JPH08500386A

JPH08500386A - 架橋ポリマーアンモニウム塩

Info

Publication number: JPH08500386A
Application number: JP6506438A
Authority: JP
Inventors: フイグリー，ギヤレツト・ダニエル
Original assignee: イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー
Priority date: 1992-08-20
Filing date: 1993-08-18
Publication date: 1996-01-16
Also published as: CA2142826A1; NZ255758A; IL106733A; DE69319914T2; WO1994004596A1; PL307527A1; ES2118254T3; US5667774A; KR950703016A; EP0656029B1; AU672824B2; EP0656029A1; HU9500475D0; IL106733A0; ZA936127B; DK0656029T3; FI950704A; GR3027584T3; RU95107405A; SK31395A3

Abstract

(57)【要約】新規な架橋ポリマーアンモニウム塩を開示し、ここで該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上は基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、ここで該ｎ−アルキレン基は炭素数が７〜約２０であり；アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％は基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト又はシリル基、あるいは複素環を含むことができ；アンモニウム原子の約２５％又はそれ以上は第２アンモニウム原子である。

Description

【発明の詳細な説明】架橋ポリマーアンモニウム塩発明の分野本発明は新規な架橋ポリマーアンモニウム塩に関する。これらの組成物の用途は吸収剤、導電剤（ｅｌｅｃｔｒｏｃｏｎｄｕｃｔｉｖｅａｇｅｎｔ）、電荷移動剤（ｃｈａｒｇｅｔｒａｎｓｆｅｒａｇｅｎｔ）、キレート化剤及びイオン交換樹脂である。これらの塩は胆汁酸封鎖剤（ｓｅｑｕｅｓｔｒａｎｔｓ）としても有用であり、すなわち経口的に投与するとポリマー哺乳類における血中コレステロール量を低下させる。技術的背景米国特許第４，０７１，４７８号明細書は、ポリマー主鎖にトリメチレン基により隔てられた第４アンモニウム基を有する架橋ポリマーの利用につき記載している。第４アンモニウム塩ではないアンモニウム塩を含むポリマーの利用は言及されていない。米国特許第４，７７５，３８４号明細書は、２つのハロゲン基を有する種々の有機化合物と種々のジアミンとのポリマーアンモニウム塩を形成する反応につき記載している。これらの塩は水溶性であり、かくして架橋していないと記載されている。これらはさらに反応させた後、繊維仕上げ剤として有用であると記載されている。米国特許第４，１４７，５８６号明細書は、ある種のジハロアルカンとアルキレンジアミンの水溶性の「付加物」を形成する反応につき記載している。付加物はエピハロヒドリンと反応させた後、紙の湿潤強度を増すのに有用である。数種の胆汁酸封鎖剤が既知である。これらのいくつかはアンモニウム塩（塩の形態のアミン基）を含むポリマーであり、アンモニウム塩はポリマー分子に結合しているか、又はその一部である。そのようなポリマーは胆汁酸へのその結合能力、その毒性及びその投与の容易さが異なる。かくして改良された胆汁酸封鎖剤が依然として求められている。米国特許第３，３８３，２８１号明細書は、アミン基を有する架橋ポリマーの胆汁酸封鎖剤としての利用につき記載している。特に第４アンモニウム基を有する架橋スチレンの利用が記載されている。イオン交換樹脂としても有用なそのような樹脂は、血中コレステロール量を低下させるのに用いられる商業的に入手可能なコレスチラミンの活性成分であると思われる。米国特許第４，０２７，００９号明細書は、ポリマー主鎖に第４アンモニウム基を有する直鎖状（非架橋）ポリマーの胆汁酸封鎖剤としての利用につき記載している。ポリマーの窒素原子は指定された大きさのメチレン鎖により、又は他の指定された基により結合している。この特許において架橋ポリマーの利用については（背景に関する情報を除いて）、又は第４アンモニウム塩ではないアンモニウム塩を含むポリマーの利用については言及されていない。発明の概要本発明は胆汁酸封鎖剤として、吸収剤として、又は電荷移動剤として有用な架橋ポリマーアンモニウム塩を包含し、該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上は基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、該ｎ−アルキレン基は炭素数が７〜約２０であり；アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％は基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上、好ましくは２〜５０のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト、エステル、シリル基又は複素環を含むか、それらにより置換されていることができアンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上は第２アンモニウム窒素原子である。さらに本発明は、治療的有効量の架橋ポリマーアンモニウム塩を経口的に投与することから成る、哺乳類の血漿コレステロールレベルを低下させる方法に関し、該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上は基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、該ｎ −アルキレン基は炭素数が７〜約１５であり；アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％は基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上、好ましくは２〜５０のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、エステル、アミノ、チオエーテル、ケト、エステル、シリル基又は複素環を含むか、それらにより置換されていることができ；アンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上は第２アンモニウム窒素原子である。