JPH0925288A

JPH0925288A - 水溶性ケルセチン配糖体含有物およびその製造方法

Info

Publication number: JPH0925288A
Application number: JP17349596A
Authority: JP
Inventors: Sumihisa Iida; 田純久飯; Takashi Yumoto; 本隆湯; Yukinobu Gunji; 司幸信郡; Ikuo Takaya; 屋幾夫高
Original assignee: Toyo Sugar Refining Co Ltd
Current assignee: Toyo Sugar Refining Co Ltd
Priority date: 1996-07-03
Filing date: 1996-07-03
Publication date: 1997-01-28
Anticipated expiration: 2016-04-09
Also published as: JP3155466B2

Abstract

(57)【要約】【解決手段】イソクエルシトリンとモノグルコシルル
チンとを含有する水溶性ケルセチン配糖体含有物。モノ
グルコシルルチンとルチンとの混合物（Ｂ）にα-1,6-
ラムノシダーゼを作用させて、ルチンをイソクエルシト
リンに変化させる、水溶性ケルセチン配糖体含有物の製
造方法。α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合物
（Ａ）に、グルコアミラーゼとα-1,6-ラムノシダーゼ
を同時または別々に作用させ、α-グルコシル化ルチン
をモノグルコシルルチンに変化させるとともに、ルチン
をイソクエルシトリンに変化させる水溶性ケルセチン配
糖体含有物の製造方法。【効果】この水溶性ケルセチン配糖体含有物にβ-グ
ルコシダーゼを作用させれば、モノグルコシルルチンを
効率的に分取できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の技術分野】本発明は、水溶性ケルセチン配糖体
含有物およびその製造方法に関する。さらに詳しくは、
α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合物、あるいは
モノグルコシルルチンとルチンとの混合物に特定の酵素
を作用させて得られる水溶性ケルセチン配糖体含有物お
よびその製造方法に関する。

【０００２】水溶性ケルセチン配糖体含有物は、α- グ
ルコシル化ルチンとルチンとの混合物あるいはモノグル
コシルルチンとルチンとの混合物からモノグルコシルル
チンを分離する際に得られるものである。

【０００３】

【発明の技術的背景ならびにその問題点】ルチンはえん
じゅのつぼみ、ソバ等に含まれ、ビタミンＣとともに脆
弱化した血管を正常に戻し、出血を防止する作用を有
し、また消炎・鎮痛作用を有するなどその用途は広い。
しかしながら、ルチンは水に難溶であるため、その用途
は限定されている。そこでルチンに糖を転移（付加）さ
せたα-グルコシル化ルチンが開発（特開平3-27293号公
報）され、商品名「α-Ｇルチン」として市販されてい
る。この「α-Ｇルチン」は転移（付加）したグルコー
ス単位数の異なるα-グルコシル化ルチンとルチンとの
混合物であり（「食品工業」１９９０年５月３０日
（刊）参照）、α-グルコシル化ルチン自体は、ルチン
と同様の薬理・生理作用を示し、しかもルチンに比べて
約５０００倍と著しく水溶性に優れている。さらに製品
中のα-グルコシル化ルチンの純度を著しく高めること
ができれば、例えば医薬品、化粧品など、「αＧルチ
ン」の用途は一段と拡大され得るものと期待される。

【０００４】「αＧルチン」などのような、α-グルコ
シル化ルチンとルチンとの含有物から、α-グルコシル
化ルチンの内の１種であるモノグルコシルルチンを分離
する方法としては、例えば、クロマトグラフィーを用い
る方法、吸着樹脂及び酵素反応を用いる方法等が知られ
ている。

【０００５】クロマトグラフィーによる分離方法（例；
１９８９年農芸化学会講演要旨集２８７ページ参照）に
てα-グルコシル化ルチンとルチンとの混合物からα-グ
ルコシル化ルチンを分離すると、非常に純度の高いα-
グルコシル化ルチン（モノグルコシルルチン）が得られ
る。しかしながら、α-グルコシル化ルチンの内の１種
であるモノグルコシルルチンとルチンとは非常に性質が
似ているため、この方法では、効率的にα-グルコシル
化ルチンとルチンとを分離できないという問題点があっ
た。

