JPH09124426A - 新規微生物菌株を用いたイネ苗の立枯性病害防除剤及び防除方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【解決手段】 シュードモナス・グラディオリ（Pseudo
monas gladioli) CAB-03又はCAB-04を有効成分とするイ
ネ苗の立枯性病害防除剤。該病害防除剤を、浸種時の種
籾の浸漬液に添加するイネ苗の立枯性病害防除方法、又
は該病害防除剤を含む懸濁液に浸種後の種籾を播種直前
に浸漬するイネ苗の立枯性病害防除方法。イネ苗の立枯
性病害防除能を有するシュードモナス・グラディオリ
（Pseudomonas gladioli) CAB-03又はCAB-04。 【効果】 本イネ立枯病防除剤はイネもみ枯細菌病菌に
よる苗腐敗症、イネ苗立枯細菌病、イネばか苗病の３重
要病害に対して強い発病抑制作用があり、現在これら病
害に対して使用される農薬と同等以上の防除効果が期待
でき、種籾浸種時の１回の処理で上記３病害の同時防除
が可能で数種類の薬剤の混用の必要がなく、農薬による
環境汚染の心配がなくなる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、イネ苗の立枯性病
害に対する防除能を有する新規微生物菌株、及びそれを
用いたイネ苗の立枯性病害防除剤及び病害防除方法に関
する。

【０００２】

【従来の技術】イネ苗の立枯性病害である、イネもみ枯
細菌病菌による苗腐敗症、イネ苗立枯細菌病、イネばか
苗病はいずれもイネの育苗時に発生する種子伝染性の病
害である。特に加温箱育苗時において、前２者は幼苗の
腐敗と萎凋枯死を、ばか苗病は幼苗腐敗や徒長苗を生
じ、これらの病害が発生した苗は移植不能となり廃棄す
る他ない。幼苗腐敗等の被害が発生しない場合でも、保
菌した苗を本田に移植すれば、もみ枯細菌病については
もみ枯症発生の原因となり、ばか苗病については不稔や
枯死株発生の原因となる。苗立枯細菌病の本田での被害
は解明されていないが、いずれにしてもこのようなイネ
から収穫した種子は保菌しているため、次年度の病害発
生の伝染源となる。これらの３病害はいずれも例年全国
各地で発生し、多くの被害をもたらしており、水稲栽培
上の重要病害として位置づけられている。しかしなが
ら、これらの病害に対して抵抗性のあるイネ品種は存在
しない。イネばか苗病では数種の有効な種子消毒薬剤が
実用に供せられているものの、薬剤耐性菌の問題があ
る。また、イネもみ枯細菌病とイネ苗立枯細菌病では未
だ安定して高い効果を示す薬剤が見出されていない。さ
らに近年、種子消毒剤の廃液が環境汚染源として、その
処理が問題となっている。そのため、これらの病害の防
除にあたっては、防除効果が高く、水質汚濁性の少ない
防除資材の開発が不可欠である。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、イネ
苗の立枯性病害であるイネもみ枯細菌病菌による苗腐敗
症、イネ苗立枯細菌病、イネばか苗病に対して優れた防
除効果を発揮し得、かつ環境の汚染もないイネ苗の立枯
性病害の防除する手段を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、上記イネ苗の
立枯性病害の防除に優れた効果を発揮しうるシュードモ
ナス属に属する新規な微生物菌株を見いだし、本発明を
完成した。

【０００５】即ち、本発明は、シュードモナス・グラデ
ィオリ（Pseudomonas gladioli) CAB-03又はシュードモ
ナス・グラディオリ（Pseudomonas gladioli) CAB-04を
有効成分として含有することを特徴とする、イネ苗の立
枯性病害防除剤である。本発明はまた、上記のイネ苗の
立枯性病害防除剤を、浸種時の種籾の浸漬液に添加する
ことを特徴とするイネ苗の立枯性病害防除方法、又は上
記のイネ苗の立枯性病害防除剤を含む懸濁液に、浸種後
の種籾を播種直前に浸漬することを特徴とするイネ苗の
立枯性病害防除方法である。更に、本発明は、イネ苗の
立枯性病害防除能を有する、シュードモナス・グラディ
オリ（Pseudomonas gladioli) CAB-03又はシュードモナ
ス・グラディオリ（Pseudomonas gladioli) CAB-04であ
る。以下、本発明を詳細に説明する。

