JPH01213293A - 水易溶性フラボノール配糖体の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明は、フラボノーμ配糖体すなわち、糖部分を結
合保持するフラボノールに係るものである。一般にフラ
ボノーｐの抗酸化性は糖部分が結合するケルセチンの分
子構造によるものとされている。この発明ではケルセチ
ンの分子構造には何ら変化を与えていないので、水晶性
にしても作用には何ら変化がない。従って、フラボノー
〃が使用されている食品業界、医薬業界で利用される。

〔従来の技術〕

フラボノール類例えばケルセチン３−０−モノグルコサ
イド、ルチン、ケルセチン、モリンその他は、一般に常
温の水に難溶である。従って、これらの有する色（相）
や抗酸化性などを有効に発揮させることが困難である。

その使用効率を向上させるためには、ケルセチンの分子
構造を変えることなしに水溶性にすることが必要である
が、水易溶性化は極めて困難であった。この発明は、こ
のような課題にたいする１つの解答であって、工業的に
有利に水易溶性化を達成したものである。

以下に、この発明の詳細な説明する。

〔発明の構成〕

この発明の出発物質はケルセチン３−０−モノグルコサ
イドである。ケルセチン３−０−モノグルコサイドを得
る方法としては、例えば、ルチンにナリンギナーゼを作
用させる方法がある。

使用するナリンギナーゼは、アスペルギルス・ニガーｔ
ベンシリウム属などの微生物によって生産されることが
知られておシ、通常は粗酵素で充分目的を達成でき、精
製品を使用する必要はない。

また市販されている酵素剤（例えば天野製薬株式会社製
、商品名ナリンギナーゼ°アマノ”）を使用する１こと
もヤきる。あるいは、ルチンを加えた培養液に、ナリン
ギナーゼを生産する菌を植菌し、醗酵法によシ反応を行
なうこともできる。

さらに、ナリンギナーゼ、またはナリンギナーゼ生産菌
を固定化してパッチ式で繰り返し使用することも、連続
式で反応に使用することもできる。

ナリンギナーゼの反応条件は、ルチンとナリンギナーゼ
との混合水系で、ナリンギナーゼが作用する条件であれ
ばよい。使用量はルチンの１重量部にたいし、ナリンギ
ナーゼ（酵素活性約１００単位）３重量部以下量でよく
、ことにこの範囲内において、１：１程度量が好適であ
る。この水系の温度は、約７０’Ｃ以下でよく、この範
囲内において工業的に有利なのは約６０〜２５°Ｃであ
る。

この糸のＩ）Ｈは、８以下とする。この範囲において、
ことに６〜４見当が有利である。系は、攪拌してもよい
。このようにすると、系は残存ナリンギｔ−ゼと生成し
ケルセチン３−０−モノグルコサイドおよびラムノース
との混合系となる。

得うれたケルセチン３．−０−モノグルコサイドに、で
ん粉質とジクロデキストリングルカットランスフェラー
ゼ（以下ＣＧＴ−ａｓｅ）を添加する。

この発明に使用するでん粉質としては、ＣＧＴ−ａｓｅ
の基質となり、そのグμコシ／Ｌ’残基の１分子以上が
ケル七チン３−０−モノグルコサイド分子に転移されう
るものであればよく、アミロース、アミロペクチン、で
ん粉だけでなく、例えば、でん粉液化物、でん粉糖化物
、シクロデキストリンなども用いることができる。

ＣＧＴ−ａｓｅは、バチルス・サーキュランス、バチル
ス・マセランス、バチルス・ステアロサーモフィルス、
バチルス・メガテリウス、バチルス・ポリミキサなどの
バチルス属、クレプシーラ・ニューモニアエなどのクレ
プシーラ属などの則菌によって生産されることが知られ
ており、いずれもこの発明に自由に使用することができ
、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は粗酵素
で目的を達成しうる。また、市販の酵素剤（例えば、天
野製薬株式会社製、商品名・コンチザイム）を使用する
こともできる。あるいはケルセチン３−〇−モノグルコ
サイドとでん粉質を添加した培養液に、ＣＧＴ−ａｓｅ
生産菌を植菌し、醗酵法により反応を行なうこともでき
る。