【０００６】また、吸着樹脂を用いる方法では、まずは
じめに「αＧルチン」溶液を吸着樹脂中に通して、「α
Ｇルチン」中の、より疎水性の低い、糖単位の沢山つい
たα-グルコシル化ルチンを吸着樹脂からリークさせ
る。次いでこの吸着樹脂からリークしたα-グルコシル
化ルチンをグルコアミラーゼで分解するとモノグルコシ
ルルチンが得られる。あるいはまたあらかじめ吸着樹脂
に「αＧルチン」を吸着させておき、樹脂への付着力の
弱い糖単位の沢山付いたα-グルコシル化ルチンを例え
ば濃度の低いアルコール等で脱着し、必要により脱アル
コールしてからグルコアミラーゼで分解してもモノグル
コシルルチンが得られる。しかしながらこれらの方法で
はルチンとα-グルコシル化ルチンの吸着樹脂への付着
力の差により効率が決ってくるが、現実にはルチンとα
-グルコシル化ルチンの吸着樹脂への付着力の差がそれ
程大きくないため、この方法では「αＧルチン」からル
チンの含まれないα-グルコシル化ルチンさらにはモノ
グルコシルルチンを製造することはきわめて効率が悪
い。

【０００７】ところで、本発明者らは、このようなモノ
グルコシルルチンの製造過程で得られる、イソクエルシ
トリンとモノグルコシルルチンとを含有する水溶性ケル
セチン配糖体含有物も有用であることも見出していた。

【０００８】

【発明の目的】本発明は、上記のような従来技術に伴う
問題点を解決しようとするものであって、α-グルコシ
ル化ルチンとルチンとの混合物あるいはモノグルコシル
ルチンとルチンとの混合物からモノグルコシルルチンを
効率的に分離する過程で生成する水溶性ケルセチン配糖
体含有物、およびその製造方法を提供することを目的と
している。

【０００９】

【発明の概要】本発明に係る水溶性ケルセチン配糖体含
有物は、このようにイソクエルシトリンとモノグルコシ
ルルチンとを含有することを特徴としている。

【００１０】本発明に係る水溶性ケルセチン配糖体含有
物の第１の製造方法は、モノグルコシルルチンとルチン
との混合物（Ｂ）にα-1,6-ラムノシダーゼを作用させ
て、ルチンをイソクエルシトリンに変化させることを特
徴としている。

【００１１】本発明に係る水溶性ケルセチン配糖体含有
物の第２の製造方法は、α-グルコシル化ルチンとルチ
ンとの混合物（Ａ）に、グルコアミラーゼとα-1,6-ラ
ムノシダーゼを同時または別々に作用させ、α-グルコ
シル化ルチンをモノグルコシルルチンに変化させるとと
もに、ルチンをイソクエルシトリンに変化させることを
特徴としている。

【００１２】本発明の水溶性ケルセチン配糖体含有物の
製造方法によれば、α-グルコシル化ルチンとルチンと
の混合物あるいはモノグルコシルルチンとルチンとの混
合物から水溶性ケルセチン配糖体含有物を得ることがで
きる。

【００１３】

【発明の具体的説明】以下、本発明に係る水溶性ケルセ
チン配糖体含有物およびその製造方法について具体的に
説明する。

【００１４】本発明に係る水溶性ケルセチン配糖体含有
物は、上記のようにイソクエルシトリンとモノグルコシ
ルルチンとを含有している。このような水溶性ケルセチ
ン配糖体含有物は、以下に詳述するように、モノグルコ
シルルチンとルチンとの混合物（Ｂ）に特定の酵素を作
用させて、モノグルコシルルチンを製造する過程で得ら
れる。すなわち、この混合物（Ｂ）にα-1,6-ラムノシ
ダーゼを作用させて、ルチンをイソクエルシトリンに変
化させることにより得られる、モノグルコシルルチンと
イソクエルシトリンとの混合物［（Ｃ）：水溶性ケルセ
チン配糖体含有物と言う。］である。

