JPH09504719A

JPH09504719A - 止血パッチ

Info

Publication number: JPH09504719A
Application number: JP7513376A
Authority: JP
Inventors: プラス，タッデウス，ピー; ウィル，ジェイムス，エイ
Original assignee: クラリオン、ファーマシューティカルズ、インコーポレイテッド
Priority date: 1993-11-03
Filing date: 1994-11-03
Publication date: 1997-05-13
Also published as: EP0726749B1; AU1086795A; US5643596A; US5645849A; EP0726749A4; DE69433939D1; ATE273035T1; ES2227542T3; DE69433939T2; EP0726749A1; CA2175203A1; WO1995012371A1

Abstract

(57)【要約】吸収性ゼラチンスポンジ等のような生分解性のマトリックスと線溶を阻害するのに有効な量のε−アミノカプロン酸とを含んだ有利的に安全且つ安価な止血パッチがつくり出される。ε−アミノカプロン酸は、線溶を阻害し、トロンビンの活性を高めそして抗菌性を有する止血剤である。ε−アミノカプロン酸及び塩化カルシウムを含有するパッチは、実質性器官の出血を減少させるのに、並びに包帯形態での局所的な使用に有効である。該パッチは、トロンビン、ＲＧＤ及び硫酸プロタミンを更に含むことができる。

Description

【発明の詳細な説明】止血パッチ本発明の背景血管、身体組織、器官又は骨の出血は、循環血液量減少ショック及び死に至る血液損失をもたらしうる。血友病患者及び、心臓手術の後にしばしば処方されるような抗凝固剤の投与を受けている患者においては、急速な血液損失の問題はより一層急激である。血液損失を抑制するための迅速で効果的且つ安価な方法を考案するために、凝固促進因子を含有するペーストを含む試みがなされてきた。出血の停止すなわち「止血」を助けるために用いられるそのような凝固促進物質の一つは、ヒトフィブリノーゲンであり、最も普通には「フィブリン膠」として用いられる。フィブリン膠は、ヒトフィブリノーゲンとウシトロンビンとの混合物より構成されている。それはフィブリノーゲン溶液とトロンビン溶液との別個のバイアルを含んだキットとして販売されている。これらの溶液は、一つに混合されて、ペーストとして、スプレーとして又はパッチ上に等、種々の方法で傷に適用される。フィブリン膠は、しかしながら、止血のためには一貫性のない効果のない療法である。混合し、浸漬しそしてパッチをフィブリン膠で被覆することは、時間浪費的な且つ煩わしい手順を必要とする。これらの調製ステップの各々が潜在的な過誤を導入し、それによりそれらの有効性は操作室の要員の経験によって変動する。更には、そのような溶液の調製に際して、更なる出血が起こり、激しい出血によってそれらの溶液が洗い流される。フィブリノーゲン組成物及び手術技術における進歩にもかかわらず、止血を達成する際のこれらの落とし穴が、適切な製品の開発の必要性を強調している。フィブリン膠に対する欧州において販売されている一つの改良は、ウシトロンビン、アプロチニン及びヒトフィブリノーゲンを含浸させた生分解性のコラーゲンパッチ（「ＴＡＦ」パッチ）よりなる。ＴＡＦパッチの一例は、欧州において Hafslund Nycomed Pharma のパッチはまた、凝固を促進させるために塩化カルシウムをも含有している。使用においては、このパッチはそのパッケージから取り出され、食塩溶液に浸されて次いで、少なくとも５分の間軽い圧力を以て、出血している器官に当てがわれる。出血が停止したら、パッチは外科医によってその場所に残され、腔が閉鎖される。フィブリン膠及びＴＡＦパッチの使用の主たる欠点は、何れも、ヒト血液から精製されたタンパク質であるヒトフィブリノーゲンを含有していることである。ＨＩＶ及び肝炎ウイルス汚染の高い危険性のために、米国食品医薬品局は1978年に米国におけるヒトフィブリノーゲンの使用を取り消した。安全性の懸念に加えて、ヒト血漿から精製されたヒトフィブリノーゲンは非常に高価である。ＴＡＦパッチはまた、パッチ中に含有された凝固促進剤を安定化させるために冷蔵を必要とする。この必要性は、冷蔵施設の利用できないある種の分野のパッチ適用を不可能にする。外科医が挙げるＴＡＦパッチに関する別の問題の一つはその柔軟性のなさであり、すなわちこのパッチはそれが適用される身体面の形状に容易には従わない。脾臓、肝臓、肺又は膵臓等のような実質性の器官の出血（外傷又は手術によって起こりうる）は、処置するのが特に困難である。実質性の器官は、組織が容易に裂け、粉砕され又は崩れることから、結紮するのが困難である。その結果、外科医はしばしば電気焼灼の使用に頼るが、それは患者組織の更なる破壊へと繋がり得る。従って、致死的なウイルス汚染から安全な、そして実質性器官の問題の多い出血をも停止させる、効果的な止血パッチが望まれている。安価で、使用が容易で且つ身体の外形を容易に型どるパッチが更に望まれている。また、冷蔵を必要とすることなく止血効果を保持する、高い温度に耐えるパッチも求められている。本発明の要約本発明によれば、マトリックス及び少なくとも１つの止血剤であるε−アミノカプロン酸とを含む効果的な止血パッチが製造される。該パッチは、成分として、フィブリノーゲン等のような如何なる外来のヒトタンパク質をも必要とせず、それによって危険な汚染性のウイルスの導入を回避する。この止血パッチは、安価で、使用が容易で、熱的に安定で、抗菌的で、そしてまた局所的使用のために包帯形でも提供できる。図面の簡単な記述図１は、37℃及び生理的ｐＨにおけるトロンビンの活性化を示す対照実験を表す。図２は、37℃におけるトロンビンの活性化に対するｐＨの効果を示す。図３Ａ及び図３Ｂは、各々、種々の濃度のε−アミノカプロン酸（ＥＡＣＡ）の存在下における黄色ブドウ球菌 (Staph．aureus)の増殖に対するε−アミノカプロン酸による阻害を示す。図４Ａ及び４Ｂは、各々、種々の濃度のε−アミノカプロン酸の存在下における大腸菌（Ｅ．coli）の増殖に対するε−アミノカプロン酸の阻害を示す。ッチ、２つのHemarrest ^TMパッチ、及びブランク（Ｂ）ゼラチンフォーム（gela tin foam）パッチを示す。ａ＋＋）Ｅパッチと比較されているものである、肝臓傷害試験を写真で示す。図７は、傷からパッチが除去された状態の図６に示された同じ肝臓の写真を示す。図８は、100 ｍｇ／ｃｍ² のε−アミノカプロン酸を含有する、腎臓に適用された本発明のHemarrest ^TMパッチを写真で示す。の反対の極を写真で示す。図１０は、本発明のＧＥパッチとＧＴＥパッチの間の比較を写真で示す。図１１は、アルギン酸カルシウム／ナトリウム、コラーゲン及びGelfoam よりなるマトリックスの間の比較を写真で示す。パッチＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ，「Ｃａｌ−Ａｌｇ」；ＣＶＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ，「コラーゲン」；及びＧＴ（ＣＡ＋＋），本発明の「Gelfoam 」パッチが示されている。図１２Ａは、対照の組の本発明の未使用のＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ，ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ及びＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰパッチを写真で示し、一方図１２Ｂはこれらのパッチを脾臓に適用された状態で示す。図１３Ａは、本発明のパッチを含んだ本発明の包帯の具体例を側面図を示し、一方図１３Ｂは、該包帯の立面図を示す。好ましい具体例の詳細な記述本発明によれば、ε−アミノカプロン酸（ＥＡＣＡ）を含有する止血剤の適用されている吸収性ゼラチンスポンジ又はアルギン酸カルシウム等のような生分解性マトリックスである形作られた構造要素を含んだ止血パッチが提供される。ＥＡＣＡは、血餅分解の阻害剤である。体内においては、血餅の形成及び血餅の分解は競合的なプロセスである。ＥＡＣＡは、血餅を分解する酵素であるプラスミンの産生を阻害する。プラスミンは、血餅の重要な一要素であるフィブリンを線溶とよばれるプロセスにおいて溶解させることによって血餅を分解する。血餅を分解するプラスミンの形成を阻害することによって、ε−アミノカプロン酸は線溶を阻害しそしてパッチ／生物学的境界面における反応条件を血餅形成に有利にする。本発明による止血パッチはこうして、線溶を阻害するのに有効な量のＥＡＣＡを含む。好ましい一具体例においては、生分解性且つ吸収性の平たい柔軟なマトリックスを含んだＥＡＣＡを含む止血パッチが提供される。更には、該マトリックスは圧縮前約４〜10ｍｍの厚み又は圧縮したとき約２〜10ｍｍ、有利的には２〜５ｍｍの厚みを有し、そして約１〜２乃至20ｃｍ、より好ましくは４〜10ｃｍの長さを有する。このマトリックスは、勿論、所望の長さに切ることができる。好ましくは、ＥＡＣＡは、マトリックスの片側、傷接触面のみに、10〜10 0 ｍｇ／ｃｍ² 、より有利的には60〜70ｍｇ／ｃｍ² の量で適用される。所望により、１つ又はより多くの、カルシウムイオン源、ＲＧＤペプチド、ＲＧＤＳペプチド、硫酸プロタミン及び緩衝剤を含む添加剤がその面に適用される。