CN103734742A - 一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒及制备方法,所述多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的粒径为50-400nm,多分散性系数低于0.14,为核壳结构,所述核为多酚类化合物,所述壳为大麦醇溶蛋白,大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为5-100:1。其制备方法即首先制备大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液,然后将大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液混合,所得的混合液离心,得到的上清液在漩涡混合条件下逐滴滴入到蒸馏水中,得到的分散液冷冻干燥即得包封率为85-90%、载药率为25-35%,生物利用率为85-90%多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。可应用于食品、保健品、药品及化妆品等多个领域。
Description
技术领域
本发明涉及一种包封多酚类活性物质的大麦醇溶蛋白纳米颗粒及其制备方法,属于食品生物纳米技术领域。
背景技术
多酚类化合物是一类广泛存在于植物中具有多个酚羟基的化学物质,通常具有较强的清除自由基能力,能抑制多种细菌、真菌、病毒和溃疡,以及抗血栓、预防肿瘤、降低高血压发病风险等多种生理活性。然而多酚类化合物自身化学性质不稳定,在强酸强碱、光照及较高温度下容易发生氧化,且经人体摄入后在胃环境中容易分解破坏而失去活性,因此研究和发展一种多酚类化合物的载体,对其进行包封,以保持其活性及提高其生物利用率尤有必要。
相关的研究表明,包封多酚类化合物的纳米颗粒能有效提高多酚的稳定性及其生物利用率。作为多酚类化合物的载体,并应用于食品、保健品、药品及化妆品等领域,所选用的载体材料必须具有良好的生物相容性,体内可降解且无毒无害。目前用作多酚类化合物包封的材料主要包括合成高分子(如PLGA-PEG)和天然高分子(如糖类和蛋白质类)。但从前人的研究结果来看,包材选择的合理性及其技术方法方面仍存在诸多问题:第一,纳米颗粒的包封率、载药率不高,其包封率最高约80%,载药率最高约26%;第二,纳米颗粒的粒径分布难以控制,且对多酚生物利用率的提高作用不显著;第三,纳米颗粒的制备工艺复杂,合成过程常涉及使用有毒化学试剂等。
另一方面,纳米颗粒的粒径分布对进入人体后的靶向分布起关键作用。例如,通过静脉注射后,直径小于1μm的纳米颗粒将分布于肝、脾、骨髓,而小于0.1μm的纳米颗粒在体内能避免被网状内皮系统捕捉,延长在血液中的滞留时间。因此,通过开发出可使粒径分布在特定范围的纳米颗粒,能让多酚类化合物靶向作用于身体特定部位,提高其利用率和生理功效。
大麦醇溶蛋白作为一种可食用谷物蛋白,除了具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒无害外,还具有成本低廉、来源丰富等优点。且与动物性蛋白相比,不存在受病毒污染等安全性问题。考虑其作为多酚类化合物的载体,具有优良的纳米成粒性和保护缓释效果,是很好的制备纳米颗粒的材料。
制备纳米颗粒的方法通常可分为机械法、物理法和化学法。化学法中常常使用一些有毒的试剂且难以除去,机械法对设备的要求较高,“液液分散法”属于物理法的一种,使用的溶剂无毒且操作简单,通过控制反应条件,可以获得粒径分布较为均一的纳米颗粒。
参考文献
[1]无锡纳诺生物科技有限公司.茶多酚海藻酸钠微球及其制备方法和应用:中国,201010613694.8[P]. 2012-07-11.
[2]周欣,钟世江,陈树琳.高效液相色谱法测定银杏叶提取物中槲皮素的含量[J].中国中药杂志,1997,22(10):616.
