JPH08283170A

JPH08283170A - 抗活性酸素剤

Info

Publication number: JPH08283170A
Application number: JP7108248A
Authority: JP
Inventors: Aaru Saniabadeii Abii; アールサニアバディーアビー; Takashi Yamamoto; 敬山本; Takashi Koyano; 喬小谷野
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1995-04-07
Filing date: 1995-04-07
Publication date: 1996-10-29

Abstract

(57)【要約】【目的】十分な抗活性酸素作用を有し、副作用の危険
性が少ない植物からの抽出を有効成分とする抗活性酸素
剤を提供する。【構成】本発明の抗活性酸素剤は、ドリチャンドロン
・スパタセア（Dolichandrone Sepathacea）、ソラナム
・リグティ（Solanum Wrightii）もしくはエウゲニア・
リムナエア（Eugenia Limnaea）の抽出物を有効成分と
する抗活性酸素剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、活性酸素の捕捉作用を
有する抗活性酸素剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】最近の研究により、生体内で発生する活
性酸素が種々の疾病の原因となっていることがわかって
きた。正常時に体内に異物である細菌が侵入すると、貪
食細胞はその異物を取り込むとともにその溶解のために
活性酸素を産生するといわれている。しかし、正常時
に、外的刺激などに起因して、活性酸素が異常に産生さ
れることもある。癌、動脈硬化症、脳卒中、心筋梗塞
症、糖尿病などの各疾患は、必ずしも同一の原因により
発症するものではないが、上記のような生体内で過剰に
発生した活性酸素に起因する細胞障害がその一因である
といわれている。

【０００３】具体的には、生体内においてフリーラジカ
ル（例えば、活性酸素）は、食作用、酸素要求性の代謝
過程、カテコールアミンの酸化触媒酵素、放射線（紫外
線、Ｘ線、γ線、および重原子による放射物）のイオン
化といった様々な要因によって発生する。さらに，活性
酸素類は常に相互変換をしており、これによって活性酸
素類の種類が増えることも多い。

【０００４】例えば、Ｏ₂ ^-ラジカルはジスムターゼ反応
によって過酸化水素、Ｈ₂Ｏ₂を形成することができ、過
酸化水素はＦｅ（II）のような金属触媒の存在下でヒド
ロキシラジカル、ＨＯ^-を生成する。ミエロペルオキシ
ダーゼあるいは好酸球ペルオキダーゼ（ＭＰＯ／ＥＰ
Ｏ，活性化した食細胞から放出された酵素）が存在する
と、過酸化水素は次亜塩素酸ラジカル、ＣｌＯ^-が生成
されることもあり、しかもＨ₂Ｏ₂およびＣｌＯ^-は、一
重項酸素、¹Ｏ₂の生成反応が可能である。

【０００５】よって、Ｏ₂ ^-ラジカルは、殆どの活性酸素
類の前駆体（母体）とみなすことができる。病理学の観
点からみると、ＨＯ^-は、最も反応性があり、ＤＮＡ損
傷に様々な理由で介在している。ＣｌＯ^-ラジカルおよ
び¹Ｏ₂（¹Ｏ₂はフリーラジカルではないがかなり反応性
のある活性酸素類である）もまた非常に高い活性があ
り、たとえば炎症性関節損傷（ＣｌＯ^-）、アレルギ
ー、および眼球水晶体の白内障（¹Ｏ₂）など、数種の破
壊性損傷組織に深くかかわっている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】このような生体内に発
生した活性酸素を抑制もしくは捕捉するいわゆる抗活性
酸素剤は種々提案されている。しかし、それらは、化学
的手法により合成されたものが多く、連続的に投与した
場合の副作用のおそれがある。そこで、種々の植物抽出
物の抗活性酸素作用を研究したところ、ある種の植物の
抽出物が高い抗活性酸素作用を示すことがわかった。

【０００７】本発明の目的は、十分な抗活性酸素作用を
有し、かつ副作用の危険性が少ない植物からの抽出物を
有効成分とする抗活性酸素剤を提供するものである。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明の抗活性酸素剤
は、ドリチャンドロン・スパタセア（Dolichandrone Se
pathacea）の抽出物を有効成分とする抗活性酸素剤であ
る。