更には、約１〜1000ＩＵ／ｃｍ² 、有利的には１〜100 ＩＵ／ｃｍ² 、そしてより有利的には１〜４ＩＵ／ｃｍ² が、傷接触面に適用される。この文脈において適用される好ましい量は、1.25 ＩＵ／ｃｍ² のトロンビンである。平たいパッチの片面即ち傷接触面にここに規定されたように止血剤及び添加剤を適用することによって、パッチは、組織表面間の望ましくない接着の形成を起こしにくい。そのような接着は、内部的／外科的使用のために設計された止血パッチの場合には特に問題である。異常な接着は、傷の周辺にある傷のない正常な組織が該傷の表面を覆っているパッチと接触しそして該傷に安定的に結合し又は該傷に異常に「癒着」するときに生ずる。例えば、競合者のパッチが適用された潰瘍性の腸は、それに重なっている腸の正常な部分に異常に接着するであろう。その結果、その腸の部分の正常な運動性が減少する。ここに規定されるHemarrest ^TMパッチ等のような好ましいパッチの組織学的切片は、止血を許容するためにそのままの位置に十分な期間放置されると、有利的には傷のない正常な組織とパッチとの間では接着が起こらなかった。表１に掲げられているような本パッチの他の具体例もまた、接着を回避することが想定されている。驚くべきことにＥＡＣＡがパッチ中において凝固因子であるフィブリノーゲンの効果を近似するような仕方で止血剤として機能することが見いだされたことから、ＥＡＣＡ含有のパッチによって示された異常な接着の回避は、重要な特徴である。フィブリノーゲンは溶液中においてトロンビンの存在下にフィブリンに変換され、そしてフィブリノーゲンは他の止血パッチ中に見いだされる活性成分である。しかしながら、ＥＡＣＡは、フィブリノーゲンの使用に伴う害を回避する。更には、本発明によれば、驚くべきことに、パッチのマトリックス中のＥＡＣＡがトロンビンの活性化を促進するアルカリ性環境を提供するということが判明した。ＥＡＣＡの不存在下で測定されたトロンビン活性化（図１の黒四角）に比して、ＥＡＣＡはトロンビン活性を大きく増加させる（図２）。この現象は、ＥＡＣＡが内在の血液中に存在するトロンビンに対して作用してもまたパッチ中に外部から供給されたトロンビンに対して作用しても真である。こうして、ＥＡＣＡを含んだパッチが、（１）プラスミン形成を阻害することによって血餅の分解を遅らせることにより、そしてまた（２）トロンビンを活性化することによって血餅の形成を促進することにより、二重の止血作用を行うことが発見された。従って、本発明によりパッチの局所環境のｐＨを上昇させることによる、トロンビンの活性促進のための方法が提供される。そのようなパッチは、マトリックスと、トロンビンの活性化を促進するに十分にパッチの局所環境中における溶液のｐＨを上昇させる能力のある「トロンビン促進化合物」とを含む。そのような化合物は、該局所環境のｐＨを、7.0 〜9.0 の範囲（両端を含む）、より有利的には7.02〜8.20の範囲（両端を含む）、そして更に好ましくはｐＨ7.62〜8.02（両端を含む）まで高めることができる。本発明によれば、トロンビン促進化合物が血液と接触して溶解するとき、パッチの局所環境中にアルカリ性溶液がつくり出される。次いで血液中に存在するトロンビン及び、所望により、パッチの外来成分として提供されたトロンビンが、パッチの局所環境中において該アルカリ性溶液と混合し、それによって活性化される。有利的には、ｐＨを上昇させるためにパッチ中に提供されるトロンビン促進化合物は、ＥＡＣＡである。薬剤学的に許容し得且つパッチ中の局所ｐＨをアルカリ性条件（すなわち、ｐＨ7.0 〜9.0 、より有利的にはｐＨ7.02〜8.02、そして更に有利的には7.62〜8.02）に緩衝する能力のある「滅菌緩衝剤」が、トロンビン促進化合物として同様に適している。例えば、トリス緩衝剤は、図２において中抜きのダイアモンド形グラフプロットに示されているように、効果的なトロンビン促進滅菌緩衝剤である。ｐＨをこの範囲に緩衝する他の滅菌緩衝剤、例えば Hepes 緩衝剤もまた想定される。従って、より有利的なパッチにおいては、ＥＡＣＡ及びトリス（又は他の）緩衝剤の双方が、本パッチのマトリックス中に提供される。ＥＡＣＡの尚も別の驚くべき利点が見出された。ＥＡＣＡは抗菌性を有する。本発明によれば、ＥＡＣＡは、S．aureus及びE．coli 双方の増殖を用量依存的に阻害することが示された（それぞれ、図３Ａ、３Ｂ及び４Ａ、４Ｂ）。従って、本発明によるＥＡＣＡ／マトリックスパッチは、パッチが適用される所の傷部位に存在する微生物に対する抗菌的効果のために、非常に望ましい。ＥＡＣＡの他の一利点は、動物起源の外来の如何なるペプチドも含有しないということである。例えば、非ヒトフィブリノーゲン止血剤は、人によっては免疫応答又はアレルギー様反応を引き起こすであろう。こうして、本発明によるパッチは、唯一の止血剤として、線溶を阻害するのに、そしてそれによって血餅形成を促進するのに有効な量の、マトリックス中に分散された又はマトリックス表面に適用されたＥＡＣＡを含有することができる。ここにいうそして本発明の何れの具体例においても用いられているものとしての生分解性の「マトリックス」は、吸収性ゼラチンスポンジ、アルギン酸カルシウム、アルギン酸カルシウム／ナトリウム、コラーゲン及び酸化された再生セルロースよりなる群より選ばれるが、しかしこれらに限定されない。本発明によってＥＡＣＡと共に使用するのに、Sawyerの米国特許第4,390,519号によって教示されているような架橋コラーゲン、エステル化コラーゲン又は化学的に変性させたコラーゲン等のような他のタイプのコラーゲンよりなるマトリックス及び止血パッチにおいて利用されている他の慣用のマトリックスが想定されている。ＥＡＣＡと共に使用するのに有利な４つのマトリックスとしては、吸収性ゼラチンスポンジ、アルギン酸カルシウム、アルギン酸カルシウム／ナトリウム及びコラーゲンが挙げられる。従って、本発明の第１の具体例は、吸収性ゼラチンスポンジ（Ｇ）よりなるマトリックスと止血剤であるＥＡＣＡ（Ｅ）とを含むパッチを提供する。この具体例（ＧＥ）は、好ましくはまた、カルシウムを含有してよい（Ｇ（Ｃａ＋＋）Ｅ）。有利的には、ＧＥ又はＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは、効果的に機能するためにトロンビンもフィブリノーゲンも含有する必要がない。その結果、ＧＥ及びＧ（Ｃａ＋＋）Ｅ共に、良好な熱的安定性を有し、何ヵ月もそして数年も、冷蔵することも効果を失うこともなく貯蔵することができる。ＧＥ及びＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは、各々直ちに使用できる状態で冷蔵庫がない場合でさえも長期間貯蔵できることから、屋外及び緊急の使用に有用である。双方共に、フィブリノーゲンを含有するパッチを作るのにもはるかに安価である。本発明の多くの代表的具体例は、ここに最も容易に頭文字によって、例えばＧＥ等と呼ばれる。これらの頭文字は、本発明によってつくり出されるパッチ中に見出される個々の構成要素を示す（表１）。他の具体例においては、ＧＥ又はＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは更に、止血を促進するのに有効量のトロンビンを含み、従って「ＧＴＥ」又は「ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅ」と名付けられる。トロンビン分子は、２〜８℃の温度において最も安定である。しかしながら、これらのパッチは、室温において限られた期間貯蔵することができる。実際、トロンビンがＧＥ及びＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチの効果を高めるために、これらのパッチは救急時又は軍事目的等のような屋外での使用のために、診療所外において非常に有用である。極端な環境条件への暴露はパッチ中に存在するトロンビンを部分的に又は全く不活性化してしまうかも知れないが、残りのＧＥ又はＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは、実質的に影響を受けないであろうということが理解される。ＧＴＥ及びＧ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは更にフィブリノーゲンを含有することができ、それぞれ、ＧＴＥＦ及びＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦと呼ばれる。ＧＥ及びＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチ及び吸収性ゼラチンスポンジ^usp をマトリックスとして用いる全てのパッチにおいて、マトリックスは、有利的には平たいゼラチンフォームの層、より有利的にはGe のパッチの有効性は、ゼラチンフォームの格子構造（これは酵素−基質相互作用を促進する）によって高められる。特に、このゼラチンフォーム構造は、パッチに外来的に提供されているトロンビンと傷から滲出してくる血液中に存在する内因性のフィブリノーゲンとの間の接触を促進する。フィブリノーゲンをフィブリンに変換する酵素であるトロンビン（Ｔ）、止血を促進するカルシウム、ナトリウム、マグネシウムその他のイオン、及び、所望により、フィブリノーゲン（Ｆ）を含むがこれらに限定されない更なる止血剤を止血を促進するのに有効な量でＧＥパッチに適用することができる。