【００１５】また、この水溶性ケルセチン配糖体含有物
は、以下に詳述するように、α-グルコシル化ルチンと
ルチンとの混合物（Ａ）に、特定の酵素２種を作用させ
て、モノグルコシルルチンを分離する過程で得られる。
すなわち、この混合物（Ａ）に、グルコアミラーゼとα
-1,6-ラムノシダーゼを同時または別々に作用させ、α-
グルコシル化ルチンをモノグルコシルルチンに変化させ
るとともに、ルチンをイソクエルシトリンに変化させる
ことにより得られる水溶性ケルセチン配糖体含有物であ
る。

【００１６】本発明では、このような水溶性ケルセチン
配糖体含有物から、後述するような方法でモノグルコシ
ルルチンを分離してもよい。以下、上記水溶性ケルセチ
ン配糖体含有物およびその製造方法について、モノグル
コシルルチンの分離方法についての説明の中で下記の表
１を参照しつつ具体的に説明する。なお、表中、Ｒはル
チノースを、またＧはグルコースをそれぞれ表わす。

【００１７】

【表１】

【００１８】モノグルコシルルチンの第２の分離方法で
は、原料としてα-グルコシル化ルチンとルチンとの混
合物（Ａ）が用いられ、この混合物（Ａ）は、通常、
「αＧルチン」（東洋精糖（株）製）の商品名で市販さ
れている。

【００１９】このα-グルコシル化ルチンは下記式
（ロ）で表わされ、

【００２０】

【化１】

【００２１】（但し、式（ロ）中、Ｇはグルコース残
基、Ｒはラムノース残基、ｎは１〜数十の整数を表わ
す。）、α-位のグルコース残基数（ｎ）が１〜数十の
範囲、平均ではｎが４〜５程度のα-グルコシル化ルチ
ンの混合物である。このα-グルコシル化ルチンには、
α-位のグルコース残基数（ｎ）が１のモノグルコシル
ルチンなどが含まれる。

【００２２】このα-グルコシル化ルチンは水、アルコ
ール等に対する溶解度が高く、水１００ｇ当り５０ｇ以
上溶解し、また濃度５０％のアルコール１００ｇ当り４
０ｇ以上溶解する。

【００２３】α-グルコシル化ルチンは、例えば下記の
ようにして製造される。すなわち、下記式（イ）で

【００２４】

【化２】

【００２５】で表わされる、水に極めて難溶（溶解度：
水１００ｇ当り０．０１ｇ程度）なルチンに、糖供与体
としての澱粉あるいはその部分加水分解物（例：デキス
トリン、マルトース）を加えてなる組成物に、アミラー
ゼ、グリコシダーゼ、トランスグリコシダーゼなどのグ
ルコース残基転移酵素を作用させて澱粉あるいはその部
分分解物からルチンに糖（グルコース）を転移（付加）
させることにより、α-グルコシル化ルチンは得られ
る。

【００２６】このようなα-グルコシル化ルチンの製造
方法としては、従来より公知の種々の方法を採用するこ
とができる。具体的には、例えば特公昭５４ー３２０７
３号公報あるいは特公昭５８ー５４７９９号公報記載の
方法を採用することができる。

【００２７】なお、このようにして得られた反応物に
は、通常、α-グルコシル化ルチンと共に、未反応のル
チンあるいはルチンの分解物であるケルセチン等が少量
含まれている。なお、この明細書中においては、その主
旨に反しない限り、α-グルコシル化ルチンというとき
は、モノグルコシルルチンを含む。

【００２８】本発明では、少なくともこのようなα-グ
ルコシル化ルチンとルチンとが含まれた混合物から上記
水溶性ケルセチン配糖体含有物を酵素処理して得てい
る。以下、まずはじめに本発明の主な反応工程について
詳細に説明するが、第１工程と第２工程のように隣合う
工程において、用いられる各酵素が共通の作用を有する
ものである場合には、先の工程で用いられる酵素にて、
それに続く後の工程の反応をも、通常、進行させること
ができる。