【０００６】

【発明の実施の態様】本発明に用いる微生物は、シュー
ドモナス・グラディオリ（Pseudomonas gladioli) CAB-
03（以下、CAB-03菌株という）、シュードモナス・グラ
ディオリ（Pseudomonas gladioli) CAB-04（以下、CAB-
04菌株という）である。

【０００７】CAB-03菌株、及びCAB-04菌株は、いずれも
広島県福山市、中国農業試験場圃場内のイネから分離・
収集した約700菌株の細菌について、イネもみ枯細菌病
菌による苗腐敗症を指標とした生物検定を行い、発病抑
制力の強い細菌を選抜した結果得られたものである。

【０００８】CAB-03菌株、及びCAB-04菌株は、形態を光
学顕微鏡又は電子顕微鏡で観察した結果、いずれも細胞
の大きさは１〜４μmの桿菌で、細胞の多形性はなく、
数本以上の極鞭毛を有し、運動性を有するという特徴を
示した。また、グラム反応は陰性で、内生胞子を形成せ
ず、PHB顆粒を蓄積した。その他の細菌学的性質につい
ては、それぞれ次に示すとおりである。

【０００９】CAB-03菌株 １．培養的性質 CAB-03菌株の各種培地における生育状態は次の通りであ
る。観察は２８℃、３日培養後に行った． 肉汁寒天平板培養 集落の性状は、白色、偏平、縁辺鈍鋸歯状、表面粗で、
鈍光を有し、粘ちょうである。水溶性の緑黄色色素を産
生する。 肉汁液体培養 培地は、全面濁り、白色の皮膜を形成する。

【００１０】２．生理・生化学的性質 一般的性質 酸素との関係 好気性 非水溶性色素の産生 − 黄緑色蛍光色素の産生 − ピオシアニンの産生 − ゼラチンの液化 ＋ カタラーゼ活性 ＋ オキシダーゼ活性 − ウレアーゼ活性 ＋ 硝酸塩の還元 ＋ 硝酸呼吸能 − レバンの産生 − デンプンの加水分解 − クエン酸の利用 ＋ 乳酸の利用 ＋ グルコン酸の酸化 − エクスリンの加水分解 − アルギニンの加水分解 − pH3.5での生育 − 生長素要求性 なし 生育速度 速い ジャガイモ塊茎の腐敗 −

【００１１】 グルコースの分解様式（ヒュ−ライフ
ソン(Hugh-Laifson)法による、30℃、７日間） 条 件 生 育 酸の生成 ───────────────── 嫌気的条件 − − 好気的条件 ＋ ＋

【００１２】 生育温度（肉汁液体培地、７日間） 温 度 生 育 ──────────── ４℃ − １０℃ ＋ １５℃ ＋ ２０℃ ＋ ２５℃ ＋ ３０℃ ＋ ４０℃ ＋ ４１℃ − ４２℃ −

【００１３】 耐食塩性 濃 度 生 育 ──────────── １％ ＋ ２％ ＋ ３％ ＋ ４％ ＋ ５％ ＋

【００１４】 各種炭素源の利用性 グルコース ＋ フルクトース ＋ キシロース ＋ L-アラビノース ＋ ガラクトース ＋ マンノース ＋ ラムノース − D-リボース ＋ スクロース − マルトース − ラクトース ＋ トレハロース ＋ D-マンニトール ＋ D-ソルビトール ＋ イノシトール ＋ エリトリトール − ガラクチトール ＋ アドニトール ＋ エタノール ＋ 2,3-ブチレングリコール − プロピレングリコール ＋ ゲラニオール − ベタイン ＋ β−アラニン ＋ L-アルギニン ＋ L-バリン ＋ トリプタミン塩酸塩 − L-酒石酸 ＋ D-酒石酸 ＋ m-酒石酸 ＋ マロン酸 ＋ メサコン酸 ＋ シトラコン酸 ＋ レブリン酸 − 安息香酸 − ヒドロキシ安息香酸 − プロピオン酸 − n-酪酸 − グリコール酸 ＋ dl−リンゴ酸 ＋ n-カプリン酸 ＋ アジピン酸 ＋

