JPH08503383A - レーザー治療 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 口腔の組織あるいは口腔内の傷または病変部に光増感用化合物を適用しそして前記光増感用化合物により吸収される波長でのレーザー光線を用いて、前記組織、傷または病変部を照射することを包含する、口腔の前記組織あるいは口腔内の前記傷または病変部を消毒または滅菌する方法。

Description

【発明の詳細な説明】 レーザー治療 本発明は、炎症性歯周疾患およびむしばを包含する多くの口腔疾患においてあ るいは傷感染においてそして口腔内の創傷または病変において、包含される微生 物を殺すための光増感用化合物およびレーザー照射線の使用に関する。 炎症性歯周疾患はヒトの最も一般に広がっている疾患でありそしてその進んだ 形態、慢性歯周炎は成人の歯が抜ける主な原因である。慢性歯周炎を治療する現 在の方法は、原因組織を排除するために歯肉下のプラーク（ｐｌａｑｕｅ）を排 除することを包含する：これは抗菌性薬化学療法によりしばしば補助的に行われ る。プラークの機械的除去は決して十分に首尾よくいくものではなくそしてクロ ルヘキシジン（ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ）およびテトラサイクリンのような 抗菌性薬の長期間の使用、顕著には、薬剤を臨床的に効果を無くさせる耐性の発 現、そして口腔内ミクロフローラ（ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ）の障害から生ずる困 難性の多くの欠点がある。 また、従来の歯牙充てん前にそして他の形態の歯科手術中に、穿孔されたう食 窩中の微生物を殺す必要がある。 口腔内の微生物を殺す必要がある他の状況は、化学療法による従来の治療が殆 ど有効でない、ＡＩＤＳ患者、易感染性個人および義歯性口内炎を有する患者の 、口腔内カンジダ症の場合である。 本発明者は口腔内の病原微生物を殺す方法を開発した。 したがって、本発明は、方法が口腔内の組織あるいは口腔内の傷または病変部 に光増感用化合物を適用しそして光増感用化合物により吸収される波長でのレー ザー光線を用いて該組織、傷または病変部を照射することからなる、該組織ある いは該傷または病変部を消毒または滅菌する方法を提供する。 本発明はまた、 （ａ）口腔の組織あるいは口腔内の傷または病変部における任意の病原性微生 物が光増感用化合物を吸収するように該組織、傷または病変部を該光増感用化合 物と接触させ、そして （ｂ）該組織、傷または病変部を、該光増感用化合物により吸収される波長で のレーザー光線で照射する、 ことにより、該組織あるいは該傷または病変部を消毒または滅菌するのに使用す るための、薬剤の製造においての該光増感用化合物の使用を提供する。 治療される傷あるいは病変部は、任意の手術による傷、外傷誘発性の傷、病原 性微生物により起こった病変あるいはそのような微生物に感染した傷または病変 部であってよい。その処置は、感染に対する日常の予防措置としてあるいは傷ま たは病変部のすでに診断された感染の特定の治療として傷または病変部を消毒ま たは滅菌するために適用されてよい。 一面において、本発明は、方法が微生物に光増感用化合物を適用しそして該光 増感用化合物により吸収される波長でのレーザー光線で該微生物を照射すること を包含する、口腔内の病原性微生物を殺す方法を提供する。 さらに、本発明は （ａ）微生物が光増感用化合物を吸収するように該微生物を該光増感用化合物 と接触させ、そして （ｂ）該微生物を、該光増感用化合物により吸収される波長でのレーザー光線 で照射する、 ことにより口腔内の病原性微生物を殺すのに使用するための、薬剤の製造におい ての該光増感用化合物の使用を提供する。 本発明の好ましい面において、光増感用化合物およびレーザー照射をもちいて の処置は、 （ｉ）慢性歯周炎を治療するために歯周嚢中の病原性微生物の殺微生物、 （ｉｉ）慢性歯周炎、歯肉炎、等を包含する炎症性歯周疾患を治療または防止 するために歯と歯肉との間の領域（歯肉裂け目または歯肉縁）における病原性微 生物の殺微生物、 （ｉｉｉ）充てんまえの穿孔う食損傷の消毒または滅菌、 （ｉｖ）むしばを治療または防止するための歯表面上のう食（むしば）原性微 生物の殺微生物、 （ｖ）他の歯科手術処置における象牙質組織および（または）歯肉組織の消毒 または滅菌、および （ｖｉ）ＡＩＤＳ患者、易感染性患者または義歯性口内炎を有する患者におけ る、カンジダ症の治療、 に適用される。 本発明に従って使用するための光増感用化合物は、本発明にしたがって計画さ れた濃度で対象微生物に対して一般的に非毒性でありそして傷または病変部のま わりの組織に対して一般的に非毒性である。しかしながら、光増感剤が微生物に 対して非毒性であるべき特別の必要性はない。さらに、口腔内のまわりの組織を 光増感剤にさらすのが一般に短い期間でありそして高度に集中化されるので、こ れらの組織に対して幾分の毒性を有する化合物を使用することは、許容できるで あろう。 本発明の方法において使用される光増感剤は可視スペクトルの赤色末端でのあ るいはそれより長い波長でのレーザー光線を吸収できるのが好ましく、その理由 は、そのようなレーザー光線が口腔組織のような傷または病変部のまわりの組織 に、より良好に浸透できそして特に治療されるべき部位に存在する可能性のある 血液に良好に浸透できるからである。使用するために選ばれた光増感剤は生理学 的条件下、正の電荷を有するのが一般に好ましく、その理由は、そのような光増 感剤は対象微生物より一層容易に吸収されるからであり、しかし、本発明にした がって細菌に対して有効であるフタロシアニンは負に荷電されている。