【００２９】［第１工程］本発明では、α-グルコシル
化ルチンとルチンとの混合物（Ａ）に、グルコアミラー
ゼを作用させて、α-グルコシル化ルチンをモノグルコ
シルルチンに変える。こうした酵素としては長瀬産業
（株）のグルコチーム、天野製薬（株）のグルクザイム
NL、（株）ヤクルトのユニアーゼ30等のグルコアミラー
ゼの他、田辺製薬のナリンギナーゼ、天野製薬（株）の
セルラーゼA「アマノ」３などのような酵素、すなわち
α-1,4-グルコシル結合を、グルコース単位で切断する
グルコアミラーゼ活性を有する酵素であれば自由に用い
ることができる。さらにα-アミラーゼ、β-アミラーゼ
等のように、α-1,4-グルコシル結合をグルコース単位
以外でも切断する酵素を用いることもできる。しかしこ
れらの酵素のうちではα-グルコシル化ルチンをモノグ
ルコシルルチンに変える性質に優れたグルコアミラーゼ
が好ましく用いられる。

【００３０】例えば、グルコアミラーゼの一種であるグ
ルコチームは、α-グルコシル化ルチンとルチンとの混
合物（Ａ）１００ｇ当り、通常、０.０１〜１０ｇの量
で、好ましくは０.２〜１ｇの量で、換言すれば、混合
物（Ａ）中のα-グルコシル化ルチン含有量１００ｇ当
り、通常、０.０１〜１１ｇの量で、好ましくは０.２〜
１ｇの量で用いられる。このような量でグルコチームを
用いると、効率的（変換率９９％程度）にα-グルコシ
ル化ルチンをモノグルコシルルチンに変換することがで
きる。

【００３１】このようにα-グルコシル化ルチンとルチ
ンと混合物（Ａ）にグルコアミラーゼなどの酵素を作用
させる際には、用いられる酵素の種類、活性などの違い
により一概に決定されないが、例えば、グルコチームで
は、混合物（Ａ）含有溶液のｐＨを無機酸、有機酸等を
用いて３〜６程度に調節することが好ましい。また、こ
のモノグルコシル化反応の際には、３５〜６５℃程度の
温度で、１〜６０時間程度保持することが好ましい。

【００３２】このように、混合物（Ａ）中のα-グルコ
シル化ルチンに酵素を作用させて得られたモノグルコシ
ルルチンとルチンとの混合物（Ｂ）に、第２工程では、
α-1,6-ラムノシダーゼを作用させて、混合物（Ｂ）中
のルチンをイソクエルシトリンに変える。

【００３３】［第２工程］本発明では、モノグルコシル
ルチンとルチンとの混合物（Ｂ）に、α-1,6-ラムノシ
ダーゼを作用させて、混合物（Ｂ）中のルチンからラム
ノース単位が取れたイソクエルシトリンに変える。この
混合物（Ｂ）は、上記第１工程で原料（Ａ）を用いて得
られるものに限らず、公知の方法で得られた原料（Ｂ）
を用いることもできる。

【００３４】第２工程で用いられる酵素は、α-1,6-ラ
ムノシダーゼ活性を有する酵素であれば、いずれもルチ
ンをイソクエルシトリンに変えることができる。このよ
うな酵素として田辺製薬（株）のヘスペリジナーゼ２
号、ナリンギナーゼ、天野製薬（株）のセルラーゼA
「アマノ」３などを挙げることができる。

【００３５】例えば、田辺製薬（株）のヘスペリジナー
ゼ２号は、モノグルコシルルチンとルチンとの混合物
（Ｂ）１００ｇ当り、通常、０.０１〜１０ｇの量で、
好ましくは０.３〜２ｇの量で、換言すれば、混合物
（Ｂ）中のルチン含有量１００ｇ当り、通常、０.０５
〜５０ｇの量で、好ましくは１.５〜１０ｇの量で用い
られる。このような量でヘスペリジナーゼを用いると、
効率的（変換効率９９％程度）にルチンをイソクエルシ
トリンに変換することができる。