イオン添加剤に関しては、特にパッチが外来のフィブリノーゲンを含有していない場合には、パッチ中にカルシウムイオンを導入するために塩化カルシウムが一般に好ましい添加剤である。しかしながらフィブリノーゲンを含有しているパッチにおいては、血餅形成の促進において止血添加剤として、塩化カルシウム及び塩化ナトリウムがほぼ同等によく機能する。「ＥＡＣＡ類縁体」又はＥＡＣＡに類似の止血活性及び化学構造を有する化合物を、ＥＡＣＡに代えてまたはこれに加えて本発明によりパッチ中において使用することができる。マトリックスへの添加の想定されている可能性あるＥＡＣＡ類縁体としては、バイオアイソステリック（bioisosteric）な官能基を有するＥＡＣＡ誘導体が含まれる。ＥＡＣＡのカルボン酸残基は、例えばスルホン酸又はスルフィン酸（−ＳＯ₂ Ｈ及び−ＳＯ₃ Ｈ）又はホスホン酸残基によって置換することができる。類縁体の例としては、５−アミノペンタン酸、７−アミノヘプタノン酸、８−アミノオクタン酸が、これらの化合物が止血活性を有する限り含まれるが、これらに限定されない。ここに規定される分子「トロンビン」及び「フィブリノーゲン」は、動物又はヒト起源より導かれた天然のトロンビン及びフィブリノーゲン分子、動物又はヒトにおいて該酵素の凝固促進活性を効果的に維持している官能性の活性類縁体を含むこれらの分子の合成形又は組換形を含めた意味である。これらの分子が導かれる動物の種は様々であってよく、意図されたパッチの用途に依存する。例えば、ヒトに使用するよう意図されたパッチは、安全上の理由から非ヒトトロンビン及び非ヒトフィブリノーゲンを含む、この文脈において好ましいのは、牛トロンビン及び牛フィブリノーゲンである。ヒトフィブリノーゲンの使用を回避することによって、精製血液製品（特にフィブリノーゲン）のウイルス汚染に伴う危険が最小にされは、米国食品医薬品局によりヒトへの使用について承認されている。尚も別の一具体例においては、アルギン酸カルシウム／ナトリウム（ＣＶＡ）又はアルギン酸カルシウム（ＣＡ）よりなるマトリックスとＥＡＣＡよりなる止血層（Ｅ）とを有するパッチが提供される。アルギン酸カルシウムは、結果に実質的な差をもたらすことなく以下の議論及び実施例において、アルギン酸カルシウム／ナトリウムに置き換えられてよいことが理解される。該具体例において、「ＣＶＡＥ」は、有利的には、カルシウムイオン及びトロンビンをも含む。それもまた、フィブリノーゲンを含有するパッチに比して安価である。ＧＥパッチと同様に、ＣＡＥパッチもまた、トロンビン、カルシウム又はナトリウム又は他のイオンを含むがこれらに限られない追加の止血剤を、止血を刺激又は促進するのに有効な量で含有することができる。所望により、フィブリノーゲンもまた、止血を刺激又は促進するのに十分な量に加えることができる。これらのパッチはまた、ここに記述されるような添加剤をも含有することかてきる。別の一具体例においては、傷の修復を刺激するのに有効な量の活性ペプチド、ＲＧＤ、「Ｒ」又はＲＧＤＳが、ＧＥ又はＣＡＥを含むパッチに加えられ、そしてそのようなパッチはＧＥＲ又はＣＡＥＲと名付けられる。トリペプチドであるＲＧＤは、アルギニン、グリシン及びアスパラギン酸より、そして所望によりセリン「ＲＧＤＳ」により構成されており、そしてフィブリノーゲン及びフイブロネクチンの活性部位である。ＲＧＤは傷の修復を促進し、そして、繊維芽細胞の移動を刺激するものと信じられている。ＲＧＤ添加剤もまた、フィブリノーゲンに比してはるかに安価である。ＲＧＤは、現在は天然の源から精製によって得なければならないフィブリノーゲンを得るコストの一部分で慣用の固相化学を用いて容易に合成することができる。尚も別の一具体例においては、パッチの局所環境中に存在するヘパリンを中和するのに有効な量の薬剤である硫酸プロタミン（Ｐ）が、ＥＡＣＡ及びマトリックスを含む前述のパッチの何れにも加えられる。硫酸プロタミンは、止血パッチによって治療されている特定の患者又は動物の血中に存在するヘパリン又はビタミンＫ拮抗剤を中和する。例えば、ＧＥＰ又はＣＡＥＰを含むパッチは、ヘパリンによる非経口療法を受けている患者のために処方される。特に、更にトロンビンを含有するパッチは、ジクマロールを投与されている患者において有効であろう。硫酸プロタミンを含有するパッチは、硫酸プロタミンの活性を維持するために好ましくは２〜８℃の冷蔵温度にて貯蔵される。本発明によるパッチの更なる利点は、吸収性ゼラチンスポンジ又はアルギン酸カルシウム等の様なマトリックス及び止血剤特にＥＡＣＡ及びトロンビン、及び添加剤、ＲＧＤの全てが、比較的安価であるという点である。約9.5 ×4.8 ｃｍの、約2.5 ｍｍの厚みを有する「標準サイズ」の長方形パッチの製造は、同じサイズのＴＡＦパッチよりも実質的に低コストであろうと推定される。本発明のパッチは、麻酔したブタの脾臓、肝臓及び腎臓の自由に出血している傷において止血を誘導するのに効果を示した。TachoC よって証明されたように、ブタの実質性の器官に加えた外科的傷は、類似のヒトの器官における止血のための優れたモデル系を提供する。Schiele et al.，Clin ical Materials 9:169，p．172(1992)．SWINE AS MODELS IN BIOMEDICAL RESEAR CH，Swindle，M．Iowa State Univ．Press（1992）をも参照。実際、驚くべきことに、本発ン及び100 ｍｇ／ｃｍ² のＥＡＣＡを含有するパッチは、TachoCom 実施例３において示されている。本発明の別の重要な一利点は、その柔軟性である。すなわち、器官又は生物学的表面の外形に容易に一致してパッチの適用の操作の実施をより迅速にするパッチが提供される。結果として、患者の血液の全体的損失が一層少なく、且つ手術にかかる時間が一層短くなる。本発明の止血パッチは、パッチの「傷接触」面、すなわち傷に接触することを意図したそして止血剤及び所望により添加剤を含んだ表面を出血している傷に貼ることによって用いられる。次いで、パッチは、止血パッチと傷との間の境界面において血液凝固が起こって出血が実質的に止められるのに十分な時間、傷と接触した状態に維持される。好ましくは、パッチは、傷表面と約３〜20分間、有利的には３〜10 分間、そしてより有利的には３〜５分間接触した状態に維持される。ＥＡＣＡ、トロンビン及び塩化カルシウムの全てがマトリックス上／中に存在する場合には、この時間は好ましくは約５分である。パッチは、その生物学的表面に当てて、好ましくは滅菌食塩水浸漬スポンジによる、好ましくは軽い圧力によって、その位置に保持される。代わりとして、パッチは、ガーゼ又は他の乾燥した無菌材料によってパッチに単に圧力を加えることによってその位置に保持されてよい。傷の位置に応じて、傷の部位に軽い圧力を与えるよう弾力包帯を含む包帯をパッチの周りに巻くことができる。止血を誘導することに加えて、本発明のパッチは身体組織を密封的にシールするために有用である。例えば、肺の傷から空気が漏れている場合には、その傷を囲む表面にパッチが貼られ、軽い圧力を以て、上述のように止血を誘導するに十分な時間その位置に維持される。その時間の間に、止血に加えて、密封シールが形成される。パッチを適用する前に、パッチを滅菌食塩溶液に浸漬することが好ましい。しかしながら、そのようなステップは必須ではない。本発明による止血パッチの使用は、先ず食塩溶液に浸漬することなしに、救急医療技術者や軍の医療従事者が遭遇するような屋外状況でのパッチの迅速且つ簡単な適用を許容する。一具体例においては、パッチは、汚染なしにパッチを取り出すことを容易にするシールされた無菌パッケージ中に収容されている。そのようなパッケージは、例えば、アルミホイルパウチ又は他の、容易に滅菌される慣用の材料であってよい。照射、有利的にはガンマ線照射が、パッチとパッケージ材料とを一緒に滅菌するために適用される。別の一具体例においては、２つのコンパートメントを有する容器が提供される。第１のコンパートメントは、蒸留水、滅菌食塩水又は滅菌緩衝液を収容しており、一方、第２のコンパートメントは本発明のパッチを収容している。屋外での使用に際して、第２のコンパートメント内のパッチは開放された第１のコンパートメント内に容易に浸漬されてその後に傷に適用されることができる。本発明のパッチの好ましい用途は、肝臓、腎臓、脾臓、膵臓又は肺等のような実質性の器官の出血を阻害し又は完全に停止させることである。そのようなパッチの更なる用途としては、内部の／腹部の、血管の（特に吻合術）、泌尿器科、婦人科（特に会陰切開術）、甲状腺、神経科、耳鼻咽喉科、組織移植での使用、及び歯科手術等が含まれるが、これらに限定されない種々のタイプの手術に際して、組織の出血を抑制することが含まれる。止血パッチの別の一用途としては、火傷又は組織移植等のような局所的治療が含まれる。本発明による局所的使用を意図したパッチは、好ましくは、抗感染薬等のような添加剤を含む。殺菌薬、抗真菌薬及び傷修復剤も加えることができる。ネオマイシン及びバシトラシンは、局所的使用を意図したパッチに、上述のＥＡＣＡの抗菌性に加えて導入される添加物の例である。本発明の止血パッチはまた、動物、好ましくはヒト又は他の哺乳類を治療するのに有用である。従って、ペット、家畜及び野性動物の双方を止血パッチで治療することができる。使用の意図に応じたパッチのサイズ及び形状。更には、圧縮なしで約４〜10ｍｍ、又は圧縮したときの厚みが約２〜５ｍｍの標準のサイズの長方形パッチすなわち9.5 ×4.8 ｃｍが、鋏によって切り取られてよい。ＥＡＣＡ及び止血剤及び／又は本発明による他の添加剤の適用される有利なマトリックスの一例として、ゼラチンフォーム、好ましくは圧縮した形で提供されたものが挙げられる。