本発明に したがって使用されることができる特定の光増感剤は： アリアノルスチールブルー（ａｒｉａｎｏｒ ｓｔｅｅｌ ｂｌｕｅ）、 トルイジンブルー Ｏ（ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ ｂｌｕｅ Ｏ）、 トリプタンブルー（ｔｒｙｐｔａｎ ｂｌｕｅ）、 クリスタルバイオレット、 メチレンブルー、 アズレブルーセルト（ａｚｕｒｅ ｂｌｕｅ ｃｅｒｔ）、 アズレＢクロリド（ａｚｕｒｅ Ｂ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、 アズレ ２（ａｚｕｒｅ ２）、 アズレＡクロリド（ａｚｕｒｅ Ａ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、 アズレＢテトラフルオロボーレート（ａｚｕｒｅ Ｂ ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏ ｂｏｒａｔｅ）、 チオニン（ｔｈｉｏｎｉｎ）、 アズレＡエオシネート（ａｚｕｒｅ Ａ ｅｏｓｉｎａｔｅ）、 アズレＢエオシネート（ａｚｕｒｅ Ｂ ｅｏｓｉｎａｔｅ）、 アズレミックスシック（ａｚｕｒｅ ｍｉｘ ｓｉｃｃ）、 アズレＩＩエオシネート（ａｚｕｒｅ ＩＩ ｅｏｓｉｎａｔｅ）、 ヘマトポルフィリンＨＣｌ、 ヘマトポルフィリンエステル、 アルミニウム二スルホン化フタロシアニン（ａｌｕｍｉｎｉｕｍ ｄｉｓｕｌ− ｐｈｏｎａｔｅｄ ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ）、 クロリンス（ｃｈｌｏｒｉｎｓ）、 のような染料および他の光増感用化合物を包含する。 これらの光増感剤の或るもの、とくにヘマトポルフィリン類はグラム陰性菌によ り十分に吸収されなくそしてグラム陰性菌に対して有効である光増感剤、すなわ ち染料を使用するのが好ましい。これらの中で、アルミニウム二スルホン化フタ ロシアニン、トルイジンブルー Ｏ、アズレＢクロリドまたはメチレンブルーを 使用するのが現在好ましい。 トリプタンブルーまたはクリスタルバイオレットの使用を避けるのが好ましい 。本発明の特定の面において、ＨｅＮｅレーザーが使用される場合、使用される 光増感剤は、トリプタンブルーおよびクリスタルバイオレット以外である。 本発明の特定の面において、光増感剤は微生物を標的としそして（あるいは） 微生物による光増感剤の吸収はターゲット用部分（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｏｉ ｅｔｙ）に結合させて光増感剤を用いることにより高められる。ターゲット用部 分は、微生物上の特定の結合剤のための任意の特定の結合用パートナー、たとえ ば、微生物により発現される表面抗原に対する抗体であってよい。別法として、 ターゲット用部分は微生物により有効に吸収されることが知られている物 質であってよい。光増感剤分子へのターゲット用部分の結合は従来技術の使用に よって達成されることができる（特に、Ｆｒｉｅｄｂｅｒｇ，Ｊ．Ｓ．等による Ｐ．Ｎ．Ａ．Ｓ．，Ｕ．Ｓ．Ａ，６１８第３８３頁〜第３９３頁（１９９１）参 照）。 レーザー光線は、もし必要または都合よければ、光ファイバあるいは治療され るべき部位に光を送るための既知の装置を用いてヘリウムネオン（ＨｅＮｅ）ガ スレーザー又は砒化ガリウム（ＧａＡｓ）レーザーの様な任意の適当な源により 提供されることが出来る。（６３２．８ｎｍでの）ＨｅＮｅガスレーザー光線は 、それが口腔組織および血液への良好な浸透性を有しそして本発明において使用 するのに特に適当である光増感剤により十分に吸収されるので、特に適当である 。しかしながら、他の光増感剤／レーザー組み合わせが意図されることが出来そ して当業者は病原性微生物、特に傷に感染するかあるいは口腔内に存在すること が知られている微生物を殺すのに用いるために他の公知のレーザー源および光増 感剤を容易に採用することが出来るだろう。 近赤外（ｔｈｅ ｆａｒ ｒｅｄ）（７００〜８００ｎｍ）で発するレーザー 、特に半導体レーザーがまた使用されることができる。そのようなレーザーが使 用される場合、選ばれた光増感剤は７００ｎｍまたはそれより長い吸収ピークを 有しそしてそれ故に、“無色”であってよいがしかしメチレンブルーのような或 る種の染料がまたこれらのレーザーとともに使用されることが出来る。 特に好ましい光増感剤／レーザー組み合わせは： （ａ）ヘリウム／ネオンレーザー（波長６３２．８ｎｍ）とともにトルイジンブ ルー Ｏ、 （ｂ）砒化アルミニウムガリウムレーザー（波長６６０ｎｍ）とともにアルミニ ウム二スルホン化フタロシアニン、 である。組み合わせ（ａ）はＨＩＶ−関連カンジダ症及び歯周疾患の治療に特に 適用されることができる。組み合わせ（ｂ）はむしばの治療あるいは防止に特に 適用されることができる。これらは本発明の特に好ましい面を形成する。 微生物を殺すのに必要とされる光増感剤の量およびレーザーの投射量は微生物 および治療されるべき部位によって変化するだろう。しかしながら、口腔内に普 通見い出されそして炎症性歯周疾患、むしばおよび他の歯科疾患に関連する代表 的な微生物を、下に記載されるとおりに露光すると、微生物の満足すべき殺微生 物を一般に提供することが分かった： １．レーザー出力：１〜１００ｍＷ、好ましくは、約２５ｍＷのＨｅＮｅレー ザー、 １〜１００ｍＷ、好ましくは、約１５ｍＷのＧａＡｓレザー。 （注：ビーム直径の選択、露光時間およびレーザー／光増感剤組み合わせに対す る微生物の感受性に関連してレーザー源が選択される。短い時間用にあるいは広 い領域を照射するために非常に強力な源が使用されてもよいがしかし常に必要と される眼の保護以外に特別の予防措置が避けられる事ができるように強力性がや や劣る源を使用するのが一般に好ましい。） ２．レーザービームの大きさ：１〜１０ｍｍのビーム直径が口腔内において実施 するために都合がよい。 ３．レーザー照射時間：１秒〜５分、好ましくは５秒〜２分そして最も好ましく は約３０秒。 （注：これらの数量は、連続的に照射されるレーザービーム寸法に対応して、あ るいは間欠的に照射されるならば、その領域の全体の照射時間に対応して、単一 領域に適用する。治療されるべき領域がビーム寸法を超え、ビームを移動させる ことを必要とする場合、全体の治療時間は対応して増大されるだろう。） ４．光投射量：５〜３０Ｊ・ｃｍ^-2、好ましくは１０〜２０Ｊ・ｃｍ^-2そして最 もこのましくは約１５Ｊ・ｃｍ^-2。 ５．増感剤濃度：水溶液中０．００００１〜１％ｗ／ｖ、好ましくは ０．０００１〜０．１％ｗ／ｖ、そしてさらに好ましくは ０．００１〜０．０１％ｗ／ｖ、たとえば ０．００５％ｗ／ｖ。 治療の部位でそしてたとえば、唾液または血液のような体液で治療部位がおおわ れている歯周嚢および傷の治療において、 光増感剤濃度は、体液により希釈さ れた後に、有効な濃度を達成されるように一層大きな濃度で光増感剤を適用する ことが必要であることに留意すべきである。 