[3]吴迪,穆怡然,刘志华等.高效液相色谱法检测葡萄酒中的白藜芦醇及其糖苷异构体[J]. 现代仪器, 2008, 3: 28-29。
发明内容
本发明的目的之一是为了解决现有技术中的多酚类化合物载体包封率、载药率低,以及由此造成的多酚类化合物生物利用率低等技术问题而提供一种采用“液液分散法”,以大麦醇溶蛋白为包材来包封多酚类化合物。制备出的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒既容易控制粒径分布,又能克服现有的多酚类化合物载体包封率、载药率低等缺陷,并能较好保护多酚类化合物的活性,显著提高多酚的生物利用率。
本发明目的之二是提供上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,该制备方法操作简单,且制备过程中不使用有毒的化学试剂,因此制备过程对环境友好。
本发明的技术方案
一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,其粒径为50-400nm,多分散性系数低于0.14,为核壳结构,所述的核为多酚类化合物,所述的壳为大麦醇溶蛋白,所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为5-100:1;
所述的多酚类化合物为茶多酚、槲皮素或白藜芦醇等;
所述的大麦醇溶蛋白其分子量为30,000-96,000。
上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,具体包括如下步骤:
(1)、将大麦醇溶蛋白和多酚类化合物分别溶解在体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后分别得到大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液,然后将大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液混合;
上述的大麦醇溶蛋白溶液中,大麦醇溶蛋白和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按大麦醇溶蛋白:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:11.15-36ml的比例计算;
上述的多酚溶液中,多酚类化合物和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按多酚类化合物:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:4-20ml的比例计算;
(2)、将步骤(1)所得的大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液在3000rpm的转速下离心13min,得上清液;
(3)、将步骤(2)所得的上清液在漩涡混合条件下控制滴加速率为0.5ml/min将上清液逐滴滴入到蒸馏水中,得到分散液;
上述的上清液和蒸馏水的用量按体积比计算,即上清液:蒸馏水为1:2.5-3的比例计算;
(4)、将步骤(3)所得的分散液控制温度为-49℃进行冷冻干燥即得多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。
上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,通过将多酚类活性物质包封在大麦醇溶蛋白中,免受胃酸和各种酶的消化,保护了多酚类活性物质的活性,使受到保护的多酚类活性物质被转运到小肠中,在蛋白载体逐渐降解的过程中,活性物质扩散,进而被小肠吸收,从而达到缓慢释放和获得较高的生物利用率(85-90%)。为多酚类活性物质在食品、保健品、药品及化妆品等领域的应用提供了参考。即可在制备抗氧化清除自由基、抗菌、消炎、预防和治疗肿瘤、降低心脑血管、糖尿病等疾病的风险性的食品、保健品、药品和抗衰老化妆品中应用。
本发明的有益技术效果
本发明的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,由于以具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒无害且优良的纳米成粒性和保护缓释效果的大麦醇溶蛋白为原料,采用“物理法”中操作简单的“液液分散法”,而不是对设备要求高的“机械法”和常需使用难以去除的有毒试剂的“化学法”,并有效提高了纳米颗粒对多酚的包封率和载药率,分别达到85-90%和25-35%。制得的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒粒径分布较均匀,多分散性系数低于0.14,大部分在100-200nm之间;且操作过程和设备简单,无需使用有毒的化学试剂,即制备过程对环境友好。
进一步,本发明的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,通过将多酚类活性物质包封在大麦醇溶蛋白中,免受胃酸和各种酶的消化,保护了多酚类活性物质的活性,使受到保护的多酚类活性物质被转运到小肠中,在蛋白载体逐渐降解的过程中,活性物质扩散,进而被小肠吸收,从而达到缓慢释放和获得较高的生物利用率(85-90%)。
进一步,本发明的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,由于所用的载体大麦醇溶蛋白来源广泛,具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒无害,还具有抗菌、抗氧化、成本低廉、来源丰富等优点,且与动物性蛋白相比,不存在受病毒污染等安全问题,因此为多酚类活性物质在食品、保健品、药品及化妆品等领域的应用提供了参考。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进一步阐述,但并不限制本发明。
本发明的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的生物利用率的估算方法为通过模拟胃肠消化道环境研究纳米颗粒体系的体外释放动力学,步骤如下:
将100mg的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒悬浮在10mL 37℃的模拟胃液中,搅拌2h后所得的混合物离心,下层得到的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒继续搅拌悬浮于10mL 37℃的模拟肠液中,在连续时间间隔内取1mL溶液,测定多酚类化合物的浓度,当浓度趋于稳定时,利用此浓度计算得到最终的累积释放量,从而得到累积释放率;
所述的模拟胃液即为pH2.0的盐酸-生理盐水+0.1%的胃蛋白酶;