本発明は水性媒体中で胆汁酸及び架橋ポリマーアンモニウム塩を接触させることから成る胆汁酸の封鎖（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｉｎｇ）の方法を包含し、該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上は基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、該ｎ −アルキレン基は炭素数が７〜約１５であり；アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％は基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上、好ましくは２〜５０のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、エステル、アミノ、チオエーテル、ケト、シリル基又は複素環を含むか、それらにより置換されていることができ；アンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上は第２アンモニウム窒素原子である。上記で定義した実施態様において、ヒドロカルビレン上の置換基の炭素数は１〜５０であるのが好ましく、１〜３０がより好ましい。上記の架橋ポリマー塩の製薬学的に許容し得る塩及びプロドラッグは本発明に含まれる。発明の詳細本明細書で用いられ、記載されている材料は架橋ポリマーアンモニウム塩である。架橋は網目構造を有するポリマーを意味する。ポリマーが架橋しているか否かを決定する通常の試験は、通常そのポリマーに対する溶剤である液体にポリマーを溶解してみることである。直鎖状もしくは分枝鎖状であるが架橋していないポリマーは溶剤に溶解する。架橋ポリマーはある程度膨潤するが溶解しない。本明細書に記載のポリマーアンモニウム塩は、架橋していない場合一般に水又は他の極性溶媒に可溶性である。架橋するとポリマーアンモニウム塩は水に膨潤し、多くの場合ゲル一様材料を形成する。胆汁酸封鎖剤として、又は血漿コレステロール量の低下のために用いる場合、本発明の架橋ポリマーアンモニウム塩は乾燥又はほとんど乾燥状態で、あるいは水に膨潤させて用いることができる。用いられるポリマーアンモニウム塩は少なくとも約４、好ましくは約５〜２５、より好ましくは約１０〜１５の膨潤因子を有するのが好ましい。膨潤因子は、ポリマーにより吸収された水の重量を用いたポリマーの重量で割った商として理解される。好ましい程度まで膨潤する架橋ポリマーアンモニウム塩は、血漿コレステロール量の低下剤として胆汁酸の封鎖の容量の増加及び刺激を少なくする柔らかいゲルテキスチャーなどのある種の利点を有する。アンモニウム塩又はイオンは、４つの他の原子に結合した窒素原子、例えばアンモニウムイオン自身の場合４つの水素原子に結合した窒素原子を意味する。第１アンモニウムイオンの場合、窒素原子は３つの水素原子及び１つの炭素原子に結合しており、第２アンモニウムイオンの場合、それは２つの炭素原子及び２つの水素原子に結合しており、第３アンモニウムの場合は３つの炭素原子及び１つの水素原子、ならびに第４アンモニウムイオンの場合は４つの炭素原子に結合している。本発明のポリマーアンモニウム塩の場合、アンモニウム窒素原子の少なくとも２５％、好ましくは少なくとも４０％が第２アンモニウム窒素原子である。１つの好ましい実施態様の場合、ポリマー中の合計アンモニウム窒素原子において第１アンモニウム窒素原子は１５〜２５％であり、第２アンモニウム窒素原子は４０〜６０％であり、第３アンモニウム窒素原子は１５〜２５％であり、第４アンモニウム窒素原子は５％未満である。どの種類のアンモニウム窒素原子が存在するかの決定は実施例５３に例示する。アンモニウム塩の各窒素原子は１つの正の電荷を有し、各アンモニウムイオンの正の電荷に対する対イオンが近接している。対イオンは、その共役（Ｂｒｏｎｓｔｅｄ）酸がアンモニウム塩の共役塩基をプロトン化することができるいずれの負のイオンであることもできる。コレステロール低下剤として用いる場合、対イオンは生物学的に適合性でなければならず、すなわち実質的に望ましくない生理学的変化を起こさないものでなければならない。生物学的に適合する適した対イオンにはクロリド、ブロミド、ヨーダイド、サルフェート、ホスフェート、アセテート、アスコルベート、カーボネート、ビカーボネート、ニコチネート、サリチレート、タルタレート及びサイトレートが含まれる。クロリドイオンが特に好ましい対イオンである。ポリマーのアンモニウム塩（イオン）の窒素原子は、それらが末端基でなければポリマーセグメントの間に位置する。本明細書でＹと指定され、これらの窒素原子に結合しているこのような基の少なくとも約２５％は炭素数が７〜約２０のｎ−アルキレン基から独立して選ばれる。本明細書でｎ−アルキレン基は基−（ＣＨ₂）_b−を意味し、ここでｂはこの場合７〜約２０である。このｎ−アルキレン基Ｙはアルキル基により置換されていることもでき、その場合実際は分枝鎖状アルキレン基である。ｎ−アルキレン基の炭素数は７〜１４が好ましく、９〜１２がより好ましい。窒素原子間の距離が少なくとも７メチレン基に相当する場合のような他のヒドロカルビレン基も有効であるものとする。アンモニウム塩の他の窒素原子は本明細書でＺと指定されるヒドロカルビレン基により結合しており、炭素数が２又はそれ以上、好ましくは２〜５０であり、すなわち窒素原子間に少なくとも２つの炭素原子がなければならない。本明細書でヒドロカルビレンは炭素及び水素のみを含む２価の基を意味する。ヒドロカルビレン基Ｚは種々の置換基により置換されていることができる。ヒドロカルビレン基は飽和であるのが好ましい。置換基にはエーテル、エステルアミノ、チオエーテル、ケト、シリル基又は複素環が含まれる。好ましい置換基はエーテル及びアミノである。ヒドロカルビレン基Ｚは炭素数が２〜１４のｎ−アルキレン基であるのが好ましい。置換基の炭素数が１〜５０であるのも好ましく、１〜３０がより好ましい。本ポリマーアンモニウム塩の製造の１つの方法は、有機ジハライドとその両アミン基が第１アミンであるジアミンの反応である。本議論を目的とする場合、ジハライドはＸ−Ｙ−Ｘ及び／又はＸ−Ｚ−Ｘにより示すことができ、ここでＸは塩素、臭素又はヨウ素であり（臭素が好ましく）、Ｙ又はＺは両ハロゲン原子が結合している基である。ジアミンはＨ₂Ｎ−Ｙ−ＮＨ₂及び／又はＨ₂Ｎ−Ｚ−ＮＨ₂により示すことができ、ここでＹ又はＺは２つのアミノ基が結合している基である。所望のポリマーを得るために、ジハライドの少なくともいくつか、及び／又はジアミンの少なくともいくつかは上記のＹを含まなければならない。所望のポリマーを最適に得るために、Ｙ又はＺ基はハロゲン原子が約７又はそれ以上のメチレン基に相当する距離で離れる、すなわち７つのメチレン基により、あるいはメチレン基により隔てられていない場合はそれに相当する距離で隔てられるような寸法でなければならないことが見いだされた。ハロゲン原子のこの最低隔離がないと、ジハライドは最初のハロゲンがアミンと反応した後に「バックバイト（ｂａｃｋｂｉｔｅ）」を起こして望ましくない環状構造を与える傾向があると思われる。かくして多くの場合、ジハライドがＸ−Ｙ−Ｘであるのが便利である（必要ではない）。基Ｙ及びＺは特定のポリマーにおける各位置で独立して選ぶことができる。