より好ましくは、元の厚みの少なくとも半分まで圧縮されたGelFoam マトリックスである。また、パッチは、身体の腔に詰める等のために、球形、円錐形、立方形又は円柱状に形作っても、又は小さな正方形の形に予め製作してもよい。そのような具体例は、例えば抜歯によって生じた歯の空洞に有用である。加えて、パッチは、鼻出血（鼻孔からの多量の出血）その他の空洞のためにタンポンの形に形成することができる。局所適用を意図したパッチは、更に、パッチが接着性の裏打ちに接着されているものであるバンド−エイドの形で、接着テープと共に適用することができる。好ましくは、パッチを固定するために使用される接着剤は、皮膚に接触する領域が多孔性である。本発明の一具体例は、あらゆるタイプの感染性因子に対して無菌の機械的障壁を提供するために、皮膚表面に適用するための薄いフィルムの傷抑え又は包帯を提供する。好ましくは、図１３に示されている「包帯」の具体例は、パッチ２０の、傷接触面３０の反対側である外面と接触した裏打ち部材１０を含む。好ましい一具体例においては、この裏打ちは、止血剤、所望による添加剤及び他の生物学的滲出物が外面３０を通過するのを阻止する働きをすると共に、感染性微生物がパッチ及びその下にある傷内へと入ることに対する障壁を提供する。この裏打ちはまた、パッチ及びその下の傷のための物理的支持及び保護をも提供し、そして好ましくは、パッチの外面に例えば医療上許容し得る接着剤によって固定されている。本発明の接着包帯においては、種々の閉塞性の又は非閉塞性の、可撓性又は非可撓性の裏打ち部材を使用することができる。この文脈における使用に好ましいのは、傷の手当てその他の医療的使用に特に適合させてある幾つかのポリウレタンフィルムである。これらのフィルムは、典型的には２ｍｍ未満の厚みで使用され、そして酸素、水蒸気及び他の気体がそれらの分子マトリックスを通って自由に拡散することを許容する。加えて、これらのフィルムは、液体に対しても全ての既知の微生物疾病媒介因子に対しても非透過性である。他の適した裏打ちとしては、ポリエチレン、アクリル、シリコン、セロファン、酢酸セルロース、エチルセルロース、可塑化酢酸ビニル−塩化ビニルコポリマー、ポリエチレンテレフタレート、ナイロン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニリデン、紙、布、アルミホイル及び他の慣用の裏打ち材料が含まれれる。好ましくは、パッチが適用される患者の身体部分の外形に包帯が容易に一致することを許容するよう、可撓性の裏打ち材料が用いられる。本発明の包帯の提供において、フラップ１５がパッチの領域を超えて裏打ち部材から延びている。別の一具体例においては、フラップはパッチ自体に、好ましくはパッチの各側に固定されている。有利的には、パッチ部材の長手方向の又は幅の両側に裏打ち部材から延びている少なくとも２つのフラップが備えられている。代わりとして、図１３に示したように複数の繋がったフラップが裏打ち部材からパッチを超えてひさしのように延びていてよい。フラップが裏打ち部材の単一の側から外方へと延びている場合には、フラップは好ましくは、それが例えば指などを一周してパッチの反対側の裏打ち部材に接着することを許容するに十分に長い。裏打ち部材と患者の皮膚との間の接着を許容するよう、医療上許容し得る接着剤２５がフラップに塗られている。好ましくは、フラップ及び裏打ち部材は、皮膚が呼吸することを許容する材料で作られている。裏打ち及びフラップ材料は、同一の又は異なった材料で作られていてよい。使用前に他の表面にひっつくことを防止するために、一層のセロファン、プラスチックその他を含む除去可能の「引きタブ」４０が、フラップにつけられている。本発明の局所的接着包帯を使用するためには、身体への包帯の適用の直前に引きタブ層が容易に剥がされる。次いで包帯は、下方に面した傷接触表面が傷に直接接触する状態で適用される。フラップは、好ましくは、傷に接触せず、代わりにパッチ部材を所定位置に固定するために傷の隣接する正常組織の領域に適用される。傷処置材料の１つ又はより多くの層、好ましくは血液その他の滲出物の吸収を助ける層が、パッチに適用できる。そのような追加の層は、パッチの一体の一部として作ることができ、それにより一層厚いパッチを作り出す。代わりとしては、層は、本発明のパッチの後ろ側（傷非接触面）への補助として適用してよい。特に局所使用のためには、層は、傷の部位からの滲出液を吸収する超吸収剤を含んでよい。内部手術適用を意図したパッチの場合、追加の層がパッチと一体ならば、その層は生分解性であり且つ薬剤学的に許容し得るものである必要がある。パッチは、外科的又はその他によって切断された血管又は他の身体管腔の各末端の吻合又は融合を容易にするよう設計することができる。吻合のためにパッチを適用するには、例えば長方形のＧＥＴ移植物が所定位置に配置されると、パッチは埋め込み物内へのフィブリンの成長を促進して埋め込み物を所定位置に（止血的に且つ密封的に）シールする。移植物の両端と密着するよう設計された、移植物と本発明のパッチとを収容したキットが提供される。代わりとして、移植物の少なくとも一端に予め密着させた本発明のパッチを有するキットが提供される。好ましくは、パッチの傷接触面は、使用者を補助するために、例えば黄色のビタミンＢ₂ （リボフラビン）又は適当な染料例えばヘミン等の色指標で被覆される。パッチに色コードを付すことにより、使用者は、パッチの傷接触面に触れ又は別の方法で汚染することを意識して避ける。本発明のＥＡＣＡ含有パッチは、マトリックスの局所環境における線溶を阻害するのに有効な量のＥＡＣＡをマトリックスに適用することによって作られる。有利的には、約10〜100 ｍｇ／ｃｍ² 、より有利的には60〜70ｍｇ／ｃｍ² のＥＡＣＡがマトリックスの傷接触面に適用される。ＥＡＣＡ並びに本発明のパッチの成分として記述された他の止血剤又は添加剤は、いずれも最も好ましくは無菌条件下に行われるであろう幾つかの方法の何れによってマトリックスに適用されてもよい。ここに記述されたものの他にも、ＥＡＣＡを含むマトリックスに止血剤及び添加剤を適用する慣用の方法が同様に行えるということが理解される。有利的には、ＥＡＣＡはマトリックスの特定の表面又は側に一層として適用され、その表面がついで傷接触面と名付けられる。これは、パッチ上へＥＡＣＡを粉末形態でスプレーすることによって達成できる。代わりとして、ＥＡＣＡの溶液をマトリックス上へ被覆しそして凍結乾燥により又は慣用の手段によって乾燥させることができる。ＥＡＣＡを適用する別の一方法においては、マトリックスが、Hemarrest パッチに類似の効果が示されるように、哺乳類における線溶を阻害するのに有効な十分な量のＥＡＣＡがマトリックス内に蓄積するよう、ＥＡＣＡの滅菌溶液中に完全に又は部分的に浸される。内部に使用することを意図したパッチを作るに当たっては、マトリックスは好ましくはＥＡＣＡに完全には浸漬されず又はＥＡＣＡで飽和されない。寧ろ、上記の代わりの方法の何れによっても、ＥＡＣＡは片側に適用される。マトリックスへのＥＡＣＡの適用の後、マトリックス／ＥＡＣＡは、マトリックスへのＥＡＣＡの接着を容易にするタンパク質層で被覆される。有利的には、このタンパク質はトロンビンである。尤も、そのような接着を容易にする他のタンパク質又はゼラチン化合物もまた利用できよう。より有利な具体例においては、マトリックスはＥＡＣＡの適用前にタンパク質によって被覆される。更なる有利な具体例においては、マトリックスはＥＡＣＡの添加前及び後に、タンパク質で、好ましくは例えばカルシウムのようなイオン添加剤を含んだ溶液（すなわち塩化カルシウム溶液）中のタンパク質で処理される。例えば、ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅ又はＣＴ（Ｃａ＋＋）Ｅ等のような具体例は、ゼラチンフォーム又はコラーゲンよりなるマトリックスの傷接触面に、塩化カルシウム中に溶解させたトロンビンの第１の溶液（トロンビンが例えば１〜1000 ＩＵ／ｃｍ² 、有利的には１〜100 ＩＵ／ｃｍ² 、そしてより有利的には１〜４ＩＵ／ｃｍ² 又は1.25 ＩＵ／ｃｍ² の量で存在する。）を適用することによって作られる。トロンビンは、25〜150 μｇ／ｃｍ² 、好ましくは50〜100 μｇ／ｃｍ² がその表面に沈着されるよう、20〜60ｍＭ、好ましくは約40ｍＭの塩化カルシウム中に溶解される。次のステップは、このトロンビン被覆表面に10〜100 ｍｇ／ｃｍ² 、好ましくは60〜70ｍｇ／ｃｍ² のε−アミノカプロン酸を、好ましくは粉末形態で適用し、次いで塩化カルシウム中のトロンビンの第２の溶液（例えば、第１の溶液において記述したような量のトロンビン及び塩化カルシウムを含む）を適用し、そしてパッチ上のトロンビン、塩化カルシウム及びε−アミノカプロン酸を乾燥させる。第１及び第２の溶液の形で適用されるトロンビンの量は変化させることができ、又は単一のトロンビン溶液シール工程をＥＡＣＡの添加後に適用することもできる。好ましくは、これら２つのステップによってパッチの傷接触面に適用されるトロンビンの総量は、２〜10 ＩＵ／ｃｍ² である。乾燥ステップは、好ましくは凍結乾燥によって達成される。乾燥処理がタンパク質を変性せず又はそれらを動物血液に曝したときに不活性なものにするのでない限り、活性のタンパク質成分を含有する材料に適した他の乾燥手順も用いることができる。代わりとして、パッチは、室温で１〜３時間、続いて終夜冷蔵という慣用の仕方で乾燥される。