【０００９】また、本発明の抗活性酸素剤は、ソラナム
・リグティ（Solanum Wrightii）の抽出物を有効成分と
する抗活性酸素剤である。

【００１０】また、本発明の抗活性酸素剤は、エウゲニ
ア・リムナエア（Eugenia Limnaea）の抽出物を有効成
分とする抗活性酸素剤である。

【００１１】また、本発明の植物の抽出物は、抗活性酸
素作用を有するドリチャンドロン・スパタセア（Dolich
androne Sepathacea）、ソラナム・リグティ（Solanum
Wrightii）、もしくはエウゲニア・リムナエア（Eugeni
a Limnaea）から抽出されたものである。

【００１２】そこで、本発明のドリチャンドロン・スパ
タセア（Dolichandrone Sepathacea）の抽出物を有効成
分とする抗活性酸素剤について説明する。ドリチャンド
ロン・スパタセアは、ノウゼンカツラ科の熱帯植物であ
る。原料のドリチャンドロン・スパタセアとして、植物
全体が使用され、例えば、葉、茎、芽、花、木質部、木
皮部、根部などのすべてが利用できる。特に好ましく
は、葉である。また、原料の保存時の腐敗を防止するた
めに、上記植物の乾燥物を用いることが好ましい。特
に、乾燥物の粉砕物が好適である。なお、植物原料は、
未乾燥もしくは半乾燥のものでもよい。

【００１３】そして、ドリチャンドロン・スパタセアを
用いた抽出は、原料、例えば、生もしくは乾燥した葉を
粉砕した後、水（熱水を含む）または有機溶媒を用いて
行われる。必要に応じて、水抽出と有機溶媒抽出の両者
を併用してもよい。有機溶媒としては、メタノール、エ
タノール、ｎ−ブタノール、アセトン、酢酸エチル、ク
ロロホルム、ｎ−ヘキサンなどが用いられる。水溶性有
機溶媒の場合には、その水溶液も使用できる。このよう
な有機溶媒抽出も好適であるが、特に、好ましくは水抽
出である。抽出作業における水の量は限定されるもので
はなく、原料植物より有効に抽出物が得られる量であれ
ばよい。好ましくは、ドリチャンドロン・スパタセア５
０ｇ（乾燥重量）当たり、５００〜１０００ｍｌであ
る。また、抽出温度としては、０〜１００℃、好ましく
は、室温〜６０℃である。抽出時間（浸漬時間）は、温
度により相違するが、室温において、３〜１０時間程度
が適当である。そして、浸漬作業後に再びローラーミキ
サーなどを用いて、液中粉砕を行うことが好ましい。こ
のようにすることにより、原料より有効に抽出物を採取
できる。そして、このようにして得られた固液混合物
は、固液分離され、液体分が採取される。固液分離方法
としては、どのようなものでもよいが、遠心分離法、限
外濾過法などが好適である。

【００１４】このようにして得られるドリチャンドロン
・スパタセア抽出液は、極めて毒性が低く、毎日１５０
ｍｇ／ｋｇ、７日間連続してラットに投与しても、死亡
例は見られなく、毒性は低いものであった。

【００１５】そして、得られたドリチャンドロン・スパ
タセア抽出液は、そのまま、もしくは必要により乾燥さ
れる。乾燥方法としては、凍結乾燥、減圧乾燥、加熱乾
燥など公知の方法が用いられる。

【００１６】この抽出物は、医薬または食品の形態で提
供される。医薬として用いる場合には、この抽出物を有
効成分として、これに常用される無機または有機の担体
を加えて、固体、半固体または液体の形で、経口投与用
もしくは非経口投与用に薬剤形成される。経口投与用の
剤形としては、散剤、顆粒、錠剤、糖衣錠、カプセル、
液剤などが考えられる。非経口投与用としては、液剤が
好適である。非経口投与としては、経腸投与、皮下注
射、静脈内投与などが考えられる。また、食品として用
いる場合には、ガム、キャンディー、ゼリー、飲料など
の形態が考えられる。