有用なジハライドには１，１０−ジブロモデカン、１，１２−ジブロモドデカン、１，８−ジブロモオクタン、１，１８−ジブロモオクタデカン、１，９−ジブロモノナン、１，７−ジブロモヘプタン、１，８−ジヨードオクタン、１，８ −ジブロモ−３−エチルオクタン及び１，９−ジブロモデカンが含まれるがこれらに限られるわけではない。有用なジアミンにはエチレンジアミン、１，６−ジアミノヘキサン、１，１２−ジァミノドデカン、２−メチル−１，５−ジアミノペンタン、１，４−ビス（アミノメチル）シクロヘキサン、１，３−ジアミノペンタン、ジエチレントリアミン、１，４−ビス（３−アミノプロピル）ピペラジン、１，４−シクロヘキサンジアミン、５−アミノ−１−アミノメチル−１，３，３−トリメチルシクロヘキサン、１，３−プロパンジアミン、１，４−ブタンジアミン、１，５−ペンタンジアミン、１，７−ヘキサンジァミン、１，８−ジアミノオクタン、１，９−ジアミノノナン、１，１０−ジアミノデカン、１，１１−ジアミノウンデカン、２−ヒドロキシ−１，３−プロパンジアミン及び４，４’−メチレンビス（シクロヘキシルアミン）が含まれるがこれらに限られるわけではない。例えば基Ｙ及びＺの合計の少なくとも約２５％がＹでなければならないなどのポリマー構造に課せられた制限が満たされれば、１種以上のジアミン及び／又はジハライドを用いることができる。ポリマーアンモニウム塩はジアミンとジエポキシドの反応によっても製造することができる。この場合、ジアミンは窒素原子が炭素数が７〜約２０のｎ−アルキレン基（アルキル置換されていることができる）により結合しているジアミンである。そのような封鎖剤の製造に関して実施例５７〜６３を参照されたい。これらのポリマーの合成後、アミンを酸で中和することによりアンモニウム塩が形成される。本明細書に記載のポリアミン（及びそれらの塩）は、典型的に（置換）アルキルハライドとの反応によりさらに置換され、例えば第１アミンから第２アミン（塩）、及び第２アミンから第３アミンを形成している窒素原子を有することができる。しかし得られるポリアミン（塩）においてアミノ（アンモニウム）窒素原子の２５％又はそれ以上はやはり第２でなければならない。窒素原子上でさらに置換された基Ｑは、炭素数が１〜５０のヒドロカルビル基であり、１つ又はそれ以上のヒドロキシ、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト、シリル基又は複素環を有することができる。Ｑは炭素数が１〜３０であるのが好ましい。そのようなポリアミン塩は実施例３９〜５０、６９及び７０に記載されている。ポリマーアンモニウム塩は上記のジアミン及びジハライド又はジエポキシドから、反応物を溶媒、典型的にメタノール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、水及びそれらの混合物などの極性溶媒中に溶解することにより製造することができる。温度は重要ではなく、周囲温度から溶媒（又はそれより沸点の低い成分）の沸点までを用いることができる。温度、反応物及び溶媒に依存して反応は数分から数日、典型的に約１〜８時間で完了する。反応は溶液の粘度の観察により追跡することができ、粘度はゲルが形成されるまで、又はポリマー生成物が沈澱するまで徐々に増加する。ポリマーが沈澱（その場合は濾過により単離することができる）しない場合、ポリマーが溶解性でなく、ポリマーが沈澱する溶媒、例えばテトラヒドロフランにゲルを加えることにより、得られたゲルからポリマーを回収することができる。本目的の場合、大体等モル量のジアミン及びジハライドを用いるのが望ましい。方法は不活性ガス（酸素を含まない）シール下で行い、アミンの望ましくない酸化を避けるのが好ましい。ポリマーの対イオンを変えたい場合、これは溶媒を加えてゲルを形成し、水酸化アンモニウム又はＮａＯＨなどの塩基を加えて最初の対イオンとの塩を形成し、洗浄により塩を除去し、次いで所望の対イオンの共役酸で再度酸性化することにより行うことができる。この種の方法は当該技術において既知である。本発明のポリマーの製造法の場合、通常ポリマーであるが架橋していないいくつかの反応物が少量存在する。この非架橋（従って溶解性）画分を除去したい場合、これは非架橋ポリマーが溶解する溶媒、例えば水又はメタノールを用いてポリマーアンモニウム塩を抽出することにより行うことができる。例えば実施例１を参照されたい。架橋濃度（水中における膨潤因子により測定）は、溶媒、温度及び反応時間の適切な使用により制御することができる。いくつかの溶媒（例えはＨ₂Ｏ、ＥｔＯＨ）は単独で用いると、水中でほとんど膨潤しないポリマーを与える。溶媒のＭｅＯＨなどの溶媒との混合物は膨潤性の高いポリマーを与えることができる。短かい反応時間及び／又は低い温度は低い架橋度及び高い膨潤度を与える。架橋は少量の３又はそれ以上の官能基性アミン又はハライドの使用によっても行うことができる（実施例６７参照）。架橋は又、非架橋ポリマーアンモニウム塩を電離線に暴露することによっても行うことができる。上記の実施態様において、胆汁酸封鎖剤のために用いる場合、ポリマーアンモニウム塩は水中で少なくとも約４の膨潤因子を有するのが好ましい。ポリマーの膨潤性の程度は３つの主因子により決定される。これらの１つはポリマーにおける塩形成の程度、すなわち存在するアミノ窒素原子の何パーセントがその塩の形態であるかである。このパーセンテージが高い程ポリマーはより膨潤する。アミノ基の少なくとも８０％がその塩の形態であるのが好ましく、少なくとも約９０％が塩の形態であるのがより好ましい。本明細書においてポリマー中のアミノ基の少なくとも約５０％がその塩の形態であるポリマーが「ポリマーアンモニウム塩」の定義内に含まれる。膨潤性を制御する他の因子は、窒素原子の間の基の親水性である。一般にこれらの基がより多くの炭素原子を含む程それらは親水性が低く、ポリマーは水中の膨潤度が低い。最後の制御因子は架橋濃度である。典型的に架橋濃度が高い程、ポリマーの膨潤度が低い。ポリマー合成及び取り扱いの間の条件はこれらの因子に影響を与える。かくして反応溶液におけるモノマー濃度の減少と共に膨潤度が増加し、高希釈度において鋭い増加を見せる。反応時間も重要である。より長いインキュベーション時間において、反応物は反応してより高分子量のポリマーを形成する。反応温度はＭＷ成長に寄与し、高い反応温度はより短時間でより高い分子量（架橋度が高い）を与える。仕上げ法も低分子量ポリマーを除去し、膨潤度を下げる。塩基水溶液、次いで酸で生成物を洗浄すると、ポリマーが収縮し、再膨潤し、可溶性成分を絞り出す。ソックスレー装置で有機溶媒、次いで水を用いてポリマーを連続的に抽出した後、さらに膨潤度の低下が観察される。重合のための溶媒の選択は、最終生成物の膨潤性に大きな影響を有する。反応物を溶解しない媒体においては、基本的に０の膨潤度が得られる。ジブロモデカンが有機相に溶解し、ヘキサメチレンジアミンが水に溶解した界面系においては、膨潤度が非常に低い。生成される酸副生成物を中和することにより、膨潤度をわずかに上げることができる。高い膨潤度のポリマーの形成は、両反応物を溶解する溶媒、特に２極性非プロトン性溶媒により促進される。ポリマーアンモニウム塩は胆汁酸封鎖剤（血漿レステロール量を低下させる）、水又は溶媒吸収剤、導電剤、電荷移動剤、キレート化剤及びイオン交換樹脂として有用である。上章に記載の通り、本発明の架橋ポリマーアンモニウム塩の用途は、哺乳類における血漿コレステロールを低下させるための胆汁酸封鎖剤としての用途である。