【００１５】以上の細菌学的性質のうち、(1)グラム陰
性の桿菌である、(2)極鞭毛を有し活発に運動する、(3)
好気性である、(4)酸化的にのみグルコースを分解す
る、(5)内生胞子の形成が認められない等の特徴から、C
AB-03菌株はPseudomonas属に属すると判断される。ま
た、前記の諸性質をもとに「Bergey's Manual of Deter
minative Bacteriology」第９版により検索した結果、
本菌株はPseudomonas gladioliに属すると推定した。同
菌株のTypestrain(MAFF 311021 = ICMP 3950)を対照と
して比較し、同種に属すると同定した。したがって、本
発明者らはCAB-03菌株をPseudomonas gladioli CAB-03
と命名し、工業技術院生命工学工業技術研究所にFERM P
-15238号として寄託した。

【００１６】CAB-04菌株 １．培養的性質 CAB-04 菌株の各種培地における生育状態は次の通りで
ある。観察は２８℃、３日培養後に行った． 肉汁寒天平板培養 集落の性状は、白色、円形、全縁丘状、表面平滑で、湿
光を有し、やや粘調である。水溶性の緑黄色色素を産生
する。 肉汁液体培養 培地は、全面濁り、白色の皮膜を形成する。

【００１７】２．生理・生化学的性質 一般的性質 酸素との関係 好気性 非水溶性色素の産生 − 黄緑色蛍光色素の産生 − ピオシアニンの産生 − ゼラチンの液化 ＋ カタラーゼ ＋ オキシダーゼ − ウレアーゼ − 硝酸塩の還元 ＋ 硝酸呼吸能 − レバンの産生 − デンプンの加水分解 − クエン酸の利用 ＋ 乳酸の利用 ＋ グルコン酸の酸化 − エクスリンの加水分解 ＋ アルギニンの加水分解 − pH3.5での生育 − 生長素要求性 なし 生育速度 速い ジャガイモ塊茎の腐敗 −

【００１８】 グルコースの分解様式（ヒュ−ライフ
ソン(Hugh-Laifson)法による、30℃、７日間） 条 件 生 育 酸の生成 ───────────────── 嫌気的条件 − − 好気的条件 ＋ ＋

【００１９】 生育温度（肉汁液体培地、７日間） 温 度 生 育 ──────────── ４℃ − １０℃ ＋ １５℃ ＋ ２０℃ ＋ ２５℃ ＋ ３０℃ ＋ ４０℃ ＋ ４１℃ − ４２℃ −

【００２０】 耐食塩性 濃 度 生 育 ──────────── １％ ＋ ２％ ＋ ３％ ＋ ４％ ＋ ５％ −

【００２１】 各種炭素源の利用性 グルコース ＋ フルクトース ＋ キシロース ＋ L-アラビノース ＋ ガラクトース ＋ マンノース ＋ ラムノース − D-リボース ＋ スクロース − マルトース − ラクトース ＋ トレハロース ＋ D-マンニトール ＋ D-ソルビトール ＋ イノシトール ＋ エリトリトール − ガラクチトール ＋ アドニトール ＋ エタノール ＋ 2,3-ブチレングリコール − プロピレングリコール − ゲラニオール − ベタイン ＋ β-アラニン ＋ L-アルギニン ＋ L-バリン ＋ トリプタミン塩酸塩 − L-酒石酸 ＋ D-酒石酸 ＋ m-酒石酸 ＋ マロン酸 ＋ メサコン酸 ＋ シトラコン酸 ＋ レブリン酸 − 安息香酸 − ヒドロキシ安息香酸 − プロピオン酸 − n-酪酸 − グリコール酸 ＋ dl-リンゴ酸 ＋ n-カプリン酸 ＋ アジピン酸 ＋