【００３６】なお、後述するように、原料（Ａ）に、第
１工程と第２工程の酵素を加えこれらの反応を実質的に
同時に進行させる場合において、両工程に共通の酵素
（例：ナリンギナーゼあるいはセルラーゼＡ「アマ
ノ」）を用いる場合には、その量を適宜加減し設定する
ことができる。

【００３７】モノグルコシルルチンとルチンと混合物
（Ｂ）にα-1,6-ラムノシダーゼなどの酵素を作用させ
る際には、用いられる酵素の種類、活性などの違いによ
り一概に決定されないが、通常、例えば、ヘスペリジナ
ーゼでは、混合物（Ｂ）含有溶液のｐＨ、温度、反応時
間を第１工程のモノグルコシル化反応の場合と同様に保
持することが好ましい。

【００３８】本発明では、このような第２工程により、
モノグルコシルルチンとイソクエルシトリンとの混合物
（Ｃ）である水溶性ケルセチン配糖体含有物が得られ
る。本発明では、必要により、このような第２工程で得
られた水溶性ケルセチン配糖体含有物からモノグルコシ
ルルチンをさらに分取（分離）してもよい（第３工
程）。

【００３９】［第３工程］すなわちこの第３工程では、
上記の第２工程で得られた、モノグルコシルルチンとイ
ソクエルシトリンとの混合物（Ｃ）からモノグルコシル
ルチンを、分取（分離）する。

【００４０】このように、第２工程で得られた混合物
（Ｃ）からモノグルコシルルチンを分取（分離）するに
は、例えば、下記［ｉ］〜［ｉｖ］の方法を挙げること
ができる。

【００４１】［ｉ］すなわち、まずはじめに、第２工程
で得られた、モノグルコシルルチンとイソクエルシトリ
ンとの混合物（Ｃ）に、βーグルコシダーゼを作用させ
て、混合物（Ｃ）中のイソクエルシトリンをケルセチン
に変える。

【００４２】次いで、このようにして得られたモノグル
コシルルチンとケルセチンとの混合物（Ｄ）あるいはこ
れらが含まれた水溶液（Ｄ）では、ケルセチンは沈澱す
るため、この液（Ｄ）を濾過することにより容易に両者
を固液分離して、液相としてモノグルコシルルチンを得
ることができる。

【００４３】これらの酵素としてはβ-グルコシダーゼ
活性を有する酵素であればもいずれも用いることができ
る。そうした酵素としては天野製薬（株）のセルラーゼ
A「アマノ」等を挙げることができる。

【００４４】例えば、セルラーゼA「アマノ」は、モノ
グルコシルルチンとイソクエルシトリンとの混合物
（Ｃ）１００ｇ当り、通常、０.０１〜２０ｇの量で、
好ましくは１〜１２ｇの量で、換言すれば、混合物
（Ｃ）中のイソクエルシトリン含有量１００ｇ当り、通
常、０.０５〜１２０ｇの量で、好ましくは３０〜７０
ｇの量で用いられる。このような量でβーグルコシダー
ゼを用いると、効率的（変換効率９０％程度）にイソク
エルシトリンをケルセチンに変換することができる。

【００４５】このようにモノグルコシルルチンとイソク
エルシトリンとの混合物（Ｃ）にβーグルコシダーゼを
作用させる際には、用いられる酵素の種類、活性などの
違いにより一概に決定されないが、通常、例えば、セル
ラーゼA「アマノ」３では、混合物（Ｃ）含有溶液のｐ
Ｈを、無機酸、有機酸等を用いて３〜６程度に調節する
ことが好ましい。また、この反応の際には、３５〜６５
℃程度の温度で、１〜６０時間程度保持することが好ま
しい。

【００４６】このようにして得られたモノグルコシルル
チンとケルセチンとの混合物（Ｄ）あるいはこれらが含
まれた水溶液（Ｄ）では、ケルセチンは沈澱するから、
濾過することにより容易にモノグルコシルルチンとケル
セチンとの両者を分離して、モノグルコシルルチンを得
ることができる。