光増感剤溶液は、微生物にいくらかの光増感剤を吸収させそしてレーザー光線 に一層感受性にさせることを可能にする時間の間、微生物に接触させたままにし ておく。適当な時間は、一般に１秒〜１０分、たとえば１０秒〜２分、好ましく は約３０秒であるけれども、この時間は使用している特定の光増感剤および殺す べき対象微生物に依存して変更されてもよい。 好ましくは、光増感剤は、水、たとえば蒸留水または脱イオン水、好ましくは 、発熱性物質の無い滅菌水または注射用水のような製薬的に許容できる水性担体 中の溶液で光増感剤を含む製薬組成物の形で使用される。その組成物は緩衝剤、 溶液の張度を調節するための塩、酸化防止剤、保存料、（グアル（ｇｕａｒ）お よびその誘導体のような）ゲル化剤、等をさらに含んでよい。好ましくは、その 組成物は０．００００１〜１０％ｗ／ｖ、好ましくは１％ｗ／ｖまで、たとえば ０．０００１〜０．１％ｗ／ｖで光増感剤を含む生理学的に緩衝化された等張水 溶液の形態にある。本発明の特定の面において、本組成物はエナメル質および（ または）象牙質および（または）歯肉組織の治療のために意図され、そして光増 感用化合物および補助用成分のみばかりでなく、ミネラル質再付加剤（ｒｅｍｉ ｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）もまた用いて配合される。そのような 組成物は、レーザー照射により病原性微生物を殺すと同時に歯のエナメル質およ び（または）象牙質の強度を改良するのに歯周嚢、むしば損傷、等の治療におい て使用されることができる。ミネラル質再付加剤はそれ自体周知であり、そして 例えばＰｅａｒｓ，Ｅ．Ｌ．Ｆ．およびＮｅｌｓｏｎ，Ｄ．Ｇ．Ａ．によるＣａ ｒｉｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２２ ｐ３６２〜３７０（１９８８）において記 載されているような従来の方法において使用されている。 遊離基捕獲用材料および原子状酸素捕獲用材料（ｓｉｎｇｌｅｔ ｏｘｙｇｅ ｎ ｓｃａｎｖｅｎｇｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ）の使用は、これらが微生物の 光増感に干渉する傾向があるので、避けるべきであることに留意すベきである。 本発明に従えば、適当に希釈された光増感剤溶液は、創縁切除傷または損傷、 たとえば穿孔されたむしば損傷または歯周嚢またはＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃ ａｎｓに感染した粘膜表面のような、治療すべき部位に局所的に適用 され、光増感剤溶液は、殺されるべき微生物が光増感剤の有効量を吸収するのに 十分な時間の間、微生物と接触させたままにしておきそして次ぎに、治療される べき部位の少なくとも一部分そして好ましくは全ての病原性微生物を殺すのに十 分な時間の間、適当なレーザー照射線に治療されるべき部位を露光する。さらに 、たとえばむしば損傷を充填するか傷を接合するその部位の治療が次ぎに行われ てもよい。 本発明は今や次の例によって例示されようそしてそれらの例はいかなるやり方 においても本発明の範囲を限定することを意図しない。それらの例は口腔内疾患 において包含されそして傷に感染する代表的な属の微生物である種々の微生物を 殺すために光増感剤およびレーザーの使用を示す。例 １ 材料および方法レーザー 使用されたレーザーは７．３ｍＷの出力を有するヘリウム／ネオン（ＨｅＮｅ ）ガスレーザー（日本のＮＥＣコーポレーション）であった。これは、６３２． ８ｎｍの波長を有する、直径１．３ｍｍの照準線を正しく向けたビームで照射線 を発した。対象微生物 その研究において使用された微生物はＳｔｒｅｐｔｃｏｃｃｕｓ ｓａｎｇｕ ｉｓ ＮＣＴＣ １０９０４、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌ ｉｓ Ｗ５０、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ＮＣＴＣ １０５６２および Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ Ｙ４であった。（子牛の）脳心臓浸出物（ＢＨＩ）寒天（Ｏｘｏｉｄ Ｌｔｄ． ）上で４８時間毎に継代培養されたＳ．ｓａｎｇｕｉｓ以外はすべてウイルキン スチャルグレン（Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｃｈａｒｇｒｅｎ）（ＷＣ）血液寒天（英国 、ＢａｓｉｎｇｓｔｏｋｅのＯｘｏｉｄ Ｌｔｄ．）上に毎週移すことにより維 持された。光増感剤 試験化合物は次ぎのとおりの化合物以外はすべて英国、ＰｏｏｌｅのＳｉｇｍ ａ Ｌｔｄ．から得られた： アリアベルダークブルー（Ａｒｉａｂｅｌ ｄａｒｋ ｂｌｕｅ）、 ＦＤＣブルー＃２、 アリアビットパテントブルー（ａｒｉａｖｉｔ ｐａｔｅｎｔ ｂｌｕｅ）、 アリアビットインジゴカルミン（ａｒｉａｖｉｔ ｉｎｄｉｇｏ carmin）、 アリアノルスチールブルー（ａｒｉａｎｏｌ ｓｔｅｅｌ ｂｌｕｅ）、 アリアビットブリリアントブルーＦＣＦ（ａｒｉａｖｉｔ ｂｒｉｌｌｉａｎｔ ｂｌｕｅ ＦＣＦ）および ウサセルトＦＤアンドＣブルー＃１および＃２（ｕｓａｃｅｒｔ ＦＤ ａｎｄ Ｃ ｂｌｕｅ ＃１ ａｎｄ ＃２）、 （以上すべて英国のＨｏｕｎｓｌｏｗのＷｉｌｌｉａｍｓ Ｌｔｄ．から）； アズレミックスチュアシック（ａｚｕｒｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｓｉｃｃ）、 および アズレ Ｂ （スイスＢｕｃｈｓのＦｌｕｋａから）； ブリリアントクレシルブルー（ｂｒｉｌｌｉａｎｔ ｃｒｅｓｙｌ ｂｌｕｅ） および トリパンブルー（ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ） （英国、ＰｏｏｌｅのＢＤＨから）； アルミニウム二スルホン化フタロシアニン （ロンドン、インペリアルカレッジ、化学部のＤ．Ｐｈｉｌｌｉｐｓ教授からの 贈呈）； ヘマトポルフィリンエステル （ＧｌａｓｇｏｗのＰａｉｓｌｅｙ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｔｄから）。