【００２２】以上の細菌学的性質のうち、(1)グラム陰
性の桿菌である、(2)極鞭毛を有し活発に運動する、(3)
好気性である、(4)酸化的にのみグルコースを分解す
る、(5)内生胞子の形成が認められない等の特徴から、C
AB-04菌株はPseudomonas属に属すると判断される。ま
た、前記の諸性質をもとに「Bergey's Manual of Deter
minative Bacteriology」第９版により検索した結果、
本菌株はPseudomonas gladioliに属すると推定した。同
菌株のTypestrain(MAFF 311021 = ICMP 3950)を対照と
して比較し、同種に属すると同定した。したがって、本
発明者らはCAB-04菌株をPseudomonas gladioli CAB-04
と命名し、工業技術院生命工学工業技術研究所にFERM P
-15239号として寄託した。

【００２３】CAB-03、CAB-04菌株の培養には、特別な方
法を用いる必要はなく、シュードモナス属に属する公知
の菌株と同様の方法を用いることができる。培地として
は、生育可能な炭素源、窒素源、無機物及び必要な生育
促進物質を適当に含有する培地であれば、合成培地、天
然培地のいずれも用いることができる。具体的な培地を
例示すると、普通寒天培地、キングＢ培地、ＰＤＡ（ジ
ャガイモ・デキストロース・寒天）培地、ＰＰＧＡ（ジ
ャガイモ・ペプトン・グルコース・寒天）培地、ＹＰＧ
Ａ（イースト・ペプトン・グルコース・寒天）培地等を
挙げることができる。培養に際しては、温度を１５〜４
０℃、好ましくは２８〜３０℃、ｐＨを６．０〜７．
５、好ましくは６．８〜７．０に維持することが望まし
い。

【００２４】一般に、イネ種籾は播種前に冷水または温
湯からなる浸漬液に４８〜９６時間程度浸漬すること
（これを浸種いう）により、種籾に水分を吸収させ、酵
素活性を高め催芽をはかることで播種後の出芽を容易Ｎ
Ｉする。

【００２５】本発明の菌株を用いたイネ苗の立枯性病害
防除方法は、本菌株菌体を浸種時の種籾の浸漬液に添加
するか、又は浸種後の種籾を播種直前に本菌株菌体の懸
濁液中に浸漬することにより行う。

【００２６】本発明の菌株を上記の防除方法に使用する
場合、上記浸漬液又は懸濁液中に、菌体として１０⁷ 個
／ml以上、好ましくは１０⁸ 個／ml以上添加又は懸濁す
るのが適当である。また、上記浸漬液又は懸濁液中での
処理条件は、浸漬液へ浸漬する場合は１５〜３５℃、好
ましくは２０〜３０℃にて４８〜９６時間、好ましくは
４８〜７２時間、懸濁液へ浸漬する場合は、１５〜３５
℃、好ましくは２０〜３０℃にて瞬時〜２４時間、好ま
しくは１〜２４時間が例示される。

【００２７】本発明の病害防除剤は、微生物をそのまま
使用してもよいが、一般には農薬に使用可能な固体担体
又は液体担体と混合して、液剤、カプセル剤、凍結乾燥
アンプル剤などの製剤形態に調製して使用される。微生
物としては、通常は菌体を用い、菌体の濃度は、液剤で
あれば１０⁷ 〜１０¹⁰個／ml、好ましくは１０⁸ 〜１０
⁹ 個／mlとするの適当である。

【００２８】本発明の防除対象となる病害としては、イ
ネ苗の立枯性病害である、イネもみ枯細菌病菌による苗
腐敗症、イネ苗立枯細菌病、イネばか苗病等を挙げるこ
とができる。