【００４７】［ｉｉ］また、本発明では、第２工程で得
られた、モノグルコシルルチンとイソクエルシトリンと
の混合物（Ｃ）である水溶性ケルセチン配糖体含有物、
あるいはこれらが含まれた水溶液（Ｃ）から、吸着樹脂
を用いることにより、モノグルコシルルチンを分取する
こともできる。

【００４８】吸着樹脂としては、例えば、中間極性樹脂
ＸＡＤ７、非極性樹脂ＨＰ−２０、ＨＰ−５０、ＸＡＤ
−２等が用いられる。［ｉｉｉ］また、本発明では、第２工程で得られた、モ
ノグルコシルルチンとイソクエルシトリンとの混合物
（Ｃ）を、一旦、アルコールに溶解させ、結晶化させた
後、濾過にて結晶を分取することによりモノグルコシル
ルチンを得ることもできる。アルコールとしては、メタ
ノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなど炭
素数が１〜４程度の低級アルコールが挙げられる。

【００４９】なお、上記アルコール中におけるモノグル
コシルルチンの結晶化に先立ち、混合物（Ｃ）あるいは
これらが含まれた水溶液（Ｃ）から、上記と同様の吸着
樹脂を用いることにより、混合物（Ｃ）に含まれた糖
類、タンパク質等を除去してもよい。

【００５０】［ｉｖ］また、本発明では、第２工程で得
られた、モノグルコシルルチンとイソクエルシトリンと
の混合物（Ｃ）としての水溶性ケルセチン配糖体含有
物、あるいはこれらが含まれた水溶液（Ｃ）から、クロ
マト分離を用いることにより、モノグルコシルルチンを
分取することもできる。

【００５１】本発明では、このような［ｉ］〜［ｉｖ］
の方法を適宜組み合わせてもよい。本発明では、このよ
うな［ｉ］〜［ｉｖ］の方法の内では、［iii］が好ま
しい。これはモノグルコシルルチンとイソクエルシトリ
ンとのアルコールに対する溶解度の違いを利用するもの
で、効率良く高純度のモノグルコシルチンが得られる。
本発明では、原料として、例えば、東洋精糖（株）より
市販されているような、α-グルコシル化ルチンとルチ
ンとの混合物（Ａ）：「αＧルチン」を用いる場合に
は、上記、第１工程の反応の次に、第２工程の反応を行
い、得られたモノグルコシルルチンとイソクエルシトリ
ンとの混合物（Ｃ）から、モノグルコシルルチンを分離
すればよい。

【００５２】混合物（Ｃ）から、モノグルコシルルチン
を分離するには、例えば、第３工程の［ｉ］〜［ｉｖ］
の１または２以上の分離方法を組み合わせて採用するこ
とにより、目的とする高純度のモノグルコシルルチンを
効率的に得ることができる。

【００５３】また、本発明においては、例えば、原料
（Ａ）に、上記したような第１工程で用いられるグルコ
アミラーゼ等の酵素と、第２工程で用いられるα-1,6-
ラムノシダーゼ等の酵素と、必要に応じて、第３工程の
［ｉ］で用いられるβーグルコシダーゼ等の酵素とを一
緒に加え、これらの反応を実質上同時に進行させてもよ
く、あるいは第１〜第３工程の順序で加えて、その順序
で反応を進行させてもよく、さらには、用いられる酵素
に応じて第２工程の反応の後に第１工程の反応を進行さ
せ、ついで必要に応じて、第３工程の操作、例えば、反
応［ｉ］を進行させることもできる。

【００５４】また、本発明では、原料として、モノグル
コシルルチンとルチンとの混合物（Ｂ）を用いる場合に
は、上記、第２工程の反応を行い、次いで、得られたモ
ノグルコシルルチンとイソクエルシトリンとの混合物
（Ｃ）からモノグルコシルルチンを分離してもよい。

【００５５】このように、原料として、モノグルコシル
ルチンとルチンとの混合物（Ｂ）を用いる場合には、上
記第２工程の反応の次に、さらに必要により第３工程の
［ｉ］〜［ｉｖ］のいずれか１つの方法を採用し、ある
いはこれらの方法を適宜組み合わせて採用することによ
り、目的とする高純度のモノグルコシルルチンを効率的
に得ることができる。