冠血管及び末梢血管疾患は西洋社会における主な問題であり、高い血中コレステロール量は人間と同様に動物におけるアテローム動脈硬化症の発現における主な危険因子の１つである。脂質−低下剤を用いたいくつかの研究により、虚血性心疾患の予防におけるコレステロール及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）コレステロールの低下の有益な効果が示された。体がコレステロールを除去する定量的に有意な唯一の方法は胆汁を介し、未変化の形態で、又は胆汁酸への変換の後にステロールを排泄することによる方法である。コレステロールは肝臓で胆汁酸に異化され、それは胆管を通って腸に輸送されて飲食脂質の吸収を容易にする。腸に分泌される胆汁酸の約９５％は再吸収される。少量の胆汁酸が失われ、便と共に排泄される。損失は新しい合成により補足される。動物及び人間の場合、腸で胆汁酸と結合してその再吸収を妨げるコレスチラミンのような胆汁酸結合樹脂を用いた処置は、便の胆汁酸排泄を増加させる。胆汁酸の便による損失の増加は肝臓のコレステロールからの胆汁酸合成の賦活により釣り合わされ、血漿コレステロール量の低下を生ずる。胆汁酸封鎖剤処置の後の血漿コレステロールの低下は、ＬＤＬレセプター活性の強化を介した肝臓コレステロール吸収の増加によることが示された。下記の実施例に記載する通り、本発明の架橋ポリマーアンモニウム塩は有効に胆汁酸に結合し、動物に投与した場合に血漿コレステロール量を低下させるのに有効である。上記の架橋ポリマーアンモニウム塩の製薬学的に許容し得る塩及びプロドラッグも本発明に含まれる。本明細書で用いられる「製薬学的に許容し得る塩及びプロドラッグ」は開示された化合物の誘導体を言い、それは酸塩の形成により、あるいは化合物中に存在する官能基を、日常的取り扱いで、又は生体内で修飾が切断されて元の化合物となるような方法で修飾することにより改変されている。例にはアセテート、ホルメート及びベンゾエート誘導体などが含まれるがこれらに限られるわけではない。本発明の化合物の製薬学的に許容し得る塩は、水又は有機溶媒、あるいは２つの混合物中で遊離の塩基の形態のこれらの化合物を化学量論的量の適した酸と反応させることにより製造することができる。適した塩のリストはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１７ｔｈｅｄ．，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見いだされ、その開示は引用することにより本明細書の内容となる。投薬量及び調剤本発明の胆汁酸封鎖剤ポリマーは、哺乳類の腸で活性試薬と胆汁酸を接触させるいずれの方法によっても、コレステロール低下剤として投与することができる。本発明の胆汁酸封鎖剤ポリマーは経口的に投与するのが好ましく、個別の治療薬として、又は他のコレステロール低下剤及び冠血管疾患の処置のための他の薬などの他の治療薬と組み合わせて投与することができる。それらは単独で投与することができるが、一般に標準的製薬学的実行に基づいて選ばれる製薬学的担体と共に投与される。もちろん投与される投薬量は特定の試薬の薬物動態学的性質ならびにその投与の様式及び経路、受容者の年令、健康及び体重、症状の性質及び程度、同時に行う処置の種類、処置の頻度、ならびに所望の効果などの既知の因子に依存して変わる。例えば活性成分の１日の投薬量は約０．１〜１０グラムの経口投薬量で、それを１日に１〜４回投与することができる。本発明の胆汁酸封鎖剤ポリマーは、血清コレステロール量の必要な低下を達成するのに十分な１カ月又はそれ以上の連続治療期間の間、投与することができる。投薬形態（投与に適した組成物）は単位当たり約０．１グラム〜約１０グラムの活性成分を含む。これらの製薬学的組成物において活性成分は、組成物の合計重量に基づいて通常約２０〜９５重量％の量で存在する。活性成分は、カプセル、錠剤及び粉剤などの固体投薬形態で、又はエリキサー、シロップ及び懸濁剤などの液体投薬形態で経口的に投与することができる。本発明のポリマーの投薬形態の調剤は、水又は他の溶媒による特定のポリマーの膨潤を考慮しなければならない。本発明のポリマーはパン、クッキー、ケーキ、穀物、デザートなどの多様な固体食品に挿入することもできる。本発明のポリマーは、固体胆汁酸封鎖剤ポリマーを含む錠剤又はゼラチンカプセルとして、あるいは適した懸濁剤を含む固体ポリマーの水性もしくは半−水性懸濁液として投与することができる。ゼラチンカプセルは活性成分及び粉末担体、例えばラクトース、澱粉、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などを含む。類似の希釈剤を圧縮錠剤の製造に用いることができる。錠剤及びカプセルの両者は持効性製品として製造し、何時間もかけた連続的放出による投薬を与えることができる。圧縮錠剤は糖コーティング又はフィルムコーティングし、不快な味を覆い、錠剤を大気から保護するか、あるいは胃腸管における選択的崩壊のために腸溶コーティングすることができる。経口的投与のための液体投薬形態は、患者の受容性を増すために着色剤及び風味料を含むことができる。一般に水、適した油、生理食塩水、デキストロース水溶液（グルコース）及び関連糖溶液、ならびにグリコール、例えばプロピレングリコール又はポリエチレングリコールが適した担体である。単独の、又は組み合わせた亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム又はアスコルビン酸などの酸化防止剤は適した安定剤である。クエン酸及びその塩ならびにナトリウムＥＤＴＡも用いられる。さらに溶液は防腐剤、例えばベンズアルコニウムクロリド、メチル−もしくはプロピル−パラベン、及びクロロブタノールを含むことができる。本発明の製薬学的組成物は薬学の分野における熟練者に既知の方法により調製することができる。適した製薬学的担体及び調剤は当該分野における標準的参照文献であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙに記載されている。本発明のポリマーの投与のために有用な製薬学的投薬形態は以下の通りに例示することができる：カプセル標準的ツーピース硬質ゼラチンカプセルにそれぞれ０．５グラムの粉末活性成分、１５０ミリグラムのラクトース、５０ミリグラムのセルロース及び６ミリグラムのステアリン酸マグネシウムを充填することにより、多数の単位カプセルを調製する。軟質ゼラチンカプセル大豆油、綿実油又はオリーブ油などの消化可能な油中の活性成分の混合物を調製し、容量型ポンプを用いてゼラチン中に注入し、０．５グラムの活性成分を含む軟質ゼラチンカプセルを形成する。カプセルを洗浄し、乾燥する。錠剤従来の方法により、投薬単位が０．５グラムの活性成分、０．２ミリグラムのコロイドシリカ、０．５グラムのステアリン酸マグネシウム、２７５ミリグラムの微結晶セルロース、１１ミリグラムの澱粉及び９８．８ミリグラムのラクトースである多数の錠剤を調製する。口当たりの良さを増すために、又は遅延吸収のために適したコーティングを適用することができる。