【００１７】次に、本発明のソラナム・リグティ（Sola
num Wrightii）の抽出物を有効成分とする抗活性酸素剤
について説明する。ソラナム・リグティは、ナス科の熱
帯植物である。原料のソラナム・リグティとして、植物
全体が使用され、例えば、葉、茎、芽、花、木質部、木
皮部、根部などのすべてが利用できる。特に好ましく
は、葉である。また、原料の保存時の腐敗を防止するた
めに、上記植物の乾燥物を用いることが好ましい。特
に、乾燥物の粉砕物が好適である。なお、植物原料は、
未乾燥もしくは半乾燥のものでもよい。

【００１８】そして、ソラナム・リグティを用いた抽出
は、原料、例えば、生もしくは乾燥した葉を粉砕した
後、水（熱水を含む）または有機溶媒を用いて行われ
る。必要に応じて、水抽出と有機溶媒抽出の両者を併用
してもよい。有機溶媒としては、メタノール、エタノー
ル、ｎ−ブタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホ
ルム、ｎ−ヘキサンなどが用いられる。水溶性有機溶媒
の場合には、その水溶液も使用できる。このような有機
溶媒抽出も好適であるが、特に、好ましくは水抽出であ
る。抽出作業における水の量は限定されるものではな
く、原料植物より有効に抽出物が得られる量であればよ
い。好ましくは、ソラナム・リグティ５０ｇ（乾燥重
量）当たり、５００〜１０００ｍｌである。また、抽出
温度としては、０〜１００℃、好ましくは、室温〜６０
℃である。抽出時間（浸漬時間）は、温度により相違す
るが、室温において、３〜１０時間程度が適当である。
そして、浸漬作業後に再びローラーミキサーなどを用い
て、液中粉砕を行うことが好ましい。このようにするこ
とにより、原料より有効に抽出物を採取できる。そし
て、このようにして得られた固液混合物は、固液分離さ
れ、液体分が採取される。固液分離方法としては、どの
ようなものでもよいが、遠心分離法、限外濾過法などが
好適である。

【００１９】このようにして得られるソラナム・リグテ
ィ抽出液は、極めて毒性が低く、毎日１００ｍｇ／ｋ
ｇ、７日間連続してラットに投与しても、死亡例は見ら
れなく、毒性は低いものであった。

【００２０】そして、得られたソラナム・リグティ抽出
液は、そのまま、もしくは必要により乾燥される。乾燥
方法としては、凍結乾燥、減圧乾燥、加熱乾燥など公知
の方法が用いられる。

【００２１】この抽出物は、医薬または食品の形態で提
供される。医薬として用いる場合には、この抽出物を有
効成分として、これに常用される無機または有機の担体
を加えて、固体、半固体または液体の形で、経口投与用
もしくは非経口投与用に薬剤形成される。経口投与用の
剤形としては、散剤、顆粒、錠剤、糖衣錠、カプセル、
液剤などが考えられる。非経口投与用としては、液剤が
好適である。非経口投与としては、経腸投与、皮下注
射、静脈内投与などが考えられる。また、食品として用
いる場合には、ガム、キャンディー、ゼリー、飲料など
の形態が考えられる。

【００２２】次に、本発明のエウゲニア・リムナエア
（Eugenia Limnaea）の抽出物を有効成分とする抗活性
酸素剤について説明する。エウゲニア・リムナエアは、
フトモモ科の熱帯植物である。原料のエウゲニア・リム
ナエアは、植物全体が使用され、例えば、葉、茎、芽、
花、木質部、木皮部、根部などのすべてが利用できる。
特に好ましくは、葉である。また、原料の保存時の腐敗
を防止するために、上記植物の乾燥物を用いることが好
ましい。特に、乾燥物の粉砕物が好適である。なお、植
物原料は、未乾燥もしくは半乾燥のものでもよい。