細菌生存力上へのレーザー光線の効果 試験微生物の幾つかのコロニーを滅菌塩水中に懸濁させそして渦をたたせて均 質な懸濁液を得た。この懸濁液の部分（２．０ｍｌ）を塩水中の種々の濃度の試 験化合物の溶液の部分（２．０ｍｌ）（あるいは対照の場合は塩水だけ）と混合 しそしてサンプル（１．０ｍｌ）を寒天プレートの表面上に広げた。（１０分後 に）過剰の液体を除去しそして３７℃でプレートを乾燥した。次ぎに、プレート を種々の時間の間レーザーに露光し、その次ぎに増殖が対照プレートに見ること ができるようになるまでそれらを嫌気的ジャー中でインキュベートした。プレー トを阻止域について調べそして次ぎに阻止域内に何らかの増殖が生じたかどうか を調べるために追加の７日間再インキュベートした。 Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓおよびＡ．ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ の場合において、使用された媒体はＢＨＩであり、一方ではＰ．ｇｉｎｇｉｖａ ｌｉｓおよびＦ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍについては、これに０．０００１％（ｗ／ ｖ）のメナジオン（ｍｅｎａｄｉｏｎｅ）および０．００１％（ｗ／ｖ）のヘミ ン（ｈａｅｍｉｎ）を補充した。細菌が試験化合物にさらされない対照プレート は対象微生物の生存力上にレーザー光線単独で何らかの影響を有したかどうかを 調べるために供された。試験化合物それ自体により細菌の生存力上に何か有害な 作用があるかどうかが、その化合物に予かじめさらされた細菌を入れているプレ ートの非照射部分を調べることにより確かめられた。光増感活性についての化合物の選別 ＨｅＮｅレーザー光線への露光の後にＳ．ｓａｎｇｕｉｓの増殖を阻止するそ れらの能力について２７の化合物が試験された。各々の化合物は０．１％および ０．００１％（ｗ／ｖ）の濃度で試験されそしてレーザー光線への露光は、５、 １０、３０および６０秒であった。光増感剤の濃度を変化させることの効果 選別プログラムにおいて光増感剤として働くことを示した化合物をさらに検討 するために選んだ。上記方法を用いて、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓの増殖上への、化合 物の濃度および露光時間を変えることの効果を調べた。各々２、１０および３０ 秒の露光時間で、０．０００１５％（ｗ／ｖ）〜０．０１％（ｗ／ｖ）の濃度範 囲を用いた。他の口腔細菌の光増感 最も期待できる化合物の幾つがが、ＨｅＮｅ光線による殺菌に対して、Ｐ． ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ａ．ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓおよ びＦ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍを感受性増大させるそれらの能力について試験した。結果 対象微生物としてＳ．ｓａｎｇｕｉｓを用いる２７の試験化合物の最初の選別 プログラムの結果を表１に示す。 これから、次の化合物が有効な光増感剤であったことが分かる：アリアノルス チールブルー（ａｒｉａｎｏｒ ｓｔｅｅｌ ｂｌｕｅ）、トルイジンブルーＯ 、クリスタルバイオレット、メチレンブルー、チオニン、数種のアズレ光増感剤 、ヘマトポルフィリンおよびヘマトポルフィリンエステル。殺微生物時間は５〜 ６０秒の範囲にわたり、これは２．７５〜３３Ｊ／ｃｍ²のエネルギー投与量を 表した。 Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓが予かじめ試験化合物にさらされることなしに照射された プレート上には殺微生物域が見られなかった。フタロシアニンの場合以外は試験 化合物それ自体は試験された濃度でＳ．ｓａｎｇｕｉｓの増殖に明らかな効果を 有しなかった。 ＋ ＝ 殺菌効果 − ＝ 検出出来る殺菌効果なし ＤＴ＝ S．sanguisに対して示された直接毒性 或る範囲の試験化合物にさらした後に、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓの生存上へのヘ リウム／ネオンレーザーからの光線の効果が示される。正の結果（すなわち 殺菌）の場合において、試験された光増感剤の最も低い濃度が、最も短い露 光時間と組み合わせて提供される。負の結果（すなわち殺菌性無し）につい ては、最も高い光増感剤濃度および最も長い露光時間が提供される。 予備選別プログラムから選ばれた最も期待出来る化合物の濃度を変化させての 、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓ上への効果を次ぎに調べた。表２は、試験された光増感剤 の中で、トルイジンブルー Ｏ、アズレＡクロリドおよびチオニンは、Ｓ． ｓａｎｇｕｉｓを殺菌の誘導に最も有効であったことを示す。たとえばトルイジ ンブルーＯの場合において、殺菌域は、０．０００３％（ｗ／ｖ）の濃度を用い て２秒間の照射の後の幾つかの実験において容易に認められた。 試験された光増感剤の中で、トルイジンブルー、メチレンブルーおよびアズレ Ｂクロリドが対象微生物のすべてに対して有効な唯一の場合であったことが表３ から分かる。いっぱんに、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍおよびＡ．ａｃｔｉｎｏｍｙ ｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓは、使用された光増感剤の濃度および露光時間の条 件下、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓおよびＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓよりも、殺菌に対し て一層耐性であるように思えた。 ＋ ＝ 殺菌効果 − ＝ 検出出来る殺菌効果なし ｖ ＝ 可変性結果 ＮＴ＝ この濃度でS．sanguisに対して光増感剤の直接毒性の故に、試験されな かった。 