他の具体例、例えば、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ又はＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦにおいては、パッチの局所環境において止血を促進するのに有効な量のフィブリノーゲン、好ましくは２〜10ｍｇ／ｃｍ² のフィブリノーゲンが、ＥＡＣＡ、トロンビン及び塩化カルシウムを更に含有しているマトリックスに、薬剤として加えられる。尚も別の一具体例においては、ＥＡＣＡ、トロンビン、塩化カルシウム及び、所望により、フィブリノーゲンに加えてマトリックスに加えられる薬剤としては、パッチの局所環境中のヘパリンを中和するに有効な量の硫酸プロタミンが含まれる。硫酸プロタミンは、マトリックスに１〜15ｍｇ／ｃｍ² 、好ましくはマトリックスの傷接触面に２〜５ｍｇ／ｃｍ² の量で加えられる。同様に、ＲＧＤ又はＲＧＤＳペプチドが、二重蒸留水中に溶解されてパッチの傷接触面に噴霧されてよい。パッチは有利的には血餅の形成を促進するのに有効な量のＲＧＤを含有する。ＲＧＤ又はＲＧＤＳは、パッチに、有利的には110 〜 130 ｍｇ／ｃｍ² の量で加えられる。従って、標準サイズのパッチは、約１〜10 ｍｇ／パッチ又は約５〜７ｍｇ／パッチのＲＧＤ又はＲＧＤＳを含有する。ＥＡＣＡと同様、前記の止血剤又は添加剤は、マトリックスに層の形で、例えばそれらを乾燥形態でマトリックスの傷接触面に噴霧すること等により、適用することができる。代わりとしては、マトリックスは、止血剤／添加剤を含有する溶液に浸漬又は被覆することができる。マトリックスと薬剤とは、特に、乾燥した薬剤が溶解及び混合することを許容する血液等のような体液にパッチが曝されたとき混ざり合うことが望ましい。こうして、止血剤又は止血剤の混合物がマトリックスの孔若しくは間質に吸収されているか又は薬剤がマトリックス上に層を成していてよくそして体液の添加によって薬剤が溶解されたとき所望の混合が達成されるパッチを提供することができる。マトリックスは、上記具体例において記述された適当な止血剤で、その１つ又は全ての表面が被覆されてよい。好ましい一具体例においては、止血剤と添加剤とが、ただ一つの面（傷接触面）に被服される。そのような配列は、傷と、パッチの近くの無傷の組織の間における止血の誘導を回避する。身体組織中の空洞を充填することを意図した一具体例においては、例えば、パッチは、止血剤／添加剤で全ての面を被覆される。本発明によるキットは、本発明による何れかの上述の止血パッチ具体例（それらは用いられる止血剤及び添加剤、形状又はサイズにおいて変動する）とパッケージとを含み、ここにパッチは、汚染することなくパッチを取り出すことを容易にするシールされた滅菌パッケージ内に収容されている。該キットは、多数のパッチを含むことができ、好ましくは各パッチは別々のシールされたパッケージ内に収容されている。屋外／軍事使用のために設計されたキットは、止血パッチに加えて、メス、クランプ、圧迫帯、弾力又は非弾力包帯その他等のような使い捨て滅菌済み手術器具を更に含むことができる。別のタイプのキットは、マトリックスに添加された、トロンビン、ＥＡＣＡ、塩化カルシウム及び硫酸プロタミンを含む薬剤を含んだパッチを含む。そのようなキットは、例えば抗凝固療法を受けている患者に対し、小さな傷から起こりうる重大な出血を回避するために処方することができる。そのようなパッチの利用可能性は、手術を受けた、ジクマロール投与を受けている患者の術後入院を減らすことができる。本発明は更に、以下の説明的具体例を参照して更に記述される。別に規定しない限り、ここに用いられている全ての技術的及び科学的用語は、本発明の当業者によって通常理解されているのと同じ意味を有する。ここに記述されたのと類似の又は等価な如何なる方法及び材料も、本発明の実施において使用することができるが、好ましい方法及び材料が記述されている。別に述べない限り、ここに用いられている又は想定されている技術は当業者に周知の標準的方法である。材料、方法及び実施例は、単に説明のためのものであり、限定するものではない。実施例１：トロンビン活性化に対するＥＡＣＡの効果ＥＡＣＡの存在下においてトロンビン活性化が、（Ａ）促進されるか、そして（Ｂ）ｐＨ依存性であるか、を試験するために２つの部分よりなる実験が設計された。Ａ．37℃におけるインキュベーション時間の影響本試験の第１の部分は、トロンビンの活性化及び37℃におけるインキュベーション後の水中におけるその分解を調べた。用いたアッセイは、トリペプチド、ＴＦＡ−ｐｈｅ−ｐｒｏ−ａｒｇ−ＡＦＣの比色定量的切断であり、ここにＡＦＣは比色定量タッグである。この基質の17ｍｇを200 μｌのＤＭＳＯ中に溶解した。トロンビンは、10単位／ｍｌに調製される。「試験」溶液は、100 μｌの基質と200 μｌのトロンビン溶液を含有した。ブランクは、同量の基質及び200 μｌの水を含有した。「37℃におけるトロンビン溶液の活性化」と表示した図１は、その試験の結果を示している。これらの試験の全てにおいて光学密度は色の指標であり、従って、起こった酵素分解量である。黒四角ラインの勾配は、水に溶解させたトロンビンのトロンビン活性化が、17 2 分の時間をかけてゆっくりと起こったことを示している。ブランクは、基質と水とを含むが、光学濃度に何の変化も示さず、活性化がすなわちペプチドの切断が起こらなかったことを示している。Ｂ．ＥＡＣＡによるトロンビンの活性化：ｐＨの影響この試験においては、ＥＡＣＡによるトロンビンの活性化がＥＡＣＡのｐＨ上昇効果によるものであるという仮説を検証した。全ての溶液は、ＥＡＣＡが50ｍｇ／ｍｌに調製されたことを除き、上のＡに示したのと同濃度に調製された。次のサンプルが調製された。１．50μｌトロンビン＋ 925 μｌ水＋ 25μｌ基質２．50μｌトロンビン＋ 925 μｌトリス緩衝液ｐＨ7.02 ＋ 25μｌ基質３．50μｌトロンビン＋ 925 μｌトリス緩衝液ｐＨ7.62 ＋ 25μｌ基質４．50μｌトロンビン＋ 925 μｌトリス緩衝液ｐＨ7.80 ＋ 25μｌ基質５．50μｌトロンビン＋ 925 μｌトリス緩衝液ｐＨ8.01 ＋ 25μｌ基質６．50μｌトロンビン＋ 425 ＥＡＣＡ溶液＋ 500μｌ水＋ 25μｌ基質７．50μｌトロンビン＋ 425 ＥＡＣＡ溶液＋ 500μｌトリス緩衝液ｐＨ7. 02 ＋ 25μｌ基質８．50μｌトロンビン＋ 425 ＥＡＣＡ溶液＋ 500μｌトリス緩衝液ｐＨ7. 62 ＋ 25μｌ基質９．50μｌトロンビン＋ 425 ＥＡＣＡ溶液＋ 500μｌトリス緩衝液ｐＨ7. 80 ＋ 25μｌ基質 10．50μｌトロンビン＋ 425 ＥＡＣＡ溶液＋ 500μｌトリス緩衝液ｐＨ8. 01 ＋ 25μｌ基質各試験管を37℃の水浴中に配置し、５分毎に、計60分にわたって定期的に取り出して読み取った。結果が表２にまとめられている。凡例中、縦に掲げられているサンプル１〜10は、上記サンプル１〜10に対応しており、一方「Ｔ」はトロンビンを表す。結果は、ＥＡＣＡの作用がｐＨ効果であり、トリ緩衝剤で調整された溶液がｐＨの上昇と共に同様の効果を有することを明瞭に示している。全ての場合において、機器の飽和は記録された最大の光学密度の付近で起こっていることから、プラトーは正確ではないかも知れない。 37℃において、これらの結果は、ＥＡＣＡの作用がｐＨ効果であるということを明瞭に示している。カルシウムイオンはこのｐＨ媒介性の活性化を促進するように見える。実施例２：ＥＡＣＡは抗菌効果を示す以下の方法によってＥＡＣＡが用量依存的に黄色ブドウ球菌(S．aureus)及び大腸菌（E．coli）を共に抑制することが示された。培養プレー卜及びＥＡＣＡディスクが次の通りにして調製された：直径5.4 ｃｍ及び22.9ｃｍ² の面積のWhatman 濾紙ディスクを、殆ど同じ直径のビーカー中にいれた。ＥＡＣＡ（229 ｍｇ）を250 μｌの二重蒸留水中に溶解して、最終濃度を作るために使用した。ＥＡＣＡの全ての濃度は、250 μｌの水中に適用した。０、10、20、30、40、50、60、70、80、90、及び100 ｍｇ／ｃｍ² の濃度を調製した。ＥＡＣＡ溶液の適用の後、ディスクを乾燥させ、そして安定性を保証するために凍結した。寒天プレートに適用するためのディスクは、ペーパーパンチで、約6.35ｍｍのサイズに作成した。寒天プレートは、２つの増分の形で注いだ。 1.5 ％ Brain-Heart Infusion 寒天よりなる最初の増分を調製してオートクレーブ処理した。約55℃まで冷却した後、12ｍｌを各100 ｍｍ×15ｍｍのペトリ皿に加えた。プレートを室温まで放冷し、パラフィルムで包みんで冷蔵した。Brai n-Heart Infusionブロスを調製しオートクレーブ処理した。温度が室温まで冷えたとき、黄色ブドウ球菌及び大腸菌の部分量を加えそしてブロスを終夜37℃にてインキュベー卜した。次の日に、1.2 ％ Brain-Heart Infusion 寒天よりなる第２の増分を調製し、オートクレーブ処理の後48℃まで冷えた後に、各培養物の２ｍｌを別々の寒天のフラスコに加えそしてこれらの混合物の１ｍｌを各培養プレートに加えた。この上部層を室温にて硬化させた。変化する濃度のＥＡＣＡを含有する５つのディスクよりなる２組を、ゼロｍｇ／ｃｍ² のＥＡＣＡを含有する対照ディスクの他に各プレートに加えた。完全な結果を表２に掲げてある。図３Ａ及び図３Ｂは各々、種々の濃度のＥＡＣＡの各々による黄色ブドウ球菌増殖の阻害をグラフで示しており、一方、図４Ａ及び図４Ｂは各々、各組の変化する濃度のＥＡＣＡに付いての大腸菌増殖の阻害を示している。阻害区域の観察及び測定結果は、殆ど全ての例において、ＥＡＣＡの濃度に関連して阻害区域の増大があることを明らかにしている。