また、ＣＱ７−ａｓｅあるいはＣＧＴ−ａｓｅ生産菌を
固定化したものを使用して反応を進めることもできる。

でん粉質の添加量は、ケルセチン８−０−モノグルコサ
イドにたいする５００％以下量でよく、この範囲内にお
いて、ことに２００９６程度量が有利である。その１）
Ｈは、約１１以下ことに約９〜２が有利である。この際
、ケルセチン３−〇−モノグルコサイドの反応作用を良
好にするために、未反応ルチン、残存ナリンギナーゼ、
生成ラムノースを除去してもよいことは明らかである。

ＣＧＴ−ａｓｅの添加量は、その酵素活性が、約６００
単位の場合、添加したでん粉質の約１００％以下量でよ
い。ことにこの範囲内において、約６０〜１０％程度量
が有利である。

このようにして収得したものが、目的の水易溶性フラボ
ノーμ配糖体である。収得物は、未反応ケルセチン３−
０−モノグルコサイド約４０％量とケルセチン３−０−
モノグルコサイドのグルコース残基にさらにグルコース
が等七μ以上量結合したフラボノー〃配糖体混合物とで
あって水易溶性のものである。

上記の工程をその順序において、反応式によシ次に要約
して説明する。

〔この発明の作用及び効果〕

本発明によって得たフラボノール配糖体の個々及び混合
物はいずれも、ケルセチン３−０−モノグルコサイドに
グルコース残基が転移しており、親水性が増大するため
、極めて溶解度が高く、それらの有する色（相）及び、
抗酸化性などを水系の溶媒中で有効に発揮させることが
できる。以下に実験例を用いて詳しく説明する。

実験例 説明 ■本発明品（１） ＣＧＴ−ａｓｅの反応によって得られるフラボノール配
糖体混合物 ■本発明品（２） ＣＧ　Ｔｌ−＊　ａｓｔｅの反応によって得られるフラ
ボノール配糖体のうち特許請求の範囲１に記載の化合物
で、ｎ＝２のもの。

■表中の記号 ｐＨ７，０の水にルチン、本発明品（１）及び本発明品
（２）を加熱溶解後、４°Ｃで１週間放置したときの沈
澱の有無及びその量を示す。

一：沈澱なし。

＋：沈澱あり。（数が多いほど沈澱の量が多い） 実施例１ 水ＩＮ（温度５５°Ｃ）にルチン０．５％を分散し、こ
れにナリンギナーゼ（天野製薬株式会社製、商品名ナリ
ンギナーゼ１アマノ”）を１？添加した。

この糸のｐＨは７であった。これを５時間５０℃に保持
してのち、濃縮し、０．５１とした。冷却しタトころケ
ルセチン３−０−モノグルコサイドが沈６ｔした。ケル
セチン３−〇−モノグルコサイｌ’を取シ出し、０１２
１の水を加え、コーンスターチ８２を添加し、均質にし
、これにＣＧＴ−ａｓｅ（天野製薬株式会社製、商品名
コンチザイム）２Ｉ１１ｔを添加し温度４５°Ｃに１２
時間保持した（ｐＨ６）。

これを濃縮して２０？とした。

収得したものが、目的の水易溶性フラボノール配糖体で
あった。実施側光で得られたフラボノール配糖体の分析
結果は次の通シである。

薄層クロマトグラフィー（シリカゲル薄層板、酢酸エチ
ル−メチルエチルケトン−ギ酸−水＝１５：８：１：１
）を行い、Ｒｆ　＝　０．５のケルセチン３−Ｏ−モノ
グルコサイドのスポット以下の部分を薄層板からかき取
り、含水メタノールで抽出する。抽出液に塩酸を加え、
加熱処理してから、上記の条件の薄層クロマトグラフィ
ーを行えば単一スポットとなシ、Ｒｆ値は０．９附近で
あり、ケルセチンのＲｆ値と同一であった。

上記の塩酸処理後の抽出液の高速液体クロマトグライー
による分析でグルコースを検知した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ケルセチン３−０−モノグルコサイドにでん粉質を加え
   、これにシクロデキストリングルカノトランスフェラー
   ゼ（Ｅ、Ｃ、２、４、１、１９）を作用させケルセチン
   ３−０−モノグルコサイドにグルコース残基を等モル以
   上量転移させてなることを特徴とする式（１）に示す水
   易溶性フラボノール配糖体の製法。 式１ ▲数式、化学式、表等があります▼ ＧＬ：グルコース、ｎ≧１