所述的模拟肠液即为pH7.4的PBS+1.0%的胰蛋白酶;
假定释放出来的多酚物质均被小肠吸收,则多酚类活性物质在模拟肠液中的累积释放率即其生物利用率。
载药率%=(多酚浓度*体积/纳米颗粒的质量)*100%
包封率%=(包载多酚的质量/制备时加入的多酚质量)*100%
本发明实施例1中茶多酚结构变化的检测、浓度的测定采用紫外分光光度法[1],所用的检测仪器有:UV-6000 紫外-可见分光光度计,上海元析仪器有限公司。
本发明实施例2、3中槲皮素和白藜芦醇的结构变化及浓度测定采用HPLC法[2,3,],所用的检测仪器有:配有二极管阵列检测器的1100型高效液相色谱仪,Agilent公司。
本发明的各实施例中所用的其他设备有:
AB204-N分析天平,Mettler-Toledo Group;
TGL-16B台式离心机,上海安亭科学仪器厂;
四联磁力加热搅拌器,上海硕光电子科技有限公司;
WH-2微型漩涡混合仪,金坛市盛蓝仪器制造有限公司;
Millrock Laboratory Series冻干机,Millrock Technology, Inc;Quanta x50 FEG 扫描电镜,FEI公司。
本发明的各实施例中所用的原料和试剂有:
大麦醇溶蛋白通过如下方法制备:
大麦籽粒通过碾磨过40目筛后,浸泡于正己烷中常温摇瓶过夜,真空过滤后在通风橱中风干48h,即得脱脂大麦粉,其中所用的大麦粉和正己烷的用量,按大麦粉:正己烷为1g:8ml的比例计算;
将上述所得的脱脂大麦粉用1MNaCl溶液在55℃条件下搅拌提取1h后,3000×g离心15min,得到沉淀1,其中所用的大麦粉和1MNaCl溶液的量,按大麦粉:1MNaCl溶液为1g:10ml的比例计算;
将上述所得的沉淀1继续用去离子水在55℃条件下搅拌提取1h后,3000×g离心15min,此过程重复3次,最终得到沉淀2,上述每次搅拌提取所用的去离子水的量,按沉淀1:去离子水为1g:10ml的比例计算;
上述所得的沉淀2继续用体积百分比浓度为55%的乙醇水溶液在55℃条件下搅拌提取1h,3000×g常温离心15min,收集上清液,上述搅拌提取所用的体积百分比浓度为55%的乙醇水溶液的量,按沉淀2:体积百分比浓度为55%的乙醇水溶液为1g:6ml的比例计算;
将上述所得的上清液置于4℃条件下过夜后,于4℃ 8000 ×g离心15min,所得沉淀3溶于体积百分比浓度为55%的乙醇水溶液中控制温度为-49℃进行冷冻干燥,即得大麦醇溶蛋白。
异丙醇、盐酸、氯化钠、PBS缓冲液均为国产分析纯;
胃蛋白酶、胰蛋白酶、槲皮素均为国产生物试剂;
白藜芦醇(纯度≧98%),天津市尖峰天然产物研究开发有限公司;
茶多酚,国产高纯试剂。
实施例1
一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,为核壳结构,所述的核为多酚类化合物,所述的壳为大麦醇溶蛋白,所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为5:1,其粒径分布为50-300nm,多分散性系数为0.12;
所述的多酚类化合物为茶多酚;
所述的大麦醇溶蛋白,其相对分子质量为30,000-96,000。
上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,具体包括如下步骤:
(1)、将0.33g大麦醇溶蛋白溶于3.68ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,得到大麦醇溶蛋白溶液;
上述的大麦醇溶蛋白溶液中,大麦醇溶蛋白和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按大麦醇溶蛋白:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:11.15ml的比例计算;
将0.066g多酚类化合物茶多酚溶于1.32ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,得到多酚溶液;
上述的多酚溶液中,多酚类化合物和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按多酚类化合物:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:20ml的比例计算;
然后在磁力搅拌条件下将多酚溶液加入到大麦醇溶蛋白溶液中混合混匀,得到大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液;
(2)、将步骤(1)所得的大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液在3000rpm的转速下离心13min,得上清液;
(3)、将750μL步骤(2)所得的上清液在漩涡混合条件下控制滴加速率为0.5ml/min将上清液逐滴滴入到2mL的蒸馏水中,得到分散液;
上述的上清液和蒸馏水的用量按体积比计算,即上清液:蒸馏水为1:2.7的比例计算;
(4)、将步骤(3)所得的分散液控制温度为-49℃进行冷冻干燥即得多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,即茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。
用扫描电子显微镜对上述所得的茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒进行形貌表征,结果表明茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒为实心的圆球,表面光滑。动态光散射技术分析颗粒的粒径为50-300nm,平均粒径为100nm,多分散性系数为0.12。
通过测定,计算得到多酚的包封率为85%,载药率为25%。
将茶多酚单体、茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒、大麦醇溶蛋白分别在室温条件下放置一周后进行比对,经紫外波长扫描显示,茶多酚单体最大吸收峰红移,可能是由于被氧化形成二聚体所致;而茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的紫外吸收波长未有明显改变,说明茶多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的稳定性较好,并能有效保持茶多酚的活性。
通过模拟胃肠道消化实验,研究上述所得的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒体系的体外释放动力学,具体步骤如下:
将100mg的纳米颗粒悬浮在10mL的模拟胃液中,37℃搅拌2h后所得的混合物离心,下层得到的纳米颗粒继续悬浮在10mL模拟肠液中,37℃搅拌,每隔30min取1mL溶液,离心取上清液,用紫外分光光度计测定茶多酚在280nm处的吸光值,得其浓度,经8h后浓度趋于稳定,计算得到茶多酚最终的累积释放率为85%,即其生物利用率为85%。
而未经包封的茶多酚在模拟胃液中,在2h以内几乎完全被破坏;
所述的模拟胃液即为pH2.0的盐酸-生理盐水+0.1%的胃蛋白酶;
所述的模拟肠液即为pH7.4的PBS+1.0%的胰蛋白酶。
实施例2
一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,为核壳结构,所述的核为多酚类化合物,所述的壳为大麦醇溶蛋白,所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为100:1,其粒径为50-200nm,多分散性系数为0.08;
所述的多酚类化合物为槲皮素;
所述的大麦醇溶蛋白,其分子量为30,000-96,000。
上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,具体包括如下步骤:
(1)、将1.25g大麦醇溶蛋白溶于45ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后得到大麦醇溶蛋白溶液;
上述的大麦醇溶蛋白溶液中,大麦醇溶蛋白和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按大麦醇溶蛋白:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:36ml的比例计算;
将0.125g多酚类化合物槲皮素溶于5ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后得到多酚溶液;
上述的多酚溶液中,多酚类化合物和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按多酚类化合物:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:40ml的比例计算;
然后在磁力搅拌条件下将多酚溶液加入到大麦醇溶蛋白溶液中混合混匀,得到大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液;
(2)、将步骤(1)所得的大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液在3000rpm的转速下离心13min,得上清液;
(3)、将1mL步骤(2)所得的上清液在漩涡混合条件下控制滴加速率为0.5ml/min将上清液逐滴滴入到3mL的蒸馏水中,得到分散液;
上述的上清液和蒸馏水的用量按体积比计算,即上清液:蒸馏水为1:3的比例计算;
(4)、将步骤(3)所得的分散液控制温度为-49℃进行冷冻干燥即得多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,即槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。
用扫描电子显微镜对获得的槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒进行形貌表征,结果表明槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒为实心的圆球,表面光滑。动态光散射技术分析颗粒的粒径分布在50-200nm范围,平均粒径为110nm,多分散性系数为0.08。通过测定,计算得到槲皮素的包封率为90%,载药率为30%。
将槲皮素单体、槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒在室温放置一周后,经HPLC检测表明,槲皮素被氧化生成3种醌。而对于槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,HPLC检测其中的槲皮素的氧化程度较低,说明槲皮素-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的稳定性较好,并能有效保持槲皮素的活性。
通过模拟胃肠道消化环境研究该纳米颗粒体系的体外释放动力学,步骤与实施例1相同,计算得到槲皮素最终的累积释放率为88%,即其生物利用率为88%。而未经包封的槲皮素在模拟胃液中,在2h以内几乎完全被破坏。
实施例3
一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,为核壳结构,所述的核为多酚类化合物,所述的壳为大麦醇溶蛋白,所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为50:1,其粒径为50-400nm,多分散性系数为0.14;
所述的多酚类化合物为白藜芦醇;
所述的大麦醇溶蛋白,其分子量为30,000-96,000。
上述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,具体包括如下步骤:
(1)、将1g大麦醇溶蛋白溶于24ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后得到大麦醇溶蛋白溶液;
上述的大麦醇溶蛋白溶液中,大麦醇溶蛋白和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按大麦醇溶蛋白:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:24ml的比例计算;
将0.02g多酚类化合物白藜芦醇溶于1ml体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后得到多酚溶液;
上述的多酚溶液中,多酚类化合物和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按多酚类化合物:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:50ml的比例计算;
然后在磁力搅拌条件下将多酚溶液加入到大麦醇溶蛋白溶液中混合混匀,得到大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液;
(2)、将步骤(1)所得的大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液在3000rpm的转速下离心13min,得上清液;
(3)、将2mL步骤(2)所得的上清液在漩涡混合条件下控制滴加速率为0.5ml/min将上清液逐滴滴入到5mL蒸馏水中,得到分散液;
上述的上清液和蒸馏水的用量按体积比计算,即上清液:蒸馏水为1:2.5的比例计算;