光増感用剤の種々の濃度での処理後、Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓの生存上への照射時 間の効果が示される。 ＋ ＝ 殺菌効果 − ＝ 検出できる殺菌効果なし ｖ ＝ 可変性結果 ある範囲の光増感剤にさらした後、ＨｅＮｅレーザーからの光線に対する 種々の口腔内細菌の感受性が示される。検討 この研究の結果、多くの化合物が幾つかの口腔細菌、グラム陽性菌およびグラ ム陰性菌の両方を、ＨｅＮｅレーザーからの光線による殺菌に感受性を増大させ ることが出来ることを示した。光増感剤の不存在下に細菌への照射は、これらの 微生物の生存力への検出できる効果を有しなかったそして試験された濃度で光増 感剤それ自体では殺菌効果を発揮しなかった。光増感活性を示す化合物の中で、 レーザーにより発せられる照射線の波長（６３２．８ｎｍ）に最も近い吸収最大 を有する化合物が最も有効なものの中に入っていた。これらはトルイジンブルー （６３２．２ｎｍ）及びアズレＡクロリド（６３２．４ｎｍ）を包含した。 本研究は、ヘマトポルフィリンＨＣｌおよびヘマトポルフィリンエステルがグ ラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方を、ＨｅＮｅ光線による殺菌に感受性を増 大させることができたことを示す。これらの化合物は６３２．８ｎｍでの光線の 吸収性に乏しいので、この発見は驚くべきことである。 より新しい世代の腫瘍光増感剤の１つである、アルミニウム二スルホン化フタ ロシアニンがまた本研究においてグラム陽性菌およびグラム陰性菌の有効な光増 感剤であることが分かった。しかしながら、一般に、腫瘍の光化学療法（ＰＣＴ ）において使用するために開発された光増感剤はトルイジンブルー、チオニンお よび数種のアズレ光増感剤のような光増感剤より、ＨｅＮｅ光線による殺菌に感 受性増大させるのに有効性が少なかった。 Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓの光増感剤であると分かった１６の化合物の中に、トルイ ジンブルー、メチレンブルーおよびアズレＢクロリドはまた、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖ ａｌｉｓ、Ｆ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍおよびＡ．ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏ ｍｉｔａｎｓの有効な増感剤であることが判明した。０．００５％（ｗ／ｖ）の 濃度で、これらの化合物はほんの３０秒間ＨｅＮｅ光線に露光の後に細菌を殺す ことができた。これらの微生物は、歯肉炎および歯周炎を包含する多くの口腔感 染に包含されるので、これらの結果は、本発明がそのような感染を治療するのに 有効であることを意味する。さらに、そのような疾患の局所的性質はこれらを、 治療のこの形態に特に順応させ、その理由は、その病変部が光増感剤をそして光 線を容易に受けることが出来るからである。例 ２ ６６０ｎｍの波長を有する砒化ガリウムレーザー（出力＝１５ｍＷ）をアルミ ニウム二スルホン化フタロシアニンと組み合わせて使用され、そしてＳｔｒｅｐ ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ、Ｓ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉ ｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ およびＡｃｔｉｎｏｎｙｃｅ ｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓ（これらのすべては、むしばのなかに含まれている）に対 して試験された。 実験方法論は、トリプトン大豆ブロスが塩水の代わりに用いられた以外は例１ において使用された実験方法論に類似している。結果を表４に示す。 したがって、これらの微生物を殺すのに必要とされるエネルギー密度は（０． ００１％の光増感剤濃度および１２０秒の露光時間について）２．８ｊ／ｃｍ² までであった。例 ３ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｅｓの致死光増感 Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｅｓの一夜培養物を造りそして塩 水中に１／１０および１／１００に希釈した。各々に等容量の０．０１％（ｗ／ ｖ）トルイジンブルーＯを加えそして各々の懸濁液の１．０ｍｌを栄養寒天プレ ートの表面に広げた。過剰の液を除きそして３７℃でプレートを乾燥した。次ぎ に、プレートを３０秒および６０秒間、ＨｅＮｅレーザーからの光線に露光した 。次ぎにそれらを一夜インキュベートしそして阻止域について調べた。 懸濁液の１／１０希釈液を用いて６０秒の照射の後に、阻止域が明らかに認め られた。例 ４ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓの致死光増感 サボーラウド（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ）ブロス中のＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃ ａｎｓの一夜培養物をつくりそして塩水中の等容量の種々の濃度のトルイジンブ ルーＯ懸濁液の一定分取部分に加えた。１．０ｍｌのこれらの懸濁液をサボーラ ウド（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ）デキストロース寒天プレートに加え、 過剰の液体を除去し、プレートを乾燥し、そして次ぎに種々の時間の間、７．３ ｍＷのＨｅＮｅレーザーからの光線に露光した。インキュベーションの後に、表 ５に示されるように阻止域が明らかに認められた。 ＋ ＝ 阻止域が見られる − ＝ 阻止域が見られない例 ５ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓの致死光増感 方法 １１ｍＷの出力を有する砒化アルミニウムガリウム（ＧａＡｓ）ダイオード（ ビーム直径＝９ｍｍ、 波長＝６６０ｎｍ）を光増感剤アルミニウム二スルホン 化フタロシアニン（ＡＤＰ）およびメチレンブルー（ＭＢ、Ｃ．