 이성질화효소 활성 억제 효과를 살펴본바, 실시예 2번 화합물이 IC50=1.373 μM로 양성 대조군인 Juglone과 다른 화합물에 비해 좋은 효과를 나타내었다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 Pin1 이성질화효소의 활성을 억제하는 효과가 우수하므로, 이와 관련된 암 또는 천식의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
<실험예 3> 자궁경부암 세포주의 세포증식 억제활성 평가
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물의 Pin1 정상발현 혹은 저발현(knock-down) 자궁경부암 세포주에 대한 세포증식 억제활성을 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
자궁경부암 세포주인 HeLa 세포 (Pin1 정상발현 (shCon) 혹은 저발현(shPin1), 제조사 ATCC)를 10,000 세포/웰의 농도로 96-웰 플레이트에 넣고, 24시간 동안 배양하여 세포를 배양용기에 부착시켰다. 상기 배지에 실시예 1번 화합물을 각각 0.032μM, 0.16μM, 0.8μM, 4μM, 20μM 농도로 녹인 후 세포가 들어있는 웰 플레이트로 교체하고 인큐베이터에서 72시간 동안 추가 배양시킨 후 50㎕ CellTiter-Glo (Promega, WI, USA)를 이용하여 세포의 growth를 측정하였고, 그 결과를 도 1(a)에 나타내었다. 또한, 50㎕ 반응액을 96웰 플레이트 (Corning, CA, USA)로 옮긴 후 마이크로플레이트 판독기(microplate reader; Infinite M200 pro, TECAN, Switzerland)를 이용하여 루시퍼라아제 (Luciferase) 활성을 측정하였고, 그 결과를 도 1(b)에 나타내었다.
도 1(a)는 실시예 1에서 제조한 화합물을 농도별로 HeLa 세포에 처리한 다음 세포 성장 저해율을 측정한 그래프이다.
도 1(b)는 실시예 1에서 제조한 화합물의 루시퍼라아제 활성을 측정한 이미지이다.
도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 실시예 1에서 제조한 화합물은 정상적인 Pin1을 가진 자궁경부암 세포주인 HeLa의 (shCon) 세포증식을 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났다. 하지만, Pin1 발현이 낮은 세포주에서는 (shPin1) 약물의 농도가 증가해도 세포증식에 큰 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 약물이 정상적인 Pin1을 가진 자궁경부암 세포주 (HeLa shCon)에서만 선택적으로 작용한다는 것을 보여주고 있다.
따라서, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 Pin1 이성질화효소의 활성뿐만 아니라, 자궁경부암 세포주인 HeLa의 세포증식을 억제하는 효과가 우수하므로 이와 관련된 자궁경부암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<제제예 1> 약학적 제제의 제조
1-1. 산제의 제조
화학식 1의 화합물 500 ㎎
유당 100 ㎎
탈크 10 ㎎
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
1-2. 정제의 제조
화학식 1의 화합물 500 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
1-3. 캅셀제의 제조
화학식 1의 화합물 500 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
1-4. 주사제의 제조
화학식 1의 화합물 500 ㎎
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
1-5. 액제의 제조
화학식 1의 화합물 100 ㎎
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬 향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색 병에 충진하여 멸균시켜 액체를 제조한다.

Claims (7)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암 또는 만성 염증질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112017027397112-pat00012

    (상기 화학식 1에서,
    Figure 112017027397112-pat00013
    는 단일결합 또는 이중결합이고;
    R1은 페닐 또는 퓨라닐이고, 여기서 상기 페닐에는 메틸, F 또는 Cl이 치환될 수 있고;
    R2는 수소, 메틸, F, Cl 또는 Br이고;
    X는 -N= 또는 -NH-이다).
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물:
    1) (E)-3-(1H-이미다졸-1-일)-N-(2-페닐-4-토실옥사졸-5(4H)-일이덴)프로판-1-아민;
    2) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(4-플루오로페닐)-4-(4-플루오로페닐설포닐)옥사졸-5-아민;
    3) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-클로로페닐설포닐)-2-(2-플루오로페닐)옥사졸-5-아민;
    4) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(퓨란-2-일)-4-(페닐설포닐)옥사졸-5-아민;
    5) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-브로모페닐설포닐)-2-페닐옥사졸-5-아민;
    6) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-4-(4-클로로페닐설포닐)-2-o-토릴옥사졸-5-아민; 및
    7) N-(3-(1H-이미다졸-1-일)프로필)-2-(2-클로로페닐)-4-(페닐설포닐)옥사졸-5-아민.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 암은 유방암, 자궁암, 대장암, 췌장암, 난소암 및 자궁경부암으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 만성 염증질환은 천식인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 Pin1 이성질화효소를 저해하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
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Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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Pharmaceutical Chemistry Jornal, 46(5), 274-284쪽(2012.08.)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019139365A1 (ko) * 2018-01-10 2019-07-18 경북대학교 산학협력단 신규한 페닐설포닐 옥사졸 유도체 및 이의 용도
US11345671B2 (en) 2018-01-10 2022-05-31 Kyungpook National University Industry-Academic Cooperation Foundation Phenylsulfonyl oxazole derivative and use thereof

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