懸濁液：各投薬量が５００ミリグラムの微粉砕ゲル化活性成分、２００ミリグラムのナトリウムカルボキシメチルセルロース、５ミリグラムの安息香酸ナトリウム、１．０グラムのソルビトール溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．及び０．０２５ミリリットルのバニリンを含む水性懸濁液を経口的投与のために調製する。以下の実施例においてＭｅＯＨはメタノールであり、ＥｔＯＨはエタノールであり、ＤＭＡＣはＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドであり、ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである。ポリマー膨潤因子の決定予備乾燥し、風袋を計った１５０ｍＬの粗ガラス濾過器に約１ｇのポリマーを加える。濾過器の軸をゴム栓で密閉する。濾過器を濾過フラスコ上に置き、約１００ｍＬの蒸留水を約２５℃で濾過器に加える。必要なら内容物を撹拌して水及びポリマーを完全に分散する。次いで内容物を１５分間静置する。次いでゴム栓を濾過器の軸から除去し、濾過器を５分間吸引する。次いで軸及び濾過器の下側をエタノールで濯ぎ、残留水滴を除去し、次いで吸引をさらに５分間続ける。ペーパータオルで濾過器から残留水滴を拭き取る。次いで濾過器及び内容物を秤量してポリマーにより保持された水の重量を決定する。膨潤因子＝（湿潤ポリマー＋濾過器の合計重量）− （乾燥ポリマー＋濾過器の合計重量）／乾燥ポリマーの重量＝湿潤重量−乾燥重量／乾燥重量＝保持された水のｇ／ポリマーのｇ実施例１すべてのポリマーを類似の条件下で製造した。以下の方法は用いた方法を示す。加熱マントル、還流コンデンサー、頭頂撹拌機、及び窒素導入口を備えた１Ｌの三口フラスコに１３０ｍＬのＤＭＦ、１３０ｍｌのＭｅＯＨ、４６．４ｇ（０．４０モル）のヘキサメチレンジアミン及び１２０．０ｇ（０．４０モル）の１，１０−ジブロモデカンを加えた。得られた均一溶液を急速に撹拌し、加熱還流した。０．５〜３時間の還流の後、フラスコの内容物全体は膨潤し、ゲル化した塊となった。撹拌を止め、フラスコをさらに１８〜２１時間穏やかに加熱した。加熱後、ゲルを室温に冷却し、反応容器からすくい出した。次いでゲルを同体積のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）と共にＷａｒｉｎｇブレンダーに入れ、ブレンダー中で粉砕した。各細断の間に濾過を行いながらその方法を少なくとも３回繰り返した。次いで得られた洗浄ポリマーを、５０〜１２０℃に設定した真空炉中に１〜３日間入れ、乾燥した。乾燥重量は１６０ｇ（９６％）であった。純度の確認のために、続いてポリマーをメタノールを用いて３．５日間、水を用いてさらに３．５日間ソックスレー抽出した。この方法の間に生成物の塊の約３０％が溶媒中に抽出された。得られたポリマーを真空下で乾燥し、顆粒状のクリーム色の生成物を得た。ポリマーはわずかな「ナッツ」様の匂いを有した。ブロミド対イオン又は他の対イオンは、膨潤湿潤（Ｈ₂Ｏ）ポリマーを水酸化アンモニウムの１０％溶液に暴露することにより容易に交換することができる。中和ポリマーは収縮し（脱膨潤）、それを濾過し、得られる濾液がｐＨ紙で中性となるまで水で洗浄する。次いでポリマーを適した酸を用いて再度酸性化し、所望の対イオン（例えばＣｌ−イオンの場合はＨＣｌ、アセテートイオンの場合はＨＯＡｃなど）を得る。再度酸性化するとポリマーは再び膨潤する。次いで膨潤したポリマーを、濾液がｐＨ紙で中性となるまで水で洗浄し、真空下で乾燥して異なる対イオンを有する顆粒状ポリマーを得る。実施例２〜３８、表１は実施例１と類似の方法で行った。還流及び加熱時間は実施例１と同様であった。実施例３９〜５０置換ポリマーの製造すべてのポリマーは類似の方法で製造した。ポリアミンを最初に合成し、次いでその後の反応すべてに用いた。ポリマーは実施例１の通りに合成し、３Ｌの水中で完全にそれが膨潤するまで（約１時間）撹拌した。その時点で４００ｍｌの濃水酸化アンモニウムを膨潤ポリマースラリに加え、混合物を少なくとも１５分間撹拌した。次いで生成物を濾過し、濾液が中性となるまで水で洗浄した。真空炉において６０℃で乾燥した後、５４．６ｇ（８８．７％）のポリアミンが回収された。実施例３９１００ｍＬの三口丸底フラスコ中に２０ｍＬのＤＭＦ、２０ｍＬの蒸留水、３．０ｇの上記で製造したポリアミン及び２．３２ｇの１−ブロモオクタンを入れた。混合物を少なくとも１８時間還流し、その後フラスコの内容物を１００ｍＬのＴＨＦ中に注ぎ、３０分間撹拌した。この時点で生成物を乾燥し、秤量してポリマー置換の程度を決定することができる。次いで生成物を１００ｍＬの１０％ＨＢｒ／水溶液に加え、少なくとも３０分間撹拌し、濾過し、濾液がｐＨ紙で中性となるまで水で洗浄した。得られるポリマーを次いで真空炉で乾燥した。置換ポリマーの最終的収量は５．６５ｇ（８８．８％）であった。以下のポリマーを同一の方法で、以下の成分及び量を用いて製造した。表２を参照されたい。実施例５１大量のポリマーの製造氷浴、頭頂撹拌機、還流コンデンサー、温度計及び窒素導入口を備えた５Ｌの三口丸底フラスコに１ＬのＤＭＦ、１Ｌのメタノール、３８６．７ｇ（３．３３モル）のヘキサメチレンジアミン及び１０００．０ｇ（３．３３モル）の１，１０−ジブロモデカンを加えた。得られる均一溶液を加熱せずに急速に撹拌した。１０分以内に溶液は８２℃の温度となり、還流が起こった。この時点で氷浴に氷を加えて還流の一定の速度を維持した。２０分後、初期の反応熱が消費され、還流が止まった。この時点で氷浴を取り去り、加熱マントルをフラスコ上に置いた。次いでフラスコを加熱して溶媒の一定の還流を維持した。反応溶液を加熱し、急速に撹拌すると反応物の粘度が増加し始めた。反応物の加熱の開始後２０〜３０分以内に混合物はもはや撹拌できない粘度に達した。この時点で撹拌機を止めた。得られた膨潤し、ゲル化した塊を次いで３０℃〜５０℃にさらに１８〜２１時間、穏やかに加熱した。ゲルを室温に冷却し、反応容器からすくい出した。次いでゲルを同体積の１０％水酸化アンモニウム水溶液と共にブレンダーに入れ、ブレンダー中で粉砕した。得られたポリマーを濾過し、次いで１０％水酸化アンモニウム水溶液中で１時間スラリ化した。次いでポリマーを濾過し、濾液が中性となるまで蒸留水で洗浄した。続いてポリマーを１０ＬのＨＣｌ水溶液（４Ｌの濃ＨＣ１＋６Ｌの水）で処理した。次いでポリマーを濾過し、濾液が中性となるまで蒸留水で洗浄した。次いでポリマーをメタノールで洗浄し、メタノール中でスラリ化した。スラリ化ポリマーを次いで５Ｌのソックスレー抽出円筒濾紙中に入れ、メタノールで３〜４日、及び水でさらに３〜４日抽出した。次いでポリマーを抽出円筒濾紙から取り出し、真空炉において６０℃で２〜３日乾燥し、クロリド対イオンを有する最終的ポリアンモニウム生成物を得た。理論的収量は１０８９ｇであった。抽出前の収量は８２３ｇであった。抽出後の収量は８００ｇであった。ポリマーはブレンダー又はコーヒーミルで粉砕し、３０〜５００ミクロンの粒径を得ることができた。１００メッシュのスクリーンを通した高速ハンマーミルは３０〜１５０ミクロンの範囲の粒径を与えた。エアジェット超微粉砕は３０〜１５０ミクロンの範囲の粒径を与えた。液体窒素の存在下の摩砕機における粉砕は１ミクロンもの小さい粒径を与えた。