【００２３】そして、エウゲニア・リムナエアからの抽
出は、原料、例えば、生もしくは乾燥した葉を粉砕した
後、水（熱水を含む）または有機溶媒を用いて行われ
る。必要に応じて、水抽出と有機溶媒抽出の両者を併用
してもよい。有機溶媒としては、メタノール、エタノー
ル、ｎ−ブタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホ
ルム、ｎ−ヘキサンなどが用いられる。水溶性有機溶媒
の場合には、その水溶液も使用できる。このような有機
溶媒抽出も好適であるが、特に、好ましくは水抽出であ
る。抽出作業における水の量は限定されるものではな
く、原料植物より有効に抽出物が得られる量であればよ
い。好ましくは、エウゲニア・リムナエア５０ｇ（乾燥
重量）当たり、５００〜１０００ｍｌである。また、抽
出温度としては、０〜１００℃、好ましくは、室温〜６
０℃である。抽出時間（浸漬時間）は、温度により相違
するが、室温において、３〜１０時間程度が適当であ
る。そして、浸漬作業後に再びローラーミキサーなどを
用いて、液中粉砕を行うことが好ましい。このようにす
ることにより、原料より有効に抽出物を採取できる。そ
して、このようにして得られた固液混合物は、固液分離
され、液体分が採取される。固液分離方法としては、ど
のようなものでもよいが、遠心分離法、限外濾過法など
が好適である。

【００２４】このようにして得られるエウゲニア・リム
ナエア抽出液は、極めて毒性が低く、毎日２００ｍｇ／
ｋｇ、７日間連続してラットに投与しても、死亡例は見
られなく、毒性は低いものであった。

【００２５】そして、得られたエウゲニア・リムナエア
抽出液は、そのまま、もしくは必要により乾燥される。
乾燥方法としては、凍結乾燥、減圧乾燥、加熱乾燥など
公知の方法が用いられる。

【００２６】この抽出物は、医薬または食品の形態で提
供される。医薬として用いる場合には、この抽出物を有
効成分として、これに常用される無機または有機の担体
を加えて、固体、半固体または液体の形で、経口投与用
もしくは非経口投与用に薬剤形成される。経口投与用の
剤形としては、散剤、顆粒、錠剤、糖衣錠、カプセル、
液剤などが考えられる。非経口投与用としては、液剤が
好適であり、非経口投与としては、経腸投与、皮下注
射、静脈内投与などが考えられる。また、食品として用
いる場合には、ガム、キャンディー、ゼリー、飲料など
の形態が考えられる。

【００２７】次に、本発明において用いた活性酸素捕捉
効果測定法について説明する。この方法では、３つの過
程が行われる。第１は、化学発光試薬と検査対象物の存
在下にて第１の検査対象液中にてＯ₂ ^-ラジカルを産生さ
せ、発生する光量子を測定して第１の測定値を得る過程
である。第２は、化学発光試薬の存在下で前記検査対象
物を含有しない第２の検査対象液中にてＯ₂ ^-ラジカルを
産生させ、発生する光量子を測定して第２の測定値を得
る過程である。第３は上記２つの測定値より活性酸素捕
捉率を算出する過程である。なお、第１と第２の過程は
いずれを先に行ってもよい。

【００２８】この測定法について具体的に説明する。Ｏ
₂ ^-ラジカルの産生方法としては、以下のような方法が好
適である。血清オプソニン処理したチモサンでヒトの食
細胞系白血球（好中球、単球、マクロファージ、好酸球
および好塩基球）を刺激すると、スーパーオキシドアニ
オンフリーラジカル、すなわちＯ₂ ^-が産生される。この
モデルでのヒト白血球によるＯ₂ ^-ラジカルの発生は、生
体内でヒト白血球が、オプソニンが付着した細菌、ウイ
ルスおよびその他の微生物を貧食する際、Ｏ₂ ^-ラジカル
を産生するのと類似する。しかし、フリーラジカル（活
性酸素）の産生方法は、この方法に限られるものではな
い。

【００２９】Ｏ₂ ^-ラジカルのために化学発光試薬として
は、ウミホタルシプルジナルシフェリン類似体（２−メ
チル−６−（ｐ−メトキシフェニル）−３、７−ジヒド
ロイミダゾール（１，２−α）プラジン−３−一塩酸塩
（2-methyl-6-(p-methoxyphenyl)-3,7-dihydroimidazol
(1,2-α)prazin-3-one hydrochlorode)、以下「ＭＣＬ
Ａ」が使用される。なお、化学発光試薬としては、２−
メチル−６−フェニル−３、７−ジヒドロイミダゾール
（１，２−α）プラジンー３−一塩酸塩（2-methyl-6-p
henyl-3,7-dihydroimidazol(1,2-α)prazin-3-one hydr
ochlorode）なども使用できる。このような化学発光試
薬の存在下でフリーラジカル（例えば、Ｏ₂ ^-ラジカル）
を発生させると、Ｏ₂ ^-ラジカルと化学発光試薬との反応
によって、化学発光試薬が変化し、光量子が放出され
る。これを光量子カウンターで直接測定することによっ
て得られる光量子収率をＯ₂ ^-ラジカル産生の指標として
用いることができる。