Ｉ．５２０１５ ）と組み合わせて用いた。７．３ｍＷの出力を有するヘリウム／ネオン（ＨｅＮ ｅ）ガスレーザー（日本ＮＥＣコーポレーション）（ビーム直径＝１．３ｍｍ、 波長＝６３２．８ｎｍ）を、クリスタルバイオレット（ＣＶ、Ｃ．Ｉ．４２５５ ５）、トルイジンブルーＯ（ＴＢＯ、Ｃ．Ｉ．５２０４０）、ジヘマトポルフィ リンエステル（ＤＨＥ）およびチオニン（Ｃ．Ｉ．５２０００）と組み合わせて 用いた。滅菌（子牛の）脳心臓浸出物（ＢＨＩ）ブロスで１：１００に希釈され たＣ．ａｌｂｉｃａｎｓの一夜培養物の５０μｌ分取部分を井戸型微小滴定プレ ートに移しそしてＢＨＩ中の光増感剤の等容量の溶液を各々の井戸型プレートに 加えて、０．１、０．５または１．０ｍｇ／ｍｌのいずれかの最終濃度を得た。 室温で５分インキュベーションの後に、（おだやかにかきまぜられた）同じ２つ の部分からなる井戸型プレートを１２０秒間、レーザーからの光線に露光した。 染料溶液の代わりにイースト懸濁液プラスＢＨＩを含有する対照井戸型プレート を同一の方法で処理した。上記と同じ別の４つの井戸型プレートを造りそしてこ れらはレーザー光線に露光しなかった。適当な井戸型プレートの照射の後に、生 存菌の生菌数算定により調べた。 これらの実験に基づいて、最も期待できる光増感剤を選び、そしてイースト細 胞の一層濃い懸濁液を殺すのを誘発するそれらの有効性が調べられた。その実験 計画は一夜イースト培養物を１：１００ではなくて１：１０に希釈しそして各々 の染料を０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で使用した以外は上に略述したとおりであった 。結果 ＴＢＯ、レーザー光線およびその両方の組み合わせに露出させることの、Ｃ． ａｌｂｉｃａｎｓの生存力上への効果を表６に示す。１２０秒間、ＨｅＮｅ光線 への露光はイーストの生存力への統計的に有意な効果を有しなかった（スチュー デンツｔ−テスト（Ｓｔｕｄｅｎｔ′ｓ ｔ−ｔｅｓｔ）、ｐ＞０．０５）。し かしながら、ＨｅＮｅレーザー光線不存在下での、０．１および０．５ｍｇ／ｍ ｌの濃度でのＴＢＯはそれぞれ２０．１％および２３．９％だけ、微生物の懸濁 液の生菌数を減少させた。ＴＢＯの存在下に１２０秒間、ＨｅＮｅ光線（エネル ギー投与量＝６６．３Ｊ／ｃｍ²の密度で０．８８Ｊ）でイースト懸濁液を照射 した場合、生菌数に統計的に有意な減少があった。染料濃度を増大させるにつれ て、殺された微生物の数は増大し、０．１および０．５ｍｇ／ｍｌの濃度でそれ ぞれ６４．１％および６９．６％になった。 ＨｅＮｅレーザー光線の不存在下に、チオニンは０．１および０．５ｍｇ／ｍ ｌの濃度でイースト生存力への統計的に有意な効果を有しなかった（表６）。し かしながら、チオニンの存在下に１２０秒間、ＨｅＮｅ光線でイーストを照射す ると、生存力において統計的に有意な減少を生じた。 ＨｅＮｅレーザーからの光線あるいは０．１および０．５ｍｇ／ｍｌの濃度で のＣＶはイーストの生存力上への統計的に有意な効果を有しなかった。しかしな がら、イーストが該染料の存在下にＨｅＮｅ光線で照射された場合、生存力にお ける統計的に有意な減少が達成された。 ２．５ｍｇ／ｍｌほども高い濃度でのＤＨＥは露光時間が３６０秒ほども長か った場合でさえ、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓをＨｅＮｅレーザー光線により殺菌する ことに対して感受性を増大することは出来なかった。 単独で用いた場合、ＨｅＮｅ光線または０．１ｍｇ／ｍｌのＴＢＯは、一層濃 いイースト懸濁液の生存力上に有意な効果を有しなかった（表６）。しかしなが ら、０．１ｍｇ／ｍｌのＴＢＯの存在下にＨｅＮｅレーザー光線への微生物の露 光は生菌数に有意な減少を生じた（ｐ＜０．０００１）。０．１ｍｇ／ｍｌの濃 度でチオニンはレーザー光線の不存在下にイーストに毒性であった。一層濃厚な イースト懸濁液が該染料の存在下に１２０秒間ＨｅＮｅ光線に露光された場合、 生菌数においてずっと大きな減少が得られた。 ０．１ｍｇ／ｍｌのＣＶはレーザー光線の不存在下にイーストに対して毒性で あるが、しかし該染料で処理された懸濁液が１２０秒間、ＨｅＮｅレーザー光線 で照射された場合、生菌数における大きな減少が達成された（表６）。 １２０秒間、ＧａＡｓレーザーからの光線への露光（エネルギー投与量＝２． ０４Ｊ／ｃｍ²の密度で１．３２Ｊ）はＡＤＰの不存在下にイースト生存力上に 統計的に有意な効果を有しなかった。ＡＤＰは１．０ｍｇ／ｍｌの濃度でイース トに毒性であり、４３．５％の生菌数の減少で有意な減少（ｐ＝０．００２）を 生じた。しかしながら、０．１ｍｇ／ｍｌのＡＤＰはイースト生存力上への有意 な影響を有しなかった。１．０ｍｇ／ｍｌのＡＤＰの存在下にイースト懸濁液は ＧａＡｓレーザーからの光線で照射した場合、得られた生菌数は照射されていな い、染料の存在しない対照の生菌数より非常に低かった。しかしながら、照射さ れた染料処理懸濁液の生菌数と照射されていない染料処理懸濁液との間には有意 差はなかった。 ＧａＡｓレーザー光線の不存在下にＭＢはＣ．ａｌｂｉｃａｎｓに対して毒性 であった。０．１および１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で、イースト懸濁液の生菌数は それぞれ１６．９％および３５．２％だけ減少した。該染料の存在下に、１２０ 秒間イーストをＧａＡｓからの光線に露光した場合、生菌数はレーザー光線の不 存在下に該染料での処理から生ずる生菌数より非常に低かった。該染料がそれぞ れ０．１および１．０ｍｇ／ｍｌの濃度で使用された場合、減少は、４２．１％ および５９．４％になった。ＧａＡｓレーザーからの光線が該染料の不存在下に 使用された場合、イーストの生存力への有意な効果は有しなかった。 これらの結果は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓがいったん適当な光増感剤で処理され たならば、その微生物を低い出力のレーザーからの光線への短時間露光により殺 すことが出来ることを示す。ＨｅＮｅレーザーの場合において、ＴＢＯが最も有 効な増感剤であり、一方ではＧａＡｓレーザーが使用される場合、ＭＢが最も有 効であった。 