【００２９】

【実施例】以下に本発明の実施例、試験例、製剤例を示
し、さらに具体的に説明するが，本発明はこれらに何ら
限定されるものではない。 〔実施例〕 CAB-03菌株、CAB-04菌株の選抜 広島県福山市、中国農業試験場圃場内のイネから分離・
収集した約700菌株の細菌について、イネもみ枯細菌病
菌による苗腐敗症を指標とした生物検定を行い、発病抑
制力の強い細菌を選抜した。具体的には、圃場から採取
したイネおよび籾を滅菌水中で洗浄し、その洗液を寒天
平板上で培養して出現した細菌の集落を単離して保存
し、供試細菌とした。10⁵cfu/mlのイネもみ枯細菌病菌
と10⁸cfu/mlの供試細菌との混合細菌液に健全な種籾を
浸漬後播種し、６日後に発病調査を行ったところ、苗腐
敗症の発生を抑制する細菌株がいくつか認められた。中
でも著しく強い抑制力を発揮したCAB-03菌株、CAB-04菌
株を選抜した。

【００３０】〔試験例１〕 イネもみ枯細菌病菌による
苗腐敗症に対する発病抑制効果（病原細菌液を用いた種
籾接種による試験） (1)試験方法 CAB-03菌株とイネもみ枯細菌病菌(MAFF 301441)を供試
した。濃度を10⁵cfu/mlに調整した病原細菌液に、CAB-0
3菌株を濃度が10⁸cfu/mlになるように添加して混合細菌
液とし、その中で健全種籾（品種金南風）を10℃で３日
間浸種した後播種する区（区) およびあらかじめ同一
条件で浸種した種籾を播種直前に約１時間混合細菌液中
に浸漬して播種する区（区）を設けた。また、それぞ
れの対照として病原細菌のみを10⁵cfu/mlに調整した菌
液で処理する区を設けた。育苗は32℃の湿室で行い、６
日後から苗腐敗症の発病程度を調査した。試験には直径
3cmの容器を用い、１区20粒播種×３ポットとし、６回
反復した。 (2)試験結果 病原細菌液のみを処理した区では本病が激発し、発病苗
率100%、発病度は99以上であった。CAB-03菌株を添加し
た混合細菌液を処理した区では全く発病が認められず、
本菌株の添加により高い発病抑制効果が認められた（表
１参照）。また、CAB-03菌株を添加した区の苗の生育は
正常であり、本菌株の添加による悪影響は認められなか
った。

【００３１】

【表１】 イネもみ枯細菌病菌による苗腐敗症に対する発病抑制効果 （病原細菌液を用いた種籾接種による試験） ──────────────────────── 処 理 発病苗率 発病度¹⁾防除価²⁾ (%) ──────────────────────── （区） 3日間浸漬 病原細菌＋CAB-03菌株 0 0 100 病原細菌のみ 100 99.4 ──────────────────────── （区）播種直前1時間浸漬 病原細菌＋CAB-03菌株 0 0 100 病原細菌のみ 100 99 ──────────────────────── ¹⁾発病度＝((4A+3B+2C+D)/(4×調査苗数))×100〔A:草丈3cm以内・腐敗が2/3以 上に及ぶ発病苗，B:草丈3cm 以内・腐敗が2/3未満の発病苗，C:草丈3.1〜5.0cmの 発 病苗，D:草丈5.1cm以上の発病苗〕 ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:病原細菌のみ処理した区の発病度，B:混合細 菌液を処理した区の発病度〕

【００３２】〔試験例２〕 イネもみ枯細菌病菌による
苗腐敗症に対する発病抑制効果（自然感染籾を用いた試
験） (1)試験方法 イネもみ枯細菌病の自然感染籾（品種金南風、保菌籾率
約20％）を供試し、濃度が10⁸cfu/mlのCAB-03菌株の細
菌液中で10℃３日間浸種した後播種する区（区) 、お
よびあらかじめ浸種・吸水させた種籾を播種直前に約１
時間細菌液中に浸漬して播種する区（区）を設けた。
また、それぞれの対照としてCAB-03菌株を添加しない区
を設けた。育苗は32℃の湿室で行い、６日後から苗腐敗
症の発病程度を調査した。試験には11×16cmの容器を用
い、１区当り約750粒播種、３反復とした。