【００３０】具体的には、酸素分子は、オキシダーゼの
触媒作用で、ＮＡＤＰＨからＨ^-を受けてＯ₂ ^-に変わ
る。そして、ペントースリン酸経路（ＰＰＰ）及びグル
コースー６−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ６ＰＤ）は、
分子状酸素、Ｏ₂をＯ₂ ^-に変換するオキシダーゼが要求
するＮＡＤＰＨを再生産する。Ｏ₂ ^-はその後、化学発光
試薬と反応し、試薬を発光させる。すなわち、発光試薬
は光量子（ｈν）を放出して反応を停止する。この光量
子は、光量子カウンターで測定することができ、発光試
薬と反応するＯ₂ ^-ラジカルの数に比例する。このような
理論により、活性酸素両を光量子カウンターにより測定
することができる。

【００３１】そして、Ｏ₂ ^-ラジカルスカベンジャー（活
性酸素捕捉効果）を有する物質を反応混合液（測定対象
液）に加えると、Ｏ₂ ^-ラジカルスカベンジャーは、Ｏ₂ ^-
に関して発光試薬と競合する。ｐＨが生理的値である場
合、Ｏ₂ ^-は安定ではなく、Ｏ₂ ^-はジスムターゼに触媒さ
れＨ₂Ｏ₂となる。特に、白血球からミエロペルオキシダ
ーゼあるいは好酸球ペルオキシダーゼが放出されている
環境では、次いで次亜塩素酸ラジカルＣｌＯ^-，ヒドロ
キシラジカルＨＯ^-、および一重項酸素¹Ｏ₂を形成す
る。しかしながら、本モデルのような場合、スカベンジ
ャーと発光試薬がどちらも存在しているが、その一方で
Ｏ₂ ^-は発生し続け、その殆どがスカベンジャーおよび発
光試薬、もしくはそのいずれかによって捕捉される。

【００３２】つまり、Ｏ₂ ^-ラジカルは、化学発光試薬、
ＭＣＬＡの存在下で産生され、これらが一緒に反応して
化学発光もしくは光量子放出を起こす。光収率（光量子
カウント）はＯ₂ ^-ラジカル発生の直接的な測定であり、
正確に言えば、化学発光試薬とのＯ₂ ^-ラジカルの反応の
測定であるといえる。スカベンジャー（抗活性酸素剤）
が何も存在しない場合、Ｏ₂ ^-ラジカルの最大数が光量子
放出剤（化学発光試薬）と反応し、これに対応する高い
光収率を産み出す。しかしながら、Ｏ₂ ^-ラジカルスカベ
ンジャーが存在すると、Ｏ₂ ^-に関して、Ｏ₂ ^-ラジカルス
カベンジャーは発光試薬と競合し、その結果、Ｏ₂ ^-ラジ
カルの捕捉度合いに比例して光収率は減少する。

【００３３】よって、上記のような発光試薬を含有する
測定対象物（測定対象液）中に、活性酸素捕捉効果を有
すると思われる物質を添加したものと、対象として、添
加しないものについて、上記の光量子カウンターを用い
た測定を行う。添加した物質が活性酸素捕捉効果を有す
れば、Ｏ₂ ^-は活性酸素捕捉物質（抗活性酸素剤）によっ
て捕捉され、発光試薬の発光量が減少し、光量子カウン
ター測定されるカウント値が低下する。物質を添加して
いない測定対象液の光量子カウンターによるカウント値
とを比較することにより、客観的な活性酸素捕捉効果の
測定が行える。結果（％）は、１−物質添加測定対象液
のカウント値／物質非添加測定対象液カウント値×１０
０による演算により算出される。