Ｄ−Ｌ＋ ＝ 染料不存在下にレーザーに露光された Ｄ＋Ｌ− ＝ 染料にさらされたが、レーザーに露光されなかった Ｄ＋Ｌ＋ ＝ 染料の存在下にレーザーに露光された ＮＳ ＝ レーザーにも露光されず、染料にもさらされない対照培養物と の有意差無し Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの懸濁液の生存力上へのＨｅＮｅレーザーからの光線の 効果が示される。例 ６ インピトロ使用のモデル 歯肉下プラークサンプルの致死光増感 例５の実験計画に類似の実験計画を用いて、慢性歯周炎を有する２０人の患者 からの歯肉下プラークサンプルを、光増感剤として５０μｇ／ｍｌのトルイジン ブルーＯの存在下にそしてそれの不存在下に、３０秒間７．３ｍＷのＨｅＮｅレ ーザーからの光線に露光した。種々の選択および非選択の媒体を用いての照射ま えおよび照射後に種々のグループおよび種の細菌の生菌数算定が行われた。照射 された３０μｌの分取部分中に始めに存在する生きている細菌の中央数値は１． １３ｘ１０⁵ ｃｆｕ（好気性菌）、４．０８ｘ１０⁵ ｃｆｕ（嫌気性菌）、４ ．９２ｘ１０³ ｃｆｕ（黒色着色の嫌気性菌）、４．７５ｘ１０² ｃｆｕ（Ｐ ｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、６．１５ｘ１０³ｃｆｕ （Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）および１．７ｘ１０⁴ ｃｆｕ（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）であった。染料／レーザー組み合わせはこ れらの微生物の生存力における有意な減少を達成し、生菌数における中央パーセ ンテージ減少は、好気性菌について９１．１％、嫌気性菌について９６．６％、 黒色着色の嫌気性菌、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓおよびＦ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍ については１００％そしてｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉについては９４．２％であ った。全体として、２０のプラークサンプルにおける細菌の生存力は染料単独だ けによっては有意に減少しなかった。これは、これらの微生物が慢性歯周炎を有 する患者の高度に複雑な歯肉下ミクロフローラ（ｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ）特性の 構成部分として存在する歯周病原性細菌の致死光増感を達成することが出来るこ とを示す。例 ７ インビボ使用のモデル 象牙質により遮蔽されている場合またはコラーゲンマトリックス中に埋め込まれ ている場合の、う食（むしば）原性菌の致死光増感 この研究の目的は、（ｉ）象牙質切片中のレーザー光線の通過の後に、そして （ｉｉ）細菌がコラーゲンマトリックス中に埋め込まれている場合に、殺菌可能 であるかどうかを調べることである。方法 （ｉ） ヒト大臼歯からの象牙質切片を、８、１６、２４および３２時間の間、 ０．１ＭのＥＤＴＡで脱イオンした。等容量のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓの一夜培養物および０．０５％のＴＢＯを井戸型微小滴定プレート 中に置いた。一つの象牙質の切片を介在させて懸濁液を２４０秒間７．３ｍＷの ＨｅＮｅレーザーからの光線に露光した。露光前およびその後に細菌を数えた。 １１ｍＷのＧａＡｓレーザーと組み合わせて光増感剤としてＡＤＰを用いてその 実験を繰り返した。 （ｉｉ） コラーゲンゲル中のＳ．ｍｕｔａｎｓの懸濁物を一夜乾燥させて細菌 含有プラグ（ｐｌｕｇ）を形成した。ＴＢＯ（またはＡＤＰ）を加えそして６０ 秒間、該プラグをＨｅＮｅ（またはＧａＡｓ）レーザーに露光した。該プラグを コラーゲンでダイジェストしそして生存している細菌を数えた。結果 （ｉ） ＨｅＮｅレーザーと細菌懸濁液との間に象牙質切片を介在させた場合に 実質的な殺菌が達成された。これらは１．８ｘ１０⁶〜３．６６ｘ１０⁷ ｃｆｕ の範囲にわたっていた。殺菌の程度と象牙質切片を脱イオンした時間との間には 関連性はなかった。ＡＤＰ／ＧａＡｓ組み合わせの場合に、同様なパターンの結 果が得られた。殺菌された数は１．２ｘ１０⁶〜１．３４ｘ１０⁷ ｃｆｕの範囲 にわたっていた。また、殺菌の程度と脱イオン化時間との間には関連性がなかっ た。 （ｉｉ） 細菌含有コラーゲンプラグの照射の後に、ＴＢＯ／ＨｅＮｅシステム およびＡＤＰ／ＧａＡｓシステムについて、殺菌数は、それぞれ８．９４ｘ１０⁸ および２．０８ｘ１０³ ｃｆｕであった。染料またはレーザー単独で使用され た場合の対照は統計的に有意な殺菌を示さなかった。 この研究の結果は、光線がヒト象牙質の２００μｍ厚さの切片を通過した場合 でさえそして細菌がコラーゲンマトリックス中に埋め込まれた場合でさえ、光増 感されたＳ．ｍｕｔａｎｓを低出力のレーザー光線によって殺菌することが出来 ることを示した。これはう食原性微生物の致死光増感がインビボにおけるむしば 損傷において見いだされる状況に一層近く似ている条件下に達成されることが出 来ることを示す。例 ８ インビボ使用のモデル 血清の存在下にＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓの致死光増感 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓにより生じた口腔損傷および病変において、その細胞は 一定不変に、血清に富んだ環境にある。血清は（たとえば光増感剤と錯化するこ とにより）致死光増感を妨げる可能性があるので、血清の存在下に殺菌を達成さ せることが出来るかどうか調べることは重要である。 Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの一夜培養物の２ｘ５ｍｌの一定分取部分を遠心分離し 、一方は５０ｍｌの滅菌ＢＨＩブロス中にそして他方は５０ｍｌの馬血清中に、 一定分取部分を再懸濁させた。次ぎに、０．１ｍｇ／ｍｌのＴＢＯの存在下に該 微生物の生存力上へのＨｅＮｅレーザー光線（１２０秒露光）の効果を、上記例 において記載したとおりにして調べた。 血清の不存在下に、３．