【００３３】(2)試験結果 対照区では発病苗率で84.3〜86.3%、発病度で27.7〜53.
6の多発条件下であったが、CAB-03菌株を添加した場合
には、３日間浸漬、播種直前の１時間浸漬ともほとんど
発病は認められず、自然感染もみに対しても高い発病抑
制効果のあることが確認された（表２参照）。また、CA
B-03菌株を添加した区の苗の生育は正常であり、悪影響
は認められなかった。

【００３４】

【表２】 イネもみ枯細菌病菌による苗腐敗症に対する発病抑制効果 （自然感染籾を用いた試験） ──────────────────────── 処 理 発病苗率(%) 発病度¹⁾防除価²⁾ ──────────────────────── （区） 3日間浸漬 CAB-03菌株液 0.2 0.1 99.6 対照（水） 84.3 27.7 ──────────────────────── （区）播種直前1時間浸漬 CAB-03菌株液 0.6 0.2 99.6 対照（水） 86.3 53.6 ──────────────────────── ¹⁾発病度の計算方法は表１に同じ。 ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:無処理区の発病度，B:CAB-03処理区の発病度 〕

【００３５】〔試験例３〕 イネ苗立枯細菌病に対する
発病抑制効果 (1)試験方法 イネ苗立枯細菌病菌(MAFF 301723)の濃度を10⁵cfu/mlに
調整した病原細菌液に、CAB-03菌株を濃度が10⁸cfu/ml
になるように添加して混合細菌液とし、これにあらかじ
め10℃３日間浸種した健全種籾（品種金南風）を播種直
前に約１時間浸漬して播種した。対照として病原細菌の
みを10⁵cfu/mlに調整した菌液に浸漬して播種する区を
設けた。育苗は32℃の湿室で行い、６日後から発病程度
を調査した。試験には11×16cmの容器を用い、１区当り
約750粒播種、６反復とした。

【００３６】(2)試験結果 病原細菌液のみに浸漬した籾では本病が激発し、発病苗
率100%、発病度99以上であった。CAB-03菌株を添加する
と全く発病が認められず、高い発病抑制効果が認められ
た（表３参照）。また、CAB-03菌株を添加しても苗の生
育は正常であり、悪影響は認められなかった。

【００３７】

【表３】 ¹⁾発病度の計算方法は表１に同じ²⁾ 防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:病原細菌のみ処理区の
発病度，B:CAB-03菌株処理区の発病度〕

【００３８】〔試験例４〕 イネばか苗病に対する発病
抑制効果 (1)試験方法 イネばか苗病の自然感染籾（品種吉備の華、発病茎のベ
ノミル耐性菌株率約11％）を供試し、濃度が10⁸cfu/ml
のCAB-03菌株の細菌液中で10℃３日間浸種した後播種し
た。また、対照としてCAB-03菌株を添加しない区を設け
た。育苗は32℃の湿室で６日間、その後ガラス室で約２
週間管理し、発病状況を調査した。試験には11×16cmの
容器を用い、１区当り約750粒播種、３反復とした。

【００３９】(2)試験結果 対照区の徒長苗率は67.4％、腐敗枯死を含めた発病苗率
では93.0％と本病が多発した。CAB-03菌株の菌液に処理
した籾は、徒長苗率23.6％、発病苗率30.0％と著しく発
病率が減少し、本菌株はイネばか苗病に対しても高い発
病抑制効果のあることが確認された（表４参照）。ま
た、CAB-03菌株を添加した区の苗の生育は正常であり、
悪影響は認められなかった。

【００４０】

【表４】 イネばか苗病に対する発病抑制効果 ────────────────────────────────── 徒長苗率 腐敗枯死苗率発 発病苗率¹⁾ 防除価²⁾ 処 理 ────────── (%) (%) (%) 徒長苗 発病苗 ────────────────────────────────── CAB-03 菌株液 23.6 6.4 30.0 65 67.7 対照（水） 67.4 25.6 93.0 ────────────────────────────────── ¹⁾発病苗率＝徒長苗率＋腐敗枯死苗率 ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:対照区の発病度，B:CAB-03処理区の発病度〕