ほとんどの場合、材料は使用前にコーヒーミルで粉砕した。実施例５２実施例１で製造したポリマーの膨潤（Ｂｒ^-イオン）実施例１で製造した０．５ｇのポリアンモニウムブロミドに１３ｍＬの蒸留水を加えた。数分以内にポリマーは膨潤してその体積の水を完全に吸収した。バイアルを逆転させた時、液体の水は流れ出なかった。この挙動は、このポリマーに関して少なくとも２６：１（２６００％）の膨潤因子を示している。実施例５３実施例１の通りに製造したポリマー（Ｂｒ^-イオン）の分枝鎖／架橋の程度の決定実施例１に記載の通りに製造したポリアンモニウムブロミドを１０ｍｍのＮＭＲ管に入れた。これにポリマーのスラリ化に十分なジオキサンを加えた。次いで水（Ｄ₂Ｏ）を加えてポリマーを膨潤させた。次いで試料につき¹³ＣＮＭＲスペクトルをとった。ポリマー構造に含まれる種々の可能な窒素種に隣接する炭素原子に関して以下のシグナルが観察された。４０．１０ｐｐｍ（−Ｃ−ＮＨ₃ ⁺）（１０．２４積分単位（ｉｎｔｅｇｒａｌｕｎｉｔ）；４８．２７ｐｐｍ（− Ｃ−ＮＨ₂ ⁺−Ｃ−）在率（ａｂｕｎｄａｎｃｅ）は以下の通りに算出された：第１Ｎ（４０．１０ｐｐｍ）＝１０．２４／１＝１０．２４２１．０％第２Ｎ（４８．２７ｐｐｍ）＝５２．２２／２＝２６．１１５３．６％第３Ｎ（５３．４８ｐｐｍ）＝３５．０７／３＝１１．６９２４．０％第４Ｎ（５８．７５ｐｐｍ）＝２．５７／４＝０．６４１．３％かくしてこのポリマーは５３．６％の第２（直鎖）アミン、２４．０％の分枝点又は架橋の第３アミン、２１．０％の末端の第１アミン、及び１．３％の架橋又は分枝点の第４アミンを含んだ。胆汁酸の胆汁酸封鎖剤への試験管内結合本発明の胆汁酸封鎖剤、架橋ポリマーアンモニウム塩への胆汁酸の結合は下記の方法を用いて測定することができる。本発明の胆汁酸封鎖剤への種々の胆汁酸の結合に関する平衡結合パラメーターの測定に以下の方法を用いた。胆汁酸封鎖剤への胆汁酸の平衡結合は、おおよそ生理条件に近似させるために３７℃において等張イオン性条件を用いて決定した。ｐＨ７においてリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）に溶解した炭素−１４（¹⁴Ｃ）標識胆汁酸を０．４５４、０．５５５、０．７１３、１．０００、１．６６７、５．０００、６．６６７、１０．０、２０．０及び３０．０ｍＭ（４５ｎＣｉ¹⁴ Ｃ／ｍｌ）の濃度で調製した。この逆数の濃度の系列は、実験データが半対数飽和結合曲線に沿って相対的に平均して分布するように選択した。胆汁酸はＳｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入し、比活性が約５０ｍＣｉ／ミリモルの¹⁴Ｃ標識胆汁酸塩はＥ．Ｉ．ｄｕＰｏｎｔｄｅＮｅｍｏｕｒｓａｎｄＣｏｍｐａｎｙ，ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＮｕｃｌｅａｒ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）から入手した。調製した濃度の胆汁酸２ｍＬを、１０，０００ｍｗカットオフ限外濾過カップ（ＮｉｈｏｎＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｙｏｎｅｚａｗａ，Ｊａｐａｎ）内の選択された量（例えば５．０ｍｇ）の調べるべき胆汁酸封鎖剤に加え、３７℃で終夜（１６時間）インキュベートした。参照のために調べたコレスチラミンはＳｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから入手した。非特異的結合を決定するために、胆汁酸塩の１０の原液を空の限外濾過カップに加え、全結合試料と共にインキュベートした。結合及び遊離胆汁酸の分離のために、限外濾過カップをＤｕＰｏｎｔＲＴ６０００遠心機における３７℃において３，５００ＲＰＭで遠心し、遊離の胆汁酸の溶液を外の管に通過させた。２００μＬの分離された結合管及び対応する組の全胆汁酸の原液を、７ｍＬのＦｏｒｍｕｌａ９８９シンチレーションカクテル（Ｅ．Ｉ．ｄｕＰｏｎｔｄｅＮｅｍｏｕｒｓａｎｄＣｏｍｐａｎｙ，ＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＮｕｃｌｅａｒ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）中でベータシンチレーションカウンター（Ｂｅｃｋｍａｎ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）において２分間カウントし、¹⁴ＣＤＰＭを検出した。それぞれの特異的結合ＤＰＭをカウントされた合計¹⁴ＣＤＰＭ、及び誘導された全結合及び非特異的結合ＤＰＭから決定した。特異的結合ＤＰＭを各投薬量において胆汁酸塩の特異的結合μモルに変換した。特異的結合データを飽和結合曲線（溶液１ｍＬ当たりの遊離の胆汁酸塩のμモルの対数に対する封鎖剤１ｍｇ当たりの特異的結合胆汁酸のμモル）上にプロットし、［結合］＝（Ｂ_maxｘ［遊離］ⁿ）／（（Ｋｄ）ⁿ＋［遊離］ⁿ）の関係を用いて最良一致（ｂｅｓｔ−ｆｉｔ）回帰曲線を決定した。式中Ｂ_maxは胆汁酸封鎖剤に結合した胆汁酸塩の最大量であり、Ｋｄは半−最大結合における遊離の胆汁酸塩の濃度（すなわち平衡解離定数）であり、ｎは曲線一致パラメーターである。本発明の代表的胆汁酸封鎖剤ポリマーへの種々の胆汁酸の結合に関するデータを下表３及び４に示す。表３及び４においてＢ_maXは、胆汁酸封鎖剤１ｍｇ当たりに結合した胆汁酸塩のμモルの単位で示し、ＫｄはｍＭの単位である。Ｂ_max／Ｋｄの値は胆汁酸に関する胆汁酸封鎖剤の結合効率の尺度であり、結合部位の合計数又は結合容量、及び胆汁酸に関する胆汁酸封鎖剤の結合親和力の両方を反映している。この数が高い程胆汁酸封鎖剤は有効であることが予測される。表３及び４に示す通り、本発明の胆汁酸封鎖剤ポリマーは胆汁酸の結合に関し、親和力の増加及び結合容量の増加の両方の点でコレスチラミンより実質的に有効である。胆汁酸封鎖剤の生体内血漿コレステロール低下活性本発明の胆汁酸封鎖剤ポリマーの生休内血漿コレステロール低下活性を下記の動物モデルにおいて評価した。胆汁酸封鎖剤を投与したハムスターにおける血漿コレステロール低下本発明の代表的胆汁酸封鎖剤ポリマーの血漿コレステロール低下効果を下表５に示す。調べるべく選択された胆汁酸封鎖剤を雄のハムスターに２週間与え、血漿中の全コレステロール濃度を決定した。全血清コレステロールはＤｉｍｅｎｓｉｏｎ^R臨床分析機においてコレステロールオキシダーゼアッセイを用いて測定した。封鎖剤は動物飼料中に混合することにより経口的に与えた。２過間、ハムスターに異なる量の封鎖剤を含むＡｇｗａｙ齧歯類用食物を１日当たり１１ｇ与えた。０．２５又は０．３重量％の封鎖剤（例えば０．３重量％は１１ｇの飼料当たり０．０３３ｇの封鎖剤である）に関する結果を示す。ポリマーは粉砕し、飼料と混合した。各研究において、７の動物に封鎖剤を投薬した。コレステロール量の％減少を処置前（０週）の動物における平均全コレステロール量から封鎖剤処置の２週間における平均全コレステロール量を引き去ることにより算出した。