(4)、将步骤(3)所得的分散液控制温度为-49℃进行冷冻干燥即得多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,即白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。
用扫描电子显微镜对获得的白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒进行形貌表征,结果表明白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒为实心的圆球,表面光滑。动态光散射技术分析颗粒的粒径为50-400nm,平均粒径为150nm,多分散性系数为0.14。通过测定,计算得到白藜芦醇的包封率为87%,载药率为35%。
将白藜芦醇单体、白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒在光照条件下放置2h,经HPLC检测表明,白藜芦醇单体放置前后保留时间发生显著变化,表明其结构有明显改变,可能是由反式结构转变为顺式结构,并丧失其生理活性。而对于白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,HPLC检测白藜芦醇的图谱变化较小,说明白藜芦醇-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的稳定性较好,并能有效保持白藜芦醇的活性。
通过模拟胃肠道消化环境,研究该纳米颗粒体系的体外释放动力学特性,步骤与实施例1相同,计算得到白藜芦醇最终的累积释放率为90%,即其生物利用率为90%。而未经包封的白藜芦醇在模拟胃液中,在2h以内几乎完全被破坏。
对上述实施例1-3所得的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,分别比较其在模拟胃液和模拟肠液中的释放行为发现:
多酚类活性物质在模拟胃液中会先出现短暂的突释现象,进而缓慢释放,2h内释放率为5-10%;
而在模拟肠液体系中没有明显的突释现象,0-4h内释放量极少。
上述结果表明,若多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒被降解破坏后,多酚类活性物质会被释放出来;换言之,大麦醇溶蛋白作为多酚物质的载体能够“抵御”胃中酸和酶对多酚类活性物质的破坏,从而使得大量的多酚活性物质转移至小肠吸收。
综上所述,本发明的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,粒径分布较均匀,大部分控制在100-150nm之间,多分散性系数低于0.14,并且由于以大麦醇溶蛋白为载体,从而有效提高了多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒对多酚的包封率和载药率,分别达到85-90%和25-35%,同时显著提高了多酚物质在体内的生物利用率,其值为85-90%。
上述内容仅为本发明构思下的基本说明,而依据本发明的技术方案所作的任何等效变换,均应属于本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,其特征在于所述的多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒为核壳结构,所述的核为多酚类化合物,所述的壳为大麦醇溶蛋白,所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为5-100:1,其粒径为50-400nm,多分散系数为0.08-0.14;
所述的多酚类化合物为茶多酚、槲皮素或白藜芦醇;
所述的大麦醇溶蛋白其相对分子质量为30,000-96,000。
2.如权利要求1所述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,其特征在于所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为5:1;
所述的多酚类化合物为茶多酚;
所述的大麦醇溶蛋白,其分子量为30,000-96,000。
3.如权利要求1所述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,其特征在于所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为100:1;
所述的多酚类化合物为槲皮素;
所述的大麦醇溶蛋白,其分子量为30,000-96,000。
4.如权利要求1所述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒,其特征在于所述的大麦醇溶蛋白和多酚类化合物的量按质量比计算,即大麦醇溶蛋白:多酚类化合物为50:1;
所述的多酚类化合物为白藜芦醇;
所述的大麦醇溶蛋白,其分子量为30,000-96,000。
5.如权利要求1、2、3或4所述的一种多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法,其特征在于具体包括如下步骤:
(1)、将大麦醇溶蛋白和多酚类化合物分别溶解在体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液中,待完全溶解后分别得到大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液,然后将大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液混合;
上述的大麦醇溶蛋白溶液中,大麦醇溶蛋白和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按大麦醇溶蛋白:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:11.15-36ml的比例计算;
上述的多酚溶液中,多酚类化合物和体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液的用量,按多酚类化合物:体积百分比浓度为55%的异丙醇水溶液为1g:20-50ml的比例计算;
(2)、将步骤(1)所得的大麦醇溶蛋白溶液与多酚溶液的混合液在3000rpm的转速下离心13min,得上清液;
(3)、将步骤(2)所得的上清液在漩涡混合条件下控制滴加速率为0.5ml/min逐滴滴入到蒸馏水中,得到分散液;
上述的上清液和蒸馏水的用量按体积比计算,即上清液:蒸馏水为1:2.5-3的比例计算;
(4)、将步骤(3)所得的分散液控制温度为-49℃进行冷冻干燥即得多酚-大麦醇溶蛋白纳米颗粒。
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