【００４１】〔試験例５〕 イネもみ枯細菌病菌による
苗腐敗症に対する発病抑制効果（病原細菌液を用いた種
籾接種による試験） (1)試験方法 CAB-04菌株を用い、試験例１と同様にして行った。 (2)試験結果 病原細菌液のみを処理した区では本病が激発し、発病苗
率100%、発病度は99以上であった。CAB-04菌株を添加し
た混合細菌液を処理した区では全く発病が認められず、
本菌株の添加により高い発病抑制効果が認められた（表
５参照）。また、CAB-04菌株を添加した区の苗の生育は
正常であり、本菌株の添加による悪影響は認められなか
った。

【００４２】

【表５】 イネもみ枯細菌病菌による苗腐敗症に対する発病抑制効果 （病原細菌液を用いた種籾接種による試験） ──────────────────────── 処 理 発病苗率 発病度¹⁾防除価²⁾ (%) ──────────────────────── （区）日間浸漬 病原細菌＋CAB-04菌株 0 0 100 病原細菌のみ 100 99.4 ──────────────────────── （区）播種直前1時間浸漬 病原細菌＋CAB-04菌株 0 0 100 病原細菌のみ 100 99 ──────────────────────── ¹⁾発病度＝((4A+3B+2C+D)/(4×調査苗数))×100〔A:草丈3cm以内・腐敗が2/3以 上に及ぶ発病苗，B:草丈3cm以内・腐敗が2/3未満の発病苗，C:草丈3.1 〜5.0cmの発 病苗，D:草丈5.1cm以上の発病苗〕 ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:病原細菌のみ処理した区の発病度，B:混合細 菌液を処理した区の発病度〕

【００４３】〔試験例６〕 イネもみ枯細菌病菌による
苗腐敗症に対する発病抑制効果（自然感染籾を用いた試
験） (1)試験方法 CAB-04菌株を用い、試験例２と同様にして行った。 (2)試験結果 対照区では発病苗率で84.3〜86.3%、発病度で27.7〜53.
6の多発条件下であったが、CAB-04菌株を添加した場合
には、３日間浸漬、播種直前の１時間浸漬ともほとんど
発病は認められず、自然感染もみに対しても高い発病抑
制効果のあることが確認された（表６参照）。また、CA
B-04菌株を添加した区の苗の生育は正常であり、悪影響
は認められなかった。

【００４４】

【表６】 イネもみ枯細菌病菌による苗腐敗症に対する発病抑制効果 （自然感染籾を用いた試験） ──────────────────────── 処 理 発病苗率(%) 発病度¹⁾防除価²⁾ ──────────────────────── （区） 3日間浸漬 CAB-04菌株液 0.3 0.1 99.6 対照（水） 84.3 27.7 ──────────────────────── （区）播種直前1時間浸漬 CAB-04菌株液 2.2 0.5 99.1 対照（水） 86.3 53.6 ──────────────────────── ¹⁾発病度の計算方法は表１に同じ ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:無処理区の発病度，B:CAB-04処理区の発病度 〕

【００４５】〔試験例７〕 イネ苗立枯細菌病に対する
発病抑制効果 (1)試験方法 CAB-04菌株を用い、試験例３と同様にして行った。 (2)試験結果 病原細菌液のみに浸漬した籾では本病が激発し、発病苗
率100%、発病度99以上であった。CAB-04菌株を添加する
と全く発病が認められず、高い発病抑制効果が認められ
た（表７参照) 。また、CAB-04菌株を添加しても苗の生
育は正常であり、悪影響は認められなかった。

【００４６】

【表７】 ¹⁾発病度の計算方法は表１に同じ²⁾ 防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:病原細菌のみ処理区の
発病度，B:CAB-04菌株処理区の発病度〕

【００４７】〔試験例８〕 イネばか苗病に対する発病
抑制効果 (1)試験方法 CAB-04菌株を用い、試験例４と同様にして行った。 (2)試験結果 対照区の徒長苗率は67.4％、腐敗枯死を含めた発病苗率
では93.0％と本病が多発した。CAB-04菌株の菌液に処理
した籾は、徒長苗率36.3％、発病苗率49.2％と発病率が
減少し、本菌株はイネばか苗病に対しても発病抑制効果
のあることが確認された（表８参照）。また、CAB-04菌
株を添加した区の苗の生育は正常であり、悪影響は認め
られなかった。