７の動物に関する１回の研究を行った表５において、測定されたコレステロール低下における不確定性を特定の研究に関する（すなわち７動物に関する）ＳＥＭ（又は標準偏差（ＳＤ））として表す。表５において０週及び２週における研究に関するＳＥＭ（又はＳＤ）を示し、ＳＥＭ（又はＳＤ）を全コレステロールの平均値の％としても表す。０週及び２週に関する全コレステロール量の％減少及び平均％ＳＥＭ（又はＳＤ）も表５に示す。 ^a 全コレステロール量は７の動物に関する平均値である。±の後の値は星印（＊）を付けてある場合を除いて平均の標準誤差（ＳＥＭ）であり、星印を付けてある場合は標準偏差（ＳＤ）である。胆汁酸封鎖剤で処置したウサギにおけるコレステロール低下実施例２５のポリマーのコレステロール低下効率を雄のニュージーランドウサギにおいて調べた。下表６に示す通り、１日当たり全体重１ｋｇにつき２５０ｍｇにおいてこのポリマーでウサギを処置してから１週間及び２週間後に、動物における血漿の全コレステロール量は有意に減少した。表６は５つの動物に関する全血漿コレステロール量の平均％減少を示す（ＳＥＭを±の後に示す）。胆汁酸封鎖剤は動物飼料と混合して動物に与えることにより投与した。全血清コレステロールはＤｉｍｅｎｓｉｏｎ臨床分析機においてコレステロールオキシダーゼアッセイを用いて測定した。本開示において、特定の材料及び条件は本発明の実行において重要であるが、特定されていない材料及び条件はそれらが本発明の利益の実現を妨げなければ本発明から除外されないと理解しなければならない。実施例５４〜７３封鎖剤ポリマーを実施例１で用いた方法と類似の方法により製造した。出発材料及び合成条件を表７に示す。実施例５４〜７３の封鎖剤の結合能力これらの封鎖剤の効率を「封鎖剤グリココレート結合アッセイ（ＳｅｑｕｅｓｔｒａｎｔＧｌｙｃｏｃｈｏｌａｔｅＢｉｎｄｉｎｇＡｓｓａｙ）」を用いて調べ、その方法を下記に示す。表８においてこのアッセイの結果を実施例５４〜７３の封鎖剤に関して示す。「％結合グリココレート」が高い程封鎖剤の効率が優れている。比較の目的でコレスチラミン及び実施例２５の封鎖剤と類似の封鎖剤からの結果も示す。封鎖剤グリココレート結合アッセイＡ．初期結合アッセイ各ポリマーをＭｉｌｌｉｐｏｒｅ^R限外濾過カップ（１０，０００ＮＭＬ低結合セルロース）中に直接量り込んだ。各カップに加えられた重量は約５ｍｇ／カップであり、実際の重量は記録され、各ポリマーを３カップに量り込んだ。１０ｍＭのグリココール酸溶液（ＧＣ）をｐＨ７においてリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）を用いて調製し、３７℃で保存した。各カップに２ｍｌの上記の溶液を加えた。これは１５カップ以下の組において行った。胆汁酸をカップに加えたら、カップを渦動ミキサーで混合し、遠心機に入れた。カップをＳｏｒｖａｌｌ^RＲＴ６０００遠心機において３５０００ＲＰＭ（設定＃１０）で、３７℃で１０分間回転した。Ｂ．１８時間アッセイ各ポリマーをＭｉｌｌｉｐｏｒｅ^R限外濾過カップ（１０，０００ＮＭＬ低結合セルロース）中に直接量り込んだ。各カップに加えられた重量は約５ｍｇ／カップであり、実際の重量は記録され、各ポリマーを３カップに量り込んだ。１０ｍＭのグリココール酸溶液（ＧＣ）をｐＨ７においてリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）を用いて調製した。各カップに２ｍｌの上記の溶液を加えた。カップをオービタル・ドライ・エア・シエーカー（ｏｒｂｉｔａｌｄｒｙａｉｒｓｈａｋｅｒ）において３７℃で１８〜２０時間インキュベートした。インキュベーションの後、カップをＳｏｒｖａｌｌＲＴ６０００遠心機において３５００ＲＰＭ（設定＃１０）で、３７℃で１時間、又は少なくとも２００μｌの溶液が溶出するまで回転した。試薬はＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ６３１７８からのキット，ＢｉｌｅＡｃｉｄＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＫｉｔ＃４５０−Ａとして購入した。試薬は、試薬Ａの場合は１０ｍｌ、及び試薬Ｂの場合は５ｍｌの水を用いて穏やかに再構成した。それらを震盪せずに逆転することにより混合した。試験試薬は試薬Ａと試薬Ｂを４：１の体積比で混合することにより調製した。各試料につき０．５ｍｌの試験試薬が必要であった。試験試薬は、それが必要となる約１５分前にそれを３７℃の水浴に入れることにより３７℃に温めた。アッセイは６ｍｌのポリプロピレン試験管で行った。各試料はアッセイの直線範囲内となるように希釈した。胆汁酸塩濾液試料及び１０ｍＭのＧＣを最初に１００μｌに９００μｌのＰＢＳを加えて１０倍に希釈した。各試料は２重に行い、各試料に関して６つの試料があった。ＰＢＳを０標準として用い、６つのＰＢＳ試料の平均からの吸収をすべての他の試料から引き去った。１０ｍＭのＧＣを、２００μＭてあるアッセイの最大領域となるように合計５０倍に希釈し、６つの試料を調べた。試料は合計４０倍に希釈した。アッセイには２００μｌの試料が必要であった。試料は最初に１０倍に希釈し、次いで４倍に希釈したので、５０μｌの希釈試料及び１５０μｌのＰＢＳが分析された。１０ｍＭのＧＣ試料の場合、それらも最初に１０倍に希釈し、次いで５倍に希釈したので４０μｌの希釈試料及び１６０μｌのＰＢＳが分析された。胆汁酸０標準の場合、２００μｌのＰＢＳを分析した。この点ですべての試料は同様に処理された。アッセイは７０以下の管のバッチにおいて行った。試料は３７℃の水浴中に置いた。繰り返しピペッターを用い、０．５ｍｌの試験試薬を各管に一貫した速度で加えた。試験試薬が最初の管に加えられたと同時にタイマーを始動した。５分後、試験試薬を加えたと同一の速度で１００μｌの１．３３Ｍリン酸を加えることにより反応を停止した。試料を１．５ｍｌのプラスチック容器に注ぎ、スペクトロメーターにおいて５３０ｎｍで読み取った。試料は１時間しか安定でなかった。標準ＧＣ溶液から得た吸収データを用い、５ｍｇの封鎖剤当たりに結合した胆汁酸のパーセントを算出した。コレスチラミンは各アッセイにおいて標準として調べた。３つの試料が互いに近い結果でない場合、ポリマーに関する結合アッセイを繰り返した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０８Ｇ 83/00 ＮＵＷ 8416−4Ｊ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上が基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、ここで該ｎ−アルキレン基は炭素数が７〜約２０であり、アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％が基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト又はシリル基、あるいは複素環を含むことができ、アンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上が第２アンモニウム窒素原子である、架橋ポリマーアンモニウム塩。２．