例外は、60ｍｇ／ｃｍ² がこの傾向に従わず、40ｍｇ／ｃｍ² に比して等しいか又は減少したことである。90及び100 ｍｇ／ｃｍ² の区域は、必ずしも増大しなかった。これらの変動の一貫性は、生物学的変動であるよりも、寧ろディスク調製に関係しているように見える。１．パッチ調製吸収性ゼラチンスポンジ、すなわちゼラチンフォームマトリック erence 2451，47th Edition Dowd (ed.)，Medical Economics Data (1993)．その後、1.25 ＩＵ／ｃｍ² のウシトロンビンをこのゼラチンフォームに適用した。次に、10ｍｇ／ｃｍ² 又は100 ｍｇ／ｃｍ² のＥＡＣＡの何れかを同じ表面に適用し、続いて別の1.25 ＩＵ／ｃｍ² のウシトロンビンを適用した。パッチを乾燥させそして冷蔵庫内に終夜置いた。「ブランク」ゼラチンフォームパッチ（トロンビンやＥＡＣＡで処理されていない）もまた、腎臓において試験した。て出血している器官に軽い圧力で５分間当てがった。２．器官の準備ブタ肝臓の一の葉を外科的に単離し、約１×1.5 ｃｍのサイズの傷を加えた。これらの傷の各々から血液が自由に流れた。Ａ（上述）において論じた各パッチを当てがい、食塩水含浸スポンジによる圧力の下に５分間保持し、そして圧力を解除した。（ａ）漏出、（ｂ）血管圧の増大に耐える能力、（ｃ）傷からパッチを剥がそうとしたときに与えられる抵抗、及び（ｄ）傷における血餅形成による、出血を制御する能力によって、パッチを評価した。肝臓については、0.2 ｍｌの1/1000エピネフリンの注射によって動脈圧を上昇させることにより圧力試験を実施した。腎臓の試験においては、腎臓の両極（両端）を約0.5 ｃｍの深さまで外科的に除去し、一方、腎臓動脈をクランプした。試験パッチを配置し食塩水含浸外科用スポンジによって５分間圧力を加えた後、クランプを除去した。Ｂ．結果の要約肝臓においては、圧力が除去されそして５分経過した後、本発明による両方のパッチは、100 ｍｇパッチの縁からの少量の出血を伴うのみで10ｍｇパッチからは出血を伴わず、出血に対する良好な制いる唯一のパッチであった。結果が図６及び７に示されており、これらは、それぞれ100 ｍｇ／ｃｍ² （左側）又は10ｍｇ／ｃｍ² （右側）のε−アミノカプロン酸含有のHemarrest ^TMパッチを示す。図６においては、血液は、由来するものであった。少量の血液が100 ｍｇパッチの表面に存在し、一方10ｍｇパッチ上には存在しなかった。図７は、図６に示された同じ肝臓から除去されたパッチを示す。ている。ゼラチンフォームパッチの断片が、10ｍｇ部位に導入されている。依然として血液を各縁から垂らしていた。20分後のはぎ取り試験はしそして傷が出血し続けていることを示した。100 ｍｇパッチを付はなかった。10ｍｇパッチは、全てのパッチのうちで最も出血が少なく、且つ傷内へのパッチの良好な導入と、周縁への最小の接着しか伴わない良好な血餅形成とを有した。にあまり差はなかった。エピネフリン注射の前にも後にも出血はなッチは非常に良好な接着の質、良好な血餅形成を有したが然し幾らかの自由な出血があった。100 ｍｇパッチは、同等に良好な接着性は有しなかったが、良好に形成された血餅を有しそして出血がなかった。ブランクのゼラチンパッチと本発明による10ｍｇパッチとを比較したとき、10ｍｇパッチの方が明らかに良好であった。圧力解除の５分後に、100 ｍｇパッチの下には自由な血液があったが、一方、10ｍｇパッチの縁の周りには幾らかの出血があった。これはエピネフリン注射後にも変わらなかったが、しかしパッチを除去して血餅形成を観察することによって実験的はぎ取り試験が行われたとき、ブランクパッチの下には血餅が良好には形成されていなかった。更には、自由な血液が存在し、そしてパッチを通り抜けた血液又は血漿を検出するためにパッチにあてがわれていた乾燥外科用スポンジ上には、血液で黒ずんだしみがあった。パッチが除去された後も、表面への 100 ｍｇパッチの良好な接着があった。10ｍｇパッチは、周縁においてかなり良い接着を有し、そして幾らかの自由な血液を有した。パッチが持ち上げられたとき、良好な血餅形成の証拠があり出血はなく、それによってパッチにあてがわれていた乾燥外科用スポンジによる測定により、淡い桃色のしみを与えた。図８は、腎臓に適用されたパッチを図解しており、該パッチは、2.5 ＩＵ／ｃｍ² のトロンビン及び100 ｍｇ／ｃｍ² のε−アミノカプロン酸を含有する。淡い桃色は、実際上、自由な血液がパッチを通り抜けていないことを示す。器官に止血パッチを当てて保持していたスポンジ上には血液は存在しない。極を示す。後者のパッチは一層黒ずんでおり、それはパッチマトリックスを一層多くの血液が通ってきていることを示す。そのパッチの下側の縁は、図７のパッチに比して緩い。新鮮な血液の検出を助ける目的で器官にあてがわれていた乾燥スポンジ上には、新鮮な血液を見ることができた。実施例４：ＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチによって達成される止血効果１）実施例３に論じたようにしてブタの脾臓の傷がつくり出された。図１０に見られるように、ＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチからは出血は観察されなかったが、一方、ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチからは、幾らかの出血が観察された。10分後、双方の中央から僅かな漏出があり、それは15分までには停止された。パッチが除去されたとき、双方の試験しみが共に淡い桃色であったため、パッチ表面において行われた試験しみには差は無かった。双方のパッチにおいて、大型の良好に形成された血餅と共に、非常に良好な接着が認められた。ＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチにおいては、血餅はパッチには接着していたが傷には接着していなかった。２）肝臓においては、何れも如何なる観察においても出血を示さなかった。はぎ取ったとき、それらのパッチは共に良好な接着を有したが、しかしＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチは除去後自由に出血した。対照的に、ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは、幾らかの導入と、そして良好な血餅を有した。ＧＥ（Ｃａ＋＋）は、良好な血餅を有していないように思えた。３）腎臓は、予期せぬ知見を与えた。ＧＥ（Ｃａ＋＋）パッチは明らかな漏出を示さなかったのに対し、ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチは一貫した漏出を示した。 10分の時点において、漏出はＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチにおいて減少し、そして 15分の時点においては、何れにおいても更なる出血はなかった。パッチが除去されたとき、双方共に良好な接着を示し、ＧＴ（Ｃａ＋＋）Ｅパッチの幾らかの導入が認められたが、双方ともにパッチの不存在下においては出血した。この一つの実験からの結論は、トロンビンの添加では血餅形成がより良好であるように見えるものの、これらの治療間に殆ど差がないことを示唆している。このことは、熱への一層過酷な暴露下にも安定である救急包帯が、トロンビンの不存在でも有効であろうということを意味する。実施例５：ＣＶＡ（Ｃａ＋＋）ＴＥ（アルギン酸カルシウム／ナトリウム）及び他のパッチの比較１）ＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ、ＣＶＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ及びＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦパッチを、通常の仕方で脾臓表面の傷に適用した。各々2.5 ｍｇ／ｃｍ² のフィブリノーゲンを含有した。図１１に示されているように、結果は、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ、ＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ及びＣＶＣ（Ｃａ＋＋）ＥＦが５分の時点での圧力の解除のとき、縁から出血したことを示した。10分の時点では、傷の被覆されていない部分を除き、出血は停止した。15分の時点では、全ての出血が停止した。パッチが除去されたとき、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは傷が引き延ばされたとき出血を開始したが、しかし良好に形成された血餅と、傷内の良好な接着を有した。ＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは、傷内の良好な接着を有し、パッチ下には幾らかの血餅形成と自由な血液とがあった。そしてＣＶＣ（Ｃａ＋＋）ＥＦは、一層良好な接着と、傷内の良好に形成された血餅とを有し、これは３つのパッチのうちで最も有効であった。約50分後の評価は、（１）ＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦが最も良い接着を有し、（２）ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦが傷に接着し、そして（３）ＣＶＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは緩いがしかし出血もなかったことを示した。