【００３４】

【実施例】

（実施例１：ドリチャンドロン・スパタセア抽出物の調
製）ドリチャンドロン・スパタセアの葉１０００ｍｇを
完全にすり潰し、蒸留水１０ｍｌを加えて、一晩室温に
て放置した。翌日この試料を、室温で６０分間ローラー
ミキサーにかけた後、４０００rpmで４０分間遠心分離
し、上清を回収して、本発明のドリチャンドロン・スパ
タセア抽出物を作製した。また、この抽出物をＥＹＥＬ
Ａ凍結乾燥器、ＦＤ−５Ｎ型で凍結乾燥して、凍結乾燥
物を得た。

【００３５】（実施例２：ソラナム・リグティ抽出物の
調製）ソラナム・リグティの葉１０００ｍｇを完全にす
り潰し、蒸留水１０ｍｌを加えて、一晩室温にて放置し
た。翌日この試料を、室温で６０分間ローラーミキサー
にかけた後、４０００rpmで４０分間遠心分離し、上清
を回収して、本発明のソラナム・リグティ抽出物を作製
した。また、この抽出物をＥＹＥＬＡ凍結乾燥器、ＦＤ
−５Ｎ型で凍結乾燥して、凍結乾燥物を得た。

【００３６】（実施例３：エウゲニア・リムナエア抽出
物の調製）エウゲニア・リムナエアの葉１０００ｍｇを
完全にすり潰し、蒸留水１０ｍｌを加えて、一晩室温に
て放置した。翌日この試料を、室温で６０分間ローラー
ミキサーにかけた後、４０００rpmで４０分間遠心分離
し、上清を回収して、本発明のエウゲニア・リムナエア
抽出物を作製した。また、この抽出物をＥＹＥＬＡ凍結
乾燥器、ＦＤ−５Ｎ型で凍結乾燥して、凍結乾燥物を得
た。

【００３７】［実験］上記実施例１〜３の抽出物および
比較例を用いて、活性酸素捕捉作用［スーパーラジカル
スカベンジャー効果もしくはＯ₂ ^-ラジカルスカベンジャ
ー効果］を測定した。血清オプソニン処理したチモサン
でヒトの食細胞系白血球（好中球、単球、マクロファー
ジ、好酸球および好塩基球）を刺激することにより、ス
ーパーオキシドアニオンフリーラジカル、すなわちＯ₂ ^-
を産生させる方法を用いた。化学発光試薬としては、ウ
ミホタルシプルジナルシフェリン類似体（ＭＣＬＡ）を
用いた。

【００３８】（試薬であるＭＣＬＡの調製）ＭＣＬＡ
（東京化成株式会社製）を二回蒸留水で１００μＭに希
釈した後、極低温槽中にて、−８０℃で保存したもの
を、実験前に溶解して使用した。

【００３９】（実施例の抽出物の調製）実施例１〜３の
抽出液を蒸留水で１０倍に希釈、ｐＨを７．４に調製し
た調製物１〜３を作製した。

【００４０】（比較例１の調製）ヒト赤血球のスーパー
オキシドジスムターゼ（ＳＯＤ、比活性３６１０Ｕ／ｍ
ｇ蛋白質、シグマ社、ＵＳＡ）を生理食塩水に溶解し
て、３００Ｕｎｉｔ／ｍｌに調製し、−３０℃で保存し
た物を実験前に溶解した。これを比較例１とした。

【００４１】（比較例２の調製）トロロックスＣ［東京
化成株式会社製、６−ヒドロキシー２，５，７，８−テ
トラメチルクロマンー２−カルボン酸、αートコフェロ
ール（ビタミンＥ）類似体］をｐＨ７．４の生理食塩水
に溶解して、１５０μｇ／ｍｌに調製したものを比較例
２とした。

【００４２】（ヒト血清の調製）ヒト血漿１００ｍｌに
１ＭＣａＣｌ₂２ｍｌおよびトロンビン３００Ｕを加
え、５分間撹拌した後、３７℃で２時間保温し、さら
に、一晩４℃にて保存した後、遠心分離して、ヒト血清
を得た。