製薬学的に許容し得る担体及び製薬学的にコレステロール低下有効量の請求の範囲第１項に記載の架橋ポリマーアンモニウム塩を含む製薬学的組成物。３．該Ｚ基が飽和である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。４．該Ｚ基が炭素数が２〜１４のｎ−アルキレン基である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。５．該Ｙがｎ−アルキレン基である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。６．該Ｙの炭素数が７〜１４である請求の範囲第５項に記載のポリマーアンモニウム塩。７．該Ｙの炭素数が９〜１２である請求の範囲第６項に記載のポリマーアンモニウム塩。８．アンモニウム窒素原子の少なくとも約４０％が第２アンモニウム窒素原子である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。９．アンモニウム窒素原子の１５〜２５％が第１アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の４０〜６０％が第２アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の１５〜２５％が第３アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の５％未満が第４アンモニウム窒素原子である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。１０．対イオンがクロリド、ブロミド、ヨーダイド、サルフェート、ホスフェート、アセテート、アスコルベート、カーボネート、ビカーボネート、ニコチネート、サリチレート、タルタレート又はサイトレートである請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。１１．該対イオンがクロリドである請求の範囲第１０項に記載のポリマーアンモニウム塩。１２．水中における膨潤因子が少なくとも約４である請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。１３．水中における該膨潤因子が約５〜約２５である請求の範囲第１２項に記載のポリマーアンモニウム塩。１４．水中における該膨潤因子が約１０〜約１５である請求の範囲第１３項に記載のポリマーアンモニウム塩。１５．該アンモニウム窒素原子がさらに炭素数が１〜５０のヒドロカルビル基Ｑで置換されており、該ヒドロカルビル基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト、シリル基又は複素環を含むことができる請求の範囲第１項に記載のポリマーアンモニウム塩。１６．該Ｑの炭素数が１〜３０である請求の範囲第１５項に記載のポリマーアンモニウム塩。１７．治療的有効量の架橋ポリマーアンモニウム塩を経口的に投与することから成り、ここで該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上が基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、ここで該ｎ−アルキレン基の炭素数が７〜約１５であり、アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％が基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト又はシリル基、あるいは複素環を含むことができ、アンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上が第２アンモニウム窒素原子である、哺乳類の血漿コレステロールレベルを低下させる方法。１８．水性媒体中で胆汁酸と架橋ポリマーアンモニウム塩を接触させることから成り、ここで該塩において：アンモニウム窒素原子に結合している基の約２５％又はそれ以上が基Ｙであり、ここでＹはｎ−アルキレン基又はアルキル置換ｎ−アルキレン基であり、ここで該ｎ−アルキレン基の炭素数が７〜約１５であり、アンモニウム窒素原子に結合している基の０〜約７５％が基Ｚであり、ここでＺは炭素数が２又はそれ以上のヒドロカルビレン基であり、該ヒドロカルビレン基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト又はシリル基、あるいは複素環を含むことができ、アンモニウム窒素原子の約２５％又はそれ以上が第２アンモニウム窒素原子である、胆汁酸の封鎖の方法。１９．該Ｚが飽和である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２０．該Ｚ基が炭素数が２〜１４のｎ−アルキレン基である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２１．該Ｙがｎ−アルキレン基である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２２．該Ｙの炭素数が７〜１４である請求の範囲第２１項に記載の方法。２３．該Ｙの炭素数が９〜１２である請求の範囲第２２項に記載の方法。２４．アンモニウム窒素原子の少なくとも約４０％が第２アンモニウム窒素原子である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２５．アンモニウム窒素原子の１５〜２５％が第１アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の４０〜６０％が第２アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の１５〜２５％が第３アンモニウム窒素原子であり、アンモニウム窒素原子の５％未満が第４アンモニウム窒素原子である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２６．対イオンがクロリド、ブロミド、ヨーダイド、サルフェート、ホスフェート、アセテート、アスコルベート、カーボネート、ビカーボネート、ニコチネート、サリチレート、タルタレート又はサイトレートである請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２７．該対イオンがクロリドである請求の範囲第２６項に記載の方法。２８．水中における膨潤因子が少なくとも約４である請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。２９．水中における該膨潤因子が約５〜約２５である請求の範囲第２８項に記載の方法。３０．水中における該膨潤因子が約１０〜約１５である請求の範囲第２９項に記載の方法。３１．該アンモニウム窒素原子がさらに炭素数が１〜５０のヒドロカルビル基Ｑで置換されており、該ヒドロカルビル基は場合により１つ又はそれ以上のヒドロキシル、エーテル、アミノ、チオエーテル、ケト、シリル基又は複素環を含むことができる請求の範囲第１７又は１８項に記載の方法。３２．該Ｑの炭素数が１〜３０である請求の範囲第３１項に記載の方法。