同様の試験が肝臓及び腎臓において行われ、ＣＶＡＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦが他の２つを僅かに凌いだもののこれら試験したパッチの間に大差がないという結論が導かれた。実施例６：ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰ（プロタミン）パッチこの試験は、パッチに適用される化合物の組み合わせ中におけるプロタミン（ヘパリン拮抗剤）を試験するために行われた。プロタミンは、凝固の防止又は遅延が有利である心筋、肺、血管疾患又は他の疾患のために抗凝固治療を受けている患者を容易にするのに有利である。プロタミンパッチを試験するために、試験開始前に2000単位の投与量で、そして１時間後及び試験終了45分前に別の1000単位の投与量で、ブタをヘパリン処理した。この試験において使用したＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ「ゲルフォーム」、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ「コラーゲン」及びＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰ「プロタミン」は、図１２Ａに示されている。プロタミンパッチにはプロタミンが５ｍｇ／ｃｍ² の量で適用された。フィブリノーゲン及びＥＡＣＡは、前記の量でパッチに適用する前に、細かい粉末へと粉砕された。１）脾臓においては、圧力が解除された後全ての傷は出血を続けたが、プロタミンパッチを当てた傷は出血が最も少なかった。図１２Ｂに示されている写真は、圧力解除の35秒後にとられた。圧力は、7.5 乃至10分後に再び適用された。10 分の時点において、圧力は再び除去され、そして出血が評価された。全ての傷は出血を続けた。圧力が、更に約４分間再び適用された。今や、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは出血を管理しており、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦはパッチがずれた所の傷の露出部分のみから出血し、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰはＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦと類似であった。圧力は、再び45秒間適用された。３分後パッチはこれらの傷から除去された。ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦには出血がなく、良好な導入と接着を有したが、殆ど血餅を有しなかった。ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは傷の露出部分から依然として出血しており、良好な接着と良好な血餅形成とを有したがパッチ下において依然出血しており、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰは傷の露出部から出血し続け、良好な接着、導入及び血餅形成を有した。脾臓は結紮された。腹腔は、出血した血液による大きな血餅を有した。２）このプロトコールは肝臓の場合と同様である。ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦパッチは、各縁からひどく出血しており、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは各縁から出血しており、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰは各縁からの僅かな出血を有するのみであった。圧力が15秒間再適用されるとパッチの何れも10 分の時点の評価において出血を示さなかった。これは、15分の時点においても真であった。 20分の時点においてパッチははぎ取られた。ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは良好な接着を示したか、パッチ下に自由な血液を有した。ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦはより少ない接着を有したがしかし良好な血餅形成を示した。そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰは良好な接着及びパッチ下の血餅形成を示した。３）腎臓において、結果は同様であった。圧力解除の後、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦパッチは中央において出血しており、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦはパッチの底部からしみ出しており、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰは中央からしみ出しそして外観において濡れていた。10分の時点において、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは、あったとしても僅かに漏れているだけであり、そしてＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦ及びＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰには出血がなかった。エピネフリンが注射された。ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは漏出しはじめ、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは縁から漏出しはじめ、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰは漏出しなかった。パッチが除去されたとき、ＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦはかなり良い接着と幾らかの自由な血液とそして表面からのしみ出しがあり、ＣＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦは殆ど接着がなく一層多くの自由な血液があったがしかし良好な血餅を有しており、そしてＧＴ（Ｃａ＋＋）ＥＦＰはかなり良い接着と、良好な血餅を有し、出血がなかった。要約すると、トロンビン、ＥＡＣＡ及びフィブリノーゲンによって調製したゼラチンフォームパッチとコラーゲンパッチ（ゼラチンフォームパッチはこれらの化合物及びプロタミン、すなわちヘパリン拮抗剤を含む）との間の比較がなされた。止血を行うに一層長い時間を要し、観察の間に圧力を数回加える必要があり、そして出血の管理に一層長い時間を要したが、全ての実験の結果は、硫酸プロタミンの添加は、硫酸プロタミンを含まないパッチに比して一層早期の血流停止、より良好な血餅形成及び通常一層よい接着をもたらすことを示した。これらの結果は、患者がヘパリン処理されているか又はジクマロールを投与されている場合、プロタミンパッチに20分の、そして好ましくは少なくとも10分の圧力を加えることが推奨されるということを予測する。実施例７：本（「ＲＧＤ」）パッチこの試験は第１部及び第２部を有する。第１部：ＣＴＲ，ＣＴＥ（ｆ），ＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）パッチ及びただのゲルフォーム（Ｇ）パッチを、麻酔したブタの脾臓上に適用した。シンボル（ｆ）は、直前の化合物が新鮮に適用された化合物であることを表す。すなわち、Ｅ（ｆ）は、ＥＡＣＡがパッチの作られた後非常に早く（約３時間未満）にパッチに適用されることを表す。１）漏出：スポンジ圧力がパッチから取り除かれたとき、Ｇパッチには実際上漏れがなかった。これは、ＣＴＥ（ｆ）Ｒパッチについても真であったが、ＣＴＲパッチは多くの出血を示した。その後間もなく、結果は同様であることが記録された。２）はぎ取り／接着：これらのパッチは全て食塩水含浸スポンジに付着しており、スポンジ圧力の除去は傷からのそれらの除去を防止するよう注意深く行われた。こうして、すべてのパッチにおいて接着はその時点において最小であった。パッチＧは、幾らかの接着を示したが、ＣＴＲ及びＣＴＥ（ｆ）Ｒは幾らかの血餅を形成したものの良好な接着を示し、ＣＴＥ（ｆ）Ｒが最良であった。圧力を解除して約６分後、ゼラチンフォームは、非常に良好な接着と乏しい血餅形成とを示した。他のパッチの何れも良好な接着の質を示さず、一方、ＣＴＲは幾らかの血餅を、そしてＣＴＥ（ｆ）Ｒは大きな、卓越した血餅を有した。第II部：より多くの傷が脾臓に加えられ、そして全ての結果が比較された。適用されたパッチは、ＣＴＥ（ｆ）及びＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）であった。１）漏出：ＣＴＥもＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）パッチの何れも、スポンジ圧の除去の際に漏出を示さなかった。