【００４３】（オプソニン処理チモサンの調製）チモサ
ンＡ（シグマ社、ＵＳＡ）を、生理食塩水中で１００分
間ボイルした後遠心分離し、さらに生理食塩水に２度懸
濁して洗浄した。洗浄したチモサンを血清１ｍｌあたり
２０ｍｇ添加し、３７℃で３０分間保温し、その後１０
分間遠心分離した。このオプソニン処理チモサンは、そ
の後生理食塩水で２度洗浄し、最終的に５０ｍｇ／ｍｌ
となるよう生理食塩水に再懸濁して凍結保存した。この
方法で調製したオプソニン処理チモサンは、ヒト血漿免
疫グロブリンおよび補体断片に覆われており、従って、
血液中で白血球に貧食を受けた生物と類似している。こ
の凍結保存物を実験前に溶解したものを用いた。

【００４４】（実験用混合液の調製）実験用混合液とし
ては、上述したヒト血清を１ｍｌあたり１００万個の食
細胞を含有するようにハンクス緩衝液に添加した。そし
て、この細胞含有ハンクス緩衝液にオプソニン処理チモ
サンを濃度が１ｍｇ／ｍｌとなるように添加し、さら
に、ＭＣＬＡを０．８μＭ添加し、実験用混合液を作製
した。

【００４５】（光量子のカウント）光量子カウント装置
としては、商品名ルミネセンスリーダーＢＬＲ３０１型
（アラコ株式会社製）を用いた。この装置は単一光量子
カウンターである。時間（集光時間）をセットすれば、
その間の光量子カウントが可能である。また、レコーダ
ーに接続すれば、カウント結果は、発光のピークとして
表示される。実験用混合液１．２ｍｌを入れたバイアル
瓶を、この装置の自動混合機能付き試料ホルダーの中に
セットし、光量子放出速度が最大になったとき、実施例
１ないし３の植物抽出液１０μｌ、もしくは、比較例１
の薬剤（ＳＯＤ）１０μｌ（濃度３００Ｕ／ｍｌ）、比
較例２の薬剤１０μｌが添加されるようにセットし、即
座に光量子測定を開始した。植物抽出液としては、含有
する植物抽出物の濃度が異なる３種類のものを作製し
た。測定はすべて３７℃で行い、集積時間（記録期間）
は４分間とした。その結果を表１に示す。

【００４６】

【表１】

【００４７】表１に示したように、実施例１〜３の抽出
物はいずれも、μｇ単位の投与量において、強いスカベ
ンジャー効果を示した。これらの実施例の抗活性酸素剤
のＯ₂ ^-捕捉効果をα−トコフェロール類似体であるトロ
ックスＸ（比較例２）のＯ₂ ^-捕捉効果と比較すると、濃
度１／１０にて、比較例２とほぼ同じ効果を示してお
り、実施例の抗活性酸素剤は比較例２の１０倍近い効果
を有することがわかった。

【００４８】

【発明の効果】本発明の抗活性酸素剤は、ドリチャンド
ロン・スパタセアの抽出物を有効成分とするものであ
り、有効成分は副作用の危険性が少ない植物からの抽出
物であり、かつ、所定の濃度において十分な活性酸素捕
捉効果を有するので、種々の疾患の予防もしくは臨床治
療に有効である。

【００４９】また、本発明の抗活性酸素剤は、ソラナム
・リグティの抽出物を有効成分とするものであり、有効
成分は副作用の危険性が少ない植物からの抽出物であ
り、かつ、所定の濃度において十分な活性酸素捕捉効果
を有するので、種々の疾患の予防もしくは臨床治療に有
効である。

【００５０】また、本発明の抗活性酸素剤は、エウゲニ
ア・リムナエアの抽出物を有効成分とするものであり、
有効成分は副作用の危険性が少ない植物からの抽出物で
あり、かつ、所定の濃度において十分な活性酸素捕捉効
果を有するので、種々の疾患の予防もしくは臨床治療に
有効である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ドリチャンドロン・スパタセア（Dolich
androne Sepathacea）の抽出物を有効成分とする抗活性
酸素剤。
【請求項２】ソラナム・リグティ（Solanum Wrighti
i）の抽出物を有効成分とする抗活性酸素剤。
【請求項３】エウゲニア・リムナエア（Eugenia Limn
aea）の抽出物を有効成分とする抗活性酸素剤。