【００４８】

【表８】 イネばか苗病に対する発病抑制効果 ────────────────────────────────── 徒長苗率 腐敗枯死苗率発 発病苗率¹⁾ 防除価²⁾ 処 理 ────────── (%) (%) (%) 徒長苗 発病苗 ────────────────────────────────── CAB-04菌株液 36.3 12.9 49.2 46.3 47.1 対照（水） 67.4 25.6 93.0 ────────────────────────────────── ¹⁾発病苗率＝徒長苗率＋腐敗枯死苗率 ²⁾防除価＝((A-B)/A)×100 〔A:対照区の発病度，B:CAB-04処理区の発病度〕

【００４９】〔製剤例１〕 液剤 CAB-03菌株の菌体１０¹⁴個、Tween 20（２ｇ）を滅菌水
10L に加えて混合し、液剤を調製した。

【００５０】〔製剤例２〕 カプセル剤 アルギン酸ナトリウム0.7%、カオリン5%、グリセリン15
% 、水79.3% 混合液１ml中に、 CAB-04 菌株の菌体１０
¹⁰個を懸濁し、0.2 モル酢酸カルシウム溶液中に滴下し
てカプセル状生成物を得た。これを風乾し、カプセル剤
を調製した。

【００５１】〔製剤例３〕 凍結乾燥アンプル剤 スキムミルク9%、グルタミン酸ナトリウム1.3%、水89.7
% 混合液１ml中に、 CAB-03 菌株の菌体１０¹⁰個を懸濁
し、ガラス容器に入れて真空凍結乾燥後溶封し、凍結乾
燥アンプル剤を調製した。

【発明の効果】本発明のイネ立枯病防除剤は、イネもみ
枯細菌病菌による苗腐敗症、イネ苗立枯細菌病およびイ
ネばか苗病の３重要病害に対して発病を強く抑制する作
用があり、現在これらの病害を対象として使用されてい
る農薬と比べ同等以上の防除効果が期待できる。また、
種籾浸種時の１回の処理で上記３病害の同時防除が可能
であり、現行のように数種類の薬剤を混用して使用する
必要がなく、農薬による環境汚染の心配がなくなる。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成７年１０月３１日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２４】一般に、イネ種籾は播種前に冷水または温
湯からなる浸漬液に４８〜９６時間程度浸漬すること
（これを浸種という）により、種籾に水分を吸収させ、
酵素活性を高め催芽をはかることで播種後の出芽を容易
にする。

フロントページの続き (72)発明者 大内 昭 茨城県つくば市並木２丁目14番301−1004 号 (72)発明者 西山 幸司 茨城県土浦市右籾2340番51号

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 シュードモナス・グラディオリ（Pseudo
   monas gladioli) CAB-03又はシュードモナス・グラディ
   オリ（Pseudomonas gladioli) CAB-04を有効成分として
   含有することを特徴とする、イネ苗の立枯性病害防除
   剤。
2. 【請求項２】 イネ苗の立枯性病害が、イネもみ枯細菌
   病菌による苗腐敗症、イネ苗立枯細菌病、イネばか苗病
   から成る群から選ばれた病害であることを特徴とする、
   請求項１記載のイネ苗の立枯性病害防除剤。
3. 【請求項３】 請求項１又は２記載のイネ苗の立枯性病
   害防除剤を、浸種時の種籾の浸漬液に添加することを特
   徴とする、イネ苗の立枯性病害防除方法。
4. 【請求項４】 請求項１又は２記載のイネ苗の立枯性病
   害防除剤を含む懸濁液に、浸種後の種籾を播種直前に浸
   漬することを特徴とする、イネ苗の立枯性病害防除方
   法。
5. 【請求項５】 イネ苗の立枯性病害防除能を有する、シ
   ュードモナス・グラディオリ（Pseudomonas gladioli)
   CAB-03。
6. 【請求項６】 イネ苗の立枯性病害防除能を有する、シ
   ュードモナス・グラディオリ（Pseudomonas gladioli)
   CAB-04。