【００５６】また、第２工程で用いられるα-1,6-ラム
ノシダーゼと、第３工程の反応［ｉ］で用いられるβー
グルコシダーゼとを同時に作用させて、ルチンをケルセ
チンに変える反応を進行させることもできる。

【００５７】なお、上記反応は還元剤の存在下に行うこ
とが好ましい。ここで使用される還元剤としてはα-グ
ルコシル化ルチンあるいは反応生成物を過度に還元しな
いような還元力を有すると共に溶存酸素や空気による酸
化を有効に防止し得る程度の還元力を有するものが好ま
しく、さらにモノグルコシルルチンの用途を考慮すると
生体に対する影響力の少ないものが好ましい。このよう
な還元剤の例としてはアスコルビン酸及びアスコルビン
酸塩を挙げることができ、一般にはアスコルビン酸が使
用される。その使用量はα-グルコシル化ルチン１００
ｇに対して０.１〜５ｇ程度の量である。このような量
のアスコルビン酸は製造工程で容易に除去される。

【００５８】上記のような分離方法で得られる、モノグ
ルコシルルチンは純度が高い。必要によりさらに再結晶
を繰り返し純度を高めることもできる。このような高純
度のモノグルコシルルチンは医薬品、化粧品、食品添加
物などの広範な用途に好ましく用いられる。

【００５９】また、モノグルコシルルチンは単位重量当
りのルチン単位量が大きいので、ルチンに代えてモノグ
ルコシルルチンを用いることにより、効率的にルチン自
体の有する各種特性、例えば、消炎・鎮痛作用、抗酸化
作用、紫外線吸収作用等を発揮させることができる。

【００６０】

【発明の効果】本発明によれば、α-グルコシルルチン
とルチンとの混合物あるいはモノグルコシルルチンとル
チンとの混合物から上記のような酵素処理にて水溶性ケ
ルセチン配糖体含有物を得ることができる。

【００６１】

【実施例】以下、本発明を実施例に基づきさらに具体的
に説明するが、本発明はかかる実施例に何等制限される
ものではない。

【００６２】

【実施例１】α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合
物（Ａ）１００ｇに水１０００mlを加え溶解した後、ア
スコルビン酸１ｇ、グルコチーム（長瀬産業（株）製）
１ｇを加えｐＨ４.５に調整し５５℃、２４時間反応さ
せた。この反応液（イ）にヘスペリジナーゼ２号（田辺
製薬（株）製）１ｇを加えｐＨ４.０に調整し５５℃、
２４時間反応させ、反応液（ロ）を得た。反応液（ロ）
は酸素を加熱失活させ濾過した後、濾液を中間極性樹脂
ＸＡＤ−７、１０００mlに通液し、水洗後、６０％エタ
ノール２０００ml、水１０００mlで脱着、押し出しを行
なった。両液を合わせ脱アルコール、濃縮、乾燥させ固
形物４７ｇ（純度６５％）を得た。この固形分に９９％
メタノール８０mlを加え６０℃で加熱溶解後、室温放置
し結晶を析出させた。析出した結晶は少量の９９％メタ
ノールで洗浄し、乾燥させ固形物２５ｇ（純度９３％）
を得た。

【００６３】図１、２に反応液（イ）、（ロ）の薄層ク
ロマトグラムを示す。展開はキーゼルゲル６０Ｆ₂₅₄薄
層板（メルク社製）にスポットし、n-ブタノール／水／
酢酸＝４／５／１で行なった。図１には対照として混合
物（Ａ）と標準モノグルコシルルチン（（株）林原生化
学研究所製）をスポットした。反応液（イ）はモノグル
コシルルチン以下にスポットが無いこと、またモノグル
コシルルチンのスポットの発色が強いことより、新たな
モノグルコシルルチン（Ｒｆ０.３６）の生成が認めら
れた（混合物（Ｂ））。図２では標準イソクエルシトリ
ン（フナコシ薬品（株）製）のスポットから反応液
（ロ）のイソクエルシトリン（Ｒｆ０.７４）が確認さ
れた（混合物（Ｃ））。