５分後、静脈が閉塞され、そして血管内圧は上昇させられ、両方の部分に作られた傷が評価された。スポンジが第Ｉ部において解除された後の圧力上昇試験のための時間は、27分であり、そして第II部においては僅か５分であった。ゼラチンフォームのみのパッチ（Ｇ）は全く漏出がなかった。ＣＴＲ、^**ＣＴＥ（ｆ）Ｒもそうであった。これら２つのパッチのゼラチンフォーム又はコラーゲンマトリックスを用いたＴ及びＥＡＣＡとの比較において、ゼラチンフォームパッチ、ＧＴ（ｆ）Ｅ（Ｆ）は、コラーゲンに基づくパッチ、ＣＴＥに比して少ない漏出を示した。事実、ＣＴＥパッチは血管圧が上昇したとき一層多く漏出した。２）はぎ取り／接着：スポンジ圧を解除後２分において、そしてＣＴＥ（ｆ）、コラーゲン＋Ｔ＋ＥＡＣＡ及びＧＴ（ｆ）Ｅ（Ｆ）を比較したとき、同様に処理されたゼラチンフォームに基づくパッチが、傷に対してもそして周囲組織に対しても非常に良好な接着を示した。コラーゲンベースを有するＣＴＥパッチは、殆ど又は全く接着しなかった。スポンジ圧の解除の 10分後（第II部のパッチＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）及びＣＴＥ（ｆ））及び血管内圧が依然上昇した状態において、第Ｉ部及び第IIからの全てのパッチを一緒に評価した。第１部からのパッチ（ＣＴＲ、Ｇ、及びＣＴＥ（ｆ）Ｒ））についての最初のスポンジ圧の解除後の時間間隔は約32分であった。結果は次の通りであった：パッチＣＴＲ：接着なし、良好な血餅形成、及び漏出殆どなし。パッチＧ：周囲組織への強い接着、傷への接着なし、多くの漏出。パッチＣＴＥ（ｆ）Ｒ：接着なし、良好な血餅形成、漏出殆どなし。パッチＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）：傷への良好な接着、良好な血餅形成、漏出殆どなし。パッチＣＴＥ（ｆ）：接着なし、良好な血餅形成、漏出殆どなし。３）脾臓の傷の更なる評価を、最初のスポンジ圧解除の後58分において行った（第Ｉ部）。第II部は、最初の圧解除の後−36分。この時にパッチは「除去」された。この評価の結果：パッチＴＲ：中等度の血餅形成、もしあったとしても殆どない漏出。パッチＧ：漏出、しかしゼラチンフォームの残りは傷に付着。パッチＣＴＥ（ｆ）Ｒ：卓越した血餅、漏出なし。パッチＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）：良好な血餅形成、もしあったとしても殆ど無い漏出。パッチＣＴＥ（ｆ）：良好な血餅形成、実際上乾燥。４）これら脾臓の傷の最終的評価を、37分後に行った。パッチＣＴＲ：（乾燥外科用スポンジを傷上に置いて）しみ試験に対して乾燥。血餅が形成され、傷内へのコラーゲン導入なし。パッチＧ：しみ試験に対して乾燥。傷内へゼラチンフォーム導入。パッチＣＴＥ（ｆ）Ｒ：しみ試験のあとスポンジ上に血液要素全くなし、血餅は卓越、傷を充填して周囲の正常組織へ延長。パッチＧＴ（ｆ）Ｅ（ｆ）：スポンジ上に血清の染み。しかし良好な血餅及びゼラチンスポンジが傷内に導入。パッチＣＴＥ（ｆ）：しみ試験に対して乾燥。ＣＴＥ（ｆ）Ｒと同様。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．傷接触面を有する生分解性のマトリックスであって、吸収性ゼラチンスポンジ、アルギン酸カルシウム、アルギン酸カルシウム／ナトリウム、コラーゲン及び酸化された再生セルロースよりなる群より選ばれるものでありこれに線溶を阻害するのに有効な量のε−アミノカプロン酸を含む止血剤が適用してあるものであるマトリックスである構造要素を含む止血パッチ。２．該マトリックスが吸収性ゼラチンスポンジである、請求項１の止血パッチ。３．該吸収性ゼラチンスポンジがゼラチンフォームである、請求項２の止血パッチ。４．該ゼラチンフォームがその元の厚みの少なくとも約半分まで圧縮されているものである、請求項３の止血パッチ。５．該マトリックスがコラーゲンである、請求項１の止血パッチ。６．該マトリックスがアルギン酸カルシウムである、請求項１の止血パッチ。７．該マトリックスの傷接触面にε−アミノカプロン酸が10〜100 ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項１の止血パッチ。８．該マトリックスの傷接触面にε−アミノカプロン酸が10〜100 ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項４の止血パッチ。９．該マトリックスが加速された止血を促進するのに有効な量のトロンビンを更に含むものである、請求項１の止血パッチ。１０．該トロンビンがウシトロンビンである、請求項９の止血パッチ。１１．傷接触面にトロンビンが１〜1000 ＩＵ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項９の止血パッチ。１２．傷接触面にトロンビンが２〜10 ＩＵ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項１１の止血パッチ。１３．止血を促進するのに有効な量のカルシウムイオンを該マトリックスが更に含むものである、請求項９の止血パッチ。１４．傷接触面に25〜150 μｇ／ｃｍ² の量の塩化カルシウムが存在するものである請求項９の止血パッチ。１５．塩化カルシウムの量が50〜100 μｇ／ｃｍ² である、請求項１４の止血パッチ。１６．止血を刺激するのに有効な量のフィブリノーゲンを該パッチが更に含むものである、請求項１３の止血パッチ。１７．該フィブリノーゲンがウシフィブリノーゲンである、請求項１６の止血パッチ。１８．該フィブリノーゲンが傷接触面に２〜10ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項１７の止血パッチ。１９．止血を促進するのに有効な量のＲＧＤペプチドを更に含むものである、請求項１３の止血パッチ。２０．ＲＧＤが傷接触面に10〜1000ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項１９の止血パッチ。２１．該ＲＧＤの量が50〜150 ｍｇ／ｃｍ² である、請求項２０の止血パッチ。２２．該ＲＧＤペプチドがセリンを更に含むものである、請求項１９の止血パッチ。２３．パッチの局所環境中に存在するヘパリンを中和するのに有効な量の硫酸プロタミンを更に含むものである、請求項１３の止血パッチ。２４．硫酸プロタミンが傷接触面に１〜15ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項１９の止血パッチ。２５．硫酸プロタミンが２〜５ｍｇ／ｃｍ² の量で存在するものである、請求項２４の止血パッチ。２６．２〜10ｍｍの厚みを有する、請求項１の止血パッチ。２７．出血している傷において止血を行うための方法であって、出血している傷に請求項１の止血パッチの傷接触面を適用し、そして該止血パッチと該傷との間の境界面において凝固が起こることを許容するのにそして出血が実質的に止められるのに十分な時間該パッチの該傷との接触を維持することを含む方法。２８．該時間が３乃至20分である、請求項２７の方法。２９．該時間が３乃至５分である、請求項２８の方法。３０．該パッチを傷に適用する前に滅菌食塩溶液で該パッチを湿らせるステップを更に含む、請求項２７の方法。３１．請求項１３のパッチを含んだ滅菌パッケージを含むキット。３２．滅菌された外科用器具を更に含む、請求項３１のキット。３３．少なくとも１つの包帯を更に含む、請求項３２のキット。３４．１つ又はより多くの止血剤を含有する止血パッチを傷に適用することによって止血を行うための方法における、該パッチが該パッチの適用部位のｐＨを７乃至９のｐＨへと高める能力のある組成物を含んでおりそれによって該部位におけるトロンビンの活性化が促進されるものである改良。３５．該組成物がε−アミノカプロン酸である、請求項３４の方法。３６．該組成物が該ｐＨを７〜９に維持するための緩衝剤を含むものである、請求項３４の方法。３７．止血パッチであって、（ａ）30〜50ｍＭの塩化カルシウム中に溶解させたウシトロンビンの溶液を圧縮されたゼラチンフォームの生分解性のマトリックスである構造要素の傷接触面に適用するステップと、（ｂ）該傷接触面に１〜100 ＩＵ／ｃｍ² の量のε−アミノカプロン酸を適用するステップと、（ｃ）30〜50ｍＭの塩化カルシウム中に溶解させたウシトロンビンの溶液を、該表面に全量１〜1000 ＩＵ／ｃｍ² のウシトロンビンが存在するように該面をシールするために適用するステップと、そして（ｄ）該得られたパッチを乾燥させるステップとを含む方法によって作られる止血パッチ。３８．生分解性であり且つ吸収性である平たく、柔軟なマトリックスであって、圧縮しないときの厚み約４〜10ｍｍ及びある長さを有し、該マトリックスの長手に沿って単一の傷接触面に10〜100 ｍｇ／ｃｍ² の量のε−アミノカプロン酸が適用されており、そして該表面にカルシウムイオン源、ＲＧＤペプチド、ＲＧＤＳペプチド、硫酸プロタミン及び緩衝剤よりなる群より選ばれる１つ又はより多くの添加剤か適用されていてよいマトリックスを含む止血パッチ。３９．該表面に適用された約１〜1000 ＩＵ／ｃｍのトロンビンを更に含む、請求項３８のパッチ。４０．患者の傷上に適用するための止血包帯であって、請求項３８のパッチに固定された裏打ち部材と、そして該裏打ち部材から該パッチを超えて延びる少なくとも１つのフラップであって該患者に該包帯を接着するための医療上許容し得る接着剤を適用してあるものであるフラップとを含むものである、包帯。