７４ｘ１０³ ｃｆｕ含有する懸濁液中の殺菌パーセ ンテージは６０％であり、一方血清の存在下に殺菌パーセンテージは６６％であ った。これらの結果は、馬血清がＴＢＯ−増感されたＣ．ａｌｂｉｃａｎｓのＨ ｅＮｅレーザー光線誘導殺菌を妨げないことを示す。例 ９ ゲルデリバリ（ｄｅｌｉｖｅｒｙ）システムの使用 ０．５ｇのグアルヒドロキシプロピル（ｇｕａｒｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ）誘導体（ＢＤＨ Ｌｔｄ．）を１００ｍｌの水に溶解してゲルを形成しそして トルイジンブルーＯを５０ｍｌのゲルに加えて１００μｇ／ｍｌの最終濃度を得 た。染料含有ゲルおよび染料を含有しないゲルの一定分取部分を、Ｓｔｒｅｐｔ ｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓの懸濁液に加えそして２４０秒間、ＨｅＮｅレー ザーからの光線に露光した。照射されていない細菌含有ゲルを対照として用いた 。各々のゲル中の生存微生物の数を生菌数算定により調べた。 トルイジンブルーを含有するゲル中の微生物の生菌数においてかなりの減少（ ３．３５ｘ１０⁷ ｃｆｕ）があり、これは、光増感剤をゲル担体中に存在させ る場合に、Ｓ．ｍｕｔａｎｓの致死光増感が達成させることができることを示す 。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＣＡ，ＪＰ，ＵＳ (72)発明者 ハーベイ，ウィルソン イギリス国エフケイ８ ３エイエックス スターリング，ガーガンノック，ザ グレ ベ 23

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．方法が、口腔の組織あるいは口腔内の傷または病変部に光増感用化合物を 適用しそして該光増感用化合物により吸収される波長でのレーザー光線を用いて 前記組織、傷または病変部を照射させることを包含する、前記組織、傷または病 変部を消毒あるいは滅菌する方法。 ２．(a)口腔の組織あるいは口腔内の傷または病変部中の任意の病原生微生物 が光増感用化合物を吸収するように、該組織、傷または病変部を該光増感用化合 物と接触させ、そして (b)該光増感用化合物により吸収される波長でのレーザー光線を用いて該 組織、傷または病変部を照射することにより、 該組織、傷または病変部を消毒あるいは滅菌するのに使用するための薬剤の製造 において前記光増感用化合物の使用。 ３．(i) 慢性歯周炎を治療するために歯周嚢における病原性微生物の殺微生物 、 (ii)炎症性歯周疾患を治療または防止するために、歯と歯肉との間の領域 における病原性微生物の殺微生物、 (iii)充てんまえの、穿孔されたう食性損傷の消毒または滅菌。 (iv)むしばを治療または防止するために、歯表面上のう食原性微生物の殺 微生物、 (v) 歯科手術処置における象牙質組織または歯肉組織の消毒または滅菌、 および (vi)ＡＩＤＳ患者、易感染性患者または義歯性口内炎を有する患者におけ る、口腔内カンジダ症の治療、 のための請求の範囲第１項に記載の方法または請求の範囲第２項に記載の使用。 ４．光増感剤が、 アリアノルスチールブルー（ａｒｉａｎｏｒ ｓｔｅｅｌ ｂｌｕｅ）、 トルイジンブルー Ｏ（ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ ｂｌｕｅ Ｏ）、 クリスタルバイオレット、 メチレンブルー、 アズレブルーセルト（ａｚｕｒｅ ｂｌｕｅ ｃｅｒｔ）、 アズレＢクロリド（ａｚｕｒｅ Ｂ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、 アズレ ２（ａｚｕｒｅ ２）、 アズレＡクロリド（ａｚｕｒｅ Ａ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、 アズレＢテトラフルオロボーレート（ａｚｕｒｅ Ｂ ｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏ ｂｏｒａｔｅ）、 チオニン、 アズレＡエオシネート（ａｚｕｒｅ Ａ ｅｏｃｉｎａｔｅ）、 アズレＢエオシネート（ａｚｕｒｅ Ｂ ｅｏｃｉｎａｔｅ）、 アズレミックスシック（ａｚｕｒｅ ｍｉｘ ｓｉｃｃ）、 アズレＩＩエオシネート（ａｚｕｒｅ ＩＩ ｅｏｃｉｎａｔｅ）、 ヘマトポルフィリンＨＣｌ（ｈａｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ ＨＣｌ）、 ヘマトポルフイリンエステル（ｈａｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ ester）、 アルミニウム二スルホン化フタロシアニン（ａｌｕｍｉｎｉｕｍ ｄｉｓｕｌｐ ｈｏｎａｔｅｄ ｐｈｔｈａｌｏｃ ｙａｎｉｎ）および クロリンス（ｃｈｌｏｒｉｎｓ）から選ばれる、請求の範囲第１項〜第３項のい ずれか１項に記載の方法または使用。 ５．レーザー光線がヘリウムネオンガスレーザーからの光線または砒化ガリウ ムレーザーからの光線である、請求の範囲第１項〜第４項のいずれか１項に記載 の方法または使用。 ６．レーザーが１〜１００ｍＷの出力および１〜１０ｍｍのビーム直径を有す る、請求の範囲第１項〜第５項のいずれか１項に記載の方法または使用。 ７．レーザー照射の時間が１秒〜５分であり、そして光線投射量が５〜３０Ｊ ・ｃｍ^-2である、請求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載の方法または 使用。 ８．光増感剤が、０．００００１〜１％ｗ／ｖの濃度で該組織、傷または病変 部中にまたはそれらの上に存在する、請求の範囲第１項〜第７項のいずれか１項 に記載の方法または使用。 ９．光増感剤が製薬的に許容できる水性担体中の溶液で光増感剤を含む製薬組 成物の形で使用される、請求の範囲第１項〜第８項のいずれか１項に記載の方法 または使用。 10．製薬組成物が、緩衝剤、溶液の張度を調節するための塩、酸化防止剤、保 存料、ゲル化剤およびミネラル質再付加剤 （ｒｅｍｉｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）から選ばれた１種またはそ れ以上の補助用成分をさらに含む、請求の範囲第９項に記載の方法または使用。