【００６４】

【実施例２】実施例１と同様の操作で得たモノグルコシ
ルルチンとルチンとの混合物（Ｂ）１００ｇ（純度６４
％）に９９％メタノール１５０mlを加え６０℃で加熱溶
解後、室温放置し結晶を析出させた。析出した結晶は少
量の９９％メタノールで洗浄し、乾燥させ固形分５７ｇ
（純度８４％）を得た。

【００６５】

【実施例３】α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合
物（Ａ）１００ｇに水１０００mlを加え溶解した後、ア
スコルビン酸ナトリウム２.５ｇ、グルコチーム（長瀬
産業（株）製）１ｇ、ナリンギナーゼ（田辺製薬（株）
製）０.５ｇを加えｐＨ４.０に調整し５５℃で２４時間
反応させた。反応液は酸素を加熱失活させ濾過した後、
濾液を非極性樹脂ＨＰ−２０、１０００mlに通液し、水
洗後６０％エタノール２０００ml、水１０００mlで脱
着、押し出しを行なった。両液を合わせ脱アルコール、
濃縮、乾燥させ固形物４２ｇ（純度６７％）を得た。こ
の固形分に９９％メタノール８０mlを加え６０℃で加熱
溶解後、室温放置し結晶を析出させた。析出した結晶は
少量の９９％メタノールで洗浄し乾燥させ固形物２３ｇ
（純度９３％）を得た。

【００６６】

【実施例４】α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合
物（Ａ）１００ｇに水１０００mlを加え溶解した後、ア
スコルビン酸１ｇ、グルコチーム（長瀬産業（株）製）
１ｇ、ヘスペリジナーゼ２号（田辺製薬（株）製）１
ｇ、セルラーゼA「アマノ」３（天野製薬（株）製）１
０ｇを加えｐＨ４.０に調整し５５℃で４８時間反応さ
せた。反応液は酸素を加熱失活させ濾過した後、濾液を
中間極性樹脂ＸＡＤ−７、１０００mlに通液し、水洗
後、６０％エタノール２０００ml、水１０００mlで脱
着、押し出しを行なった。両液を合わせ脱アルコール、
濃縮、乾燥させ固形物４０ｇ（純度８０％）を得た。こ
の固形分に９９％メタノール８０mlを加え６０℃で加熱
溶解後、室温放置し結晶を析出させた。析出した結晶は
少量の９９％メタノールで洗浄乾燥させ固形物２２ｇ
（純度９５％）を得た。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、反応液（イ）の薄層クロマトグラムを
示す。

【図２】図２は、反応液（ロ）の薄層クロマトグラムを
示す。

【符号の説明】

（１）・・・混合物（Ａ）（２）・・・標準モノグルコシルルチン（（株）林原生
化学研究所製）（３）・・・反応液（イ）（＝混合物（Ｂ））（４）・・・イソクエルシトリン（フナコシ薬品（株）
製）（５）・・・反応液（ロ）（＝混合物（Ｃ））

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者高屋幾夫千葉県市原市岩崎西１−６−41 東洋精糖株式会社千葉工場内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】イソクエルシトリンとモノグルコシルルチ
ンとを含有することを特徴とする水溶性ケルセチン配糖
体含有物。
【請求項２】モノグルコシルルチンとルチンとの混合物
（Ｂ）にα-1,6-ラムノシダーゼを作用させて、ルチン
をイソクエルシトリンに変化させることを特徴とする水
溶性ケルセチン配糖体含有物の製造方法。
【請求項３】α-グルコシル化ルチンとルチンとの混合
物（Ａ）に、グルコアミラーゼとα-1,6-ラムノシダー
ゼを同時または別々に作用させ、α-グルコシル化ルチ
ンをモノグルコシルルチンに変化させるとともに、ルチ
ンをイソクエルシトリンに変化させることを特徴とする
水溶性ケルセチン配糖体含有物の製造方法。